CN117379350B - 包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法以及由其制备的化妆品组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法以及由其制备的化妆品组合物，上述方法包括：清洗茶树原料；在清洗好的茶树原料中加入作为第一溶剂的纯净水后，通过微波照射得到第一提取物；通过在第一提取物中加入乳酸菌及作为第二溶剂的多元醇类化合物来制备混合物；对上述混合物进行发酵得到第二提取物；通过对发酵后的第二提取物进行低温灭菌以及过滤来得到茶树提取物；以及通过混合所得的茶树提取物和选自由纯净水、甘油、丙二醇、1,2‑己二醇、黄原胶、丁二醇、泛醇、海藻糖、甜菜碱、卡波姆、尿囊素、聚甘油10月桂酸酯、精氨酸、乙二胺四乙酸二钠、甘草酸二钾以及醋酸生育酚组成的组中的一种以上来制备化妆品组合物。

Description

包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法以及由其制备的 化妆品组合物

技术领域

本发明涉及一种包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法以及由其制备的化妆品组合物。

背景技术

属于天然物的茶树往往以油的形式蒸馏使用，由于其抗菌性及抗真菌性等功效，被称为伤口消毒剂、痤疮舒缓剂、脚气治疗剂、呼吸道疾病治疗剂等。

茶树(Melaleuca alternifolia，澳洲茶树)为属于桃金娘目桃金娘科的常绿小乔木，生长于沼泽地区的茶树生命力极强，即使砍断树茎也能生长良好。茶树是在寻找新鲜茶叶的过程中于澳大利亚及新西兰海岸地区发现的，由于茶树周围的水变成红棕色，因此人们认为与红茶相似而开始当茶喝，由此得名“茶树(tea tree)”。

将从茶树提取的提取物统称为精油，以往精油大多通过蒸馏提取法或溶剂提取法来提取。以这种方式形成的现有提取方法使用加热的方法。

通常精油由挥发性高的物质组成，因此缺点在于，在提取后将活性物质和溶剂(纯净水或有机溶剂)分离的过程中有效成分挥发，从而导致提取量以及有效成分减少。并且，存在分离过程中残留废弃物及有机溶剂的问题，并存在精油香味及有效成分被破坏的缺点。

现有技术文献

专利文献

韩国专利公开第2018-0051821号

发明内容

本发明旨在解决的技术问题为提供一种包含以高提取效率得到的茶树提取物的化妆品组合物的制备方法以及通过其制备方法制备的包含茶树提取物的化妆品组合物。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法以及通过其制备方法制备的包含茶树提取物的化妆品组合物，上述方法包括：清洗茶树原料的步骤；在清洗好的上述茶树原料中加入作为第一溶剂的纯净水后，通过微波照射得到第一提取物的步骤；通过在上述第一提取物中加入乳酸菌及作为第二溶剂的多元醇类化合物来制备混合物的步骤；对上述混合物进行发酵得到第二提取物的步骤；通过对发酵后的上述第二提取物进行低温灭菌以及过滤来得到茶树提取物的步骤；以及通过混合所得的上述茶树提取物和选自由纯净水、甘油、丙二醇、1,2-己二醇、黄原胶、丁二醇、泛醇、海藻糖、甜菜碱、卡波姆、尿囊素、聚甘油-10月桂酸酯、精氨酸、乙二胺四乙酸二钠、甘草酸二钾以及醋酸生育酚组成的组中的一种以上来制备化妆品组合物的步骤。

当利用本发明的包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法时，可以制备化妆品组合物，其包含高含量的从茶树原料得到的黄酮类衍生物化合物，并且包含最少量的作为茶树原料的提取过程中产生的氧化物的对伞花烃(p-Cymene)化合物。

具体实施方式

以下，说明本发明的各种实施例。应理解，本发明不限于特定实施例，而是包括本发明实施例的各种修饰(Modification)、同等物(Equivalent)和/或替代物(Alternative)。在本文中，“具有”、“可以具有”、“包括”或“可以包括”等表达是指相对应的特征(例如：数值、功能、动作或部件等结构要素)的存在，而不排除额外的特征的存在。

在本文中，“A或B”、“A或/和B中至少一个”或“A或/和B中一个或其以上”等表达可以包括所列项目的所有可能的组合。例如，“A或B”、“A以及B中至少一个”或“A或B中至少一个”可以是指，(1)包括至少一个A、(2)包括至少一个B、或(3)包括至少一个A以及至少一个B的所有情况。

在本文中使用的表达“配置为～(或设置为)(Configured to)”可以根据情况与例如，“适用于～(Suitable for)”、“具有～能力的(Having the capacity to)”、“设计为～(Designed to)”、“修饰为～(Adapted to)”、“用作～(Made to)”或“能够～(Capable of)”等互换使用。术语“配置为～(或设置为)”不一定仅意味着“专门设计为(Specificallydesigned to)”。

在本文中使用的术语仅用于说明特定实施例，而可能并不旨在限制其他实施例的范围。除非上下文中另有明确的定义，否则单数形式的表达可以包括复数形式的表达。在本文中使用的包括技术或科学术语在内的术语的含义可以与本文中记载的技术领域的普通技术人员通常理解的含义相同。在本文中使用的术语中，普通词典中定义的术语的含义可以被解释为与相关技术的上下文中的含义相同或类似，并且除非上下文中另有明确定义，否则不被解释为理想化或过度形式化的含义。根据情况，即使是本文中所定义的术语也不能被解释为排除本文中的实施例。

在本文中公开的实施例是为了说明以及理解已公开的技术内容而提出的，而不是用于限制本发明的范围。因此，本文的范围应解释为包括基于本发明的技术思想的所有修饰或各种其他实施例。

以下，将详细说明本发明优选实施例。在此之前，本说明书以及权利要求范围中使用的术语或单词不应被解释为限制于通常的或词典上的含义，并且基于发明人可以适当定义术语的概念以用最佳的方法说明自己的发明的原则，应被解释为符合本发明的技术思想的含义及概念。

因此，本说明书中记载的实施例的结构不过是本发明的一些最优选实施例，并不代表本发明的全部技术思想，因此应理解为在提交本申请时可以存在能够代替这些的各种同等物以及变形例。

在整个说明书中，当某一部分“包括”某一结构要素时，除非另有特别相反的说明，否则意味着还可以包括其他结构要素，而不是排除其特结构要素。

以下，将具体说明本发明。

本发明一实施例的包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法，包括如下步骤：清洗茶树原料；在清洗好的上述茶树原料中加入作为第一溶剂的纯净水后，通过微波照射得到第一提取物；通过在上述第一提取物中加入乳酸菌及作为第二溶剂的多元醇类化合物来制备混合物；对上述混合物进行发酵得到第二提取物；通过对发酵后的上述第二提取物进行低温灭菌以及过滤来得到茶树提取物；以及通过混合所得的上述茶树提取物和选自由纯净水、甘油、丙二醇、1,2-己二醇、黄原胶、丁二醇、泛醇、海藻糖、甜菜碱、卡波姆、尿囊素、聚甘油-10月桂酸酯、精氨酸、乙二胺四乙酸二钠、甘草酸二钾以及醋酸生育酚组成的组中的一种以上来制备化妆品组合物。以下，对各步骤进行详细说明。

上述清洗茶树原料的步骤用于去除除了从自然界采集的茶树原料以外的物质，并将生物/化学危害因素降至食品领域要求的接受水平，例如，可以通过在流水下清洗茶树原料来进行。

并且，还可以进行切割、干燥过程，以更有效地进行后续的提取过程。

切割过程是为了通过增加干燥时茶树原料的表面积来提高干燥效率以及提取效率而进行，将清洗好的上述茶树原料切割成2㎝至3㎝的大小。

干燥过程是为了通过降低茶树原料中包含的水分含量来抑制微生物的代谢并改善储存性而进行，例如，可以利用干燥机来干燥茶树原料。

在清洗好的上述茶树原料中加入作为第一溶剂的纯净水后，通过微波照射得到第一提取物的步骤用于最大限度地减少对伞花烃化合物的产生，上述对伞花烃化合物为提取过程中产生的氧化物，并以高收率得到α-萜品烯(α-terpinene)、γ-萜品烯(γ-terpinene)作为目标中间化合物。

用于上述微波照射的微波是一种电磁能中具有低频率的能量形式。微波也被称为厘米波，是一种其波长为厘米单位(cm)的电磁波。频率范围可以为300MHz至300000MHz。并且，微波以光速(300000km/s)传播，由于此时的微波光子能量(0.037kcal/mol)相对非常低于能够破坏分子间的结合的典型能量(80kcal/mol至120kcal/mol)，因此可以不影响分子的结构并诱导分子的电子自旋进入激发态。当将上述微波的特性用于本发明时，由于分子的运动，可以在茶树原料的分子周围形成微泡并降低界面张力，因此可以使提取效率最大化。

微波照射可以在加压下进行，例如可以在1气压至100气压的压力下进行。微波输出功率没有特别的限制，可以根据反应物的量适当地增减，例如，可以使用500W至1000W。优选地，微波的输出功率可以使用850W至1000W。更优选地，微波的输出功率可以使用900W至1000W。

微波照射可以在100℃至150℃的温度下进行。并且，微波照射可以进行30分钟至90分钟。

当进行上述微波照射时，可以直接使用茶树原料，可以使用茶树原料的干燥物或冷冻干燥物。在一实例中，可以在100℃至150℃的温度以及1气压至100气压的压力下对包含茶树原料以及纯净水的溶液进行30分钟至90分钟的微波照射。

当进行上述微波照射时，通过常温常压下的蒸煮过程形成第一提取物，所述蒸煮过程中，提供纯净水作为溶剂后，通过微波加热茶树原料整个内外部并将加热的水蒸气冷冻凝结后反复循环到提取容器中。

尤其，根据本发明一实施例，由于微波的能量可以直接传递到纯净水中的茶树原料，因此可以简化加热溶剂后将加热的溶剂的能量传递到茶树原料的如现有的热水提取法等间接的能量传递途径。因此，微波的能量可以直接传递到茶树原料中，从而提高提取效率。

微波为1mm至1m的波长，属于光谱学上相对长的波长范围。当相对长的波长照射到茶树原料时，能够渗透到茶树原料的内部，从而可以更有效地得到提取物。具体地，在构成茶树的粒子内部，原子的电子自旋在室温下处于基态(ground state)，但可以通过获得从长波长吸收的能量而处于激发态(excited state)。不同于简单地对表面施加热量的热水提取法，在利用长波长的情况下，由于渗透到原料内部的能量，可以以更高的效率得到目标提取物，并且可以有效地用比热水提取法所需的时间更短的时间得到目标提取物，因此可以使茶树原料受热的时间最小化。

茶树原料的目标提取物可以包含α-萜品烯、γ-萜品烯化合物，上述化合物可能因暴露于大气中的氧气、光、湿度以及高温而被氧化，在此情况下α-萜品烯、γ-萜品烯化合物可能变成对伞花烃。根据条件，提取物中对伞花烃的含量最多可以增加至10倍。从提取物中产生的对伞花烃残留在茶树提取物中，当后续用作化妆品组合物时可能对皮肤产生如痤疮等负面影响。

为了最大限度地减少对伞花烃的产生，应在通过微波照射得到第一提取物的步骤中精确地控制茶树原料与纯净水的比例。具体地，可以以1：10至15的重量比应用茶树原料与纯净水。当纯净水小于上述范围时，对伞花烃的含量反而因过度的微波照射而增加，当其大于上述范围时，存在对茶树原料的微波照射频率低而导致得到的目标提取物的含量低的问题。

上述纯净水可以使用本领域常用的纯净水、超纯水，优选地，可以使用超纯水。普通纯净水是通常用于药品、化妆品的水，表示纯度的溶解性固体含量为1.0ppm至0.5ppm，制备纯净水时用于去除微粒以及微生物的过滤器的尺寸为0.2μm至0.45μm，pH值从弱酸性到弱碱性不等。溶解性固体含量为0.03ppm的上述超纯水的纯度非常高，制备超纯水时使用的过滤器的尺寸为0.001μm，利用其去除99.99％的微生物。尤其，超纯水可以通过去除金属离子来防止自动氧化反应。

通过在上述第一提取物中加入乳酸菌及作为第二溶剂的多元醇类化合物来制备混合物的步骤以及对上述混合物进行发酵得到第二提取物的步骤用于防止α-萜品烯、γ-萜品烯化合物的氧化，并在进行发酵工序的同时利用两亲性溶剂以更高的效率得到目标提取物。

上述多元醇类化合物作为两亲性物质与水溶性及脂溶性溶剂均具有亲和性。由于茶树的提取物基本上具有如萜烯醇(terpene alcohol)、单环萜烯(monocyclic terpene)、双环萜烯(dicyclic terpene)、倍半萜烯(sesquiterpene)等脂溶性结构，因此当利用如热水提取等水溶性溶剂时可能降低提取效率。

在茶树原料内部的原子因上述微波照射处于激发态的情况下进行提取，然后当在稳定阶段进入二次提取步骤时，可以通过将多元醇类化合物溶剂应用于相对具有脂溶性结构的成分中来使提取效率最大化。

本发明人锐意研究的结果发现，为了最大限度地减少对伞花烃的产生，通过用微波照射来得到第一提取物后，应用多元醇类化合物溶剂的提取方法有效，以防止所得成分氧化并稳定地得到目标物质。通过连续进行上述第一以及第二提取过程，从而相对于100重量％的茶树提取物的总量，可以将最终得到的茶树提取物中包含的对伞花烃的含量降至0.0001重量％至2重量％。

上述多元醇类化合物可以包含选自由二丙二醇、1,3-丁二醇、甘油、1,3-丙二醇以及己二醇组成的组中的一种以上，以提高提取效率并确保提取物后续应用于化妆品组合物中时的皮肤应用安全性。优选地，可以使用二丙二醇，以使对伞花烃的含量最小化并实现与后述的乳酸菌的相容性。

可以使用天然提取物的发酵中常用的菌株，例如，可以产生蛋白分解酶的曲霉菌属(Aspergillus sp.)、毛霉菌属(Mucor sp.)、乳杆菌属(Lactobacillus sp.)或根霉菌属(Rhizopus sp.)等菌株作为上述乳酸菌，也可以使用单独或两种以上的混合菌株。为了与作为第二溶剂的上述多元醇类化合物的相容性以及菌株的最佳生育，优选地使用乳杆菌属菌株。更优选地，上述乳酸菌可以为果糖乳杆菌Mediheal 01(Lactobacillus fructosusMediheal 01)，保藏编号为KCTC14924BP。

在本发明中，“果糖乳杆菌Mediheal 01，保藏编号为KCTC14924BP”为从大波斯菊分离并鉴定的果糖乳杆菌的新型乳酸菌，2022年3月25日保藏于韩国典型培养物保藏中心(保藏编号为KCTC14924BP)。

根据本发明一实施例，上述混合物中包含的乳酸菌可以为通过将乳酸菌株在30℃至40℃的温度下于营养肉汤培养基(NB broth)中培养20小时至30小时的乳酸菌培养液。相对于100重量％的上述混合物，可以通过称量3重量％至15重量％的上述乳酸菌培养液来接种。

结果，上述混合物中可以包含30重量％至50重量％的多元醇类化合物、3重量％至15重量％的乳酸菌培养液以及剩余的第一提取物。

在不妨碍乳酸菌的发酵的情况下，为了确保用于从茶树原料最佳提取作为萜烯(Terpene)化合物的α-萜品烯、γ-萜品烯的效率性，应精确地控制上述混合物中包含的多元醇类化合物的含量。具体地，相对于100重量％的上述混合物，多元醇类化合物的含量可以为30重量％至50重量％。当多元醇类化合物小于上述范围时，提取效率迅速下降，当其大于上述范围时，与提取效率相比，从经济层面以及由于酒精浓度过高导致乳酸菌的存活率差的层面不理想。

上述发酵用于从茶树原料中以最大效率提取目标提取物的成分而没有热处理。即，与以往利用的高压灭菌技术相比，可以使所提取的物质的成分变化最小化。具体地，在上述发酵步骤中，生成二次混合物后在通风良好的30℃至40℃的温度下培养30小时至60小时。

培养完成后，可以通过去除所培养的微生物的低温灭菌步骤以及用微过滤器进行纯化的步骤得到黄酮类衍生物化合物，上述黄酮类衍生物化合物为从主要发酵成分中的α-萜品烯、γ-萜品烯化合物衍生的低分子成分。

上述第二提取物的浓缩步骤为在旋转式低温浓缩器的减压以及低温条件下蒸发第二提取物的溶剂，并将蒸发的第二提取物收集到冷却冷凝器中来进行浓缩的步骤。但是，还可以包括在浓缩之前用微过滤器进行过滤的步骤。上述浓缩步骤为在25℃至35℃的温度下进行蒸发浓缩，优选为30℃的温度。此时的上述旋转式低温浓缩器的内部真空度为39mmHg至43mmHg。

由于上述黄酮类衍生物化合物是一种植物或菌类的二次代谢产物，因此具有由两个苯环及杂环组成的15个碳骨架的普通结构。该碳结构可以简写为C6-C3-C6，并将具有这种骨架的植物色素统称为黄酮类化合物。

通过混合所得的上述茶树提取物和选自由纯净水、甘油、丙二醇、1,2-己二醇、黄原胶、丁二醇、泛醇、海藻糖、甜菜碱、卡波姆、尿囊素、聚甘油10月桂酸酯、精氨酸、乙二胺四乙酸二钠、甘草酸二钾以及醋酸生育酚组成的组中的一种以上来制备化妆品组合物的步骤用于制备化妆品组合物，其保留并包含高含量的从茶树原料得到的黄酮类衍生物化合物成分，同时还具有对皮肤提供水分、保湿以及舒缓的效果。优选地，可以通过混合所得的上述茶树提取物和选自由纯净水、甘油、丙二醇、1,2-己二醇、白柳树皮提取物、积雪草提取物、鱼腥草提取物、黑豆提取物、豌豆提取物、鼠尾草提取物、薰衣草提取物、迷迭香提取物、柠檬草提取物、黄原胶、丁二醇、印度乳香树脂提取物、泛醇、海藻糖、甜菜碱、卡波姆、尿囊素、聚甘油-10月桂酸酯、精氨酸、乙二胺四乙酸二钠、甘草酸二钾、醋酸生育酚以及茶树油(50ppm)组成的组中的一种以上来制备化妆品组合物。

相对于100重量％的上述化妆品组合物，所得的上述茶树提取物的含量为30重量％至70重量％。优选地，相对于100重量％的上述化妆品组合物，所得的上述茶树提取物的含量可以为40重量％至60重量％。当上述茶树提取物的含量小于30重量％时，存在应用于皮肤上时的抗氧化以及保湿效果微弱的问题，当其大于70重量％时，存在降低产品剂型的稳定性而没有根据含量增加的明显效果的问题。

通过上述制备方法，可以得到高含量的从茶树原料中提取的黄酮类衍生物化合物，并最大限度地减少对伞花烃化合物的产生，从而可以制备包含茶树提取物的化妆品组合物，上述对伞花烃化合物为提取过程中产生的氧化物。

本发明一实施例的包含茶树提取物的化妆品组合物可以制备成应用于皮肤上的化妆品组合物。本发明的组合物的剂型没有限制，只要是可以应用于皮肤的性状即可，例如，可以制成选自由溶液、悬浮液、乳剂、膏剂、凝胶、霜剂、乳液、粉剂、皂、含表面活性剂的清洁剂、油剂、粉状粉底、乳剂粉底、蜡状粉底以及喷雾组成的组中的至少一种剂型。详细地，可以制成柔软化妆水、滋养化妆水、液体喷雾、滋养霜、保湿霜、按摩霜、精华、眼霜、卸妆膏、洁面泡沫、卸妆水、面膜、面膜贴、喷雾或粉末剂型，但不限于此。

本发明的组合物中包含的成分可以包括通常用于化妆品组合物的添加成分。例如，可以包含选自由稳定剂、助溶剂、维生素、染料、香精以及载体组成的组中的至少一种，但不限于此。可以根据本发明的组合物的剂型调整上述添加成分。

以下，将通过实施例更详细地说明本发明。这些实施例仅用于更具体地说明本发明，对本发明所属领域的普通技术人员显而易见的是，根据本发明的主旨，本发明的范围不限于这些实施例。

实施例以及比较实施例

实施例1

将从济州岛购入的茶树原料用流水清洗(步骤S1)。

在10g的清洗好的上述茶树原料中添加100g的作为第一溶剂的纯净水，然后利用美尔斯通(Milestone)公司的START D设备照射60分钟的频率为1000w的微波以得到第一提取物(步骤S2)。

将所得的上述第一提取物转移到容器中，并添加30重量％的作为第二溶剂的二丙二醇以及8重量％的乳杆菌属乳酸菌株培养液后制备混合物(步骤S3)。上述重量％是以100重量％的混合物的总量为基准的。上述乳酸菌为果糖乳杆菌Mediheal 01，保藏编号为KCTC14924BP，将其在35℃的温度下于营养肉汤培养基中培养24小时以制备成培养液。

然后，在35℃的通风良好的地方发酵36小时得到第二提取物(步骤S4)。

将所得的发酵液进行低温灭菌，并用0.2微米大小的微过滤器进行过滤后得到茶树提取物(步骤S5)。

实施例2至实施例11

将所添加的组成及含量调整为如下述表1所示，通过与实施例1相同的方法进行其余部分来得到茶树提取物。

表1

比较实施例1

将从济州岛购入的茶树原料用流水清洗。

代替上述实施例1的制备方法，利用回流冷却提取法，以将10g的上述茶树原料和100g的纯净水混合并且用100℃至150℃的温度进行加热以产生蒸汽后，蒸发后的蒸汽通过冷却隧道而被提取成液体的方式，进行工艺处理4小时，从而得到第一提取物。

将所得的上述提取物转移到容器中，并添加8重量％的乳杆菌属乳酸菌株培养液后制备混合物。上述重量％是以100重量％的混合物的总量为基准的。上述乳酸菌为果糖乳杆菌Mediheal 01，保藏编号为KCTC14924BP，将其在35℃的温度下于营养肉汤培养基中培养24小时以制备成培养液。然后，在35℃的通风良好的地方发酵36小时。将所得的发酵液进行低温灭菌，并用0.2微米大小的微过滤器进行过滤后得到茶树提取物。

比较实施例2

将从济州岛购入的茶树原料用流水清洗。

将10g的上述茶树原料通过常规热水提取法提取60分钟以得到第一提取物。

将所得的上述提取物转移到容器中，并添加8重量％的乳杆菌属乳酸菌株培养液后制备混合物。上述重量％是以100重量％的混合物的总量为基准的。上述乳酸菌为果糖乳杆菌Mediheal 01，保藏编号为KCTC14924BP，将其在35℃的温度下于营养肉汤培养基中培养24小时以制备成培养液。然后，在35℃的通风良好的地方发酵36小时。将所得的发酵液进行低温灭菌，并用0.2微米大小的微过滤器进行过滤后得到茶树提取物。

比较实施例3

将从济州岛购入的茶树原料用流水清洗。

将10g的上述茶树原料通过常规热水提取法提取120分钟以得到第一提取物。

将所得的上述提取物转移到容器中，并添加8重量％的乳杆菌属乳酸菌株培养液后制备混合物。上述重量％是以100重量％的混合物的总量为基准的。上述乳酸菌为果糖乳杆菌Mediheal 01，保藏编号为KCTC14924BP，将其在35℃的温度下于营养肉汤培养基中培养24小时以制备成培养液。然后，在35℃的通风良好的地方发酵36小时。将所得的发酵液进行低温灭菌，并用0.2微米大小的微过滤器进行过滤后得到最终提取物。

比较实施例4

将从济州岛购入的茶树原料用流水清洗。

在10g的清洗好的上述茶树原料中添加100g的纯净水作为溶剂，然后利用美尔斯通公司的START D设备照射60分钟的频率为1000w的微波以得到第一提取物。

将所得的上述提取物转移到容器中，并添加8重量％的乳杆菌属乳酸菌株培养液后制备混合物。上述重量％是以100重量％的混合物的总量为基准的。上述乳酸菌为果糖乳杆菌Mediheal 01，保藏编号为KCTC14924BP，将其在35℃的温度下于营养肉汤培养基中培养24小时以制备成培养液。然后，在35℃的通风良好的地方发酵36小时。将所得的发酵液进行低温灭菌，并用0.2微米大小的微过滤器进行过滤后得到茶树提取物。

比较实施例5

将从济州岛购入的茶树原料用流水清洗。

在10g的清洗好的上述茶树原料中添加70g的二丙二醇作为溶剂，然后在35℃的温度下提取600分钟以得到第一提取物。

将所得的上述提取物转移到容器中，并添加8重量％的乳杆菌属乳酸菌株培养液后制备混合物。上述重量％是以100重量％的混合物的总量为基准的。上述乳酸菌为果糖乳杆菌Mediheal 01，保藏编号为KCTC14924BP，将其在35℃的温度下于营养肉汤培养基中培养24小时以制备成培养液。然后，在35℃的通风良好的地方发酵36小时。将所得的发酵液进行低温灭菌，并用0.2微米大小的微过滤器进行过滤后得到茶树提取物。

比较实施例6

将从济州岛购入的茶树原料用流水清洗。

在10g的清洗好的上述茶树原料中添加100g的纯净水作为第一溶剂，然后利用美尔斯通公司的START D设备照射60分钟的频率为1000w的微波以得到第一提取物。

将所得的上述第一提取物转移到容器中，并添加30重量％的二丙二醇作为第二溶剂后制备混合物。上述重量％是以100重量％的混合物的总量为基准的。将所得的发酵液进行低温灭菌，并用0.2微米大小的微过滤器进行过滤后得到最终提取物。

比较实施例7

将从济州岛购入的茶树原料用流水清洗。

在10g的清洗好的上述茶树原料中添加100g的纯净水作为第一溶剂，然后利用美尔斯通公司的START D设备照射60分钟的频率为1000w的微波以得到第一提取物。

将所得的上述第一提取物转移到容器中，并添加30重量％的二丙二醇作为第二溶剂以及8重量％的弯曲乳杆菌乳酸菌株培养液后制备混合物(步骤S3)。上述重量％是以100重量％的混合物的总量为基准的。上述乳酸菌株为通过在35℃的温度下于营养肉汤培养基中培养24小时来制备成培养液。然后，在35℃的通风良好的地方发酵36小时以得到第二提取物。将所得的发酵液进行低温灭菌，并用0.2微米大小的微过滤器进行过滤后得到茶树提取物。

制备例

制备例1

通过将通过上述实施例1的步骤S1至步骤S5得到的茶树提取物和纯净水、甘油、丙二醇、1,2-己二醇、黄原胶、丁二醇、泛醇、海藻糖、甜菜碱、卡波姆、尿囊素、聚甘油-10月桂酸酯、精氨酸、乙二胺四乙酸二钠、甘草酸二钾以及醋酸生育酚混合来制备化妆品组合物(步骤S6)。

相对于100重量％的上述化妆品组合物，根据上述实施例1得到的茶树提取物的含量为50重量％。

制备例2至制备例7

将所添加的组成及含量调整为如下述表2所示，通过与制备例1相同的方法进行其余部分来制备化妆品组合物。

表2

化妆品组合物各成分的含量

比较制备例1

除了包含通过比较实施例7得到的茶树提取物以外，通过与制备例1相同的方法制备化妆品组合物。

实验例1：确认实施例以及比较实施例的茶树提取物的成分含量

1)确认4-萜烯醇(terpinen-4-ol)含量

回收上述实施例以及比较例中的全部茶树提取物后，确认全部提取物中包含的4-萜烯醇的含量。对照组1以g为单位表示10g的茶树原料中包含的4-萜烯醇的净含量。将其结果示于表3中。

表3

2)确认对伞花烃含量

回收上述实施例以及比较例的步骤中的全部茶树提取物后，确认全部提取物中包含的对伞花烃含量。对照组1以g为单位表示10g的茶树原料中包含的对伞花烃的净含量。将其结果示于表4中。

表4

3)确认α-萜品烯、γ-萜品烯含量

回收上述实施例以及比较例的步骤中的全部茶树提取物后，确认全部提取物中包含的α-萜品烯、γ-萜品烯。对照组1以g为单位表示10g的茶树原料中包含的α-萜品烯、γ-萜品烯的净含量。将其结果示于表5中。

表5

4)确认黄酮类衍生物化合物含量

在上述实施例以及比较实施例的茶树提取物中确认黄酮类衍生物化合物。将其结果示于表6中。

表6

5)确认发酵效率

将通过OD600(600nm处的光学密度)测定上述实施例以及比较实施例的发酵后低温灭菌前的提取物的结果示于表7中。

表7

备注	OD值
		实施例1	0.915
实施例2	0.901
		实施例3	0.880
实施例4	0.811
		实施例5	0.819
实施例6	0.623
		实施例7	0.599
实施例8	0.550
		实施例9	0.592
实施例10	0.576
		实施例11	0.499
比较实施例1	0.802
		比较实施例2	0.811
比较实施例3	0.786
		比较实施例4	0.581
比较实施例5	-
		比较实施例6	-(没有变化，未进行乳酸菌发酵)
比较实施例7	0.355

实验例2：对皮肤刺激物的舒缓效果

通过对20名没有皮肤疾病或过敏症状且没有过敏史的20～50多岁健康成年男性及女性进行人体皮肤斑贴实验来确认皮肤舒缓效果。

分别对上述制备例1至制备例7的化妆品组合物(表2)、比较制备例1以及添加5％的乳酸作为皮肤刺激物质的对照试样进行皮肤斑贴实验。在进行舒缓试验之前，用70％的乙醇充分擦拭受试者的前臂内侧部位并完全干燥后将9种化妆品分别斑贴30μg。以斑贴时间为标准，经过24小时后去除贴片，约30分钟后用放大镜(微视公司(MicroView))观察斑贴部位以确认是否存在红斑以及浮肿。根据下述表8的标准进行评价，并根据下述数学式计算平均皮肤反应度。将其结果示于表9中。

表8

标记	评分	皮肤刺激	评价标准
				-	0	无刺激	无反应
±	0.5	微刺激	模糊或勉强可以察觉的轻微的红斑
				+	1.0	轻度刺激	边界清晰但较轻的红斑
++	2.0	中度刺激	清晰的红斑
				+++	3.0	强刺激	严重的红斑以及大水泡

数学式：

表9

实验例3：皮肤保湿效果

将根据上述制备例1至制备例7以及比较制备例1的化妆品组合物以1天2次连续4周分别涂抹在20名男性以及女性受试者(25岁-50岁)的面部两侧以及前侧，并利用皮肤水分测定仪Corneometer CM 820(Courage+Khazaka，德国(Germany))测定涂抹前、2周后以及4周后的皮肤保湿改善状态。单位用仪器赋予的任意单位(Arbitrary Unit，AU)表示，测定值越高，意味着皮肤表面的水分含量越高。将关于皮肤保湿改善的实验结果示于表10中。

表10

实验例4：化妆品组合物剂型随着时间变化的稳定性以及异物感评价

1)对于随着时间变化的稳定性，从完成制备开始到2周后的时间点用肉眼观察根据上述制备例1至制备例7以及比较制备例1的化妆品组合物在常温的温度条件下随着时间的变化，即剂型结块、变色以及沉淀，并将结果整理在表11中。

2)对于异物感评价，在完成制备后将根据上述制备例1至制备例7以及比较制备例1的化妆品组合物用玻璃板(宽度×高度×厚度＝19cm×19cm×0.3cm)推开以确认剂型随着时间变化的异物感(均质分散物)，并将其结果记载于表11中。

表11

试样名	时间稳定性	异物感评价(均质分散)
			制备例1	○	++++
制备例2	○	++++
			制备例3	○	++++
制备例4	○	++++
			制备例5	×	++-
制备例6	○	++++
			制备例7	×	-+-
比较制备例1	○	++++

<时间稳定性评价标准>

×：不稳定(出现剂型结块、变色、沉淀中的至少一种)

○：稳定(未出现剂型结块、变色、沉淀)

<随着时间变化的异物感评价标准>

+++：涂抹于玻璃板上的状态干净，但偶尔有粗糙的部分，并且偶尔观察到随着时间变化的异物感

++++：涂抹于玻璃板上的状态整体干净，并且未观察到随着时间变化的异物感

++-：涂抹于玻璃板上的状态比较光滑，但确认到一些粗糙的部分，并且偶尔观察到随着时间变化的异物感

-+-：涂抹于玻璃板上的状态整体粗糙，并且观察到一些随着时间变化的异物感

---：涂抹于玻璃板上的状态整体粗糙，并且整体观察到随着时间变化的异物感。

Claims (7)

1.一种包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法，其包括：

清洗茶树原料的步骤；

在清洗好的上述茶树原料中加入作为第一溶剂的纯净水后，通过微波照射得到第一提取物的步骤；

通过在上述第一提取物中加入乳酸菌及作为第二溶剂的多元醇类化合物来制备混合物的步骤；

对上述混合物进行发酵得到第二提取物的步骤；

通过对发酵后的上述第二提取物进行低温灭菌以及过滤来得到茶树提取物的步骤；以及

通过混合所得的上述茶树提取物和选自由纯净水、甘油、丙二醇、1,2-己二醇、黄原胶、丁二醇、泛醇、海藻糖、甜菜碱、卡波姆、尿囊素、聚甘油-10月桂酸酯、精氨酸、乙二胺四乙酸二钠、甘草酸二钾以及醋酸生育酚组成的组中的一种以上来制备化妆品组合物的步骤，

上述乳酸菌为果糖乳杆菌Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01)KCTC 14924BP。

2.根据权利要求1所述的包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法，其中，清洗好的上述茶树原料与第一溶剂的重量比为1：10至15。

3.根据权利要求1所述的包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法，其中相对于100重量％的茶树提取物的总量，上述茶树提取物中包含的对伞花烃的含量为0.0001重量％至2重量％。

4.根据权利要求1所述的包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法，其中，相对于100重量％的上述混合物，上述第二溶剂的含量为30重量％至50重量％。

5.根据权利要求1所述的包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法，其中，上述多元醇类化合物包含选自由二丙二醇、1,3-丁二醇、甘油、1,3-丙二醇以及己二醇组成的组中的一种以上。

6.根据权利要求1所述的包含茶树提取物的化妆品组合物的制备方法，其中，相对于100重量％的上述化妆品组合物，所得的上述茶树提取物的含量为30重量％至70重量％。

7.一种化妆品组合物，其通过权利要求1至6中任一项所述的制备方法制备。