CN117362366B - 壳梭菌素二萜类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了壳梭菌素二萜类化合物及其制备方法和应用，属于微生物农药技术领域，所述壳梭菌素二萜类化合物包括cotylenins K～M中的至少一种。该系列壳梭菌素二萜类化合物具有抗植物病原真菌的作用，可用于制备农用抗菌剂，具有较高的农用商业价值。
Description
技术领域
本发明属于微生物农药技术领域，特别涉及壳梭菌素二萜类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
二萜类化合物分布广泛，具有抗细菌、抗氧化、抗炎症、抗病毒等多种生物活性。其中，壳梭菌素二萜是一类具有 5/8/5 或 5/9/5 或 5/7/5的三环二萜骨架的化合物，其化学结构独特，但已被发现的数量尚少。目前，壳梭菌素二萜的获得途径以天然来源为主，从微生物培养发酵获取壳梭菌素二萜具有较重要的潜力。
发明内容
为了解决壳梭菌素二萜数量较少的问题，本发明提供了三种壳梭菌素二萜类化合物，该系列壳梭菌素二萜类化合物具有抗植物病原真菌的作用，可用于制备农用抗菌剂，具有较高的农用商业价值。
本发明还提供了壳梭菌素二萜类化合物的制备方法和应用。
本发明通过以下技术方案实现：
本发明提供壳梭菌素二萜类化合物，所述壳梭菌素二萜类化合物包括cotyleninsK～M中的至少一种，cotylenins K～M的结构式分别如式（I）～（III）所示：
。
基于同一发明构思，本发明提供拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350在制备壳梭菌素二萜类化合物中的应用，所述拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350已于2020年8月3日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.M 2020394。
基于同一发明构思，本发明提供拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350在制备农用抗菌剂中的应用。
基于同一发明构思，本发明提供壳梭菌素二萜类化合物的制备方法，所述制备方法包括：
将拟茎点霉菌进行发酵，发酵结束后收集发酵液和菌丝体；
将所述发酵液进行萃取、将所述菌丝体进行浸提，合并提取液，后挥发溶剂，获得发酵粗提物；
将所述发酵粗提物进行色谱分离，以氯仿-甲醇体系作为洗脱剂进行梯度洗脱，收集氯仿和甲醇体积比9:1时洗脱得到的粗组分Fr.1；
将所述粗组分Fr.1进行色谱分离，洗脱剂采用石油醚-丙酮体系，石油醚和丙酮从体积比9:1至7：3对所述粗组分Fr.1进行梯度洗脱，收集石油醚和丙酮体积比4:1时洗脱得到的粗组分Fr.1.1，收集石油醚和丙酮体积比7:3时洗脱得到的粗组分Fr.1.2；
将所述粗组分Fr.1.1进行色谱分离，获得化合物cotylenins K，将所述粗组分Fr.1.2进行色谱分离，获得化合物cotylenins L和cotylenins M。
进一步的，所述将所述粗组分Fr.1.1进行色谱分离，获得化合物cotylenins K，将所述粗组分Fr.1.2进行色谱分离，获得化合物cotylenins L和cotylenins M，具体包括：
所述粗组分Fr.1.1采用反相硅胶柱进行色谱分离，以水-丙酮体系作为洗脱剂进行洗脱，水和丙酮体积比为6:4，获得化合物cotylenins K；
将所述粗组分Fr.1.2进行色谱分离，以氯仿-丙酮体系作为洗脱剂进行洗脱，氯仿和丙酮体积比为4:1时，获得化合物cotylenins L，氯仿和丙酮体积比为7:3时，获得化合物cotylenins M。
进一步的，所述将拟茎点霉菌进行发酵，发酵结束后收集发酵液和菌丝体，具体包括：
将拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350置于改良马氏培养基中进行发酵，发酵结束后收集发酵液和菌丝体；
所述改良马氏培养基的成分如下：
蛋白胨：5份，KH2PO4：1份，MgSO4·7H2O：5份，酵母粉：2份，葡萄糖：20份，蒸馏水：1000份。
进一步的，所述将所述发酵粗提物进行色谱分离，以氯仿-甲醇体系作为洗脱剂进行梯度洗脱，收集氯仿和甲醇体积比9:1时洗脱得到的粗组分Fr.1，具体包括：
将所述发酵粗提物进行色谱分离，以氯仿-甲醇体系作为洗脱剂进行梯度洗脱，其中，氯仿和甲醇体积比依次采用1:0、95:5、9:1，收集氯仿和甲醇体积比9:1时洗脱得到的粗组分Fr.1。
进一步的，所述将所述粗组分Fr.1进行色谱分离，洗脱剂采用石油醚-丙酮体系，石油醚和丙酮从体积比9:1至7：3对所述粗组分Fr.1进行梯度洗脱，收集石油醚和丙酮体积比4:1时洗脱得到的粗组分Fr.1.1，收集石油醚和丙酮体积比7:3时洗脱得到的粗组分Fr.1.2，具体包括：
将所述粗组分Fr.1进行色谱分离，洗脱剂采用石油醚-丙酮体系，石油醚和丙酮体积比依次采用9:1、4:1、7:3对所述粗组分Fr.1进行梯度洗脱，收集石油醚和丙酮体积比4:1时洗脱得到的粗组分Fr.1.1，收集石油醚和丙酮体积比7:3时洗脱得到的粗组分Fr.1.2。
基于同一发明构思，本发明还提供壳梭菌素二萜类化合物在制备农用抗菌剂中的应用。
基于同一发明构思，本发明还提供一种农用抗菌剂，所述农用抗菌剂的有效成分包括壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M中的至少一种。`
本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：
1.本发明壳梭菌素二萜类化合物，提供了三种新的壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M，化合物cotylenins K～M提取自拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350的发酵产物，能够抗植物病原真菌，为开发农用抗菌剂提供新的选择，具有较高的农用商业价值。
2.本发明壳梭菌素二萜类化合物的制备方法，壳梭菌素二萜类化合物通过拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350发酵制备得到，该方法具有周期短、培养条件温和、副产物少、成本低的优点，且具有较高的经济价值，成本低、操作简便，易于大规模生产，为获得天然来源壳梭菌素二萜类化合物提供了新途径。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为本发明所述化合物cotylenins K的 1H-NMR谱；
图2为本发明所述化合物cotylenins K的 13C-NMR和DEPT谱；
图3为本发明所述化合物cotylenins L的 1H-NMR谱；
图4为本发明所述化合物cotylenins L的13C-NMR和DEPT谱；
图5为本发明所述化合物cotylenins M的 1H-NMR谱；
图6为本发明所述化合物cotylenins M的13C-NMR和DEPT谱；
图7为本发明壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M的结构式。
具体实施方式
下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本发明，本发明的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本发明，而非限制本发明。
在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。
除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
本发明整体思路如下：
目前，壳梭菌素（Fusicoccane）二萜类化合物已被发现的数量尚少，其获得途径以天然来源为主，从微生物培养发酵获取壳梭菌素二萜具有较重要的潜力。植物内生真菌具有丰富的生物多样性，是发现生物活性新型次生代谢物的重要资源之一。拟茎点霉[Phomopsis (Sacc.) Bubak]属半知菌亚门，腔孢纲，是植物内生真菌的一个重要类群，能够产生结构类型丰富且具有生物活性的代谢产物。
基于此，本发明提供壳梭菌素二萜类化合物及其制备方法，以拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350的发酵产物为原料，提取出壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M，化合物cotylenins K～M能够抗植物病原真菌，为开发农用抗菌剂提供新的选择，具有较高的农用商业价值。
其中，拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350已被专利CN202110831773.4所公开，因此本发明不再提供该菌株的保藏证明和存活证明。
下面将结合实施例及实验数据对本申请壳梭菌素二萜类化合物及其制备方法进行详细说明。
实施例1
壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M的分离制备，包括以下步骤：
（1）配制改良马氏培养基：称量蛋白胨5g，KH2PO4 1g，MgSO4·7H2O 5g，酵母粉2g，葡萄糖20g，加入1 L蒸馏水煮沸溶解，pH自然，121 ℃灭菌30 min，制得改良马氏培养基备用。
（2）将拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350菌株接入改良马氏培养基中，在28±2℃、200 r/min摇床培养3d，得种子液，再将制得的种子液按10 %的接种量接入发酵培养基改良马氏培养基中，于28±2℃、200 r/min摇床培养9d，获得发酵产物。
（3）将步骤（2）得到的发酵产物用纱布过滤，获得发酵液和菌丝体，发酵液用乙酸乙酯萃取，菌丝体用甲醇浸提，合并提取液，减压浓缩挥发溶剂，获得发酵粗提物。
（4）将发酵粗提物用硅胶柱（200-300目）进行色谱分离，以氯仿-甲醇体系按照体积比(1:0→95:5→9:1)对所述发酵粗提物进行梯度洗脱，收集氯仿-甲醇体系体积比9:1洗脱得到的粗组分Fr.1。
将所述粗组分Fr.1进行色谱分离，洗脱剂采用石油醚-丙酮体系，石油醚和丙酮体积比依次采用9:1、4：1、7：3对所述粗组分Fr.1进行梯度洗脱，收集石油醚和丙酮体积比4:1时洗脱得到的粗组分Fr.1.1，收集体积比7:3时洗脱得到的粗组分Fr.1.2。
所述粗组分Fr.1.1采用体积比6:4的水：丙酮溶剂体系的反相硅胶柱进行色谱分离，获得化合物cotylenins K。所述粗组分Fr 1.2采用氯仿：丙酮溶剂体系进行色谱分离，收集氯仿和丙酮体积比为4:1时洗脱得到的馏分，挥发洗脱剂，获得化合物cotylenins L，收集体积比为7:3时洗脱得到的馏分，挥发洗脱剂，获得化合物cotylenins M。
实施例2
化合物cotylenins K～M的结构鉴定，结果如图7所示，图中Me代表甲基。
1、壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K的结构鉴定
由实施例1制备得到的化合物cotylenins K，通过1D/2D NMR(一维核磁共振波谱和二维核磁共振波谱)以及HRESI-MS(高分辨电喷雾电离质谱)鉴定其结构。鉴定得出cotylenins K的分子式为C32H51O11Cl；HRESIMS m/z: 669.3036 [M+Na]+，不饱和度为7。
如图1、2所示，1H-NMR图谱显示4个甲基信号0.85 (d, J = 7.2 Hz, H-17), 0.99(d, J = 6.8 Hz, H-20), 1.10 (d, J = 6.8 Hz, H-19), 1.26 (s, H-18), 一个甲氧基3.38 (s,16-OMe), 一个烯烃氢信号5.49 (d, J = 2.8 Hz, H-1)。13C DEPT-NMR图谱中共检测到32个碳原子，包括1个甲氧基（dC 58.2），5个甲基(dC 7.6, dC 16.8, dC 19.7, dC20.7, dC 25.4), 8个芳香季碳 (dC 40.1, 51.7, 75.0, 81.9, 92.4, 134.7, 139.7,149.8), 7个亚甲基碳(dC 26.2, 31.2, 34.3, 42.3, 58.9, 65.8, 76.7), 9个次甲基碳(dC 27.6, 41.3, 67.8, 68.9, 70.7, 78.1, 78.3, 101.7, 134.2)，其中20个碳信号归属于一个二萜骨架，12个归属于两个糖单元。其中两个糖基氧环、两组烯烃碳共4个不饱和度, 表明化合物I可能是一个三环二萜的糖苷类化合物。从HMBC图谱可以观察到H-9 (dH3.85)和C-1′(dC 101.7)具有远程相关性, 表明该化合物的糖基氧环的C-1′和二萜骨架的C-9连接。16-OMe和C-16具有相关性, 表明C-16连接了一个甲氧基取代基。通过与已知化合物cotylenins B的核磁共振波谱数据比对，可以判断化合物 I 为5/8/5 三环二萜。主要区别是C-1''位的氧桥键发生了断裂。在1H-1HCOSY 图谱中H-15/H-16, H-19, H-20; H-12/H-13, H-18; H-5′/H-2′, H-4′, H-6′和H-2′/H-1′, H-5′, H-6′ 表现出相关性，另外在HMBC图谱中可以看到两个糖基氧环的H-5'' (dH 1.09)和C-1'' (dC 65.5), C-2'' (dC 75.0), C-6' (dC 16.8)具有相关性，这些数据表明两个糖基氧环上的C-1''位与C-4''没有相连，进一步证明该化合物I在氧桥键发生断裂, 经检索为新化合物，命名为cotyleninsK，其结构式如下式（I）所示：
2、壳梭菌素二萜类化合物cotylenins L的结构鉴定
由实施例1制备得到的化合物cotylenins L，通过1D/2D NMR(一维核磁共振波谱和二维核磁共振波谱)以及HRESI-MS(高分辨电喷雾电离质谱)鉴定其结构。cotylenins L的分子式为C32H50O11；HRESIMS m/z 633.3233 [M+Na]+，不饱和度为8。
如图3、4所示，从13C DEPT-NMR图谱中共检测到32个碳信号，包括1个甲氧基（dC58.3），5个甲基(dC 7.7, dC 19.8, dC 20.2, dC 20.8, dC 25.5), 8个芳香季碳 (dC40.2, 51.7, 72.6, 82.0, 92.9, 134.7, 139.7, 149.7), 7个亚甲基碳(dC 26.5,31.3, 34.4, 42.3, 54.1, 59.4, 76.8), 9个次甲基碳(dC 27.6, 41.3, 67.1, 69.9,68.2, 78.1, 78.3, 101.5, 134.2)。同化合物cotylenins K比较发现，化合物II与化合物I的二萜骨架相同。根据分子式计算，该化合物的不饱和度为8, 减去和化合物I相同的二萜骨架的5个不饱和度，推断其侧链具有3个不饱和度。在HMBC图谱中也发现 H-9 (dH 3.74)和C-1′(dC 101.5), H-1′(dH 4.83)和C-9 (dC 78.3)具有远程相关性, 表明该化合物的糖基氧环的C-1′和二萜骨架的C-9相连, 说明了化合物I与化合物II的区别就在糖基氧环的侧链上。在HMBC图谱中观察到CH3-5''的3个信号氢与C-1'' (δC 63.4), C-2'' (δC 72.6),C-3'' (δC 54.1), H-3'' (δH 3.06)和C-2'' (δC 72.6)具有远程相关性, 而在1H-1H COSY谱中, H-3'' (δH 3.06)与H-4'' (δH 2.63-2.66)关联, 这些相关点可以推测C-2''和C-3''相连，C-3''和C-4''连接, 在DEPT碳谱中显示C-3''是次甲基碳,结合C-3''和C-4'' 碳信号和H-3''和H-4''的交叉峰以及分子式中氧原子数量可推断出, C-3''和C-4''和氧原子结合形成氧环。经检索为新化合物，命名为cotylenins L，其结构式如下式（II）所示：
3、壳梭菌素二萜类化合物cotylenins M的结构鉴定
由实施例1制备得到的化合物cotylenins M，通过1D/2D NMR(一维核磁共振波谱和二维核磁共振波谱)以及HRESI-MS(高分辨电喷雾电离质谱)鉴定其结构。cotylenins M的分子式为C32H52O12；HRESIMS m/z 627.3396 [M-H]-，不饱和度为7。
如图5、6所示，其氢谱和碳谱与化合物cotylenins L相比，可确定化合物III为cotylenins类的二萜糖苷。根据分子式推测，该分子少了1个氯原子，多了一个羟基质子，推测化合物I中的氯原子被羟基取代成了化合物III, 两者应该是同系物。从HMBC图谱中观察到H-4'' (δH 3.49)和C-1''(δC 64.9), C-3''(δC 64.4)相关, C-2''(δC 74.9)和H-3''(δH4.24), H-4''(δH 3.49)相关，表示C-1'', C-2'', C-3''和C-4''相连与化合物I一致。从化合物I的HSQC图谱中可以观察到羟基质子5''氢信号与5''-C有相关点，而在化合物III中H-5''信号由于氘代甲醇的原因没有观测到, 进一步证明在C-5''上的氯原子被羟基信号取代，确定了化合物的化学结构，经检索为新化合物，命名为cotylenins M，其结构式如下式（III）所示：
本实施例所述的三个壳梭菌素二萜类化合物均为白色无定形粉末，溶解于甲醇、吡啶、二甲亚砜等，不溶于石油醚和水。化合物cotylenins K～M的1H NMR和13C NMR数据见表1，测定溶剂为氘代甲醇。
表1 壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M的1H NMR和13C NMR数据
实施例 3
壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M的抗植物病原真菌活性测定：
5株植物病原真菌包括：稻瘟霉（Pyricularia oryzae）、番茄灰霉菌（Botrytis cinerea）、小麦赤霉菌（Gibberella saubinetii）、马铃薯腐皮镰刀菌（Fusarium solani）、苹果黑腐皮壳菌（Valsa mali）。培养基为PDB培养基。
在无菌条件下，将5株生长良好的病原菌接入每瓶含有100 mL液体培养基的250mL锥形瓶中。分别称取1024 µg化合物cotylenins K～M后用DMSO溶液溶解，在96孔板上用无菌水倍比稀释成512-2 µg/mL（即512、256、128、64、32、16、8、4、2 µg/mL）。每孔加入50 µL病原菌悬液，吸打混合均匀，以不加菌液的孔为空白对照，设置3个平行处理。将96孔板置于28±1℃培养箱中培养24-48h，每8 h观察结果并记录一次,肉眼观测活性指示菌的生长状况，以没有指示菌生长的样品最低浓度为最小抑菌浓度（MIC）。
本发明的植物内生真菌Phomopsis sp. YE3350产生的壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M对5种植物病原真菌指示菌的最低抑菌浓度（MIC）值如表2所示。
表2 化合物cotylenins K～M对5种植物病原真菌的抑制活性
实验结果表明，本发明所述的壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M对5种植物病原真菌指示菌都显示不同程度的抗菌活性，其中对番茄灰霉菌均具有较强的抑制作用，化合物cotylenins L和化合物cotylenins M对番茄灰霉菌的MIC值均为4 µg/mL，尤其是化合物cotylenins K对番茄灰霉菌的MIC值仅为2 µg/mL。化合物Cotylenins K对稻瘟霉和小麦赤霉菌的抑制作用最强，其MIC值为4 µg/mL。
综上所述，本发明的壳梭菌素二萜类化合物cotylenins K～M具有作为制备新的农用抗菌剂的潜在用途。
本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：
（1）本发明壳梭菌素二萜类化合物的制备方法，在制备发酵粗提物过程中，发酵液用乙酸乙酯萃取，菌丝体用甲醇浸提，其目的在于提取获得发酵液和菌丝体中的有效组分，带来的好处是将发酵产物中的有效物质与未利用完的培养基成分和水溶性杂质分开。
（2）本发明壳梭菌素二萜类化合物的制备方法，在收集粗组分Fr.1，以及分离cotylenins K～M过程中，选择的各洗脱剂体系及洗脱剂的不同体积比，目的在于获得对应的目标馏分或目标产物，若采用其他的洗脱剂体系或其他的体积比，则获得目标产物cotylenins K～M的分离流程将会比现有技术繁琐，耗时更长或难以获得。
最后，还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (9)
1.壳梭菌素二萜类化合物，其特征在于，所述壳梭菌素二萜类化合物包括cotyleninsK～M中的至少一种，cotylenins K～M的结构式分别如式（I）～（III）所示：
。
2.拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350在制备如权利要求1所述的壳梭菌素二萜类化合物中的应用，其特征在于，所述拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350已于2020年8月3日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.M 2020394。
3.如权利要求1所述的壳梭菌素二萜类化合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
将拟茎点霉菌进行发酵，发酵结束后收集发酵液和菌丝体；
将所述发酵液进行萃取、将所述菌丝体进行浸提，合并提取液，后挥发溶剂，获得发酵粗提物；
将所述发酵粗提物进行色谱分离，以氯仿-甲醇体系作为洗脱剂进行梯度洗脱，收集氯仿和甲醇体积比9:1时洗脱得到的粗组分Fr.1；
将所述粗组分Fr.1进行色谱分离，洗脱剂采用石油醚-丙酮体系，石油醚和丙酮从体积比9:1至7：3对所述粗组分Fr.1进行梯度洗脱，收集石油醚和丙酮体积比4:1时洗脱得到的粗组分Fr.1.1，收集石油醚和丙酮体积比7:3时洗脱得到的粗组分Fr.1.2；
将所述粗组分Fr.1.1进行色谱分离，获得化合物cotylenins K，将所述粗组分Fr.1.2进行色谱分离，获得化合物cotylenins L和cotylenins M。
4.根据权利要求3所述的壳梭菌素二萜类化合物的制备方法，其特征在于，所述将所述粗组分Fr.1.1进行色谱分离，获得化合物cotylenins K，将所述粗组分Fr.1.2进行色谱分离，获得化合物cotylenins L和cotylenins M，具体包括：
所述粗组分Fr.1.1采用反相硅胶柱进行色谱分离，以水-丙酮体系作为洗脱剂进行洗脱，水和丙酮体积比为6:4，获得化合物cotylenins K；
将所述粗组分Fr.1.2进行色谱分离，以氯仿-丙酮体系作为洗脱剂进行洗脱，氯仿和丙酮体积比为4:1时，获得化合物cotylenins L，氯仿和丙酮体积比为7:3时，获得化合物cotylenins M。
5.根据权利要求3所述的壳梭菌素二萜类化合物的制备方法，其特征在于，所述将拟茎点霉菌进行发酵，发酵结束后收集发酵液和菌丝体，具体包括：
将拟茎点霉菌Phomopsis sp. YE3350置于改良马氏培养基中进行发酵，发酵结束后收集发酵液和菌丝体；
所述改良马氏培养基的成分如下：
蛋白胨：5份，KH2PO4：1份，MgSO4·7H2O：5份，酵母粉：2份，葡萄糖：20份，蒸馏水：1000份。
6.根据权利要求3所述的壳梭菌素二萜类化合物的制备方法，其特征在于，所述将所述发酵粗提物进行色谱分离，以氯仿-甲醇体系作为洗脱剂进行梯度洗脱，收集氯仿和甲醇体积比9:1时洗脱得到的粗组分Fr.1，具体包括：
将所述发酵粗提物进行色谱分离，以氯仿-甲醇体系作为洗脱剂进行梯度洗脱，其中，氯仿和甲醇体积比依次采用1:0、95:5、9:1，收集氯仿和甲醇体积比9:1时洗脱得到的粗组分Fr.1。
7.根据权利要求3所述的壳梭菌素二萜类化合物的制备方法，其特征在于，所述将所述粗组分Fr.1进行色谱分离，洗脱剂采用石油醚-丙酮体系，石油醚和丙酮从体积比9:1至7：3对所述粗组分Fr.1进行梯度洗脱，收集石油醚和丙酮体积比4:1时洗脱得到的粗组分Fr.1.1，收集石油醚和丙酮体积比7:3时洗脱得到的粗组分Fr.1.2，具体包括：
将所述粗组分Fr.1进行色谱分离，洗脱剂采用石油醚-丙酮体系，石油醚和丙酮体积比依次采用9:1、4:1、7:3对所述粗组分Fr.1进行梯度洗脱，收集石油醚和丙酮体积比4:1时洗脱得到的粗组分Fr.1.1，收集石油醚和丙酮体积比7:3时洗脱得到的粗组分Fr.1.2。
8.如权利要求1所述的壳梭菌素二萜类化合物在制备农用抗菌剂中的应用。
9.一种农用抗菌剂，其特征在于，所述农用抗菌剂的有效成分包括权利要求1所述的壳梭菌素二萜类化合物。
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Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04149133A (ja) * | 1990-10-11 | 1992-05-22 | Rikagaku Kenkyusho | 細胞分化誘導剤 |
| KR20020068424A (ko) * | 2001-02-21 | 2002-08-27 | 황재관 | 약용식물로부터 분리한 트리터펜계 화합물을 함유하는충치 예방용 항균 조성물 |
| CN103360351A (zh) * | 2013-07-17 | 2013-10-23 | 云南大学 | 异海松烷二萜化合物及其应用 |
| CN113481105A (zh) * | 2021-07-22 | 2021-10-08 | 云南大学 | 一种拟茎点霉属真菌新菌株、制备方法及用途 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004072225A2 (en) * | 2003-02-12 | 2004-08-26 | Ramot At Tel Aviv University Ltd. | Transgenic fungi expressing bcl-2 and methods of using bcl-2 or portions thereof for improving biomass production, survival, longevity, stress resistance and pathogenicity of fungi |
| NZ552316A (en) * | 2006-12-22 | 2009-10-30 | Fonterra Co Operative Group | Dairy product and process |
| US7932233B2 (en) * | 2008-05-23 | 2011-04-26 | Universita'Degli Studi Roma “Tor Vergata” | Fungal phytotoxin fusicoccin for the treatment and diagnosis of coagulation-correlated pathologies |
-
2023
- 2023-12-07 CN CN202311674246.2A patent/CN117362366B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04149133A (ja) * | 1990-10-11 | 1992-05-22 | Rikagaku Kenkyusho | 細胞分化誘導剤 |
| KR20020068424A (ko) * | 2001-02-21 | 2002-08-27 | 황재관 | 약용식물로부터 분리한 트리터펜계 화합물을 함유하는충치 예방용 항균 조성물 |
| CN103360351A (zh) * | 2013-07-17 | 2013-10-23 | 云南大学 | 异海松烷二萜化合物及其应用 |
| CN113481105A (zh) * | 2021-07-22 | 2021-10-08 | 云南大学 | 一种拟茎点霉属真菌新菌株、制备方法及用途 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 丝状真菌二倍半萜化合物及其合成酶;殷如;洪葵;;生物工程学报(12);第1631-1641页 * |
| 真菌二萜环化酶的研究进展;刘莉;胡昌华;;微生物学报(11);第1438-1445页 * |
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