CN117338908A - Elabela在制备抗遗传性肥厚型心肌病药物中的应用 - Google Patents

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CN117338908A CN202311216468.XA CN202311216468A CN117338908A CN 117338908 A CN117338908 A CN 117338908A CN 202311216468 A CN202311216468 A CN 202311216468A CN 117338908 A CN117338908 A CN 117338908A
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Abstract

本发明提供了Elabela在制备抗遗传性肥厚型心肌病药物中的应用，属于生物医药技术领域；本发明应用Elabela蛋白在体外直接处理人类胚胎干细胞定向分化获得的心肌细胞，发现Elabela体外处理可以明显抑制人类胚胎干细胞‑心肌细胞肥大表型；本发明在基因突变导致的遗传性肥厚型心肌病小鼠中过表达Elabela，发现Elabela显著缓解小鼠病理性心肌肥厚并改善了心功能；本发明所述Elabela可以用于制备抗遗传性肥厚型心肌病的药物，为治疗肥厚型心肌病提供一种新的途径和手段。

Description

Elabela在制备抗遗传性肥厚型心肌病药物中的应用
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及Elabela在制备抗遗传性肥厚型心肌病药物中的应用。
背景技术
肥厚型心肌病(Hypertrophic cardiomyopathy)是一种因编码肌小节相关蛋白基因突变导致的常染色体显性遗传病。其起病隐匿、发病率高，是诱发恶性心律失常和心源性猝死的主要原因。肥厚型心肌病的具体机制还不清晰，尽管Mavacamten(MYK-461)可通过靶向抑制心肌肌球蛋白，部分改善因流出道梗阻引起的肥厚型心肌病，但是国内尚无针对肥厚型心肌病的原创特效药。目前，手术治疗仍是重症患者缓解症状的唯一选择，但是手术患者的预后往往不佳。因此，需要研发一种新的用于治疗肥厚型心肌病的药物。
Elabela(ELA)是一种有32个氨基酸组成的分泌性小分子蛋白，人源ELA序列为：QRPVNLTMRRKLRKHNCLQRRCMPLHSRVPFP。研究表明，ELA静脉滴注有效降低自发性高血压大鼠动脉血压和交感神经活；其可通过非一氧化氮依赖途径舒张血管，减弱血管紧张素II介导的血管收缩效应；ELA还具有改善肺动脉高压大鼠的疾病症状的功效。此外，研究还表明，ELA与其内源性受体APJ所组成的ELA-APJ系统参与调控心血管疾病。但是，目前尚未有报道ELA在制备遗传性肥厚型心肌病治疗药物中的作用。
发明内容
针对现有技术中存在不足，本发明提供了Elabela在制备抗遗传性肥厚型心肌病药物中的应用；本发明应用Elabela蛋白在体外直接处理人类胚胎干细胞定向分化获得的心肌细胞，发现Elabela体外处理可以明显抑制人类胚胎干细胞-心肌细胞肥大表型；本发明在基因突变导致的遗传性肥厚型心肌病小鼠中过表达Elabela，发现Elabela显著缓解小鼠病理性心肌肥厚并改善了心功能；本发明所述Elabela可以用于制备抗遗传性肥厚型心肌病的药物，为治疗肥厚型心肌病提供一种新的途径和手段。
为了实现上述技术目的，本发明采用以下技术手段：
本发明首先提供了Elabela在制备抗遗传性肥厚型心肌病以及遗传性肥厚型心肌病引起的病症或减轻其症状的药物中的应用。
优选地，所述症状包括病理性心肌肥厚、心脏重量或左心室重量增加。
优选地，所述症状包括心肌组织中肥厚标志物的表达显著升高。
优选地，所述症状包括因遗传性肥厚型心肌病导致的心肌细胞面积增大和/或心肌纤维化水平升高。
优选地，所述病症包括人源心肌细胞面积增大，心肌肥厚标志物水平升高。
本发明还提供一种抗遗传性肥厚型心肌病以及遗传性肥厚型心肌病引起的病症或减轻其症状的药物，所述药物的活性成分包括Elabela。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
相比目前采用动物来源的细胞模型进行Elabela的体外研究，本发明利用人类胚胎干细胞定向分化获得人源心肌细胞，并建立了体外人源心肌细胞肥大模型。所述体外人源心肌细胞肥大模型能够有效避免因动物来源的心肌细胞与人类心肌细胞存在的巨大差异导致的研究结果不匹配人类心脏疾病发展的情况，本发明通过Elabela体外直接处理发现其可明显抑制人类胚胎干细胞-心肌细胞肥大表型。此外，我们利用基因编辑技术，成功构造了Myh6基因R404Q突变的肥厚型心肌病小鼠模型(Myh6R404Q)，该模型具有遗传性心肌肥厚、心脏面积增大、心脏及左心室重量增加等特征。Myh6R404Q小鼠全身过表达Elabela后，显著改善小鼠遗传性病理性心肌肥厚的症状。
本发明采用Elabela体外直接处理肥大的人类胚胎干细胞诱导获得的心肌细胞，显著减小心肌细胞面积，并降低去甲肾上腺素导致的心肌肥厚标志物表达的增高，且纳摩尔级的Elabela即可使心肌肥厚指标恢复至正常心肌细胞水平。Myh6R404Q小鼠全身过表达Elabela，降低小鼠左心室和心脏重量，减小心脏体积以及舒张期和收缩期心肌壁厚度，并有效抑制肥厚型心肌病小鼠心肌组织纤维化。
本发明通过体外和体内研究发现，Elabela具有治疗肥厚型心肌病的巨大潜能，可以作为新的抗肥厚型心肌病药物进行开发，为治疗肥厚型心肌病提供一种新的途径和手段。同时，本发明为目前抗肥厚型心肌病药物提供了全新的选择和思路，拓宽了抗肥厚型心肌病药物的选择领域，也为该技术领域的发展做出了贡献。
附图说明
图1为Elabela体外直接处理后的心肌细胞面积情况图；其中****表示p<0.0001。
图2为Elabela体外直接处理后人源心肌细胞中心肌肥厚标志物的表达水平情况图；其中(a)为ANP；(b)为BNP；(c)为TNNT2；*表示p<0.05；**表示p<0.01。
图3为小鼠过表达Elabela后血液(a)和心肌组织(b)中Elabela表达情况图；图中，*表示p<0.05；**表示p<0.01；****表示p<0.0001；#表示与WT组比较p<0.05。
图4为体内过表达Elabela后WT和Myh6R404Q小鼠心脏(a)和左心室重量(b)；图中，*表示p<0.05；**表示p<0.01。
图5为小鼠心动超声检测结果，(a)为收缩期左心室前壁厚度、(b)为舒张期左心室前壁厚度、(c)为收缩期左心室后壁厚度、(d)为舒张期左心室后壁厚度；图中，*表示p<0.05；**表示p<0.01；***表示p<0.001。
图6为体内过表达Elabela后WT和Myh6R404Q小鼠心脏中心肌肥厚标志物Anp(a)、Bnp(b)和Tnnt2(c)的表达水平。图中，*表示p<0.05；**表示p<0.01。
图7为小鼠心肌组织Masson染色结果图；图中蓝色区域表示纤维化程度。
具体实施方式
下面结合附图以及具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备均为本技术领域常规试剂、方法和设备。
以下实施例中，所采用的8周龄野生型小鼠(WT)小鼠以及Myh6基因R404Q点突变小鼠(Myh6R404Q)均购于江苏省集萃药康生物科技公司。小鼠正常饲料购于江苏省协同生物工程有限责任公司。Elabela蛋白购自MedChemExpress(HY-P2196A)。腺相关病毒9型携带Elabela过表达cDNA(AAV9-Elabela)以及对照病毒购自吉凯公司。
实施例1：人胚胎干细胞定向分化为心肌细胞以及Elabela体外直接处理对心肌细胞面积的影响检测
本实施例利用人胚胎干细胞系MYL2Neo/w-H7分化心肌细胞，再通过体外筛选获得大量高纯度人源心肌细胞。所述MYL2Neo/w-H7细胞系分化为心肌细胞的具体步骤为：
①MYL2Neo/w-H7细胞密度达到85％-90％时，将培养基换RPMI1640/B27-no insulin培养液并加入8μM Wnt信号通路激动剂CHIR-99021，连续培养2天；
②第3天将培养基换为新的RPMI1640/B27-no insulin，培养细胞24h；
③第4天将培养基更换为RPMI1640/B27-no insulin，并加入5μM的Wnt信号通路抑制剂IWR-1，连续培养2天；
④第6天用DPBS清洗细胞两次后将培养基更换RPMI1640/B27-no insulin，培养2天，在分化第7天开始可以观察到跳动的心肌细胞；
⑤第8天后将培养基更换为RPMI/B27-insulin培养基，持续培养至14天，每天换液；
⑥第14天时，培养液更换为RPMI/B27-insulin培养基，并加入50μg/mL的G418抗生素筛选心肌细胞，连续筛选7天，每天换液并更换新的G418。
通过这种定向分化和筛选方法可以获得大量高纯度的人胚胎干细胞来源的人心肌细胞。
将人胚胎干细胞定向分化获得的人源心肌细胞均匀地种到含有一张细胞爬片的24孔板中，细胞贴壁生长24h后分别给予PBS、NE(10μM)、Elabela(200nM)+NE(10μM)处理细胞，得到PBS处理组、NE处理组和Elabela+NE处理组。待各组处理24h后，分别对其进行心肌肌钙蛋白(cTNT)免疫荧光染色实验。
其中，心肌肌钙蛋白(cTNT)免疫荧光染色实验具体步骤如下：
①PBS清洗处理后的细胞2次(5min/次)后，用4％多聚甲醛固定细胞20min，弃去固定液后用PBS清洗3次(5min/次)。
②用0.2％Triton-X100处理①中得到的细胞5min，然后用PBS清洗3次(5min/次)。
③将②中得到的细胞用1％BSA溶液封闭处理2h，封闭完成后用PBS清洗3次(5min/次)。
④孵育cTNT抗体(1:200，PBS稀释)，4℃过夜孵育后，去除抗体，并用PBS清洗3次(5min/次)。
⑤孵育荧光抗兔二抗(1:1000，PBS稀释)1h，孵育完成后，去除二抗，用PBS清洗3次(5min/次)。
⑥最后利用含有DAPI荧光染液的封片剂进行封片，待玻片完全晾干后，利用正倒置一体电动荧光显微镜(RVL2-K，美国)拍摄荧光图像。该型号荧光显微镜具有测定荧光染色面积功能，利用该功能可以显示心肌细胞面积。
采用6次不同时间定向分化获得的心肌细胞，每次重复2个复孔，随机拍摄一张cTNT染色的细胞形态图，并分析照片中所有心肌细胞的面积，结果如图1所示。从图1可以看出，利用10μM的NE处理心肌细胞显著增大细胞面积(NE vs PBS：4432.1±175.9vs 3306.13±119.9)，而Elabela预处理心肌细胞2h后再给予NE刺激，有效降低NE导致的细胞面积增大(Elabela+NE vs NE：2849.4±89vs 4432.1±175.9)。数据以均值±标准误(mean±SEM)表示，PBS组统计了170个心肌细胞，NE组统计了138个心肌细胞，Elabela+NE组统计了181个心肌细胞。****，p<0.0001。因此，Elabela体外直接处理人源心肌细胞，能够抑制NE诱导的心肌细胞面积增大效应。
实施例2：Elabela蛋白体外直接处理心肌细胞对细胞中心肌肥厚标志物表达的影响
按照实施例1中方法定向分化获得人源心肌细胞，将细胞均匀地种到12孔板中，细胞贴壁生长24h后分别给予PBS、NE(10μM)、Elabela(200nM)+NE(10μM)处理细胞，得到PBS处理组、NE处理组和Elabela+NE处理组。待各组处理24h后，提取细胞内总RNA，利用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)，检测心肌细胞中心肌肥厚标志物mRNA的表达情况。具体步骤如下所示：
①处理后的细胞用4℃预冷的PBS清洗2次。吸干PBS后，每孔中加入1mL的总RNA抽提试剂Trizol，待细胞裂解后室温静置5min，使核酸-蛋白复合物完全分离。静置结束后全部转移至无菌的EP管，4℃高速离心(12,000rpm)5min，取上清液。
②向①步骤得到的上清液中加入200μL氯仿，震荡后4℃高速离心15min，吸取无色水相层(RNA在此层)，转移至新的离心管中。
③向②步骤得到的液体中加入等量异丙醇，震荡混匀，低温离心15min，管底可见明显的RNA沉淀。倒掉液体，沿管壁缓慢加入1mL 75％酒精清洗RNA沉淀，离心15min后弃去液体，将试管倒扣去除多余酒精。
④向RNA沉淀中加入50μL无菌DEPC水，在55℃金属浴中溶解RNA，然后测定RNA浓度，样本直接进行逆转录。
⑤逆转录：配制10μL体系，包括：2μL逆转录酶(5×Prime Script RT MacterMix)、RNA 1ug、RNase free ddH2O补齐至10μL。逆转得到的cDNA样本，用ddH2O稀释10倍，直接用于实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)。
⑥qRT-PCR：配制10μL反应体系：0.2μL PCRForward Primer(正向引物)、0.2μLPCR Reverse Primer(反向引物)、1μL cDNA、5μL SyBR Premix EX Taq(2×)、3.6μLddH2O。
实验采用了6批不同批次分化的心肌细胞，重复了6次体外处理。qRT-PCR检测时，每个样品设置3个复孔。数据以均值±标准误(mean±SEM)表示。β-ACTIN基因用以检测内参基因的表达，心肌肥厚标志物主要包括ANP、BNP、TNNT2。其中，β-ACTIN、ANP、BNP和TNNT2的引物序列见表1。以相对定量分析法对结果进行分析，检测结果如图2所示。
表1.人源心肌细胞肥厚标记物的引物序列
从图2中可以看出，NE处理导致心肌肥厚标志物的表达显著升高，Elabela蛋白体外直接处理后，有效降低心肌肥厚标志物的表达，表明Elabela蛋白具有对抗心肌肥厚的生理作用。
实施例3：小鼠过表达Elabela后血液和心肌组织中Elabela表达情况考察
选取8周龄野生型小鼠(WT)及Myh6基因R404Q点突变导致的肥厚型心肌病小鼠(Myh6R404Q)，并将WT和Myh6R404Q小鼠随机分为三组。然后分别对三组小鼠进行尾静脉注射生理盐水(Saline)、正常对照病毒(NC)、Elabela过表达病毒(ELA-OE)，得到生理盐水(Saline)组、阴性对照病毒(NC)组和Elabela过表达病毒(ELA-OE)组。
其中，生理盐水(Saline)组：每只鼠尾静脉注射50μL生理盐水；
阴性对照病毒(NC)组：每只鼠尾静脉注射50μL阴性对照病毒(NC)，其中对照病毒载量为5×1011vg；
Elabela过表达病毒(ELA-OE)组：每只鼠尾静脉注射50μL Elabela过表达病毒(ELA-OE)，其中Elabela过表达病毒载量为5×1011vg。
处理结束后，小鼠在SPF级动物房中继续饲养5周。
饲养5周后的小鼠通过眼球取血，然后通过脱颈方式处死小鼠，快速取下各组小鼠心脏，称量心脏重量，并提取心脏左心室的组织RNA备用。
将收集于血清分离管的小鼠全血标本在室温放置2h，然后1000×g离心20min，取上清，然后用小鼠Elabela酶联免疫吸附测定试剂盒(江莱生物，JL34941)检测血清中Elabela水平，具体步骤如下：
①稀释10倍的小鼠血清样本和不同浓度标准品按照50μL每孔加入相应孔中，空白孔加入50μL通用稀释液，紧接着每孔加入50μL HRP-抗原工作液。盖上封板膜后37℃温育1h。
②洗板：弃去液体，每孔加入300μL 1×洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，重复洗板5次。
③加底物：每孔加入底物(TMB)90μL，盖上封板膜，37℃避光温育15min。
④加终止液：每孔加入终止液50μL，立即在450nm波长处测定各孔的吸光值(OD)。
⑤计算标准品和样本复孔的平均OD值。以浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在双对数坐标上绘出四参数逻辑函数的标准曲线，最后将样本孔的OD值代入标准曲线，计算得到血清中Elabela的水平，检测结果如图3a所示。
从图3a可以看出，与WT血清相比较，Elabela蛋白在Myh6R404Q小鼠血清中的水平显著降低，过表达Elabela后显著升高小鼠血清中Elabela的水平。
本实施例还采用qRT-PCR检测小鼠过表达Elabela后心肌组织中Elabela表达情况，具体步骤如下所示：
①取50mg小鼠左心室组织样本至无菌的EP管，每管中加入1mL的Trizol后利用组织破碎震荡仪破碎组织，4℃高速离心5min，取上清得到小鼠心肌组织样本，即小鼠心肌组织上清液。
②向①步骤得到的上清液中加入200μL氯仿，震荡后4℃高速离心15min，吸取无色水相层(RNA在此层)，转移至新的离心管中。
③向②步骤得到的液体中加入等量异丙醇，震荡混匀，低温离心15min，管底可见明显的RNA沉淀。倒掉液体，沿管壁缓慢加入1mL 75％酒精清洗RNA沉淀，离心15min后弃去液体，将试管倒扣去除多余酒精。
④向RNA沉淀中加入50μL无菌DEPC水，在55℃金属浴中溶解RNA，然后测定RNA浓度，样本直接进行逆转录。
⑤逆转录：配制10μL体系，包括：2μL逆转录酶(5×Prime Script RT MacterMix)、RNA 1ug、RNase free ddH2O补齐至10μL。逆转得到的cDNA样本，用ddH2O稀释10倍，直接用于qRT-PCR。
⑥qRT-PCR：配制10μL反应体系：0.2μL PCRForward Primer(正向引物)、0.2μLPCR Reverse Primer(反向引物)、1μL cDNA、5μL SyBR Premix EX Taq(2×)、3.6μLddH2O。每个样品设置3个复孔，18S基因用以检测内参基因的表达，Elabela和18S的引物序列见表2。以2-△△Ct相对定量分析法对结果进行分析。小鼠心肌组织中Elabela的mRNA表达情况如图3b所示。
表2.小鼠心肌组织Elabela和18S基因的引物序列
从图3b可以看出，与WT小鼠心肌组织相比，Elabela mRNA在Myh6R404Q小鼠心肌组织中的表达显著降低，过表达Elabela后显著升高Elabela mRNA在小鼠心肌组织中的表达。
实施例4：体内过表达Elabela对小鼠心脏和左心室重量的影响
肥厚型心肌病的疾病进展过程中，由于心脏出现病理性肥厚，心室壁厚度增加，导致心脏重量和左心室重量均会异常增重。本实施例通过检测WT和Myh6R404Q小鼠体内过表达Elabela后心脏和左心室重量来考察体内Elabela升高对心肌肥厚进展的影响。采用实施例3中记载的方法在小鼠体内过表达Elabela，过表达Elabela后小鼠继续饲养5周，然后脱颈处死，尽快取出心脏，吸干表面水分，称量心脏重量。检测结果见图4a。另外，利用小鼠超声心动图观察，以检测小鼠左心室重量。心脏超声心动图检测的步骤如下：
①对小鼠腹部及胸腔进行备毛处理，然后用1.5-2％流量的异氟烷气体麻醉小鼠，控制小鼠心率稳定在430-480次/min内，进行检测。
②使用Vevo3100高分辨率体内成像系统(Vevo3100LT，加拿大)进行超声检测。快速找到心脏位置，分别记录小鼠心脏长轴与短轴在B-Model和M-Model下的图像及相关参数。
③通过Vevo3100系统计算左心室重量，检测结果如图4b。
从图4a和4b可以看出，与WT小鼠心脏相比，Myh6R404Q小鼠心脏和左心室重量均异常增加，而过表达Elabela后显著降低Myh6R404Q小鼠心脏和左心室重量。
实施例5：体内过表达Elabela对肥厚型心肌病小鼠左心室室壁厚度的影响
采用实施例3中记载的方法在小鼠体内过表达Elabela，5周后对小鼠进行心脏超声心动图，以检测Elabela过表达是否改善肥厚型心肌病小鼠心脏的病理性肥厚表型。心脏超声心动图检测的步骤参考实施例4，最后通过Vevo3100系统计算收缩期左心室前壁厚度(a)、舒张期左心室前壁厚度(b)、收缩期左心室后壁厚度(c)、舒张期左心室后壁厚度(d)。检测结果如图5所示。
从图5中可以看出，Myh6R404Q小鼠心脏舒张期和收缩期的左心室室壁厚度均显著高于WT小鼠，而Elabela过表达后显著降低Myh6R404Q小鼠的左心室室壁厚度。这说明Elabela水平升高具有对抗遗传性肥厚型心肌病病理性心肌肥厚进展的有益效应。
实施例6：体内过表达Elabela后对心肌肥厚标志物的影响
本实施例通过检测体内过表达Elabela的WT和Myh6R404Q小鼠左心室组织中心肌肥厚标志物的表达情况来考察体内Elabela升高对心肌肥厚进展的影响。采用实施例3中记载的方法在小鼠体内过表达Elabela，然后采用实施例3中记载的方法和步骤对小鼠左心室RNA进行提取，并采用qRT-PCR对心肌组织中Elabela mRNA的进行检测。小鼠心肌组织的肥厚标记物主要包括Anp、Bnp和Tnnt2，18S基因用以检测内参基因的表达情况，分析结果如图6所示。。其中，所检测的基因引物序列如表3所示。
表3.小鼠心肌组织的肥厚标记物引物序列
从图6中可以看出，Myh6R404Q小鼠心肌组织中的Anp、Bnp和Tnnt2等肥厚标记物的表达显著高于WT小鼠。而Elabela过表达后显著抑制Anp、Bnp和Tnnt2在Myh6R404Q小鼠心脏中的表达，这说明Elabela具有治疗遗传性肥厚型心肌病的巨大潜力。
实施例7：心肌组织Masson染色考察
小鼠脱颈处死后，快速用4％多聚甲醛溶液进行全身灌流，冲去心肌组织中残留的血液。取下小鼠心脏置入4％多聚甲醛中，固定过夜。对固定好的心脏进行组织脱水、透明和石蜡包埋。包埋完成后进行石蜡切片(5μm)。然后使用Masson三色染色试剂盒(赛维尔生物，G1006)对切片进行Masson染色，步骤如下：
①切片进入A液中室温浸泡过夜(约15h)。
②将B液与C液等体积混合(现配现用)，切片入A和B混合液内浸染1min，流水稍洗后经1％盐酸酒精(浓盐酸：无水乙醇＝1：100)分化1min，至细胞核呈灰黑色，背景几乎无色或淡灰色。
③流水稍洗，沥干切片上多余水分，切片入D液浸染6min，此时组织呈现亮红色。切片稍微沥干水分(不能干片)，立即入E液浸泡约1min。此步为分化作用，分化到胶原纤维呈浅红色，纤维呈红色即可，约1-2min。
④切片稍微沥干E液后，不经水洗，直接入F液染色2-30s。
⑤切片经连续三缸1％冰醋酸漂洗分化，毎缸8s左右。然后经连续三缸无水乙醇依次脱水约5s、10s、30s。然后经两缸正丁醇依次脱水30s和2min。
⑥最后经两缸二甲苯透明，每次5min，中性树胶封片，完全晾干后在光学显微镜下拍照，考察结果如图7所示。
从图7中可以看出，肥厚型心肌病小鼠相比于正常小鼠出现明显的心肌纤维化增高现象，且心肌细胞的面积也显著增大，而Elabela过表达后显著抑制Myh6R404Q小鼠心肌纤维化的进展，并有效减小心肌细胞的面积。这说明Elabela可能具有治疗肥厚型心肌病早期进展的巨大潜力。
综上所述，本发明在体外实验中发现，Elabela有效阻止人源心肌细胞肥大的发生发展；在体内研究中发现，升高体内Elabela水平有效抑制遗传性病理性心肌肥厚的进展，并有效抑制心肌纤维化的发生。体内体外实验均表明，Elabela能显著改善遗传性肥厚型心肌病小鼠的疾病进展，是治疗肥厚型心肌病的有效靶点，可以作为新的抗肥厚型心肌病药物或者药靶进行开发，为检测和治疗肥厚型心肌病提供了一种新的途径和手段。
所述实施例为本发明的优选的实施方式，但本发明并不限于上述实施方式，在不背离本发明的实质内容的情况下，本领域技术人员能够做出的任何显而易见的改进、替换或变型均属于本发明的保护范围。

Claims (6)

1.Elabela在制备抗遗传性肥厚型心肌病以及遗传性肥厚型心肌病引起的病症或减轻其症状的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述症状包括病理性心肌肥厚、心脏重量或左心室重量增加。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述症状包括心肌组织中肥厚标志物的表达显著升高。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述症状包括因遗传性肥厚型心肌病导致的心肌细胞面积增大和/或心肌纤维化水平升高。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述病症包括人源心肌细胞面积增大，心肌肥厚标志物水平升高。
6.一种抗遗传性肥厚型心肌病以及遗传性肥厚型心肌病引起的病症或减轻其症状的药物，其特征在于，所述药物的活性成分包括Elabela。
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