CN117298140A - 牛蒡根多糖在制备治疗干眼症药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了牛蒡根多糖在制备治疗干眼症药物中的应用，属于中医药技术领域。本发明以牛蒡根多糖为唯一活性成分，用于治疗干眼症。通过结果表明，牛蒡根多糖可以促进泪液分泌，缓解干眼症症状。牛蒡根多糖还能缓解由干眼症导致的角膜表面缺损，保护角膜上皮和结膜杯状细胞，治疗干眼症。
Description
技术领域
本发明涉及牛蒡根多糖在制备治疗干眼症药物中的应用，属于中医药技术领域。
背景技术
干眼症又称角结膜干燥症，因泪液产生减少或泪膜蒸发增加而引起眼部不适和视力障碍等，是眼科中的常见多发病。目前治疗干眼症的药物主要为人工泪液、糖皮质激素与免疫抑制剂，人工泪液在眼部的停留时间相对较短，糖皮质激素与免疫抑制剂的长期用药容易引起继发性不良反应。
牛蒡(Arctium lappa L.)系菊科两年生草本植物，是一种常见的药食同源植物。牛蒡根多糖由其根部提取制备而成，已有研究表明牛蒡根多糖具有抗肿瘤、抗过敏、降血糖等多种药理活性。但迄今为止尚未见牛蒡根多糖在治疗干眼症方面的相关报道。
发明内容
为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了牛蒡根多糖在制备治疗干眼症药物中的应用。本发明是牛蒡根多糖用于治疗干眼症的创新研究，证明其具有增加泪液分泌量、保护角膜上皮结膜杯状细胞的作用。
为了达到上述目的，本发明的技术方案包括：
第一方面，本发明提供牛蒡根多糖在制备治疗干眼症药物中的应用。
进一步地，上述技术方案中，所述牛蒡根多糖为唯一活性成分。
进一步地，上述技术方案中，牛蒡根多糖的浓度为5-10mg/mL。
进一步地，上述技术方案中，所述干眼症药物的剂型包括但不局限滴眼液、凝胶或眼贴。
进一步地，上述技术方案中，还包括药学上可接受的辅料。
进一步地，上述技术方案中，用于促进泪液分泌、保护角膜上皮和结膜杯状细胞。
第二方面，本发明提供一种眼贴，包括牛蒡根多糖。
进一步地，上述技术方案中，本眼贴主要用干眼症的治疗。
进一步地，上述技术方案中，所述牛蒡根多糖为唯一活性成分。
有益效果：
本发明在牛蒡根中提取多糖物质，用于治疗干眼症，可以促进干眼症患者泪液分泌量增加。牛蒡根多糖还能缓解由于干眼症导致的角膜表面缺损，保护角膜上皮和结膜杯状细胞，从而缓解和治疗干眼症。
附图说明
图1为泪液分泌量检查(Schirmer试验)(n＝14)。图中，与Model组比较，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；与Control组比较，###P<0.001。
图2为角膜荧光素钠染色。
图3为荧光素钠染色评分(n＝14)。图中，与Model组比较，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；与Control组比较，###P<0.001。
图4为角膜上皮HE染色(×40)。
图5为结膜杯状细胞PAS染色(×10)。
具体实施方式
为验证牛蒡根多糖在干眼症的作用，以下具体实施例以滴眼液为例，通过具体实施例并结合附图对本发明作进一步说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不应用于限定本发明的范围。
实施例中未注明具体技术或条件者，均为按照本领域内通用技术、常规方法或按产品说明书操作进行。所用仪器、试剂、材料等未注明生产厂家者，均为正规渠道，符合法定标准的市售产品。
实施例1：牛蒡根多糖滴眼液的制备
(1)牛蒡根去皮洗净切片，置于烘箱中60℃烘干，粉碎。
(2)以1:15料液比加水，80℃煮3h，用纱布和滤纸依次过滤，收集滤液，滤渣继续加水蒸煮，重复此步骤3-4次。
(3)收集滤液用普通滤纸进行抽滤，初步除掉不溶性杂质。
(4)将滤液旋蒸浓缩至适宜的体积，加入3倍体积的无水乙醇，边搅拌边加入，静置过夜，溶液分层。
(5)收集下层沉淀，旋蒸干燥，再加适量水充分溶解牛蒡根多糖。
(6)重复4-5步3-4次，收集牛蒡根多糖水溶液，冷冻干燥，得到牛蒡根多糖干燥品。
(7)精确称取牛蒡根多糖溶于0.5wt％甲基纤维素溶液中，制备成5mg/mL和10mg/mL浓度牛蒡根多糖滴眼液，灭菌处理后备用。
实施例2：牛蒡根多糖对干眼症大鼠的作用研究
(1)实验动物及试剂
健康雄性SD大鼠，体重180-220g，清洁级，由辽宁长生生物技术公司提供(合格证号：SCXK(辽)2020-0001)；苯扎氯铵：美国Med Chemexpress生物科技公司；甲基纤维素：上海麦克林生化科技有限公司；0.1wt％氟米龙滴眼液：参天制药(中国)有限公司。酚红棉线：天津晶明新技术开发有限公司；0.4wt％盐酸奥布卡因滴眼液：参天制药(中国)有限公司；游标卡尺。裂隙灯；荧光素钠染色试纸：天津晶明新技术开发有限公司。
(2)动物分组及给药
SD大鼠随机分为以下五组：正常组，模型组，牛蒡根多糖5mg/mL组，牛蒡根多糖10mg/mL组，阳性给药组。每组大鼠7只，除正常组以生理盐水滴眼外，其余4组以0.2wt％的苯扎氯铵滴眼，每眼5μL/次，2次/天，连续14天。第14天测SD大鼠的泪液分泌量和荧光素钠染色评分，筛选造模成功大鼠进入后续实验。
造模结束后，正常组和模型组以0.5wt％甲基纤维素滴眼；牛蒡根多糖组按5mg/mL、10mg/mL牛蒡根多糖滴眼液分别滴眼；阳性给药组以0.1wt％氟米龙滴眼液滴眼。各组大鼠按每眼10μL/次，3次/天，连续10天给药。给药结束后检测各组SD大鼠的泪液分泌量和荧光素钠染色评分，评价治疗效果。
(3)实验检查指标
1)泪液分泌量检查(Schirmer试验)
将酚红棉线放置于大鼠下睑结膜囊中外1/3处，测量15s后酚红棉线变红长度，每眼重复测试3次取平均值，进行记录。
2)荧光素钠染色评分
将荧光素钠均匀涂布于大鼠角膜和结膜表面2min后，在裂隙灯钴蓝光下观察评分。角膜荧光素钠染色(CFS)评分采用12分法，以瞳孔为中心，作“十”字线，将角膜分为四个象限，每个象限为0～3分。评分标准：无染色为0分；1～30个点状着色(轻度)为1分；多于30个点状着色但染色未融合(中度)为2分；角膜点状着色融合、丝状物及溃疡等(重度)为3分。
3)组织病理学检查
分离大鼠眼球及附属组织，置于4wt％多聚甲醛溶液后，石蜡包埋固定，行常规组织HE染色和PAS染色。
(4)实验结果
泪液分泌量检查结果如图1所示，与模型组比较，牛蒡根多糖5mg/mL组和10mg/mL组的泪液分泌量均显著增加，且高剂量组效果明显好于低剂量组。
荧光素钠染色评分结果如图2和3所示，与模型组比较，牛蒡根多糖5mg/mL组和10mg/mL组的荧光素钠染色评分均明显降低，且高剂量组效果明显好于低剂量组。
HE染色结果如图4所示，与正常组相比，模型组角膜上皮细胞形态不规则，浅层上皮脱落。与模型组比较，牛蒡根多糖5mg/mL组和10mg/mL组角膜上皮细胞形态规则，上皮脱落情况明显改善。
PAS染色结果如图5所示：与正常组相比，模型组结膜杯状细胞被破坏，数目减少。与模型组比较，牛蒡根多糖5mg/mL组和10mg/mL组结膜杯状细胞未见明显减少。
实施例3：含有牛蒡根多糖眼贴的制备
将牛蒡根多糖干燥品溶于2wt％甲基纤维素中，溶液中加入少量冰片溶解，之后将无菌无纺布浸于牛蒡根多糖溶液中，浸泡6-8小时后晾至以溶液不会滴下为宜，应用钴射线常规照射消毒灭菌。
使用时即可将眼贴孵于眼表，牛蒡根多糖可通过眼表皮肤或缝隙进入眼内，起到治疗作用。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；本实验仅以滴眼液为例进行具体说明，在其他剂型中牛蒡根多糖同样可起到治疗干眼症作用。尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (6)
1.牛蒡根多糖在制备治疗干眼症药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述牛蒡根多糖为唯一活性成分。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，牛蒡根多糖的浓度为5-10mg/mL。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述干眼症药物的剂型包括但不局限于滴眼液、凝胶或眼贴。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，还包括药学上可接受的辅料。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，用于促进泪液分泌、保护角膜上皮和结膜杯状细胞。
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