CN117295484A - 巴西坚果提取物及其用途 - Google Patents

巴西坚果提取物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN117295484A
CN117295484A CN202280013510.5A CN202280013510A CN117295484A CN 117295484 A CN117295484 A CN 117295484A CN 202280013510 A CN202280013510 A CN 202280013510A CN 117295484 A CN117295484 A CN 117295484A
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
skin
brazil nut
alcohol
weight
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280013510.5A
Other languages
English (en)
Inventor
玛蒂尔德·弗雷谢
哈纳内·查赫拉
桑德里娜·德劳诺伊斯
伯努瓦·米尼亚尔
丹尼尔·诺塞·沙巴拉
玛丽亚·塞莉娅·希巴里·雷姆伯格
斯蒂芬妮·费雷拉·桑切斯·洛佩斯
布鲁纳·艾琳·达席尔瓦·梅里吉奥利
罗伯森·何塞·达席尔瓦·克鲁兹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bellaka Natural Ingredients Co ltd
Clariant International Ltd
Original Assignee
Bellaka Natural Ingredients Co ltd
Clariant International Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bellaka Natural Ingredients Co ltd, Clariant International Ltd filed Critical Bellaka Natural Ingredients Co ltd
Publication of CN117295484A publication Critical patent/CN117295484A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/34—Alcohols
    • A61K8/347—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/007—Preparations for dry skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/10—Washing or bathing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/318—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on skin health and hair or coat
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/20—Natural extracts
    • A23V2250/21—Plant extracts
    • A23V2250/2132—Other phenolic compounds, polyphenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/15—Preparation or pretreatment of starting material involving mechanical treatment, e.g. chopping up, cutting or grinding
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/10—General cosmetic use
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/92—Oral administration

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明涉及一种通过提取巴西坚果(Bertholletia excelsa)籽的至少部分脱油的压榨残渣获得的巴西坚果籽提取物，以及制备这种提取物的方法。此外，本发明涉及包含这种提取物作为活性成分的美容或药物组合物，以及该提取物或组合物用于皮肤护理的用途。

Description

巴西坚果提取物及其用途
技术领域
本发明涉及通过提取巴西坚果(Bertholletia excelsa)籽的至少部分脱油的压榨残渣而获得的巴西坚果籽的提取物，以及制备这种提取物的方法。此外，本发明涉及包含这种提取物作为活性成分的美容或药物组合物，以及该提取物或该组合物用于皮肤护理和头发护理的用途。
背景技术
在有机体和环境之间的界面处，由三个不同的层(角质层(以下称为“SC”)、表皮和真皮)组成的皮肤提供了机械保护，代表抵抗来自外部侵害和抵抗不受控制的体液流失的第一道屏障。外部侵害是例如紫外线和红外线照射、颗粒物质污染、病原体、过敏原、温度和湿度波动、化学产品、由于日常习惯(如刮胡子、(有害病毒的流行使得我们环境的卫生恶化导致的)戴手套和口罩)导致的机械约束。此外，皮肤还保护有机体免受内部侵害，例如自然老化、遗传因素、激素波动和免疫失调。然而，因为当这些侵害变得过度时，皮肤也持续暴露于环境中，所以这些侵害能够使皮肤恶化，并积极地促进受损皮肤的发展(Kezic和Nielsen,Int.Arch.Occup.Environ.Health,2009,82:677-688)。此外，许多皮肤病学病状可被分类为受损皮肤病症，例如湿疹、接触性皮炎、特应性皮炎、银屑病和鱼鳞病(Kezic和Nielsen,Int.Arch.Occup.Environ.Health,2009,82:677-688)。在这种情况下，皮肤保护功能(也称为皮肤屏障功能)会受损。因此，如前所述，受损皮肤是一种常见的痛苦，可能通过由上述外部和内部侵害驱动的多因素过程而发生。除了以经皮失水(TEWL)的增加为特征的典型的屏障功能不良外，已经证明受损皮肤的特征是可见的迹象，例如干燥、发红、异常色素沉着和皮脂失调、瘙痒和炎症。此外，这些受损的皮肤可能会暴露于来自环境的有害成分的增强渗透以及水分流失的增加，从而导致有害和恶性循环的维持(Davies等人,Toxicology in Vitro,2015,29:176-18199)。
SC由死亡的角质细胞组成，被充满脂质的细胞间隙包围，在皮肤屏障功能中发挥着至关重要的作用。事实上，SC起到了屏障的作用，阻止大多数物质渗透到皮肤更深的活力层，并且还可以防止皮肤水分流失。人们一致认为，SC的脂质可能是这些皮肤屏障功能和皮肤水合特性的原因。已知皮肤表面脂质包括甘油酯、游离脂肪酸、蜡酯、神经酰胺、胆固醇、角鲨烯和磷脂。负责皮肤屏障功能的主要脂质可能是胆固醇、脂肪酸、鞘脂和神经酰胺。已知这种脂质屏障会随着衰老和某些皮肤病状(例如干燥症或特应性皮炎)而改变。皮肤屏障功能不良通常与这些皮肤病理状况和衰老有关。不幸的是，这种皮肤脂质屏障也可能因上述侵害而改变。因此，该屏障可能无法最佳地发挥其保护功能，最终可能导致皮肤受损。然而，在未受损的干性皮肤或正常皮肤或者非病理性皮肤中，皮肤脂质主要可以通过外部侵害而改变。
除了SC之外，皮肤屏障功能也归因于整个表皮，即具有增殖细胞基底层和分化角质细胞的多个基底上层的复层上皮。在表皮中，在任何上皮组织层中也发现的两种主要成分可能专门用于防止物质的进入和离开：上皮细胞本身和紧密连接(以下称为“TJ”)。
已知在所有上皮组织中存在的TJ在细胞之间形成带状粘附，仅允许小分子和离子通过。在人体内，TJ可能由跨膜蛋白(即密封蛋白(claudin)、闭合蛋白(occludin)、三细胞紧密连接蛋白(tricellulin)、连接粘附分子(JAM)和细胞质斑(ZO蛋白))组成。如上所述，上皮细胞本身是组织屏障功能的参与者。就皮肤而言，称为角质细胞的上皮细胞凭借其细胞骨架确保维持适应的皮肤屏障功能。角质细胞组装大量的细胞骨架微丝，这些微丝可能部分固定在细胞间连接处，例如桥粒、TJ和粘附连接。这些元素被描述为有助于上皮的机械稳定性和最佳弹性。此外，由于表皮不断更新，角质细胞在向表面发展的过程中，可能会经历完整的分化过程。在这一分化过程中，角质细胞在细胞形状、高度和包装几何形状方面发生了深刻的变化，从而影响了它们的机械物理特性、坚固性和抗性。已经证明分化过程完全由细胞骨架支持。此外，通过分化过程获得的分化角质细胞分泌具有独特脂质和蛋白质组成的板层体内容物。因此，分化过程可能通过持续提供脂质和蛋白质成分中的SC来维持皮肤屏障保护。除了其结构功能外，细胞骨架还被证明支持细胞的增殖和迁移及其粘附，从而调节表皮的内聚及其渗透性。
如上所述，受损的屏障可以允许物质进入皮肤。这可能会导致并促进皮肤的炎症过程。事实上，这些炎症过程可能是常驻皮肤细胞应答和免疫细胞募集的结果，该应答和募集产生促炎分子，如白介素、肿瘤坏死因子-α、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(CSF-1)。此外，皮肤中细胞因子和趋化因子的失调表达可能导致表皮屏障功能的功能障碍，如在老化皮肤和许多皮肤疾病(包括与严重失水和干燥相关的特应性皮炎和银屑病)中观察到的，(Liu等人,Frontiers in Immunology,2020,11:Article No.594735)。此外，炎症过程也可能通过炎症小体活化而发生，炎症小体活化将促炎细胞因子pro-IL-1β和pro-IL-18裂解为其活化形式，这些形式可能在这些屏障功能较差的炎症性皮肤疾病中上调，所述炎症性皮肤疾病包括银屑病、白癜风、系统性红斑狼疮(SLE)和特应性皮炎(AD)。据描述，相同的促炎细胞因子在老化皮肤中被上调。
蛋白质AIM2(通常在黑色素瘤2中不存在)参与负责炎症性皮肤疾病的发展和维持的炎症小体活化。此外，白介素(IL)-18是一种多效性免疫调节剂，能够在炎症和自身免疫性皮肤病的发生和/或进展中发挥作用。例如，IL-18在各种皮肤病中介导信号网络。事实上，IL-18通过诱导干扰素(IFN)-γ发挥强大的促炎作用。但是在皮肤疾病如银屑病中，IL-18诱导Th1和Th17响应(伴随趋化因子CXCL13(C-X-C基序趋化因子配体13)的上调)，并且在特应性皮炎中，IL-18根据细胞因子环境促进Th-1或Th-2反应，从而促进细胞因子如IL-4、IL-13的释放。
据描述，IL18RAP(白介素18受体辅助蛋白)可参与IL18依赖性信号转导，导致NF-κB和JNK活化。白介素26(IL-26)是局部免疫和炎症的介质，其通过增强中性粒细胞的流入和刺激成熟巨噬细胞、单核细胞、成纤维细胞和上皮细胞释放促炎细胞因子和趋化因子来驱动炎症。IL-26是炎症的驱动器和效应器，是造成持续炎症的原因。此外，已证明IL-26可能参与慢性炎症性疾病，如炎症性肠病、类风湿性关节炎或银屑病。
简言之，显而易见的是，皮肤屏障功能的增强或保持、水合作用的改善、老化的预防和/或缓解以及在皮肤内，特别是已经建立的受损皮肤表型内的病症和损伤(例如炎症)的预防和/或减轻可以通过在上述皮肤屏障功能参与者的不同水平上起作用来达到，即从SC的脂质成分到表皮成分及其更新过程。
巴西坚果是一种属于玉蕊科(Lecythidaceae)的植物，其树高可达50米，平均直径为2米。它能够生长在干燥的土地和雨林中。它存在于旱地森林中，可作为环境退化地区重新造林的优良树种。该俗称“巴西坚果”的果实，基本上是球状蒴果，表面较厚，颜色为黑褐色。每个水果平均含有10至25颗籽，这些籽因其内核(也称为坚果)而富含油脂。这种油是众所周知的巴西油籽之一，其生产也引起了巴西北部和亚马逊地区野生收获区的社会经济组织的兴趣。通常，巴西坚果要么作为食物成分食用，其外壳被丢弃，要么通过众所周知的压榨过程从其籽中提取其油成分。巴西坚果籽的内核中的主要化合物是以总重量计的油(约60-70重量％)，特别是不饱和脂肪酸(油酸、亚油酸和亚麻酸)、蛋白质(约12％至20％)和碳水化合物(大约6％至10％)。次要成分是氨基酸、多酚和矿物质。内核的另一个臭名昭著的特征是蛋白质中的硒含量。
巴西坚果植物的树皮提取物和巴西坚果籽的油基提取物在美容领域是已知的。DE-A102016009036教导了一种包含巴西坚果籽油和来自巴西坚果的水解蛋白质的混合物的制剂，该制剂可能对干性皮肤和头皮屑具有活性。KR-B101987421教导了包含包括巴西坚果籽油的植物提取物的混合物的美容组合物。US-A2014/090660教导了一种含有来自巴西坚果的还原糖、蛋白质和/或氨基酸的组合物，该组合物可用于头发护理。WO 2009/082796教导了包含刺棕(Bactris)属和巴西果(Bertholletia)属植物油的美容水包油乳液。US 6,471,972和US 7,887,858提出多种植物提取物，并且总体教导了多种植物提取物能够刺激胶原蛋白合成。EP-B 0809484、DE 69611082T2和FR-B 2752527提出包含来自巴西坚果树皮或坚果果皮的提取物的组合物，该提取物可以刺激胶原蛋白合成。还已知的是，巴西坚果籽的水提取物富含硒蛋白，能够通过调节不同的氧化代谢途径来最小化过氧化氢水平的负面影响。已知含有多酚(没食子酸、原儿茶酸、2,4-二羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸和芥子酸)的巴西坚果压榨饼的乙醇和水乙醇提取物在1.52至1.93mg/GAE g-1的饼的范围内(Suellen G等人,Research Article,P2805-2814,2015,DOI:10.1002/jsfa.7448)。
本领域已知的上述巴西坚果植物的树皮提取物和巴西坚果籽的油基提取物存在多个技术缺陷。通常，所获得的美容或药物的有益效果主要是由于籽的油含量或坚果的富含皂苷的树皮和果皮。当使用巴西坚果树的树皮提取物时，树会受伤。树皮已经被去除，树木受到害虫影响例如真菌病的风险增加。此外，树皮是非常有限的资源。另一方面，籽油是营养和特定美容或药物用途的宝贵来源。因此，可能存在有限资源的竞争。
因此，对可很好地用于美容或药物用途的巴西坚果的进一步提取物的需求仍未被满足。希望的是该提取物基于可持续资源。因此，希望该提取物既不与营养和特定的美容或药物用途竞争，并且因此不主要基于籽油，也不损害巴西坚果树。此外，希望提取物不基于籽油，并且脂肪较少。
令人惊讶的是，已经发现用至少一种醇或水醇溶剂提取巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣可以产生具有特别优良特性的提取物。
发明内容
本发明涉及通过用至少一种醇或水醇溶剂提取巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣可获得(或获得)的巴西坚果籽提取物。
本发明的第一个方面涉及通过用至少一种醇或水醇溶剂提取巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣可获得(或获得)的巴西坚果籽提取物，该巴西坚果籽压榨残渣的油含量低于压榨前巴西坚果籽中的油含量，其中该提取物包含相对于提取物干含量的总重量为至少1.5重量％的一种或多种多酚，其中残余的油含量相对于压榨前的巴西坚果籽为大于15重量％且小于50重量％。
因此，本发明还涉及一种巴西坚果籽至少部分脱油的压榨残渣的水醇提取物，其包含相对于提取物干含量的总重量的至少1.5重量％的一种或多种多酚。本发明的醇提取物和水醇提取物都具有特殊的植物化学特征。在机械压榨过程中，一定量的非极性多酚可能与油一起被提取。
本发明的提取物基于特别可持续的资源。用作本发明来源的至少部分脱油的压榨残渣被认为是副产物。通常，这种至少部分脱油的压榨残渣(也称为“籽饼”)在工厂中使用，例如燃烧，或送回采收的巴西社区用作农业肥料或动物饲养。因此，使用这种来源是特别可持续的，并且是一种循环经济的积极方法，可以使以前的副产品增值作为美容和/或药物领域中新用途的有价值的成分。本发明的提取物的制备既不与营养和特定的美容或药物用途竞争，也不会对巴西坚果树造成任何伤害。
此外，已经令人惊讶地发现，该提取物不是基于籽油的，并且脂肪较少。还令人惊讶地发现，包含至少一种本发明的提取物(或甚至由至少一种本发明的提取物组成)的组合物可用作美容和/或药物用途的活性成分，特别是皮肤美容用品。该组合物可以改善皮肤状况。令人惊讶地发现，本发明的巴西坚果籽提取物能够在皮肤中发挥有益效果。本申请的实验部分证明了本发明的提取物可以促进皮肤的屏障功能和/或皮肤水合作用和/或可以用作皮肤抗老化剂和/或皮肤抗炎剂和/或皮肤抗污染剂。该提取物可以上调参与完成一种或多种这些功能的主要基因和关键蛋白质的表达。
令人惊讶的是，已经发现，巴西坚果籽的提取物可以用作活性成分，其任选地用于美容用途。因此，本发明还涉及组合物，该组合物包含用作活性成分的至少一种巴西坚果籽的提取物或由用作活性成分的至少一种巴西坚果籽的提取物组成。本发明进一步涉及本发明提取物作为活性成分的(任选地美容)用途。本发明还涉及用于治疗或预防受试者的皮肤病症和/或皮肤损伤的皮肤和头皮美容方法，其中对所述受试者的皮肤施用足量的包含至少一种本发明提取物(作为活性成分)或由其组成的组合物。本申请还涉及用于治疗或预防受试者皮肤或头皮的病症和/或损伤的方法(美容)，其中对所述受试者的皮肤或头皮的一个或多个部位或目的部位施用足量的本发明组合物。
如在本发明中所使用的，本发明的巴西坚果籽提取物也被称为“提取物”或其缩写“EBE”。
贯穿本发明使用的术语“压榨残渣(press residue)”、“压榨残余物(pressresidual)”、“压榨剩余物”、“籽饼”和“饼”可以在本领域通常理解的最广泛的意义上互换理解。至少部分脱油的压榨残渣可以理解为从巴西坚果籽中榨出油后剩余的主要为固体的残余物。换句话说，本文所用的至少部分脱油的压榨残渣可优选(基本上)指通过机械压榨去除其油含量后获得的压实的籽。适于进行机械压制的公知装置的示例为单螺杆或双螺杆挤出机。
在一个优选实施方案中，至少部分脱油的压榨残渣是冷榨残渣。因此，压制可优选在至少一个压制步骤中进行，该压制步骤在不超过50℃、不超过45℃、不超过40℃、不超过35℃或不超过30℃的温度下进行。在一个优选实施方案中，压制在环境温度下，更优选在18至25℃的温度下进行。
如本文所用，术语“籽(seed)”是指包含内核和果皮的籽，该果皮是包围该籽的棕色薄层。如本文所用，术语“巴西坚果籽(Bertholletia excelsa seed)”和“巴西坚果籽(Brazil nut seed)”可以在本领域通常理解的最广泛的意义上互换理解。
根据本发明，该至少部分脱油的压榨残余物至少部分脱油，因此其油含量低于压榨前巴西坚果籽中的油含量。如本文所用，术语“脱油的”可以在最广泛的意义上理解为在本领域中通常理解为与原料(此处为：压榨前的巴西坚果籽)相比油含量减少的材料(此处为：巴西坚果籽的压榨残渣)。脱油可以通过机械压榨进行。术语“至少部分脱油的”可以在最广泛的意义上理解，即油含量不一定(基本上)完全减少，而是低于原料中的含量的任何程度，即油被除去。除去的油可以任选地被回收，并且可以任选地用于其他目的。
所述油含量可能在任何程度上比压榨前低。在一个优选实施方案中，至少部分脱油的压榨残渣含有的油含量比压榨前巴西坚果籽中的油含量低至少50重量％。优选地，至少50重量％的主要包含于(新鲜的)巴西坚果籽中的巴西坚果油已经通过压榨的方式被压出。本发明还涉及通过用至少一种醇溶剂或水醇溶剂提取巴西坚果籽至少部分脱油的压榨残渣获得的巴西坚果籽提取物，其中所述至少部分脱油的压榨残渣的油含量比压榨前的巴西坚果籽的油含量低至少50重量％。脱油的压榨残渣中的残余油含量通常可以通过公知的索氏溶剂提取法来测定，该方法由以下组成：将(任选地确定量的)脱油压榨残渣与任选地确定量的非极性溶剂(例如脂肪族烃)混合，在(任选精确的)时间内蒸发溶剂并回收残余油。
可获得本发明提取物的可用的(或使用的)至少部分脱油的压榨残渣可以是任何类型的至少部分脱油的巴西坚果籽的压榨残渣。它可以从商业供应商处获得，也可以制备。它可以储存或新鲜制备。它可以由贮藏的巴西坚果籽、干燥的巴西坚果籽、冷冻或冻干的巴西坚果籽制备，或者可以由新鲜的巴西坚果籽制备。在一个优选实施方案中，该至少部分脱油的压榨残渣是自压榨新鲜的巴西坚果籽获得。在一个优选实施方案中，至少部分脱油的压榨残渣是新鲜压制残渣。
如本文所用，术语“提取物”可以是通过提取一部分巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣而制得的任何物质。根据本发明，巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣的提取物可以通过溶剂提取所述植物获得的溶剂基提取物。如本文所用，提取通过使用至少一种溶剂来实现。因此，在一个优选实施方案中，提取物通过进行溶剂提取方法获得。在一个优选实施方案中，提取物通过醇或水醇提取方法获得，包括冷或热提取、超声波提取、回流冷却、针式提取和微波提取。本文中，在溶剂提取步骤之前，可以任选地进行准备步骤，例如通过使用本领域已知的适当手段例如加热，对至少部分脱油的压榨残渣进行净化步骤。可以将溶剂加入到脱油的压榨残渣中。在进一步的步骤中，该脱油的压榨残渣的固体部分可以任选地通过初级提取分离。该初级提取可以通过本领域已知的任何方法来实现，例如过滤、筛分、超滤、错流过滤、离心、随时间沉淀或其中两种或更多种的组合。
如本文所用，术语“新鲜籽”或“新鲜压榨残渣”可以理解为本领域最广泛的含义。如本文所用，新鲜籽优选地是既没有(显著地)干燥(即在收获籽时损失超过19％、超过20％或超过50％的原始含水量)也没有冷冻或冻干的籽。优选地，新鲜籽没有储存超过一个月、超过三周、超过两周或超过一周。如本文所用，新鲜的至少部分脱油的压榨残渣优选地是既没有(显著地)干燥(即在压榨籽时损失超过19％、超过20％或超过50％的原始含水量)也没有冷冻或冻干的籽。优选地，至少部分脱油的压榨残渣没有储存超过一个月、超过三周、超过两周或超过一周。事实上，在新鲜籽中，天然化合物，特别是敏感的可氧化成分，在提取过程进行之前能够保存在籽中。该至少部分脱油的压榨残渣可以以任何形式(例如粉末、压碎的、球状、颗粒或任何块状形式)使用。
根据本发明的提取物可以通过任何方式获得。该提取物可以任选地通过商业供应商获得，或者可以部分或完全由巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣制备。
所述醇或水醇溶剂可以是包含至少一种醇的任何溶剂或溶剂混合物。优选地，该醇或水醇溶剂是主要由一种或多种醇和水组成的溶剂或溶剂混合物。优选地，该醇或水醇溶剂由超过50重量％、至少60重量％、至少70重量％、至少80重量％、至少90重量％、至少95重量％的溶剂或溶剂混合物组成，该醇或水醇溶剂(基本上)由一种或多种醇和水组成。任选地，醇或水醇溶剂由超过50重量％、至少60重量％、至少70重量％、至少80重量％、至少90重量％、至少95重量％的溶剂或溶剂混合物组成，该醇或水醇溶剂(基本上)由一种或多种醇和水组成。如本文所用，水也可包括热水或亚临界水。也可以使用一种或多种水性缓冲液。
如本文所用，术语“水醇的”可以在本领域通常理解的最广泛的意义上理解。它可以是包含醇和水的任何组合物。水醇溶剂可以是任何醇/水混合物。在一个优选实施方案中，溶剂是含有10-90％(v/v)的醇，或含有25-85％(v/v)的醇，或含有50-82％(v/v)的醇，或含有60-80％(v/v)的醇，或含有65-75％(v/v)的醇，或含有约70％(v/v)的醇的醇/水混合物。
在一个优选实施方案中，该至少一种醇或水醇溶剂选自由以下组成的组：乙醇、甲醇、丙醇、丁醇、戊醇、苯酚、甘油、1,3-丁二醇、丙二醇及其中两种或更多种的混合物以及其中一种或多种与水或水性缓冲液的混合物。
在一个优选实施方案中，该至少一种醇或水醇溶剂是乙醇、乙醇和水的混合物、或乙醇和水性缓冲液的混合物。
在本文中，醇可以是任何醇或醇混合物，特别是选自由乙醇、甲醇或其混合物组成的组。
在一个优选实施方案中，水醇溶剂可以是水乙醇溶剂。因此，在一个优选实施方案中，溶剂是含有10-90％(v/v)的乙醇，或含有25-85％(v/v)的乙醇，或含有50-82％(v/v)的乙醇，或含有60-80％(v/v)的乙醇，或含有65-75％(v/v)的乙醇，或含有约70％(v/v)的乙醇的乙醇/水混合物。在另一个优选实施方案中，水醇溶剂可以是水乙醇溶剂。
在进一步的优选实施方案中，本发明的提取物是水乙醇或乙醇提取物，即溶剂是乙醇或水乙醇溶剂。在进一步的优选实施方案中，本发明的提取物是水乙醇提取物，即溶剂是水乙醇溶剂。在一个优选实施方案中，本发明的至少一种提取物是通过用乙醇/水的混合物提取获得的水乙醇提取物，该乙醇/水混合物含有10-90％(v/v)的乙醇，或含有25-85％(v/v)的乙醇，或含有50-82％(v/v)的乙醇，或含有60-80％(v/v)的乙醇，或含有65-75％(v/v)的乙醇，或含有约70％(v/v)的乙醇的乙醇/水混合物。
在一个优选实施方案中，本发明的提取物含有一种或多种多酚。该提取物可含有任何含量范围的一种或多种多酚。在一个优选实施方案中，相对于提取物干含量的总重量，提取物包含至少1.8重量％，更优选至少2重量％，特别是3重量％的一种或多种多酚。
总多酚的定量可以通过任何方式进行。在一个优选实施方案中，本发明提取物中总多酚含量的定量可以根据已知的Folin-Ciocalteu法进行。这种分析方法可以基于光谱测量。通常，本发明提取物中的所有多酚成分都被Folin-Ciocalteu试剂氧化。这些试剂可以由磷钨酸和磷钼酸的混合物组成，该混合物在酚类物质的氧化过程中被还原成钨和钼的蓝色氧化物的混合物。产生的蓝色可能在约750-760nm处具有最大吸收，其通常与氧化的酚组分的量成比例。
在一个优选实施方案中，提取物是水醇提取物或醇提取物，特别是水乙醇提取物或乙醇提取物，该提取物包含相对于提取物干含量的总重量的至少1.8重量％，更优选至少2重量％，特别是3重量％的一种或多种多酚。
如上所述，该至少部分脱油的压榨残渣所含的油含量比压榨前巴西坚果籽中的油含量低至少50重量％。在一个优选实施方案中，该至少部分脱油的压榨残渣包含相对于压榨前的巴西坚果籽的大于15至45重量％，优选20至45重量％，更优选20至40重量％，特别是20至35重量％的残余油含量。
在一个优选实施方案中，提取物是水醇或醇提取物，特别是水乙醇或乙醇提取物，该提取物包含相对于提取物干含量总重量的至少1.8重量％，更优选至少2重量％，特别是3重量％的一种或多种多酚，并且该提取物是通过提取至少部分脱油的压榨残渣可获得(或获得)的，所述压榨残渣包含相对于压榨前的巴西坚果籽超过15至45重量％，优选20至45重量％，更优选20至40重量％，特别是20至35重量％的残余油含量。
在一个优选实施方案中，提取物中的固体含量(也称为“干物质含量”)可占相对于提取物总重量的至少0.1重量％，优选至少0.5重量％，更优选至少1重量％，甚至更优选至少1.5重量％(或甚至至少2重量％)。通过已知方法测量固体含量，例如在给定初始重量的样品的沙子的存在下，通过105℃的烘箱，直至获得恒重。
在另一实施方案中，提取物的干含量可以代表至少10g/L(溶剂的重量/体积)，优选至少15g/L(溶剂的重量/体积)，甚至更优选至少20g/L(溶剂的重量/体积)。同样在本文中，可以通过在给定初始重量的样品的沙子存在下通过105℃的烘箱直至获得恒重，测量固体含量。如在本文中所使用的，溶剂可以被认为是可蒸发的液体(在105℃的温度下可蒸发)并且体积优选地是其在环境温度和环境压力(例如(大约)20℃和(大约)1013毫巴)。换句话说，基于在105℃和环境压力下可蒸发的组分已被除去时的固体残余物，相对于在室温和环境温度下冷凝的可蒸发组分的体积，提取物的固体含量为至少10g/L、至少15g/L或至少20g/L。
提取可以在任何适于此目的的温度下进行。优选地，提取在10至150℃、或15至100℃、或20至80℃、或25至70℃、或15至25℃、或约20约的范围内的温度下进行。在一个优选实施方案中，提取在环境温度(即15至25℃、特别地约20℃)下进行。在一个优选实施方案中，提取在环境温度(即15至25进，特别是约20别)环境压力(即980至1200hPa)下进行。在一个优选的实施方案中，提取在环境温度(即15-25℃，特别是约20℃)和环境压力(即980-1200hPa)下使用含有65-75％(v/v)乙醇，特别是约70％(v/v)乙醇的乙醇/水混合物进行。
提取可以在任何适于此目的的时间间隔内进行。例如，该提取可以进行的时间间隔范围为小于20分钟、30分钟至1小时、1小时至2小时、90分钟至6小时、2小时至24小时、或6小时至36小时、12小时至两天、一天至一周。在一个优选实施方案中，提取可以进行(优选在15至25℃的环境温度下)的时间间隔范围为20分钟至48小时、25分钟至3天，示例性地约为25分钟至24小时、25分钟至10小时、或30分钟至5小时。该提取可以过夜进行。
根据本发明的提取物在标准条件(约20℃的室温，约1013hPa的常压)下可以是液体、糊状或固体。在本文中，术语“液体(liquid)”和“流体(fluid)”可以互换理解。优选地，提取物首先以液体形式获得。然后，可以任选地除去一种或多种溶剂，以获得固体形式的提取物。也可以浓缩液体提取物。然后，优选地，除去部分的一种或多种溶剂。任选地，可以获得液体或糊状提取物。任选地，还可以用一种或多种溶剂稀释提取物，以获得基于溶剂的提取物。任选地，提取物还可以通过任何方法纯化(例如，结晶、色谱方法等)。提取物可以任选地指定为“酊剂的(tincture)”或“无水的(absolute)”。用于制备基于溶剂的提取物的溶剂可以是水性溶剂(水或缓冲液)，或者可以是水性溶剂和液体有机溶剂的组合。因此，根据本发明的巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣的提取物是基于溶剂的提取物，其中稀释溶剂可以选自水、水性缓冲液、醇、二醇、乳酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、甘油三酯、柠檬酸三乙酯、二辛基醚、异硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、乙酸乙酯或其混合物。醇可以优选选自甲醇和乙醇。二醇可以优选选自戊二醇和甘油。巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣的提取物可以是体积比为95/5至5/95、优选80/20至20/80的甘油:水的混合物。
所述籽(优选巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣)的至少一种提取物可以任选地以通过进行其他纯化方法产生的级分获得，所述纯化方法包括通过具有恒定分子量截止值的超滤膜分离，或者通过各种色谱方法，或液-液分离或结晶或沉淀分离。
例如，籽(优选至少部分脱油的压榨残渣)的提取物可以通过干燥该籽或脱油的巴西坚果籽压榨残渣进行制备，该籽优选新鲜材料，然后用溶剂，特别是用醇或水合醇提取，随后任选地通过减压过滤，最后通过蒸发溶剂浓缩来制备。
如本文所用，术语“干提取物”可以在最广泛的意义上理解为作为干物质的根据本发明的提取物，即不含溶剂。干提取物可以任选地作为干物质实际上存在。然而，可以直接理解的是，在计算涉及干物质的百分比时，不一定是以物理形式存在的干物质，干提取物也可以以溶解形式存在。然后，在计算中，数学上的从总质量中减去溶剂的质量。
在本发明的优选实施方案中，至少部分脱油的压榨残渣是干燥的压榨残渣，优选已经部分或完全除去水的干燥的压榨残渣。
任选地，用于提取的至少一种溶剂可以通过蒸发部分或完全除去。
(物理形式的)干物质可以通过合适的提取方法获得，随后是干燥获得的提取物的步骤。干燥可以通过本领域已知的适于此目的的任何方法进行。干燥是指除去用于提取的一种或多种溶剂。可以通过任何方式除去该一种或多种溶剂。例如，干燥可以通过将提取物置于热干环境中和/或将提取物置于加热板上以蒸发溶剂来实现。例如，干燥可以通过真空和/或高温下的蒸发(例如，在旋转(真空)蒸发器中)或通过目的固体材料的结晶来实现。可替代地或另外地，干燥可以通过雾化或冻干来实现。
本发明还涉及用于制备本发明的巴西坚果籽提取物的方法。因此，本发明的另一方面涉及一种用于制备巴西坚果籽提取物的方法，包括以下连续步骤：
(i)提供巴西坚果籽(优选来自新鲜籽)的至少部分脱油的压榨残渣，包含相对于压榨前的巴西坚果籽的大于15重量％且小于50重量％的残余油含量，其中该至少部分脱油的压榨残渣任选地被干燥；；
(ii)使脱油的压榨残渣与至少一种醇或水醇溶剂在15至30℃、优选在18至25℃下接触30分钟至2小时；
(iii)使脱油的压榨残渣在至少一种醇或水醇溶剂中均化；
(iv)从步骤(iii)的固体残渣中分离提取物，优选通过过滤或离心的方式；以及
(v)通过除去至少一种溶剂或其部分来浓缩提取物。
在一个优选实施方案中，浓缩提取物可以进行2至5次。
应该理解的是，在本发明提取物的上下文中所作的定义和优选实施方案在加以必要的修正后适用于制备巴西坚果籽提取物的方法。
因此，本发明还涉及通过本发明的方法可获得(或获得)的提取物。在一个优选实施方案中，通过本发明的方法可获得(或获得)的提取物的特征如上所述。
一种巴西坚果籽的提取物可用作活性成分。巴西坚果籽的提取物可以以纯的形式使用，或者可以与一种或多种其它成分混合使用。换句话说，该提取物可以用作组合物中的活性成分。优选地，它用于美容或药物组合物中。因此，本发明的另一方面涉及美容或药物组合物，其包含：
(A)作为活性成分的本发明的巴西坚果籽的至少一种提取物；和
(B)除所述巴西坚果籽提取物之外的至少一种其他的美容和/或药学上可接受的成分。
应该理解的是，在本发明提取物的上下文中所作的定义和优选实施方案在加以必要的修正后适用于包含这种巴西坚果籽提取物的组合物。
本文中，所述巴西坚果籽的至少一种提取物可以任选地被认为是一种(或者任选地甚至是唯一的)活性成分。术语“活性成分”可在最广泛的意义上理解为可单独或与一种或多种其它成分(如一种或多种本身无活性的载体或其它可任选地协同作用的活性成分)一起表现出所需和预期活性的组分。优选地，本发明的活性成分是美容活性成分。
该美容或药物组合物可以用于任何目的并以任何形式使用。在一个优选实施方案中，该组合物是用于局部使用的组合物，其选自由溶液、悬浮液、乳液、霜剂、糊剂、凝胶、洗液、粉末、肥皂、含表面活性剂的水、油、香波和喷雾剂组成的组，或者其中该组合物是口服施用的营养组合物。
该组合物还可以是选自由以下组成的组的产品或被包含于以下由以下组成的组的产品中：乳液、凝胶、软膏、滋补品、液体皂、条皂、沐浴油、淋浴油、按摩油、美容用品、头皮护理剂、须后水、剃须产品、除臭剂、沐浴露、洗发水及其中两种或更多种的组合。
任选地，美容或药物组合物也可以是可以向受试者口服施用的营养药物组合物。然后，美容或药物组合物可以任选地包含在食品，例如食品补充剂中。那么，该组合物通常可以具有全身效应。根据本发明的营养药物组合物可以与可接受的载体一起配制成适于口服施用的任何形式，例如片剂、胶囊、颗粒、粉末、溶液、乳液或悬浮液。
该美容或药物组合物可以含有任何含量的本发明的巴西坚果籽提取物。在一个优选实施方案中，相对于组合物的总重量，该组合物包含少于30重量％的巴西坚果籽的至少一种提取物。在一个优选实施方案中，该组合物包含相对于组合物的总重量的0.0001至20重量％，更优选0.001至15重量％，甚至更优选0.005至10重量％，特别是0.01至5重量％的至少一种巴西坚果籽的提取物。
除了巴西坚果籽提取物之外的至少一种其它美容和/或药学上可接受的成分可以是任何美容和/或药学上可接受的成分。在一个优选实施方案中，该美容和/或药学上可接受的成分是或包含至少一种美容和/或药学上可接受的载体。
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”、“药学上可接受的赋形剂”、“美容可接受的载体”、“美容可接受的赋形剂”、“载体”和“赋形剂”可以在最广泛的意义上可互换地理解为可支持根据本发明的包含巴西坚果籽提取物的组合物的美容和/或药学上可接受性或可用性的任何物质。优选地，当施用于组织时，巴西坚果籽提取物或含有这样的至少一种根据本发明的提取物的组合物均无毒。
即用型组合物优选可以是液体制剂，特别是适于局部和口服施用的组合物。该组合物的储存形式也可以是液体，但也可以是干燥形式(例如粉末，如包含巴西坚果籽的至少一种提取物或由其组成的粉末)，或者可以是糊剂或糖浆等。任选地，在施用于目的皮肤之前，可以溶解或乳化干燥形式、糊剂或糖浆。
美容和/或药学上可接受的载体可以示例性地选自由以下组成的列表：水性缓冲液、生理盐水、水、醇、植物油、矿物油、聚合物或其中两种或更多种的组合。任选地，美容和/或药学上可接受的载体可以含有一种或多种美容和/或药学上可接受的添加剂。在一个优选实施方案中，这样的美容和/或药学上可接受的添加剂可以选自由以下组成的组：芳香剂/香料、染料、色素、乳化剂、润滑剂、螯合剂、酸度调节剂、抗菌剂、防腐剂、抗氧化剂及其中两种或多种的组合。例如，美容和/或药学上可接受的载体可以任选地含有一种或多种洗涤剂、三乙醇胺、一种或多种芳香剂、一种或多种发泡剂(例如硫酸月桂酸钠(SLS)、十二烷基硫酸钠(SDS))、一种或多种着色剂(例如食用着色剂、色素)、一种或多种维生素、一种或多种盐(例如钠、钾、钙、锌盐)、一种或多种湿润剂(例如山梨醇、甘油、丁二醇、丙二醇、甘露醇、丙二醇、聚葡萄糖)、一种或多种酶，一种或多种防腐剂(例如，苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、一种或多种抗氧化剂、一种或多种草药和植物提取物、一种或多种稳定剂、一种或多种螯合剂(例如，乙二胺四乙酸(EDTA))、一种或多种聚合物(例如，羧乙烯基聚合物、羧甲基纤维素、纤维素、羧乙基纤维素)、一种或多种稳定剂、一种或多种增溶剂、一种或多种润肤剂和/或一种或多种吸收介质(例如，聚乙烯亚胺(PEI)、细胞穿透肽(CPP)、蛋白质转导结构域(PTD)抗微生物肽等)。此外，本发明的组合物除了含有至少一种巴西坚果籽提取物之外，还可以含有一种或多种其它活性成分，与所述巴西坚果籽提取物协同和/或互补作用，而不影响其活性或上述用途。
根据本发明的组合物可以是化妆品或者可以包含在化妆品中。根据安全性研究和法律要求，可以减少或避免皮肤中的有害作用。该组合物可以用于任何用途。达到所要求的预期目的的任何施用途径都是合适的。施用可以是局部或全身施用。优选地，施用是局部施用。施用可以是局部施用、经皮施用、口服施用、通过注射施用(例如，静脉内(i.v.)、动脉内(i.a.)、腹膜内(i.p.)、肌内(i.m.)和皮下(s.c.)注射)或鼻内施用。例如，根据本发明的组合物可以与可接受的载体一起配制成用于局部、口服、直肠、经粘膜、经鼻、肠、肠内和胃肠外施用的任何合适形式。
在一个优选实施方案中，组合物是用于局部使用的组合物。在一个优选实施方案中，组合物是局部施用至受试者的局部使用的组合物。换句话说，根据本发明的组合物可以局部施用。在一个优选实施方案中，该组合物是局部施用到皮肤的一部分(例如，脸、头皮或身体的一部分)的局部使用的组合物。皮肤可以是所有类型的皮肤，包括受损皮肤、干性皮肤、健康皮肤、正常皮肤和油性皮肤。
如上所述，巴西坚果籽提取物或本发明的组合物可用于任何目的。优选地，它用于美容和/或药物目的。
令人惊讶地，发现本发明的巴西坚果籽提取物和组合物能够治疗、调节和/或预防导致许多皮肤病症和损伤的表皮屏障功能障碍。
因此，在另一方面，本发明涉及本发明的巴西坚果籽提取物或美容或药物组合物在增强、保存和/或恢复皮肤屏障功能、改善皮肤水合作用、预防和/或减轻皮肤老化、和/或减轻和/或预防皮肤病症或损伤中的用途。
应该理解的是，在本发明的巴西坚果籽提取物或包含这种提取物的组合物的上下文中所作的定义和优选实施方案在加以必要的修改后适用于其用途。
本发明还涉及用作药物的本发明的巴西坚果籽提取物或者美容或药物组合物。本发明还涉及用于治疗或预防皮肤病症和/或皮肤损伤的方法中的本发明的巴西坚果籽提取物或者美容或药物组合物。在一个优选实施方案中，本发明的巴西坚果籽提取物或者美容或药物组合物用于增强、保存和/或恢复皮肤屏障功能、改善皮肤水合作用、预防和/或减轻皮肤老化、和/或减轻和/或预防皮肤病症或损伤。
如本文所用，术语“病症”可以在最广泛的意义上理解为任何病理状况。其可以任选地是固有的或获得的疾病。如本文所用，术语“损伤”可以在最广泛的意义上理解为组织中、特别是在(另外的)健康组织中的任何扰动或功能障碍。如本文所用，病症和损伤可由内部和外部侵害引起，例如衰老、一种或多种遗传因素、一种或多种激素、光暴露(例如，暴露于紫外线(UV)光、暴露于可见光和暴露于红外线(IR)光)、暴露于特定污染、暴露于一种或多种病原体(包括天然和化学产品)和/或过敏原、暴露于波动的温度和/或湿度、和/或暴露于机械限制(包括由于日常习惯，如剃须、戴手套和/或戴口罩)。
本发明的巴西坚果籽提取物或包含其的组合物可具有局部和/或全身效应。在一个优选实施方案中，当局部和/或局部施用时，该提取物(主要或完全)具有局部效应。
在一个优选实施方案中，该用途用于组织护理，优选其中该用途用于改善选自由以下组成的组的组织状况：干燥、发红、异常色素沉着和皮脂失调、瘙痒和炎症、特应性皮炎、银屑病、白癜风、系统性红斑狼疮、鱼鳞病和皮肤老化。
被治疗的组织可以是任何组织。在一个优选实施方案中，该组织选自由以下组成的组：存在于皮肤和头皮中的组织，特别是真皮组织、表皮组织、皮下组织及其中两种或多种的组合。
被治疗的皮肤可以是任何类型的皮肤。本发明的巴西坚果籽提取物可以是用于改善任何类型皮肤状况的活性成分。在一个优选实施方案中，皮肤选自受损皮肤、干性皮肤、健康皮肤、正常皮肤和油性皮肤。
在一个优选实施方案中，该用途用于：
(a)刺激皮肤脂质代谢，优选胆固醇、脂肪酸、鞘脂和/或神经酰胺代谢；
(b)促进表皮增殖和/或表皮分化；
(c)调节角质细胞的内聚和/或细胞骨架；和/或
(d)通过抑制炎症小体和促炎分子的活化来调节炎症过程。
刺激皮肤脂质代谢还可以任选地刺激整体皮肤脂质含量，优选胆固醇、脂肪酸、鞘脂和神经酰胺。
通过任选地作用于不同水平的皮肤屏障(角质细胞的分化过程、细胞骨架、由于TJ和脂质代谢的角质细胞内聚)来增强或保存皮肤屏障功能，从而全面改善皮肤状况。它还可以任选地减轻导致受损皮肤的过程。事实上，这种增强可以任选地防止有害物质通过有缺陷的皮肤屏障进入体内，并且可以任选地防止水分流失。
如本文所用，术语“受损皮肤”和“受损皮肤表型”可以广义地理解为暴露于一种或多种有害或刺激性影响的任何类型的皮肤。
具有目的组织(特别是皮肤)的受试者可能患有上述病症或可能具有患上述病症的风险。
如在本发明的上下文中所用，术语“受试者”可以在最广泛的意义上理解为任何生物。受试者优选是人类或动物，更优选人类或哺乳动物，特别是人类。
本文所用的术语“患有”可以在最广泛的意义上理解，即受试者已经发展出一种病理状况。患有病症的受试者不一定但可以任选地具有一种或多种医学症状。术语“处于...的风险”或“处于发展...的风险”可以在最广泛的意义上理解，即受试者具有一定的患有本发明意义上的病症的风险。
本发明的另一方面涉及通过用至少一种醇溶剂或水醇溶剂提取巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣而获得的巴西坚果籽提取物，该压榨残渣的残余油含量为巴西坚果籽压榨前油含量的0-50重量％，其中该提取物包含相对于提取物干含量的总重量的至少1.5重量％，优选至少1.8重量％，更优选至少2重量％，特别是至少3重量％的一种或多种多酚，用于增强、保存和/或恢复皮肤屏障功能、改善皮肤水合作用、预防和/或缓解皮肤老化、和/或减轻和/或预防皮肤病症或损伤。
在整个说明书和权利要求书中，除非上下文另有要求，开放式术语如“包含(comprise)”、“含有(contain)”、“包括(include)”等，以及诸如“包含(comprises)”、“含有(contains)”、“包括(includes)”、“包含(comprising)”、“含有(containing)”、“包括(including)”等的变体可以理解为包含所陈述的成分(component)、成分(member)、整体或步骤或者组件、构件、整体或步骤的组，但不排除任何其他成分。
除非本文另外指出或者与上下文明显矛盾，否则在描述本发明的上下文中(尤其是在权利要求的上下文中)使用的术语“一个(a)”和“一个(an)”和“该/所述(the)”以及类似的引用应被解释为覆盖单数和复数。本文中数值范围的列举仅旨在用作单独提及落入该范围内的每个单独值的简略表达方法。除非本文另有说明，否则每个单独的值均被并入说明书中，如同其单独地以及与本文中列举的每个其他组合的一样。除非在此另有说明或者与上下文明显矛盾，所有方法和程序步骤，包括本文描述的由方法得到产品的步骤，可以以任何合适的顺序执行。本文提供的任何和所有示例或示例性语言(例如，“例如(such as)”、“例如(for example)”)的使用仅仅是为了更好地说明本发明，而不是对本发明的范围进行限制。说明书中的任何语言都不应被解释为表示对本发明的实践至关重要的任何未要求保护的元素。
应该理解的是，这些方面和实施方案可以以任何方式和任何数量组合成另外的实施方案。除非上下文另有说明，否则本申请中所有描述的元素的任何排列和组合都应被认为是由本申请的描述所公开的。
除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本领域技术人员通常理解的相同含义。尽管本文描述的方法和材料是优选的，但是在本发明的实践或测试中也可以使用与本文描述的方法和材料类似或等同的其他方法和材料。
本文引用或参考的所有文献均通过引用并入本文，并且可用于本发明的实践中。更具体地，所有参考文献均通过引用并入，其程度如同每个单独的文献被具体且单独地指示通过引用并入一样。
以下实施例和附图旨在说明本发明的进一步实施方案而不限制其范围。
附图说明
图1(A，B)显示了用巴西坚果籽提取物(“籽饼”)处理的重建人体皮肤模型的表皮脂质基因和蛋白质表达的调节。图1A描述的细胞因子组包含STARD2(StAR相关脂质转移蛋白2)、STARD3(StAR相关脂质转移蛋白3)、STARD4(StAR相关脂质转移蛋白4)、APOL1(载脂蛋白L1)、MVK(甲羟戊酸激酶)、SGPP1(鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1)和FITM2(脂肪诱导蛋白2)。图1B中描述的细胞因子组包括DHCR7(7-脱氢胆固醇还原酶)、CPT2(肉碱O-棕榈酰转移酶2)、ACOT11(酰基辅酶A硫酯酶11)和TECR(极长链烯酰CoA还原酶)。
图2显示了本发明的巴西坚果籽(EBE)提取物对重建人体皮肤模型调节整体脂质含量的效果。
图3显示了用本发明的提取物处理的重建人体皮肤模型的表皮分化过程中涉及的基因和蛋白质表达的调节效果。该细胞因子组包括FGF7(成纤维细胞生长因子7)、LCE5A(晚期角质化包膜蛋白5A)、KLK14(激肽释放酶-14)、EGR1(早期生长反应蛋白1)、BTC(原β细胞蛋白)、RUNX3(矮小相关转录因子3)、ZFPM2(锌指蛋白)和CRNN(cornulin)。
图4显示了基因和蛋白质表达的调节，该基因和蛋白质表达涉及用本发明的提取物处理的重建人体皮肤模型的角质细胞内聚和细胞骨架的调节。该细胞因子组包括EML1(棘皮动物微管相关蛋白系1)、EML2(棘皮动物微管相关蛋白系2)、WAS(Wiskott-Aldrich综合征蛋白)、WASF2(Wiskott-Aldrich综合征蛋白家族成员1)、ARHGAP6(Rho GTP酶激活蛋白6)、NEDD9(成膜增强子1)、SERBS1(含山梨糖蛋白和SH3结构域的蛋白1)和CLDN12(密封蛋白12)。
图5显示了在用本发明的提取物处理的重建人体皮肤模型中，角蛋白10(K10)蛋白表达的调节。
图6显示了基因表达的调节，该基因表达参与用本发明的提取物处理的重建人体皮肤模型的炎症途径的调节。该细胞因子组包括IL18RAP(白介素18受体辅助蛋白)、IL26(白介素26)、IL4(白介素4)、CXCL13(C-X-C基序趋化因子配体13)、CXCL11(C-X-C基序趋化因子配体11)和AIM2(黑色素瘤缺乏因子2)。
图7涉及志愿者前臂皮肤的屏障恢复，所述志愿者前臂皮肤用胶带剥离破坏，以达到至少20的经皮失水(TEWL)值，然后用安慰剂制剂或含有本发明的巴西坚果籽提取物(EBE)的制剂处理。
实施例
1.制备至少部分脱油的压榨残渣(“籽饼”)提取物
收获巴西坚果籽。两天后，对籽进行压榨，以回收其大部分油含量。获得的压榨残渣含有至多30重量％的油。在提取之前，通过加热对压榨的脱油残渣进行净化，以获得细菌、霉菌和酵母数量减少的干燥压榨脱油残渣。
a.提取步骤：
对如上所定义的经干燥和净化的至少部分脱油的压榨残渣(下文称“压榨残渣”)进行提取。每次使用大约40公斤的压榨残渣。
根据标准程序通过使用溶剂提取器进行提取。例如，通过70％(v/v)乙醇水溶液(即乙醇/水的比例为70∶30(v/v))进行提取。在环境温度(即18-25℃)下，通过在提取溶剂中完全均化至少部分脱油的压榨残余物并持续搅拌(最大500rpm)1小时来进行提取。
b.过滤步骤：
随后，根据标准程序过滤获得的水乙醇提取物。例如，通过使用具有增加的孔的过滤器进行过滤，从孔径为3-10μm的组织开始，以避免微生物污染。获得的经过滤的液体清澈，细菌含量低于10CFU/g(每克菌落形成单位)，霉菌和酵母含量低于10CFU/g。
c.浓缩步骤：
根据标准程序进一步浓缩步骤b)中获得的经过滤的液体提取物。例如，在恒定真空中减压、在50至80℃的温度下连续搅拌进行浓缩，直至乙醇完全蒸发，以获得具有可接受的微生物含量的浓缩物，其优选构成根据本发明的提取物。根据Folin-Ciocalteu方法测量，获得的该浓缩提取物的总多酚含量占干提取物总重量的3重量％。如下所述，在步骤c)结束时获得的本发明的巴西坚果的至少部分脱油的压榨残渣的提取物在甘油∶水为80/20(v/v)的混合物中稀释，并被称为“EBE”，其具有的干含量为20g每1L甘油∶水。
就多酚成分而言，EBE不含没食子酸、原儿茶酸、2,4-二羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、香豆酸、儿茶素和芥子酸。
2.体外研究：
在下面的研究中，证明了EBE的皮肤屏障功能改善、皮肤水合作用和皮肤抗炎作用。
a.EBE刺激脂质代谢，并导致参与皮肤脂质代谢的基因表达的整体上调
EBE对脂质代谢的刺激作用通过3D全厚度重建人体皮肤模型FTS(Phenion，Henkel)在体外进行评估。简而言之，将以0.25重量％配制的EBE或表1中所述的安慰剂以2mg/cm2的剂量局部应用于在37℃和5％ CO2下培养24小时和5天的全厚度重建人体皮肤。
表1：含有0.25重量％EBE的凝胶霜剂和安慰剂
组织培养24小时后，使用Qiagen的RNeasy Mini试剂盒提取总RNA。通过分光光度法和毛细管电泳分析它们的浓度和完整性。根据Affymetrix用户手册，在Affymetrixhuman Clariom S阵列上进行转录组学分析。
培养五天后，对每种条件下的三个组织取样进行蛋白质组学分析，对每种条件下的另外三个组织取样进行组织学分析。使用裂解缓冲液提取蛋白质。使用Bradford方法测定蛋白质浓度，并通过高分辨率SDS-PAGE验证提取的质量控制。在与Orbitrap Fusion质谱仪(Thermo Fisher Scientific)偶联的Dionex U3000RSLC nano-LC系统上进行质谱(MS)分析。对于组织学，将组织分成两部分：一半速冻，另一半石蜡包埋。
为了分析转录组学和蛋白质组学研究的数据，使用DAVID生物信息学资源对所有显着失调的基因进行分析。该工具从大型基因或蛋白质数据集中识别功能性调节途径。该分析显示参与脂质代谢途径的转录物的富集。
结果：
图1显示了由EBE引起的基因上调，通过Affymetrix技术对用0.25重量％的EBE治疗的FTS模型与安慰剂相比进行了分析。所有分析重复进行三次。DAVID生物信息学资源将脂质代谢强调为调节的功能途径，并显示了其中参与的显著调节基因的列表。通过与安慰剂相比进行统计分析。
如图1A所示，在经EBE处理的细胞组织中证实了参与胆固醇代谢及其转运(MVK、STARD3、STARD4)、通过激活鞘脂途径的神经酰胺代谢(SGPP1)、磷脂酰胆碱代谢和转运(STARD2)、脂质储存及其转运(FITM2和APOL1)的基因的转录上调。具有类固醇生成急性调节蛋白相关脂质转移域并在脂质转运和代谢中起作用的蛋白质的StarD家族。StarD3和4参与胆固醇和固醇的运输。
此外，如图1B所示，蛋白质组学分析还揭示了胆固醇生物合成途径的刺激，因为我们发现蛋白质DHCR7被上调。这种酶通过还原7-脱氢胆固醇(7-DHC)的C7-C8双键参与胆固醇的生成。蛋白质组学分析也显示了参与脂肪酸代谢的生物靶标(CPT2、ACOT11和TECR)的上调。CPT2参与脂肪酸β-氧化途径。ACOT11是一种具有酰基辅酶A硫酯酶活性的酶，优先选择长链脂肪酰基辅酶A硫酯十六酰辅酶A/棕榈酰辅酶A和十四酰辅酶A/肉豆蔻酰辅酶A，是线粒体β-氧化途径中的主要底物。TECR是一种通过鞘氨醇1-磷酸代谢途径参与用于鞘脂合成的极长链脂肪酸的生成和鞘脂中鞘氨醇部分的降解的酶。脂肪酸和鞘氨醇部分对神经酰胺(CER)的生成至关重要。
皮肤屏障功能的破坏导致表皮胆固醇和脂肪酸合成的快速且显著的增加。此外，这些途径的抑制剂会延迟屏障功能的恢复。先于神经酰胺合成的鞘脂合成的增加，比胆固醇和脂肪酸更延迟，但对皮肤屏障功能的恢复同样重要。
这些结果提供证据表明，皮肤脂质含量，特别是胆固醇、游离脂肪酸和神经酰胺令人惊讶地有效上调。因此，屏障功能似乎得到增强。事实上，皮肤屏障功能依赖于主要由上述三种脂质类别主导的角质层脂质组成。
b.EBE刺激脂质代谢，并导致整体皮肤脂质含量的整体上调：
为了研究整体皮肤脂质含量是否有效增加，如前所述，使用已知的尼罗红染色处理第五天时间点的速冻样品，以进行脂质含量可视化和定量。图2表示用0.25重量％的EBE或安慰剂处理的FTS模型的总体脂质含量的调节。所有测量重复进行三次。通过使用ImageJ对红色荧光(极性脂质)和黄色荧光(中性脂质)进行荧光定量来估计脂质含量。与安慰剂相比，进行了统计分析(非配对t检验)，*：p<0.05。尼罗红是一种荧光探针，在存在非极性脂质(酯化胆固醇和甘油三酯)时呈金黄色，在存在极性脂质(磷脂和其他两亲性脂质)时呈红色。如图2所示，使用Image J软件通过测量目的表皮区域(ROI)中的RawIntDen参数来量化荧光强度。
结果：
已经证明，在转录组学和蛋白质组学研究中强调的并且在各种代谢阶段和各种脂质分子中发生的脂质代谢的上调在表皮水平上得到反映。正如所证明的，EBE上调表皮的极性和非极性脂质含量，从而增强表皮的屏障功能。
2.2.EBE通过促进表皮分化过程来促进更好的皮肤屏障功能：
由于皮肤屏障功能很大程度上是由角质层来保证的，因此它与角质细胞所经历的表皮分化过程的质量密切相关。一个有趣的作用是分化过程，角质层最强，皮肤屏障功能越好。
图3涉及通过Affymetrix技术分析用0.25重量％的EBE或安慰剂处理的FTS模型的基因表达调节(表1)。所有分析重复进行三次。DAVID生物信息学资源将表皮分化强调为调节的功能途径，并显示了其中参与的显著调节基因的列表。与安慰剂相比，进行统计分析。基于R Limma 3.26.8包中实施的调节t”方法的统计测试***：p<0.001，*：p<0.05。已经证明，在与上述相同类型的体外3D皮肤模型中，根据表1的含有0.25重量％EBE的凝胶霜剂上调了参与表皮分化的基因(图3)。
结果：
已经证明，本发明的提取物(EBE)通过促进例如FGF7、EGR1或BTC的生长因子的上调，促进表皮细胞的更新并促进其分化。此外，CRNN和LCE5A的上调证实了角质细胞增殖和分化过程的效率。有趣的是，在蛋白质水平证实了在转录水平观察到的CRNN的显著上调。
2.3.EBE通过调节角质细胞内聚和细胞骨架来增强皮肤屏障功能
由于活性表皮在皮肤屏障功能中也起着至关重要的作用，因此研究了EBE在这一层面上的作用。事实上，由于细胞-细胞内聚和细胞骨架(细胞骨架是细胞的真正支架)，活性表皮发挥皮肤屏障功能。此外，微管、肌动蛋白微丝和中间丝这三种细胞骨架结构成分直接与细胞连接相连，显示出它们对皮肤屏障功能的特殊的益处。
图4涉及通过Affymetrix技术分析用0.25重量％的EBE或用安慰剂处理的FTS模型的基因表达调节(表1)。所有分析重复进行三次。DAVID生物信息学资源将细胞连接和细胞骨架强调为调节的功能途径，并显示了其中参与的显著调节基因的列表。与安慰剂相比，进行统计分析。基于R Limma 3.26.8包中实施的调节t”方法的统计测试。**：p<0.01，*：p<0.05。
图5涉及通过免疫荧光分析用0.25重量％的EBE或用安慰剂处理的FTS模型的角蛋白10(K10)表达的调节(表1)。所有测量重复进行三次。使用ImageJ通过荧光定量来估计K10表达。通过与安慰剂相比进行了统计分析(非配对t检验)(**：p<0.01)。
结果：
有趣的是，令人惊讶地发现EBE上调紧密连接组分(如SORBS1和NEDD9)的转录表达(图4)。SORBS1是编码Ponsin蛋白的基因，Ponsin蛋白在细胞粘附过程中至关重要，因为它与位于紧密连接结构中的许多蛋白质相互作用。这些紧密连接成分可能都在细胞骨架组织中起作用。例如，已知Ponsin蛋白介导肌动蛋白细胞骨架的组织，NEDD9参与肌动蛋白纤维的组装。已经证明EBE也上调了密封蛋白-12的表达。密封蛋白家族是紧密连接的主要成分，也与细胞骨架相互作用。此外，EBE还上调EML家族的两个成员EML1和EML2的表达。EML是参与微管结合、组装和调节的微管相关蛋白(MAP)的保守家族。虽然已知EML1调节微管细胞骨架的组装和组织，但EML2结合微管并促进微管动力学以允许细胞骨架的进化。还观察到EBE对WAS和WASF1的mRNA转录物的显著调节。已知这两种转录物属于WASP家族蛋白，是正常细胞骨架功能所必需的。WAS和WASF1(参与肌动蛋白聚合，从而形成肌动蛋白丝。与此同时，EBE还刺激Rho GTP酶激活蛋白ARHGAP6，ARHGAP6是已知的在细胞骨架组织中非常重要的蛋白。有趣的是，这种Rho GTP酶激活蛋白ARHGAP6是一种促进肌动蛋白重塑的细胞骨架蛋白。
最后，证明了EBE上调K10的翻译，K10是表皮分化过程中细胞骨架的关键蛋白(图5)。角蛋白属于中间丝，一种细胞骨架成分。一致认为角蛋白赋予表皮机械弹性，形成连接到桥粒细胞连接的细胞内细丝网。K10是在棘层和颗粒层中分化的角质细胞的中间丝中发现的最多的角蛋白之一。已经证明，缺乏K10会表现出比正常情况更大的基底上角质细胞和有缺陷的扁平。已知K10中的缺陷会导致屏障缺陷，因此证明，K10在细胞骨架、细胞连接和由此产生的屏障功能中的重要性。
2.4.EBE调节皮肤中的炎症途径
为了研究EBE是否能够减轻皮肤炎症(皮肤病一部分)，通过使用转录组学方法，在与上文第2.3段所述相同的条件下，使用相同的材料(重组皮肤)进行了相同的研究。图6涉及通过Affymetrix技术分析用0.25重量％的EBE或用安慰剂处理的FTS模型的炎症途径相关的基因表达调节(表1)。所有分析重复进行三次。列出了参与炎症的显著调节基因列表。通过与安慰剂相比进行统计分析。基于R Limma 3.26.8包中实施的调节t”方法的统计测试**：p<0.01，*：p<0.05。
结果：
令人惊讶地发现，EBE下调参与炎症小体活化(AIM-2)和IL-18依赖性信号传导的多种生物标志物，例如IL18RAP、IL-26、IL-4和CXCL13的mRNA表达，而且还下调了参与JAK/STAT信号传导途径的多种生物标志物mRNA表达，在JAK/STAT信号传导途径中CXCL11趋化因子被刺激(C-X-C基序趋化因子配体11)，这两条信号传导途径在皮肤疾病如银屑病、特应性皮炎中上调，表现出屏障功能的明显的缺陷。此外，蛋白质组分析还证明粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子1表达的下调。
3.美容制剂实施例：
根据常规方法制备适合局部施用的根据表1的包含巴西坚果的至少部分脱油的压榨残渣的提取物的凝胶霜剂。
4.体内研究
以下研究旨在证明本发明的巴西坚果籽提取物(EBE)恢复皮肤屏障功能的能力。
4.1EBE促进皮肤屏障恢复
EBE对屏障恢复的刺激作用通过对15名年龄从29岁到65岁、平均年龄为44±11岁的健康女性的体内研究平均值进行评估。为了产生皮肤屏障默认值，在前臂上尽可能多地进行胶带剥离，以达到20的经皮失水(TEWL)值，限制为20条。这种皮肤屏障破坏在三个区域进行。胶带剥离前TEWL的平均值为9.88±2.64。其中一个区域接受1％ EBE制剂的施用，另一个区域接受如下表2所述的安慰剂，第三个区域未进行处理。三小时后在三个区域进行TEWL测量，以评估皮肤屏障的恢复。
如本文所用，TEWL是由于皮肤屏障两侧的水梯度差而从皮肤内部被动蒸发到外部的水量。TEWL是用于评估皮肤屏障恢复的参数。完整的屏障能够保持水分，而破裂的屏障会造成更多的水分流失。
使用Tewameter TM 300TM(Courage&Khazaka electronics)进行TEWL测量，其测量从皮肤蒸发的水分，单位为g/cm2。连续测量20个值，计算平均值。
表2：含有1重量％EBE的凝胶霜剂和安慰剂
皮肤屏障能够在三个小时内自然恢复，因为皮肤具有内在的修复代谢来保护身体。
图7显示用安慰剂处理的区域的皮肤屏障恢复与未处理的区域基本上没有不同，表明空白制剂对皮肤屏障恢复没有影响。结果，令人惊讶地发现，EBE促进皮肤屏障功能的恢复，因为在破坏后3小时内，TEWL值显著低于没有任何制剂获得的值。该结果证实了EBE能够通过促进更好的恢复来改善皮肤屏障功能。

Claims (16)

1.一种巴西坚果籽的提取物，其能够通过用至少一种醇或水醇溶剂提取巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣获得，所述压榨残渣的油含量低于压榨前巴西坚果籽中的油含量，
其中所述提取物相对于提取物的干含量的总重量包含至少1.5重量％，优选至少1.8重量％，更优选至少2重量％，特别是至少3重量％的一种或多种多酚，其中残余油含量相对于压榨前的巴西坚果籽大于15重量％且小于50重量％。
2.根据权利要求1所述的提取物，其中所述提取物中的固体含量占提取物总重量的至少0.1重量％，优选至少0.5重量％，更优选至少1重量％，甚至更优选至少1.5重量％。
3.根据权利要求1或2中任一项所述的提取物，其中所述至少部分脱油的压榨残渣是自压榨的新鲜巴西坚果籽中获得的。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的提取物，其中所述至少一种醇或水醇溶剂选自由以下组成的组：乙醇、甲醇、丙醇、丁醇、戊醇、苯酚、甘油、1,3-丁二醇、丙二醇及其两种或更多种的混合物以及其一种或更多种与水或水性缓冲液的混合物。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的提取物，其中所述至少一种醇或水醇溶剂是乙醇、乙醇和水的混合物、或乙醇和水性缓冲液的混合物。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的提取物，其中所述溶剂是含有10-90％(v/v)的醇，或含有25-85％(v/v)的醇，或含有50-82％(v/v)的醇，或含有60-80％(v/v)的醇，或含有65-75％(v/v)的醇，或含有约70％(v/v)的醇的醇/水混合物。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的提取物，其中所述至少部分脱油的压榨残渣相对于压榨前的巴西坚果籽包含大于15至45重量％，优选20至45重量％，更优选20至40重量％，特别是20至35重量％的残余油含量。
8.一种制备巴西坚果籽的提取物的方法，包括以下连续步骤：
(i)提供巴西坚果籽，优选来自新鲜籽，的至少部分脱油的压榨残渣，其相对于压榨前的巴西坚果籽包含大于15重量％且小于50重量％的残余油含量，其中所述至少部分脱油的压榨残渣任选地被干燥；
(ii)使脱油的压榨残渣与至少一种醇或水醇溶剂接触；
(iii)使脱油的压榨残渣在至少一种醇或水醇溶剂内，在15至30℃、优选在18至25℃下均化30分钟至2小时；
(iv)从步骤(iii)的固体残渣中分离提取物，优选通过过滤或离心的方式；以及(v)通过除去至少一种溶剂或其部分来浓缩提取物。
9.一种通过权利要求8的方法能够获得的提取物，优选地，其中所述提取物具有权利要求1至7中任一项的特征。
10.一种美容或药物组合物，包含：
(A)至少一种权利要求1至7或9中任一项所述的巴西坚果籽的提取物作为活性成分；和
(B)除所述巴西坚果籽提取物之外的至少一种其他的美容和/或药学上可接受的成分，
优选地，其中所述组合物是用于局部使用的组合物，所述组合物选自由溶液、悬浮液、乳液、霜剂、糊剂、凝胶、洗液、粉末、肥皂、含表面活性剂的水、油、香波和喷雾剂组成的组，或者其中所述组合物是口服施用的营养组合物。
11.根据权利要求10所述的美容或药物组合物，其中所述组合物相对于组合物的总重量包含0.0001至20重量％，更优选0.001至15重量％，甚至更优选0.005至10重量％，特别是0.01至5重量％的所述至少一种巴西坚果籽的提取物。
12.根据权利要求1至7或9中任一项所述的巴西坚果籽的提取物或根据权利要求10或11中任一项所述的美容或药物组合物，用于增强、用于保持和/或恢复皮肤屏障功能、改善皮肤水合作用、预防和/或缓解皮肤老化、和/或减轻和/或预防皮肤病症或损伤中的用途。
13.根据权利要求12所述的用途，其中所述用途用于组织护理，优选其中所述用途用于改善选自由以下组成的组的组织状况：干燥、发红、异常色素沉着和皮脂失调、瘙痒和炎症、特应性皮炎、银屑病、白癜风、系统性红斑狼疮、鱼鳞病和皮肤老化。
14.根据权利要求12或13中任一项所述的用途，其中：
(a)所述组织选自由以下组成的组：存在于皮肤和头皮中的组织，特别是真皮组织、表皮组织、皮下组织及其两种或更多种的组合；和/或
(b)所述皮肤选自受损皮肤、干性皮肤、健康皮肤、正常皮肤和油性皮肤。
15.根据权利要求12至14中任一项所述的用途，其中所述用途用于：
(a)刺激皮肤脂质代谢，优选胆固醇、脂肪酸、鞘脂和/或神经酰胺代谢；
(b)促进表皮增殖和/或表皮分化；
(c)调节角质细胞的内聚和/或细胞骨架；和/或
(d)通过抑制炎症小体和促炎分子的活化来调节炎症过程。
16.一种通过用至少一种醇或水醇溶剂提取巴西坚果籽的至少部分脱油的压榨残渣能够获得的巴西坚果籽的提取物的用途，所述压榨残渣具有压榨前巴西坚果籽中油含量的0-50重量％的残余油含量，其中所述提取物相对于提取物干含量的总重量包含至少1.5重量％，优选至少1.8重量％，更优选至少2重量％，特别是至少3重量％的一种或多种多酚，所述用途用于增强、用于保持和/或恢复皮肤屏障功能、改善皮肤水合作用、预防和/或缓解皮肤老化、和/或减轻和/或预防皮肤病症或损伤。
CN202280013510.5A 2021-02-04 2022-01-17 巴西坚果提取物及其用途 Pending CN117295484A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP21305152.7 2021-02-04
EP21305152 2021-02-04
PCT/EP2022/050828 WO2022167202A1 (en) 2021-02-04 2022-01-17 Bertholletia excelsa extract and use thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN117295484A true CN117295484A (zh) 2023-12-26

Family

ID=74661323

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280013510.5A Pending CN117295484A (zh) 2021-02-04 2022-01-17 巴西坚果提取物及其用途

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20240091132A1 (zh)
EP (1) EP4288024A1 (zh)
JP (1) JP2024506893A (zh)
KR (1) KR20230154821A (zh)
CN (1) CN117295484A (zh)
WO (1) WO2022167202A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117398318B (zh) * 2023-10-27 2024-04-05 广州瑞誉化工科技有限公司 一种含有酵母菌发酵溶胞产物滤液的组合物及其应用

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2752527B1 (fr) 1996-08-22 1998-11-13 Lvmh Rech Utilisation d'un extrait de bertholletia dans le domaine cosmetique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, et pour la preparation de milieux de culture de cellules
FR2730635B1 (fr) 1995-02-17 1997-05-09 Lvmh Rech Composition cosmetique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, contenant un extrait de bertholletia
US6471972B1 (en) 1996-11-07 2002-10-29 Lvmh Recherche Cosmetic treatment method for fighting against skin ageing effects
FR2911779B1 (fr) 2007-01-30 2009-04-24 Lvmh Rech Composition contenant un extrait d'ambre
WO2009082796A1 (en) 2007-12-28 2009-07-09 Instituto Nacional De Pesquisa Da Amazônia - Inpa Cosmetic composition comprising plant extracts and preparation method of the same
US20140190507A9 (en) 2012-06-04 2014-07-10 Jean Harry Xavier Compositions And Methods For Enhancing The Structure Of Hair Fibers
DE102016009036A1 (de) 2016-07-25 2018-01-25 Ana Luisa Schulze zur Wiesche Kosmetisches oder dermatologisches Mittel mit Paranussöl und Paranussprotein gegen trockene und schuppige Haut
KR101987421B1 (ko) 2017-01-09 2019-06-12 주식회사 아미코스메틱 브라질넛씨 오일, 아프리칸월넛 오일, 망고 추출물 및 딸기 추출물을 포함하는 항산화 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물
CN111973496A (zh) * 2019-12-05 2020-11-24 上海遇鑫生物科技有限公司 一种海藻保湿补水面膜及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
JP2024506893A (ja) 2024-02-15
KR20230154821A (ko) 2023-11-09
US20240091132A1 (en) 2024-03-21
WO2022167202A1 (en) 2022-08-11
EP4288024A1 (en) 2023-12-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20180344623A1 (en) Synergistic extract of palmaria palmata and jasmine, compositions comprising same and uses thereof
EP3402502A1 (fr) Principe actif obtenu a partir d&#39;ophiopogon japonicus
KR102271001B1 (ko) 고전압 펄스 전기장 처리를 이용한 차가버섯 추출물의 제조방법 및 이를 포함하는 화장료 조성물
JP6591963B2 (ja) ラクトバチルス・ペントーサスの化粧品及び薬品への適用
EP3280497A1 (fr) Extrait hydro-alcoolique de schinus molle, compositions cosmetiques le comprenant et leurs utilisations cosmetiques
JP2011088845A (ja) インボルクリン発現抑制剤
KR102286990B1 (ko) 바쿠치올을 함유하는 나노에멀젼을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물
CN117295484A (zh) 巴西坚果提取物及其用途
WO1992021322A1 (fr) Composition cosmetique ou pharmaceutique notamment, dermatologique, contenant un extrait de brunelle
KR101204858B1 (ko) 피부 주름 개선용 화장료 조성물
KR102075849B1 (ko) 흑효모 균체 추출물을 유효성분으로 함유하는 보습, 항염 및 피부장벽강화용 조성물
KR101724146B1 (ko) 생약 추출물을 포함하는 피부 각질 제거용 화장품 조성물
FR3013985A1 (fr) Compositions hydratantes comprenant au moins un extrait de caesalpinia spinosa, avec au moins de la vaseline et de la glycerine
KR101552472B1 (ko) 항산화 및 미백 활성이 증진된 굴 추출물의 제조방법
KR101512064B1 (ko) 알러지 성분이 제거된 분리정제봉독을 이용한 기능성 봉독 화장품 조성물의 제조방법
KR102196414B1 (ko) 지의류 유래 미네랄 및 갈락토미세스 복합 발효물을 함유하는 화장료 조성물
KR20220120948A (ko) 율피, 백지, 마치현, 행인, 및 상백피 발효 추출물을 포함하는 기미, 주근깨, 미백 및 주름 개선용 화장료 조성물 및 이의 제조 방법
KR20160014315A (ko) 호두 및 밤 복합 발효추출물의 나노 에멀젼을 함유하는 피부의 노화방지 및 주름개선용 화장료 조성물
JPH1171292A (ja) 皮膚外用剤
CN114262360B (zh) 一种带鱼抗氧化肽及其抗氧化面霜
JP7162803B2 (ja) 発毛及び／又は育毛用組成物
JP7241212B2 (ja) 酵母加水分解物を含む化粧品組成物
JP7455350B2 (ja) 大気汚染物質によるダメージ抑制剤、化粧料及び飲食品
WO2022004631A1 (ja) 皮膚改善用組成物
KR100505818B1 (ko) 고산홍경천 추출물 함유 두발화장품 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination