CN117137932B - 一种用于肿瘤的中药复方制剂及其应用 - Google Patents
一种用于肿瘤的中药复方制剂及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117137932B CN117137932B CN202311353337.6A CN202311353337A CN117137932B CN 117137932 B CN117137932 B CN 117137932B CN 202311353337 A CN202311353337 A CN 202311353337A CN 117137932 B CN117137932 B CN 117137932B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dma
- cells
- group
- concentration
- idb
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 61
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 29
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N (3z)-3-(3-oxo-1h-indol-2-ylidene)-1h-indol-2-one Chemical compound N/1C2=CC=CC=C2C(=O)C\1=C1/C2=CC=CC=C2NC1=O CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N 0.000 claims abstract description 107
- OFEZSBMBBKLLBJ-BAJZRUMYSA-N cordycepin Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)C[C@H]1O OFEZSBMBBKLLBJ-BAJZRUMYSA-N 0.000 claims abstract description 64
- KQLDDLUWUFBQHP-UHFFFAOYSA-N Cordycepin Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OCC(CO)C1O KQLDDLUWUFBQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 51
- OFEZSBMBBKLLBJ-UHFFFAOYSA-N cordycepine Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)CC1O OFEZSBMBBKLLBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 51
- CRDNMYFJWFXOCH-BUHFOSPRSA-N Couroupitine B Natural products N\1C2=CC=CC=C2C(=O)C/1=C1/C2=CC=CC=C2NC1=O CRDNMYFJWFXOCH-BUHFOSPRSA-N 0.000 claims abstract description 49
- CRDNMYFJWFXOCH-UHFFFAOYSA-N isoindigotin Natural products N1C2=CC=CC=C2C(=O)C1=C1C2=CC=CC=C2NC1=O CRDNMYFJWFXOCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 49
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 47
- OGGXGZAMXPVRFZ-UHFFFAOYSA-N dimethylarsinic acid Chemical compound C[As](C)(O)=O OGGXGZAMXPVRFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims abstract description 10
- -1 dimethyl arsine Chemical compound 0.000 claims description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 25
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 20
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 abstract description 7
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 7
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 abstract description 7
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 abstract description 7
- 208000003200 Adenoma Diseases 0.000 abstract description 6
- 206010001233 Adenoma benign Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 abstract description 6
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 abstract description 6
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 abstract description 6
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 abstract description 6
- 206010033701 Papillary thyroid cancer Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 abstract description 6
- 201000005746 Pituitary adenoma Diseases 0.000 abstract description 6
- 206010061538 Pituitary tumour benign Diseases 0.000 abstract description 6
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 abstract description 6
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 abstract description 6
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 abstract description 6
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000021310 pituitary gland adenoma Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000030045 thyroid gland papillary carcinoma Diseases 0.000 abstract description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 5
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 95
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 34
- 229910052957 realgar Inorganic materials 0.000 description 32
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 29
- 208000036762 Acute promyelocytic leukaemia Diseases 0.000 description 21
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 16
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 16
- RQNWIZPPADIBDY-UHFFFAOYSA-N arsenic atom Chemical compound [As] RQNWIZPPADIBDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 14
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 14
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 14
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 102000015792 Cyclin-Dependent Kinase 2 Human genes 0.000 description 11
- 108010024986 Cyclin-Dependent Kinase 2 Proteins 0.000 description 11
- JPXMTWWFLBLUCD-UHFFFAOYSA-N nitro blue tetrazolium(2+) Chemical compound COC1=CC(C=2C=C(OC)C(=CC=2)[N+]=2N(N=C(N=2)C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 JPXMTWWFLBLUCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 11
- 101001046686 Homo sapiens Integrin alpha-M Proteins 0.000 description 10
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 description 10
- 229910052785 arsenic Inorganic materials 0.000 description 10
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 10
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 10
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 10
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 9
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 9
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 7
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 7
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 7
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 7
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 6
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 6
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 6
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 6
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 6
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 108010006693 promyelocytic leukemia-retinoic acid receptor alpha fusion oncoprotein Proteins 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 6
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 5
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 5
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241001264174 Cordyceps militaris Species 0.000 description 4
- 230000010190 G1 phase Effects 0.000 description 4
- QQILFGKZUJYXGS-UHFFFAOYSA-N Indigo dye Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(C3=C(C4=CC=CC=C4N3)O)=NC2=C1 QQILFGKZUJYXGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000033826 Promyelocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 4
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 4
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 4
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 3
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 208000034951 Genetic Translocation Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 3
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 3
- HJTAZXHBEBIQQX-UHFFFAOYSA-N 1,5-bis(chloromethyl)naphthalene Chemical compound C1=CC=C2C(CCl)=CC=CC2=C1CCl HJTAZXHBEBIQQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 2
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 2
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 101001095089 Homo sapiens PML-RARA-regulated adapter molecule 1 Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 102100037019 PML-RARA-regulated adapter molecule 1 Human genes 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 2
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 2
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 2
- GOLCXWYRSKYTSP-UHFFFAOYSA-N arsenic trioxide Inorganic materials O1[As]2O[As]1O2 GOLCXWYRSKYTSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 231100000357 carcinogen Toxicity 0.000 description 2
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 2
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 239000008358 core component Substances 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 238000001095 inductively coupled plasma mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N phorbol 13-acetate 12-myristate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N 0.000 description 2
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 2
- 239000009386 qinghuang Substances 0.000 description 2
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 231100000195 subchronic toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000007666 subchronic toxicity Effects 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 238000012406 Annexin V-FITC/PI double staining Methods 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 229940124294 CD33 monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 229940126074 CDK kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101100439046 Caenorhabditis elegans cdk-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 206010048610 Cardiotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 102000003909 Cyclin E Human genes 0.000 description 1
- 108090000257 Cyclin E Proteins 0.000 description 1
- 102100034770 Cyclin-dependent kinase inhibitor 3 Human genes 0.000 description 1
- 102000003903 Cyclin-dependent kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000266 Cyclin-dependent kinases Proteins 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 108010040476 FITC-annexin A5 Proteins 0.000 description 1
- 230000035519 G0 Phase Effects 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710088172 HTH-type transcriptional regulator RipA Proteins 0.000 description 1
- 206010019851 Hepatotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 101000945639 Homo sapiens Cyclin-dependent kinase inhibitor 3 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000000177 Indigofera tinctoria Nutrition 0.000 description 1
- ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N NADPH Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 229940122907 Phosphatase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 101150016155 Pml gene Proteins 0.000 description 1
- 102100026375 Protein PML Human genes 0.000 description 1
- 101150066717 Rara gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 102100023606 Retinoic acid receptor alpha Human genes 0.000 description 1
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 1
- 206010059516 Skin toxicity Diseases 0.000 description 1
- 208000000389 T-cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 229950004243 cacodylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000259 cardiotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 238000002782 cell morphology assay Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000024207 chronic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 239000002875 cyclin dependent kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940043378 cyclin-dependent kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000012137 double-staining Methods 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 238000003255 drug test Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007686 hepatotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000001927 high performance liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003463 hyperproliferative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229940097275 indigo Drugs 0.000 description 1
- COHYTHOBJLSHDF-UHFFFAOYSA-N indigo powder Natural products N1C2=CC=CC=C2C(=O)C1=C1C(=O)C2=CC=CC=C2N1 COHYTHOBJLSHDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 206010024378 leukocytosis Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- JTJMJGYZQZDUJJ-UHFFFAOYSA-N phencyclidine Chemical compound C1CCCCN1C1(C=2C=CC=CC=2)CCCCC1 JTJMJGYZQZDUJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002644 phorbol ester Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 210000000557 podocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 238000002331 protein detection Methods 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010814 radioimmunoprecipitation assay Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 102000037983 regulatory factors Human genes 0.000 description 1
- 108091008025 regulatory factors Proteins 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 108091008726 retinoic acid receptors α Proteins 0.000 description 1
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 231100001251 short-term toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000438 skin toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 231100000212 subchronic toxicity study Toxicity 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 201000010653 vesiculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/28—Compounds containing heavy metals
- A61K31/285—Arsenic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
- A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
Abstract
本发明属于医药技术领域，具体公开了一种用于肿瘤的中药复方制剂及其应用，该中药复方制剂包括二甲基胂酸、靛玉红和虫草素，所述二甲基胂酸、靛玉红和虫草素的浓度比为1‑20:1‑10:1‑40。本发明的中药复方制剂可以用于治疗多种肿瘤，包括白血病、胃癌、肺癌脑胶质瘤、甲状腺乳头状癌、生长激素腺瘤、垂体腺瘤、骨髓瘤等多种恶性肿瘤，治疗效果显著且安全性高，具有较好的开发前景。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体来说，涉及一种用于肿瘤的中药复方制剂及其应用。
背景技术
细胞周期失调在肿瘤的发生中起到了重要的作用。细胞周期蛋白依赖型激酶2(CDK2)可以与细胞周期蛋白(Cyclin)形成复合物，被认为是细胞周期G1期向S期转变的主要限速因子，其过表达可加速S期进程，使细胞过度增殖(Cyclin-dependent kinase2protects podocytes from apoptosis,Saurus et al,Sci Rep,2016,15,doi:10.1038/srep21664.)。p27是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子，有研究表明p27蛋白主要抑制CyclinE/CDK2等激酶复合物，在细胞中的低表达或表达缺失可能引起肿瘤的发生(CyclinE/CDK2及p27在胃癌细胞周期G1/S调控中的研究,张桂东等,现代中西医结合杂志,2014,23(3):251-253)。大量研究表明p27和CDK2在胃癌、肺癌、脑胶质瘤、甲状腺乳头状癌、生长激素腺瘤、垂体腺瘤、骨髓瘤等多种肿瘤疾病的发生发展中起到了重要的作用。
白血病是一种造血系统的恶性肿瘤，分为急性和慢性两种类型，且根据细胞系列的不同，急性白血病又分为急性髓性白血病(Acute Myeloid Leukemia，AML)和急性淋巴细胞性白血病(Acute Lymphoid Leukemia，ALL)。其中急性早幼粒细胞白血病(AcutePromyelocytic Leukemia，APL)是急性髓系白血病的M3型，是第一种针对肿瘤特异性标志分子进行治疗的恶性肿瘤，95％以上的APL患者具有特征性的非随机染色体易位，发生机制为t(15；17)特异性染色体易位形成PML-RARa融合基因，其蛋白产物引起细胞分化阻滞和凋亡不足，APL约占同期AML的10-15％。
(“中国急性早幼粒细胞白血病诊疗指南”，中华医学会血液学分会，中华血液学杂志，第39卷第3期，第179-183页，2018年3月)给出APL的治疗以全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)+砷剂为首选方案，ATRA+砷剂(亚砷酸、复方黄黛片)治疗方案疗效显著，五年无病生存率高达90％以上。目前已成为临床治疗APL的一线方案。但是，现今临床使用的砷剂在治疗过程中存在着不同程度安全性问题，尤其是静脉给予的砷剂(三氧化二砷)，可引起心脏毒性、神经毒性、皮肤毒性、肝毒性、以及骨髓移植及白细胞增多等多种不良反应，因此，相较于静脉用药，口服给药无论是从患者的适应度、耐药性还是性价比方面均存在较高优势。
口服砷剂青黄散由雄黄和青黛两味药组成。青黛中所含的主要成分有靛玉红(Indirubin，IDB)和靛蓝，雄黄中主要含有二硫化二砷。对雄黄口服后体内砷代谢物的研究中发现，单次给予或反复给予雄黄后血液中二甲基胂酸(Dimethylarsenic acid，DMA)的含量最高，且DMA的分布存在着明显的脏器差异，即血液中DMA的分布最高，肝脏和肾脏中其含量约为血液中含量的1/10，而脑组织中的含量又为肝脏肾脏中含量的1/10(Study of theaccumulation and distribution of arsenic species and association with arsenictoxicity in rats after 30days of oral realgar administration,Yi Y et al,Journal of Ethnopharmacology,247,2018,DOI:10.1016/j.jep.2018.10.037)。而与三价砷和五价砷相比，DMA的毒性相对较低，三氧化二砷的LD50为20-50mg/kg，而DMA的LD50>1000mg/kg(雄黄中砷的不同形态及其毒性研究进展，高双荣等，中国实验方剂学杂志，第17卷第24期，243-247，2011年12月)，因此提示相较于三氧化二砷，DMA是一种毒性相对较低且可能对APL存在着一定的治疗前景的化合物。
虫草素(Cordycepin，CDY)为蛹虫草的核心成分，具有抗炎、抗肿瘤和免疫调节等多种药理活性。早在1997年，美国开始将虫草素用于I期临床实验，用于治疗急性前B和前T淋巴细胞白血病，且目前已通过II期临床(Synergistic property of cordycepin incultivated Cordyceps militaris-mediated apoptosis in human leukemia cells,Chou S et al,Phytomedicine,2014,21(12):1516-1524.)。因此虫草素在白血病的治疗中也存在着一定的应用前景。
基于现有技术在治疗肿瘤方面的安全性和治疗效果不能同时兼顾，开发一种安全性相对较高且对多种肿瘤均有明显治疗作用的口服制剂是有必要的。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种用于肿瘤的中药复方制剂及其应用，该复方制剂安全性相对较高，对多种肿瘤细胞具有潜在的治疗作用，无论从治疗效果还是药物安全性，该复方制剂均有较好的开发前景。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一方面，本发明提供了一种用于肿瘤的中药复方制剂DCI，包括二甲基胂酸、靛玉红和虫草素。
二甲基胂酸DMA为中药雄黄的体内分布含量较高的(尤其是在血液中)砷代谢物，靛玉红为中药青黛的主要活性成分，虫草素为中药蛹虫草的核心成分。
优选地，所述二甲基胂酸、靛玉红和虫草素的浓度比为1-20:1-10:1-40。
进一步优选地，所述二甲基胂酸、靛玉红和虫草素的浓度比为1-20:1-10:1-10。
最优选地，所述二甲基胂酸、靛玉红和虫草素的浓度比为1:1:1。
优选地，所述二甲基胂酸的浓度为10μM-40μM，靛玉红的浓度为10μM-40μM，虫草素的浓度为10μM-40μM。
进一步优选地，所述二甲基胂酸的浓度为10μM-20μM，靛玉红的浓度为10μM-20μM，虫草素的浓度为10μM-20μM。
本发明还提供了一种上述的中药复方制剂在制备抑制肿瘤细胞增殖的药物中的应用。
本发明还提供了一种上述的中药复方制剂在制备治疗肿瘤药物中的应用。
优选地，所述肿瘤包括白血病、胃癌、肺癌、脑胶质瘤、甲状腺乳头状癌、生长激素腺瘤、垂体腺瘤或骨髓瘤。
本发明所述的中药复方制剂DCI在治疗APL时，通过抑制NB4细胞增殖，诱导其分化凋亡，降低PML-RARα融合蛋白表达，以达到治疗APL的目的；本发明所述的中药复方制剂在治疗白血病、胃癌、肺癌、脑胶质瘤、甲状腺乳头状癌、生长激素腺瘤、垂体腺瘤、骨髓瘤等的作用机制为：DCI下调CDK2表达，上调P27表达，抑制细胞从G1到S期，进而抑制肿瘤细胞增殖，达到治疗以上各类恶性肿瘤的目的
另一方面，本发明提供了一种治疗肿瘤的药物，包括上述的中药复方制剂及药学上可接受的载体。
优选地，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、膏剂、口服液剂、丸剂或糖浆剂。
本发明的有益效果为：
(1)本发明的中药复方制剂DCI可以用于治疗多种肿瘤，包括白血病(以APL为主)、胃癌、肺癌、脑胶质瘤、甲状腺乳头状癌、生长激素腺瘤、垂体腺瘤、骨髓瘤等。
(2)本发明所述的中药复方制剂DCI在治疗APL时，通过抑制NB4细胞增殖，诱导其分化凋亡，降低PML-RARα融合蛋白表达，以达到治疗APL的目的；本发明所述的中药复方制剂在治疗白血病、胃癌、肺癌、脑胶质瘤、甲状腺乳头状癌、生长激素腺瘤、垂体腺瘤、骨髓瘤等的作用机制为：DCI下调CDK2表达，上调P27表达，抑制细胞从G1到S期，进而抑制肿瘤细胞增殖，达到治疗以上各类恶性肿瘤的目的。
(3)本发明的中药复方制剂DCI是以青黄散为复方基础，包含雄黄给药后的6种砷代谢物之一的二甲基胂酸DMA，以及青黛主要有效成分靛玉红(IDB)，配伍具有潜在抗肿瘤作用的蛹虫草的核心成分虫草素(CDY)。DMA在前期研究发现其在血液中分布的所有砷代谢物中含量最高，且存在脏器分布差异性(分布情况：血液>肝脏或肾脏>脑)，且LD50>1000mg/kg，是一种毒性相对较低且对APL存在治疗前景的化合物。IDB和CDY均报道对多种肿瘤细胞有潜在的治疗作用，其中CDY目前在美国已通过急性前B和前T淋巴细胞白血病的II期临床，且未见明显不良反应报道。因此中药复方制剂DCI毒性相对较低且存在抗肿瘤作用，具有较好的开发前景。
附图说明
图1为DMA、CDY和IDB三种化合物不同组合处理NB4细胞后NBT阳性率结果图，其中A为生理盐水对照组，B为ATO组，C为DMA组，D为IDB组，E为CDY组，F为DMA+CDY组，G为DMA+IDB组，H为CDY+IDB组，I为DCI组。
图2为DMA、CDY和IDB三种化合物不同组合处理后NB4细胞的形态图，其中A为生理盐水对照组，B为ATO组，C为DMA组，D为IDB组，E为CDY组，F为DMA+CDY组，G为DMA+IDB组，H为CDY+IDB组，I为DCI组。图3为DMA、CDY和IDB三种化合物不同组合处理NB4细胞24h和96h后PML-RARα融合蛋白降解图，A为生理盐水对照组，B为ATO组，C为DMA组，D为CDY组，E为IDB组，F为DMA+CDY组，G为DMA+IDB组，H为CDY+IDB组，I为DCI组；GAPDH为内参。
图4为DMA、CDY和IDB三种化合物不同组合处理NB4细胞24h和96h后对细胞周期调控因子的作用图，A为生理盐水对照组，B为ATO组，C为DMA组，D为CDY组，E为IDB组，F为DMA+CDY组，G为DMA+IDB组，H为CDY+IDB组，I为DCI组；GAPDH为内参。
图5为在生存实验中不同剂量的DMA对荷NB4小鼠的生存期和体重的影响图。
图6为在生存实验中不同剂量的DMA对荷NB4小鼠生存期的影响图，A：各组的生存期结果图；B：各组生存期延长率结果图；与对照组相比，*p<0.05，**p<0.01。图7为在生存实验中不同剂量的DMA对荷NB4小鼠体重的影响图(对照组动物存活状态下)，与对照组相比，*p<0.05。
图8为给予雄黄60天、90天、停药恢复30天和60天时间点DMA在大鼠血液中的蓄积图，与同时间点的对照组相比，1)p<0.05，2)p<0.01，3)p<0.001。
图9为给予雄黄60天、90天、停药恢复30天和60天时间点DMA在大鼠肝脏中的蓄积图，与同时间点的对照组相比，1)p<0.05，2)p<0.01，3)p<0.001。
图10为给予雄黄60天、90天、停药恢复30天和60天时间点DMA在大鼠肾脏中的蓄积图，与同时间点的对照组相比，1)p<0.05，2)p<0.01，3)p<0.001。
图11为给予雄黄60天、90天、停药恢复30天和60天时间点DMA在大鼠脑组织中的蓄积图，与同时间点的对照组相比，1)p<0.05，2)p<0.01，3)p<0.001。
图12为给予雄黄60天、90天、停药恢复30天和60天时间点DMA在大鼠尿液中的蓄积图，与同时间点的对照组相比，1)p<0.05，2)p<0.01，3)p<0.001。
图13为给予雄黄90天以及停药恢复60天后大鼠肝脏和肾脏组织的病理学结果图，A：给药90天对照组的肝组织；B：给药90天雄黄高剂量组的肝组织，黑色矩形框区域表示肝组织中局灶性轻度的炎性细胞浸润；C：停药恢复60天雄黄高剂量组的肝组织；D：给药90天对照组的肾组织；E：给药90天雄黄高剂量组的肾组织，黑色矩形框区域表示肾组织中局灶性肾小管轻度变性；F：停药恢复60天雄黄高剂量组的肾组织；HE染色，bar显示为20μm。
具体实施方式
以下实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。对所公开的实施例的下述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例中，而是可以应用于符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的更宽的范围。虽然在本发明的实施或测试中可以使用与本发明中所述相似或等价的任何方法和材料，本文在此处列举优选的方法和材料。
除非另外定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同意义。
需要说明的是，
1、实验中用到的原料和仪器信息如下：
二甲基胂酸(DMA)购自的德国Ehrenstorfer标准品公司，用无菌试验用水溶解配置，储存浓度为1mM(M即mol/L)，保存于-20℃备用。
靛玉红(IDB)购自中国食品药品检定研究院，溶解于二甲基亚砜，0.22μM过滤器过滤，储存浓度为5mM，保存于-20℃备用。
虫草素(CDY)同样购自中国食品药品检定研究院，用无菌试验用水溶解配置，储存浓度为1mM，保存于-20℃备用。
RPMI1640粉末和青霉素-链霉素双抗为Gibco产品，胎牛血清为Hyclone产品，显微镜为日本奥林巴斯生产，流式细胞仪为Luminex-Guava系列。
2、细胞来源和细胞培养
(1)NB4细胞：又称人急性早幼粒细胞白血病细胞，是1991年建株于一个二次复发的APL女性患者的白血病细胞，具有特征性的染色体异位t(15：17)和由此所致的PML-RARα融合基因，是研究APL的理想体外细胞模型，购自北纳生物。
(2)细胞培养：以5×105个/孔的起始浓度(6孔板每孔的细胞悬液为3mL)接种于含10％胎牛血清和1％双抗的RPMI1640细胞培养液中，37℃、5％CO2饱和湿度条件下常规培养。在对数生长期，使用药物处理，药物处理时间根据试验目的进行调整。
实施例1ANNEXIN V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率
ANNEXIN V-FITC/PI双染色法是根据凋亡细胞出现细胞膜的不对称性丧失，即磷脂酰丝氨酸由膜内向膜外翻转原理所建立，其结果判断为正常活细胞为annexin V-PI-，凋亡细胞为annexin V+PI-，坏死细胞或凋亡晚期细胞为annexin V+PI+。
(1)实验方法：
取对数生长期的NB4细胞以1×105个/孔的密度接种于6孔板内，24h后开始给药。按表1各组的给药方法检测各组促凋亡作用。药物处理24h后收集细胞，按照ANNEXIN V-FITC/PI凋亡检测试剂盒(购自solarbio)操作流程，于流式细胞仪上进行检测。实验重复3次。结果如表1所示。
(2)实验结果：
表1各组用于NB4细胞对细胞凋亡率的影响
注：与生理盐水对照组相比，*P<0.05,**P<0.01，***P<0.001
根据上表数据可知，单独给予三种化合物，DMA与IDB在浓度高于20μM时促凋亡作用较对照组显著增高(p<0.05)，存在剂量依赖关系；三种化合物联合使用的时候凋亡率最高，明显高于DMA单用的凋亡率，也明显高于三种化合物两两联用的凋亡率，提示三种化合物合用时促凋亡作用最强，缺一不可，缺少其中任一化合物其促细胞凋亡的作用明显降低，且三种化合物在等倍配比条件下促凋亡作用最明显，像样本16的促凋亡作用明显优于样本22，样本17的促凋亡作用明显优于样本10、11和12，样本18的促凋亡作用明显优于样本7、8和9。但是在浓度20μM开始，便可在显微镜下观察到少量的细胞破碎现象，且当浓度进一步升高(>20μM)，凋亡中早调比例明显降低，而晚调比例明显增高，晚调意味着细胞会出现大量死亡，因此在之后的实验中，对于三种化合物合用，当实验时间较短(≤24h)，推荐的浓度为20μM，当实验时间相对较长时(超过48h)，推荐的浓度为10μM。选择阳性药的原理与受试物的相一致，即阳性药5μM组中可见大部分凋亡均属于晚调而非早调，因此在实验时间较短时阳性药的剂量规定为2μM，而当实验时间相对较长时(超过48h)，阳性药的剂量设置为0.5μM。
实施例2硝基蓝四氮唑(NBT)还原实验
正常的中性粒细胞或分化细胞通过激发，细胞内的超氧阴离子产生增多，NBT在分化细胞中接受来自NADPH的氢，还原成不溶性的蓝黑色或蓝紫色颗粒-甲簪颗粒，可在显微镜下清楚观察到色斑并定量计数阳性细胞的百分率，以考察给药后对细胞分化的影响。
(1)实验方法：
取对数生长期的NB4细胞，以2×105个/孔的密度接种于6孔板内，24h后开始给药。按表2分别给予阳性药ATO，DMA，IDB，CDY，以及DMA联用IDB，DMA联用CDY，IDB联用CDY和三种化合物合用(DCI)，连续加药10天，且在加药期间单孔细胞密度始终控制在5×105个/孔以下。在末次加药24h后去掉培养液后用PBS洗涤2次，每孔加入含1μg/ml的佛波酯(PMA，购自sigma)的0.1％NBT溶液(购自sigma，由PBS配制)500μL，37℃孵育30分钟，再用PBS洗涤2遍，于显微镜下进行观察。于400倍放大视野中，每份标本随机计数200个细胞，胞浆中含有灰色或是黑色的甲簪颗粒的细胞计为NBT还原阳性细胞，并计算其还原阳性细胞百分率。实验重复3次。具体结果如表2和图1所示。
(2)实验结果：
表2DMA、CDY和IDB三种化合物不同组合处理NB4细胞后NBT还原阳性率结果(X±SD)
注：与生理盐水对照组相比，*P<0.05,**P<0.01，***P<0.001
NBT还原实验中其细胞的形态学和计数结果提示DMA、IDB和CDY单独给药组的NBT还原率分别增加了30.24％、15.20％和3.19％。两两配比组中DMA和CDY联合使用后NBT还原率相对较高，增加了36.97％，DMA和IDB联合使用增加了18.70％，IDB与CDY联合使用增加了20.70％。而与单用或两两联用相比，三种化合物合用处理(DCI)后可显著提高NB4细胞的NBT还原能力(P<0.001)，增加了49.92％，提示三种化合物联用处理后促细胞分化作用最强，三者表现出很好的协同作用，缺少其中任一化合物其促细胞分化作用均明显降低。其中，单用DMA后在镜下可观察到较多的细胞碎片出现，提示虽然DMA单用具有一定的促细胞分化作用，但是会引起细胞受损破碎(图1中的C)。
实施例3细胞膜表面分化抗原的检测
APL细胞的免疫学标志检查为CD11b为阴性，CD33为阳性，表面抗原CD33与细胞的幼稚程度相关，而表面抗原CD11b与细胞的成熟程度相关，CD11b作为细胞表面的一种黏附分子，其高表达可能是细胞分化成熟的标志。如加药后降低CD33的表达，而增加CD11b的表达，提示药物可能有利于细胞的诱导分化。
(1)实验方法：
取对数生长期的NB4细胞以2×105个/孔的密度接种于6孔板内，24h后开始给药。按表3的给药剂量分别给予阳性药ATO，DMA，IDB，CDY，以及DMA联用IDB，DMA联用CDY，IDB联用CDY和三种化合物合用(DCI)，加药处理10天，单孔细胞密度控制在5×105个/孔以下。在末次加药24h后收集细胞离心去除培养基后用预冷的PBS洗涤两遍，重悬于100μL PBS中，分别加入APC(别藻蓝蛋白)和BB515标记的CD11b和CD33单克隆抗体和相应的同型抗体(均购于BD，美国)。混匀后，4℃孵育30min，过细胞滤膜后上机。具体结果如表3和表4所示。
(2)实验结果：
表3 DMA、CDY和IDB三种化合物不同组合处理NB4细胞后CD11b表达的阳性率统计结果(X±SD)
注：与生理盐水对照组相比，*P<0.05,**P<0.01，***P<0.001
表4 DMA、CDY和IDB三种化合物不同组合处理NB4细胞后CD33表达的阳性率统计结果(X±SD)
注：与生理盐水对照组相比，*P<0.05,**P<0.01，***P<0.001
CD11结果：各组给药后CD11b的表达较对照组均明显增高，其中三种化合物合用的DCI配比组的CD11b表达最高，CD11b表达阳性率为45.96％，与对照组相比增加了5504.88％。提示三种化合物联合用药后其促进早幼及早中幼粒细胞分化成熟的作用最强，远高于单用或两两联用。
CD33结果：各组给药后CD33的表达较对照组均明显降低，其中三种化合物合用的DCI配比组的CD33表达最低，CD33表达阳性率17.64％，与对照组相比降低了128.12％。提示三种化合物联合用药后表现出的促进NB4细胞分化的作用最强，远高于单用或两两联用。
实施例4细胞形态学检测实验
(1)实验方法：
取对数生长期的NB4细胞以2×105个/孔的密度接种于6孔板内，24h后开始给药。按表2的剂量分别给予阳性药ATO，DMA，IDB，CDY，以及DMA联用IDB，DMA联用CDY，IDB联用CDY和三种化合物合用(DCI)，加药培养10天，单孔细胞密度控制在5×105个/孔以下。以110g、3min的离心条件对培养10天的NB4细胞进行离心，涂片，甲醇固定后自然晾干，之后用瑞氏-姬姆萨染料(Wright’s-Giemsa)对细胞涂片进行染色，进行细胞形态学观察。实验重复3次。结果如图2所示。
(2)实验结果：
单用DMA、IDB和CDY干预10天后，DMA组观察到少量细胞出现体积变小，核浆比例轻微降低；IDB组中个别细胞出现包膜不完整，有细胞破碎的现象；CDY组的所有细胞与对照组相比未见明显差异。
三种化合物两两联合的组中，DMA与CDY联用可观察到少量细胞的体积变小，核碎裂成多块弥散到胞浆中，但细胞膜较为完整，未见破碎现象。少数细胞的核浆比例轻微降低，核形态异常，不规律，呈肾形。DMA与IDB联用可观察到部分细胞的体积变小，核形态异常，呈肾形，少量细胞核染色质浓缩，碎裂成多块弥散在胞浆中。此外，少数细胞包膜不完整，有细胞破碎的现象。CDY与IDB联用观察到少数细胞的核浆比例轻微降低，部分细胞的胞浆中可见空泡。但细胞膜较为完成，体积也未见明显变小。
三种化合物合用的DCI组中观察到大部分细胞体积变小，核染色质浓缩明显，部分细胞的核形态不规律，呈肾形，核浆比例缩小明显，部分细胞的胞浆中可见空泡，即出现明显的分化现象。部分细胞膜不完整，呈细胞破碎现象。提示三种化合物合用后对细胞形态的影响最为明显，促细胞分化作用最强，缺少一个其作用明显降低。
实施例5Western blot法检测PML-RARα蛋白表达水平
95％以上APL患者具有特征性的非随机染色体易位t(15:17)，该易位使得15号染色体上面的PML基因和17号染色体的RARa基因发生融合，表达PML-RARa融合蛋白，研究表明促进PML-RARa蛋白的降解，可以有效治疗APL。因此在本发明中考察三种化合物合用后对于PML-RARa蛋白表达的影响。
(1)实验方法：
取对数生长期的NB4细胞以2×105个/孔的密度接种于6孔板内，单孔细胞密度控制在5×105个/孔以下，24h开始给药。分别给予阳性药ATO(24h为2μM，96h为0.5μM)，DMA，IDB，CDY，以及DMA联用IDB，DMA联用CDY，IDB联用CDY和三种化合物合用(DCI)，给药24h和给药96h的各组剂量如下表所示。
表5各组给药剂量
在试验结束时收集细胞，用预冷的PBS洗涤两遍，每孔加入200μL的蛋白裂解液(RIPA，内含1％的PMSF和1％的磷酸酶抑制剂)，轻轻混匀后静置5min，观察是否出现沉淀。10000rpm离心5min，取上清液，用BCA蛋白检测试剂盒检测蛋白浓度。向调整浓度的样本中加入上样缓冲液，沸水煮7min，分装，于-20℃保存或直接上样。
根据蛋白分子量的不同选择合适的凝胶浓度，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，首先应用80V电压进行分离，待溴酚蓝至分离胶后改用120V。应用湿转方法将凝胶中的条带转移到0.22μm的PVDF膜上，用5％脱脂奶粉或牛血清白蛋白BSA-PBST封闭2h后加一抗封闭过夜，一抗为PML和RARα鼠单克隆抗体(美国Santa Cruz生物技术公司)。4℃过夜孵育后弃掉一抗，用PBST洗膜3次，每次10min，用辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗(proteintech)室温孵育1.5h，之后再用PBST洗膜3次，每次10min。最后加入ECL显色液，在western blot成像仪(美国Protein-sample生物技术公司)显影。结果如图3所示。
(2)实验结果：
除给药24h的CDY 20μM组外，给予不同化合物以单用、两两联合使用和三种联合使用后PML-RARα的蛋白表达呈不同程度的明显降低，其中DCI组的蛋白表达降低的最为明显，与阳性药ATO组的降低程度基本相近，给药24h和96h的结果基本一致。提示三种化合物合用后促PML-RARα蛋白降解程度最高，缺乏其中任意一个化合物其促蛋白降解作用明显降低。
实施例6Western blot法检测细胞周期关键调控因子的蛋白表达
CDK2被认为是细胞周期G1期向S期转变的主要限速因子，其过表达可加速S期进程，使细胞过度增殖。p27是CDK的抑制剂，其表达可抑制从G1到S的进程。如果给药后上调NB4细胞的p27的表达，下调CDK2的表达，即可以抑制细胞进入S期。
(1)实验方法：
取对数生长期的NB4细胞以2×105个/孔的密度接种于6孔板内，单孔细胞密度控制在5×105个/孔以下，24h开始给药。分别给予阳性药ATO(24h为2μM，96h为0.5μM)DMA，IDB，CDY，以及DMA联用IDB，DMA联用CDY，IDB联用CDY和三种化合物合用(DCI)，给药剂量如表5所示。Western blot步骤与实施例5中PML-RARα蛋白表达检测基本相同，仅将一抗换为CDK2和p27鼠单克隆抗体(美国CST生物技术有限公司)，二者表达的上调或下调均可影响细胞周期，抑制从G1到S期的进程。结果如图4所示。
(2)实验结果：
给药24h和96h结果均表明除CDY单用组外，单用、两两联用或三者合用进行处理后均可不同程度的下调CDK2的蛋白表达，上调P27的蛋白表达，其中DCI组的蛋白变化最显著，其抑制效果既明显强于单独给药组，也明显强于两两联合应用组，提示这三种化合物联合使用在诱导NB4细胞G0/G1期阻滞中具有协同/累加效应，缺少任一化合物对蛋白表达的影响均明显降低。
以上是结合具体实施例对本发明进一步的描述，但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
实施例7腹腔给予DMA对荷瘤小鼠体重和生存期的影响
由于DMA属于2B类致癌物质，提示有可能的致癌作用，在安全性方面存在一定的隐患。因此设计短期毒性实验，考察DMA对荷瘤小鼠生存期的影响，在考察药效的同时对其安全性进行监测。
(1)实验方法
取对数生长期的NB4细胞，离心后重悬于无菌的磷酸盐缓冲液中并调整细胞浓度为8×107/mL，每只小鼠腹腔接种0.2mL瘤液，即每只小鼠接种1.6×107个NB4细胞，24h后进行实验分组治疗。SCID小鼠分为4组，分别为对照组、DMA50、10和5mg/kg组，每组10只。DMA用0.9％氯化钠溶液进行溶解，腹腔注射，隔天给药1次，共给药7次，对照组腹腔注射给予0.9％氯化钠溶液，给药体积为0.1ml/10g。
(2)实验结果
对照组的平均生存期是20-35天(30.2±4.2天)，给予DMA高、中、低剂量后生存期叫对照组均显著延长(p<0.05)，DMA50mg/kg组的生存期为42.4±13.2天，DMA10mg/kg组的生存期为43.6±11.1天，DMA5mg/kg组的生存期为39.6±10.3天，与对照组相比DMA各剂量组的生存期延长率分别为40.40％(50mg/kg)；44.37％(10mg/kg)；31.13％(5mg/kg)。结果表明DMA可以显著延长荷瘤小鼠的生存期，即DMA对荷NB4小鼠的腹水瘤具有一定的治疗作用，具体的结果见图5和图6。
此外，在实验过程中给予DMA后，除第13天DMA50和10mg/kg组的体重较对照组显著降低外，其他时间点DMA各剂量组与对照组相比体重均未见明显差异。因此我们认为在实验过程中给予DMA未见明显的毒性作用，具体的结果见图7。
实施例8长期给予雄黄后DMA在体内蓄积及致癌作用研究
前期研究发现，长期给予雄黄后砷会蓄积在血液、肝脏、肾脏、脑组织中，所引起的肝脏和肾脏的毒性作用可能与砷蓄积有关，而在砷代谢物中，DMA在组织脏器中的蓄积含量是相对较高的。鉴于DMA属于2B类致癌物质，故长期给予雄黄可能会存在一定的致癌风险。因此设计雄黄的亚慢性毒性实验，检测DMA在血液、肝脏、肾脏、脑组织的蓄积水平，同时考察当DMA在体内的浓度较高时，是否会产生致癌作用。
(1)实验方法
根据ICH M3亚慢性毒性实验指南，选择给药90天恢复60天进行雄黄的亚慢性毒性研究。实验动物为雄性Wistar大鼠，将近7周龄。参照2020版药物所记载的药量进行折算后，雄黄的临床最高等效量为1.7mg/kg/day，选择了10mg/kg(6倍等效量)、40mg/kg(24倍等效量)和170mg/kg(100倍等效量)进行实验。雄黄是用0.3％ CMC-Na溶液进行溶解，现用现配，配制成浓度为2mg/ml、8mg/ml和34mg/ml的溶液，口服灌胃给药，给药体积为5ml/kg，每天给药，同时对照组在给药过程中口服给予0.3％ CMC-Na溶液。每天给药后对动物的状态进行观察并记录，如出现异常死亡需及时记录。
分别在给药第60天、第90天，停药第30天和第60天进行取材。动物处死前禁食16h，同时收集尿液。动物在麻醉状态下，腹主动脉取血。之后摘取动物的主要脏器，包括心、肝、脾、肺、肾、脑、性腺等脏器，计算脏器指数：脏器指数(平均脏器重量％)＝[脏器重量(g)/禁食体重(g)]×100％，并通过固定-脱水-包埋-切片，进行HE染色，观察给药组的肝肾等组织是否诱发肿瘤，以评价其致癌作用。
此外，用HPLC-ICP-MS技术检测血、肝、肾、脑以及尿液中DMA的含量。首先用纯水制备DMA标准储备溶液，并在测试当天稀释为工作液。样品用盐酸酸化，加入IEX色谱柱洗脱后，得到洗脱液。鉴于DMA可被吸附到柱子上，加入纯水进行分离，通过收集解离液获得DMA。之后采用ICP-MS法检测组织样本中的DMA的含量，ICP-MS条件如下：射频功率1500W；取样深度8.0mm；载气流量0.9L/min；载气补偿空气流量0.3L/min。定量分析(模型)，积分时间2s，重复三次。
(2)实验结果
DMA在血液、尿液、肝脏、肾脏和脑组织中随着给药时间延长蓄积程度明显增加，停药后各组织中的DMA的蓄积程度虽然明显降低，但是仍然显著高于对照组。给药90天后血液中DMA的低、中、高剂量组分别是对照组的11.11、19.93和23.65倍，肝脏中DMA的低、中、高剂量组分别是对照组的12.58、17.75和28.79倍，肾脏中DMA的低、中、高剂量组分别是对照组的11.01、15.98和22.84倍，脑组织中DMA的低、中、高剂量组分别是对照组的9.66、16.29和19.47倍，尿液中DMA的低、中、高剂量组分别是对照组的16.07、91.86和468.74倍，DMA的蓄积存在明显的剂量依赖关系。提示长期给予雄黄可使得DMA在血液、肝肾脑等主要脏器中的浓度显著增加，蓄积明显。具体结果见图8-图12。
给药过程中未观察到动物死亡。给药90天后，雄黄各剂量组的心、肝、脾、肺、肾、脑、肾上腺、精囊腺、睾丸、唾液腺、前列腺等脏器指数与对照组相比均未见显著差异，具体结果如表6所示。病理结果显示，给药90天后雄黄高剂量组(100倍临床等效量)的肝组织中观察到局灶性的轻微的炎性细胞浸润的病理改变，肾组织中观察到局灶性的肾小管轻度变性和少量肾细胞上皮细胞裸露的病理改变，这些病理改变是局部的且轻微的，并未观察到严重的病理改变。再者，相似的病理改变同样可见于同时间点的对照组的肝肾组织中，因此提示这种病理改变可能与长期饲养后动物的自身状态有关，可能并不是给药所造成的。同时在肝肾组织中均未观察到肿瘤的生长。肝肾的病理结果见图13。
雄黄高剂量组的脑、肺、支气管、肾上腺、胰腺、膀胱、性腺等脏器与对照组相比均未见明显的异常改变。此外，雄黄中低剂量组的脏器也未观察到明显的病理异常改变。提示雄黄在剂量过高的情况下(100倍临床等效量)未引起与给药相关的明显的肝肾毒性，同时也没有明显的致癌作用。
表6.口服给予雄黄90天大鼠的脏器指数结果(X±SD)
综合实施例7和实施例8的安全性研究可以得出结论，本发明在实验过程中给予DMA未观察明显的肝肾毒性和致癌作用。
Claims (7)
1.一种用于肿瘤的中药复方制剂，其特征在于，原料为二甲基胂酸、靛玉红和虫草素；所述二甲基胂酸、靛玉红和虫草素的浓度比为1-20:1:1；所述二甲基胂酸的浓度为10μM-40μM，靛玉红的浓度为10μM-40μM，虫草素的浓度为10μM-40μM。
2.根据权利要求1所述的中药复方制剂，其特征在于，所述二甲基胂酸的浓度为10μM-20μM，靛玉红的浓度为10μM-20μM，虫草素的浓度为10μM-20μM。
3.权利要求1-2任一项所述的中药复方制剂在制备抑制肿瘤细胞增殖的药物中的应用。
4.权利要求1-2任一项所述的中药复方制剂在制备治疗肿瘤药物中的应用。
5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括白血病。
6.一种治疗肿瘤的药物，其特征在于，包括权利要求1-2任一项所述的中药复方制剂及药学上可接受的载体。
7.根据权利要求6所述的药物，其特征在于，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、膏剂、口服液剂、丸剂或糖浆剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311353337.6A CN117137932B (zh) | 2023-10-18 | 2023-10-18 | 一种用于肿瘤的中药复方制剂及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311353337.6A CN117137932B (zh) | 2023-10-18 | 2023-10-18 | 一种用于肿瘤的中药复方制剂及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117137932A CN117137932A (zh) | 2023-12-01 |
| CN117137932B true CN117137932B (zh) | 2024-04-19 |
Family
ID=88904543
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311353337.6A Active CN117137932B (zh) | 2023-10-18 | 2023-10-18 | 一种用于肿瘤的中药复方制剂及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117137932B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992010198A1 (en) * | 1990-12-06 | 1992-06-25 | Johnson & Johnson Research Pty Limited | Immunotherapeutic agents, compositions and methods |
| CN101890042A (zh) * | 2009-05-18 | 2010-11-24 | 上海交通大学医学院附属瑞金医院 | 中药复方制剂砷靛参及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 |
| CN105106959A (zh) * | 2015-08-16 | 2015-12-02 | 深圳市倍昂生物科技有限公司 | 虫草素在制备与放疗和/或化疗协同治疗肿瘤的药物中的应用以及一种药物组合物 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6770304B2 (en) * | 1997-11-10 | 2004-08-03 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Process for producing arsenic trioxide formulations and methods for treating cancer using arsenic trioxide or melarsoprol |
| US20080220441A1 (en) * | 2001-05-16 | 2008-09-11 | Birnbaum Eva R | Advanced drug development and manufacturing |
| WO2007035755A2 (en) * | 2005-09-19 | 2007-03-29 | Duke University | Methods of treating hematological malignancies |
| US20070166415A1 (en) * | 2006-01-18 | 2007-07-19 | Yaguang Liu | Safe medicine for treating and preventing cancer and method of use |
-
2023
- 2023-10-18 CN CN202311353337.6A patent/CN117137932B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992010198A1 (en) * | 1990-12-06 | 1992-06-25 | Johnson & Johnson Research Pty Limited | Immunotherapeutic agents, compositions and methods |
| CN101890042A (zh) * | 2009-05-18 | 2010-11-24 | 上海交通大学医学院附属瑞金医院 | 中药复方制剂砷靛参及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 |
| CN105106959A (zh) * | 2015-08-16 | 2015-12-02 | 深圳市倍昂生物科技有限公司 | 虫草素在制备与放疗和/或化疗协同治疗肿瘤的药物中的应用以及一种药物组合物 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| A concise review of the toxicity and carcinogenicity of dimethylarsinic acid;Elaina M. Kenyon等;Toxicology;第160卷;227–236 * |
| role of arsenic (+3 oxidation state) methyltransferase in arsenic mediated APL treatment: an in vitro investigation;Yasen Maimaitiyiming等;Metallomics;第10卷;828-837 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN117137932A (zh) | 2023-12-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3007627B2 (ja) | 天然化学物質六酸化四砒素の新規の抗腫瘍治療剤としての用途及びその薬学的組成物 | |
| JP2002512967A (ja) | 悪性疾患治療のための硫化ヒ素化合物およびその誘導体 | |
| Piñeyro-López et al. | In vitro selective toxicity of toxin T-514 from Karwinskia humboldtiana (buckthorn) plant on various human tumor cell lines | |
| EP1397105A1 (en) | Methods for inhibiting angiogenesis | |
| AU2002311985A1 (en) | Methods for inhibiting angiogenesis | |
| CN106943432B (zh) | 一种脐带间充质干细胞来源的外泌体及其在制备治疗肝癌药物中的应用 | |
| WO2018035884A1 (zh) | 一种具有抗肿瘤药物功效的联合用药物 | |
| CA2988989A1 (en) | Composition containing carboplatin and use | |
| Chang et al. | Antitumor effects of curcumin and glycyrrhetinic acid-modified curcumin-loaded cationic liposome by intratumoral administration | |
| CN109419793A (zh) | N-乙酰半胱氨酸在制备肝癌治疗药物中的应用 | |
| Poydock et al. | Inhibiting effect of vitamins C and B12 on the mitotic activity of ascites tumors | |
| CN117137932B (zh) | 一种用于肿瘤的中药复方制剂及其应用 | |
| EP0542807B1 (en) | Use of 2-phenyl-1,2-benzisoselenazol-3(2h)-one | |
| US5385726A (en) | Use of 2-phenyl-1,2-benzisoselenazol-3-(2H)-one | |
| KR101471498B1 (ko) | 암의 치료를 위한 화합물 및 방법 | |
| US20040048808A1 (en) | Methods for inhibiting angiogenesis | |
| WO2020098329A1 (zh) | 牛樟芝萃取物、牛樟芝组合物的制备方法及医药组合物 | |
| CN111110675A (zh) | 延胡索乙素在制备抗奥沙利铂外周神经毒性药物中的应用 | |
| CN110856717A (zh) | 一种肿瘤免疫调节剂及其用途 | |
| McClay et al. | A phase I and pharmacokinetic study of intraperitoneal carboplatin and etoposide | |
| CN114748630B (zh) | 具有改善功效的铂类抗癌药物组合物及其用途 | |
| CN110935027B (zh) | 三氧化二砷与flt3抑制剂的药物组合物及其应用 | |
| EP4342463A1 (en) | Stilbene compounds for use in the treatment of tumour and eye diseases | |
| AU620512B2 (en) | Therapeutic uses of cyanocobalamin | |
| CN117982538A (zh) | 人参皂苷Rg1碳纳米点在抑制人非小细胞肺癌细胞中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |