CN117137060B - 一种副干酪乳杆菌sf-l31饮品及其制备方法和应用 - Google Patents
一种副干酪乳杆菌sf-l31饮品及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种副干酪乳杆菌SF‑L31饮品及其制备方法和应用。副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）SF‑L31的保藏编号为CGMCC No.23492。副干酪乳杆菌SF‑L31饮品由被发酵底物经副干酪乳杆菌SF‑L31发酵后制得，被发酵底物包括如下的组分：桑葚、黑豆肽、黄精、板栗、南瓜子、苔菜、白蘑菇、羊肚菌、桂圆和有机钙。该副干酪乳杆菌SF‑L31饮品对小鼠股骨生长有促进作用，促进骨基质中的钙沉积、加快骨形成，提高了小鼠骨钙和骨磷含量，且效果优于葡萄糖酸钙和碳酸钙，提高了小鼠体内血钙含量，对股骨钙化具有促进作用。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种副干酪乳杆菌SF-L31饮品及其制备方法和应用。
背景技术
钙是人体必不可少的常量元素。正常的情况下成人体内含钙约为1200克，其中约99%存在于骨骼和牙齿中，和磷元素结合以羟磷灰石骨盐的形式存在，维持骨和牙齿具有坚硬的结构和支架。另外约1%的钙常以游离的或结合的离子状态存在于软组织细胞外液及血液中，发挥重要的调节生理功能的作用。当血液中钙浓度下降时，骨骼中的钙就会被释放到血液中维持平衡。如果从食物中获取的钙不足，血钙低于1%，体内就会促使甲状旁腺分泌甲状旁腺素。甲状旁腺素具有破骨作用，即将骨骼中的钙反抽调出来，以维持血钙水平。成骨速率与破骨速率相当，骨骼新陈代谢才能维持正常。而持续的缺钙、低血钙，破骨速率增大，骨钙持续释出，会导致骨质疏松，出现腰酸背痛、骨折等症状，重者造成大小便失禁、瘫痪。
根据我国第三次营养调查结果显示，我国居民膳食钙摄入量普遍低下，平均每人钙摄入量仅400mg，不足营养学会推荐量的50%，儿童和青少年缺钙的现象更为严重，完全达到推荐量的只占人群的3%~4%。在钙摄入量低的状况下，儿童易出现骨骼发育不良，而成人易出现骨质疏松，有很大的健康隐患。为了避免缺钙、预防钙缺乏症，需要增加钙摄入量或提高钙吸收率。目前市面上预防缺钙的产品多为钙片，但是这类产品多存在效果不佳、口感较差的问题。
发明内容
针对目前预防缺钙的产品存在效果不佳、口感较差的技术问题，本发明提供一种副干酪乳杆菌SF-L31饮品及其制备方法和应用。
第一方面，本发明提供一种副干酪乳杆菌SF-L31饮品，由被发酵底物经副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）SF-L31发酵后制得，被发酵底物包括如下重量份的组分：70~75份纯水、3~5份桑葚、0.1~0.5份黑豆肽、1~3份黄精、4~5份板栗、5~10份南瓜子、1~5份苔菜、1~3份白蘑菇、1~3份羊肚菌、2~4份桂圆和3~5份有机钙；副干酪乳杆菌SF-L31已于2021年9月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.23492，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
被发酵底物的各组分具备如下功效：
桑葚：味甘性寒，有滋阴补血、生津润肠的功效，滋阴益肾，补血润燥；
黑豆：具有健脾利水，消肿下气，滋肾阴，润肺燥，制风热而活血解毒，止盗汗，乌发黑发以及延年益寿的功效；
黄精：性平，味甘，归肺经、脾经、肾经，补气养阴、健脾、润肺、益肾；
板栗：具有养胃健脾、补肾强筋的作用；
南瓜子：性平，味甘，归大肠经，杀虫，下乳，利水消肿，有保健、控制血糖、健脑的作用；
桂圆：补益心脾，养血安神，补养肝肾，养阴黑发，用于气阴不足，津枯赢瘦，劳伤失血之心悸、头昏眼花、健忘、失眠、须发早白等症；
苔菜：具有清热除火、健脾开胃、祛脂降压、健脑安神、宽肠通便、预防缺铁性贫血的功效，可辅助治疗胃火旺盛、肠燥便秘、高血压、高血脂、食欲不振、心烦失眠、缺铁性贫血等病症；
白蘑菇：含有丰富的蛋白质、维生素及钾、钙、铁、磷等矿物质；
羊肚菌：性平、味甘，具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、壮阳、补脑、提神的功效，对脾胃虚弱、消化不良、痰多气短、头晕失眠有良好的治疗作用。
进一步的，有机钙包括牦牛骨髓肽、牡蛎肽和牛骨肽，牦牛骨髓肽、牡蛎肽和牛骨肽的质量之比为1:1:1。
第二方面，本发明还提供一种上述副干酪乳杆菌SF-L31饮品的制备方法，包括以下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，过120目筛网，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，高压灭菌，冷却后得到灭菌液；
（3）将副干酪乳杆菌SF-L31接种到MRS液体培养基中，培养得到副干酪乳杆菌SF-L31接种剂；
（4）将副干酪乳杆菌SF-L31接种剂接种于灭菌液中，发酵得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液进行巴氏灭菌，得到副干酪乳杆菌SF-L31饮品。
进一步的，步骤（2）中，高压灭菌温度为121℃，时间为30min，冷却至35℃。
进一步的，步骤（3）中，副干酪乳杆菌SF-L31的接种量为1%，培养温度为37℃，培养时间为18h。
进一步的，步骤（4）中，副干酪乳杆菌SF-L31接种剂的接种量为1%，发酵包括第一发酵阶段和第二发酵阶段，第一发酵阶段的发酵温度为37℃，发酵时间24h；第二发酵阶段的发酵温度20℃，发酵时间12h。
第三方面，本发明还提供一种上述副干酪乳杆菌SF-L31饮品在制备提高钙吸收、预防钙缺乏产品方面的应用。
进一步的，提高钙吸收、预防钙缺乏产品为促进骨基质中的钙沉积、加快骨形成的产品。
本发明的有益效果在于：
本发明提供的副干酪乳杆菌SF-L31饮品中，被发酵底物基本采用药食同源性中药，合理配伍，安全无毒，同时使用副干酪乳杆菌SF-L31进行发酵，提高药物的吸收，协同增效，最终获得的副干酪乳杆菌SF-L31饮品口感良好。通过动物实验验证，该副干酪乳杆菌SF-L31饮品对小鼠股骨生长有促进作用，促进骨基质中的钙沉积、加快骨形成，提高了小鼠骨钙和骨磷含量，且效果优于葡萄糖酸钙和碳酸钙，提高了小鼠体内血钙含量，对股骨钙化具有促进作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本申请实施例5中各组大鼠的股骨干重测量结果图。
图2是本申请实施例5中各组大鼠的股骨灰重测量结果图。
图3是本申请实施例5中各组大鼠的骨钙含量测量结果图。
图4是本申请实施例5中各组大鼠的骨磷含量测量结果图。
图5是本申请实施例6中各组小鼠的骨钙含量测量结果图。
图6是本申请实施例6中各组小鼠的血钙含量测量结果图。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
实施例1副干酪乳杆菌SF-L31的分离和鉴定
1、菌源：酸奶，2021年1月采集于青海省西宁市。
2、菌株的分离
对酸奶样品做十倍梯度稀释，每个梯度取100μL均匀涂布于MRS固体平板培养基上，随后取出置于厌氧罐中，37℃厌氧培养过夜；
次日可见平板上长有形态大小各异的菌落，挑取若干乳酸菌的特征菌落作二代划线纯化处理，平板厌氧活化1天，得培养物，随后做菌株鉴定。
3、副干酪乳杆菌SF-L31的鉴定
（1）鉴定单位
生工生物工程（上海）股份有限公司。
（2）引物序列
27F：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'；
1492R：5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'。
（3）鉴定的序列
CATGGCTCAGGATGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAGTTCTCGTTGATGATCGGTGCTTGCACCGAGATTCAACATGGAACGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCTTAAGTGGGGGATAACATTTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAGATCCAAGAACCGCATGGTTCTTGGCTGAAAGATGGCGTAAGCTATCGCTTTTGGATGGACCCGCGGCGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGATGATACGTAGCCGAACTGAGAGGTTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGCAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTGGAGAAGAATGGTCGGCAGAGTAACTGTTGTCGGCGTGACGGTATCCAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCTCGGCTTAACCGAGGAAGCGCATCGGAAACTGGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAATGCTAGGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTTTTGATCACCTGAGAGATCAGGTTTCCCCTTCGGGGGCAAAATGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATGACTAGTTGCCAGCATTTAGTTGGGCACTCTAGTAAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAACGAGTTGCGAGACCGCGAGGTCAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGACTGTAGGCTGCAACTCGCCTACACGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCGAAGCCGGTGGCGTAACCCTTTTAGGGA
（4）鉴定结果
该菌株被鉴定为乳杆菌属（Lactobacillus），推测为副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei），将该菌株命名为副干酪乳杆菌SF-L31，送至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏信息如下：
该副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）SF-L31于2021年9月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.23492，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
实施例2 制备副干酪乳杆菌SF-L31饮品
1、准备被发酵底物，包括如下重量份的组分：70份纯水、5份桑葚、0.5份黑豆肽、1份黄精、4份板栗、8份南瓜子、5份苔菜、1份白蘑菇、1份羊肚菌、2份桂圆和3份有机钙，其中有机钙包括质量比为1:1:1的牦牛骨髓肽、牡蛎肽和牛骨肽。
2、按照如下工艺步骤制备饮品：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，过120目筛网，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，121℃高压灭菌30min，冷却至35℃后得到灭菌液；
（3）将副干酪乳杆菌SF-L31接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，培养得到副干酪乳杆菌SF-L31接种剂，培养温度为37℃，培养时间为18h；
（4）将副干酪乳杆菌SF-L31接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，发酵得到发酵液；发酵包括第一发酵阶段和第二发酵阶段，第一发酵阶段的发酵温度为37℃，发酵时间24h；第二发酵阶段的发酵温度20℃，发酵时间12h；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液进行巴氏灭菌，得到副干酪乳杆菌SF-L31饮品。
实施例3 制备副干酪乳杆菌SF-L31饮品
1、准备被发酵底物，包括如下重量份的组分：75份纯水、3份桑葚、0.1份黑豆肽、3份黄精、5份板栗、5份南瓜子、1份苔菜、3份白蘑菇、3份羊肚菌、4份桂圆和5份有机钙，其中有机钙包括质量比为1:1:1的牦牛骨髓肽、牡蛎肽和牛骨肽。
2、制备饮品的工艺步骤同实施例2。
实施例4 制备副干酪乳杆菌SF-L31饮品
1、准备被发酵底物，包括如下重量份的组分：73份纯水、4份桑葚、0.3份黑豆肽、2份黄精、4份板栗、6份南瓜子、3份苔菜、2份白蘑菇、2份羊肚菌、3份桂圆和4份有机钙，其中有机钙包括质量比为1:1:1的牦牛骨髓肽、牡蛎肽和牛骨肽。
2、制备饮品的工艺步骤同实施例2。
实施例5 不同剂量的副干酪乳杆菌SF-L31饮品对低钙模型大鼠影响
（1）实验材料
实施例2制备的副干酪乳杆菌SF-L31饮品，含钙量为15%；碳酸钙（分析纯，含钙量为40%），水合氯醛（分析纯，购自天津科密欧化学试剂有限公司）。
低钙饲料（含钙量10~20mg/kg）配制：按质量百分比，酪蛋白10.0%，黄豆粉15.0%，小麦面粉54.0%，玉米油4.0%，纤维素2.0%，混合盐2.6%，混合维生素1.0%，氯化胆碱0.2%，dl-蛋氨酸0.2%，淀粉11.0%，混合制粒。
（2）实验动物
4周龄雄性SD大鼠60只，SPF级，体重（80±10）g，由中国食品药品检定研究院提供，经动物伦理委员会同意，许可证号：SCXK（京）2017-0005，屏障环境饲养，环境温度（24±2）℃，相对湿度40%~60%，12h光/12h暗交替，自由釆食和饮水。实验前适应性喂养一周，期间自由摄食饮水。
（3）构建低钙模型与给药
4周龄健康雄性SD大鼠适应性喂养一周后，随机分为对照组、模型组、低剂量副干酪乳杆菌SF-L31饮品组（记为低剂量组）、中剂量副干酪乳杆菌SF-L31饮品组（记为中剂量组）、高剂量副干酪乳杆菌SF-L31饮品组（记为高剂量组）和阳性对照组，每组10只。对照组大鼠以正常饲料喂养，自由饮用去离子水。其余各组大鼠给予低钙饲料，自由饮水。第9周开始连续4周，分别以2、4、8mL/kg副干酪乳杆菌SF-L31饮品灌胃低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠，以500mL/kg的碳酸钙液灌胃阳性对照组大鼠，以500mL/kg的去离子水灌胃模型组和对照组大鼠。
（4）样本收集
实验结束后，各组大鼠禁食24h，各组大鼠腹腔注射水合氯醛（0.3g/kg）进行麻醉处死，剪开大鼠腿部皮肤，将大鼠左侧股骨剥离干净，剔除股骨上附着的肌肉组织和韧带。左侧股骨用生理盐水浸湿的纱布包裹，-80℃冻存。
（5）骨密度、生物力学指标检测
取大鼠左侧股骨置于DPX骨密度仪测试台上，扫描并测定股骨中点密度。在1195电子拉伸机上进行三点弯曲实验，将左侧股骨放置于支座上，使其横截面短轴方向与载荷方向保持一致，跨距为17mm，加载速度为3mm/min，通过所得载荷-挠度曲线得到位移、斜率、强度力学指标。
（6）股骨干重、灰重、骨钙、骨磷含量测定
去除左侧股骨软组织，用生理盐水冲去骨髓，在环流热空气高热箱中120℃，烘干1h，用三氯甲烷和甲醇（v/v=2:1）混合溶液浸泡72h脱脂，烤箱120℃烘干6h，称量其干重。然后置于马福炉中600℃灰化6h，测量其灰重。采用火焰原子吸收法测定骨钙、骨磷含量。
（7）数据处理
运用Prism 8.0软件进行数据处理和统计分析，数据均以均值±标准差（Mean+SD）表示，组间差异比较釆用单因素方差分析，P＜0.05表示有显著的统计学差异，应用Origin软件对试验数据进行作图分析。
表1 副干酪乳杆菌SF-L31饮品对低钙大鼠股骨骨密度和生物力学指标的影响
注：与对照组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01；与模型组比较，#表示P＜0.05。
通过骨密度仪和三点弯曲实验检测大鼠股骨密度及生物力学指标（包括位移、斜率、强度），测定结果如表1所示。相较于对照组，模型组大鼠股骨密度降低了22.7%。与模型组相比，低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠的股骨密度均有所升高，其中，中剂量组和高剂量组大鼠股骨密度升高显著（P＜0.05），中剂量组大鼠的股骨密度最大。位移、斜率和强度都是衡量骨骼强度的重要力学指标，可以反映骨生长代谢状况。模型组大鼠股骨位移和斜率均低于对照组大鼠，但未见显著差异。给予低钙大鼠低、中、高剂量副干酪乳杆菌SF-L31饮品后，大鼠股骨位移都有所升高，中剂量组和高剂量组大鼠股骨斜率和强度有所升高。以上结果表明，中、高剂量副干酪乳杆菌SF-L31饮品能有效提升低钙大鼠的股骨密度，并且对股骨力学性能的提高或有积极作用。
大鼠股骨干重（dry weight of femur）、股骨灰重（ash weight of femur）、骨钙（Ca-bone）和骨磷（P-bone）的测定结果如图1-4所示。与对照组相比，模型组大鼠股骨干重、灰重均显著降低（P＜0.01），分别减少了22.02%、15.52%。服用了不同剂量副干酪乳杆菌SF-L31饮品的大鼠的股骨干重、灰重随着给药剂量的增加逐渐升高，干灰重比也略有提高，但与模型组相比未见显著性差异。与对照组相比，模型组大鼠股骨的骨钙、骨磷分别降低了23.80%，20.45%。与模型组相比，低、中、高剂量副干酪乳杆菌SF-L31饮品组均能显著提高低钙大鼠的骨钙和骨磷含量（P<0.05），低剂量副干酪乳杆菌SF-L31饮品组大鼠股骨的骨钙和骨磷含量升高最为显著（P<0.01），分别升高了13.62%和20.00%，效果显著优于阳性对照组。以上结果，说明副干酪乳杆菌SF-L31饮品能有效提高低钙大鼠骨骼中钙磷酸盐等矿物质含量，促进骨基质中的钙沉积，加快骨形成，从而发挥补钙作用。副干酪乳杆菌SF-L31饮品对低钙大鼠股骨钙、磷含量的提升作用并未表现出剂量依赖性关系，低剂量副干酪乳杆菌SF-L31饮品的作用最为显著，能有效提高股骨中钙磷酸盐的含量。
实施例6 副干酪乳杆菌SF-L31饮品对小鼠骨骼的影响
（1）实验动物
选取3周龄昆明小鼠60只，雌雄各半，将其随机平均分为4组，分别为对照组、SF-L31饮品组、葡萄糖酸钙组和碳酸钙组。实验期为4周，期间喂食常规饲料，自由进食。实验期间，SF-L31饮品组小鼠服用实施例3制备的副干酪乳杆菌SF-L31饮品，葡萄糖酸钙组小鼠服用葡萄糖酸钙口服液，碳酸钙组小鼠服用碳酸钙（分析纯，含钙量40%），对照组为蒸馏水，各组均采用灌胃给药，每日13:00~14:00灌胃1次，每次给药量为2g/kg小鼠体重。
（2）样本采集与检测指标
血样采集与血钙含量测定：试验结束后，使用镊子摘除小鼠眼球进行放血，用1.5mL离心管接血，至小鼠血液放尽后停止。采集的血液以4000r/min离心15min，取上层血清至离心管中，放置于-20℃冰箱中保存，用于血清指标的测定。采用血钙浓度检测试剂盒（购自合肥莱尔生物科技有限公司）检测血钙含量。
骨骼采集处理和股骨指标测定：小鼠取血后处死，剔除小鼠腿部毛发，然后剥去小鼠股骨连附的肌肉组织，取出小鼠的左侧股骨，测量其长度和直径。利用丙酮脱脂处理股骨8~10h后，80℃条件下烘至恒重，称量股骨干重。根据浮力原理用天平称重，并测量股骨体积，计算单位体积内股骨质量，即骨密度。
骨钙的测定：用硝酸将样品溶解，再经微波消解，取适量稀释后的消解液用原子吸收法测钙含量，计算骨钙含量。
各项指标检测中，每组试验样品测定3次。
（3）数据处理与分析
所有数据采用SPSS 22.0软件进行方差分析，P＜0.05表示有显著的统计学差异，应用Origin软件对试验数据进行作图分析。
表2 各组小鼠的股骨指标
股骨的状况间接反映了全身的骨骼状况，骨密度是用于评价骨质疏松症和骨折危险度的重要指标。由表2可以看出，服用副干酪乳杆菌SF-L31饮品的小鼠在股骨质量、长度和密度方面均高于服用葡萄糖酸、碳酸钙和对照组的小鼠，表明副干酪乳杆菌SF-L31饮品具有较好的补钙效果，其促进小鼠股骨生长、提高股骨密度的效果优于传统的补钙剂葡萄糖酸钙和碳酸钙。
骨钙的含量是决定骨密度的重要因素。由图5可以看出，SF-L31饮品组、葡萄糖酸钙组和碳酸钙组的小鼠骨钙含量均高于对照组，而且服用副干酪乳杆菌SF-L31饮品的小鼠骨钙含量最高，表明服用副干酪乳杆菌SF-L31饮品能明显增加小鼠股骨中钙含量，其补钙效果优于葡萄糖酸钙和碳酸钙。
血清钙含量受肠道对钙的吸收、骨钙融出以及甲状旁腺激素（parathyroidhormone，PTH）、降钙素等激素调节的影响。钙的有效补充可以维持正常血钙水平，抑制PTH水平的增加，血钙降低说明钙未得到有效吸收，出现钙平衡失调，因此血钙的含量可以用来评价补钙剂在小鼠体内的吸收利用情况。由图6可以看出，服用副干酪乳杆菌SF-L31饮品、葡萄糖酸钙和碳酸钙的小鼠血液中的钙含量均高于对照组，而且服用副干酪乳杆菌SF-L31饮品的小鼠血钙含量最高，表明服用副干酪乳杆菌SF-L31饮品钙能明显增加小鼠血液中的钙含量。
尽管通过参考附图并结合优选实施例的方式对本发明进行了详细描述，但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换，而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种副干酪乳杆菌SF-L31饮品，其特征在于，由被发酵底物经副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）SF-L31发酵后制得，被发酵底物包括如下重量份的组分：70~75份纯水、3~5份桑葚、0.1~0.5份黑豆肽、1~3份黄精、4~5份板栗、5~10份南瓜子、1~5份苔菜、1~3份白蘑菇、1~3份羊肚菌、2~4份桂圆和3~5份蛋白多肽；副干酪乳杆菌SF-L31已于2021年9月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.23492，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；蛋白多肽包括牦牛骨髓肽、牡蛎肽和牛骨肽，牦牛骨髓肽、牡蛎肽和牛骨肽的质量之比为1:1:1。
2.一种如权利要求1所述副干酪乳杆菌SF-L31饮品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，过120目筛网，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，高压灭菌，冷却后得到灭菌液；
（3）将副干酪乳杆菌SF-L31接种到MRS液体培养基中，培养得到副干酪乳杆菌SF-L31接种剂；
（4）将副干酪乳杆菌SF-L31接种剂接种于灭菌液中，发酵得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液进行巴氏灭菌，得到副干酪乳杆菌SF-L31饮品。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，高压灭菌温度为121℃，时间为30min，冷却至35℃。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，接种量为1%，培养温度为37℃，培养时间为18h。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，接种量为1%，发酵包括第一发酵阶段和第二发酵阶段，第一发酵阶段的发酵温度为37℃，发酵时间24h；第二发酵阶段的发酵温度20℃，发酵时间12h。
6.一种如权利要求1所述副干酪乳杆菌SF-L31饮品在制备提高钙吸收、预防钙缺乏产品方面的应用。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，提高钙吸收、预防钙缺乏产品为促进骨基质中的钙沉积、加快骨形成的产品。
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