CN117017846B - 一种皮肤修复组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种皮肤修复组合物及其制备方法和应用，属于化妆品技术领域；本发明提供的组合物包括以下质量份的组分：蛋白类物质0.2‑8份、多肽活性物质0.1‑5份、多糖类物质0.1‑5份、杉木愈伤组织提取物0.1‑20份。本发明提供的组合物通过选择合适重均分子量的重组人源纤连蛋白和可溶性胶原作为蛋白类物质并于多肽活性物质、多糖类物质以及杉木愈伤组织提取物进行复配，从而能够实现组合物良好的保湿能力、祛痘能力以及对创面的修复能力，并且得到的组合物温和安全。同时，本发明组合物能够应用于不同形态的化妆品制备上，具有显著的效果。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，尤其涉及一种皮肤修复组合物及其制备方法和应用。
背景技术
常见市售纤连蛋白是一种高分子量(约440kDa)的细胞外基质的糖蛋白，它与整合素跨膜受体蛋白结合，其通常来源于动物组织、血液中含有的纤连蛋白，但是含量极为有限。因此，组织来源的纤连蛋白存在产量低，成本高，产品纯度低的缺点。另一方面，野生型FN分子量太大，基本无法重组表达。外源蛋白质表达是一项很复杂的工作，特定蛋白可否在大肠杆菌、酵母、昆虫、哺乳动物细胞、植物表达系统中按需要表达、是否具有活性都是无法预知的(张小霞等，外源蛋白质表达系统类型的研究进展，国外医学卫生学分册，2004年，第31卷，第4期，pp203-208)。
目前市面上含有胶原蛋白的用于修复痘印痘坑的护肤品，其胶原或多或少被水解，其三螺旋结构松开(结构改变)，成为3条自由的肽链，生物活性下降，甚至失活只能起到皮肤物理屏障的作用，并不能很好的起到修复皮肤屏障、降低色素沉着修复痘坑的作用，只能起到保湿效果。另一方面，皮肤修复过程中创面愈合的过程涉及体内自身胶原的合成，但胶原从转录到翻译，再到折叠修饰的过程比较缓慢，导致整体的功效不显著。
现有技术中有不少使用胶原蛋白或纤连蛋白作为组分的化妆品，如中国专利申请CN105708724A公开了一种修复皮肤的化妆品组合物，所述修复皮肤的化妆品组合物由如下重量百分比的原料制成：14-18%的水、11-15%的甘油、14-18%的丙二醇、14-18%的胶原蛋白交联体、11-15%的寡肽-1、11-15%的寡肽-2、11-15%的寡肽-5；该发明能促进皮损部位快速修复，调节成纤维细胞紊乱，有效抑制疤痕形成，促进皮肤恢复平整，重建皮肤屏障，具有修复表皮、增加肌肤毛细血管血液循环、淡化色素沉着的作用，但是组合物中所用活性物质浓度过高，不仅刺激性强而且成本高，修复效果不好。如中国专利申请CN113018210A公开了一种皮肤修复组合物及其制备方法和应用，包括如下组分：PLANT 21N、AERN EX-PHAVA、透皮多肽、纤连蛋白、寡肽-1、D-泛醇、透明质酸钠、生物糖胶-1、玉米谷蛋白氨基酸类、甘油、黄原胶和去离子水；其中成分PLANT21N作用机理不明确，作用效果不可控，容易产生副作用。再比如中国专利申请CN113318062A公开了一种皮肤屏障修护组合物、皮肤屏障修护液及其制备方法，包括以下质量份的组分：纤连蛋白、贻贝提取物、木兰醇；该发明利用纤连蛋白、贻贝提取物和木兰醇之间的作用，使皮肤屏障修护组合物及含有该皮肤组合物的修护液促进了细胞对Ⅲ型胶原蛋白的分泌，提高Ⅲ型胶原蛋白生成量，增厚细胞外基质，同时也提高皮肤的保湿活性，实现肌肤修护、增强了皮肤的屏障功效，但该发明还添加多种植物提取物、防腐剂，对修护敏感肌肤的效果不佳。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种具有优异的祛痘、保湿、创面修复功能的皮肤修复组合物及其制备方法和应用。
为实现上述目的，在本发明的第一方面，本发明提供了一种皮肤修复组合物，所述皮肤修复组合物包括以下质量份的组分：
蛋白类物质0.2-8份、多肽活性物质0.1-5份、多糖类物质0.1-5份、杉木愈伤组织提取物0.1-20份；
所述蛋白类物质为重组人源纤连蛋白和可溶性胶原；
所述多肽活性物质为棕榈酰三肽-1、棕榈酰三肽-5、芋螺肽、七肽-6、肌肽中的至少一种；
所述多糖类物质为海藻糖、红藻糖、人参多糖、积雪草多糖、β-葡聚糖中至少一种；
所述重组人源纤连蛋白的重均分子量为3×104-5×104Dal，所述可溶性胶原的重均分子量为2×104-4×104Dal。
本发明提供的一种皮肤修复组合物通过选择合适重均分子量的重组人源纤连蛋白和可溶性胶原作为蛋白类物质并与多肽活性物质、多糖类物质以及杉木愈伤组织提取物进行复配，从而能够实现皮肤修复组合物良好的保湿能力、祛痘能力以及对创面的修复能力。
本发明选择的重组人源纤连蛋白和可溶性胶原是通过“翻译暂停技术”制备得到的高活性蛋白类物质。一方面，纤连蛋白（Fibronectin，FN）对细胞有高度的亲和性，尤其是成纤维细胞，能够促进细胞间的粘连，调节细胞间的关系，恢复细胞的正常功能，促进细胞的分裂、增殖，具有促进皮肤再生、愈合伤口、滋润皮肤等功效，促进皮肤细胞新陈代谢，促进皮肤细胞分泌细胞外基质及胶原蛋白等合成，起到抗衰效果；本研究发现，选择本发明中的特定重均分子量范围内的重组人源纤连蛋白能够与其他组分产生协同作用，进而体现出高活性。另一方面，本发明使用的特定重均分子量范围的可溶性胶原蛋白在宿主细胞中实现重组活性蛋白的可溶性表达，即使用的原料蛋白成分更纯、更稳定、活性更高且具有护肤和促进创面愈合功效，尤其是将其与本发明中的其他组分复配时，能够进一步提升皮肤胶原蛋白含量，改善皮肤屏障，而且使得恢复后的皮肤更有弹性，同时还能应用于促进创面愈合、痘印修复、降低色素沉着等方面。
人体皮肤有不断周转循环的细胞，再生并修复内外部的损伤，这种能力通常来源于体细胞组织中的干细胞，真皮干细胞负责维持真皮的稳态完整性和再生，而人类皮肤源前体是一种很好的细胞再生来源，但从人类皮肤中分离源前体是非常有限的，因此，可以利用植物干细胞成分将人成纤维细胞转化为皮肤源前体；本研究发现，杉木愈伤组织提取物中主要成分为莽草酸，莽草酸是一种有效的组织再生剂，通过提高皮肤细胞外基质的组成来增强皮肤重塑，具有促进伤口愈合和皮肤重建的功能；对于痘坑处皮肤的恢复重塑，其机理相似，本发明将其创新应用于痘坑修复，与蛋白类物质、多肽活性物质、多糖类物质形成协同增效作用，具有明显效果。
本发明选择的多肽类活性物质具有优异的促进其他活性蛋白透皮吸收的能力，从而能够促进重组人源纤连蛋白和可溶性胶原经皮肤进入体内，加速皮肤形成具有三螺旋结构(生物活性)的胶原，促进创面修复、降低色素沉着，部分胶原附着在皮肤表面，形成隔离膜保护层，保湿锁水，同时组合物内的多糖类物质、杉木愈伤组织提取物提供皮肤修复的内环境，促使皮肤上皮组织再生。
优选地，所述杉木愈伤组织提取物中的杉木为北美红杉或巨杉中的任意一种。
本研究发现，使用不同来源的杉木愈伤组织提取物会有一定的效果差异，当进一步选择杉木为北美红杉或巨杉中的任意一种时，得到的产品的综合效果更为优异。
优选地，所述杉木愈伤组织提取物的制备方法为：
1）取适宜的杉木植物幼嫩叶片、叶柄或是枝条、果实等组织，将其在消杀后接种至诱导培养基中，诱导其产生愈伤组织；
2）选择易分散、不分泌粘液的杉木愈伤组织，将其放置于适宜的杉木细胞组织培养液中；
3）选择合适的培养条件，将杉木愈伤组织细胞进行放大增殖培养，得到量产化杉木愈伤组织细胞悬浮液；
4）将杉木愈伤细胞悬浮液用专门的无菌设备过滤，分离得到培养液中的杉木愈伤组织细胞，将所得细胞进行破碎，以高速离心方法分离液体和植物残渣；
5）将所得杉木愈伤组织细胞提取液进行活性成分分析，并根据其性质是否稳定进行进一步萃取富集并保护其活性成分不被破坏，从而得到稳定的杉木愈伤组织提取液。
作为本发明所述皮肤修复组合物的优选实施方式，所述皮肤修复组合物包括以下质量份的组分：蛋白类物质1-4份、多肽活性物质1-3份、多糖类物质0.5-3份、杉木愈伤组织提取物5-10份。
本研究发现，当进一步选择组分的质量份在上述范围内时，组分之间的复配效果更好，得到的产品的综合性能更为优异。
作为本发明所述皮肤修复组合物的优选实施方式，所述蛋白类物质中，重组人源纤连蛋白和可溶性胶原的质量比为重组人源纤连蛋白：可溶性胶原=（0.1-4）：（0.1-4）。
作为本发明所述皮肤修复组合物的优选实施方式，所述蛋白类物质中，重组人源纤连蛋白和可溶性胶原的质量比为重组人源纤连蛋白：可溶性胶原=（1-3）：1。
本研究发现，蛋白类物质中，重组人源纤连蛋白和可溶性胶原的质量比也会对产品的性能带来影响，当进一步优选两者的质量比为（0.1-4）：（0.1-4），尤其是（1-3）：1时，得到的产品的综合性能更优。
作为本发明所述皮肤修复组合物的优选实施方式，所述多肽活性物质为芋螺肽和肌肽，芋螺肽和肌肽的质量比为（0.5-3）：1；
和/或，所述多糖类物质为β-葡聚糖。
本研究发现，多肽活性物质和多糖类物质的种类也会对产品的性能带来影响，当进一步优选多肽活性物质以及多糖类物质为上述选择类型时，得到的产品的综合性能更优。
在本发明的第二方面，本发明提供了所述皮肤修复组合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：将组分混合，得所述皮肤修复组合物。
在本发明的第三方面，本发明提供了所述皮肤修复组合物在制备化妆品上的应用。
本发明提供的组合物具有优异的保湿、祛痘、促进伤口修复的能力，因此，能够作为化妆品的原料提升化妆品的保湿能力、祛痘能力以及对皮肤的修复能力。
在本发明的第四方面，本发明提供了一种化妆品，所述化妆品包括以下质量百分数的组分：5-20%本发明所述皮肤修复组合物、1-50%化妆品基质、余量水。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式，所述化妆品基质包括保湿剂、皮肤调理剂、油脂、乳化剂、增稠剂、pH调节剂、防腐剂中的至少一种。
示例性地，所述保湿剂可为甘油、丙二醇、透明质酸钠、1,3-丙二醇、丁二醇、1,2-戊二醇、双丙甘醇、聚甘油-10、甘油聚醚-26、甲基丙二醇、1,2-己二醇、乙基己基甘油、辛甘醇、木糖醇中的至少一种；
所述皮肤调理剂可为甜菜碱、神经酰胺NP、红没药醇、四氢甲基嘧啶羧酸、泛醌、超氧化物歧化酶(SOD)、熊果苷、羟丙基四氢吡喃三醇、聚谷氨酸、抗坏血酸棕榈酸酯中的至少一种；
所述油脂可为异十六烷、聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物、矿酯、角鲨烷、鸸鹋油、橄榄油、椰子油、茶树精油、荷荷巴油、甜杏仁油、亚麻籽油、棕榈酸异辛酯、硬脂酸、鲸蜡基-PG羟乙基棕榈酰胺中的至少一种；
所述乳化剂可为PEG/PPG-18/18聚二甲基硅氧烷、聚山梨醇酯-80、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-20、氢化卵磷脂、硬脂酰谷氨酸二钠、PEG-20硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、PEG-30二聚羟基硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯中的至少一种；
所述增稠剂可为甲基丙烯酸甲酯交联聚合物、黄原胶、卡波姆、氢氧化铝、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、聚丙烯酸酯交联聚合物-6中的至少一种；
所述pH调节剂可为柠檬酸、柠檬酸钠、氢氧化钠、碳酸氢钠、三乙醇胺中的至少一种；
所述防腐剂可为苯氧乙醇、辛酰羟肟酸、对羟基苯乙醇中的至少一种。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式，所述化妆品为护肤水、精华乳、精华液、面霜、面膜、冻干粉、凝胶、喷雾中的任意一种。
示例性地，当所述化妆品为护肤水时，所述护肤水中包括以下质量百分数的组分：5-20%本发明所述皮肤修复组合物、1-20%保湿剂、0.1-10%皮肤调理剂、0.01-1%防腐剂，余量水；
所述护肤水的制备方法包括以下步骤：
（1）将水加入搅拌锅中后加入皮肤调理剂，搅拌溶解均匀；
（2）接着将可溶性胶原加入，搅拌均匀后，再加入重组人源纤连蛋白，搅拌至料体混合均匀，再加入多肽活性物质混合溶解均匀，温度控制在35-45℃；
（3）预先将保湿剂与杉木愈伤组织提取物搅拌分散均匀，得预混液，将该预混液边搅拌边加入步骤（2）所得料液中，搅拌速度200-300r/min，搅拌10-35min；
（4）加入防腐剂，搅拌15-25min，过滤，得护肤水。
示例性地，当所述化妆品为精华乳时，所述精华乳包括以下质量百分数的组分：5-20%本发明所述皮肤修复组合物、1-10%保湿剂、0.1-15%皮肤调理剂、1-10%油脂、1-10%乳化剂、0.1-5%增稠剂、0.1-5% pH调节剂、0.01-1%防腐剂、余量水；
所述精华乳的制备方法包括以下步骤：
（1）将皮肤调理剂、可溶性胶原、重组人源纤连蛋白、多肽活性物质、防腐剂加入少量水，搅拌至料体溶解混合均匀备用，温度控制在35-45℃；
（2）将剩余配方量水加入搅拌锅中，加热搅拌至75-85℃，将混合均匀的保湿剂和增稠剂加入搅拌锅中，搅拌至溶解完全；
（3）将20-40%配方量乳化剂和20-40%配方量油脂混合并加热至80-90℃后加入到步骤（2）的物料中进行均质乳化，均质速度为2000-3000rpm，时间为4-8 min；
（4）将剩余配方量乳化剂和剩余配方量油脂混合并加热至80-90℃后加入到步骤（3）的物料中进行均质乳化，均质速度为2000-3000rpm，时间为6-10 min；
（5）降温至40-45℃，在步骤（4）中得到的物料中加入步骤（1）的混合液、杉木愈伤组织提取物、pH调节剂、搅拌均匀后即得精华乳。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明提供的一种皮肤修复组合物通过选择合适重均分子量的重组人源纤连蛋白和可溶性胶原作为蛋白类物质并于多肽活性物质、多糖类物质以及杉木愈伤组织提取物进行复配，从而能够实现皮肤修复组合物良好的保湿能力、祛痘能力以及对创面的修复能力，并且得到的皮肤修复组合物温和安全。同时，本发明皮肤修复组合物能够应用于不同形态的化妆品制备上，具有显著的效果。
附图说明
图1为效果例3中一号志愿者使用前后对比图；
图2为效果例3中二号志愿者使用前后对比图。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
若无特殊说明，本发明使用的原料为常规市售原料，且本发明中的平行实施例或对比例使用的原料一致。
重组人源纤连蛋白-1（rhFN-1）：重均分子量为3.5×104Dal，启点生物，
AnaGF@纤连蛋白；
重组人源纤连蛋白-2（rhFN-2）：重均分子量为4.67×104Dal，上海信裕生物，xyA037纤连蛋白；
重组人源纤连蛋白-3（rhFN-3）：重均分子量为2.2×104Dal，聚源生物，Rechprotein@FN；
重组人源纤连蛋白-4（rhFN-4）：重均分子量为21.0×104Dal，Yeasen，rFN纤连蛋白；
可溶性胶原-1（SC-1）：重均分子量为2.7×104Dal，启点生物，全人源TM胶原蛋白；
可溶性胶原-2（SC-2）：重均分子量为4.0×104Dal，巨诚化工，COLL-P90可溶性胶原；
可溶性胶原-3（SC-3）：重均分子量为1.67×104Dal，南京赛泓瑞生物科技有限公司，重组类人胶原蛋白；
可溶性胶原-4（SC-4）：重均分子量为9.0×104Dal，肽源，Rechprotein COL-3重组胶原蛋白。
实施例1-13和对比例1-13
本发明实施例1-13和对比例1-13提供一种皮肤修复组合物，组合物的组分（质量份）如表1-2所示；
表1
表2
实施例1提供的皮肤修复组合物的制备方法为：将各组分混合均匀即得皮肤修复组合物。
实施例2-13和对比例1-13的制备方法和实施例1保持一致，若没有相关物质不加即可。
实施例14
本发明实施例提供一种护肤水，所述护肤水包括以下质量百分数的组分：6.6%实施例1中的皮肤修复组合物、7%保湿剂（4%透明质酸钠、2%丙二醇、1%丁二醇）、3%皮肤调理剂（0.5%甜菜碱、0.5%红没药醇、2%神经酰胺NP）、0.2%防腐剂（苯氧乙醇）、余量水；
所述护肤水的制备方法包括以下步骤：
（1）将水加入搅拌锅中后加入皮肤调理剂，搅拌溶解均匀；
（2）接着将可溶性胶原加入，搅拌均匀后，再加入重组人源纤连蛋白，搅拌至料体混合均匀，再加入多肽活性物质混合溶解均匀，温度控制在35-45℃；
（3）预先将保湿剂与杉木愈伤组织提取物搅拌分散均匀，得预混液，将该预混液边搅拌边加入步骤（2）所得料液中，搅拌速度250r/min，搅拌25min；
（4）加入防腐剂，搅拌20min，过滤，得护肤水。
实施例15
本发明实施例提供一种护肤水，所述护肤水与实施例14的唯一差别在于包括以下质量百分数的组分：18%实施例1中的皮肤修复组合物、7%保湿剂（4%透明质酸钠、2%丙二醇、1%丁二醇）、3%皮肤调理剂（0.5%甜菜碱、0.5%红没药醇、2%神经酰胺NP）、0.2%防腐剂（苯氧乙醇）、余量水。
实施例16
本发明实施例提供一种精华乳，所述精华乳包括以下质量百分数的组分：6.6%实施例1中的皮肤修复组合物、6%保湿剂（3%透明质酸钠、2%甲基丙二醇、1%丁二醇）、3.5%皮肤调理剂（2%熊果苷、0.5%红没药醇、1%神经酰胺NP）、5%油脂（3%异十六烷、2%鸸鹋油）、5%乳化剂（2%聚二甲基就硅氧烷、3%聚山梨醇酯-40）、1.5%增稠剂（0.5%黄原胶、1%卡波姆）、0.2%pH调理剂（柠檬酸）、0.2%防腐剂（苯氧乙醇）、余量水；
所述精华乳的制备方法包括以下步骤：
（1）将皮肤调理剂、可溶性胶原、重组人源纤连蛋白、多肽活性物质、防腐剂加入少量水，搅拌至料体溶解混合均匀备用，温度控制在35-45℃；
（2）将剩余配方量水加入搅拌锅中，加热搅拌至75-85℃，将混合均匀的保湿剂和增稠剂加入搅拌锅中，搅拌至溶解完全；
（3）将30%配方量乳化剂和30%配方量油脂混合并加热至80-90℃后加入到步骤（2）的物料中进行均质乳化，均质速度为2500rpm，时间为6min；
（4）将剩余配方量乳化剂和剩余配方量油脂混合并加热至80-90℃后加入到步骤（3）的物料中进行均质乳化，均质速度为2500rpm，时间为8min；
（5）降温至40-45℃，在步骤（4）中得到的物料中加入步骤（1）的混合液、杉木愈伤组织提取物、pH调节剂、搅拌均匀后即得精华乳。
效果例1
本发明效果例验证实施例1-13和对比例1-13制备得到的皮肤修复组合物的安全性，具体包括以下步骤：
取本发明实施例1-13和对比例1-13制备得到的皮肤修复组合物将其制备成水溶液进行测试，其中水溶液中，皮肤修复组合物含量为2.5%；
具体地，进行皮肤刺激及过敏试验，采用同体左右自身比较法；志愿者130人，分为26组，每组5人，将相应待测品直接涂抹在志愿受试皮肤准备部，并用敷料覆盖固定，粘贴时间为4小时，多次皮肤刺激性试验连续在同一部位给药，每次给药时间相同，皮肤损伤试验中的皮肤损伤程度以损伤表皮层为限；在自然光下肉眼观察皮肤的反应；
皮肤刺激性试验的观察时间点为药物清除后30min、60min、24 h、48 h、72h；多次进行皮肤刺激性试验，每次清除药物1小时后继续每次用药。
试验结果：结果证明实施例1-13和对比例1-13制备得到的皮肤修复组合物对人体无刺激性、无致敏性、无其他不良反应。
效果例2
本发明效果例验证实施例1-13和对比例1-13制备得到的皮肤修复组合物的痘坑修复效果、保湿效果和伤口愈合率，具体包括以下步骤：
取本发明实施例1-13和对比例1-13制备得到的皮肤修复组合物将其制备成水溶液进行测试，其中，所述水溶液中，皮肤修复组合物含量为2.5%；
1、痘坑修复效果
选取面部残留痘印痘坑的志愿者260人，年龄在20-25岁之间，其中男性120人，女性140人，随机分成26组，每组10人，痘印残留时间3个月到3年不等，平均1.8年，分别使用实施例1-13和对比例1-13的产品，每天早晚洁面后均匀涂抹修复乳于痘印痘坑处，连续使用42天，在此期间不使用其他护肤品，使用皮肤面部分析仪VISIA CR和面部图像分析软件Image Pro Plus对志愿者开始使用产品前和使用28天后的面部皮肤进行拍照分析，观察分析痘印消除数量和淡化程度；
若90%以上痘印痘坑都消除，剩余痘印颜色明显变浅则为显效；若60-90%的痘印痘坑消失或只留下很浅的痘印，未完全消失的痘印颜色明显变浅的则为有效，若痘印消失面积小于60%，未消除部分颜色没有明显变浅的则为无效，统计每组使用效果，显效、有效、无效的人数，并计算总有效率，总有效率＝(显效数+有效数)/总人数×100％；统计结果如表3所示；
2、保湿效果
选择年龄20-45岁的受试者130人，每5人一组进行编号，共26组，要求受试者在实验前不得使用其他同类化妆品，无日常清洁之外的皮肤护理行为，在试验前先用皮肤水分仪测试一组数据，实验开始后，各组受试者使用指定的洁面产品清洗面部，用同样的面巾纸按压吸干皮肤表面水分；分别取待测样品，于面部选定受试区域，受试面积3.0×3.0cm，产品用量(0.020±0.001)g，在受试者使用待测样品前(H0)、使用1小时后(H1)、2小时后(H1)、4小时后(H4)、8小时后(H8)，使用皮肤水分测试仪Real Bubee测试皮肤角质层水分含量，再计算出皮肤角质层水分含量变化率，计算公式：皮肤角质层水分含量变化率＝(水合/Hn-水合/H0)/水合/H0，n＝1、2、4、8)，得到的结果如表3所示；
3、伤口愈合率
选取54只雄性大鼠，体重在180-200g之间，由青岛守杰富城生物科技有限公司提供，相关操作均为严格的无菌操作，排除细菌感染因素影响；在小鼠背部一侧使用YLS 5Q台式拆机控温烫伤仪，以90℃/0.5kg的条件下对小鼠烫伤12分钟，产生直径为18mm的二度烧伤，随机分成27组，每组2只，其中一组为对照组，每天使用0.2mL生理盐水处理伤口，其余各组分别用实施例1-13和对比例1-13制得的皮肤修复组合物产品处理伤口，每天用量为0.2mL，在第0、5、10天拍摄照片，使用IPP软件计算伤口面积，并计算伤口愈合率，得到的结果如表3所示；
表3
从表3中可以看出，当选择本发明的技术方案时，得到的产品具有优异的祛痘以及修复痘印的效果、保湿效果以及伤口愈合效果，得到的痘坑吸附效果中，显效人数在50%人以上，总有效率在70%以上；保湿效果中，H1在65%以上，H8在32%以上；伤口愈合率中，5d愈合率在15.4%以上，10d愈合率33.5%以上；
从实施例1-5中可以看出，组分之间的质量比会对产品的性能带来影响，当进一步优选组分的质量份分别为蛋白类物质1-4份、多肽活性物质1-3份、多糖类物质0.5-3份、杉木愈伤组织提取物5-10份时，得到的产品的综合效果更优，得到的痘坑吸附效果中，显效人数在70%人以上，总有效率在80%以上；保湿效果中，H1在67%以上，H8在47%以上；伤口愈合率中，5d愈合率在17.2%以上，10d愈合率43.3%以上；
从实施例1和实施例6-7中可以看出，当蛋白类物质的总质量份不变，但是重组人源纤连蛋白和可溶性胶原的质量比发生变化时，得到的产品的功能效果具有明显差异，当进一步选择重组人源纤连蛋白：可溶性胶原=（1-3）：1时，得到的产品的修复痘印效果、保湿效果和伤口愈合效果都是更优的；
从实施例1、实施例8和对比例7-8中可以看出，重组人源纤连蛋白的重均分子量也会对产品的综合效果产生影响，当重组人源纤连蛋白的重均分子量不在范围内时，得到的产品的性能明显下降，痘坑修复效果总有效率下降至40%；保湿效果中，H1下降至42%以下，H8下降至26%以下；伤口愈合中，5d愈合率下降至8.3%以下，10d愈合率下降至15.7%以下；从实施例1、实施例9和对比例9-10中可以看出，可溶性胶原的重均分子量也会对产品的综合效果产生影响，当可溶性胶原的重均分子量不在范围内时，得到的产品的性能明显下降，痘坑修复效果总有效率下降至40%；保湿效果中，H1下降至44%以下，H8下降至21%以下；伤口愈合中，5d愈合率下降至6.7%以下，10d愈合率下降至14.2%以下；
从实施例1、实施例10-11和对比例11中可以看出，多肽活性物质的类型的选择对产品性能的影响较明显，当进一步选择本发明优选的多肽活性物质时，得到的产品性能明显上升；从实施例1、实施例12-13和对比例12中可以看出，多糖类物质的选择对产品性能的影响较明显，当进一步选择本发明优选的多糖类物质时，得到的成品性能明显比其他多于糖类物质好；从实施例1和对比例13中可以看出，当用类似的海茴香愈伤组织提取物替代本发明中的杉木愈伤组织提取物，并不能取得同样优异的效果；从实施例1和对比例1-5中可以看出，无论是缺少蛋白类物质、多肽活性物质、多糖类物质或杉木愈伤组织提取物中的任意一种，得到的产品的性能都显著下降。
效果例3
本发明效果例验证实施例14中制备得到的护肤水的效果，选取面部残留痘印痘坑的志愿者8人，年龄在20-25岁之间，其中男性4人，女性4人，痘印残留时间1年到3年不等，平均2年，使用实施例14的产品，每天早晚洁面后均匀涂抹护肤水于痘印痘坑处，连续使用42天，在此期间不使用其他护肤品，使用皮肤面部分析仪VISIA CR和面部图像分析软件ImagePro Plus对志愿者开始使用产品前和使用28天后的面部皮肤进行拍照分析，观察分析痘印消除数量和淡化程度；随机选取其中两名志愿者的使用前后对比图如图1（一号志愿者，左边为使用前，右边为使用后）和图2（二号志愿者，左边为使用前，右边为使用后）所示，从图中可以明显的看出采用本发明的技术方案制备得到的化妆品具有显著的效果。
最后应当说明的是，以上实施例以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (9)
1.一种皮肤修复组合物，其特征在于，所述皮肤修复组合物包括以下质量份的组分：
蛋白类物质0.2-8份、多肽活性物质0.1-5份、多糖类物质0.1-5份、杉木愈伤组织提取物0.1-20份；
所述蛋白类物质为重组人源纤连蛋白和可溶性胶原；
所述多肽活性物质为棕榈酰三肽-1、芋螺肽、七肽-6、肌肽中的至少一种；
所述多糖类物质为海藻糖、人参多糖、β-葡聚糖中至少一种；
所述重组人源纤连蛋白的重均分子量为3×104-5×104Dal，所述可溶性胶原的重均分子量为2×104-4×104Dal；
所述蛋白类物质中，重组人源纤连蛋白和可溶性胶原的质量比为重组人源纤连蛋白：可溶性胶原=（0.1-4）：（0.1-4）。
2.根据权利要求1所述的皮肤修复组合物，其特征在于，所述皮肤修复组合物包括以下质量份的组分：
蛋白类物质1-4份、多肽活性物质1-3份、多糖类物质0.5-3份、杉木愈伤组织提取物5-10份。
3.根据权利要求1所述的皮肤修复组合物，其特征在于，所述蛋白类物质中，重组人源纤连蛋白和可溶性胶原的质量比为重组人源纤连蛋白：可溶性胶原=（1-3）：1。
4.根据权利要求1所述的皮肤修复组合物，其特征在于，所述多肽活性物质为芋螺肽和肌肽，芋螺肽和肌肽的质量比为（0.5-3）：1；
和/或，所述多糖类物质为β-葡聚糖。
5.如权利要求1-4任一项所述的皮肤修复组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：将组分混合，得所述皮肤修复组合物。
6.如权利要求1-4任一项所述的皮肤修复组合物在制备化妆品上的应用。
7.一种化妆品，其特征在于，所述化妆品包括以下质量百分数的组分：5-20%如权利要求1-4任一项所述的皮肤修复组合物、1-50%化妆品基质、余量水。
8.根据权利要求7所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品基质包括保湿剂、皮肤调理剂、油脂、乳化剂、增稠剂、pH调节剂、防腐剂中的至少一种。
9.根据权利要求7所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品为护肤水、精华乳、精华液、面霜、面膜、冻干粉、凝胶、喷雾中的任意一种。
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