CN1169957C - 编码具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白的多核苷酸 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一类新的具有抑癌功能的人蛋白，编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病如癌症等的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。

Description

编码具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白的多核苷酸

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及新的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸，以及此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。

人基因组学研究目前是国际上的热点，除人染色体DNA大规模测序，表达序列测序(EST)的方法外，还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。

癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤，目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此，本领域迫切需要开发研究具有抑癌功能的人蛋白及其激动剂/抑制剂。

本发明的目的是提供一类新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。

本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的具有抑癌功能的蛋白多肽，它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26；或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。

较佳地，该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ IDNO：23、SEQ ID NO：26。

在本发明的第二方面，提供了一种分离的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85％相同性：(a)编码上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26。更佳地，该多核苷酸的序列选自下组：SEQ ID NO：3、SEQIDNO：6、SEQ ID NO：9、SEQID NO：12、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：27的编码区序列或全长序列。

在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。

在本发明的第四方面，提供了制备具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制备方法，该方法包含：(a)在适合表达具有抑癌功能的蛋白的条件下，培养上述被转化或转导的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。

在本发明的第五方面，提供了与上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中连续的10-800个核苷酸。

在本发明的第六方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。

本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

本发明采用大规模cDNA克隆转染癌细胞，在获得具有抑癌作用的基础上，经测序证明为新的基因，进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明，本发明的具有抑癌功能的蛋白对癌细胞(肝癌细胞)具有抑制克隆形成的作用，其抑制率在50％或50％以上。

如本文所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。

如本文所用，“分离的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有抑癌功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。具有抑癌功能的蛋白多肽的纯度能用氨基酸序列分析。

本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。

本发明还包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。

本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以PP894蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：3所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO：2的蛋白质，但与SEQ IDNO：3所示的编码区序列有差别的核酸序列。以PP1030蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：6所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO：5的蛋白质，但与SEQ ID NO：6所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。

编码成熟多肽的多核苷酸包括：只编码成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。

术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。

本发明还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。

本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50％，较佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中，“严格条件”是指：(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95％以上，更好是97％以上时才发生杂交。并且，可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO：2所示的成熟多肽有相同的生物学功能和活性。

本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。

本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供，更佳地被纯化至均质。

本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如，用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于：1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列，和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。

编码具有抑癌功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得：1)从基因组DNA分离双链DNA序列；2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。

上述提到的方法中，分离基因组DNA最不常用。当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时，DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时，DNA序列的直接化学合成是不可能的，选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录，形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术，试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook，et al.，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory.New York，1989)。还可得到商业供应的cDNA文库，如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时，即使极少的表达产物也能克隆。

可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于)：(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交；(2)标志基因的功能出现或丧失；(3)测定具有抑癌功能的蛋白的转录本的水平；(4)通过免疫学技术或测定生物学活性，来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用，也可多种方法联合应用。

在第(1)种方法中，杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源，其长度至少15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸。此外，探针的长度通常在2kb之内，较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素，荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。

在第(4)种方法中，检测具有抑癌功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法，放射免疫沉淀法，酶联免疫吸附法(ELISA)等。

应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki，et al.Science 1985；230：1350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时，可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法)，用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择，并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。

如上所述得到的本发明的基因，或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS，1977，74：5463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列，测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列，才能拼接成全长的cDNA序列。

本发明也涉及包含本发明的多核苷酸的载体，以及用本发明的载体或具有抑癌功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞，以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。

通过常规的重组DNA技术，可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有抑癌功能的蛋白多肽(Science，1984；224：1431)。一般来说有以下步骤：

(1).用本发明的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体)，或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞；

(2).在合适的培养基中培养的宿主细胞；

(3).从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。

本发明中，具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于：在细菌中表达的基于T7的表达载体(Rosenberg，et al.Gene，1987，56：125)；在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体(Lee and Nathans，J Bio Chem.263：3521，1988)和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之，只要能在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。

本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有抑癌功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等(Sambroook，et al.Molecular Cloning，a Laboratory Manual，coldSpring Harbor Laboratory.New York，1989)。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上，以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有：大肠杆菌的lac或trp启动子；λ噬菌体P_L启动子；真核启动子包括CMV立即早期启动子、HSV胸苷激酶启动子、早期和晚期SV40启动子、反转录病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。

此外，表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因，以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状，如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP)，或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。

包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体，可以用于转化适当的宿主细胞，以使其能够表达蛋白质。

宿主细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高等真核细胞，如哺乳动物细胞。代表性例子有：大肠杆菌，链霉菌属：鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞；真菌细胞如酵母；植物细胞；果蝇S2或Sf9的昆虫细胞；CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。

本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时，如果在载体中插入增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子，通常大约有10到300个碱基对，作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。

本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。

用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时，能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获，用CaCl₂法处理，所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl₂。如果需要，转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物，可选用如下的DNA转染方法：磷酸钙共沉淀法，常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。

获得的转化子可以用常规方法培养，表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞，培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后，用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子，将细胞再培养一段时间。

在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要，可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于：常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。

重组的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于)：直接做为药物治疗具有抑癌功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病，和用于筛选促进或对抗具有抑癌功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如，抗体可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表达的重组具有抑癌功能的人蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。

本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有抑癌功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有抑癌功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能，而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症。例如，能在药物的存在下，将哺乳动物细胞或表达具有抑癌功能的人蛋白的膜制剂与标记的具有抑癌功能的人蛋白一起培养。然后测定药物提高或阻遏此相互作用的能力。

具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有抑癌功能的人蛋白结合并消除其功能，或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的产生，或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。

在筛选作为拮抗剂的化合物时，可以将具有抑癌功能的蛋白加入生物分析测定中，通过测定化合物影响具有抑癌功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法，可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。

本发明的多肽可直接用于疾病治疗，例如，各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。

本发明的多肽，及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术，三瘤技术，人B-细胞杂交瘤技术，EBV-杂交瘤技术等。

可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。

本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒，容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起，可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示，该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外，本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。

药物组合物可以以方便的方式给药，如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有抑癌功能的蛋白以有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素，如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。

具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有抑癌功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有抑癌功能的蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。重组的基因治疗载体(如病毒载体)可设计成表达变异的具有抑癌功能的蛋白，以抑制内源性的具有抑癌功能的蛋白活性。例如，一种变异的具有抑癌功能的蛋白可以是缩短的、缺失了信号传导功能域的具有抑癌功能的蛋白，虽可与下游的底物结合，但缺乏信号传导活性。因此重组的基因治疗载体可用于治疗具有抑癌功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有抑癌功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有抑癌功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook，et al.)。另外重组具有抑癌功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。

抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子，其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得，如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性，可用多种方法对其进行修饰，如增加两侧的序列长度，核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。

多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括：将多聚核苷酸直接注入到体内组织中；或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中，再将细胞移植到体内等。

本发明的多肽还可用作肽谱分析，例如，多肽可用物理的、化学或酶进行特异性切割，并进行一维或二维或三维的凝胶电泳分析。

本发明还提供了针对具有抑癌功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于)：多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。

抗具有抑癌功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中，检测活检标本中的具有抑癌功能的人蛋白。

与具有抑癌功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记，注入体内可跟踪其位置和分布。这种放射性标记的抗体可作为一种非创伤性诊断方法用于肿瘤细胞的定位和判断是否有转移。

本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有抑癌功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以刺激或阻断具有抑癌功能的人蛋白的产生或活性。

抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素，蓖麻蛋白，红豆碱等)共价结合。一种通常的方法是用巯基交联剂如SPDP，攻击抗体的氨基，通过二硫键的交换，将毒素结合于抗体上，这种杂交抗体可用于杀灭具有抑癌功能的人蛋白阳性的细胞。

多克隆抗体的生产可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫动物，如家兔，小鼠，大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏佐剂等。

具有抑癌功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler and Milstein.Nature，1975，256：495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al，PNAS，1985，81：6851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.PatNo.4946778)也可用于生产抗具有抑癌功能的人蛋白的单链抗体。

能与具有抑癌功能的人蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时，必须对具有抑癌功能的人蛋白分子进行标记。

本发明还涉及定量和定位检测具有抑癌功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的，且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有抑癌功能的人蛋白水平，可以用作解释具有抑癌功能的人蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。

具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面，具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有抑癌功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有抑癌功能的蛋白的异常表达。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有抑癌功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法，Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术，相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上，用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有抑癌功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有抑癌功能的蛋白的转录产物。

检测具有抑癌功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有抑癌功能的蛋白相关的疾病。具有抑癌功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外，突变有可能影响蛋白的表达，因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。

本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。该序列会特异性地针对某条人染色体具体位置且并可以与其杂交。目前，需要鉴定染色体上的各基因的具体位点。现在，只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色体位置。根据本发明，为了将这些序列与疾病相关基因相关联，其重要的第一步就是将这些DNA序列定位于染色体上。

简而言之，根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp)，可以将序列定位于染色体上。然后，将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。

体细胞杂合细胞的PCR定位法，是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物，通过类似方法，可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选，从而构建染色体特异的cDNA库。

将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH)，可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述，参见Verma等，Human Chromosomes：a Manual of BasicTechniques，Pergamon Press，New York(1988)。

一旦序列被定位到准确的染色体位置，此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如，V.Mckusick，Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析，确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。

接着，需要测定患病和未患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变，而该突变在任何正常个体中未观察到，则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体，通常涉及首先寻找染色体中结构的变化，如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。根据目前的物理作图和基因定位技术的分辨能力，被精确定位至与疾病有关的染色体区域的cDNA，可以是50至500个潜在致病基因间之一种(假定1兆碱基作图分辨能力和每20kb对应于一个基因)。

本发明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。

一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。

此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。

目前，已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外，还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。

此外，由于本发明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列，因此，与来源于其他物种的同族蛋白相比，预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York：Cold Spring Harbor LaboratoryPress，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1：cDNA基因的获得及对癌细胞克隆形成的抑制作用

PP894，PP1030，PP1164，PP1187，PP1498，PP2464，PP3051，PP3105，PP5423是通过用常规方法构建人胎盘cDNA文库获得的。取3、6、10月龄的胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-SuperscriptII(GIBCO BRL)，反转录反应在42℃进行。转化XL 10-Gold感受细胞，获得了1×10⁶cfu/μg cDNA滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆，其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针，杂交筛选cDNA文库，挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen 96孔板质粒抽提试剂盒，按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染肝癌细胞系7721。100ng DNA酒精沉淀干燥后，加6μl H₂O溶解，待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液，混匀后，室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液，均分加入3孔生长于96孔板的7721细胞中，37℃放置2小时，每孔再加50μl无血清培液，37℃24小时。每孔换100μl全培液，37℃ 24小时，换含G418的全培液100μl，37℃ 24～48小时，边观察，边换G418浓度不等的培液。约2～3次后，直到镜检细胞有克隆形成，计数。发现上述克隆有抑制细胞克隆形成作用，结果如下表所示。

            cDNA克隆转染细胞(7721)克隆形成情况

cDNA克隆名称  CDNA克隆数(三个重复)  空载体克隆数(三个重复)

PP894             70   68   65          57   54   40

PP1030            0    0    0           54   45   40

PP1164            0    0    0           30   37   41

PP1187            0    1    1           30   37   41

PP1498            0    0    0           26   23   32

PP2464            2    0    0           28   30   27

PP3051            8    10   11          12   18   20

PP3105            0    2    0           12   18   20

PP5423            23   50   30          19   32   21

对cDNA克隆采用双脱氧终止法，在ABI377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后，确定为新基因克隆，进行另一端测序，仍未获得全长cDNA序列，设计引物，再次进行测序，直到获得全长序列(SEQ ID NO：1、4、7、10、13、16、19、22、25)。

实施例2：从胎盘cDNA中PCR获得全长基因：

取3、6、10月龄的胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-SuperscriptII(GIBCO BRL)反转录酶在42℃进行反转录反应，获得胎盘cDNA。利用各个基因的转异引物(如下表所示)，按90℃ 3分钟1个循环：94℃ 30秒，60℃ 30秒，72℃ 1分钟，共35个循环；72℃ 10分钟，1个循环进行PCR扩增，获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证，与实施例1测得的序列相符，随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞，以获得重组蛋白。

                      基因特异引物序列

克隆名称   特异引物1(5′→3′)        特异引物2(5′→3′)

PP894    GTCGTGGACTGTGGTTGGGGGAG    ACCCAGAGCAGGTTCCAGAGCCC

PP1030   ACAGCACGAGAGCACAGCCCTGA    GCCACCACCACAAAAGGCTCCAG

PP1164   TTACAGACGCATTTCAGCCCCGC    TGAGCCACTGTCCCCAGCGTTTT

PP1187   TCAGCTTCCGGGAGTTCCTGCTC    AGGAGACAGAGGTGGGCAGGCAT

PP1498   GTCAGGCCTGGTCAACGTGGTGT    CAAAGGGGCACCAGACAGGGAAC

PP2464   AGACCTCCTCGAAGGAGCAGCCA    GAAGATCTCCCCAGGGGGCTTTG

PP3051   GAGCTGGCGTGCAAGCTGGAG      AGGAGACAGAGGTGGGCAGGCAT

PP3105   GGGGGCGGGAGACAGAAAGAGAG    CAATTCGATTTCTCCTGCATACA

PP5423   TGGAGCCTGAGTGCATCATGGAG    GTCAGGGGCAAGAGCCAAGCTGT

实施例3：cDNA克隆序列分析

1.PP894

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：1)长度：1492bp

  1  GGCATCTGAG AGGCTGGTCG TGGACTGTGG TTGGGGGAGG TGGGAGCTGT

 51  TTTAACCGTG TGCCCCCTCT CCTGTGCCGG CGTGGGCATC CCCCGGGGCA

101  GTGGAACGCG GGCGCTCCTC CAGCTTCCGA GTCCAGCCAG CCTGGGCGCG

151  GGGCGCCGCC CCCGAGACAC CCGAGGAGTC CGTTCCTCCC TGGTTACGTG

201  GACTGTGGAG CTGGTCTCTT GTGGCTCAGC GCCGTGCGGA GGTTGAAGCG

251  TACCTGCGGA GGTCGCACCA GGGCGTGAGG AGGAGGAGGA AGGGCATGAG

301  CCGAGCTTGA GGAATCCGTG CTCCAAACTC TACACTCAAG GGTGGCCCTT

351  GGGTAGGGTG AAGATCCCCT GTCTTTATCC TAGTTCCACA CCTTGGTGTG

401  GGTTACTGGG TGCAGGATGA ACTGTCGCTC GGAGGTGCTG GAGGTGTCGG

451  TGGAGGGGCG GCAGGTGGAG GAGGCCATGC TGGCTGTGCT GCACACGGTG

501  CTTCTGCACC GCAGCACAGG CAAGTTCCAC TACAAGAAGG AGGGCACCTA

551  CTCCATTGGC ACCGTGGGCA CCCAGGATGT TGACTGTGAC TTCATCGACT

601  TCACTTATGT GCGTGTCTCT TCTGAGGAAC TGGATCGTGC CCTGCGCAAG

651  GTTGTTGGGG AGTTCAAGGA TGCACTGCGC AACTCTGGTG GCGATGGGCT

701  GGGGCAGATG TCCTTGGAGT TCTACCAGAA GAAGAAGTCT CGCTGCCATT

751  CTCAGACGAG TGCATCCCAT GGGAAGTGTG GACGGTCAAG GTGCATGTGG

801  TAGCCCTGGC CACGGAGCAG GAGCGGCAGA TCTGCCGGGA GAAGGTGGGT

851  GAGAAACTCT GCGAGAAGAT CATCAACATC GTGGAGGTGA TGAATCGGCA

901  TGAGTACTTG CCCAAGATGC CCACACAGTC GGAGGTGGAT AACGTGTTTG

 951  ACACAGGCTT GCGGGACGTG CAGCCCTACC TGTACAAGAT CTCCTTCCAG

1001  ATCACTGATG CCCTGGGCAC CTCAGTCACC ACCACCATGC GCAGGCTCAT

1051  CAAAGACACC CTTGCCCTCT GAGCGTCGGT GGATCTCTGG GAGCTCCTTG

1101  ATGGCTCCCA GACCTTGGCT TTTGGGAATT GCACTTTTGG GCCTTTGGGC

1151  TCTGGAACCT GCTCTGGGTC ATTGGTGAGA CTTGGAAGGG GCAGCCCCCG

1201  CTGGCTTCTT GGTTTTGTGG TTGCCAGCCT CAGGTCATCC TTTTAATCTT

1251  TGCTGATGGT TCAGTCCTGC CTCTACTGTC TCTCCATAGC CCTGGTGGGG

1301  TCCCCCTTCT TTCTCCACTG TACAGAAGAG CCACCACTGG GATGGGGAAT

1351  AAAGTTGAGA ACATGAGTTT GGAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1401  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1451  CCTGGGGGGG GGGCCCGGTC CCAGGTAAGT GTACCCAATT CG

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：2)长度：128个氨基酸

   1  MNCRSEVLEV SVEGRQVEEA MLAVLHTVLL HRSTGKFHYK KEGTYSIGTV

  51  GTQDVDCDFI DFTYVRVSSE ELDRALRKVV GEFKDALRNS GGDGLGQMSL

 101  EFYQKKKSRC HSQTSASHGK CGRSRCMW

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：3)

克隆号和蛋白名称：PP894

起始编码子：  417 ATG    终止编码子：803 TAG

蛋白质分子量：14426.67

   1   GG CAT CTG AGA GGC TGG TCG TGG ACT GTG GTT GGG GGA GGT GGG AGC     47

  48  TGT TTT AAC CGT GTG CCC CCT CTC CTG TGC CGG CGT GGG CAT CCC CCG     95

  96  GGG CAG TGG AAC GCG GGC GCT CCT CCA GCT TCC GAG TCC AGC CAG CCT    143

 144  GGG CGC GGG GCG CCG CCC CCG AGA CAC CCG AGG AGT CCG TTC CTC CCT    191

 192  GGT TAC GTG GAC TGT GGA GCT GGT CTC TTG TGG CTC AGC GCC GTG CGG    239

 240  AGG TTG AAG CGT ACC TGC GGA GGT CGC ACC AGG GCG TGA GGA GGA GGA    287

 288  GGA AGG GCA TGA GCC GAG CTT GAG GAA TCC GTG CTC CAA ACT CTA CAC    335

 336  TCA AGG GTG GCC CTT GGG TAG GGT GAA GAT CCC CTG TCT TTA TCC TAG    383

 384  TTC CAC ACC TTG GTG TGG GTT ACT GGG TGC AGG ATG AAC TGT CGC TCG    431

   1                                              Met Asn Cys Arg Ser      5

 432  GAG GTG CTG GAG GTG TCG GTG GAG GGG CGG CAG GTG GAG GAG GCC ATG    479

   6  Glu Val Leu Glu Val Ser Val Glu Gly Arg Gln Val Glu Glu Ala Met     21

 480  CTG GCT GTG CTG CAC ACG GTG CTT CTG CAC CGC AGC ACA GGC AAG TTC    527

  22  Leu Ala Val Leu His Thr Val Leu Leu His Arg Ser Thr Gly Lys Phe     37

 528  CAC TAC AAG AAG GAG GGC ACC TAC TCC ATT GGC ACC GTG GGC ACC CAG    575

  38  His Tyr Lys Lys Glu Gly Thr Tyr Ser Ile Gly Thr Val Gly Thr Gln     53

 576  GAT GTT GAC TGT GAC TTC ATC GAC TTC ACT TAT GTG CGT GTC TCT TCT    623

  54  Asp Val Asp Cys Asp Phe Ile Asp Phe Thr Tyr Val Arg Val Ser Ser     69

 624  GAG GAA CTG GAT CGT GCC CTG CGC AAG GTT GTT GGG GAG TTC AAG GAT    671

  70  Glu Glu Leu Asp Arg Ala Leu Arg Lys Val Val Gly Glu Phe Lys Asp     85

 672  GCA CTG CGC AAC TCT GGT GGC GAT GGG CTG GGG CAG ATG TCC TTG GAG    719

  86  Ala Leu Arg Asn Ser Gly Gly Asp Gly Leu Gly Gln Met Ser Leu Glu    101

 720  TTC TAC CAG AAG AAG AAG TCT CGC TGC CAT TCT CAG ACG AGT GCA TCC     767

 102  Phe Tyr Gln Lys Lys Lys Ser Arg Cys His Ser Gln Thr Ser Ala Ser     117

 768  CAT GGG AAG TGT GGA CGG TCA AGG TGC ATG TGG TAG CCC TGG CCA CGG     815

 118  His Gly Lys Cys Gly Arg Ser Arg Cys Met Trp ***                     129

 816  AGC AGG AGC GGC AGA TCT GCC GGG AGA AGG TGG GTG AGA AAC TCT GCG     863

 864  AGA AGA TCA TCA ACA TCG TGG AGG TGA TGA ATC GGC ATG AGT ACT TGC     911

 912  CCA AGA TGC CCA CAC AGT CGG AGG TGG ATA ACG TGT TTG ACA CAG GCT     959

 960  TGC GGG ACG TGC AGC CCT ACC TGT ACA AGA TCT CCT TCC AGA TCA CTG    1007

1008  ATG CCC TGG GCA CCT CAG TCA CCA CCA CCA TGC GCA GGC TCA TCA AAG    1055

1056  ACA CCC TTG CCC TCT GAG CGT CGC TGG ATC TCT GGG AGC TCC TTG ATG    1103

1104  GCT CCC AGA CCT TGG CTT TTG GGA ATT GCA CTT TTG GGC CTT TGG GCT    1151

1152  CTG GAA CCT GCT CTG GGT CAT TGG TGA GAC TTG GAA GGG GCA GCC CCC    1199

1200  GCT GGC TTC TTG GTT TTG TGG TTG CCA GCC TCA GGT CAT CCT TTT AAT    1247

1248  CTT TGC TGA TGG TTC AGT CCT GCC TCT ACT GTC TCT CCA TAG CCC TGG    1295

1296  TGG GGT CCC CCT TCT TTC TCC ACT GTA CAG AAG AGC CAC CAC TGG GAT    1343

1344  GGG GAA TAA AGT TGA GAA CAT GAG TTT GGA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1391

1392  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1439

1440  AAA AAA AAA AAC CTG GGG GGG GGG CCC GGT CCC AGG TAA GTG TAC CCA    1487

1488  ATT CG                                                             1492

D：Blastp结果

Query＝PP894[基因＝PP894](128个氨基酸)

>SP_FUN：O13978 O13978 schizosaccharomyces pombe(fission yeast).

             hypothetical 20.3 kd protein c25h1.03 in chromosome i.

             6/1998

长度＝184

分值＝35.6bits(80)，预计值＝0.17

相同性＝30/103(29％)，相似性＝44/103(42％)，缺口＝18/103(17％)

Query：8   LEVSVEGRQVEEAMLAVLHTVLLHRSTGKFHYKKEGTYSIGTVGTQDVDCDFIDFTYVRV 67

           +E+ +  +   E + AVL  +L HR                TV  + +D   +D T   +

Sbjct：7   IELKIGYKYAAEVVKAVLGVILFHRQ-------------FSTVPARTIDV--LDITVPTL 51

Query：68  SSEELDRALRKVVGEFKDALRNSGGDGLGQMSLEFYQK--KKS 108

              EL+  L     EF D +RN  G   GQM L  Y++  KKS

Sbjct：52  VGAELNEQLATKAAEFIDTIRNEAGAN-GQMILLLYERSPKKS 93

2.PP1030

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：4)长度：2258bp

   1  CCCAACTGGG GGTGGTCCCT GGGATTGGAC ACTAGTGGAG GAGGGCGATG

  51  GACGCCTTCA GCCCCAGGCA CCCAGCTGGC CGGCAGCTGA GGAGGGAGAG

 101  GGGGAGCGTA GCCTTACAGC ACGAGAGCAC AGCCCTGAGG AGGCGCGGGA

 151  GCTGCGGGCT GCGGTGATCC AGCTTCTGGA CACCTCCTAT CTGCTCACTC

 201  CTGTGGCCCA GGCCCAGCTC CTGTGGCTGC TGGGCTGGGC CCTGCGGGGT

 251  CTGCAGGGAC AGCCACCGGC ACTCTTCAAG CCGCAGCTGG TACGGCTGCT

 301  AGGCACAGCA CAGCTGACAC TGTTGCACGC CATGCTTGCG CTCAAGGCGG

 351  CCTTTGGTGA GGCCTTGTTC ACAGCCCAGG ATGAAGCGTT GCTGCTCCGC

 401  CGGCTCACCT TGGCTGCCCA GCACCCTGCT CTGCCTCCGC CCACCCATCT

 451  CTTTTACCTG CACTGCGTCC TGAGCTTCCC TGAGAACTGG CCGCTGGGCC

 501  TGAAGGTGAG GAGGCTGCCC CACTGCTGCT AGGGCCCCAG CTATGCCGTG

 551  GTCTCCTGCC CAGTCTCCTG CATGACCCAA TGGCCCTCCT GGCCCGCCTG

 601  CATTTACTGT GCCTGCTCTG TGCGGAGGAG GAAGAAGAGG AGAAAGGCCA

 651  GCTTCCAAGC CCACGGCACT ACCTGGAAGA GCTGCTGGCT GGCTTGCGGC

 701  ACGGGGCAGC CCTGGATGGG GGCCCCCGGG CTTGGCCACT CTCTGCTTCC

 751  AGGCCTCGTA TCTGGTGGCC TGCTGCCTGG CTGGGCAACC TACGGTGCTG

 801  ACCCCCTTGA TCCACGGACT GGCCCAGCTG TACCAAGCCC GGCCCATGCT

 851  GGCTCCCCAC TTTGTGGACC TCTTGGATCA GGTGGACTCT GAGCTGAGGG

 901  AGCCCCTGAA GGTGGTGTTG CGGCAGGTGG TGGTGTCCAG GCCGGGCAGG

 951  GATGAAGCTC TTTGCTGGCA CCTGCAAATG CTGGCAAAGG TGGCAGATGG

1001  AGATGCCCAG AGTGCTACCC TCAACTTTCT ACAGGCCGCG GCTGCCCACT

1051  GCACGAACTG GGACCTACAG CAGGGCCTGC TGCGGGTCTG CCGGGCGCTG

1101  CTGCGGGCAG GGGTGAGGGG CGGCCTGGTC GACTTGCTGC AGGTGCTGGC

1151  CAGGCAGCTG GAGGACCCTG ATGGGCGTGA CCACGCCCGC CTCTACTACA

1201  TCCTGCTGGC ACACCTGGCA GCACCCAAGT TGGGGGTGGC CCTGGGCCCC

1251  TCGCTTGCCG CACCTGCACT GGCCTCTTCA CTGGTGGCCG AGAACCAGGG

1301  CTTTGTGGCA GCACTGATGG TGCAGGAGGC ACCGGCCCTG GTACGGCTGA

1351  GCCTGGGGTC CCATCGGGTC AAGGGCCCAC TCCCAGTGTT GAAGCTCCAC

1401  CGGAGGCGCT GGAGCCCATC TACTCTCTGG AGTGCGCTTC GTGTGGAAGG

1451  ACAGCTGTAT GCACCCCTGG AGGCTGTCCA TGTGCCCTGC CTGTGTCCTG

1501  GCCGCCCTGC CCGCCCTCTG CTCCTGCCTC TGCAGCCCCG ATGCCCGGCC

1551  CCCGCACGGC TGGATGTCCA TGCCCTTTAC ACCACATCCA CTGGTCTCAC

1601  GTGCCATGCC CACTTGCCAC CCCTGTTCTG TGAACTTTGC CGACCTCTTT

1651  CTGCCTTTCC CGCAGCCTCC AGAGGGGGCC GGGCTGGGCT TCTTTGAGGA

1701  GCTCTGGGAT TCCTGCCTGC CAGAGGGTGC TGAGAGTCGT GTGTGGTGTC

1751  CACTTGGGCC ACAGGGCCTG GAGGGCTTGG TGTCCCGCCA CCTGGAGCCT

1801  TTTGTGGTGG TGGCCCAGCC TCCTACCAGC TACTGTGTAG CAATCCACCT

1851  GCCCCCGGAC TCAAAGCTGC TGCTGCGGCT GGAGGCGGCC CTGGCAGATG

1901  GAGTGCCTGT GGCCCTGCGG ACCGATGACT GGGCCGTGCT GCCCCTGGCG

1951  GGGGACTACC TCCGTGGGCT GGCGGCTGCT GTTTGAGCCC CGGGAGACCA

2001  GGTGGGGGCA GGACTGTGGC CCTTGTGGGG GCCAAGGCAC ACTCCTGTAG

2051  CTCTGTCGCC AAAACCCTGC ATTCCGCAGT GCCCTCGCTG GCTTGTTTTC

2101  TTTTGGGCCC CGGTTGGGAG CAGGCTCCTG GGGGTGAGGG TCTGTCTGAG

2151  TCTGTTTTTG CTGCTCTAGC AAGATCCCTG AGACGGGGTA AGTTATAATA

2201  AACAGAAATG TATTGGCTCC GCAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

2251  AAAAAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：5)长度：283个氨基酸

   1  MLAPHFVDLL DQVDSELREP LKVVLRQVVV SRPGRDEALC WHLQMLAKVA

  51  DGDAQSATLN FLQAAAAHCT NWDLQQGLLR VCRALLRAGV RGGLVDLLQV

 101  LARQLEDPDG RDHARLYYIL LAHLAAPKLG VALGPSLAAP ALASSLVAEN

 151  QGFVAALMVQ EAPALVRLSL GSHRVKGPLP VLKLHRRRWS PSTLWSALRV

 201  EGQLYAPLEA VHVPCLCPGR PARPLLLPLQ PRCPAPARLD VHALYTTSTG

 251  LTCHAHLPPL FCELCRPLSA FPAASRGGRA GLL

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：6)

克隆号和蛋白名称：PP1030

起始编码子：  846 ATG    终止编码子：1697 TAG

蛋白质分子量：30594.17

   1   CC CAA CTG GGG GTG GTC CCT GGG ATT GGA CAC TAG TGG AGG AGG GCG      47

  48  ATG GAC GCC TTC AGC CCC AGG CAC CCA GCT GGC CGG CAG CTG AGG AGG      95

  96  GAG AGG GGG AGC GTA GCC TTA CAG CAC GAG AGC ACA GCC CTG AGG AGG     143

 144  CGC GGG AGC TGC GGG CTG CGG TGA TCC AGC TTC TGG ACA CCT CCT ATC     191

 192  TGC TCA CTC CTG TGG CCC AGG CCC AGC TCC TGT GGC TGC TGG GCT GGG     239

 240  CCC TGC GGG GTC TGC AGG GAC AGC CAC CGG CAC TCT TCA AGC CGC AGC     287

 288  TGG TAC GGC TGC TAG GCA CAG CAC AGC TGA CAC TGT TGC ACG CCA TGC     335

 336  TTG CGC TCA AGG CGG CCT TTG GTG AGG CCT TGT TCA CAG CCC AGG ATG     383

 384  AAG CGT TGC TGC TCC GCC GGC TCA CCT TGG CTG CCC AGC ACC CTG CTC     431

 432  TGC CTC CGC CCA CCC ATC TCT TTT ACC TGC ACT GCG TCC TGA GCT TCC     479

 480  CTG AGA ACT GGC CGC TGG GCC TGA AGG TGA GGA GGC TGC CCC ACT GCT     527

 528  GCT AGG GCC CCA GCT ATG CCG TGG TCT CCT GCC CAG TCT CCT GCA TGA     575

 576  CCC AAT GGC CCT CCT GGC CCG CCT GCA TTT ACT GTG CCT GCT CTG TGC     623

 624  CGA GGA GGA AGA AGA GGA GAA AGG CCA GCT TCC AAG CCC ACG GCA CTA     671

 672  CCT GGA AGA GCT GCT GGC TGG CTT GCG GCA CGG GGC AGC CCT GGA TGG     719

 720  GGG CCC CCG GGC TTG GCC ACT CTC TGC TTC CAG GCC TCG TAT CTG GTG     767

 768  GCC TGC TGC CTG GCT GGG CAA CCT ACG GTG CTG ACC CCC TTG ATC CAC     815

 816  GGA CTG GCC CAG CTG TAC CAA GCC CGG CCC ATG CTG GCT CCC CAC TTT     863

   1                                          Met Leu Ala Pro His Phe       6

 864  GTG GAC CTC TTG GAT CAG GTG GAC TCT GAG CTG AGG GAG CCC CTG AAG     911

   7  Val Asp Leu Leu Asp Gln Val Asp Ser Glu Leu Arg Glu Pro Leu Lys      22

 912  GTG GTG TTG CGG CAG GTG GTG GTG TCC AGG CCG GGC AGG GAT GAA GCT     959

  23  Val Val Leu Arg Gln Val Val Val Ser Arg Pro Gly Arg Asp Glu Ala      38

 960  CTT TGC TGG CAC CTG CAA ATG CTG GCA AAG GTG GCA GAT GGA GAT GCC    1007

  39  Leu Cys Trp His Leu Gln Met Leu Ala Lys Val Ala Asp Gly Asp Ala      54

1008  CAG AGT GCT ACC CTC AAC TTT CTA CAG GCC GCG GCT GCC CAC TGC ACG    1055

  55  Gln Ser Ala Thr Leu Asn Phe Leu Gln Ala Ala Ala Ala His Cys Thr      70

1056  AAC TGG GAC CTA CAG CAG GGC CTG CTG CGG GTC TGC CGG GCG CTG CTG    1103

  71  Asn Trp Asp Leu Gln Gln Gly Leu Leu Arg Val Cys Arg Ala Leu Leu      86

1104  CGG GCA GGG GTG AGG GGC GGC CTG GTC GAC TTG CTG CAG GTG CTG GCC    1151

  87  Arg Ala Gly Val Arg Gly Gly Leu Val Asp Leu Leu Gln Val Leu Ala     102

1152  AGG CAG CTG GAG GAC CCT GAT GGG CGT GAC CAC GCC CGC CTC TAC TAC    1199

 103  Arg Gln Leu Glu Asp Pro Asp Gly Arg Asp His Ala Arg Leu Tyr Tyr     118

1200  ATC CTG CTG GCA CAC CTG GCA GCA CCC AAG TTG GGG GTG GCC CTG GGC    1247

 119  Ile Leu Leu Ala His Leu Ala Ala Pro Lys Leu Gly Val Ala Leu Gly     134

1248  CCC TCG CTT GCC GCA CCT GCA CTG GCC TCT TCA CTG GTG GCC GAG AAC    1295

 135  Pro Ser Leu Ala Ala Pro Ala Leu Ala Ser Ser Leu Val Ala Glu Asn     150

1296  CAG GGC TTT GTG GCA GCA CTG ATG GTG CAG GAG GCA CCG GCC CTG GTA    1343

 151  Gln Gly Phe Val Ala Ala Leu Met Val Gln Glu Ala Pro Ala Leu Val     166

1344  CGG CTG AGC CTG GGG TCC CAT CGG GTC AAG GGC CCA CTC CCA GTG TTG    1391

 167  Arg Leu Ser Leu Gly Ser His Arg Val Lys Gly Pro Leu Pro Val Leu     182

1392  AAG CTC CAC CGG AGG CGC TGG AGC CCA TCT ACT CTC TGG AGT GCG CTT    1439

 183  Lys Leu His Arg Arg Arg Trp Ser Pro Ser Thr Leu Trp Ser Ala Leu     198

1440  CGT GTG GAA GGA CAG CTG TAT GCA CCC CTG GAG GCT GTC CAT GTG CCC    1487

 199  Arg Val Glu Gly Gln Leu Tyr Ala Pro Leu Glu Ala Val His Val Pro     214

1488  TGC CTG TGT CCT GGC CGC CCT GCC CGC CCT CTG CTC CTG CCT CTG CAG    1535

 215  Cys Leu Cys Pro Gly Arg Pro Ala Arg Pro Leu Leu Leu Pro Leu Gln     230

1536  CCC CGA TGC CCG GCC CCC GCA CGG CTG GAT GTC CAT GCC CTT TAC ACC    1583

 231  Pro Arg Cys Pro Ala Pro Ala Arg Leu Asp Val His Ala Leu Tyr Thr     246

1584  ACA TCC ACT GGT CTC ACG TGC CAT GCC CAC TTG CCA CCC CTG TTC TGT    1631

 247  Thr Ser Thr Gly Leu Thr Cys His Ala His Leu Pro Pro Leu Phe Cys     262

1632  GAA CTT TGC CGA CCT CTT TCT GCC TTT CCC GCA GCC TCC AGA GGG GGC    1679

 263  Glu Leu Cys Arg Pro Leu Ser Ala Phe Pro Ala Ala Ser Arg Gly Gly     278

1680  CGG GCT GGG CTT CTT TGA GGA GCT CTG GGA TTC CTG CCT GCC AGA GGG    1727

 279  Arg Ala Gly Leu Leu ***                                             284

1728  TGC TGA GAG TCG TGT GTG GTG TCC ACT TGG GCC ACA GGG CCT GGA GGG    1775

1776  CTT GGT GTC CCG CCA CCT GGA GCC TTT TGT GGT GGT GGC CCA GCC TCC    1823

1824  TAC CAG CTA CTG TGT AGC AAT CCA CCT GCC CCC GGA CTC AAA GCT GCT    1871

1872  GCT GCG GCT GGA GGC GGC CCT GGC AGA TGG AGT GCC TGT GGC CCT GCG    1919

1920  GAC CGA TGA CTG GGC CGT GCT GCC CCT GGC GGG GGA CTA CCT CCG TGG    1967

1968  GCT GGC GGC TGC TGT TTG AGC CCC GGG AGA CCA GGT GGG GGC AGG ACT    2015

2016  GTG GCC CTT GTG GGG GCC AAG GCA CAC TCC TGT AGC TCT GTC GCC AAA    2063

2064  ACC CTG CAT TCC GCA GTG CCC TCG CTG GCT TGT TTT CTT TTG GGC CCC    2111

2112  GGT TGG GAG CAG GCT CCT GGG GGT GAG GGT CTG TCT GAG TCT GTT TTT    2159

2160  GCT GCT CTA GCA AGA TCC CTG AGA CGG GGT AAG TTA TAA TAA ACA GAA    2207

2208  ATG TAT TGG CTC CGC AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    2255

2256  AAA                                                                2258

D：Blastp结果

Query＝PP1030[基因＝PP1030](283个氨基酸)

>SW：DIS3_SCHPO P37202 schizosaccharomyces pombe(fission yeast).

             mitotic control protein dis3.12/1998

长度＝970

分值＝36.7bits(83)，预计值＝0.23

相同性＝23/75(30％)，相似性＝42/75(55％)，缺口＝3/75(4％)

Query：12  QVDSELREPLKVVLRQVVVSRPGRDE-ALCWHLQMLAKVADGDAQSATLNFLQAAAAHCT 70

           Q D+E  +P+ V ++Q++ +    +E  L  ++ +  K+ D   Q+A L   + AA   T

Sbjct：669 QTDNETSDPMDVEIKQLLETNSLVEEFMLLANISVAQKIYDAFPQTAVLR--RHAAPPLT 726

Query：71  NWDLQQGLLRVCRAL 85

           N+D  Q +LRVC+ +

Sbjct：727 NFDSLQDILRVCKGM 741

3.PP1164

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：7)长度：1094bp

   1  GAGGGCCTCA CGGGGTGGGT GTGAGTCTGG CCTGCCTGGG CTCGGGGTGG

  51  GGGGTGTTTA CAGACGCATT TCAGCCCCGC AGCAGGGGCT GGGGAGGTCC

 101  CGCTCGTGAC AGTCTCTGCA CCAAGGCAGG AGAGATGGAA GCCGCCCAGA

 151  GAACTGCCAC TCCATAGCCT GTGGGCATCC AGGGGTGAGC GGCAGCGATG

 201  GCGCCCCATG GAGGAAACAC ACTGGAAATC GTGCAGAAGA TGGGAAGATG

 251  CAGGCTGGAG TGCGGAGAAG GACTGAGACC CTGCCTGGTA GACGGCACCG

 301  TCACAGCAGC CGTCTGCCTG CTAGGAGGAG CGTCTCCACC AGCAGCAGGC

 351  CGGCCCCTGA GGGAGACAGC AGAGAGCTGG AGTCCTGGCC AGCCAGGCGG

 401  GGATCCTTCA GCAGGACACA GGGGACACAG CAGGCAACAG GAGCTCAGAA

 451  CGCTCTCGGC GACCCTGCTG AGTAACTTGT GGACTTTGTC GTCTGGCCAG

 501  TCATGCAGGA TCCGGCACAG GACGTACAGC TCAGCGCTGG GGAGGGGGTC

 551  CCTGAAAAAG TCACCTGGTT TAAAGACAAA AGGAGACACG TCCGTCAGGT

 601  ATGGAAGAAG CAGTCCTCCC CGGACAGATC CTGGGACGGC CACCCGCATC

 651  CTAAGTCAGG GACAGAGAAG AGAGGGGTGT GGGCGGGAAT GGGTCTTCCT

 701  GAAGTACATC CCCGTGGGGA CTTGAACAGA GCTCCATGAG GAGCTGGTTA

 751  GTGATGTCAC GCCCGTGCGG TTTGACTCCG GCTGAGAAAA CGCTGGGGAC

 801  AGTGGCTCAC ACCTGTAATC TCAGCCTCCC AGACGGCTGG GATTCCAGGC

 851  GTGAGCCTGG GCACGTGGCC CAGGCGTCTC CTGTCAATCC GTCCTGGCCT

 901  CAGCAGCTGC CACCTGGAAG TTCTCCTTCA AGTCTAACCT AAGGCCGCCC

 951  TGTGACGGCT CTCGGGTCAG TTCCTTCTGT GACCTCGGCA CCGTGGATGC

1001  CCATGAATGC TGATCTCGGC TGTTCCCCAT CTCCACTCCC CTCCCGTCTC

1051  GGCTATTTGC ACTGATGATA ACTTCAAAAA AAAAAAAAAA AAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：8)长度：175个氨基酸

   1  MAPHGGNTLE IVQKMGRCRL ECGEGLRPCL VDGTVTAAVC LLGGASPPAA

  51  GRPLRETAES WSPGQPGGDP SAGHRGHSRQ QELRTLSATL LSNLWTLSSG

 101  QSCRIRHRTY SSALGRGSLK KSPGLKTKGD TSVRYGRSSP PRTDPGTATR

 151  ILSQGQRREG CGREWVFLKY IPVGT

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：9)

克隆号和蛋白名称：PP1164

起始编码子：  198 ATG    终止编码子：725 TGA

蛋白质分子量：18634.15

   1   GA GGG CCT CAC GGG GTG GGT GTG AGT CTG GCC TGC CTG GGC TCG GGG     47

  48  TGG GGG GTG TTT ACA GAC GCA TTT CAG CCC CGC AGC AGG GGC TGG GGA     95

  96  GGT CCC GCT CGT GAC AGT CTC TGC ACC AAG GCA GGA GAG ATG GAA GCC    143

 144  GCC CAG AGA ACT GCC ACT CCA TAG CCT GTG GGC ATC CAG GGG TGA GCG    191

 192  GCA GCG ATG GCG CCC CAT GGA GGA AAC ACA CTG GAA ATC GTG CAG AAG    239

   1          Met Ala Pro His Gly Gly Asn Thr Leu Glu Ile Val Gln Lys     14

 240  ATG GGA AGA TGC AGG CTG GAG TGC GGA GAA GGA CTG AGA CCC TGC CTG    287

  15  Met Gly Arg Cys Arg Leu Glu Cys Gly Glu Gly Leu Arg Pro Cys Leu     30

 288  GTA GAC GGC ACC GTC ACA GCA GCC GTC TGC CTG CTA GGA GGA GCG TCT    335

  31  Val Asp Gly Thr Val Thr Ala Ala Val Cys Leu Leu Gly Gly Ala Ser     46

 336  CCA CCA GCA GCA GGC CGG CCC CTG AGG GAG ACA GCA GAG AGC TGG AGT    383

  47  Pro Pro Ala Ala Gly Arg Pro Leu Arg Glu Thr Ala Glu Ser Trp Ser      62

 384  CCT GGC CAG CCA GGC GGG GAT CCT TCA GCA GGA CAC AGG GGA CAC AGC     431

  63  Pro Gly Gln Pro Gly Gly Asp Pro Ser Ala Gly His Arg Gly His Ser      78

 432  AGG CAA CAG GAG CTC AGA ACG CTC TCG GCG ACC CTG CTG AGT AAC TTG     479

  79  Arg Gln Gln Glu Leu Arg Thr Leu Ser Ala Thr Leu Leu Ser Asn Leu      94

 480  TGG ACT TTG TCG TCT GGC CAG TCA TGC AGG ATC CGG CAC AGG ACG TAC     527

  95  Trp Thr Leu Ser Ser Gly Gln Ser Cys Arg Ile Arg His Arg Thr Tyr     110

 528  AGC TCA GCG CTG GGG AGG GGG TCC CTG AAA AAG TCA CCT GGT TTA AAG     575

 111  Ser Ser Ala Leu Gly Arg Gly Ser Leu Lys Lys Ser Pro Gly Leu Lys     126

 576  ACA AAA GGA GAC ACG TCC GTC AGG TAT GGA AGA AGC AGT CCT CCC CGG     623

 127  Thr Lys Gly Asp Thr Ser Val Arg Tyr Gly Arg Ser Ser Pro Pro Arg     142

 624  ACA GAT CCT GGG ACG GCC ACC CGC ATC CTA AGT CAG GGA CAG AGA AGA     671

 143  Thr Asp Pro Gly Thr Ala Thr Arg Ile Leu Ser Gln Gly Gln Arg Arg     158

 672  GAG GGG TGT GGG CGG GAA TGG GTC TTC CTG AAG TAC ATC CCC GTG GGG     719

 159  Glu Gly Cys Gly Arg Glu Trp Val Phe Leu Lys Tyr Ile Pro Val Gly     174

 720  ACT TGA ACA GAG CTC CAT GAG GAG CTG GTT AGT GAT GTC ACG CCC GTG     767

 175  Thr ***                                                             176

 768  CGG TTT GAC TCC GGC TGA GAA AAC GCT GGG GAC AGT GGC TCA CAC CTG     815

 816  TAA TCT CAG CCT CCC AGA CGG CTG GGA TTC CAG GCG TGA GCC TGG GCA     863

 864  CGT GGC CCA GGC GTC TCC TGT CAA TCC GTC CTG GCC TCA GCA GCT GCC     911

 912  ACC TGG AAG TTC TCC TTC AAG TCT AAC CTA AGG CCG CCC TGT GAC GGC     959

 960  TCT CGG GTC AGT TCC TTC TGT GAC CTC GGC ACC GTG GAT GCC CAT GAA    1007

1008  TGC TGA TCT CGG CTG TTC CCC ATC TCC ACT CCC CTC CCG TCT CGG CTA    1055

1056  TTT GCA CTG ATG ATA ACT TCA AAA AAA AAA AAA AAA AAA                1094

D：Blastp结果

Query＝PP1164[基因＝PP1164](175个氨基酸)

>SP_IN：O17642 O17642 caenorhabditis elegans.c34f6.3 protein.5/1999

长度＝283

分值＝31.3bits(69)，预计值＝5.5

相同性＝23/56(41％)，相似性＝28/56(49％)，缺口＝10/56(17％)

Query：23  GEGLRPCLVDGTVTAAVCLLGGASPPAAGRPLRETAESWSPGQPGGDPSAGHRGHS 78

           GEG RP     T +A        SPP  G+P  +  E  SPG+PG D  AGH G +

Sbjct：190 GEGGRPGQAGQTRSAP-------SPP--GQP-GQPGEPGSPGEPGPDGRAGHPGRN 235

>SP_IN：O17641 O17641 caenorhabditis elegans.c34f6.2 protein.5/1999

长度＝283

分值＝31.3bits(69)，预计值＝5.5

相同性＝23/56(41％)，相似性＝28/56(49％)，缺口＝10/56(17％)

Query：23  GEGLRPCLVDGTVTAAVCLLGGASPPAAGRPLRETAESWSPGQPGGDPSAGHRGHS 78

           GEG RP     T +A        SPP  G+P  +  E  SPG+PG D  AGH G +

Sbjct：190 GEGGRPGQAGQTRSAP-------SPP--GQP-GQPGEPGSPGEPGPDGRAGHPGRN 235

4.PP1187

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：10)长度：1562bp

   1  CGGAGACTAA CGAGTGTCCT TTCATCCCGG TCATGCATTC CTTTGACCCT

  51  GCAGGTATGA CGCTGGGCGG GATGGCTTCA TCGACCTGAT GGAGCTGAAG

 101  CTGATGATGG AGAAGCTGGG GGCCCCCCAG ACCCACCTGG GCCTGAAGAG

 151  CATGATCAAG GAGGTGGATG AGGACTTCGA TGGCAAGCTC AGCTTCCGGG

 201  AGTTCCTGCT CATTTTCCAC AAGGCCGCGG CAGGGGAGCT GCAGGAGGAC

 251  AGTGGGCTGA TGGCGCTGGC AAAGCTTTCT GAGATCGATG TGGCCCTGGA

 301  GGGTGTCAAA GGTGCCAAGA ACTTCTTTGA AGCCAAGGTC CAAGCCTTGT

 351  CATCGGCCAG TAAGTTTGAA GCAGAGTTGA AAGCTGAGCA AGATGAGCGG

 401  AAGCGGGAGG AGGAGGAGAG GCGGCTCCGC CAGGCAGCCT TCCAGAAACT

 451  CAAGGCCAAC TTCAATACAT AGTCCTGCTG ACCTTGCCCT CTGCCCACAG

 501  CTGTGCCTCA CAGATGCCCC GAGAAGAGAT GACTAGGCAT CTTCATCACT

 551  GCTGTCGGTC CCCTCCCTGA GCCAGCATCT CCATCCACCA CCCCGTGCCA

 601  GCTCCCATGC CAGCCTTCAT TCTTCCCAGT GTCCAAGCCC CTCCAGGAGG

 651  GTCCTGGGGT GGGCCAGATG CCTGCCCACC TCTGTCTCCT GCCTCTGCTC

 701  CTCTGCCCTT CTTATAGCCA GAACTTGTAT CTTCTCAGCA ACCTTCACTT

 751  TGTCCTTGTC CCTTTACCAT TCCCCATCAA AGAGTAGTCT GCTATATCAA

 801  TTTGTGTAGA TATGTCTGTC TTTTTGGGTC CTCAGAGAAA ATGCCCATTT

 851  TCTCGGAGAA TTCTCTGCAC TCCTCTCTGC TTCACATTCA ACTTCCCTGT

 901  TCTCATCTTT GGTAGGATTC TGCCAGTTGC TTTTGCATCT TCTGTTCCTG

 951  GGTAATGGTG GGTCTTAATG GAGGCTGGGT GGACCACTGC CCGTCCACTC

1001  TTCAACAGGA GGAACAGCAT GCCACCACAG TAACACACAT TAGAGAAAGG

1051  ACAGAGGTCT GCTCCTTCCT GCCACCTTTC TCCTGGCCCC TTAGCATTCC

1101  CCCAGTCCCT CCCTCTTCAC CTTGCTCCGT CTATGTCTTC CCAGCTCAGC

1151  CTTTTCCCCA CTCTTAAATA CTGTACTACT TCACTGTAAG AACGAAAGAA

1201  TAGTTAGGAT ACCAATGAGT AAAAGGGTTC CTGTTCACTC TGACTCTGTG

1251  CAAATTGTAT TACAGTAGAC CGCTGACGTT CCCAAGTGAC AGATCCAGGG

1301  CCTTTCAAAC ATCCCCAAAG TCATGGCCAT ACTCACCATT AGCCAGTTTC

1351  TAACATCTGT TTCAGGGTAT CCAGCTGTAG ATGTTCTTAT CCCCCATACT

1401  TGTGAGTTCT TGGGGTTGCT CACAAATACT AGGGGTTTTT GTTGTATTTT

1451  TAACAAATAT ATCCTAATGT CATATTTATT CTCTTTTGTA ACTGCTGTCT

1501  TTACAATAAA GAAATCATCT GCCAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1551  AAAAAAAAAA AA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：11)长度：127个氨基酸

   1  MELKLMMEKL GAPQTHLGLK SMIKEVDEDF DGKLSFREFL LIFHKAAAGE

  51  LQEDSGLMAL AKLSEIDVAL EGVKGAKNFF EAKVQALSSA SKFEAELKAE

 101  QDERKREEEE RRLRQAAFQK LKANFNT

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：12)

克隆号和蛋白名称：PP1187

起始编码子：  89 ATG    终止编码子：472 TAG

蛋白质分子量：30129.28

   1    C GGA GAC TAA CGA GTG TCC TTT CAT CCC GGT CAT GCA TTC CTT TGA    46

  47  CCC TGC AGG TAT GAC GCT GGG CGG GAT GGC TTC ATC GAC CTG ATG GAG      94

   1                                                          Met Glu       2

  95  CTG AAG CTG ATG ATG GAG AAG CTG GGG GCC CCC CAG ACC CAC CTG GGC     142

   3  Leu Lys Leu Met Met Glu Lys Leu Gly Ala Pro Gln Thr His Leu Gly      18

 143  CTG AAG AGC ATG ATC AAG GAG GTG GAT GAG GAC TTC GAT GGC AAG CTC     190

  19  Leu Lys Ser Met Ile Lys Glu Val Asp Glu Asp Phe Asp Gly Lys Leu      34

 191  AGC TTC CGG GAG TTC CTG CTC ATT TTC CAC AAG GCC GCG GCA GGG GAG     238

  35  Ser Phe Arg Glu Phe Leu Leu Ile Phe His Lys Ala Ala Ala Gly Glu      50

 239  CTG CAG GAG GAC AGT GGG CTG ATG GCG CTG GCA AAG CTT TCT GAG ATC     286

  51  Leu Gln Glu Asp Ser Gly Leu Met Ala Leu Ala Lys Leu Ser Glu Ile      66

 287  GAT GTG GCC CTG GAG GGT GTC AAA GGT GCC AAG AAC TTC TTT GAA GCC     334

  67  Asp Val Ala Leu Glu Gly Val Lys Gly Ala Lys Asn Phe Phe Glu Ala      82

 335  AAG GTC CAA GCC TTG TCA TCG GCC AGT AAG TTT GAA GCA GAG TTG AAA     382

  83  Lys Val Gln Ala Leu Ser Ser Ala Ser Lys Phe Glu Ala Glu Leu Lys      98

 383  GCT GAG CAA GAT GAG CGG AAG CGG GAG GAG GAG GAG AGG CGG CTC CGC     430

  99  Ala Glu Gln Asp Glu Arg Lys Arg Glu Glu Glu Glu Arg Arg Leu Arg     114

 431  CAG GCA GCC TTC CAG AAA CTC AAG GCC AAC TTC AAT ACA TAG TCC TGC     478

 115  Gln Ala Ala Phe Gln Lys Leu Lys Ala Asn Phe Asn Thr ***             128

 479  TGA CCT TGC CCT CTG CCC ACA GCT GTG CCT CAC AGA TGC CCC GAG AAG     526

 527  AGA TGA CTA GGC ATC TTC ATC ACT GCT GTC GGT CCC CTC CCT GAG CCA     574

 575  GCA TCT CCA TCC ACC ACC CCG TGC CAG CTC CCA TGC CAG CCT TCA TTC     622

 623  TTC CCA GTG TCC AAG CCC CTC CAG GAG GGT CCT GGG GTG GGC CAG ATG     670

 671  CCT GCC CAC CTC TGT CTC CTG CCT CTG CTC CTC TGC CCT TCT TAT AGC     718

 719  CAG AAC TTG TAT CTT CTC AGC AAC CTT CAC TTT GTC CTT GTC CCT TTA     766

 767  CCA TTC CCC ATC AAA GAG TAG TCT GCT ATA TCA ATT TGT GTA GAT ATG     814

 815  TCT GTC TTT TTG GGT CCT CAG AGA AAA TGC CCA TTT TCT CGG AGA ATT     862

 863  CTC TGC ACT CCT CTC TGC TTC ACA TTC AAC TTC CCT GTT CTC ATC TTT     910

 911  GGT AGG ATT CTG CCA GTT GCT TTT GCA TCT TCT GTT CCT GGG TAA TGG     958

 959  TGG GTC TTA ATG GAG GCT GGG TGG ACC ACT GCC CGT CCA CTC TTC AAC    1006

1007  AGG AGG AAC AGC ATG CCA CCA CAG TAA CAC ACA TTA GAG AAA GGA CAG    1054

1055  AGG TCT GCT CCT TCC TGC CAC CTT TCT CCT GGC CCC TTA GCA TTC CCC    1102

1103  CAG TCC CTC CCT CTT CAC CTT GCT CCG TCT ATG TCT TCC CAG CTC AGC    1150

1151  CTT TTC CCC ACT CTT AAA TAC TGT ACT ACT TCA CTG TAA GAA CGA AAG    1198

1199  AAT AGT TAG GAT ACC AAT GAG TAA AAG GGT TCC TGT TCA CTC TGA CTC    1246

1247  TGT GCA AAT TGT ATT ACA GTA GAC CGC TGA CGT TCC CAA GTG ACA GAT    1294

1295  CCA GGG CCT TTC AAA CAT CCC CAA AGT CAT GGC CAT ACT CAC CAT TAG    1342

1343  CCA GTT TCT AAC ATC TGT TTC AGG GTA TCC AGC TGT AGA TGT TCT TAT    1390

1391  CCC CCA TAC TTG TGA GTT CTT GGG GTT GCT CAC AAA TAC TAG GGG TTT    1438

1439  TTG TTG TAT TTT TAA CAA ATA TAT CCT AAT GTC ATA TTT ATT CTC TTT    1486

1487  TGT AAC TGC TGT CTT TAC AAT AAA GAA ATC ATC TGC CAA AAA AAA AAA    1534

1535  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A                              1562

5.PP1498

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：13)长度：2112bp

   1  CCTGTGTGGC CTTCGCCTGG GTGTCCCTCA ATGCATGGTT CTGGTCCACA

  51  GTCTTCCACA CCAGGGACAC TGACCTCACA GAGAAAATGG ACTACTTCTG

 101  TGCCTCCACT GTCATCCTAC ACTCAATCTA CCTGTGCTGC GTCAGGCCTG

 151  GTCAACGTGG TGTGGTGGCT GGCCTGGTGC CTGTGGAACC AGCGGCGGCT

 201  GCCTCACGTG CGCAAGTGCG TGGTGGTGGT CTTGCTGCTG CAGGGGCTGT

 251  CCCTGCTCGA GCTGCTTGAC TTCCCACCGC TCTTCTGGGT CCTGGATGCC

 301  CATGCCATCT GGCACATCAG CACCATCCCT GTCCACGTCC TCTTTTTCAG

 351  CTTTCTGGAA GATGACAGCC TGTACCTGCT GAAGGAATCA GAGGACAAGT

 401  TCAAGCTGGA CTGAAGACCT TGGAGCGAGT CTGCCCCAGT GGGGATCCTG

 451  CCCCCGCCCT GCTGGCCTCC CTTCTCCCCT CAACCCTTGA GATGATTTTC

 501  TCTTTTCAAC TTCTTGAACT TGGACATGAA GGATGTGGGC CCAGAATCAT

 551  GTGGCCAGCC CACCCCCTGT TGGCCCTCAC CAGCCTTGGA GTCTGTTCTA

 601  GGGAAGGCCT CCCAGCATCT GGGACTCGAG AGTGGGCAGC CCCTCTACCT

 651  CCTGGAGCTG AACTGGGGTG GAACTGAGTG TGTTCTTAGC TCTACCGGGA

 701  GGACAGCTGC CTGTTTCCTC CCCACCAGCC TCCTCCCCAC ATCCCCAGCT

 751  GCCTGGCTGG GTCCTGAAGC CCTCTGTCTA CCTGGGAGAC CAGGGACCAC

 801  AGGCCTTAGG GATACAGGGG GTCCCCTTCT GTTACCACCC CCCACCCTCC

 851  TCCAGGACAC CACTAGGTGG TGCTGGATGC TTGTTCTTTG GCCAGCCAAG

 901  GTTCACGGCG ATTCTCCCCA TGGGATCTTG AGGGACCAAG CTGCTGGGAT

 951  TGGGAAGGAG TTTCACCCTG ACCGTTGCCC TAGCCAGGTT CCCAGGAGGC

1001  CTCACCATAC TCCCTTTCAG GGCCAGGGCT CCAGCAAGCC CAGGGCAAGG

1051  ATCCTGTGCT GCTGTCTGGT TGAGAGCCTG CCACCGTGTG TCGGGAGTGT

1101  GGGCCAGGCT GAGTGCATAG GTGACAGGGC CGTGAGCATG GGCCTGGGTG

1151  TGTGTGAGCT CAGGCCTAGG TGCGCAGTGT GGAGACGGGT GTTGTCGGGG

1201  AAGAGGTGTG GCTTCAAAGT GTGTGTGTGC AGGGGGTGGG TGTGTTAGCG

1251  TGGGTTAGGG GAACGTGTGT GCGCGTGCTG GTGGGCATGT GAGATGAGTG

1301  ACTGCCGGTG AATGTGTCCA CAGTTGAGAG GTTGGAGCAG GATGAGGGAA

1351  TCCTGTCACC ATCAATAATC ACTTGTGGAG CGCCAGCTCT GCCCAAGACG

1401  CCACCTGGGC GGACAGCCAG GAGCTCTCCA TGGCCAGGCT GCCTGTGTGC

1451  ATGTTCCCTG TCTGGTGCCC CTTTGCCCGC CTCCTGCAAA CCTCACAGGG

1501  TCCCCACACA ACAGTGCCCT CCAGAAGCAG CCCCTCGGAG GCAGAGGAAG

1551  GAAAATGGGG ATGGCTGGGG CTCTCTCCAT CCTCCTTTTC TCCTTGCCTT

1601  CGCATGGCTG GCCTTCCCCT CCAAAACCTC CATTCCCCTG CTGCCAGCCC

1651  CTTTGCCATA GCCTGATTTT GGGGAGGAGG AAGGGGCGAT TTGAGGGAGA

1701  AGGGGAGAAA GCTTATGGCT GGGTCTGGTT TCTTCCCTTC CCAGAGGGTC

1751  TTACTGTTCC AGGGTGGCCC CAGGGCAGGC AGGGGCCACA CTATGCCTGC

1801  GCCCTGGTAA AGGTGACCCC TGCCATTTAC CAGCAGCCCT GGCATGTTCC

1851  TGCCCCACAG GAATAGAATG GAGGGAGCTC CAGAAACTTT CCATCCCAAA

1901  GGCAGTCTCC GTGGTTGAAG CAGACTGGAT TTTTGCTCTG CCCCTGACCC

1951  CTTGTCCCTC TTTGAGGGAG GGGAGCTATG CTAGGACTCC AACCTCAGGG

2001  ACTCGGGTGG CCTGCGCTAG CTTCTTTTGA TACTGAAAAC TTTTAAGGTG

2051  GGAGGGTGGC AAGGGATGTG CTTAATAAAT CAATTCCAAG CCTCAAAAAA

2101  AAAAAAAAAA AA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：14)长度：240个氨基酸

   1  MKDVGPESCG QPTPCWPSPA LESVLGKASQ HLGLESGQPL YLLELNWGGT

  51  ECVLSSTGRT AACFLPTSLL PTSPAAWLGP EALCLPGRPG TTGLRDTGGP

 101  LLLPPPTLLQ DTTRWCWMLV LWPAKVHGDS PHGILRDQAA GIGKEFHPDR

 151  CPSQVPRRPH HTPFQGQGSS KPRARILCCC LVESLPPCVG SVGQAECIGD

 201  RAVSMGLGVC ELRPRCAVWR RVLSGKRCGF KVCVCRGWVC

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：15)

克隆号和蛋白名称：PP1498

起始编码子：  526 ATG    终止编码子：1248 TAG

蛋白质分子量：25690.60

   1  CCT GTG TGG CCT TCG CCT GGG TGT CCC TCA ATG CAT GGT TCT GGT CCA      48

  49  CAG TCT TCC ACA CCA GGG ACA CTG ACC TCA CAG AGA AAA TGG ACT ACT      96

  97  TCT GTG CCT CCA CTG TCA TCC TAC ACT CAA TCT ACC TGT GCT GCG TCA     144

 145  GGC CTG GTC AAC GTG GTG TGG TGG CTG GCC TGG TGC CTG TGG AAC CAG     192

 193  CGG CGG CTG CCT CAC GTG CGC AAG TGC GTG GTG GTG GTC TTG CTG CTG     240

 241  CAG GGG CTG TCC CTG CTC GAG CTG CTT GAC TTC CCA CCG CTC TTC TGG     288

 289  GTC CTG GAT GCC CAT GCC ATC TGG CAC ATC AGC ACC ATC CCT GTC CAC     336

 337  GTC CTC TTT TTC AGC TTT CTG GAA GAT GAC AGC CTG TAC CTG CTG AAG     384

 385  GAA TCA GAG GAC AAG TTC AAG CTG GAC TGA AGA CCT TGG AGC GAG TCT     432

 433  GCC CCA GTG GGG ATC CTG CCC CCG CCC TGC TGG CCT CCC TTC TCC CCT     480

 481  CAA CCC TTG AGA TGA TTT TCT CTT TTC AAC TTC TTG AAC TTG GAC ATG     528

   1                                                              Met       1

 529  AAG GAT GTG GGC CCA GAA TCA TGT GGC CAG CCC ACC CCC TGT TGG CCC     576

   2  Lys Asp Val Gly Pro Glu Ser Cys Gly Gln Pro Thr Pro Cys Trp Pro      17

 577  TCA CCA GCC TTG GAG TCT GTT CTA GGG AAG GCC TCC CAG CAT CTG GGA     624

  18  Ser Pro Ala Leu Glu Ser Val Leu Gly Lys Ala Ser Gln His Leu Gly      33

 625  CTC GAG AGT GGG CAG CCC CTC TAC CTC CTG GAG CTG AAC TGG GGT GGA     672

  34  Leu Glu Ser Gly Gln Pro Leu Tyr Leu Leu Glu Leu Asn Trp Gly Gly      49

 673  ACT GAG TGT GTT CTT AGC TCT ACC GGG AGG ACA GCT GCC TGT TTC CTC     720

  50  Thr Glu Cys Val Leu Ser Ser Thr Gly Arg Thr Ala Ala Cys Phe Leu      65

 721  CCC ACC AGC CTC CTC CCC ACA TCC CCA GCT GCC TGG CTG GGT CCT GAA     768

  66  Pro Thr Ser Leu Leu Pro Thr Ser Pro Ala Ala Trp Leu Gly Pro Glu      81

 769  GCC CTC TGT CTA CCT GGG AGA CCA GGG ACC ACA GGC CTT AGG GAT ACA     816

  82  Ala Leu Cys Leu Pro Gly Arg Pro Gly Thr Thr Gly Leu Arg Asp Thr      97

 817  GGG GGT CCC CTT CTG TTA CCA CCC CCC ACC CTC CTC CAG GAC ACC ACT     864

  98  Gly Gly Pro Leu Leu Leu Pro Pro Pro Thr Leu Leu Gln Asp Thr Thr     113

 865  AGG TGG TGC TGG ATG CTT GTT CTT TGG CCA GCC AAG GTT CAC GGC GAT     912

 114  Arg Trp Cys Trp Met Leu Val Leu Trp Pro Ala Lys Val His Gly Asp     129

 913  TCT CCC CAT GGG ATC TTG AGG GAC CAA GCT GCT GGG ATT GGG AAG GAG     960

 130  Ser Pro His Gly Ile Leu Arg Asp Gln Ala Ala Gly Ile Gly Lys Glu     145

 961  TTT CAC CCT GAC CGT TGC CCT AGC CAG GTT CCC AGG AGG CCT CAC CAT    1008

 146  Phe His Pro Asp Arg Cys Pro Ser Gln Val Pro Arg Arg Pro His His     161

1009  ACT CCC TTT CAG GGC CAG GGC TCC AGC AAG CCC AGG GCA AGG ATC CTG    1056

 162  Thr Pro Phe Gln Gly Gln Gly Ser Ser Lys Pro Arg Ala Arg Ile Leu     177

1057  TGC TGC TGT CTG GTT GAG AGC CTG CCA CCG TGT GTC GGG AGT GTG GGC    1104

 178  Cys Cys Cys Leu Val Glu Ser Leu Pro Pro Cys Val Gly Ser Val Gly     193

1105  CAG GCT GAG TGC ATA GGT GAC AGG GCC GTG AGC ATG GGC CTG GGT GTG    1152

 194  Gln Ala Glu Cys Ile Gly Asp Arg Ala Val Ser Met Gly Leu Gly Val     209

1153  TGT GAG CTC AGG CCT AGG TGC GCA GTG TGG AGA CGG GTG TTG TCG GGG    1200

 210  Cys Glu Leu Arg Pro Arg Cys Ala Val Trp Arg Arg Val Leu Ser Gly     225

1201  AAG AGG TGT GGC TTC AAA GTG TGT GTG TGC AGG GGG TGG GTG TGT TAG    1248

 226  Lys Arg Cys Gly Phe Lys Val Cys Val Cys Arg Gly Trp Val Cys ***     241

1249  CGT GGG TTA GGG GAA CGT GTG TGC GCG TGC TGG TGG GCA TGT GAG ATG    1296

1297  AGT GAC TGC CGG TGA ATG TGT CCA CAG TTG AGA GGT TGG AGC AGG ATG    1344

1345  AGG GAA TCC TGT CAC CAT CAA TAA TCA CTT GTG GAG CGC CAG CTC TGC    1392

1393  CCA AGA CGC CAC CTG GGC GGA GAG CCA GGA GCT CTC CAT GGC CAG GCT    1440

1441  GCC TGT GTG CAT GTT CCC TGT CTG GTG CCC CTT TGC CCG CCT CCT GCA    1488

1489  AAC CTC ACA GGG TCC CCA CAC AAC AGT GCC CTC CAG AAG CAG CCC CTC    1536

1537  GGA GGC AGA GGA AGG AAA ATG GGG ATG GCT GGG GCT CTC TCC ATC CTC    1584

1585  CTT TTC TCC TTG CCT TCG CAT GGC TGG CCT TCC CCT CCA AAA CCT CCA    1632

1633  TTC CCC TGC TGC CAG CCC CTT TGC CAT AGC CTG ATT TTG GGG AGG AGG    1680

1681  AAG GGG CGA TTT GAG GGA GAA GGG GAG AAA GCT TAT GGC TGG GTC TGG    1728

1729  TTT CTT CCC TTC CCA GAG GGT CTT ACT GTT CCA GGG TGG CCC CAG GGC    1776

1777  AGG CAG GGG CCA CAC TAT GCC TGC GCC CTG GTA AAG GTG ACC CCT GCC    1824

1825  ATT TAC CAG CAG CCC TGG CAT GTT CCT GCC CCA CAG GAA TAG AAT GGA    1872

1873  GGG AGC TCC AGA AAC TTT CCA TCC CAA AGG CAG TCT CCG TGG TTG AAG    1920

1921  CAG ACT GGA TTT TTG CTC TGC CCC TGA CCC CTT GTC CCT CTT TGA GGG    1968

1969  AGG GGA GCT ATG CTA GGA CTC CAA CCT CAG GGA CTC GGG TGG CCT GCG    2016

2017  CTA GCT TCT TTT GAT ACT GAA AAC TTT TAA GGT GGG AGG GTG GCA AGG    2064

2065  GAT GTG CTT AAT AAA TCA ATT CCA AGC CTC AAA AAA AAA AAA AAA AAA    2112

6.PP2464

A：核苷酸序列：(SBQ ID NO：16)长度：2811bp

   1  CCTAGGCCAG CCCCCCCCGC AGGAAGAGTC CCCTTCCTCT GAAGCAAAGA

  51  GCAGAGGACC CACCCCACCA GCCATGGGCC CACGGGATGC CAGACCTCCT

 101  CGAAGGAGCA GCCAGCCATC TCCAACAGCA GTGCCAGCCT CCGACAGCCC

 151  TCCCACCAAG CAAGAGGTGA AGAAGGCAGG AGAGAGACAC AAGCTGGCAA

 201  AGGAGCGGCG AGAAGAGCGG GCCAAGTACC TGGCGGCCAA GAAGGCAGTG

 251  TGGCTGGAGA AGGAGGAGAA GGCCAAGGCG CTGCGGGAGA AGCAGCTCCA

 301  GGAGCGCCGG CGCCGGCTGG AGGAGCAACG TCTTAAAGCC GAGCAACGCC

 351  GTGCAGCCCT GGAGGAACGG CAGCGGCAGA AGCTCGAGAA AACAGCAAGG

 401  AGCGCTATGA AGCAGCCATC CAACGGTCAG TGAAGAAGAC GTGGGCCGAA

 451  ATCCGGCAGC AGCGCTGGTC CTGGGCAGGG GCCCTGCACC ACAGCTCTCC

 501  AGGACATAAG ACCAGTGGGA GCAGGTGCTC CGTGTCGGCA GTTAACCTGC

 551  CCAAACACGT GGACTCTATA ATCAACAAGC GGCTCTCAAA GTCCTCTGCC

 601  ACGCTCTGGA ACTCCCCCAG TAGAAATCGC AGCCTGCAGC TGAGCGCATG

 651  GGAGAGCAGC ATCGTGGATC GTCTGATGAC GCCCACTCTC TCCTTCCTTG

 701  CTCGGAGTCG CAGCGCGGTC ACACTGCCCC GCAACGGCCG GGACCAGGCC

 751  GTGCCGGTGT GCCCGCGCTC GGCCTCCGCC AGCCCCCTGA CGCCGTGCAG

 801  CGTCACCCGA AGCGTGCACC GCTGCGCCCC CGCCGGTGAG CGCGGGGAGC

 851  GCCGCAAGCC CAACGCCGGG GGCAGCCCCG CTCCGGTGCG CCGCCGGCCG

 901  GAGGCCTCGC CGGTGCAGAA AAAGGAGAAG AAGGACAAGG AGCGGGAAAA

 951  CGAGAAGGAG AAGAGTGCCC TAGCCCGGGA GCGCAGCCTC AAGAAGCGCC

1001  AGTCGCTGCC CGCCTCCCCA CGTGCCCGCC TCTCCGCCAG CACCGCCTCT

1051  GAGCTCAGCC CCAAATCCAA GGCCAGGCCA TCCTCTCCCT CCACATCCTG

1101  GCACAGGCCT GCCTCCCCCT GCCCCAGCCC AGGGCCAGGC CACACTCTGC

1151  CTCCAAAGCC ACCGTCCCCC CGAGGCACCA CTGCATCCCC CAAGGGGCGG

1201  GTTCGGAGGA AGGAGGAGGC AAAGGAGAGC CCCAGCGCCG CAGGGCCCGA

1251  GGACAAGAGC CAGAGCAAGC GCAGGGCCAG TAACGAGAAG GAGTCAGCAG

1301  CCCCAGCCTC ACCGGCACCT TCGCCGGCGC CCTCGCCCAC CCCAGCCCCG

1351  CCCCAGAAGG AGCAGCCCCC CGCGGAGACC CCTACAGACG CTGCTGTCTT

1401  GACCTCACCC CCAGCCCCTG CTCCCCCGGT GACCCCTAGC AAACCAATGG

1451  CCGGCACCAC AGACCGAGAA GAAGCCACTC GGCTCTTGGC TGAAAAGCGG

1501  CGCCAGGCCC GGGAGCAGCG GGAGCGCGAG GAGCAGGAGC GGAGGCTGCA

1551  GGCAGAAAGG GACAAGCGAA TGCGAGAGGA GCAGCTGGCA CGGGAGGCCG

1601  AGGCCCGGGC GGAGCGGGAG GCGGAGGCCC GGAGGCGGGA GGAGCAGGAG

1651  GCACGAGAGA AGGCGCAGGC CGAGCAGGAG GAGCAGGAGC GGCTGCAGAA

1701  GCAGAAAGAG GAGGCCGAAG CTCGGTCGCG GGAAGAGGCG GAGCGGCAGC

1751  GTCTGGAGCG GGAAAAGCAC TTCCAGCAGC AGGAGCAAGA GCGGCAAGAG

1801  CGCAGAAAGC GTCTGGAGGA GATCATGAAG AGGACTCGGA AGTCAGAAGT

1851  TTCTGAAACC AAGAAGCAGG ACAGCAAGGA GCGCRAWCGC CAACGGTTCC

1901  AGCCCAGAGC CTGTGAAAGC TGTGGAGGCT CGGTCCCCAG GGCTGCAGAA

1951  GGAGGCTGTG CAGAAAGAGG AGCCCATCCC ACAGGAGCCT CAGTGGAGTC

2001  TCCCAAGCAA GGAGTTGCCA GCGTCCCTGG TGAATGGCCT GCAGCCTCTC

2051  CCAGCACACC AGGAGAATGG CTTCTCCACC AACGGACCCT CTGGGGACAA

2101  GAGTCTGAGC CGAACACCAG AGACACTCCT GCCCTTTGCA GAGGCAGAAG

2151  CCTTCCTCAA GAAAGCTGTG GTGCAGTCCC CGCAGGTCAC AGAAGTCCTT

2201  TAAGAGGGTT TGCCTTGGAT CCGGGCACAG TTGTGAGGGC TCCTCTGCAT

2251  CACCTACCAG GATGTCTGGA GGAGAAAAAG ACAGAACAAA GATGGAAGTG

2301  GCCTGGGCCC CTGGGGGTGG GTCCTCTCTG TTGTTTTTAA TCTGCACCTT

2351  ATAGACTGAT GTCTCTTTGG CCGGAGCCAG ATCTGCCCCT CAGTGCATTC

2401  GTGTGCTCGC ACGCGCAGAC ATCCCTTCTC CCCCATACAC ACATATACAC

2451  TCACAGCCTC TCTGGCCTCT TCCCTTGGGG AGGGGCCACC TGTAGTATTT

2501  GCCTTGATTT GGTGGGGTAC AGTGGATGTG AATACTGTAA ATAGCTTGTG

2551  CTCAGACTCC TCTGCGTGGA GAGGGTGGGT GCAGGAGGCA GACCCTCCCC

2601  CCAAAGCCCC CTGGGGAGAT CTTCCTCTCT CTATTTAACT GTAACTGAGG

2651  GGGATCCCAG GTCTGGGGAT GGGGGACACC TTGGGCCACA GGATACTGGT

2701  TGCTTCAGGG GTACCCATGC CCCCTGCCCT CGCCTGGAAT CAGTGTTACT

2751  GCATCTGATT AAATGTCTCC AGAAATAAAG AATAATTCTG CCAAAAAAAA

2801  AAAAAAAAAA A

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：17)长度：554个氨基酸

   1  MTPTLSFLAR SRSAVTLPRN GRDQAVPVCP RSASASPLTP CSVTRSVHRC

  51  APAGERGERR KPNAGGSPAP VRRRPEASPV QKKEKKDKER ENEKEKSALA

 101  RERSLKKRQS LPASPRARLS ASTASELSPK SKARPSSPST SWHRPASPCP

 151  SPGPGHTLPP KPPSPRGTTA SPKGRVRRKE EAKESPSAAG PEDKSQSKRR

 201  ASNEKESAAP ASPAPSPAPS PTPAPPQKEQ PPAETPTDAA VLTSPPAPAP

 251  PVTPSKPMAG TTDREEATRL LAEKRRQARE QREREEQERR LQAERDKRMR

 301  EEQLAREAEA RAEREAEARR REEQEAREKA QAEQEEQERL QKQKEEAEAR

 351  SREEAERQRL EREKHFQQQE QERQERRKRL EEIMKRTRKS EVSETKKQDS

 401  KERXRQRFQP RACESCGGSV PRAAEGGCAE RGAHPTGASV ESPKQGVASV

 451  PGEWPAASPS TPGEWLLHQR TLWGQESEPN TRDTPALCRG RSLPQESCGA

 501  VPAGHRSPLR GFALDPGTVV RAPLHHLPGC LEEKKTEQRW KWPGPLGVGP

 551  LCCF

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：18)

克隆号和蛋白名称：PP2464

起始编码子：  676 ATG    终止编码子：2340 TAA

蛋白质分子量：61259.91

   1  CCT AGG CCA GCC CCC CCC GCA GGA AGA GTC CCC TTC CTC TGA AGC AAA      48

  49  GAG CAG AGG ACC CAC CCC ACC AGC CAT GGG CCC ACG GGA TGC CAG ACC      96

  97  TCC TCG AAG GAG CAG CCA GCC ATC TCC AAC AGC AGT GCC AGC CTC CGA     144

 145  CAG CCC TCC CAC CAA GCA AGA GGT GAA GAA GGC AGG AGA GAG ACA CAA     192

 193  GCT GGC AAA GGA GCG GCG AGA AGA GCG GGC CAA GTA CCT GGC GGC CAA     240

 241  GAA GGC AGT GTG GCT GGA GAA GGA GGA GAA GGC CAA GGC GCT GCG GGA     288

 289  GAA GCA GCT CCA GGA GCG CCG GCG CCG GCT GGA GGA GCA ACG TCT TAA     336

 337  AGC CGA GCA ACG CCG TGC AGC CCT GGA GGA ACG GCA GCG GCA GAA GCT     384

 385  CGA GAA AAC AGC AAG GAG CGC TAT GAA GCA GCC ATC CAA CGG TCA GTG     432

 433  AAG AAG ACG TGG GCC GAA ATC CGG CAG CAG CGC TGG TCC TGG GCA GGG     480

 481  GCC CTG CAC CAC AGC TCT CCA GGA CAT AAG ACC AGT GGG AGC AGG TGC     528

 529  TCC GTG TCG GCA GTT AAC CTG CCC AAA CAC GTG GAC TCT ATA ATC AAC     576

 577  AAG CGG CTC TCA AAG TCC TCT GCC ACG CTC TGG AAC TCC CCC AGT AGA     624

 625  AAT CGC AGC CTG CAG CTG AGC GCA TGG GAG AGC AGC ATC GTG GAT CGT     672

 673  CTG ATG ACG CCC ACT CTC TCC TTC CTT GCT CGG AGT CGC AGC GCG GTC     720

   1      Met Thr Pro Thr Leu Ser Phe Leu Ala Arg Ser Arg Ser Ala Val      15

 721  ACA CTG CCC CGC AAC GGC CGG GAC CAG GCC GTG CCG GTG TGC CCG CGC     768

  16  Thr Leu Pro Arg Asn Gly Arg Asp Gln Ala Val Pro Val Cys Pro Arg      31

 769  TCG GCC TCC GCC AGC CCC CTG ACG CCG TGC AGC GTC ACC CGA AGC GTG     816

  32  Ser Ala Ser Ala Ser Pro Leu Thr Pro Cys Ser Val Thr Arg Ser Val      47

 817  CAC CGC TGC GCC CCC GCC GGT GAG CGC GGG GAG CGC CGC AAG CCC AAC     864

  48  His Arg Cys Ala Pro Ala Gly Glu Arg Gly Glu Arg Arg Lys Pro Asn      63

 865  GCC GGG GGC AGC CCC GCT CCG GTG CGC CGC CGG CCG GAG GCC TCG CCG     912

  64  Ala Gly Gly Ser Pro Ala Pro Val Arg Arg Arg Pro Glu Ala Ser Pro      79

 913  GTG CAG AAA AAG GAG AAG AAG GAC AAG GAG CGG GAA AAC GAG AAG GAG     960

  80  Val Gln Lys Lys Glu Lys Lys Asp Lys Glu Arg Glu Asn Glu Lys Glu      95

 961  AAG AGT GCC CTA GCC CGG GAG CGC AGC CTC AAG AAG CGC CAG TCG CTG    1008

  96  Lys Ser Ala Leu Ala Arg Glu Arg Ser Leu Lys Lys Arg Gln Ser Leu     111

1009  CCC GCC TCC CCA CGT GCC CGC CTC TCC GCC AGC ACC GCC TCT GAG CTC    1056

 112  Pro Ala Ser Pro Arg Ala Arg Leu Ser Ala Ser Thr Ala Ser Glu Leu     127

1057  AGC CCC AAA TCC AAG GCC AGG CCA TCC TCT CCC TCC ACA TCC TGG CAC    1104

 128  Ser Pro Lys Ser Lys Ala Arg Pro Ser Ser Pro Ser Thr Ser Trp His     143

1105  AGG CCT GCC TCC CCC TGC CCC AGC CCA GGG CCA GGC CAC ACT CTG CCT    1152

 144  Arg Pro Ala Ser Pro Cys Pro Ser Pro Gly Pro Gly His Thr Leu Pro     159

1153  CCA AAG CCA CCG TCC CCC CGA GGC ACC ACT GCA TCC CCC AAG GGG CGG    1200

 160  Pro Lys Pro Pro Ser Pro Arg Gly Thr Thr Ala Ser Pro Lys Gly Arg     175

1201  GTT CGG AGG AAG GAG GAG GCA AAG GAG AGC CCC AGC GCC GCA GGG CCC    1248

 176  Val Arg Arg Lys Glu Glu Ala Lys Glu Ser Pro Ser Ala Ala Gly Pro     191

1249  GAG GAC AAG AGC CAG AGC AAG CGC AGG GCC AGT AAC GAG AAG GAG TCA    1296

 192  Glu Asp Lys Ser Gln Ser Lys Arg Arg Ala Ser Asn Glu Lys Glu Ser     207

1297  GCA GCC CCA GCC TCA CCG GCA CCT TCG CCG GCG CCC TCG CCC ACC CCA    1344

 208  Ala Ala Pro Ala Ser Pro Ala Pro Ser Pro Ala Pro Ser Pro Thr Pro     223

1345  GCC CCG CCC CAG AAG GAG CAG CCC CCC GCG GAG ACC CCT ACA GAC GCT    1392

 224  Ala Pro Pro Gln Lys Glu Gln Pro Pro Ala Glu Thr Pro Thr Asp Ala     239

1393  GCT GTC TTG ACC TCA CCC CCA GCC CCT GCT CCC CCG GTG ACC CCT AGC    1440

 240  Ala Val Leu Thr Ser Pro Pro Ala Pro Ala Pro Pro Val Thr Pro Ser     255

1441  AAA CCA ATG GCC GGC ACC ACA GAC CGA GAA GAA GCC ACT CGG CTC TTG    1488

 256  Lys Pro Met Ala Gly Thr Thr Asp Arg Glu Glu Ala Thr Arg Leu Leu     271

1489  GCT GAA AAG CGG CGC CAG GCC CGG GAG CAG CGG GAG CGC GAG GAG CAG    1536

 272  Ala Glu Lys Arg Arg Gln Ala Arg Glu Gln Arg Glu Arg Glu Glu Gln     287

1537  GAG CGG AGG CTG CAG GCA GAA AGG GAC AAG CGA ATG CGA GAG GAG CAG    1584

 288  Glu Arg Arg Leu Gln Ala Glu Arg Asp Lys Arg Met Arg Glu Glu Gln     303

1585  CTG GCA CGG GAG GCC GAG GCC CGG GCG GAG CGG GAG GCG GAG GCC CGG    1632

 304  Leu Ala Arg Glu Ala Glu Ala Arg Ala Glu Arg Glu Ala Glu Ala Arg     319

1633  AGG CGG GAG GAG CAG GAG GCA CGA GAG AAG GCG CAG GCC GAG CAG GAG    1680

 320  Arg Arg Glu Glu Gln Glu Ala Arg Glu Lys AAa Gln Ala Glu Gln Glu     335

1681  GAG CAG GAG CGG CTG CAG AAG CAG AAA GAG GAG GCC GAA GCT CGG TCG    1728

 336  Glu Gln Glu Arg Leu Gln Lys Gln Lys Glu Glu Ala Glu Ala Arg Ser     351

1729  CGG GAA GAG GCG GAG CGG CAG CGT CTG GAG CGG GAA AAG CAC TTC CAG    1776

 352  Arg Glu Glu Ala Glu Arg Gln Arg Leu Glu Arg Glu Lys His Phe Gln     367

1777  CAG CAG GAG CAA GAG CGG CAA GAG CGC AGA AAG CGT CTG GAG GAG ATC    1824

 368  Gln Gln Glu Gln Glu Arg Gln Glu Arg Arg Lys Arg Leu Glu Glu Ile     383

1825  ATG AAG AGG ACT CGG AAG TCA GAA GTT TCT GAA ACC AAG AAG CAG GAC    1872

 384  Met Lys Arg Thr Arg Lys Ser Glu Val Ser Glu Thr Lys Lys Gln Asp     399

1873  AGC AAG GAG CGC RAW CGC CAA CGG TTC CAG CCC AGA GCC TGT GAA AGC    1920

 400  Ser Lys Glu Arg Xxx Arg Gln Arg Phe Gln Pro Arg Ala Cys Glu Ser     415

1921  TGT GGA GGC TCG GTC CCC AGG GCT GCA GAA GGA GGC TGT GCA GAA AGA    1968

 416  Cys Gly Gly Ser Val Pro Arg Ala Ala Glu Gly Gly Cys Ala Glu Arg     431

1969  GGA GCC CAT CCC ACA GGA GCC TCA GTG GAG TCT CCC AAG CAA GGA GTT    2016

 432  Gly Ala His Pro Thr Gly Ala Ser Val Glu Ser Pro Lys Gln Gly Val     447

2017  GCC AGC GTC CCT GGT GAA TGG CCT GCA GCC TCT CCC AGC ACA CCA GGA    2064

 448  Ala Ser Val Pro Gly Glu Trp Pro Ala Ala Ser Pro Ser Thr Pro Gly     463

2065  GAA TGG CTT CTC CAC CAA CGG ACC CTC TGG GGA CAA GAG TCT GAG CCG    2112

 464  Glu Trp Leu Leu His Gln Arg Thr Leu Trp Gly Gln Glu Ser Glu Pro     479

2113  AAC ACC AGA GAC ACT CCT GCC CTT TGC AGA GGC AGA AGC CTT CCT CAA    2160

 480  Asn Thr Arg Asp Thr Pro Ala Leu Cys Arg Gly Arg Ser Leu Pro Gln     495

2161  GAA AGC TGT GGT GCA GTC CCC GCA GGT CAC AGA AGT CCT TTA AGA GGG    2208

 496  Glu Ser Cys Gly Ala Val Pro Ala Gly His Arg Ser Pro Leu Arg Gly     511

2209  TTT GCC TTG GAT CCG GGC ACA GTT GTG AGG GCT CCT CTG CAT CAC CTA    2256

 512  Phe Ala Leu Asp Pro Gly Thr Val Val Arg Ala Pro Leu His His Leu     527

2257  CCA GGA TGT CTG GAG GAG AAA AAG ACA GAA CAA AGA TGG AAG TGG CCT    2304

 528  Pro Gly Cys Leu Glu Glu Lys Lys Thr Glu Gln Arg Trp Lys Trp Pro     543

2305  GGG CCC CTG GGG GTG GGT CCT CTC TGT TGT TTT TAA TCT GCA CCT TAT    2352

 544  Gly Pro Leu Gly Val Gly Pro Leu Cys Cys Phe ***                     555

2353  AGA CTG ATG TCT CTT TGG CCG GAG CCA GAT CTG CCC CTC AGT GCA TTC    2400

2401  GTG TGC TCG CAC GCG CAG ACA TCC CTT CTC CCC CAT ACA CAC ATA TAC    2448

2449  ACT CAC AGC CTC TCT GGC CTC TTC CCT TGG GGA GGG GCC ACC TGT AGT    2496

2497  ATT TGC CTT GAT TTG GTG GGG TAC AGT GGA TGT GAA TAC TGT AAA TAG    2544

2545  CTT GTG CTC AGA CTC CTC TGC GTG GAG AGG GTG GGT GCA GGA GGC AGA    2592

2593  CCC TCC CCC CAA AGC CCC CTG GGG AGA TCT TCC TCT CTC TAT TTA ACT    2640

2641  GTA ACT GAG GGG GAT CCC AGG TCT GGG GAT GGG GGA CAC CTT GGG CCA    2688

2689  CAG GAT ACT GGT TGC TTC AGG GGT ACC CAT GCC CCC TGC CCT CGC CTG    2736

2737  GAA TCA GTG TTA CTG CAT CTG ATT AAA TGT CTC CAG AAA TAA AGA ATA    2784

2785  ATT CTG CCA AAA AAA AAA AAA AAA AAA                                2811

7.PP3051

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：19)长度：1923bp

   1  GGCACAGGCG AGGAGCGCGC CGCCCGCCAG CTCCCTGCGT CCCGTCCCGC

  51  GTCCCCGCGT TCCCGCGTCC TGCGATCCGC CGCCATGGCC AGTGAGGAGC

 101  TGGCGTGCAA GCTGGAGCGC CGGCTGCGGC GCGAGGAGGC CGAGGAGAGT

 151  GGCCCCCAGC TGGCTCCCCT CGGCGCCCCA GCCCCGGAGC CCAAGCCCGA

 201  GCCCGAGCCT CCCGCCCGTG CGCCCACGGC CAGCGCCGAC GCGGAGCTGA

 251  GCGCCCAGCT GAGCCGGCGG CTGGACATCA ACGAGGGCGC TGCGCGGCCC

 301  GGCGCTGCAG GGTCTTCAAC CCCTACACGG AGTTCCCTGA GTTCAGCCGC

 351  CGCCTCATCA AGGACCTGGA GAGCATGTTC AAACTGTATG ACGCTGGGCG

 401  GGATGGCTTC ATCGACCTGA TGGAGCTGAA GCTGATGATG GAGAAGCTGG

 451  GGGCCCCCCA GACCCACCTG GGCCTGAAGA GCATGATCAA GGAGGTGGAT

 501  GAGGACTTCG ATGGCAAGCT CAGCTTCCGG GAGTTCCTGC TCATTTTCCA

 551  CAAGGCCGCG GCAGGGGAGC TGCAGGAGGA CAGTGGGCTG ATGGCGCTGG

 601  CAAAGCTTTC TGAGATCGAT GTGGCCCTGG AGGGTGTCAA AGGTGCCAAG

 651  AACTTCTTTG AAGCCAAGGT CCAAGCCTTG TCATCGGCCA GTAAGTTTGA

 701  AGCAGAGTTG AAAGCTGAGC AAGATGAGCG GAAGCGGGAG GAGGAGGAGA

 751  GGCGGCTCCG CCAGGCAGCC TTCCAGAAAC TCAAGGCCAA CTTCAATACA

 801  TAGTCCTGCT GACCTTGCCC TCTGCCCACA GCTGTGCCTC ACAGATGCCC

 851  CGAGAAGAGA TGACTAGGCA TCTTCATCAC TGCTGTCGGT CCCCTCCCTG

 901  AGCCAGCATC TCCATCCACC ACCCCGTGCC AGCTCCCATG CCAGCCTTCA

 951  TTCTTCCCAG TGTCCAAGCC CCTCCAGGAG GGTCCTGGGG TGGGCCAGAT

1001  GCCTGCCCAC CTCTGTCTCC TGCCTCTGCT CCTCTGCCCT TCTTATAGCC

1051  AGAACTTGTA TCTTCTCAGC AACCTTCACT TTGTCCTTGT CCCTTTACCA

1101  TTCCCCATCA AAGAGTAGTC TGCTATATCA ATTTGTGTAG ATATGTCTGT

1151  CTTTTTGGGT CCTCAGAGAA AATGCCCATT TTCTCGGAGA ATTCTCTGCA

1201  CTCCTCTCTG CTTCACATTC AACTTCCCTG TTCTCATCTT TGGTAGGATT

1251  CTGCCAGTTG CTTTTGCATC TTCTGTTCCT GGGTAATGGT GGGTCTTAAT

1301  GGAGGCTGGG TGGACCACTG CCCGTCCACT CTTCAACAGG AGGAACAGCA

1351  TGCCACCACA GTAACACACA TTAGAGAAAG GACAGAGGTC TGCTCCTTCC

1401  TGCCACCTTT CTCCTGGCCC CTTAGCATTC CCCCAGTCCC TCCCTCTTCA

1451  CCTTCCTCCG TCTATGTCTT CCCAGCTCAG CCTTTTCCCC ACTCTTAAAT

1501  ACTGTACTAC TTCACTGTAA GAACGAAAGA ATAGTTAGGA TACCAATGAG

1551  TAAAAGGGTT CCTGTTCACT CTGACTCTGT GCAAATTGTA TTACAGTAGA

1601  CCGCTGACGT TCCCAAGTGA CAGATCCAGG GCCTTTCAAA CATCCCCAAA

1651  GTCATGGCCA TACTCACCAT TAGCCAGTTT CTAACATCTG TTTCAGTGTA

1701  TCCAGCTGTA GATGTTCTTA TCCCCCATAC TTGTGAGTTC TTGGGGTTGC

1751  TCACAAATAC TAGGGGTTTT TGTTGTATTT TTAACAAATA TATCCTAATG

1801  TCATATTTAT TCTCTTTTGT AACTGCTGTC TTTACAATAA AGAAATCATC

1851  TGCCTTTCTA TCTTAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1901  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：20)长度：142个氨基酸

   1  MFKLYDAGRD GFIDLMELKL MMEKLGAPQT HLGLKSMIKE VDEDFDGKLS

  51  FREFLLIFHK AAAGELQEDS GLMALAKLSE IDVALEGVKG AKNFFEAKVQ

 101  ALSSASKFEA ELKAEQDERK REEEERRLRQ AAFQKLKANF NT

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：21)

克隆号和蛋白名称：PP3051

起始编码子：  375 ATG    终止编码子：803 TAG

蛋白质分子量：16105.65

   1   GG CAC AGG CGA GGA GCG CGC CGC CCG CCA GCT CCC TGC GTC CCG TCC     47

  48  CGC GTC CCC GCG TTC CCG CGT CCT GCG ATC CGC CGC CAT GGC CAG TGA     95

  96  GGA GCT GGC GTG CAA GCT GGA GCG CCG GCT GCG GCG CGA GGA GGC CGA    143

 144  GGA GAG TGG CCC CCA GCT GGC TCC CCT CGG CGC CCC AGC CCC GGA GCC    191

 192  CAA GCC CGA GCC CGA GCC TCC CGC CCG TGC GCC CAC GGC CAG CGC CGA    239

 240  CGC GGA GCT GAG CGC CCA GCT GAG CCG GCG GCT GGA CAT CAA CGA GGG    287

 288  CGC TGC GCG GCC CGG CGC TGC AGG GTC TTC AAC CCC TAC ACG GAG TTC    335

 336  CCT GAG TTC AGC CGC CGC CTC ATC AAG GAC CTG GAG AGC ATG TTC AAA    383

   1                                                      Met Phe Lys      3

 384  CTG TAT GAC GCT GGG CGG GAT GGC TTC ATC GAC CTG ATG GAG CTG AAG    431

   4  Leu Tyr Asp Ala Gly Arg Asp Gly Phe Ile Asp Leu Met Glu Leu Lys     19

 432  CTG ATG ATG GAG AAG CTG GGG GCC CCC CAG ACC CAC CTG GGC CTG AAG     479

  20  Leu Met Met Glu Lys Leu Gly Ala Pro Gln Thr His Leu Gly Leu Lys      35

 480  AGC ATG ATC AAG GAG GTG GAT GAG GAC TTC GAT GGC AAG CTC AGC TTC     527

  36  Ser Met Ile Lys Glu Val Asp Glu Asp Phe Asp Gly Lys Leu Ser Phe      51

 528  CGG GAG TTC CTG CTC ATT TTC CAC AAG GCC GCG GCA GGG GAG CTG CAG     575

  52  Arg Glu Phe Leu Leu Ile Phe His Lys Ala Ala Ala Gly Glu Leu Gln      67

 576  GAG GAC AGT GGG CTG ATG GCG CTG GCA AAG CTT TCT GAG ATC GAT GTG     623

  68  Glu Asp Ser Gly Leu Met Ala Leu Ala Lys Leu Ser Glu Ile Asp Val      83

 624  GCC CTG GAG GGT GTC AAA GGT GCC AAG AAC TTC TTT GAA GCC AAG GTC     671

  84  Ala Leu Glu Gly Val Lys Gly Ala Lys Asn Phe Phe Glu Ala Lys Val      99

 672  CAA GCC TTG TCA TCG GCC AGT AAG TTT GAA GCA GAG TTG AAA GCT GAG     719

 100  Gln Ala Leu Ser Ser Ala Ser Lys Phe Glu Ala Glu Leu Lys Ala Glu     115

 720  CAA GAT GAG CGG AAG CGG GAG GAG GAG GAG AGG CGG CTC CGC CAG GCA     767

 116  Gln Asp Glu Arg Lys Arg Glu Glu Glu Glu Arg Arg Leu Arg Gln Ala     131

 768  GCC TTC CAG AAA CTC AAG GCC AAC TTC AAT ACA TAG TCC TGC TGA CCT     815

 132  Ala Phe Gln Lys Leu Lys Ala Asn Phe Asn Thr ***                     143

 816  TGC CCT CTG CCC ACA GCT GTG CCT CAC AGA TGC CCC GAG AAG AGA TGA     863

 864  CTA GGC ATC TTC ATC ACT GCT GTC GGT CCC CTC CCT GAG CCA GCA TCT     911

 912  CCA TCC ACC ACC CCG TGC CAG CTC CCA TGC CAG CCT TCA TTC TTC CCA     959

 960  GTG TCC AAG CCC CTC CAG GAG GGT CCT GGG GTG GGC CAG ATG CCT GCC    1007

1008  CAC CTC TGT CTC CTG CCT CTG CTC CTC TGC CCT TCT TAT AGC CAG AAC    1055

1056  TTG TAT CTT CTC AGC AAC CTT CAC TTT GTC CTT GTC CCT TTA CCA TTC    1103

1104  CCC ATC AAA GAG TAG TCT GCT ATA TCA ATT TGT GTA GAT ATG TCT GTC    1151

1152  TTT TTG GGT CCT CAG AGA AAA TGC CCA TTT TCT CGG AGA ATT CTC TGC    1199

1200  ACT CCT CTC TGC TTC ACA TTC AAC TTC CCT GTT CTC ATC TTT GGT AGG    1247

1248  ATT CTG CCA GTT GCT TTT GCA TCT TCT GTT CCT GGG TAA TGG TGG GTC    1295

1296  TTA ATG GAG GCT GGG TGG ACC ACT GCC CGT CCA CTC TTC AAC AGG AGG    1343

1344  AAC AGC ATG CCA CCA CAG TAA CAC ACA TTA GAG AAA GGA CAG AGG TCT    1391

1392  GCT CCT TCC TGC CAC CTT TCT CCT GGC CCC TTA GCA TTC CCC CAG TCC    1439

1440  CTC CCT CTT CAC CTT CCT CCG TCT ATG TCT TCC CAG CTC AGC CTT TTC    1487

1488  CCC ACT CTT AAA TAC TGT ACT ACT TCA CTG TAA GAA CGA AAG AAT AGT    1535

1536  TAG GAT ACC AAT GAG TAA AAG GGT TCC TGT TCA CTC TGA CTC TGT GCA    1583

1584  AAT TGT ATT ACA GTA GAC CGC TGA CGT TCC CAA GTG ACA GAT CCA GGG    1631

1632  CCT TTC AAA CAT CCC CAA AGT CAT GGC CAT ACT CAC CAT TAG CCA GTT    1679

1680  TCT AAC ATC TGT TTC AGT GTA TCC AGC TGT AGA TGT TCT TAT CCC CCA    1727

1728  TAC TTG TGA GTT CTT GGG GTT GCT CAC AAA TAC TAG GGG TTT TTG TTG    1775

1776  TAT TTT TAA CAA ATA TAT CCT AAT GTC ATA TTT ATT CTC TTT TGT AAC    1823

1824  TGC TGT CTT TAC AAT AAA GAA ATC ATC TGC CTT TCT ATC TTA AAA AAA    1871

1872  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1919

1920  AAA A                                                              1923

8.PP3105

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：22)长度：1803bp

   1  GTTGTGGGGG CGGGAGACAG AAAGAGAGAG AGATCCAGAG ACCGAGTCTT

  51  ACGTTGACAC GCAGAGAGAA AGACGCAGAG ACAGACAAAC AAACAGATAG

 101  GAGAGGCTCT CCAGGAGGCC GGGGGGCCCA CTCCGCCTAT CGCTCCCCTC

 151  GGCTACGCTG CCACTTCAAT GCCCCGCAGG TCGCGAGCTG CTGTTCTTTC

 201  GAAGGCGTCG GAGAACCAGG GGCGTCCCGC GCCACCTCTG ACTCGGAGCA

 251  GCGCCGAGCA CTGACGCTCC CGCCCTTGGG CAAGGACGCC AGTGCGCCCG

 301  CGCGCGTCCC TCTGCGCGGC AGCCCGTCGC GGGCCCTCAA GGGGAAGCCC

 351  AGGCCAGGAT GGCCCCGGGT CGCGCGGTGG CCGGGCTCCT GTTGCTGGCG

 401  GCCGCCGGCC TCGGAGGAGT GGCGGAGGGG CCAGGGCTAG CCTTCAGCGA

 451  GGATGTGCTG AGCGTGTTCG GCGCGAATCT GAGCCTGTCG GCGGCGCAGC

 501  TCCAGCACTT GCTGGAGCAG ATGGGAGCCG CCTCCCGCGT GGGCGTCCCG

 551  GAGCCTGGCC AGCTGCACTT CAACCAGTGT TTAACTGCTG AAGAGATCTT

 601  TTCCCTTCAT GGCTTTTCAA ATGCTACCCA AATAACCAGC TCCAAATTCT

 651  CTGTCATCTG TCCAGCAGTC TTACAGCAAT TGAACTTTCA CCCATGTGAG

 701  GATCGGCCCA AGCACAAAAC AAGACCAAGT CATTCAGAAG TTTGGGGATA

 751  TGGATTCCTG TCAGTGACGA TTATTAATCT GGCATCTCTC CTCGGATTGA

 801  TTTTGACTCC ACTGATAAAG AAATCTTATT TCCCAAAGAT TTTGACCTTT

 851  TTTGTGGGGC TGGCTATTGG GACTCTTTTT TCAAATGCAA TTTTCCAACT

 901  TATTCCAGAG GCATTTGGAT TTGATCCCAA AGTCGACAGT TATGTTGAGA

 951  AGGCAGTTGC TGTGTTTGGT GGATTTTACC TACTTTTCTT TTTTGAAAGA

1001  ATGCTAAAGA TGTTATTAAA GACATATGGT CAGAATGGTC ATACCCACTT

1051  TGGAAATGAT AACTTTGGTC CTCAAGAAAA AACTCATCAA CCTAAAGCAT

1101  TACCTGCCAT CAATGGTGTG ACATGCTATG CAAATCCTGC TGTCACAGAA

1151  GCTAATGGAC ATATCCATTT TGATAATGTC AGTGTGGTAT CTCTACAGGA

1201  TGGAAAAAAA GAGCCAAGTT CATGTACCTG TTTGAAGGGG CCCAAACTGT

1251  CAGAAATAGG GACGATTGCC TGGATGATAA CGCTCTGCGA TGCCCTCCAC

1301  AATTTCATCG ATGGCCTGGC GATTGGGGCT TCCTGCACCT TGTCTCTCCT

1351  TCAGGGACTC AGTACTTCCA TAGCAATCCT ATGTGAGGAG TTTCCCCACG

1401  AGTTAGGAGA CTTTGTGATC CTACTCAATG CAGGGATGAG CACTCGACAA

1451  GCCTTGCTAT TCAACTTCCT TTCTGCATGT TCCTGCTATG TTGGGCTAGC

1501  TTTTGGCATT TTGGTGGGCA ACAATTTCGC TCCAAATATT ATATTTGCAC

1551  TTGCTGGAGG CATGTTCCTC TATATTTCTC TGGCAGATAT GTTTCCAGAG

1601  ATGAATGATA TGCTGAGAGA AAAGGTAACT GGAAGAAAAA CCGATTTCAC

1651  CTTCTTCATG ATTCAGAATG CTGGAATGTT AACTGGATTC ACAGCCATTC

1701  TACTCATTAC CTTGTATGCA GGAGAAATCG AATTGGAGTA ATAGAAAATG

1751  GAAGATGGTG TTGTTAATAA AGGCATTTAA TAGATAAAAA AAAAAAAAAA

1801  AAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：23)长度：460个氨基酸

   1  MAPGRAVAGL LLLAAAGLGG VAEGPGLAFS EDVLSVFGAN LSLSAAQLQH

  51  LLEQMGAASR VGVPEPGQLH FNQCLTAEEI FSLHGFSNAT QITSSKFSVI

 101  CPAVLQQLNF HPCEDRPKHK TRPSHSEVWG YGFLSVTIIN LASLLGLILT

 151  PLIKKSYFPK ILTFFVGLAI GTLFSNAIFQ LIPEAFGFDP KVDSYVEKAV

 201  AVFGGFYLLF FFERMLKMLL KTYGQNGHTH FGNDNFGPQE KTHQPKALPA

 251  INGVTCYANP AVTEANGHIH FDNVSVVSLQ DGKKEPSSCT CLKGPKLSEI

 301  GTIAWMITLC DALHNFIDGL AIGASCTLSL LQGLSTSIAI LCEEFPHELG

 351  DFVILLNAGM STRQALLFNF LSACSCYVGL AFGILVGNNF APNIIFALAG

 401  GMFLYISLAD MFPEMNDMLR EKVTGRKTDF TFFMIQNAGM LTGFTAILLI

451  TLYAGEIELE

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：24)

克隆号和蛋白名称：PP3105

起始编码子：  359 ATG    终止编码子：1741 TAA

蛋白质分子量：49627.97

  1    G TTG TGG GGG CGG GAG ACA GAA AGA GAG AGA GAT CCA GAG ACC GAG     46

 47  TCT TAC GTT GAC ACG CAG AGA GAA AGA CGC AGA GAC AGA CAA ACA AAC     94

 95  AGA TAG GAG AGG CTC TCC AGG AGG CCG GGG GGC CCA CTC CGC CTA TCG    142

143  CTC CCC TCG GCT ACG CTG CCA CTT CAA TGC CCC GCA GGT CGC GAG CTG    190

191  CTG TTC TTT CGA AGG CGT CGG AGA ACC AGG GGC GTC CCG CGC CAC CTC    238

239  TGA CTC GGA GCA GCG CCG AGC ACT GAC GCT CCC GCC CTT GGG CAA GGA    286

287  CGC CAG TGC GCC CGC GCG CGT CCC TCT GCG CGG CAG CCC GTC GCG GGC    334

335  CCT CAA GGG GAA GCC CAG GCC AGG ATG GCC CCG GGT CGC GCG GTG GCC    382

  1                                  Met Ala Pro Gly Arg Ala Val Ala      8

383  GGG CTC CTG TTG CTG GCG GCC GCC GGC CTC GGA GGA GTG GCG GAG GGG    430

  9  Gly Leu Leu Leu Leu Ala Ala Ala Gly Leu Gly Gly Val Ala Glu Gly     24

431  CCA GGG CTA GCC TTC AGC GAG GAT GTG CTG AGC GTG TTC GGC GCG AAT    478

 25  Pro Gly Leu Ala Phe Ser Glu Asp Val Leu Ser Val Phe Gly Ala Asn     40

479  CTG AGC CTG TCG GCG GCG CAG CTC CAG CAC TTG CTG GAG CAG ATG GGA    526

 41  Leu Ser Leu Ser Ala Ala Gln Leu Gln His Leu Leu Glu Gln Met Gly     56

527  GCC GCC TCC CGC GTG GGC GTC CCG GAG CCT GGC CAG CTG CAC TTC AAC    574

 57  Ala Ala Ser Arg Val Gly Val Pro Glu Pro Gly Gln Leu His Phe Asn     72

575  CAG TGT TTA ACT GCT GAA GAG ATC TTT TCC CTT CAT GGC TTT TCA AAT    622

 73  Gln Cys Leu Thr Ala Glu Glu Ile Phe Ser Leu His Gly Phe Ser Asn     88

623  GCT ACC CAA ATA ACC AGC TCC AAA TTC TCT GTC ATC TGT CCA GCA GTC    670

 89  Ala Thr Gln Ile Thr Ser Ser Lys Phe Ser Val Ile Cys Pro Ala Val    104

671  TTA CAG CAA TTG AAC TTT CAC CCA TGT GAG GAT CGG CCC AAG CAC AAA    718

105  Leu Gln Gln Leu Asn Phe His Pro Cys Glu Asp Arg Pro Lys His Lys    120

719  ACA AGA CCA AGT CAT TCA GAA GTT TGG GGA TAT GGA TTC CTG TCA GTG    766

121  Thr Arg Pro Ser His Ser Glu Val Trp Gly Tyr Gly Phe Leu Ser Val    136

767  ACG ATT ATT AAT CTG GCA TCT CTC CTC GGA TTG ATT TTG ACT CCA CTG    814

137  Thr Ile Ile Asn Leu Ala Ser Leu Leu Gly Leu Ile Leu Thr Pro Leu    152

815  ATA AAG AAA TCT TAT TTC CCA AAG ATT TTG ACC TTT TTT GTG GGG CTG    862

153  Ile Lys Lys Ser Tyr Phe Pro Lys Ile Leu Thr Phe Phe Val Gly Leu    168

863  GCT ATT GGG ACT CTT TTT TCA AAT GCA ATT TTC CAA CTT ATT CCA GAG    910

169  Ala Ile Gly Thr Leu Phe Ser Asn Ala Ile Phe Gln Leu Ile Pro Glu    184

911  GCA TTT GGA TTT GAT CCC AAA GTC GAC AGT TAT GTT GAG AAG GCA GTT    958

 185  Ala Phe Gly Phe Asp Pro Lys Val Asp Ser Tyr Val Glu Lys Ala Val     200

 959  GCT GTG TTT GGT GGA TTT TAC CTA CTT TTC TTT TTT GAA AGA ATG CTA    1006

 201  Ala Val Phe Gly Gly Phe Tyr Leu Leu Phe Phe Phe Glu Arg Met Leu     216

1007  AAG ATG TTA TTA AAG ACA TAT GGT CAG AAT GGT CAT ACC CAC TTT GGA    1054

 217  Lys Met Leu Leu Lys Thr Tyr Gly Gln Asn Gly His Thr His Phe Gly     232

1055  AAT GAT AAC TTT GGT CCT CAA GAA AAA ACT CAT CAA CCT AAA GCA TTA    1102

 233  Asn Asp Asn Phe Gly Pro Gln Glu Lys Thr His Gln Pro Lys Ala Leu     248

1103  CCT GCC ATC AAT GGT GTG ACA TGC TAT GCA AAT CCT GCT GTC ACA GAA    1150

 249  Pro Ala Ile Asn Gly Val Thr Cys Tyr Ala Asn Pro Ala Val Thr Glu     264

1151  GCT AAT GGA CAT ATC CAT TTT GAT AAT GTC AGT GTG GTA TCT CTA CAG    1198

 265  Ala Asn Gly His Ile His Phe Asp Asn Val Ser Val Val Ser Leu Gln     280

1199  GAT GGA AAA AAA GAG CCA AGT TCA TGT ACC TGT TTG AAG GGG CCC AAA    1246

 281  Asp Gly Lys Lys Glu Pro Ser Ser Cys Thr Cys Leu Lys Gly Pro Lys     296

1247  CTG TCA GAA ATA GGG ACG ATT GCC TGG ATG ATA ACG CTC TGC GAT GCC    1294

 297  Leu Ser Glu Ile Gly Thr Ile Ala Trp Met Ile Thr Leu Cys Asp Ala     312

1295  CTC CAC AAT TTC ATC GAT GGC CTG GCG ATT GGG GCT TCC TGC ACC TTG    1342

 313  Leu His Asn Phe Ile Asp Gly Leu Ala Ile Gly Ala Ser Cys Thr Leu     328

1343  TCT CTC CTT CAG GGA CTC AGT ACT TCC ATA GCA ATC CTA TGT GAG GAG    1390

 329  Ser Leu Leu Gln Gly Leu Ser Thr Ser Ile Ala Ile Leu Cys Glu Glu     344

1391  TTT CCC CAC GAG TTA GGA GAC TTT GTG ATC CTA CTC AAT GCA GGG ATG    1438

 345  Phe Pro His Glu Leu Gly Asp Phe Val Ile Leu Leu Asn Ala Gly Met     360

1439  AGC ACT CGA CAA GCC TTG CTA TTC AAC TTC CTT TCT GCA TGT TCC TGC    1486

 361  Ser Thr Arg Gln Ala Leu Leu Phe Asn Phe Leu Ser Ala Cys Ser Cys     376

1487  TAT GTT GGG CTA GCT TTT GGC ATT TTG GTG GGC AAC AAT TTC GCT CCA    1534

 377  Tyr Val Gly Leu Ala Phe Gly Ile Leu Val Gly Asn Asn Phe Ala Pro     392

1535  AAT ATT ATA TTT GCA CTT GCT GGA GGC ATG TTC CTC TAT ATT TCT CTG    1582

 393  Asn Ile Ile Phe Ala Leu Ala Gly Gly Met Phe Leu Tyr Ile Ser Leu     408

1583  GCA GAT ATG TTT CCA GAG ATG AAT GAT ATG CTG AGA GAA AAG GTA ACT    1630

 409  Ala Asp Met Phe Pro Glu Met Asn Asp Met Leu Arg Glu Lys Val Thr     424

1631  GGA AGA AAA ACC GAT TTC ACC TTC TTC ATG ATT CAG AAT GCT GGA ATG    1678

 425  Gly Arg Lys Thr Asp Phe Thr Phe Phe Met Ile Gln Asn Ala Gly Met     440

1679  TTA ACT GGA TTC ACA GCC ATT CTA CTC ATT ACC TTG TAT GCA GGA GAA    1726

 441  Leu Thr Gly Phe Thr Ala Ile Leu Leu Ile Thr Leu Tyr Ala Gly Glu     456

1727  ATC GAA TTG GAG TAA TAG AAA ATG GAA GAT GGT GTT GTT AAT AAA GGC    1774

 457  Ile Glu Leu Glu ***                                                 461

1775 ATT TAA TAG ATA AAA AAA AAA AAA AAA AA                              1803

D：Blastp结果

Query＝PP3105[基因＝PP3105](460个氨基酸)

>SP_IN：Q22395 Q22395 caenorhabditis elegans.t11f9.2 protein.1/1999

长度＝586

分值＝98.7bits(242)，预计值＝9e-20

相同性＝48/154(31％)，相似性＝92/154(59％)，缺口＝3/154(1％)

Query：295 PKLSEIGTIAWMITLCDALHNFIDGLAIGASCTLSLLQGLSTSIAILCEEFPHELGDFVI 354

           P   E+ ++A+MI    + +NF+DG+++GA+ + +LL+GLS  IA++ ++FP ELG   I

Sbjct：420 PAAMEVASVAYMIIFGSSANNFVDGMSMGAAFSDNLLRGLSIGIAVISQQFPQELGTLAI 479

Query：355 LLNAGMSTRQALLFNFLSACSCYVGLAFGILVG--NNFAPNIIFALAGGMFLYISLADMF 412

           L+ +G+  ++ LLFN +     ++G + G+++   ++     IFA++ GM++YI L  +

Sbjct：480 LVKSGLGLKKTLLFNMVPIVLSFLGFSIGVMLDSVDDSYDEYIFAISSGMYMYIFLGTLI 539

Query：413 PEMNDMLREKVTGRKTD-FTFFMIQNAGMLTGFT 445

           PE+ +   E +     +     ++Q  G+L G T

Sbjct：540 PEIRESTNELIKENLAESILVSILQACGILFGTT 573

分值＝63.6bits(152)，预计值＝3e-09

相同性＝32/101(31％)，相似性＝57/101(55％)，缺口＝1/101(0％)

Query：122 RPSHSEVWGYGFLSVTIINLASLLGLILTPLIKKSYFPKILTFFVGLAIGTLFSNAIFQL 181

           +P   + WG GF  V+  + ++ LG++L P + KS + +I+TF V + IG L  + IF +

Sbjct：117 KPPAWQTWGIGFAIVSGCSFSAPLGILLLPCLSKSLYERIMTFLVAVGIGALSGSTIFIM 176

Query：182 IPEAFGFDP-KVDSYVEKAVAVFGGFYLLFFFERMLKMLLK 221

           +P+AF     +   Y  K++ +    Y F   +RML+ +L+

Sbjct：177 LPQAFHLTSFEHFEYHTKSLIILCALYAFFTVDRMLQYILE 217

>PIR2：S49959 probable membrane protein YIL023c-yeast

             (Saccharomyces cerevisiae)

长度＝346

分值＝71.0bits(171)，预计值＝2e-11

相同性＝69/330(20％)，相似性＝127/330(37％)，缺口＝70/330(21％)

Query：134 LSVTIINLASLLGLILTPLIKKSYFPKI-LTFFVGLAIGTLFSNAIFQLIPEAFGFDPKV 192

           +++ II L   L ++  P ++K+    + L+  V  ++GTL  + +  +IPE+      V

Sbjct：71  VAILIIQLMPCLFVLFVPGLRKNDRASLTLSLLVSFSLGTLLGDILLHVIPESLS---GV 127

Query：193 DSYVEKAVAVFGGFYLLFFFERMLKMLLKTYGQNGHTHFGNDNFGPQEKTHQPKALPAIN 252

                   A+F GF      ++ +++L  T   +G  H

Sbjct：128 TDVTMVGGAIFLGFISFLTLDKTMRILSGTSNDDGSIH---------------------- 165

Query：253 GVTCYANPAVTEANGHIHFDNVSVVSLQDGKKEPSSCTCLKGPKLSEIGTIAWMITLCDA 312

                       ++ H H    +                    K+      A++  +

Sbjct：166 ------------SHSHSHTPQQTA------------------EKKAGFNMSAYLNVISGI 195

Query：313 LHNFIDGLAIGASCTLSLLQGLSTSIAILCEEFPHELGDFVILLNAGMSTRQALLFNFLS 372

            H+  DG+A+  S   S   G+ TSIA+   E PHELGDF ILL++G +  QA+    ++

Sbjct：196 AHHITDGIALATSFYSSTQVGIMTSIAVTFHEIPHELGDFAILLSSGFTFPQAIRAQAVT 255

Query：373 ACSCYVGLAFGIL---VGNNF---------APNIIFALAGGMFLYISLADMFPEMNDMLR 420

           A    VG + G     +GNN          A  ++    G   +YI+   + P++  +

Sbjct：256 AFGAVVGTSIGCWMNEIGNNSHKATSSSANASELMLPFTAGGLIYIATTSVVPQI--LHS 313

Query：421 EKVTGRKTDFTFFMIQNAGMLTGFTAILLI 450

                +  +F  + +Q   +  GF  + L+

Sbjct：314 SAPDSKLREFKKWALQLVFIFVGFAVMALM 343

9.PP5423

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：25)长度：1832bp

   1  TTGGAGCTCC ACCGCGGTGG CGGCCGCTCT AGCCCGGGCG GATCCCCCGG

  51  GCTGCAGGGA CCATCAACGC ACGGGCCGAG GAGGATGTGG AGCCTGAGTG

 101  CATCATGGAG AAGGTGGCCA AGGCTTCAGG TGCCAACTAC AGCTTTCACA

 151  AGGAGAGTGG CCGCTTCCAG GACGTGGGAC CCCAGGCCCC AGTGGGCTCT

 201  GTGTACCAGA AGACCAATGC CGTGTCTGAG ATTAAAAGGG TTGGTAAAGA

 251  CAGCTTCTGG GCCAAAGCAG AGAAGGAGGA GGAGAACCGT CGGCTGGAGG

 301  AAAAGCGGCG GGCCGAGGAG GCACAGCGGC AGCTGGAGCA GGAGCGCCGG

 351  GAGCGTGAGC TGCGTGAGGC TGCACGCCGG GAGCAGCGCT ATCAGGAGCA

 401  GGGTGGCGAG GCCAGCCCCC AAAGGACGTG GGAGCAGCAG CAAGAAGTGG

 451  TTTCAAGGAA CCGAAATGAG CAGGAGTCTG CCGTGCACCC GAGGGAGATT

 501  TTCAAGCAGA AGGAGAGGGC CATGTCCACC ACCTCCATCT CCAGTCCTCA

 551  GCCTGGCAAG CTGAGGAGCC CCTTCCTGCA GAAGCAGCTC ACCCAACCAG

 601  AGACCCACTT TGGCAGAGAG CCAGCTGCTG CCATCTCAAG GCCCAGGGCA

 651  GATCTCCCTG CTGAGGAGCC GGCGCCCAGC ACTCCTCCAT GTCTGGTGCA

 701  GGCAGAAGAG GAGGCTGTGT ATGAGGAACC TCCAGAGCAG GAGACCTTCT

 751  ACGAGCAGCC CCCACTGGTG CAGCAGCAAG GTGCTGGCTC TGAGCACATT

 801  GACCACCACA TTCAGGGCCA GGGGCTCAGT GGGCAAGGGC TCTGTGCCCG

 851  TGCCCTGTAC GACTACCAGG CAGCCGACGA CACAGAGATC TCCTTTGACC

 901  CCGAGAACCT CATCACGGGC ATCGAGGTGA TCGACGAAGG CTGGTGGCGT

 951  GGCTATGGGC CGGATGGCCA TTTTGGCATG TTCCCTGCCA ACTACGTGGA

1001  GCTCATTGAG TGAGGCTGAG GGCACATCTT GCCCTTCCCC TCTCAGACAT

1051  GGCTTCCTTA TTGCTGGAAG AGGAGGCCTG GGAGTTGACA TTCAGCACTC

1101  TTCCAGGAAT AGGACCCCCA GTGAGGATGA GGCCTCAGGG CTCCCTCCGG

1151  CTTGGCAGAC TCAGCCTGTC ACCCCAAATG CAGCAATGGC CTGGTGATTC

1201  CCACACATCC TTCCTGCATC CCCCGACCCT CCCAGACAGC TTGGCTCTTG

1251  CCCCTGACAG GATACTGAGC CAAGCCCTGC CTGTGGCCAA GCCCTGAGTG

1301  GCCACTGCCA AGCTGCGGGG AAGGGTCCTG AGCAGGGGCA TCTGGGAGGC

1351  TCTGGCTGCC TTCTGCATTT ATTTGCCTTT TTTCTTTTTC TCTTGCTTCT

1401  AAGGGGTGGT GGCCACCACT GTTTAGAATG ACCCTTGGGA ACAGTGAACG

1451  TAGAGAATTG TTTTTAGCAG AGTTTGTGAC CAAAGTCAGA GTGGATCATG

1501  GTGGTTTGGC AGCAGGGAAT TTGTCTTGTT GGAGCCTGCT CTGTGCTCCC

1551  CACTCCATTT CTCTGTCCCT CTGCCTGGGC TATGGGAAGT GGGGATGCAG

1601  ATGGCCAAGC TCCCACCCTG GGTATTCAAA AACGGCAGAC ACAACATGTT

1651  CCTCCACGCG GCTCACTCGA TGCCTGCAGG CCCCAGTGTG TGCCTCAACT

1701  GATTCTGACT TCAGGAAAAG TAACACAGAG TGGCCTTGGC CTGTTGTCTT

1751  CCCCTATTTT CTGTCCCAGC TCATCCGTGT CTCTGAAGAA CAAATATGCT

1801  TTTGGACCAC GAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：26)长度：302个氨基酸

   1  MEKVAKASGA NYSFHKESGR FQDVGPQAPV GSVYQKTNAV SEIKRVGKDS

  51  FWAKAEKEEE NRRLEEKRRA EEAQRQLEQE RRERELREAA RREQRYQEQG

 101  GEASPQRTWE QQQEVVSRNR NEQESAVHPR EIFKQKERAM STTSISSPQP

 151  GKLRSPFLQK QLTQPETHFG REPAAAISRP RADLPAEEPA PSTPPCLVQA

 201  EEEAVYEEPP EQETFYEQPP LVQQQGAGSE HIDHHIQGQG LSGQGLCARA

 251  LYDYQAADDT EISFDPENLI TGIEVIDEGW WRGYGPDGHF GMFPANYVEL

 301  IE

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：27)

克隆号和蛋白名称：PP5423

起始编码子：  105 ATG    终止编码子：1013 TGA

蛋白质分子量：34386.03

   1   TT GGA GCT CCA CCG CGG TGG CGG CCG CTC TAG CCC GGG CGG ATC CCC     47

  48  CGG GCT GCA GGG ACC ATC AAC GCA CGG GCC GAG GAG GAT GTG GAG CCT     95

  96  GAG TGC ATC ATG GAG AAG GTG GCC AAG GCT TCA GGT GCC AAC TAC AGC    143

   1              Met Glu Lys Val Ala Lys Ala Ser Gly Ala Asn Tyr Ser     13

 144  TTT CAC AAG GAG AGT GGC CGC TTG CAG GAC GTG GGA CCC CAG GCC CCA    191

  14  Phe His Lys Glu Ser Gly Arg Phe Gln Asp Val Gly Pro Gln Ala Pro     29

 192  GTG GGC TCT GTG TAC CAG AAG ACC AAT GCC GTG TCT GAG ATT AAA AGG    239

  30  Val Gly Ser Val Tyr Gln Lys Thr Asn Ala Val Ser Glu Ile Lys Arg     45

 240  GTT GGT AAA GAC AGC TTC TGG GCC AAA GCA GAG AAG GAG GAG GAG AAC    287

  46  Val Gly Lys Asp Ser Phe Trp Ala Lys Ala Glu Lys Glu Glu Glu Asn     61

 288  CGT CGG CTG GAG GAA AAG CGG CGG GCC GAG GAG GCA CAG CGG CAG CTG    335

  62  Arg Arg Leu Glu Glu Lys Arg Arg Ala Glu Glu Ala Gln Arg Gln Leu     77

 336  GAG CAG GAG CGC CGG GAG CGT GAG CTG CGT GAG GCT GCA CGC CGG GAG    383

  78  Glu Gln Glu Arg Arg Glu Arg Glu Leu Arg Glu Ala Ala Arg Arg Glu     93

 384  CAG CGC TAT CAG GAG CAG GGT GGC GAG GCC AGC CCC CAA AGG ACG TGG    431

  94  Gln Arg Tyr Gln Glu Gln Gly Gly Glu Ala Ser Pro Gln Arg Thr Trp    109

 432  GAG CAG CAG CAA GAA GTG GTT TCA AGG AAC CGA AAT GAG CAG GAG TCT    479

 110  Glu Gln Gln Gln Glu Val Val Ser Arg Asn Arg Asn Glu Gln Glu Ser    125

 480  GCC GTG CAC CCG AGG GAG ATT TTC AAG CAG AAG GAG AGG GCC ATG TCC    527

 126  Ala Val His Pro Arg Glu Ile Phe Lys Gln Lys Glu Arg Ala Met Ser    141

 528  ACC ACC TCC ATC TCC AGT CCT CAG CCT GGC AAG CTG AGG AGC CCC TTC    575

 142  Thr Thr Ser Ile Ser Ser Pro Gln Pro Gly Lys Leu Arg Ser Pro Phe    157

 576  CTG CAG AAG CAG CTC ACC CAA CCA GAG ACC CAC TTT GGC AGA GAG CCA    623

 158  Leu Gln Lys Gln Leu Thr Gln Pro Glu Thr His Phe Gly Arg Glu Pro    173

 624  GCT GCT GCC ATC TCA AGG CCC AGG GCA GAT CTC CCT GCT GAG GAG CCG     671

 174  Ala Ala Ala Ile Ser Arg Pro Arg Ala Asp Leu Pro Ala Glu Glu Pro     189

 672  GCG CCC AGC ACT CCT CCA TGT CTG GTG CAG GCA GAA GAG GAG GCT GTG     719

 190  Ala Pro Ser Thr Pro Pro Cys Leu Val Gln Ala Glu Glu Glu Ala Val     205

 720  TAT GAG GAA CCT CCA GAG CAG GAG ACC TTC TAC GAG CAG CCC CCA CTG     767

 206  Tyr Glu Glu Pro Pro Glu Gln Glu Thr Phe Tyr Glu Gln Pro Pro Leu     221

 768  GTG CAG CAG CAA GGT GCT GGC TCT GAG CAC ATT GAC CAC CAC ATT CAG     815

 222  Val Gln Gln Gln Gly Ala Gly Ser Glu His Ile Asp His His Ile Gln     237

 816  GGC CAG GGG CTC AGT GGG CAA GGG CTC TGT GCC CGT GCC CTG TAC GAC     863

 238  Gly Gln Gly Leu Ser Gly Gln Gly Leu Cys Ala Arg Ala Leu Tyr Asp     253

 864  TAC CAG GCA GCC GAC GAC ACA GAG ATC TCC TTT GAC CCC GAG AAC CTC     911

 254  Tyr Gln Ala Ala Asp Asp Thr Glu Ile Ser Phe Asp Pro Glu Asn Leu     269

 912  ATC ACG GGC ATC GAG GTG ATC GAC GAA GGC TGG TGG CGT GGC TAT GGG     959

 270  Ile Thr Gly Ile Glu Val Ile Asp Glu Gly Trp Trp Arg Gly Tyr Gly     285

 960  CCG GAT GGC CAT TTT GGC ATG TTC CCT GCC AAC TAC GTG GAG CTC ATT    1007

 286  Pro Asp Gly His Phe Gly Met Phe Pro Ala Asn Tyr Val Glu Leu Ile     301

1008  GAG TGA GGC TGA GGG CAC ATC TTG CCC TTC CCC TCT CAG ACA TGG CTT    1055

 302  Glu ***                                                             303

1056  CCT TAT TGC TGG AAG AGG AGG CCT GGG AGT TGA CAT TCA GCA CTC TTC    1103

1104  CAG GAA TAG GAC CCC CAG TGA GGA TGA GGC CTC AGG GCT CCC TCC GGC    1151

1152  TTG GCA GAC TCA GCC TGT CAC CCC AAA TGC AGC AAT GGC CTG GTG ATT    1199

1200  CCC ACA CAT CCT TCC TGC ATC CCC CGA CCC TCC CAG ACA GCT TGG CTC    1247

1248  TTG CCC CTG ACA GGA TAC TGA GCC AAG CCC TGC CTG TGG CCA AGC CCT    1295

1296  GAG TGG CCA CTG CCA AGC TGC GGG GAA GGG TCC TGA GCA GGG GCA TCT    1343

1344  GGG AGG CTC TGG CTG CCT TCT GCA TTT ATT TGC CTT TTT TCT TTT TCT    1391

1392  CTT GCT TCT AAG GGG TGG TGG CCA CCA CTG TTT AGA ATG ACC CTT GGG    1439

1440  AAC AGT GAA CGT AGA GAA TTG TTT TTA GCA GAG TTT GTG ACC AAA GTC    1487

1488  AGA GTG GAT CAT GGT GGT TTG GCA GCA GGG AAT TTG TCT TGT TGG AGC    1535

1536  CTG CTC TGT GCT CCC CAC TCC ATT TCT CTG TCC CTC TGC CTG GGC TAT    1583

1584  GGG AAG TGG GGA TGC AGA TGG CCA AGC TCC CAC CCT GGG TAT TCA AAA    1631

1632  ACG GCA GAC ACA ACA TGT TCC TCC ACG CGG CTC ACT CGA TGC CTG CAG    1679

1680  GCC CCA GTG TGT GCC TCA ACT GAT TCT GAC TTC AGG AAA AGT AAC ACA    1727

1728  GAG TGG CCT TGG CCT GTT GTC TTC CCC TAT TTT CTG TCC CAG CTC ATC    1775

1776  CGT GTC TCT GAA GAA CAA ATA TGC TTT TGG ACC ACG AAA AAA AAA AAA    1823

1824  AAA AAA AAA                                                        1832

Claims (5)

1.一种分离的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列选自下组：

(a)编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸，所述蛋白具有选自下组的氨基酸序列：

SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。

2.如权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26。

3.如权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的序列选自下组：

SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：27的编码区序列或全长序列。

4.一种载体，其特征在于，它含有权利要求1所述的多核苷酸。

5.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它是选自下组的一种宿主细胞：

(a)用权利要求4所述的载体转化或转导的宿主细胞；

(b)用权利要求1所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。