CN1199997C - 具有促进小鼠nih/3t3细胞转化功能的新的人蛋白及其编码序列 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一类新的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白,编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的多核苷酸的用途。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体地说,本发明涉及新的编码具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的多核苷酸,以及此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。
背景技术
人基因组学研究目前是国际上的热点,除人染色体DNA大规模测序,表达序列测序(EST)的方法外,还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。
癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤,目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此,本领域迫切需要开发研究与癌细胞生长相关的人蛋白及其激动剂/抑制剂。
发明内容
本发明的目的是提供一类新的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。
本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。
本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。
在本发明的第一方面,提供新颖的分离出的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽,它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽:SEQ ID NO:3、6、9、12、15、18;或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
较佳地,该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽:SEQ ID NO:3、6、9、12、15、18。
在本发明的第二方面,提供了一种分离的多核苷酸,它包含一核苷酸序列,该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85%相同性:(a)编码上述的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽的多核苷酸;(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地,该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列:SEQ ID NO:3、6、9、12、15、18。更佳地,该多核苷酸的序列选自下组:SEQ ID NO:2、5、8、11、14、17的编码区序列或全长序列。
在本发明的第三方面,提供了含有上述多核苷酸的载体,以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。
在本发明的第四方面,提供了制备具有促进3T3细胞转化功能的蛋白活性的多肽的制备方法,该方法包含:(a)在适合表达具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的条件下,培养上述被转化或转导的宿主细胞:(b)从培养物中分离出具有促进3T3细胞转化功能的蛋白活性的多肽。
在本发明的第五方面,提供了与上述的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子,它含有上述的多核苷酸中连续10个核苷酸至全长核苷酸,较佳地它含有连续的约10-800个核苷酸。
在本发明的第六方面,提供了一种药物组合物,它含有安全有效量的本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可用于促进细胞的生长。本发明还提供了一种药物组合物,它含有安全有效量的针对本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽的拮抗剂(如抗体)以及药学上可接受的载体。该药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。
本发明的其它方面由于本文的技术的公开,对本领域的技术人员而言是显而易见的。
具体实施方式
3T3细胞是一种小鼠成纤维细胞(J.Cell.Biol.,17:299,1963)(也称为NIH/3T3细胞)。在癌症研究领域中,常将外源基因(尤其是人基因)引入3T3细胞,观察其对3T3细胞生长的影响情况。通常认为,对3T3细胞生长(或恶性转化或转染)有影响的基因是癌症相关基因,其中对3T3细胞生长或转化有抑制作用的基因大多是抑癌基因,而对3T3细胞生长或转化有促进作用的基因大多是(原)癌基因。
本发明采用大规模cDNA克隆转染小鼠胚胎成纤维细胞3T3,在获得具有促进生长作用的基础上,经测序证明为新的基因,进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明,本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白对3T3细胞具有促进克隆形成的作用,其促进率≥50%。
如本文所用,“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质,原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的,但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开,则为分离纯化的。
如本文所用,“分离的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白或多肽”是指具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有促进3T3细胞转化功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。
本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽,优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物,或是化学合成的产物,或使用重组技术从原核或真核宿主(例如,细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主,本发明的多肽可以是糖基化的,或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。
本发明还包括具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用,术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽,而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的,或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽,或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物,例如聚乙二醇)融合所形成的多肽,或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导,这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。
本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以FP630蛋白(在本申请中,蛋白质的命名采用其克隆编号)为例,编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO:2所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用,“简并的变异体”对于FP630而言是指编码具有SEQ ID NO:3的蛋白质,但与SEQ ID NO:2所示的编码区序列有差别的核酸序列。再以FP2234蛋白(在本申请中,蛋白质的命名采用其克隆编号)为例,编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO:5所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用,“简并的变异体”对于FP2234而言是指编码具有SEQ ID NO:6的蛋白质,但与SEQ ID NO:5所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于本发明其他具有促进3T3细胞转化功能的蛋白,依此类推。
编码成熟多肽的多核苷酸包括:只编码成熟多肽的编码序列;成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列;成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。
术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸,也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。
本发明还涉及上述多核苷酸的变异体,其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的,等位变异体是一个多核苷酸的替换形式,它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入,但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。
本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50%,较佳地至少70%,更佳地至少80%相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中,“严格条件”是指:(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱,如0.2×SSC,0.1%SDS,60℃;或(2)杂交时加有变性剂,如50%(v/v)甲酰胺,0.1%小牛血清/0.1%Ficoll,42℃等;或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95%以上,更好是97%以上时才发生杂交。并且,可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO:3所示的成熟多肽(以FP630蛋白为例)有相同的生物学功能和活性。
本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用,“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸,较好是至少30个核苷酸,更好是至少50个核苷酸,最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的多聚核苷酸。
本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供,更佳地被纯化至均质。
本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如,用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于:1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列,和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。
编码具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得:1)从基因组DNA分离双链DNA序列;2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。
当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时,DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时,DNA序列的直接化学合成是不可能的,选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录,形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术,试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook,et al.,Molecular Cloning,A Laboratory Manual,Cold Spring HarborLaboratory.New York,1989)。还可得到商业供应的cDNA文库,如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时,即使极少的表达产物也能克隆。
可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于):(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交;(2)标志基因的功能出现或丧失;(3)测定具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的转录本的水平;(4)通过免疫学技术或测定生物学活性,来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用,也可多种方法联合应用。
在第(1)种方法中,杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源,其长度至少15个核苷酸,较好是至少30个核苷酸,更好是至少50个核苷酸,最好是至少100个核苷酸。此外,探针的长度通常在2kb之内,较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素,荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。
在第(4)种方法中,检测具有促进3T3细胞转化功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法,放射免疫沉淀法,酶联免疫吸附法(ELISA)等。
应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki,et al.Science 1985;230:1350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时,可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法),用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择,并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。
如上所述得到的本发明的基因,或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS,1977,74:5463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列,测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列,才能拼接成全长的cDNA序列。
本发明也涉及包含本发明多核苷酸的载体,以及用本发明的载体或具有促进3T3细胞转化功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞,以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。
通过常规的重组DNA技术(Science,1984;224;1431),可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽。一般来说有以下步骤:
(1).用本发明的编码具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体),或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞;
(2).在合适的培养基中培养的宿主细胞;
(3).从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。
本发明中,具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于:在细菌中表达的基于T7的表达载体(Rosenberg,et al.Gene,1987,56:125);在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体(Lee and Nathans,J Bio Chem.263:3521,1988)和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之,只要能在宿主体内复制和稳定,任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。
本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等(Sambroook,et al)。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上,以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有:大肠杆菌的lac或trp启动子;λ噬菌体PL启动子;真核启动子包括CMV立即早期启动子、早期和晚期SV40启动子和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。
此外,表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因,以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状,如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP),或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。
包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体,可以用于转化适当的宿主细胞,以使其能够表达蛋白质。
宿主细胞可以是原核细胞,如细菌细胞;或是低等真核细胞,如酵母细胞;或是高等真核细胞,如哺乳动物细胞。代表性例子有:大肠杆菌,链霉菌属;鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞;真菌细胞如酵母;植物细胞;果蝇S2或Sf9的昆虫细胞;CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。
本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时,如果在载体中插入增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子,通常大约有10到300个碱基对,作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。
本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。
用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时,能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获,用CaCl2法处理,所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl2。如果需要,转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物,可选用如下的DNA转染方法:磷酸钙共沉淀法,常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。
获得的转化子可以用常规方法培养,表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞,培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后,用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子,将细胞再培养一段时间。
在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要,可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于:常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。
重组的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于):直接做为药物治疗具有促进3T3细胞转化功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病,和用于筛选促进或对抗具有促进3T3细胞转化功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如,该抗体可用于治疗癌症或细胞异常增殖。用重组表达的本发明蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白功能的多肽分子。
本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能,而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症.
具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白结合并消除其功能,或是抑制具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的产生,或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。
在筛选作为拮抗剂的化合物时,可以将具有促进3T3细胞转化功能的蛋白加入生物分析测定中,通过测定化合物影响具有促进3T3细胞转化功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法,可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。
本发明蛋白的拮抗剂可直接用于疾病治疗,例如,各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。
本发明的多肽,及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术,三瘤技术,人B-细胞杂交瘤技术,EBV-杂交瘤技术等。
可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。
本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒,容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起,可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示,该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外,本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。
药物组合物可以以方便的方式给药,如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有促进3T3细胞转化功能的蛋白或其特异性抗体,可按有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素,如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。
具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的表达所致的细胞发育或代谢异常。重组的基因治疗载体(如病毒载体)可设计成表达变异的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白,以抑制内源性的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白活性。例如,一种变异的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白可以是缩短的、缺失了信号传导功能域的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白,虽可与下游的底物结合,但缺乏信号传导活性。因此重组的基因治疗载体可用于治疗具有促进3T3细胞转化功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有促进3T3细胞转化功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有促进3T3细胞转化功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook,et al.)。另外重组具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。
抑制具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子,其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得,如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性,可用多种方法对其进行修饰,如增加两侧的序列长度,核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。
多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括:将多聚核苷酸直接注入到体内组织中;或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中,再将细胞移植到体内等。由于本发明蛋白具有促进3T3细胞转化的功能,因此本发明蛋白编码序列的反义序列,可被引入细胞以抑制细胞的异常增殖(如癌变)。
本发明还提供了针对具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于):多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。
抗具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中,检测活检标本中的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白。
与具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记,注入体内可跟踪其位置和分布。这种放射性标记的抗体可作为一种非创伤性诊断方法用于肿瘤细胞的定位和判断是否有转移。
本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以阻断具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的产生或活性,从而抑制癌细胞的生长和/或细胞的异常增殖。
抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素,蓖麻蛋白,红豆碱等)共价结合。一种通常的方法是用巯基交联剂如SPDP,攻击抗体的氨基,通过二硫键的交换,将毒素结合于抗体上,这种杂交抗体可用于杀灭有关的阳性细胞(如癌细胞)。
多克隆抗体的生产可用具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白或多肽免疫动物,如家兔,小鼠,大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应,包括但不限于弗氏佐剂等。
具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler andMilstein.Nature,1975,256:495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al,PNAS,1985,81:6851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.Pat No.4946778)也可用于生产抗具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的单链抗体。
能与具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时,必须对具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白分子进行标记。
本发明还涉及定量和定位检测具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验为本领域所熟知,且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白水平,可以用作解释具有促进3T3细胞转化功能的蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有促进3T3细胞转化功能的蛋白起作用的疾病。
具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有促进3T3细胞转化功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面,具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的异常表达。如具有促进3T3细胞转化功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法,Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术,相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(即基因芯片)上,用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有促进3T3细胞转化功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的转录产物。
检测具有促进3T3细胞转化功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有促进3T3细胞转化功能的蛋白相关的疾病。具有促进3T3细胞转化功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有促进3T3细胞转化功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外,突变有可能影响蛋白的表达,因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。
本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。这些序列会特异性地针对某条人染色体具体位置且并可以与其杂交。目前,需要鉴定染色体上的各基因的具体位点。然而现在只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色体位置。为了将这些序列与疾病相关基因相关联。第一步就是将本发明DNA序列定位于染色体上。
简而言之,根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp),可以将序列定位于染色体上。然后,将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。
体细胞杂合细胞的PCR定位法,是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物,通过类似方法,可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选,从而构建染色体特异的cDNA库。
将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH),可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述,参见Verma等,Human Chromosomes:a Manual of BasicTechniques,Pergamon Press,New York(1988)。
一旦序列被定位到准确的染色体位置,此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如,V.Mckusick,Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析,确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。
接着,需要测定患病和未患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变,而该突变在任何正常个体中未观察到,则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体,通常涉及首先寻找染色体中结构的变化,如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。
本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法,可根据本发明所公开的有关核苷酸序列,尤其是开放阅读框序列来设计引物,并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板,扩增而得有关序列。当序列较长时,常常需要进行两次或多次PCR扩增,然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。
一旦获得了有关的序列,就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体,再转入细胞,然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。
此外,还可用人工合成的方法来合成有关序列,尤其是片段长度较短时。通常,通过先合成多个小片段,然后再进行连接可获得序列很长的片段。
目前,已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段,或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外,还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。
此外,由于本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列,因此,与来源于其他物种的同族蛋白相比,预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件如Sambrook等人,分子克隆:实验室手册(New York:Cold Spring Harbor LaboratoryPress,1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。注意,在核苷酸和氨基酸组合序列中,(1)给出的是起始和终止编码子第一个核苷酸的位置,(2)分子量单位是道尔顿。
实施例1:cDNA基因的获得及对小鼠NIH/3T3细胞克隆形成的促进作用
FP630、FP2234、FP6679、FP6779、FP14381和FP15331是从按常规方法构建的人胎儿cDNA文库获得的。取胎儿组织(FP克隆),用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA,用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL),反转录反应在42℃进行。转化XL 10-Gold感受细胞,获得了1×106cfu/μg滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆,其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑制癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针,杂交筛选cDNA文库,挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen 96孔板质粒抽提试剂盒,按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染小鼠NIH/3T3细胞。100ng DNA酒精沉淀干燥后,加6μl H2O溶解,待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液,混匀后,室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液,均分加入3孔生长于96孔板的小鼠NIH/3T3细胞中,37℃放置2小时,每孔再加50μl无血清培液,37℃ 24小时。每孔换100μl全培液,37℃ 24小时,换含G418的全培液100μl,37℃ 24-48小时,边观察,边换G418浓度不等的培液。约2-3次后,直到镜检细胞有克隆形成,计数。发现上述克隆有促进细胞克隆形成作用,结果如下表所示。
cDNA克隆转染细胞(3T3)克隆形成情况
cDNA克隆名称 | cDNA克隆数(三个重复) | 空载体克隆数(三个重复) | ||||
FP630 | 73 | 67 | 63 | 36 | 34 | 30 |
FP2234 | 68 | 35 | 58 | 36 | 34 | 30 |
FP6679 | 67 | 48 | 35 | 36 | 34 | 30 |
FP6778 | 58 | 56 | 54 | 21 | 28 | 20 |
FP14381 | 51 | 45 | 49 | 23 | 29 | 25 |
FP15331 | 60 | 69 | 73 | 11 | 16 | 14 |
对cDNA克隆采用双脱氧终止法,在ABI377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后,确定为新基因克隆,进行另一端测序,仍未获得全长cDNA序列,设计引物,再次进行测序,直到获得全长序列(SEQ ID NO:1、4、7、10、13、16)。
实施例2:从胎盘或胎儿cDNA中PCR获得全长基因:
取胎儿组织(FP克隆),用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA,用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL),反转录酶在42℃进行反转录反应,获得胎盘或胎儿cDNA。利用各个基因的特异引物(如下表所示),按97℃ 3’1个循环。94℃ 30″60℃ 30″72℃ 1’35个循环,72℃ 10’1个循环进行PCR扩增,获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证,与实施例1测得的序列相符,随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞,获得重组蛋白(SEQ ID NO:3、6、9、12、15、18)。
基因特异引物
克隆名称 | 特异引物1(5’→3’) | 特异引物2(3’→5’) |
FP630 | (89)TTTAACACCCATAGTAGGC | CAGACCGAAGAAAGGAAG(1698) |
FP2234 | (15)AAATTGGCAGGTGCACTT | AAATAAGACCACCTCAGG(2124) |
FP6679 | (118)CATATCTCCCATAGAATAGG | CCCACTGTCTCGTTCTGA(1936) |
FP6778 | (3)TGATCCCTCAATTTCTAGC | CTCCGTCCTCGTAGTGAA(2181) |
FP14381 | (13)CCAGCCAACACTGTAACTC | CCAGGAACCATACGACTC(2231) |
FP15331 | (15)CCTGGTGATGCCACTATTT | GCTGTCCTCACTTTGGGAC(1043) |
实施例3:cDNA克隆序列分析
1.FP630
A:核苷酸序列(SEQ ID NO:1)长度:1837个碱基
1 GCTAAATCCC CTTGTAAATT TAACTGTTAG TCCAAAGAGG AACAGCTCTT TGGACACTAG
61 GAAAAAACCT TGTAGAGAGA GTAAAAAATT TAACACCCAT AGTAGGCCTA AAAGCAGCCA
121 CCAATTAAGA AAGCGTTCAA GCTCAACACC CACTACCTAA AAAACCCCAT CTCTACTAAA
181 AAAAAAAAAA TACAAAAAAT TAGCCAGGCA TGGTGGCGGG CGCCTGTAGT CCCAGCTACT
241 CCGGAGGCTG AGGCAGGAGA ATCGCTTGAA CCTGGGAGGC TGAGGTTGCA GTGAGCCGAG
301 ATCGCGCCAT TGCACTCCAG CCTCGACAAC AAGAGCCAAA CTCCGTCTCA AAAAAAAAAA
361 TTAAATAACA GCAAGCAACT GCATGCACGT CTGGGGGCGG TGTCCGGGGT GAGAAAGGCC
421 CCGCCAGCAA TCCATCCCAC AATCAGCGAT GGCTGAGGGG GTCTGGACCT CGCGGGACGG
481 GGCTGCACGC CCCCAAGCAA ATGCACAGCG CGGCTAAATT GGATTCGACA GCACCGGAAA
541 CGGCGACTCC CACTTGGGGC GCTGCGGACA CACGAGTCGA GGCTGCCTTC CAGGAAGCAA
601 ACAAAAAAAG GGGGGAAAAG GGGGGGAAAG AAAGAAAGAG AAAAAGGAGG GCGAGTGGCG
661 AGCAGGGGCC TCGGCCGCCA CCCACACGCC CCGAAGCGTG CTCGTCCCCC GCGCGGGGCT
721 CCCGGCCGCC GCCCTCGGCC ATCGGCTGCT CCCCGGTGGC CCAGGCCTCG GACTCCGCGG
781 CCGGCCCGGC GCGGCCCAGC GCCCTCAGGT GCGTACCCCG CCCCCGCCGC CGACGCCGCC
841 GACGCCGCCA TTAAGGGCGG GTTGCCTTTC GGAACGTCCT CCTCCTGAGG GCCTGGGGAA
901 GGGAGGCCGC CCGGCCGCAG CGGGAGGTGG CCCCCCGGGA CACCCCGGCG CCCCGAGGCG
961 AGGCACCCCC GAACCCCGAT CCCTGCTGGC AGGACCAGAG GTGTGAGGGT GGGGGCGGAG
1021 AAGCCTTGCC GCGGGGGCAA TGGTCGTACG CACGGAGCGC ACATCCCTCT CCTTCCTGAT
1081 TGGCCGAGCG GGGGTGTGCG TGATGCCACG CTCCGCCCGT CGTACGTGGG GCGCTCGCGG
1141 GGGCGGGGGC CGCCGCTGTT ACCAGGCAAC TGCGCCCCGG ATCCGCCCCC TGACGTCACG
1201 CGTTGCCTAG AGGCCCAGGT TGTGGGTTTT GTCCGTGGGT ATGGTCCTCG CGACGGCCTC
1261 CGGGGATCTG TTTGTTGGCG GAAAACCAAT CCAGACTCCC AAGGAAAAAG GCCGAGGCCC
1321 GGGAATTTCC CGTTGCAATT CTGGTTTCGA GTTCTAGGGG GAAAAAGGCT CGCAAGGCTG
1381 TATTCTCCAT CCCTCAAAGC CCAAGCTTTC TTGTTTCTTA ATAACAGCTT CGTTGAGATC
1441 CATTGTAAAA TTCACGTTTT AAGAGTGAAT AATTCAGTGC ACAGAGCTGT GCAACCTTTG
1501 CCACTAATTG CAGAACGCTT TCAGCACCCG AGGAGAAGAA ACCCCAACCC CATTAGGCCG
1561 TCATTCCCCG GTCCCCACCC CGTCCCTATC CCCAGCCCCT GGCAATCACT TTTGTCTCCG
1621 TGGATTTGCC TATTCTGGAC ATTTCGTGTG GATAGAATCA TCCCAAGAAG TTTTTTGTGT
1681 GTCTGGCTTC TTTCCTTCTT TATGGCTGAA TAAAAATCCA TGATATGAAA AAAAAAAAAA
1741 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA
1801 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAA
B:核苷酸序列 (SEQ ID NO:3) 长度:117个氨基酸
1 MHSAAKLDST APETATPTWG AADTRVEAAF QEANKKRGEK GGKERKRKRR ASGEQGPRPP
61 PTRPEACSSP ARGSRPPPSA IGCSPVAQAS DSAAGPARPS ALRCVPRPRR RRRRRRH
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:2)克隆号和蛋白名称:FP630
起始编码子:501 ATG 终止编码子:852 TAA 蛋白质分子量:12609.50
1 GC TAA ATC CCC TTG TAA ATT TAA CTG TTA GTC CAA AGA GGA ACA GCT CTT TGG ACA CTA 59
60 GGA AAA AAC CTT GTA GAG AGA GTA AAA AAT TTA ACA CCC ATA GTA GGC CTA AAA GCA GCC 119
120 ACC AAT TAA GAA AGC GTT CAA GCT CAA CAC CCA CTA CCT AAA AAA CCC CAT CTC TAC TAA 179
180 AAA AAA AAA AAT ACA AAA AAT TAG CCA GGC ATG GTG GCG GGC GCC TGT AGT CCC AGC TAC 239
240 TCC GGA GGC TGA GGC AGG AGA ATC GCT TGA ACC TGG GAG GCT GAG GTT GCA GTG AGC CGA 299
300 GAT CGC GCC ATT GCA CTC CAG CCT CGA CAA CAA GAG CCA AAC TCC GTC TCA AAA AAA AAA 359
360 ATT AAA TAA CAG CAA GCA ACT GCA TGC ACG TCT GGG GGC GGT GTC CGG GGT GAG AAA GGC 419
420 CCC GCC AGC AAT CCA TCC CAC AAT CAG CGA TGG CTG AGG GGG TCT GGA CCT CGC GGG ACG 479
480 GGG CTG CAC GCC CCC AAG CAA ATG CAC AGC GCG GCT AAA TTG GAT TCG ACA GCA CCG GAA 539
1 Met His Ser Ala Ala Lys Leu Asp Ser Thr Ala Pro Glu 13
540 ACG GCG ACT CCC ACT TGG GGC GCT GCG GAC ACA CGA GTC GAG GCT GCC TTC CAG GAA GCA 599
14 Thr Ala Thr Pro Thr Trp Gly Ala Ala Asp Thr Arg Val Glu Ala Ala Phe Gln Glu Ala 33
600 AAC AAA AAA AGG GGG GAA AAG GGG GGG AAA GAA AGA AAG AGA AAA AGG AGG GCG AGT GGC 659
34 Asn Lys Lys Arg Gly Glu Lys Gly Gly Lys Glu Arg Lys Arg Lys Arg Arg Ala Ser Gly 53
660 GAG CAG GGG CCT CGG CCG CCA CCC ACA CGC CCC GAA GCG TGC TCG TCC CCC GCG CGG GGC 719
54 Glu Gln Gly Pro Arg Pro Pro Pro Thr Arg Pro Glu Ala Cys Ser Ser Pro Ala Arg Gly 73
720 TCC CGG CCG CCG CCC TCG GCC ATC GGC TGC TCC CCG GTG GCC CAG GCC TCG GAC TCC GCG 779
74 Ser Arg Pro Pro Pro Ser Ala Ile Gly Cys Ser Pro Val Ala Gln Ala Ser Asp Ser Ala 93
780 GCC GGC CCG GCG CGG CCC AGC GCC CTC AGG TGC GTA CCC CGC CCC CGC CGC CGA CGC CGC 839
94 Ala Gly Pro Ala Arg Pro Ser Ala Leu Arg Cys Val Pro Arg Pro Arg Arg Arg Arg Arg 113
840 CGA CGC CGC CAT TAA GGG CGG GTT GCC TTT CGG AAC GTC CTC CTC CTG AGG GCC TGG GGA 899
114 Arg Arg Arg His *** 118
900 AGG GAG GCC GCC CGG CCG CAG CGG GAG GTG GCC CCC CGG GAC ACC CCG GCG CCC CGA GGC 959
960 GAG GCA CCC CCG AAC CCC GAT CCC TGC TGG CAG GAC CAG AGG TGT GAG GGT GGG GGC GGA 1019
1020 GAA GCC TTG CCG CGG GGG CAA TGG TCG TAC GCA CGG AGC GCA CAT CCC TCT CCT TCC TGA 1079
1080 TTG GCC GAG CGG GGG TGT GCG TGA TGC CAC GCT CCG CCC GTC GTA CGT GGG GCG CTC GCG 1139
1140 GGG GCG GGG GCC GCC GCT GTT ACC AGG CAA CTG CGC CCC GGA TCC GCC CCC TGA CGT CAC 1199
1200 GCG TTG CCT AGA GGC CCA GGT TGT GGG TTT TGT CCG TGG GTA TGG TCC TCG CGA CGG CCT 1259
1260 CCG GGG ATC TGT TTG TTG GCG GAA AAC CAA TCC AGA CTC CCA AGG AAA AAG GCC GAG GCC 1319
1320 CGG GAA TTT CCC GTT GCA ATT CTG GTT TCG AGT TCT AGG GGG AAA AAG GCT CGC AAG GCT 1379
1380 GTA TTC TCC ATC CCT CAA AGC CCA AGC TTT CTT GTT TCT TAA TAA CAG CTT CGT TGA GAT 1439
1440 CCA TTG TAA AAT TCA CGT TTT AAG AGT GAA TAA TTC AGT GCA CAG AGC TGT GCA ACC TTT 1499
1500 GCC ACT AAT TGC AGA ACG CTT TCA GCA CCC GAG GAG AAG AAA CCC CAA CCC CAT TAG GCC 1559
1560 GTC ATT CCC CGG TCC CCA CCC CGT CCC TAT CCC CAG CCC CTG GCA ATC ACT TTT GTC TCC 1619
1620 GTG GAT TTG CCT ATT CTG GAC ATT TCG TGT GGA TAG AAT CAT CCC AAG AAG TTT TTT GTG 1679
1680 TGT CTG GCT TCT TTC CTT CTT TAT GGC TGA ATA AAA ATC CAT GAT ATG AAA AAA AAA AAA 1739
1740 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 1799
1800 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA 1837
2.FP2234
A:核苷酸序列(SEQ` ID NO:4)长度:2182个碱基
1 GCAGAGAAAT TTGAAAATTG GCAGGTGCAC TTTCTTGACC TTTCCAAAAA TAGTCTGAGT
61 CACTTTCACT TTCAGCCTTC AAACTGTGTT GAATGAAACC TTTGTGCAGT TTACAGAAAG
121 TGAAGAACTG TTTGGCAAGA GAGAGAAGTT CGAGCTCCTA ATAGCCTCGG CTGCATTGAG
181 TAACATTTCT TTTGAGTTGT CTATTAACAC TTTCCTGAAA CATGCTTTTT ATGACGCCTA
241 GAACTTGTGT AAGAGTGACT GTAATTTGAG TTATTTAAAA ATGTAAGTAC AAGAAATGTG
301 TCACACGCCA TAAGAGCTAG GAAATGACAG CTCACATTCA TCTTGGTGGA AGGAAACTCT
361 AATTATTGGA AGATGTGATT GGAGTATTTG TTCTTAATAC CTACGGTGGC TCTGTTATAT
421 GCTTGCCTAA CACCAGTATT GGGTTGCAAA TAACACTGAA AAGCTCCTTT GTTTTCCTCT
481 GGTCTTTGTG GGAAGGCATG GTATGAGTCG AGATTGCTAA ACCACTCTTC TGAGAGGACT
541 CAGAGAGAGT GTTTATCCTA GACTATCCAT GGCCCTGGTA CTTCTGAGTT CAGTTGTGGT
601 GTGATCTCAT TAGTCCAGGC TCAGAATGGC TCGGTAACCT CAAAACTCCA AGCCCTCGGT
661 GCTTGCTTTG CTTCCCTAGA CTTGCAGCTT ATGTACGCCC ACATGTGCTT CATGCGTATT
721 AAAAATGCTT GCATGTGTAG ATAGGAAGAT ATATGTTGAC TGTCCTGAAA AACTTGACAT
781 ACCTAACATT TAAAATTGTT TTGAGTTTCC CCCGGGGATA AACTAGTCTT CAAATGTAAA
841 CGTGATGAGC AGCGTAGGGG CTATGGTACC AGAGAAAAGA GCCGAATCTC GGCCCTGGTC
901 CAGCCCTACC TCTCGTGCTC TGTCACCTGC AGCAGAGGTG GAGTGGGGGC CATGTCTGTG
961 AGCGGGACCT CATCTTGTCT ATTCCTCAGA CCCACCCAAG GGCAGGGATT CCCAAAACTG
1021 CTGGTACCTG TAAGAGGTAT TGTATTCTTG GACTCCATTC CATAACCTCT CATCAGGATT
1081 CTGGGTTTGG AACTCTAGAA TCAATGTTGA GGAAAAATAG AACTTGGCGA TTTTATTTTT
1141 CTAGATATAA TTCACATACC ATAAAAGCCA CTCTTTAAAT TGTACAATTC AGTGGTTTTT
1201 TAGTATATTC AGAGTTGTAC AGCCATGACC ACTAGCTAAT TCAGAATATT TTCATTGCCT
1261 CCCAACAAGC CTAGTACTCA TGAGTAGTCA CTCCCTTGCC CATTCCCTCC ACCCCCAAGC
1321 CCCTGGCAAC CACTAATCTA CTTTCTGTCT CTATGGATTT GCCTATTTGA GACATTCATA
1381 TGAATGGAAT TATATAATAT GTAGACTTTT GTATCTGTTT TTTTTTCATT TAGCATAAAA
1441 ATTTTCAAGA TTTGTCCACA GTGTAGTGGT GTCTCAGTAC TTCTTTCCTT TTTATCACTG
1501 AAAATACTTC ATTGATGTAT ATGTCATATT TTGTTATCTA CTCATCAATT GATGAATACT
1561 TGTATTGTTT CCACTTTGGC TGTTACAAAT AATGCTGTTA TGAACATGTG TGTACAAGTA
1621 TTTGTGTGGG TAGATGTTAT TTCTCTTGGG CATACCTACA GATGGAATTA CTGGATCATA
1681 TGACAACTTT ATGTTTAACT TTTTGAAAAA CTACAAAACC AACAAGCTGT ACCATTTTGT
1741 AATCCCACCA GCAATGAATA GGGTTCTAAT TTTTCCACAT CTTCATCAAT ATTTGTTATT
1801 GATCTTTTTG ATTATAGCCA ATCTAGTGAG TGTGAACTGG TATCTTATTG TAATTGTGAT
1861 TTTGATTTGC AATTCCCTAA TGATGTTGAA CAGATGTTCA TATAATTGTT GGCCATTTAT
1921 ATAGTCTTTA GAGATATATC TGTTTTGCCC ATTTCTAACT GAGCAAAACA GACAAAAATT
1981 GAGTTGTGAA TGTTCTTTAT GTATACTGTA TACAAGCCCC TTAACAGATA TATGATTTGC
2041 AAATCTTTTC TGTTCTGTAG GTTGTTTCTC CATGTTCTTG TTGGTATGCT TGGAAGCATA
2101 AAAGTTTTTA TTCTGGTGGA GTCCAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA
2161 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AA
B:核苷酸序列 (SEQ ID NO:6) 长度:96个氨基酸
1 MLFLLGIPTD GITGSYDNFM FNFLKNYKTN KLYHFVIPPA MNRVLIFPHL HQYLLLIFLI
61 IANLVSVNWY LIVIVILICN SLMMLNRCSY NCWPFI
C.核苷酸及氨基酸组合序列 (SEQ ID NO:5) 克隆号和蛋白名称:FP2234
起始编码子:1634 ATG 终止编码子:1922 TAG 蛋白质分子量:11333.15
1 G CAG AGA AAT TTG AAA ATT GGC AGG TGC ACT TTC TTG ACC TTT CCA AAA ATA GTC TGA 58
59 GTC ACT TTC ACT TTC AGC CTT CAA ACT GTG TTG AAT GAA ACC TTT GTG CAG TTT ACA GAA 118
119 AGT GAA GAA CTG TTT GGC AAG AGA GAG AAG TTC GAG CTC CTA ATA GCC TCG GCT GCA TTG 178
179 AGT AAC ATT TCT TTT GAG TTG TCT ATT AAC ACT TTC CTG AAA CAT GCT TTT TAT GAC GCC 238
239 TAG AAC TTG TGT AAG AGT GAC TGT AAT TTG AGT TAT TTA AAA ATG TAA GTA CAA GAA ATG 298
299 TGT CAC ACG CCA TAA GAG CTA GGA AAT GAC AGC TCA CAT TCA TCT TGG TGG AAG GAA ACT 358
359 CTA ATT ATT GGA AGA TGT GAT TGG AGT ATT TGT TCT TAA TAC CTA CGG TGG CTC TGT TAT 418
419 ATG CTT GCC TAA CAC CAG TAT TGG CTT GCA AAT AAC ACT GAA AAG CTC CTT TCT TTT CCT 478
479 CTG GTC TTT GTG GGA AGG CAT GGT ATG AGT CGA GAT TGC TAA ACC ACT CTT CTG AGA GGA 538
539 CTC AGA GAG AGT GTT TAT CCT AGA CTA TCC ATG GCC CTG GTA CTT CTG AGT TCA GTT GTG 598
599 GTG TGA TCT CAT TAG TCC AGG CTC AGA ATG GCT CGG TAA CCT CAA AAC TCC AAG CCC TCG 658
659 GTG CTT GCT TTG CTT CCC TAG ACT TGC AGC TTA TGT ACG CCC ACA TGT GCT TCA TGC GTA 718
719 TTA AAA ATG CTT GCA TGT GTA GAT AGG AAG ATA TAT GTT GAC TGT CCT GAA AAA CTT GAC 778
779 ATA CCT AAC ATT TAA AAT TGT TTT GAG TTT CCC CCG GGG ATA AAC TAG TCT TCA AAT GTA 838
839 AAC GTG ATG AGC AGC GTA GGG GCT ATG GTA CCA GAG AAA AGA GCC GAA TCT CGG CCC TGG 898
899 TCC AGC CCT ACC TCT CGT GCT CTG TCA CCT GCA GCA GAG GTG GAG TGG GGG CCA TGT CTG 958
959 TGA GCG GGA CCT CAT CTT GTC TAT TCC TCA GAC CCA CCC AAG GGC AGG GAT TCC CAA AAC 1018
1019 TGC TGG TAC CTG TAA GAG GTA TTG TAT TCT TGG ACT CCA TTC CAT AAC CTC TCA TCA GGA 1078
1079 TTC TGG GTT TGG AAC TCT AGA ATC AAT GTT GAG GAA AAA TAG AAC TTG GCG ATT TTA TTT 1138
1139 TTC TAG ATA TAA TTC ACA TAC CAT AAA AGC CAC TCT TTA AAT TGT ACA ATT CAG TGG TTT 1198
1199 TTT AGT ATA TTC AGA GTT GTA CAG CCA TGA CCA CTA GCT AAT TCA GAA TAT TTT CAT TGC 1258
1259 CTC CCA ACA AGC CTA GTA CTC ATG AGT AGT CAC TCC CTT GCC CAT TCC CTC CAC CCC CAA 1318
1319 GCC CCT GGC AAC CAC TAA TCT ACT TTC TGT CTC TAT GGA TTT GCC TAT TTG AGA CAT TCA 1378
1379 TAT GAA TGG AAT TAT ATA ATA TGT AGA CTT TTG TAT CTG TTT TTT TTT CAT TTA GCA TAA 1438
1439 AAA TTT TCA AGA TTT GTC CAC AGT GTA GTG GTG TCT CAG TAC TTC TTT CCT TTT TAT CAC 1498
1499 TGA AAA TAC TTC ATT GAT GTA TAT GTC ATA TTT TGT TAT CTA CTC ATC AAT TGA TGA ATA 1558
1559 CTT GTA TTG TTT CCA CTT TGG CTG TTA CAA ATA ATG CTG TTA TGA ACA TGT GTG TAC AAG 1618
1619 TAT TTG TGT GGG TAC ATG TTA TTT CTC TTG GGC ATA CCT ACA GAT GGA ATT ACT GGA TCA 1678
1 Met Leu Phe Leu Leu Gly Ile Pro Thr Asp Gly Ile Thr Gly Ser 15
1679 TAT GAC AAC TTT ATG TTT AAC TTT TTG AAA AAC TAC AAA ACC AAC AAG CTG TAC CAT TTT 1738
16 Tyr Asp Asn Phe Met Phe Asn Phe Leu Lys Asn Tyr Lys Thr Asn Lys Leu Tyr His Phe 35
1739 GTA ATC CCA CCA GCA ATG AAT AGG GTT CTA ATT TTT CCA CAT CTT CAT CAA TAT TTG TTA 1798
36 Val Ile Pro Pro Ala Met Asn Arg Val Leu Ile Phe Pro His Leu His Gln Tyr Leu Leu 55
1799 TTG ATC TTT TTG ATT ATA GCC AAT CTA GTG AGT GTG AAC TGG TAT CTT ATT GTA ATT GTG 1858
56 Leu Ile Phe Leu Ile Ile Ala Asn Leu Val Ser Val Asn Trp Tyr Leu Ile Val Ile Val 75
1859 ATT TTG ATT TGC AAT TCC CTA ATG ATG TTG AAC AGA TGT TCA TAT AAT TGT TGG CCA TTT 1918
76 Ile Leu Ile Cys Asn Ser Leu Met Met Leu Asn Arg Cys Ser Tyr Asn Cys Trp Pro Phe 95
1919 ATA TAG TCT TTA GAG ATA TAT CTG TTT TGC CCA TTT CTA ACT GAG CAA AAC AGA CAA AAA 1978
96 Ile *** 97
1979 TTG AGT TGT GAA TGT TCT TTA TGT ATA CTG TAT ACA AGC CCC TTA ACA GAT ATA TGA TTT 2038
2039 GCA AAT CTT TTC TGT TCT GTA GGT TGT TTC TCC ATG TTC TTG TTG GTA TGC TTG GAA GCA 2098
2099 TAA AAG TTT TTA TTC TGG TGG AGT CCA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 2158
2159 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 2182
3.FP6679
A:核苷酸序列(SEQ ID NO:7)长度:1962个碱基
1 GCAAGAATTG GTTCTTTTCG GGGTTCTCTC CTATATCCCA TACAATCAAA CAATAAATAT
61 GTGTTGAATA AATCACTTGT GCAAATTCTA AAATTCACAT ATGACCCTGT ATTTTATCAT
121 ATCTCCCATA GAATAGGTGA GAACCAGAGA AAAATATTGT TAAGCCCAGG AGCCCAAGCT
181 ATATGATCAA CTGGAAAGAC TCAGTAGGTA ATTTGTTCCT AGAAAGCAGC CTATGGCAAC
241 AAATGATTGA AATTTCCACC TTGATAAAAT GACGAATTAC TACATGTCAG AGATTTCTAG
301 TTTGCTTGTA AATAATGAAA GCTGTGATGA TAAATCCCAG ATTTTCACCC TGAGGTACCC
361 TATCAGCAAA ACAGTAAATG CCATTCATTC TTCTGGAGGC CTTGCCAAAA AAAGTCATTG
421 CCTAACTAAA AAATATGCTG GAGTCTCACA TTTTGTCTTA AAATTTCATG TGAATTTTGG
481 ATTTTATGCC ACAATACATA TTTATTATAA TATTAACATT AAATTACCAG TTAAATTTCT
541 TAAATTTTTC TAAAAAATTT TGAAAAAGCT GATAGTCCCA GAAGATGTAT TATGTTTAGC
601 TTGTGTCTTG GCATATCATC AAGTCCAAGG AGCACATGAC AGATGAGAAA GGTGAGTGTA
661 ATCCATGGAA CTTGGTCAAT GCAGTAGGTT GAATTGTGTC CCCCCAAAAG ATATGCACAA
721 GCTCAGCTGG GTGTGGTGGC TCACACCTGT AATCCCAGCA CTGTGGGAGG CCAGGGCAGG
781 CAGATCGCTG GAGGTCAGGA GTTTGAGACT AGGCTGGCCA ACATGGTGAA ATCCCATCTC
841 TACTAAAAGT ACAAAAATTA GCCGGGCGTG ATGGCAGGTG CCCATAGTCC CAGCTACTCA
901 GGAGGCTGAG GCAGGAGAAT CGCTTGAACC TGGGAGGCAG AGTTTGCAGT GAGACAAGAT
961 TGCACCACTG CACTATAGCC TGGGTGACAG AGCAAGACTC TGCCTCAAAA AAAAAAAAAA
1021 AAGATATGCA TAAGCTCTAG CTACCCCACT CCTTTTTCTG TGAATGTGAC CTTATTTGGA
1081 TATACGGGTC TTTGCAGATA TAATTAAGTT GAGGATCTCA AAATGAGATA ATGTTGGATT
1141 TAATCCAATG AGAGAGATCT GAGACCCAAA GAAACAGGGG AGACAGTCAT ATGAAGAAGG
1201 AGGCTGCTAT GGTTTGGATG TGGTTTGTCC CCACTAAAAC TCCTGTTGAA ATTTGATCCC
1251 CAGTGTGGCA GTATTGGGAG ATGGGAAGTG TTTTGGGGTC ATGGGAGCCA GGGTGTCTCA
1321 TGAATAGGGT TAATGCCCTC CCAGTGGAGA GCATTCTCAT TCTTGTGGGA CTGGATTAAT
1381 TACTGAAGAG CAGGTTGTTA TAACAAGTGA GTTCAGCCTC CTAGACTCTC TCTCTTGCTT
1441 CCTCTCTCAC CATGTGATCT TTTGGCACAC ACCCGCTTCC CCTTCCTCTT TCTTCCATGA
1501 GTTGAAGTGG TGTGGGACCC TGACCAGTTG CAGCTACCCA ATCTTGAATT TCCAGCCTAC
1561 AGAACTGTGA GCTAAATAAG CCTCTTTTCT TTATAAATTA CCCAGTCTAA AGTGTTCTGT
1621 TATAGCAACA AAAATAATGG ACTAAGAAAA TGGTAGGAGA CGCCCTGGCT TGGTGGCTCA
1681 TGCCTGTAAT CCCAGCACTT TGGGAGGCCA AGGCAGGCGG ATCGCCTGAG GTCAGGAGTT
1741 CAAGACCAGC CTGACCAACA TGGTGAAGCC CCATCTCTAC TAAAAATACA AAAATTAGCC
1801 GGCCTTGGTG GCACACACCT ATAATCCCAG CTCCTTGGGA GGCTGAGGCA GGAGAATTTC
1861 TTGAACCCAG GAGGCAGAGG TTGCAATGAG CTGAGATTCT GCCACTGCAC TCCAGCCTGG
1921 GTGACAGAGC AAGACTGTGT CTGGAAAAAA AAAAAAAAAA AA
B:核苷酸序列 (SEQ ID NO:9) 长度:94个氨基酸
1 MTNYYMSEIS SLLVNNESCD DKSQIFTLRY PISKTVNAIH SSGGLAKKSH CLTKKYAGVS
61 HFVLKFHVNF GFYATIHIYY NINIKLPVKF LKFF
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:8) 克隆号和蛋白名称:FP6679
起始编码子:269 ATG 终止编码子:551 TAA 蛋白质分子量:10833.10
1 G CAA GAA TTG GTT CTT TTC GGG GTT CTC TCC TAT ATC CCA TAC AAT CAA ACA ATA AAT 58
59 ATG TGT TGA ATA AAT CAC TTG TGC AAA TTC TAA AAT TCA CAT ATG ACC CTG TAT TTT ATC 118
119 ATA TCT CCC ATA GAA TAG GTG AGA ACC AGA GAA AAA TAT TGT TAA GCC CAG GAG CCC AAG 178
179 CTA TAT GAT CAA CTG GAA AGA CTC AGT AGG TAA TTT GTT CCT AGA AAG CAG CCT ATG GCA 238
239 ACA AAT GAT TGA AAT TTC CAC CTT GAT AAA ATG ACG AAT TAC TAC ATG TCA GAG ATT TCT 298
1 Met Thr Asn Tyr Tyr Met Ser Glu Ile Ser 10
299 AGT TTG CTT GTA AAT AAT GAA AGC TGT GAT GAT AAA TCC CAG ATT TTC ACC CTG AGG TAC 358
11 Ser Leu Leu Val Asn Asn Glu Ser Cys Asp Asp Lys Ser Gln Ile Phe Thr Leu Arg Tyr 30
359 CCT ATC AGC AAA ACA GTA AAT GCC ATT CAT TCT TCT GGA GGC CTT GCC AAA AAA AGT CAT 418
31 Pro Ile Ser Lys Thr Val Asn Ala Ile His Ser Ser Gly Gly Leu Ala Lys Lys Ser His 50
419 TGC CTA ACT AAA AAA TAT GCT GGA GTC TCA CAT TTT GTC TTA AAA TTT CAT GTG AAT TTT 478
51 Cys Leu Thr Lys Lys Tyr Ala Gly Val Ser His Phe Val Leu Lys Phe His Val Asn Phe 70
479 GGA TTT TAT GCC ACA ATA CAT ATT TAT TAT AAT ATT AAC ATT AAA TTA CCA GTT AAA TTT 538
71 Gly Phe Tyr Ala Thr Ile His Ile Tyr Tyr Asn Ile Asn Ile Lys Leu Pro Val Lys Phe 90
539 CTT AAA TTT TTC TAA AAA ATT TTG AAA AAG CTG ATA GTC CCA GAA GAT GTA TTA TGT TTA 598
91 Leu Lys Phe Phe *** 95
599 GCT TGT GTC TTG GCA TAT CAT CAA GTC CAA GGA GCA CAT GAC AGA TGA GAA AGG TGA GTG 658
659 TAA TCC ATG GAA CTT GGT CAA TGC AGT AGG TTG AAT TGT GTC CCC CCA AAA GAT ATG CAC 718
719 AAG CTC AGC TGG GTG TGG TGG CTC ACA CCT GTA ATC CCA GCA CTG TGG GAG GCC AGG GCA 778
779 GGC AGA TCG CTG GAG GTC AGG AGT TTG AGA CTA GGC TGG CCA ACA TGG TGA AAT CCC ATC 838
839 TCT ACT AAA AGT ACA AAA ATT AGC CGG GCG TGA TGG CAG GTG CCC ATA GTC CCA GCT ACT 898
899 CAG GAG GCT GAG GCA GGA GAA TCG CTT GAA CCT GGG AGG CAG AGT TTG CAG TGA GAC AAG 958
959 ATT GCA CCA CTG CAC TAT AGC CTG GGT GAC AGA GCA AGA CTC TGC CTC AAA AAAAAA AAA 1018
1019 AAA AGA TAT GCA TAA GCT CTA GCT ACC CCA CTC CTT TTT CTG TGA ATG TGA CCT TAT TTG 1078
1079 GAT ATA CGG GTC TTT GCA GAT ATA ATT AAG TTG AGG ATC TCA AAA TGA GAT AAT GTT GGA 1138
1139 TTT AAT CCA ATG AGA GAG ATC TGA GAC CCA AAG AAA CAG GGG AGA CAG TCA TAT GAA GAA 1198
1199 GGA GGC TGC TAT GGT TTG GAT GTG GTT TGT CCC CAC TAA AAC TCC TGT TGA AAT TTG ATC 1258
1259 CCC AGT GTG GCA GTA TTG GGA GAT GGG AAG TGT TTT GGG GTC ATG GGA GCC AGG GTG TCT 1318
1319 CAT GAA TAG GGT TAA TGC CCT CCC AGT GGA GAG CAT TCT CAT TCT TGT GGG ACT GGA TTA 1378
1379 ATT ACT GAA GAG CAG GTT GTT ATA ACA AGT GAG TTC AGC CTC CTA GAC TCT CTC TCT TGC 1438
1439 TTC CTC TCT CAC CAT GTG ATC TTT TGG CAC ACA CCC GCT TCC CCT TCC TCT TTC TTC CAT 1498
1499 GAG TTG AAG TGG TGT GGG ACC CTG ACC AGT TGC AGC TAC CCA ATC TTG AAT TTC CAG CCT 1558
1559 ACA GAA CTG TGA GCT AAA TAA GCC TCT TTT CTT TAT AAA TTA CCC AGT CTA AAG TGT TCT 1618
1619 GTT ATA GCA ACA AAA ATA ATG GAC TAA GAA AAT GGT AGG AGA CGC CCT GGC TTG GTG GCT 1678
1679 CAT GCC TGT AAT CCC AGC ACT TTG GGA GGC CAA GGC AGG CGG ATC GCC TGA GGT GAG GAG 1738
1739 TTC AAG ACC AGC CTG ACC AAC ATG GTG AAG CCC CAT CTC TAC TAA AAA TAC AAA AAT TAG 1798
1799 CCG GCC TTG GTG GCA CAC ACC TAT AAT CCC AGC TCC TTG GGA GGC TGA GGC AGG AGA ATT 1858
1859 TCT TGA ACC CAG GAG GCA GAG GTT GCA ATG AGC TGA GAT TCT GCC ACT GCA CTC CAG CCT 1918
1919 GGG TGA CAG AGC AAG ACT GTG TCT GGA AAA AAA AAA AAA AAA AA 1962
4.FP6778
A:核苷酸序列(SEQ ID NO:10)长度:2263个碱基
1 GCTGATCCCT CAATTTCTAG CACATAATTT CATCACTAGT TCACTTACAA ACCTCAGTTT
61 TCCCATGTGT AAAATAGGAA TTAAGTGATC ACAAGGCCGC TCTATGGAGC CCTCATCCTA
121 AGGTTACAAT GAGTACATAT CAGTTGTAGG AGTCCTTTTA TCCAACAGTG ACTCCGTCAA
181 GCCCTTGCCG TATGCTAGGG CTTGTAGTGG ACACCCGAAG AACCATAAGG AGTAAGATGA
241 GGCTGGTTGC AGAGAGTACA GTCTCATCAG AAGAACTTGC TCTTGTAATA AATTCAATCA
301 TTGACAATCA TTATTTCCAC CCAATCTGTG AAACAGAATA CCGTTATTTC TTTTTTTTGA
361 GAGAGAGTCT TCTTCTGTCG CCCAGGCTGG AGTGTAGTGG CGTGATCTCA GCTCACTGCA
421 ACCTCCACCT CCACCTCCCG GGTTCAAGCA ATTCTCGTGC CTCAGCCTCC CAACTAGCTG
481 GAGCTGCAGG CGCATACCAC CATGCCCAGC TAATTTTTGT ATTATTTGTA GAGATGGGGT
541 TTTGCCACAT TGCCCAGGCT GGTCTTGAAC TCCTGTCCTC AGGTTATCCA CCTCCCAAAG
601 TGCTGGGGTT ACAGGCATGA GCCACTGCGG GATCTCACTC GGTCACCCAG GCTGGAATGC
661 AGTGGAGTGA TCATGGCTCG CTGTAGCCTT GACCTGGGCT CAAGCGATCC TCCTGCCTCA
721 GCCTCCCAGG CTGGTCTCGA ACTCCTGACC TCAGGTGATC TGCCCACCTT GGCCTCCCTA
781 AGTGCTGGGG TTACAGGCAA GAGCCACCGC GCCCAGCCGG AAATTCCATT TTAGACTGGA
841 AGCCACAGTA TAAGGAAAAC AGCTCCTTGG AGTGCATTCA GAGTATGACT CCATGGCCAG
901 GACAGGGAGG GGCTCTAACA TAAAAAGAAC TAGGGGGTTC GGAGACGTTC CTAATCTTGG
961 GGTAGCAGGG AAAGACGGCA GCACCACTGG ACAGCAGGAG CAAGAGGAAT AATTTCAGGA
1021 ATCTGGGACG CGAAAAGATA AGGGGGAAGG GTCATGGGGG CATTTGTGGG TTCTGTCCTT
1081 GTAGTTCTCA AGAGCCGACC AGAAAGAAAG GCCAGGGGAC GGAGCCAGGC TTTTTCTGAG
1141 AGACCCCTGT AGACCCCAGC CAAGCATAGA GGCTGGCGAG AGGAAACTTT TTTGTTTTTG
1201 CTTCTGAGAC AGTCTTGCTC TGTTGCCCAG GCTGGAGTGC AGTGGCACAA TCTCAGCTCA
1261 CTGCAACCTC CCCGTCCTGG GTTCAAGTGA TTCCCCTGCC TCAGCCTCCC AAATAGCTGG
1321 GACTATGGGC ATATGGCTCC CCATCCTGGG TTCAAGCGAT TCTCCTGCCA CAGCCTCCCG
1381 AGTAGCTGGG ACTACGGGCA TATGGCTCCC CATCCTGGGT TCAAGCGATT CTCCTGCCTC
1441 AGCCTCCCGA GTAGCTGGGA CTACAGGCAT ATGGCACCAC GCATGGCTAA TTTTCTTATT
1501 TTTAGTAGAG ATAACTCCTG GGCTCAAGCG ATCTGCCCAC CTCGGCCTCC CAAAGTGCTG
1561 AGATTACAGG CACATGCCAC CACACCCAGC TAATTATTGT GTTTTTAGTA GAGACGGGGT
1621 TTTGCCATGT TTGCCCAGGC TGCTCTTGAA CTCCTGGGCT CAAACGATCC ACCCACCTCT
1681 GCCTCCCAAA GTTCTGGGGT TACAGGCATC AGCCACCATG CCCAGCCAGG AAGCTTATTC
1741 CCAGTGGTCT GGCTCTCCAG AGTTGCCACG CTGAAAGATG CTTGCTCTGG AGAGAGTGAG
1801 CTCCCTGTCA CCAGAGCTAT GCAAGCAGAT TCAGGCCAGC CCTCCCAGAG AGCATGAGAT
1861 GGGGAATCAC GCACAGAGTG GACCGAAGGA GGGATTGAAC AAGAAGGCTC AAAGGGTCCC
1921 TTTTGACCCT GAAGTCTAGG ATTTCGTGAA GCTACAGGTG AACCCATTGG CATGAGAAGC
1981 ATCCAGGGAG GAAAGATGCA AGCCCTTGGA ATATCGAGAG AATATTTCCA GCAGGAAAAG
2041 AAGTGGAAGG TTAAAGGAAA GCCAGAGAAG GGGACGTTGC CCTGGGCCAT CAACTAAGAG
2101 AAAAGCTGCC CAGAGCCAGG GATGGTGGCG GCGGTGCCTA TAGTACCGGC AGTTGGAGAG
2161 GCCGAGGCAG GAGCATCACT TGAGCCCATG AGTTTGAGAC CAGCCTGGGC AACATAGTGA
2221 GACTTTTTTC TCTACAAAAA AGTTTAAAAA AAAAAAAAAA AAA
B:核苷酸序列 (SEQ ID NO:12) 长度:142个氨基酸
1 MLGLVVDTRR TIRSKMRLVA ESTVSSEELA LVINSIIDNH YFHPICETEY RYFFFLRESL
61 LLSPRLECSG VISAHCNLHL HLPGSSNSRA SASQLAGAAG AYHHAQLIFV LFVEMGFCHI
121 AQAGLELLSS GYPPPKVLGL QA
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:11) 克隆号和蛋白名称:FP6778
起始编码子:192 ATG 终止编码子:618 TGA 蛋白质分子量:15625.22
1 GC TGA TCC CTC AAT TTC TAG CAC ATA ATT TCA TCA CTA GTT CAC TTA CAA ACC TCA GTT 59
60 TTC CCA TGT GTA AAA TAG GAA TTA AGT GAT CAC AAG GCC GCT CTA TGG AGC CCT CAT CCT 119
120 AAG GTT ACA ATG AGT ACA TAT CAG TTG TAG GAG TCC TTT TAT CCA ACA GTG ACT CCG TCA 179
180 AGC CCT TGC CGT ATG CTA GGG CTT GTA GTG GAC ACC CGA AGA ACC ATA AGG AGT AAG ATG 239
1 Met Leu Gly Leu Val Val Asp Thr Arg Arg Thr Ile Arg Ser Lys Met 16
240 AGG CTG GTT GCA GAG AGT ACA GTC TCA TCA GAA GAA CTT GCT CTT GTA ATA AAT TCA ATC 299
17 Arg Leu Val Ala Glu Ser Thr Val Ser Ser Glu Glu Leu Ala Leu Val Ile Asn Ser Ile 36
300 ATT GAC AAT CAT TAT TTC CAC CCA ATC TGT GAA ACA GAA TAC CGT TAT TTC TTT TTT TTG 359
37 Ile Asp Asn His Tyr Phe His Pro Ile Cys Glu Thr Glu Tyr Arg Tyr Phe Phe Phe Leu 56
360 AGA GAG AGT CTT CTT CTG TCG CCC AGG CTG GAG TGT AGT GGC GTG ATC TCA GCT CAC TGC 419
57 Arg Glu Ser Leu Leu Leu Ser Pro Arg Leu Glu Cys Ser Gly Val Ile Ser Ala His Cys 76
420 AAC CTC CAC CTC CAC CTC CCG GGT TCA AGC AAT TCT CGT GCC TCA GCC TCC CAA CTA GCT 479
77 Asn Leu His Leu His Leu Pro Gly Ser Ser Asn Ser Arg Ala Ser Ala Ser Gln Leu Ala 96
480 GGA GCT GCA GGC GCA TAC CAC CAT GCC CAG CTA ATT TTT GTA TTA TTT GTA GAG ATG GGG 539
97 Gly Ala Ala Gly Ala Tyr His His Ala Gln Leu Ile Phe Val Leu Phe Val Glu Met Gly 116
540 TTT TGC CAC ATT GCC CAG GCT GGT CTT GAA CTC CTG TCC TCA GGT TAT CCA CCT CCC AAA 599
117 Phe Cys His Ile Ala Gln Ala Gly Leu Glu Leu Leu Ser Ser Gly Tyr Pro Pro Pro Lys 136
600 GTG CTG GGG TTA CAG GCA TGA GCC ACT GCG GGA TCT CAC TCG GTC ACC CAG GCT GGA ATG 659
137 Val Leu Gly Leu Gln Ala *** 143
660 CAG TGG AGT GAT CAT GGC TCG CTG TAG CCT TGA CCT GGG CTC AAG CGA TCC TCC TGC CTC 719
720 AGC CTC CCA GGC TGG TCT CGA ACT CCT GAC CTC AGG TGA TCT GCC CAC CTT GGC CTC CCT 779
780 AAG TGC TGG GGT TAC AGG CAA GAG CCA CCG CGC CCA GCC GGA AAT TCC ATT TTA GAC TGG 839
840 AAG CCA CAG TAT AAG GAA AAC AGC TCC TTG GAG TGC ATT CAG AGT ATG ACT CCA TGG CCA 899
900 GGA CAG GGA GGG GCT CTA ACA TAA AAA GAA CTA GGG GGT TCG GAG ACG TTC CTA ATC TTG 959
960 GGG TAG CAG GGA AAG ACG GCA GCA CCA CTG GAC AGC AGG AGC AAG AGG AAT AAT TTC AGG 1019
1020 AAT CTG GGA CGC GAA AAG ATA AGG GGG AAG GGT CAT GGG GGC ATT TGT GGG TTC TGT CCT 1079
1080 TGT AGT TCT CAA GAG CCG ACC AGA AAG AAA GGC CAG GGG ACG GAG CCA GGC TTT TTC TGA 1139
1140 GAG ACC CCT GTA GAC CCC AGC CAA GCA TAG AGG CTG GCG AGA GGA AAC TTT TTT GTT TTT 1199
1200 GCT TCT GAG ACA GTC TTG CTC TGT TGC CCA GGC TGG AGT GCA GTG GCA CAA TCT CAG CTC 1259
1260 ACT GCA ACC TCC CCG TCC TGG GTT CAA GTG ATT CCC CTG CCT CAG CCT CCC AAA TAG CTG 1319
1320 GGA CTA TGG GCA TAT GGC TCC CCA TCC TGG GTT CAA GCG ATT CTC CTG CCA CAG CCT CCC 1379
1380 GAG TAG CTG GGA CTA CGG GCA TAT GGC TCC CCA TCC TGG GTT CAA GCG ATT CTC CTG CCT 1439
1440 CAG CCT CCC GAG TAG CTG GGA CTA CAG GCA TAT GGC ACC ACG CAT GGC TAA TTT TCT TAT 1499
1500 TTT TAG TAG AGA TAA CTC CTG GGC TCA AGC GAT CTG CCC ACC TCG GCC TCC CAA AGT GCT 1559
1560 GAG ATT ACA GGC ACA TGC CAC CAC ACC CAG CTA ATT ATT GTG TTT TTA GTA GAG ACG GGG 1619
1620 TTT TGC CAT GTT TGC CCA GGC TGC TCT TGA ACT CCT GGG CTC AAA CGA TCC ACC CAC CTC 1679
1680 TGC CTC CCA AAG TTC TGG GGT TAC AGG CAT CAG CCA CCA TGC CCA GCC AGG AAG CTT ATT 1739
1740 CCC AGT GGT CTG GCT CTC CAG AGT TGC CAC GCT GAA AGA TGC TTG CTC TGG AGA GAG TGA 1799
1800 GCT CCC TGT CAC CAG AGC TAT GCA AGC AGA TTC AGG CCA GCC CTC CCA GAG AGC ATG AGA 1859
1860 TGG GGA ATC ACG CAC AGA GTG GAC CGA AGG AGG GAT TGA ACA AGA AGG CTC AAA GGG TCC 1919
1920 CTT TTG ACC CTG AAG TCT AGG ATT TCG TGA AGC TAC AGG TGA ACC CAT TGG CAT GAG AAG 1979
1980 CAT CCA GGG AGG AAA GAT GCA AGC CCT TGG AAT ATC GAG AGA ATA TTT CCA GCA GGA AAA 2039
2040 GAA GTG GAA GGT TAA AGG AAA GCC AGA GAA GGG GAC GTT GCC CTG GGC CAT CAA CTA AGA 2099
2100 GAA AAG CTG CCC AGA GCC AGG CAT GGT GGC GGC GGT GCC TAT AGT ACC GGC AGT TGG AGA 2159
2160 GGC CGA GGC AGG AGC ATC ACT TGA GCC CAT GAG TTT GAG ACC AGC CTG GGC AAC ATA GTG 2219
2220 AGA CTT TTT TCT CTA CAA AAA AGT TTA AAA AAA AAA AAA AAA AA 2263
5.FP14381
A:核苷酸序列(SEQ ID NO:13)长度:2283个碱基
1 GGATCAATCA CCCCAGCCAA CACTGTAACT CCCTTCTTAG CCTGTTGACT TAAAGGTAGG
61 AGGAGCCCAA AGTGTCTAGG TGGCAATCTC AGCTTCCGGT TTAATGGAAT CATTCTTGTG
121 TCTCCTGGTG GCAGTGTTCC TCCCCCTGGA ACTAAGACCT CCAAGCCAGC AGAATGTAAT
181 GTCATGGGAA CAGGAAGAAA AATTTTGCTT GTGGAACACT ATGGGTGATG GTGAGTTGTG
241 CCACTTCTAC TTCCATCCCT TGATTCCTGG ACCCGTGAAT CCTGGCTATG GGAGAAACAC
301 TATCATATAT TGGATGCTGA TTTAGAGCAT ACATGGCTTT CTAGAGAACT TTGCCCCAGG
361 CCTGCAAAGT ATTGTCACCT AGTTGGCATT GTAATTGTGA CTTCAAAAGG CCATTCCACC
421 ATTCTATCAA TCCAGCTGCT TCAGATGATG GGGAATATGG TAAGACCAGT AAATTCCATG
481 GGCACGAGAC CACTGCCACA CTGCTTTTGC CATAAAGTGA ATGCGTTGGT CAGAGGCAAT
541 GCTGTTGGGA ATACCATGAT GGTGGGTAAG GCATTTCATG AGTCCACGGA TGGTAGTCTT
601 GGCAGAAGCA TTGCATGCAG GATAGGCAAA CCCATATCCC AAGTAAGTGT CTATTCCAGT
661 GAGGACAAAG CTTTGACTTT TCCATGATGG GAGAGGTCCA ATATAATCAA CCTGCCACCA
721 GGTAGCTGGC TGATTACCCC GAGGAATGGT GCCATATTGA GGACTCAGTG TTGGTGTCTG
781 CTGCTGGCAA ATTTGGCACT CAGCAGTGGC TGTAGCCAGG TCAGCCTTGG TGAGTGGAAG
841 TCCATATTGC TGAACCCATG TGTAACCTCC ATCCCTGCCA CGATGGCCAC TTTGTTCGTG
901 GGCCCATTGG GCGATCACAG GGGTGGCTGG GGAAGGAGGC TGAGTGGTGT CCATAGATCG
961 GGTCATCCTA TCCACTTGAT TATTAAAATC CTCCTCTGCT GAGGTCACCT GTTGGTGGGC
1021 ACCTACATGG AATACAAAAG TATTCACAGT TTTTGACCAC GCAGAAGAGG TTCATCCACA
1081 TACCTCTTCC CCAACTTTGT CACAAATTTT CCAGTCATGC TTCTTCCAAG TCCCTGACCA
1141 TCCAGCCAAA CCACTGGCCA CAGCCAATGA ATCAGTATAT AATCACATAT CTGGCCATTT
1201 CTCCTTCCAT GCAAAGTGCA CAACTAGGTG CACTGCTCAA AGTTCTGCTT ACTGGGAAGA
1261 TTCCTCTTCA CTGCTGTCCT TCAGGGGTGT CCTAGAAAGG GGGGCTGTAG TGCTCCAGTT
1321 GTCCACTTTT GTGGGGAAAA GAAAGAGAGA TCAGACTGTT ACTGTGTCTA AGTAGAAAGG
1381 GAAGACATAA GACACTCCAT TTTGAAAAAG ACCTGTACTT TAAATAATTG CTTTGCTGAG
1441 ATGTTGTTAA TTTGTAGCTT TGCCCCAGCC ACTTTGACCC AACCACTTTG ACACAACCTG
1501 GAGCTCACAA AAACATGTGT TGTATGAAAT CAAGGTTTAA GGGATCTAGG ACTGTGCAGG
1561 ACGTGCCTTG TTAACAAAAT GTTTACAAGC AGTATACTTG GTAAAAGTCA TCGCCATTCT
1621 CTAGTCTCAA TAAACCAGGG GCACAATGCA CTGTGGAAAG CCACAGGGAC CTCCACCCTT
1681 GAAAGCGGGG TATTGTCCAA GGTTTCTCCC CATGTGATAG TCTAAAATAT GGCCTCACAG
1741 GATTAGAAAG ACCTGACTGT CCCCCAGCCC GACACCCATA AAGGGTCTGT GCTGAGGTGG
1801 ATTAGTAAAA GAGGAAAGCC TCTTGCAGTT GAGATAGCGG AAAGCCAGTC TCCTGCCTGC
1861 CCCTGGGAAC TGAATGTCTC AGTATAAAAC CCAGTTGTAC ATTTGTTCAA TTCTGAGATG
1921 AAAGAAAAAC TGCCCTGTGG TGAGAGGTGA GACATGTTTG CAGCAATGCT GCTTTGTTAT
1981 TCTTTACTCC ACTGAGATGT TTGGGTGGAG AGAAACATAA ATCTGGCTTA CGTGCACGTC
2041 CAGTCATAGT ACCTTCCCTT GAACTTAATT ATGACATAGA TTCTATTGCT CACGTTTGTT
2101 GTTGACCTTT CCCCTTATTA TCACCCTGCC CTCCTACTAC ATTCCTTTTT GCTGAAATAA
2161 TGAAGATAAT AATCAATAAA AACTGAGGGA ACCCAGAGAC TGGTGTCGGT GCAGGTCCTT
2221 GGTATGCTGA GCGCTGGTCC CCTGGGCCCA CTGTTGTTTC TCTATAAAAA AAAAAAAAAA
2281 AAA
B:核苷酸序列(SEQ ID NO:15) 长度:80个氨基酸
1 MMGNMVRPVN SMGTRPLPHC FCHKVNALVR GNAVGNTMMV GKAFHESTDG SLGRSIACRI
61 GKPISQVSVY SSEDKALTFP
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:14) 克隆号和蛋白名称:FP14381
起始编码子:445 ATG 终止编码子:685 TGA 蛋白质分子量:8594.62
1 GGA TCA ATC ACC CCA GCC AAC ACT GTA ACT CCC TTC TTA GCC TGT TGA CTT AAA GGT AGG 60
61 AGG AGC CCA AAG TGT CTA GGT GGC AAT CTC AGC TTC CGG TTT AAT GGA ATC ATT CTT GTG 120
121 TCT CCT GGT GGC AGT GTT CCT CCC CCT GGA ACT AAG ACC TCC AAG CCA GCA GAA TGT AAT 180
181 GTC ATG GGA ACA GGA AGA AAA ATT TTG CTT GTG GAA CAC TAT GGG TGA TGG TGA GTT GTG 240
241 CCA CTT CTA CTT CCA TCC CTT GAT TCC TGG ACC CGT GAA TCC TGG CTA TGG GAG AAA CAC 300
301 TAT CAT ATA TTG GAT GCT GAT TTA GAG CAT ACA TGG CTT TCT AGA GAA CTT TGC CCC AGG 360
361 CCT GCA AAG TAT TGT CAC CTA GTT GGC ATT GTA ATT GTG ACT TCA AAA GGC CAT TCC ACC 420
421 ATT CTA TCA ATC CAG CTG CTT CAG ATG ATG GGG AAT ATG GTA AGA CCA GTA AAT TCC ATG 480
1 Met Met Gly Asn Met Val Arg Pro Val Asn Ser Met 12
481 GGC ACG AGA CCA CTG CCA CAC TGC TTT TGC CAT AAA GTG AAT GCG TTG GTC AGA GGC AAT 540
13 Gly Thr Arg Pro Leu Pro His Cys Phe Cys His Lys Val Asn Ala Leu Val Arg Gly Asn 32
541 GCT GTT GGG AAT ACC ATG ATG GTG GGT AAG GCA TTT CAT GAG TCC ACG GAT GGT AGT CTT 600
33 Ala Val Gly Asn Thr Met Met Val Gly Lys Ala Phe His Glu Ser Thr Asp Gly Ser Leu 52
601 GGC AGA AGC ATT GCA TGC AGG ATA GGC AAA CCC ATA TCC CAA GTA AGT GTC TAT TCC AGT 660
53 Gly Arg Ser Ile Ala Cys Arg Ile Gly Lys Pro Ile Ser Gln Val Ser Val Tyr Ser Ser 72
661 GAG GAC AAA GCT TTG ACT TTT CCA TGA TGG GAG AGG TCC AAT ATA ATC AAC CTG CCA CCA 720
73 Glu Asp Lys Ala Leu Thr Phe Pro *** 81
721 GGT AGC TGG CTG ATT ACC CCG AGG AAT GGT GCC ATA TTG AGG ACT CAG TGT TGG TGT CTG 780
781 CTG CTG GCA AAT TTG GCA CTC AGC AGT GGC TGT AGC CAG GTC AGC CTT GGT GAG TGG AAG 840
841 TCC ATA TTG CTG AAC CCA TGT GTA ACC TCC ATC CCT GCC ACG ATG GCC ACT TTG TTC GTG 900
901 GGC CCA TTG GGC GAT CAC AGG GGT GGC TGG GGA AGG AGG CTG AGT GGT GTC CAT AGA TCG 960
961 GGT CAT CCT ATC CAC TTG ATT ATT AAA ATC CTC CTC TGC TGA GGT CAC CTG TTG GTG GGC 1020
1021 ACC TAC ATG GAA TAC AAA AGT ATT CAC AGT TTT TGA CCA CGC AGA AGA GGT TCA TCC ACA 1080
1081 TAC CTC TTC CCC AAC TTT GTC ACA AAT TTT CCA GTC ATG CTT CTT CCA AGT CCC TGA CCA 1140
1141 TCC AGC CAA ACC ACT GGC CAC AGC CAA TGA ATC AGT ATA TAA TCA CAT ATC TGG CCA TTT 1200
1201 CTC CTT CCA TGC AAA GTG CAC AAC TAG GTG CAC TGC TCA AAG TTC TGC TTA CTG GGA AGA 1260
1261 TTC CTC TTC ACT GCT GTC CTT CAG GGG TGT CCT AGA AAG GGG GGC TGT AGT GCT CCA GTT 1320
1321 GTC CAC TTT TGT GGG GAA AAG AAA GAG AGA TCA GAC TGT TAC TGT GTC TAA GTA GAA AGG 1380
1381 GAA GAC ATA AGA CAC TCC ATT TTG AAA AAG ACC TGT ACT TTA AAT AAT TGC TTT GCT GAG 1440
1441 ATG TTG TTA ATT TGT AGC TTT GCC CCA GCC ACT TTG ACC CAA CCA CTT TGA CAC AAC CTG 1500
1501 GAG CTC ACA AAA ACA TGT GTT GTA TGA AAT CAA GGT TTA AGG GAT CTA GGA CTG TGC AGG 1560
1561 ACG TGC CTT GTT AAC AAA ATG TTT ACA AGC AGT ATA CTT GGT AAA AGT CAT CGC CAT TCT 1620
1621 CTA GTC TCA ATA AAC CAG GGG CAC AAT GCA CTG TGG AAA GCC ACA GGG ACC TCC ACC CTT 1680
1681 GAA AGC GGG GTA TTG TCC AAG GTT TCT CCC CAT GTG ATA GTC TAA AAT ATG GCC TCA CAG 1740
1741 GAT TAG AAA GAC CTG ACT GTC CCC CAG CCC GAC ACC CAT AAA GGG TCT GTG CTG AGG TGG 1800
1801 ATT AGT AAA AGA GGA AAG CCT CTT GCA GTT GAG ATA GCG GAA AGC CAG TCT CCT GCC TGC 1860
1861 CCC TGG GAA CTG AAT GTC TCA GTA TAA AAC CCA GTT GTA CAT TTG TTC AAT TCT GAG ATG 1920
1921 AAA GAA AAA CTG CCC TGT GGT GAG AGG TGA GAC ATG TTT GCA GCA ATG CTG CTT TGT TAT 1980
1981 TCT TTA CTC CAC TGA GAT GTT TGG GTG GAG AGA AAC ATA AAT CTG GCT TAC GTG CAC GTC 2040
2041 CAG TCA TAG TAC CTT CCC TTG AAC TTA ATT ATG ACA TAG ATT CTA TTG CTC ACG TTT GTT 2100
2101 GTT GAG CTT TCC CCT TAT TAT CAC CCT GCC CTC CTA CTA CAT TCC TTT TTG CTG AAA TAA 2160
2161 TGA AGA TAA TAA TCA ATA AAA ACT GAG GGA ACC CAG AGA CTG GTG TCG GTG CAG GTC CTT 2220
2221 GGT ATG CTG AGC GCT GGT CCC CTG GGC CCA CTG TTG TTT CTC TAT AAA AAA AAA AAA AAA 2280
2281 AAA
2283
6.FP15331
A:核苷酸序列(SEQ ID NO:16)长度:1073个碱基
1 GGGGCCTGGC CTGGCCTGGT GATGCCACTA TTTCCTTAAG AGGAGAGTGG ACATTCCGGA
61 TTATTGTCGG GGGAGTCTCA TTTCTGCTGC TGTAACAAAA TACCACAGAC TGGGTCATTT
121 AGAAACCATA GAAACTGATT TCGTACTGTT CTAGAGGCTG GGAAGTCCCA GATCAAGGTG
181 CCAGCAGGTT TGGTGTCGTG AGGGCCACTC TCTGCTTCCA AGATGGTCCC TCCTTGCTGT
241 GTCCTCTGGA GGGGAAGACT GCTGTGTCCT CACGCTGCAG AAGGTGGAAG GGCGAGAGAT
301 GGCAAACCAG GCTTACAAGC CCTTTGAAAA GGGCCCTCAT CCCATCCTGG AGAGCTCTGC
361 CCTATCACAT TGGCGATTAT GTTTCAATAT GTAAATTTTG GGAGATGCAT TCAGACCACA
421 GGAGGAAGGG AAAAGAAAGA GCCCCCAGGT TGAAAGCCAG TTTAGGTTTG AGTCCCAGCC
481 TTTCCCCTTG CTGTGTGACC TGGAGTAAAT TCCTCAGCCT CTGTGAGTCT CCCATTCCAC
541 CCCAGGATTG TTGTGAAAAC ACAGTAAGGC AAGCGGGTAA GAAAGCACCC AGCAAGGTGT
601 CAAGTGCCCC ACCAGGAGGG GTGGGGTGGC AATTTCCAGC ATTGCTTGGA ACCAGAATAG
661 CAACGTCTTC TGAGGTTCCA GAATTTGGAC TCTGAACCCA TTGAGAAGAA TGAAATCAAC
721 TTTGGCGTCA ATCAGCCACT GATTGCCATG TGGCCTGGAC GAGTCATCTC ATTCAACTTC
781 ACTTTCAGCC GGACGCTGTG ACTCGGGCCT GTAACCCCAG CACTTTGGGA AGCTGAGGTG
841 GGTGGATCGC TTGAGCCCAG GAGTTAGAGA CCAGCCTGGG CAACCTGGCG AAACCTCGTC
901 TCTACAAAAA AATACAAAAA ATTAGCTGGG CCTGGTGGCG TGTGCCTGTA GTCCCGGCTA
961 CTCAGGAGTC TGAGGTGGGA AGATCCACTG AGCCCAGGAG GTTGAGGCTG CACTCCAGCC
1021 TGGGCGACAG GAGTGAAAGC CTGTCTCAAA AAGTTAAAAA AAAAAAAAAA AAA
B:核苷酸序列 (SEQ ID NO:18) 长度:96个氨基酸
1 MHSDHRRKGK ERAPRLKASL GLSPSLSPCC VTWSKFLSLC ESPIPPQDCC ENTVRQAGKK
61 APSKVSSAPP GGVGWQFPAL LGTRIATSSE VPEFGL
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:17) 克隆号和蛋白名称:FP15331
起始编码子:405 ATG 终止编码子:693 TGA 蛋白质分子量:10260.28
1 GG GGC CTG GCC TGG CCT GGT GAT GCC ACT ATT TCC TTA AGA GGA GAG TGG ACA TTC CGG 59
60 ATT ATT GTC GGG GGA GTC TCA TTT CTG CTG CTG TAA CAA AAT ACC ACA GAC TGG GTC ATT 119
120 TAG AAA CCA TAG AAA CTG ATT TCG TAC TGT TCT AGA GGC TGG GAA GTC CCA GAT CAA GGT 179
180 GCC AGC AGG TTT GGT GTC GTG AGG GCC ACT CTC TGC TTC CAA GAT GGT CCC TCC TTG CTG 239
240 TGT CCT CTG GAG GGG AAG ACT GCT GTG TCC TCA CGC TGC AGA AGG TGG AAG GGC GAG AGA 299
300 TGG CAA ACC AGG CTT ACA AGC CCT TTG AAA AGG GCC CTC ATC CCA TCC TGG AGA GCT CTG 359
360 CCC TAT CAC ATT GGC GAT TAT GTT TCA ATA TGT AAA TTT TGG GAG ATG CAT TCA GAC CAC 419
1 Met His Ser Asp His 5
420 AGG AGG AAG GGA AAA GAA AGA GCC CCC AGG TTG AAA GCC AGT TTA GGT TTG AGT CCC AGC 479
6 Arg Arg Lys Gly Lys Glu Arg Ala Pro Arg Leu Lys Ala Ser Leu Gly Leu Ser Pro Ser 25
480 CTT TCC CCT TGC TGT GTG ACC TGG AGT AAA TTC CTC AGC CTC TGT GAG TCT CCC ATT CCA 539
26 Leu Ser Pro Cys Cys Val Thr Trp Ser Lys Phe Leu Ser Leu Cys Glu Ser Pro Ile Pro 45
540 CCC CAG GAT TGT TGT GAA AAC ACA GTA AGG CAA GCG GGT AAG AAA GCA CCC AGC AAG GTG 599
46 Pro Gln Asp Cys Cys Glu Asn Thr Val Arg Gln Ala Gly Lys Lys Ala Pro Ser Lys Val 65
600 TCA AGT GCC CCA CCA GGA GGG GTG GGG TGG CAA TTT CCA GCA TTG CTT GGA ACC AGA ATA 659
66 Ser Ser Ala Pro Pro Gly Gly Val Gly Trp Gln Phe Pro Ala Leu Leu Gly Thr Arg Ile 85
660 GCA ACG TCT TCT GAG GTT CCA GAA TTT GGA CTC TGA ACC CAT TGA GAA GAA TGA AAT CAA 719
86 Ala Thr Ser Ser Glu Val Pro Glu Phe Gly Leu *** 97
720 CTT TGG CGT CAA TCA GCC ACT GAT TGC CAT GTG GCC TGG ACG AGT CAT CTC ATT CAA CTT 779
780 CAC TTT GAG CCG GAC GCT GTG ACT CGG GCC TGT AAC CCC AGC ACT TTG GGA AGC TGA GGT 839
840 GGG TGG ATC GCT TGA GCC CAG GAG TTA GAG ACC AGC CTG GGC AAC CTG GCG AAA CCT CGT 899
900 CTC TAC AAA AAA ATA CAA AAA ATT AGC TGG GCC TGG TGG CGT GTG CCT GTA GTC CCG GCT 959
960 ACT CAG GAG TCT GAG GTG GGA AGA TCC ACT GAG CCC AGG AGG TTG AGG CTG CAC TCC AGC 1019
1020 CTG GGC GAC AGG AGT GAA ACC CTG TCT CAA AAA GTT AAA AAA AAA AAA AAA AAA 1073
序列表
<110>上海新世界基因技术开发有限公司
<120>具有促进小鼠NIH/3T3细胞转化功能的新的人蛋白及其编码序列
<130>017520
<160>18
<170>PatentIn version 3.0
<210>1
<211>1837
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<400>1
gctaaatccc cttgtaaatt taactgttag tccaaagagg aacagctctt tggacactag 60
gaaaaaacct tgtagagaga gtaaaaaatt taacacccat agtaggccta aaagcagcca 120
ccaattaaga aagcgttcaa gctcaacacc cactacctaa aaaaccccat ctctactaaa 180
aaaaaaaaaa tacaaaaaat tagccaggca tggtggcggg cgcctgtagt cccagctact 240
ccggaggctg aggcaggaga atcgcttgaa cctgggaggc tgaggttgca gtgagccgag 300
atcgcgccat tgcactccag cctcgacaac aagagccaaa ctccgtctca aaaaaaaaaa 360
ttaaataaca gcaagcaact gcatgcacgt ctgggggcgg tgtccggggt gagaaaggcc 420
ccgccagcaa tccatcccac aatcagcgat ggctgagggg gtctggacct cgcgggacgg 480
ggctgcacgc ccccaagcaa atgcacagcg cggctaaatt ggattcgaca gcaccggaaa 540
cggcgactcc cacttggggc gctgcggaca cacgagtcga ggctgccttc caggaagcaa 600
acaaaaaaag gggggaaaag ggggggaaag aaagaaagag aaaaaggagg gcgagtggcg 660
agcaggggcc tcggccgcca cccacacgcc ccgaagcgtg ctcgtccccc gcgcggggct 720
cccggccgcc gccctcggcc atcggctgct ccccggtggc ccaggcctcg gactccgcgg 780
ccggcccggc gcggcccagc gccctcaggt gcgtaccccg cccccgccgc cgacgccgcc 840
gacgccgcca ttaagggcgg gttgcctttc ggaacgtcct cctcctgagg gcctggggaa 900
gggaggccgc ccggccgcag cgggaggtgg ccccccggga caccccggcg ccccgaggcg 960
aggcaccccc gaaccccgat ccctgctggc aggaccagag gtgtgagggt gggggcggag 1020
aagccttgcc gcgggggcaa tggtcgtacg cacggagcgc acatccctct ccttcctgat 1080
tggccgagcg ggggtgtgcg tgatgccacg ctccgcccgt cgtacgtggg gcgctcgcgg 1140
gggcgggggc cgccgctgtt accaggcaac tgcgccccgg atccgccccc tgacgtcacg 1200
cgttgcctag aggcccaggt tgtgggtttt gtccgtgggt atggtcctcg cgacggcctc 1260
cggggatctg tttgttggcg gaaaaccaat ccagactccc aaggaaaaag gccgaggccc 1320
gggaatttcc cgttgcaatt ctggtttcga gttctagggg gaaaaaggct cgcaaggctg 1380
tattctccat ccctcaaagc ccaagctttc ttgtttctta ataacagctt cgttgagatc 1440
cattgtaaaa ttcacgtttt aagagtgaat aattcagtgc acagagctgt gcaacctttg 1500
ccactaattg cagaacgctt tcagcacccg aggagaagaa accccaaccc cattaggccg 1560
tcattccccg gtccccaccc cgtccctatc cccagcccct ggcaatcact tttgtctccg 1620
tggatttgcc tattctggac atttcgtgtg gatagaatca tcccaagaag ttttttgtgt 1680
gtctggcttc tttccttctt tatggctgaa taaaaatcca tgatatgaaa aaaaaaaaaa 1740
aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 1800
aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaa 1837
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<211>1837
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<220>
<221>CDS
<222>(501)..(851)
<400>2
gctaaatccc cttgtaaatt taactgttag tccaaagagg aacagctctt tggacactag 60
gaaaaaacct tgtagagaga gtaaaaaatt taacacccat agtaggccta aaagcagcca 120
ccaattaaga aagcgttcaa gctcaacacc cactacctaa aaaaccccat ctctactaaa 180
aaaaaaaaaa tacaaaaaat tagccaggca tggtggcggg cgcctgtagt cccagctact 240
ccggaggctg aggcaggaga atcgcttgaa cctgggaggc tgaggttgca gtgagccgag 300
atcgcgccat tgcactccag cctcgacaac aagagccaaa ctccgtctca aaaaaaaaaa 360
ttaaataaca gcaagcaact gcatgcacgt ctgggggcgg tgtccggggt gagaaaggcc 420
ccgccagcaa tccatcccac aatcagcgat ggctgagggg gtctggacct cgcgggacgg 480
ggctgcacgc ccccaagcaa atg cac agc gcg gct aaa ttg gat tcg aca gca 533
Met His Ser Ala Ala Lys Leu Asp Ser Thr Ala
1 5 10
ccg gaa acg gcg act ccc act tgg ggc gct gcg gac aca cga gtc gag 581
Pro Glu Thr Ala Thr Pro Thr Trp Gly Ala Ala Asp Thr Arg Val Glu
15 20 25
gct gcc ttc cag gaa gca aac aaa aaa agg ggg gaa aag ggg ggg aaa 629
Ala Ala Phe Gln Glu Ala Asn Lys Lys Arg Gly Glu Lys Gly Gly Lys
30 35 40
gaa aga aag aga aaa agg agg gcg agt ggc gag cag ggg cct cgg ccg 677
Glu Arg Lys Arg Lys Arg Arg Ala Ser Gly Glu Gln Gly Pro Arg Pro
45 50 55
cca ccc aca cgc ccc gaa gcg tgc tcg tcc ccc gcg cgg ggc tcc cgg 725
Pro Pro Thr Arg Pro Glu Ala Cys Ser Ser Pro Ala Arg Gly Ser Arg
60 65 70 75
ccg ccg ccc tcg gcc atc ggc tgc tcc ccg gtg gcc cag gcc tcg gac 773
Pro Pro Pro Ser Ala Ile Gly Cys Ser Pro Val Ala Gln Ala Ser Asp
80 85 90
tcc gcg gcc ggc ccg gcg cgg ccc agc gcc ctc agg tgc gta ccc cgc 821
Ser Ala Ala Gly Pro Ala Arg Pro Ser Ala Leu Arg Cys Val Pro Arg
95 100 105
ccc cgc cgc cga cgc cgc cga cgc cgc cat taagggcggg ttgcctttcg 871
Pro Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg His
110 115
gaacgtcctc ctcctgaggg cctggggaag ggaggccgcc cggccgcagc gggaggtggc 931
cccccgggac accccggcgc cccgaggcga ggcacccccg aaccccgatc cctgctggca 991
ggaccagagg tgtgagggtg ggggcggaga agccttgccg cgggggcaat ggtcgtacgc 1051
acggagcgca catccctctc cttcctgatt ggccgagcgg gggtgtgcgt gatgccacgc 1111
tccgcccgtc gtacgtgggg cgctcgcggg ggcgggggcc gccgctgtta ccaggcaact 1171
gcgccccgga tccgccccct gacgtcacgc gttgcctaga ggcccaggtt gtgggttttg 1231
tccgtgggta tggtcctcgc gacggcctcc ggggatctgt ttgttggcgg aaaaccaatc 1291
cagactccca aggaaaaagg ccgaggcccg ggaatttccc gttgcaattc tggtttcgag 1351
ttctaggggg aaaaaggctc gcaaggctgt attctccatc cctcaaagcc caagctttct 1411
tgtttcttaa taacagcttc gttgagatcc attgtaaaat tcacgtttta agagtgaata 1471
attcagtgca cagagctgtg caacctttgc cactaattgc agaacgcttt cagcacccga 1531
ggagaagaaa ccccaacccc attaggccgt cattccccgg tccccacccc gtccctatcc 1591
ccagcccctg gcaatcactt ttgtctccgt ggatttgcct attctggaca tttcgtgtgg 1651
atagaatcat cccaagaagt tttttgtgtg tctggcttct ttccttcttt atggctgaat 1711
aaaaatccat gatatgaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 1771
aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 1831
aaaaaa 1837
<210>3
<211>117
<212>PRT
<213>智人(Homo sapiens)
<400>3
Met His Ser Ala Ala Lys Leu Asp Ser Thr Ala Pro Glu Thr Ala Thr
1 5 10 15
Pro Thr Trp Gly Ala Ala Asp Thr Arg Val Glu Ala Ala Phe Gln Glu
20 25 30
Ala Asn Lys Lys Arg Gly Glu Lys Gly Gly Lys Glu Arg Lys Arg Lys
35 40 45
Arg Arg Ala Ser Gly Glu Gln Gly Pro Arg Pro Pro Pro Thr Arg Pro
50 55 60
Glu Ala Cys Ser Ser Pro Ala Arg Gly Ser Arg Pro Pro Pro Ser Ala
65 70 75 80
Ile Gly Cys Ser Pro Val Ala Gln Ala Ser Asp Ser Ala Ala Gly Pro
85 90 95
Ala Arg Pro Ser Ala Leu Arg Cys Val Pro Arg Pro Arg Arg Arg Arg
100 105 110
Arg Arg Arg Arg His
115
<210>4
<211>2182
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<400>4
gcagagaaat ttgaaaattg gcaggtgcac tttcttgacc tttccaaaaa tagtctgagt 60
cactttcact ttcagccttc aaactgtgtt gaatgaaacc tttgtgcagt ttacagaaag 120
tgaagaactg tttggcaaga gagagaagtt cgagctccta atagcctcgg ctgcattgag 180
taacatttct tttgagttgt ctattaacac tttcctgaaa catgcttttt atgacgccta 240
gaacttgtgt aagagtgact gtaatttgag ttatttaaaa atgtaagtac aagaaatgtg 300
tcacacgcca taagagctag gaaatgacag ctcacattca tcttggtgga aggaaactct 360
aattattgga agatgtgatt ggagtatttg ttcttaatac ctacggtggc tctgttatat 420
gcttgcctaa caccagtatt ggcttgcaaa taacactgaa aagctccttt cttttcctct 480
ggtctttgtg ggaaggcatg gtatgagtcg agattgctaa accactcttc tgagaggact 540
cagagagagt gtttatccta gactatccat ggccctggta cttctgagtt cagttgtggt 600
gtgatctcat tagtccaggc tcagaatggc tcggtaacct caaaactcca agccctcggt 660
gcttgctttg cttccctaga cttgcagctt atgtacgccc acatgtgctt catgcgtatt 720
aaaaatgctt gcatgtgtag ataggaagat atatgttgac tgtcctgaaa aacttgacat 780
acctaacatt taaaattgtt ttgagtttcc cccggggata aactagtctt caaatgtaaa 840
cgtgatgagc agcgtagggg ctatggtacc agagaaaaga gccgaatctc ggccctggtc 900
cagccctacc tctcgtgctc tgtcacctgc agcagaggtg gagtgggggc catgtctgtg 960
agcgggacct catcttgtct attcctcaga cccacccaag ggcagggatt cccaaaactg 1020
ctggtacctg taagaggtat tgtattcttg gactccattc cataacctct catcaggatt 1080
ctgggtttgg aactctagaa tcaatgttga ggaaaaatag aacttggcga ttttattttt 1140
ctagatataa ttcacatacc ataaaagcca ctctttaaat tgtacaattc agtggttttt 1200
tagtatattc agagttgtac agccatgacc actagctaat tcagaatatt ttcattgcct 1260
cccaacaagc ctagtactca tgagtagtca ctcccttgcc cattccctcc acccccaagc 1320
ccctggcaac cactaatcta ctttctgtct ctatggattt gcctatttga gacattcata 1380
tgaatggaat tatataatat gtagactttt gtatctgttt ttttttcatt tagcataaaa 1440
attttcaaga tttgtccaca gtgtagtggt gtctcagtac ttctttcctt tttatcactg 1500
aaaatacttc attgatgtat atgtcatatt ttgttatcta ctcatcaatt gatgaatact 1560
tgtattgttt ccactttggc tgttacaaat aatgctgtta tgaacatgtg tgtacaagta 1620
tttgtgtggg tacatgttat ttctcttggg catacctaca gatggaatta ctggatcata 1680
tgacaacttt atgtttaact ttttgaaaaa ctacaaaacc aacaagctgt accattttgt 1740
aatcccacca gcaatgaata gggttctaat ttttccacat cttcatcaat atttgttatt 1800
gatctttttg attatagcca atctagtgag tgtgaactgg tatcttattg taattgtgat 1860
tttgatttgc aattccctaa tgatgttgaa cagatgttca tataattgtt ggccatttat 1920
atagtcttta gagatatatc tgttttgccc atttctaact gagcaaaaca gacaaaaatt 1980
gagttgtgaa tgttctttat gtatactgta tacaagcccc ttaacagata tatgatttgc 2040
aaatcttttc tgttctgtag gttgtttctc catgttcttg ttggtatgct tggaagcata 2100
aaagttttta ttctggtgga gtccaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 2160
aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aa 2182
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<211>2182
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<220>
<221>CDS
<222>(1634)..(1921)
<400>5
gcagagaaat ttgaaaattg gcaggtgcac tttcttgacc tttccaaaaa tagtctgagt 60
cactttcact ttcagccttc aaactgtgtt gaatgaaacc tttgtgcagt ttacagaaag 120
tgaagaactg tttggcaaga gagagaagtt cgagctccta atagcctcgg ctgcattgag 180
taacatttct tttgagttgt ctattaacac tttcctgaaa catgcttttt atgacgccta 240
gaacttgtgt aagagtgact gtaatttgag ttatttaaaa atgtaagtac aagaaatgtg 300
tcacacgcca taagagctag gaaatgacag ctcacattca tcttggtgga aggaaactct 360
aattattgga agatgtgatt ggagtatttg ttcttaatac ctacggtggc tctgttatat 420
gcttgcctaa caccagtatt ggcttgcaaa taacactgaa aagctccttt cttttcctct 480
ggtctttgtg ggaaggcatg gtatgagtcg agattgctaa accactcttc tgagaggact 540
cagagagagt gtttatccta gactatccat ggccctggta cttctgagtt cagttgtggt 600
gtgatctcat tagtccaggc tcagaatggc tcggtaacct caaaactcca agccctcggt 660
gcttgctttg cttccctaga cttgcagctt atgtacgccc acatgtgctt catgcgtatt 720
aaaaatgctt gcatgtgtag ataggaagat atatgttgac tgtcctgaaa aacttgacat 780
acctaacatt taaaattgtt ttgagtttcc cccggggata aactagtctt caaatgtaaa 840
cgtgatgagc agcgtagggg ctatggtacc agagaaaaga gccgaatctc ggccctggtc 900
cagccctacc tctcgtgctc tgtcacctgc agcagaggtg gagtgggggc catgtctgtg 960
agcgggacct catcttgtct attcctcaga cccacccaag ggcagggatt cccaaaactg 1020
ctggtacctg taagaggtat tgtattcttg gactccattc cataacctct catcaggatt 1080
ctgggtttgg aactctagaa tcaatgttga ggaaaaatag aacttggcga ttttattttt 1140
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tttgtgtggg tac atg tta ttt ctc ttg ggc ata cct aca gat gga att 1669
Met Leu Phe Leu Leu Gly Ile Pro Thr Asp Gly Ile
1 5 10
act gga tca tat gac aac ttt atg ttt aac ttt ttg aaa aac tac aaa 1717
Thr Gly Ser Tyr Asp Asn Phe Met Phe Asn Phe Leu Lys Asn Tyr Lys
15 20 25
acc aac aag ctg tac cat ttt gta atc cca cca gca atg aat agg gtt 1765
Thr Asn Lys Leu Tyr His Phe Val Ile Pro Pro Ala Met Asn Arg Val
30 35 40
cta att ttt cca cat ctt cat caa tat ttg tta ttg atc ttt ttg att 1813
Leu Ile Phe Pro His Leu His Gln Tyr Leu Leu Leu Ile Phe Leu Ile
45 50 55 60
ata gcc aat cta gtg agt gtg aac tgg tat ctt att gta att gtg att 1861
Ile Ala Asn Leu Val Ser Val Asn Trp Tyr Leu Ile Val Ile Val Ile
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ttg att tgc aat tcc cta atg atg ttg aac aga tgt tca tat aat tgt 1909
Leu Ile Cys Asn Ser Leu Met Met Leu Asn Arg Cys Ser Tyr Asn Cys
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tgg cca ttt ata tagtctttag agatatatct gttttgccca tttctaactg 1961
Trp Pro Phe Ile
95
agcaaaacag acaaaaattg agttgtgaat gttctttatg tatactgtat acaagcccct 2021
taacagatat atgatttgca aatcttttct gttctgtagg ttgtttctcc atgttcttgt 2081
tggtatgctt ggaagcataa aagtttttat tctggtggag tccaaaaaaa aaaaaaaaaa 2141
aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa a 2182
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<211>96
<212>PRT
<213>智人(Homo sapiens)
<400>6
Met Leu Phe Leu Leu Gly Ile Pro Thr Asp Gly Ile Thr Gly Ser Tyr
1 5 10 15
Asp Asn Phe Met Phe Asn Phe Leu Lys Asn Tyr Lys Thr Asn Lys Leu
20 25 30
Tyr His Phe Val Ile Pro Pro Ala Met Asn Arg Val Leu Ile Phe Pro
35 40 45
His Leu His Gln Tyr Leu Leu Leu Ile Phe Leu Ile Ile Ala Asn Leu
50 55 60
Val Ser Val Asn Trp Tyr Leu Ile Val Ile Val Ile Leu Ile Cys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Met Met Leu Asn Arg Cys Ser Tyr Asn Cys Trp Pro Phe Ile
85 90 95
<210>7
<211>1962
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<400>7
gcaagaattg gttcttttcg gggttctctc ctatatccca tacaatcaaa caataaatat 60
gtgttgaata aatcacttgt gcaaattcta aaattcacat atgaccctgt attttatcat 120
atctcccata gaataggtga gaaccagaga aaaatattgt taagcccagg agcccaagct 180
atatgatcaa ctggaaagac tcagtaggta atttgttcct agaaagcagc ctatggcaac 240
aaatgattga aatttccacc ttgataaaat gacgaattac tacatgtcag agatttctag 300
tttgcttgta aataatgaaa gctgtgatga taaatcccag attttcaccc tgaggtaccc 360
tatcagcaaa acagtaaatg ccattcattc ttctggaggc cttgccaaaa aaagtcattg 420
cctaactaaa aaatatgctg gagtctcaca ttttgtctta aaatttcatg tgaattttgg 480
attttatgcc acaatacata tttattataa tattaacatt aaattaccag ttaaatttct 540
taaatttttc taaaaaattt tgaaaaagct gatagtccca gaagatgtat tatgtttagc 600
ttgtgtcttg gcatatcatc aagtccaagg agcacatgac agatgagaaa ggtgagtgta 660
atccatggaa cttggtcaat gcagtaggtt gaattgtgtc cccccaaaag atatgcacaa 720
gctcagctgg gtgtggtggc tcacacctgt aatcccagca ctgtgggagg ccagggcagg 780
cagatcgctg gaggtcagga gtttgagact aggctggcca acatggtgaa atcccatctc 840
tactaaaagt acaaaaatta gccgggcgtg atggcaggtg cccatagtcc cagctactca 900
ggaggctgag gcaggagaat cgcttgaacc tgggaggcag agtttgcagt gagacaagat 960
tgcaccactg cactatagcc tgggtgacag agcaagactc tgcctcaaaa aaaaaaaaaa 1020
aagatatgca taagctctag ctaccccact cctttttctg tgaatgtgac cttatttgga 1080
tatacgggtc tttgcagata taattaagtt gaggatctca aaatgagata atgttggatt 1140
taatccaatg agagagatct gagacccaaa gaaacagggg agacagtcat atgaagaagg 1200
aggctgctat ggtttggatg tggtttgtcc ccactaaaac tcctgttgaa atttgatccc 1260
cagtgtggca gtattgggag atgggaagtg ttttggggtc atgggagcca gggtgtctca 1320
tgaatagggt taatgccctc ccagtggaga gcattctcat tcttgtggga ctggattaat 1380
tactgaagag caggttgtta taacaagtga gttcagcctc ctagactctc tctcttgctt 1440
cctctctcac catgtgatct tttggcacac acccgcttcc ccttcctctt tcttccatga 1500
gttgaagtgg tgtgggaccc tgaccagttg cagctaccca atcttgaatt tccagcctac 1560
agaactgtga gctaaataag cctcttttct ttataaatta cccagtctaa agtgttctgt 1620
tatagcaaca aaaataatgg actaagaaaa tggtaggaga cgccctggct tggtggctca 1680
tgcctgtaat cccagcactt tgggaggcca aggcaggcgg atcgcctgag gtcaggagtt 1740
caagaccagc ctgaccaaca tggtgaagcc ccatctctac taaaaataca aaaattagcc 1800
ggccttggtg gcacacacct ataatcccag ctccttggga ggctgaggca ggagaatttc 1860
ttgaacccag gaggcagagg ttgcaatgag ctgagattct gccactgcac tccagcctgg 1920
gtgacagagc aagactgtgt ctggaaaaaa aaaaaaaaaa aa 1962
<210>8
<211>1962
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<220>
<221>CDS
<222>(269)..(550)
<400>8
gcaagaattg gttcttttcg gggttctctc ctatatccca tacaatcaaa caataaatat 60
gtgttgaata aatcacttgt gcaaattcta aaattcacat atgaccctgt attttatcat 120
atctcccata gaataggtga gaaccagaga aaaatattgt taagcccagg agcccaagct 180
atatgatcaa ctggaaagac tcagtaggta atttgttcct agaaagcagc ctatggcaac 240
aaatgattga aatttccacc ttgataaa atg acg aat tac tac atg tca gag 292
Met Thr Asn Tyr Tyr Met Ser Glu
1 5
att tct agt ttg ctt gta aat aat gaa agc tgt gat gat aaa tcc cag 340
Ile Ser Ser Leu Leu Val Asn Asn Glu Ser Cys Asp Asp Lys Ser Gln
10 15 20
att ttc acc ctg agg tac cct atc agc aaa aca gta aat gcc att cat 388
Ile Phe Thr Leu Arg Tyr Pro Ile Ser Lys Thr Val Asn Ala Ile His
25 30 35 40
tct tct gga ggc ctt gcc aaa aaa agt cat tgc cta act aaa aaa tat 436
Ser Ser Gly Gly Leu Ala Lys Lys Ser His Cys Leu Thr Lys Lys Tyr
45 50 55
gct gga gtc tca cat ttt gtc tta aaa ttt cat gtg aat ttt gga ttt 484
Ala Gly Val Ser His Phe Val Leu Lys Phe His Val Asn Phe Gly Phe
60 65 70
tat gcc aca ata cat att tat tat aat att aac att aaa tta cca gtt 532
Tyr Ala Thr Ile His Ile Tyr Tyr Asn Ile Asn Ile Lys Leu Pro Val
75 80 85
aaa ttt ctt aaa ttt ttc taaaaaattt tgaaaaagct gatagtccca 580
Lys Phe Leu Lys Phe Phe
90
gaagatgtat tatgtttagc ttgtgtcttg gcatatcatc aagtccaagg agcacatgac 640
agatgagaaa ggtgagtgta atccatggaa cttggtcaat gcagtaggtt gaattgtgtc 700
cccccaaaag atatgcacaa gctcagctgg gtgtggtggc tcacacctgt aatcccagca 760
ctgtgggagg ccagggcagg cagatcgctg gaggtcagga gtttgagact aggctggcca 820
acatggtgaa atcccatctc tactaaaagt acaaaaatta gccgggcgtg atggcaggtg 880
cccatagtcc cagctactca ggaggctgag gcaggagaat cgcttgaacc tgggaggcag 940
agtttgcagt gagacaagat tgcaccactg cactatagcc tgggtgacag agcaagactc 1000
tgcctcaaaa aaaaaaaaaa aagatatgca taagctctag ctaccccact cctttttctg 1060
tgaatgtgac cttatttgga tatacgggtc tttgcagata taattaagtt gaggatctca 1120
aaatgagata atgttggatt taatccaatg agagagatct gagacccaaa gaaacagggg 1180
agacagtcat atgaagaagg aggctgctat ggtttggatg tggtttgtcc ccactaaaac 1240
tcctgttgaa atttgatccc cagtgtggca gtattgggag atgggaagtg ttttggggtc 1300
atgggagcca gggtgtctca tgaatagggt taatgccctc ccagtggaga gcattctcat 1360
tcttgtggga ctggattaat tactgaagag caggttgtta taacaagtga gttcagcctc 1420
ctagactctc tctcttgctt cctctctcac catgtgatct tttggcacac acccgcttcc 1480
ccttcctctt tcttccatga gttgaagtgg tgtgggaccc tgaccagttg cagctaccca 1540
atcttgaatt tccagcctac agaactgtga gctaaataag cctcttttct ttataaatta 1600
cccagtctaa agtgttctgt tatagcaaca aaaataatgg actaagaaaa tggtaggaga 1660
cgccctggct tggtggctca tgcctgtaat cccagcactt tgggaggcca aggcaggcgg 1720
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aa 1962
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<211>94
<212>PRT
<213>智人(Homo sapiens)
<400>9
Met Thr Asn Tyr Tyr Met Ser Glu Ile Ser Ser Leu Leu Val Asn Asn
1 5 10 15
Glu Ser Cys Asp Asp Lys Ser Gln Ile Phe Thr Leu Arg Tyr Pro Ile
20 25 30
Ser Lys Thr Val Asn Ala Ile His Ser Ser G1y Gly Leu Ala Lys Lys
35 40 45
Ser His Cys Leu Thr Lys Lys Tyr Ala Gly Val Ser His Phe Val Leu
50 55 60
Lys Phe His Val Asn Phe Gly Phe Tyr Ala Thr Ile His Ile Tyr Tyr
65 70 75 80
Asn Ile Asn Ile Lys Leu Pro Val Lys Phe Leu Lys Phe Phe
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<210>10
<211>2263
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<400>10
gctgatccct caatttctag cacataattt catcactagt tcacttacaa acctcagttt 60
tcccatgtgt aaaataggaa ttaagtgatc acaaggccgc tctatggagc cctcatccta 120
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gcccttgccg tatgctaggg cttgtagtgg acacccgaag aaccataagg agtaagatga 240
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ttgacaatca ttatttccac ccaatctgtg aaacagaata ccgttatttc ttttttttga 360
gagagagtct tcttctgtcg cccaggctgg agtgtagtgg cgtgatctca gctcactgca 420
acctccacct ccacctcccg ggttcaagca attctcgtgc ctcagcctcc caactagctg 480
gagctgcagg cgcataccac catgcccagc taatttttgt attatttgta gagatggggt 540
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tgctggggtt acaggcatga gccactgcgg gatctcactc ggtcacccag gctggaatgc 660
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gcctcccagg ctggtctcga actcctgacc tcaggtgatc tgcccacctt ggcctcccta 780
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agccacagta taaggaaaac agctccttgg agtgcattca gagtatgact ccatggccag 900
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agattacagg cacatgccac cacacccagc taattattgt gtttttagta gagacggggt 1620
tttgccatgt ttgcccaggc tgctcttgaa ctcctgggct caaacgatcc acccacctct 1680
gcctcccaaa gttctggggt tacaggcatc agccaccatg cccagccagg aagcttattc 1740
ccagtggtct ggctctccag agttgccacg ctgaaagatg cttgctctgg agagagtgag 1800
ctccctgtca ccagagctat gcaagcagat tcaggccagc cctcccagag agcatgagat 1860
ggggaatcac gcacagagtg gaccgaagga gggattgaac aagaaggctc aaagggtccc 1920
ttttgaccct gaagtctagg atttcgtgaa gctacaggtg aacccattgg catgagaagc 1980
atccagggag gaaagatgca agcccttgga atatcgagag aatatttcca gcaggaaaag 2040
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gccgaggcag gagcatcact tgagcccatg agtttgagac cagcctgggc aacatagtga 2220
gacttttttc tctacaaaaa agtttaaaaa aaaaaaaaaa aaa 2263
<210>11
<211>2263
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<220>
<221>CDS
<222>(192)..(617)
<400>11
gctgatccct caatttctag cacataattt catcactagt tcacttacaa acctcagttt 60
tcccatgtgt aaaataggaa ttaagtgatc acaaggccgc tctatggagc cctcatccta 120
aggttacaat gagtacatat cagttgtagg agtcctttta tccaacagtg actccgtcaa 180
gcccttgccg t atg cta ggg ctt gta gtg gac acc cga aga acc ata agg 230
Met Leu Gly Leu Val Val Asp Thr Arg Arg Thr Ile Arg
1 5 10
agt aag atg agg ctg gtt gca gag agt aca gtc tca tca gaa gaa ctt 278
Ser Lys Met Arg Leu Val Ala Glu Ser Thr Val Ser Ser Glu Glu Leu
15 20 25
gct ctt gta ata aat tca atc att gac aat cat tat ttc cac cca atc 326
Ala Leu Val Ile Asn Ser Ile Ile Asp Asn His Tyr Phe His Pro Ile
30 35 40 45
tgt gaa aca gaa tac cgt tat ttc ttt ttt ttg aga gag agt ctt ctt 374
Cys Glu Thr Glu Tyr Arg Tyr Phe Phe Phe Leu Arg Glu Ser Leu Leu
50 55 60
ctg tcg ccc agg ctg gag tgt agt ggc gtg atc tca gct cac tgc aac 422
Leu Ser Pro Arg Leu Glu Cys Ser Gly Val Ile Ser Ala His Cys Asn
65 70 75
ctc cac ctc cac ctc ccg ggt tca agc aat tct cgt gcc tca gcc tcc 470
Leu His Leu His Leu Pro Gly Ser Ser Asn Ser Arg Ala Ser Ala Ser
80 85 90
caa cta gct gga gct gca ggc gca tac cac cat gcc cag cta att ttt 518
Gln Leu Ala Gly Ala Ala Gly Ala Tyr His His Ala Gln Leu Ile Phe
95 100 105
gta tta ttt gta gag atg ggg ttt tgc cac att gcc cag gct ggt ctt 566
Val Leu Phe Val Glu Met Gly Phe Cys His Ile Ala Gln Ala Gly Leu
110 115 120 125
gaa ctc ctg tcc tca ggt tat cca cct ccc aaa gtg ctg ggg tta cag 614
Glu Leu Leu Ser Ser Gly Tyr Pro Pro Pro Lys Val Leu Gly Leu Gln
130 135 140
gca tgagccactg cgggatctca ctcggtcacc caggctggaa tgcagtggag 667
Ala
tgatcatggc tcgctgtagc cttgacctgg gctcaagcga tcctcctgcc tcagcctccc 727
aggctggtct cgaactcctg acctcaggtg atctgcccac cttggcctcc ctaagtgctg 787
gggttacagg caagagccac cgcgcccagc cggaaattcc attttagact ggaagccaca 847
gtataaggaa aacagctcct tggagtgcat tcagagtatg actccatggc caggacaggg 907
aggggctcta acataaaaag aactaggggg ttcggagacg ttcctaatct tggggtagca 967
gggaaagacg gcagcaccac tggacagcag gagcaagagg aataatttca ggaatctggg 1027
acgcgaaaag ataaggggga agggtcatgg gggcatttgt gggttctgtc cttgtagttc 1087
tcaagagccg accagaaaga aaggccaggg gacggagcca ggctttttct gagagacccc 1147
tgtagacccc agccaagcat agaggctggc gagaggaaac ttttttgttt ttgcttctga 1207
gacagtcttg ctctgttgcc caggctggag tgcagtggca caatctcagc tcactgcaac 1267
ctccccgtcc tgggttcaag tgattcccct gcctcagcct cccaaatagc tgggactatg 1327
ggcatatggc tccccatcct gggttcaagc gattctcctg ccacagcctc ccgagtagct 1387
gggactacgg gcatatggct ccccatcctg ggttcaagcg attctcctgc ctcagcctcc 1447
cgagtagctg ggactacagg catatggcac cacgcatggc taattttctt atttttagta 1507
gagataactc ctgggctcaa gcgatctgcc cacctcggcc tcccaaagtg ctgagattac 1567
aggcacatgc caccacaccc agctaattat tgtgttttta gtagagacgg ggttttgcca 1627
tgtttgccca ggctgctctt gaactcctgg gctcaaacga tccacccacc tctgcctccc 1687
aaagttctgg ggttacaggc atcagccacc atgcccagcc aggaagctta ttcccagtgg 1747
tctggctctc cagagttgcc acgctgaaag atgcttgctc tggagagagt gagctccctg 1807
tcaccagagc tatgcaagca gattcaggcc agccctccca gagagcatga gatggggaat 1867
cacgcacaga gtggaccgaa ggagggattg aacaagaagg ctcaaagggt cccttttgac 1927
cctgaagtct aggatttcgt gaagctacag gtgaacccat tggcatgaga agcatccagg 1987
gaggaaagat gcaagccctt ggaatatcga gagaatattt ccagcaggaa aagaagtgga 2047
aggttaaagg aaagccagag aaggggacgt tgccctgggc catcaactaa gagaaaagct 2107
gcccagagcc aggcatggtg gcggcggtgc ctatagtacc ggcagttgga gaggccgagg 2167
caggagcatc acttgagccc atgagtttga gaccagcctg ggcaacatag tgagactttt 2227
ttctctacaa aaaagtttaa aaaaaaaaaa aaaaaa 2263
<210>12
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<212>PRT
<213>智人(Homo sapiens)
<400>12
Met Leu Gly Leu Val Val Asp Thr Arg Arg Thr Ile Arg Ser Lys Met
1 5 10 15
Arg Leu Val Ala Glu Ser Thr Val Ser Ser Glu Glu Leu Ala Leu Val
20 25 30
Ile Asn Ser Ile Ile Asp Asn His Tyr Phe His Pro Ile Cys Glu Thr
35 40 45
Glu Tyr Arg Tyr Phe Phe Phe Leu Arg Glu Ser Leu Leu Leu Ser Pro
50 55 60
Arg Leu Glu Cys Ser Gly Val Ile Ser Ala His Cys Asn Leu His Leu
65 70 75 80
His Leu Pro Gly Ser Ser Asn Ser Arg Ala Ser Ala Ser Gln Leu Ala
85 90 95
Gly Ala Ala Gly Ala Tyr His His Ala Gln Leu Ile Phe Val Leu Phe
100 105 110
Val Glu Met Gly Phe Cys His Ile Ala Gln Ala Gly Leu Glu Leu Leu
115 120 125
Ser Ser Gly Tyr Pro Pro Pro Lys Val Leu Gly Leu Gln Ala
130 135 140
<210>13
<211>2283
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<400>13
ggatcaatca ccccagccaa cactgtaact cccttcttag cctgttgact taaaggtagg 60
aggagcccaa agtgtctagg tggcaatctc agcttccggt ttaatggaat cattcttgtg 120
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gctgttggga ataccatgat ggtgggtaag gcatttcatg agtccacgga tggtagtctt 600
ggcagaagca ttgcatgcag gataggcaaa cccatatccc aagtaagtgt ctattccagt 660
gaggacaaag ctttgacttt tccatgatgg gagaggtcca atataatcaa cctgccacca 720
ggtagctggc tgattacccc gaggaatggt gccatattga ggactcagtg ttggtgtctg 780
ctgctggcaa atttggcact cagcagtggc tgtagccagg tcagccttgg tgagtggaag 840
tccatattgc tgaacccatg tgtaacctcc atccctgcca cgatggccac tttgttcgtg 900
ggcccattgg gcgatcacag gggtggctgg ggaaggaggc tgagtggtgt ccatagatcg 960
ggtcatccta tccacttgat tattaaaatc ctcctctgct gaggtcacct gttggtgggc 1020
acctacatgg aatacaaaag tattcacagt ttttgaccac gcagaagagg ttcatccaca 1080
tacctcttcc ccaactttgt cacaaatttt ccagtcatgc ttcttccaag tccctgacca 1140
tccagccaaa ccactggcca cagccaatga atcagtatat aatcacatat ctggccattt 1200
ctccttccat gcaaagtgca caactaggtg cactgctcaa agttctgctt actgggaaga 1260
ttcctcttca ctgctgtcct tcaggggtgt cctagaaagg ggggctgtag tgctccagtt 1320
gtccactttt gtggggaaaa gaaagagaga tcagactgtt actgtgtcta agtagaaagg 1380
gaagacataa gacactccat tttgaaaaag acctgtactt taaataattg ctttgctgag 1440
atgttgttaa tttgtagctt tgccccagcc actttgaccc aaccactttg acacaacctg 1500
gagctcacaa aaacatgtgt tgtatgaaat caaggtttaa gggatctagg actgtgcagg 1560
acgtgccttg ttaacaaaat gtttacaagc agtatacttg gtaaaagtca tcgccattct 1620
ctagtctcaa taaaccaggg gcacaatgca ctgtggaaag ccacagggac ctccaccctt 1680
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gattagaaag acctgactgt cccccagccc gacacccata aagggtctgt gctgaggtgg 1800
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cagtcatagt accttccctt gaacttaatt atgacataga ttctattgct cacgtttgtt 2100
gttgaccttt ccccttatta tcaccctgcc ctcctactac attccttttt gctgaaataa 2160
tgaagataat aatcaataaa aactgaggga acccagagac tggtgtcggt gcaggtcctt 2220
ggtatgctga gcgctggtcc cctgggccca ctgttgtttc tctataaaaa aaaaaaaaaa 2280
aaa 2283
<210>14
<211>2283
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<220>
<221>CDS
<222>(445)..(684)
<400>14
ggatcaatca ccccagccaa cactgtaact cccttcttag cctgttgact taaaggtagg 60
aggagcccaa agtgtctagg tggcaatctc agcttccggt ttaatggaat cattcttgtg 120
tctcctggtg gcagtgttcc tccccctgga actaagacct ccaagccagc agaatgtaat 180
gtcatgggaa caggaagaaa aattttgctt gtggaacact atgggtgatg gtgagttgtg 240
ccacttctac ttccatccct tgattcctgg acccgtgaat cctggctatg ggagaaacac 300
tatcatatat tggatgctga tttagagcat acatggcttt ctagagaact ttgccccagg 360
cctgcaaagt attgtcacct agttggcatt gtaattgtga cttcaaaagg ccattccacc 420
attctatcaa tccagctgct tcag atg atg ggg aat atg gta aga cca gta 471
Met Met Gly Asn Met Val Arg Pro Val
1 5
aat tcc atg ggc acg aga cca ctg cca cac tgc ttt tgc cat aaa gtg 519
Asn Ser Met Gly Thr Arg Pro Leu Pro His Cys Phe Cys His Lys Val
10 15 20 25
aat gcg ttg gtc aga ggc aat gct gtt ggg aat acc atg atg gtg ggt 567
Asn Ala Leu Val Arg Gly Asn Ala Val Gly Asn Thr Met Met Val Gly
30 35 40
aag gca ttt cat gag tcc acg gat ggt agt ctt ggc aga agc att gca 615
Lys Ala Phe His Glu Ser Thr Asp Gly Ser Leu Gly Arg Ser Ile Ala
45 50 55
tgc agg ata ggc aaa ccc ata tcc caa gta agt gtc tat tcc agt gag 663
Cys Arg Ile Gly Lys Pro Ile Ser Gln Val Ser Val Tyr Ser Ser Glu
60 65 70
gac aaa gct ttg act ttt cca tgatgggaga ggtccaatat aatcaacctg 714
Asp Lys Ala Leu Thr Phe Pro
75 80
ccaccaggta gctggctgat taccccgagg aatggtgcca tattgaggac tcagtgttgg 774
tgtctgctgc tggcaaattt ggcactcagc agtggctgta gccaggtcag ccttggtgag 834
tggaagtcca tattgctgaa cccatgtgta acctccatcc ctgccacgat ggccactttg 894
ttcgtgggcc cattgggcga tcacaggggt ggctggggaa ggaggctgag tggtgtccat 954
agatcgggtc atcctatcca cttgattatt aaaatcctcc tctgctgagg tcacctgttg 1014
gtgggcacct acatggaata caaaagtatt cacagttttt gaccacgcag aagaggttca 1074
tccacatacc tcttccccaa ctttgtcaca aattttccag tcatgcttct tccaagtccc 1134
tgaccatcca gccaaaccac tggccacagc caatgaatca gtatataatc acatatctgg 1194
ccatttctcc ttccatgcaa agtgcacaac taggtgcact gctcaaagtt ctgcttactg 1254
ggaagattcc tcttcactgc tgtccttcag gggtgtccta gaaagggggg ctgtagtgct 1314
ccagttgtcc acttttgtgg ggaaaagaaa gagagatcag actgttactg tgtctaagta 1374
gaaagggaag acataagaca ctccattttg aaaaagacct gtactttaaa taattgcttt 1434
gctgagatgt tgttaatttg tagctttgcc ccagccactt tgacccaacc actttgacac 1494
aacctggagc tcacaaaaac atgtgttgta tgaaatcaag gtttaaggga tctaggactg 1554
tgcaggacgt gccttgttaa caaaatgttt acaagcagta tacttggtaa aagtcatcgc 1614
cattctctag tctcaataaa ccaggggcac aatgcactgt ggaaagccac agggacctcc 1674
acccttgaaa gcggggtatt gtccaaggtt tctccccatg tgatagtcta aaatatggcc 1734
tcacaggatt agaaagacct gactgtcccc cagcccgaca cccataaagg gtctgtgctg 1794
aggtggatta gtaaaagagg aaagcctctt gcagttgaga tagcggaaag ccagtctcct 1854
gcctgcccct gggaactgaa tgtctcagta taaaacccag ttgtacattt gttcaattct 1914
gagatgaaag aaaaactgcc ctgtggtgag aggtgagaca tgtttgcagc aatgctgctt 1974
tgttattctt tactccactg agatgtttgg gtggagagaa acataaatct ggcttacgtg 2034
cacgtccagt catagtacct tcccttgaac ttaattatga catagattct attgctcacg 2094
tttgttgttg acctttcccc ttattatcac cctgccctcc tactacattc ctttttgctg 2154
aaataatgaa gataataatc aataaaaact gagggaaccc agagactggt gtcggtgcag 2214
gtccttggta tgctgagcgc tggtcccctg ggcccactgt tgtttctcta taaaaaaaaa 2274
aaaaaaaaa 2283
<210>15
<211>80
<212>PRT
<213>智人(Homo sapiens)
<400>15
Met Met Gly Asn Met Val Arg Pro Val Asn Ser Met Gly Thr Arg Pro
1 5 10 15
Leu Pro His Cys Phe Cys His Lys Val Asn Ala Leu Val Arg Gly Asa
20 25 30
Ala Val Gly Asn Thr Met Met Val Gly Lys Ala Phe His Glu Ser Thr
35 40 45
Asp Gly Ser Leu Gly Arg Ser Ile Ala Cys Arg Ile Gly Lys Pro Ile
50 55 60
Ser Gln Val Ser Val Tyr Ser Ser Glu Asp Lys Ala Leu Thr Phe Pro
65 70 75 80
<210>16
<211>1073
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<400>16
ggggcctggc ctggcctggt gatgccacta tttccttaag aggagagtgg acattccgga 60
ttattgtcgg gggagtctca tttctgctgc tgtaacaaaa taccacagac tgggtcattt 120
agaaaccata gaaactgatt tcgtactgtt ctagaggctg ggaagtccca gatcaaggtg 180
ccagcaggtt tggtgtcgtg agggccactc tctgcttcca agatggtccc tccttgctgt 240
gtcctctgga ggggaagact gctgtgtcct cacgctgcag aaggtggaag ggcgagagat 300
ggcaaaccag gcttacaagc cctttgaaaa gggccctcat cccatcctgg agagctctgc 360
cctatcacat tggcgattat gtttcaatat gtaaattttg ggagatgcat tcagaccaca 420
ggaggaaggg aaaagaaaga gcccccaggt tgaaagccag tttaggtttg agtcccagcc 480
tttccccttg ctgtgtgacc tggagtaaat tcctcagcct ctgtgagtct cccattccac 540
cccaggattg ttgtgaaaac acagtaaggc aagcgggtaa gaaagcaccc agcaaggtgt 600
caagtgcccc accaggaggg gtggggtggc aatttccagc attgcttgga accagaatag 660
caacgtcttc tgaggttcca gaatttggac tctgaaccca ttgagaagaa tgaaatcaac 720
tttggcgtca atcagccact gattgccatg tggcctggac gagtcatctc attcaacttc 780
actttcagcc ggacgctgtg actcgggcct gtaaccccag cactttggga agctgaggtg 840
ggtggatcgc ttgagcccag gagttagaga ccagcctggg caacctggcg aaacctcgtc 900
tctacaaaaa aatacaaaaa attagctggg cctggtggcg tgtgcctgta gtcccggcta 960
ctcaggagtc tgaggtggga agatccactg agcccaggag gttgaggctg cactccagcc 1020
tgggcgacag gagtgaaacc ctgtctcaaa aagttaaaaa aaaaaaaaaa aaa 1073
<210>17
<211>1073
<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)
<220>
<221>CDS
<222>(405)..(692)
<400>17
ggggcctggc ctggcctggt gatgccacta tttccttaag aggagagtgg acattccgga 60
ttattgtcgg gggagtctca tttctgctgc tgtaacaaaa taccacagac tgggtcattt 120
agaaaccata gaaactgatt tcgtactgtt ctagaggctg ggaagtccca gatcaaggtg 180
ccagcaggtt tggtgtcgtg agggccactc tctgcttcca agatggtccc tccttgctgt 240
gtcctctgga ggggaagact gctgtgtcct cacgctgcag aaggtggaag ggcgagagat 300
ggcaaaccag gcttacaagc cctttgaaaa gggccctcat cccatcctgg agagctctgc 360
cctatcacat tggcgattat gtttcaatat gtaaattttg ggag atg cat tca gac 416
Met His Ser Asp
1
cac agg agg aag gga aaa gaa aga gcc ccc agg ttg aaa gcc agt tta 464
His Arg Arg Lys Gly Lys Glu Arg Ala Pro Arg Leu Lys Ala Ser Leu
5 10 15 20
ggt ttg agt ccc agc ctt tcc cct tgc tgt gtg acc tgg agt aaa ttc 512
Gly Leu Ser Pro Ser Leu Ser Pro Cys Cys Val Thr Trp Ser Lys Phe
25 30 35
ctc agc ctc tgt gag tct ccc att cca ccc cag gat tgt tgt gaa aac 560
Leu Ser Leu Cys Glu Ser Pro Ile Pro Pro Gln Asp Cys Cys Glu Asn
40 45 50
aca gta agg caa gcg ggt aag aaa gca ccc agc aag gtg tca agt gcc 608
Thr Val Arg Gln Ala Gly Lys Lys Ala Pro Ser Lys Val Ser Ser Ala
55 60 65
cca cca gga ggg gtg ggg tgg caa ttt cca gca ttg ctt gga acc aga 656
Pro Pro Gly Gly Val Gly Trp Gln Phe Pro Ala Leu Leu Gly Thr Arg
70 75 80
ata gca acg tct tct gag gtt cca gaa ttt gga ctc tgaacccatt 702
Ile Ala Thr Ser Ser Glu Val Pro Glu Phe Gly Leu
85 90 95
gagaagaatg aaatcaactt tggcgtcaat cagccactga ttgccatgtg gcctggacga 762
gtcatctcat tcaacttcac tttcagccgg acgctgtgac tcgggcctgt aaccccagca 822
ctttgggaag ctgaggtggg tggatcgctt gagcccagga gttagagacc agcctgggca 882
acctggcgaa acctcgtctc tacaaaaaaa tacaaaaaat tagctgggcc tggtggcgtg 942
tgcctgtagt cccggctact caggagtctg aggtgggaag atccactgag cccaggaggt 1002
tgaggctgca ctccagcctg ggcgacagga gtgaaaccct gtctcaaaaa gttaaaaaaa 1062
aaaaaaaaaa a 1073
<210>18
<211>96
<212>PRT
<213>智人(Homo sapiens)
<400>18
Met His Ser Asp His Arg Arg Lys Gly Lys Glu Arg Ala Pro Arg Leu
1 5 10 15
Lys Ala Ser Leu Gly Leu Ser Pro Ser Leu Ser Pro Cys Cys Val Thr
20 25 30
Trp Ser Lys Phe Leu Ser Leu Cys Glu Ser Pro Ile Pro Pro Gln Asp
35 40 45
Cys Cys Glu Asn Thr Val Arg Gln Ala Gly Lys Lys Ala Pro Ser Lys
50 55 60
Val Ser Ser Ala Pro Pro Gly Gly Val Gly Trp Gln Phe Pro Ala Leu
65 70 75 80
Leu Gly Thr Arg Ile Ala Thr Ser Ser Glu Val Pro Glu Phe Gly Leu
85 90 95
Claims (5)
1.一种分离的多核苷酸,其特征在于,它选自下组:
(a)编码具有促进3T3细胞转化功能的多肽的多核苷酸,其中所述的多肽具有选自下组的氨基酸序列:SEQ ID NO:3、6、9、12、15、18;
(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。
2.如权利要求1所述的多核苷酸,其特征在于,该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列:SEQ ID NO:3、6、9、12、15、18。
3.如权利要求1所述的多核苷酸,其特征在于,该多核苷酸的序列选自下组:
SEQ ID NO:2、5、8、11、14、17的编码区序列或全长序列。
4.一种载体,其特征在于,它含有权利要求1所述的多核苷酸。
5.一种遗传工程化的宿主细胞,其特征在于,它是选自下组的一种宿主细胞:
(a)用权利要求4所述的载体转化或转导的宿主细胞;
(b)用权利要求1所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。
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