CN1169956C - 编码具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白的多核苷酸 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一类新的具有抑癌功能的人蛋白，编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病如癌症等的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。

Description

编码具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白的多核苷酸

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及新的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸，以及此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。

人基因组学研究目前是国际上的热点，除人染色体DNA大规模测序，表达序列测序(EST)的方法外，还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。

癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤，目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此，本领域迫切需要开发研究具有抑癌功能的人蛋白及其激动剂/抑制剂。

本发明的目的是提供一类新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。

本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的具有抑癌功能的蛋白多肽，它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26：或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。

较佳地，该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ IDNO：23、SEQ ID NO：26。

在本发明的第二方面，提供了一种分离的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85％相同性：(a)编码上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26。更佳地，该多核苷酸的序列选自下组：SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQID NO：12、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：27的编码区序列或全长序列。

在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。

在本发明的第四方面，提供了制备具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制备方法，该方法包含：(a)在适合表达具有抑癌功能的蛋白的条件下，培养上述被转化或转导的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。

在本发明的第五方面，提供了与上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中连续的10-800个核苷酸。

在本发明的第六方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。

本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

本发明采用大规模cDNA克隆转染癌细胞，在获得具有抑癌作用的基础上，经测序证明为新的基因，进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明，本发明的具有抑癌功能的蛋白对癌细胞(肝癌细胞)具有抑制克隆形成的作用，其抑制率在50％或50％以上。

如本文所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。

如本文所用，“分离的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有抑癌功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。具有抑癌功能的蛋白多肽的纯度能用氨基酸序列分析。

本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。

本发明还包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。

本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以SP82蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：3所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO：2的蛋白质，但与SEQ ID NO：3所示的编码区序列有差别的核酸序列。以SP192蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：6所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ IDNO：5的蛋白质，但与SEQ ID NO：6所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。

编码成熟多肽的多核苷酸包括：只编码成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。

术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。

本发明还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。

本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50％，较佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中，“严格条件”是指：(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95％以上，更好是97％以上时才发生杂交。并且，可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO：2所示的成熟多肽有相同的生物学功能和活性。

本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。

本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供，更佳地被纯化至均质。

本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如，用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于：1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列，和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。

编码具有抑癌功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得：1)从基因组DNA分离双链DNA序列；2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。

上述提到的方法中，分离基因组DNA最不常用。当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时，DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时，DNA序列的直接化学合成是不可能的，选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录，形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术，试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook，et al.，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory.New York，1989)。还可得到商业供应的cDNA文库，如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时，即使极少的表达产物也能克隆。

可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于)：(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交；(2)标志基因的功能出现或丧失；(3)测定具有抑癌功能的蛋白的转录本的水平；(4)通过免疫学技术或测定生物学活性，来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用，也可多种方法联合应用。

在第(1)种方法中，杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源，其长度至少15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸。此外，探针的长度通常在2kb之内，较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素，荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。

在第(4)种方法中，检测具有抑癌功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法，放射免疫沉淀法，酶联免疫吸附法(ELISA)等。

应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki，et al.Science 1985；230：1350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时，可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法)，用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择，并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。

如上所述得到的本发明的基因，或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS，1977，74：5463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列，测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列，才能拼接成全长的cDNA序列。

本发明也涉及包含本发明的多核苷酸的载体，以及用本发明的载体或具有抑癌功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞，以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。

通过常规的重组DNA技术，可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有抑癌功能的蛋白多肽(Science，1984；224：1431)。一般来说有以下步骤：

(1).用本发明的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体)，或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞；

(2).在合适的培养基中培养的宿主细胞；

(3).从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。

本发明中，具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于：在细菌中表达的基于T7的表达载体(Rosenberg，et al.Gene，1987，56：125)；在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体(Lee and Nathans，J Bio Chem.263：3521，1988)和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之，只要能在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。

本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有抑癌功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等(Sambroook，et al.Molecular Cloning，a Laboratory Manual，coldSpring Harbor Laboratory.New York，1989)。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上，以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有：大肠杆菌的lac或trp启动子；λ噬菌体P_L启动子；真核启动子包括CMV立即早期启动子、HSV胸苷激酶启动子、早期和晚期SV40启动子、反转录病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。

此外，表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因，以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状，如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP)，或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。

包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体，可以用于转化适当的宿主细胞，以使其能够表达蛋白质。

宿主细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高等真核细胞，如哺乳动物细胞。代表性例子有：大肠杆菌，链霉菌属；鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞；真菌细胞如酵母；植物细胞；果蝇S2或Sf9的昆虫细胞；CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。

本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时，如果在载体中插入增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子，通常大约有10到300个碱基对，作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。

本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。

用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时，能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获，用CaCl₂法处理，所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl₂。如果需要，转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物，可选用如下的DNA转染方法：磷酸钙共沉淀法，常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。

获得的转化子可以用常规方法培养，表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞，培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后，用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子，将细胞再培养一段时间。

在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要，可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于：常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。

重组的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于)：直接做为药物治疗具有抑癌功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病，和用于筛选促进或对抗具有抑癌功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如，抗体可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表达的重组具有抑癌功能的人蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。

本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有抑癌功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有抑癌功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能，而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症。例如，能在药物的存在下，将哺乳动物细胞或表达具有抑癌功能的人蛋白的膜制剂与标记的具有抑癌功能的人蛋白一起培养。然后测定药物提高或阻遏此相互作用的能力。

具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有抑癌功能的人蛋白结合并消除其功能，或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的产生，或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。

在筛选作为拮抗剂的化合物时，可以将具有抑癌功能的蛋白加入生物分析测定中，通过测定化合物影响具有抑癌功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法，可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。

本发明的多肽可直接用于疾病治疗，例如，各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。

本发明的多肽，及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术，三瘤技术，人B-细胞杂交瘤技术，EBV-杂交瘤技术等。

可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。

本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒，容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起，可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示，该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外，本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。

药物组合物可以以方便的方式给药，如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有抑癌功能的蛋白以有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素，如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。

具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有抑癌功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有抑癌功能的蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。重组的基因治疗载体(如病毒载体)可设计成表达变异的具有抑癌功能的蛋白，以抑制内源性的具有抑癌功能的蛋白活性。例如，一种变异的具有抑癌功能的蛋白可以是缩短的、缺失了信号传导功能域的具有抑癌功能的蛋白，虽可与下游的底物结合，但缺乏信号传导活性。因此重组的基因治疗载体可用于治疗具有抑癌功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有抑癌功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有抑癌功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook，et al.)。另外重组具有抑癌功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。

抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子，其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得，如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性，可用多种方法对其进行修饰，如增加两侧的序列长度，核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。

多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括：将多聚核苷酸直接注入到体内组织中；或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中，再将细胞移植到体内等。

本发明的多肽还可用作肽谱分析，例如，多肽可用物理的、化学或酶进行特异性切割，并进行一维或二维或三维的凝胶电泳分析。

本发明还提供了针对具有抑癌功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于)：多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。

抗具有抑癌功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中，检测活检标本中的具有抑癌功能的人蛋白。

与具有抑癌功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记，注入体内可跟踪其位置和分布。这种放射性标记的抗体可作为一种非创伤性诊断方法用于肿瘤细胞的定位和判断是否有转移。

本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有抑癌功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以刺激或阻断具有抑癌功能的人蛋白的产生或活性。

抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素，蓖麻蛋白，红豆碱等)共价结合。一种通常的方法是用巯基交联剂如SPDP，攻击抗体的氨基，通过二硫键的交换，将毒素结合于抗体上，这种杂交抗体可用于杀灭具有抑癌功能的人蛋白阳性的细胞。

多克隆抗体的生产可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫动物，如家兔，小鼠，大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏佐剂等。

具有抑癌功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler and Milstein.Nature，1975，256：495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al，PNAS，1985，81：6851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.PatNo.4946778)也可用于生产抗具有抑癌功能的人蛋白的单链抗体。

能与具有抑癌功能的人蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时，必须对具有抑癌功能的人蛋白分子进行标记。

本发明还涉及定量和定位检测具有抑癌功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的，且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有抑癌功能的人蛋白水平，可以用作解释具有抑癌功能的人蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。

具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面，具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有抑癌功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有抑癌功能的蛋白的异常表达。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有抑癌功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法，Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术，相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上，用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有抑癌功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有抑癌功能的蛋白的转录产物。

检测具有抑癌功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有抑癌功能的蛋白相关的疾病。具有抑癌功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外，突变有可能影响蛋白的表达，因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。

本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。该序列会特异性地针对某条人染色体具体位置且并可以与其杂交。目前，需要鉴定染色体上的各基因的具体位点。现在，只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色体位置。根据本发明，为了将这些序列与疾病相关基因相关联，其重要的第一步就是将这些DNA序列定位于染色体上。

简而言之，根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp)，可以将序列定位于染色体上。然后，将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。

体细胞杂合细胞的PCR定位法，是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物，通过类似方法，可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选，从而构建染色体特异的cDNA库。

将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH)，可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述，参见Verma等，Human Chromosomes：a Manual of BasicTechniques，Pergamon Press，New York(1988)。

一旦序列被定位到准确的染色体位置，此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如，V.Mckusick，Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析，确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。

接着，需要测定患病和未患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变，而该突变在任何正常个体中未观察到，则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体，通常涉及首先寻找染色体中结构的变化，如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。根据目前的物理作图和基因定位技术的分辨能力，被精确定位至与疾病有关的染色体区域的cDNA，可以是50至500个潜在致病基因间之一种(假定1兆碱基作图分辨能力和每20kb对应于一个基因)。

本发明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。

一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。

此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。

目前，已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外，还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。

此外，由于本发明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列，因此，与来源于其他物种的同族蛋白相比，预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York：Cold Spring Harbor LaboratoryPress，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1：cDNA基因的获得及对癌细胞克隆形成的抑制作用

SP82，SP192，来自于GIBCO BRL公司购得肝cDNA文库(cat，NO.10422-012)PP79，PP1009，PP1045，PP1195，PP1345，PP1744和PP1757是通过用常规方法构建人胎盘cDNA文库获得的。取3、6、10月龄的胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反转录反应在42℃进行。转化XL 10-Gold感受细胞，获得了1×10⁶cfu/μg cDNA滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆，其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针，杂交筛选cDNA文库，挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen96孔板质粒抽提试剂盒，按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染肝癌细胞系7721。100ng DNA酒精沉淀干燥后，加6μl H₂O溶解，待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液，混匀后，室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液，均分加入3孔生长于96孔板的7721细胞中，37℃放置2小时，每孔再加50μl无血清培液，37℃ 24小时。每孔换100μl全培液，37℃ 24小时，换含G418的全培液100μl，37℃ 24～48小时，边观察，边换G418浓度不等的培液。约2～3次后，直到镜检细胞有克隆形成，计数。发现上述克隆有抑制细胞克隆形成作用，结果如下表所示。

            cDNA克隆转染细胞(7721)克隆形成情况

cDNA克隆名称  CDNA克隆数(三个重复)  空载体克隆数(三个重复)

SP82              17  32  31           16  15  23

SP192             4   3   4            17  12  7

PP79              18  31  15           38  12  40

PP1009            1   1   1            54  45  40

PP1045            2   1   0            32  39  37

PP1195            22  26  4            30  37  41

PP1345            15  13  12           34  31  30

PP1744            4   2   6            10  18  9

PP1757            6   6   2            10  18  9

对cDNA克隆采用双脱氧终止法，在ABI377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后，确定为新基因克隆，进行另一端测序，仍未获得全长cDNA序列，设计引物，再次进行测序，直到获得全长序列(SEQ ID NO：1、4、7、10、13、16、19、22、25)。

实施例2：从胎盘cDNA中PCR获得全长基因：

取3、6、10月龄的胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-SuperscriptII(GIBCO BRL)反转录酶在42℃进行反转录反应，获得胎盘cDNA。利用各个基因的转异引物(如下表所示)，按90℃3分钟1个循环；94℃ 30秒，60℃ 30秒，72℃ 1分钟，共35个循环；72℃ 10分钟，1个循环，进行PCR扩增，获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证，与实施例1测得的序列相符，随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞，以获得重组蛋白。

                       基因特异引物

克隆名称     特异引物1(5′→3′)        特异引物2(5′→3′)

SP82       TCAAAAAGGCACCCCAACCTTGC    GAGGGTTGGGGACTTAGGGCAGG

SP192      TCTGGGATCCTGGCCATGAGGTT    GTGAGTGCCCCAAGGGCTGGTAG

PP79       AGCCACCATGCCAGGCCCTCTTA    GGGTGAGTGTCCAAGGTCAGCGA

PP1009     TGAGATTACCGACGAGCCGCCTT    GACGCCCATCTGGTTTACCGCTC

PP1045     TCAGCCCAGCTCCTCTGCTGACA    GGATTCAGGGGGTGTCTGGGGTC

PP1195     CATCCTGCTCCATGAAGGCCGAC    TGGGCAGCACGCACTCTCTGTTC

PP1345     CCCGGGCACTTGAGCTCCTCATA    GGCAGCACAGGATGGTGTCCACT

PP1744     AGGTGGAGGTGCATCAAGAGCCC    GAGGCCGTTTCTCCTCACAGGCT

PP1757     CTGGGATCATGCTGATGTGGCCC    GCCTGGGTGCTCCTGGAGGTTCT

实施例3：cDNA克隆序列分析

1.SP82

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：1)长度：1918bp

  1  CCCAGAGCAA GCCGATTCTC TACACACTGC CTTCCCTTCC TGTAAGACTC

 51  ATCAAAAAGG CACCCCAACC TTGCATGGAT CTGCTGTTGG TATTCCTTGG

101  GGTGAAGCCA GAAGTCAGGC TTTCCACAGA GAGACGGGAC TACATGGCCA

151  CCTGGGAAGG CTAGGGAGTC AAAGGGCCTG AGGAATGACT ACTTCCCTCC

201  ACAAGGGCAT TCCCTGCCCT GCTCTGCTTC CTGGGGGCTT CAGCAAGCCT

251  TCCTTCTAGA GCTCCTAGAA CCCTCCCATG GTCAACACAA CAGCAGCCCA

301  GACAATGAGA TGCAAGAGGC CTGAGCTCAC AGGCCATTCA GGTCTTCTAG

351  ATGCCTTCTT GAGGCTGCTT GTGGCCACCC ACAGACACTT GTAAGGAGGA

401  GAGAAGTCAG CCTGGCAGAG AGACTCTGAA ATGAGGGATT AGAGGTGTTC

451  AAGGAGCAAG AGCTTCAGCC TGAAGACAAG GGAGCAGTCC CTGAAGACGC

501  TTCTACTGAG AGGTCTGCCA TGGCCTCTCT TGGCCTCCAA CTTGTGGGCT

551  ACATCCTAGG CCTTCTGGGG CTTTTGGGCA CACTGGTTGC CATGCTGCTC

601  CCCAGCTGGA AAACAAGTTC TTATGTCGGT GCCAGCATTG TGACAGCAGT

651  TGGCTTCTCC AAGGGCCTCT GGATGGAATG TGCCACACAC AGCACAGGCA

701  TCACCCAGTG TGACATCTAT AGCACCCTTC TGGGCCTGCC CGCTGACATC

751  CAGGCTGCCC AGGCCATGAT GGTGACATCC AGTGCAATCT CCTCCCTGGC

 801  CTGCATTATC TCTGTGGTGG GCATGAGATG CACAGTCTTC TGCCAGGAAT

 851  CCCGAGCCAA AGACAGAGTG GCGGTAGCAG GTGGAGTCTT TTTCATCCTT

 901  GGAGGCCTCC TGGGATTCAT TCCTGTTGCC TGGAATCTTC ATGGGATCCT

 951  ACGGGACTTC TACTCACCAC TGGTGCCTGA CAGCATGAAA TTTGAGATTG

1001  GAGAGGCTCT TTACTTGGGC ATTATTTCTT CCCTGTTCTC CCTGATAGCT

1051  GGAATCATCC TCTGCTTTTC CTGCTCATCC CAGAGAAATC GCTCCAACTA

1101  CTACGATGCC TACCAAGCCC AACCTCTTGC CACAAGGAGC TCTCCAAGGC

1151  CTGGTCAACC TCCCAAAGTC AAGAGTGAGT TCAATTCCTA CAGCCTGACA

1201  GGGTATGTGT GAAGAACCAG GGGCCAGAGC TGGGGGGTGG CTGGGTCTGT

1251  GAAAAACAGT GGACAGCACC CCGAGGGCCA CAGGTGAGGG ACACTACCAC

1301  TGGATCGTGT CAGAAGGTGC TGCTGAGGAT AGACTGACTT TGGCCATTGG

1351  ATTGAGCAAA GGCAGAAATG GGGGCTAGTG TAACAGCATG CAGGTTGAAT

1401  TGCCAAGGAT GCTCGCCATG CCAGCCTTTC TGTTTTCCTC ACCTTGCTGC

1451  TCCCCTGCCC TAAGTCCCCA ACCCTCAACT TGAAACCCCA TTCCCTTAAG

1501  CCAGGACTCA GAGGATCCCT TTGCCCTCTG GTTTACCTGG GACTCCATCC

1551  CCAAACCCAC TAATCACATC CCACTGACTG ACCCTCTGTG ATCAAAGACC

1601  CTCTCTCTGG CTGAGGTTGG CTCTTAGCTC ATTGCTGGGG ATGGGAAGGA

1651  GAAGCAGTGG CTTTTGTGGG CATTGCTCTA ACCTACTTCT CAAGCTTCCC

1701  TCCAAAGAAA CTGATTGGCC CTGGAACCTC CATCCCACTC TTGTTATGAC

1751  TCCACAGTGT CCAGACTAAT TTGTGCATGA ACTGAAATAA AACCATCCTA

1801  CGGTATCCAG GGAACAGAAA GCAGGATGCA GGATGGGAGG ACAGGAAGGC

1851  AGCCTGGGAC ATTTAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1901  AAAAAAAAAA AAAAAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：2)长度：230个氨基酸

   1  MASLGLQLVG YILGLLGLLG TLVAMLLPSW KTSSYVGASI VTAVGFSKGL

  51  WMECATHSTG ITQCDIYSTL LGLPADIQAA QAMMVTSSAI SSLACIISVV

 101  GMRCTVFCQE SRAKDRVAVA GGVFFILGGL LGFIPVAWNL HGILRDFYSP

 151  LVPDSMKFEI GEALYLGIIS SLFSLIAGII LCFSCSSQRN RSNYYDAYQA

 201  QPLATRSSPR PGQPPKVKSE FNSYSLTGYV

C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：3)

克隆号和蛋白名称：SP82

起始编码子：  520 ATG    终止编码子：1212 TGA

蛋白质分子量：24574.31

   1  CCC AGA GCA AGC CGA TTC TCT ACA CAC TGC CTT CCC TTC CTG TAA GAC     48

  49  TCA TCA AAA AGG CAC CCC AAC CTT GCA TGG ATC TGC TGT TGG TAT TCC     96

  97  TTG GGG TGA AGC CAG AAG TCA GGC TTT CCA CAG AGA GAC GGG ACT ACA    144

 145  TGG CCA CCT GGG AAG GCT AGG GAG TCA AAG GGC CTG AGG AAT GAC TAC    192

 193  TTC CCT CCA CAA GGG CAT TCC CTG CCC TGC TCT GCT TCC TGG GGG CTT    240

 241  CAG CAA GCC TTC CTT CTA GAG CTC CTA GAA CCC TCC CAT GGT CAA CAC    288

 289  AAC AGC AGC CCA GAC AAT GAG ATG CAA GAG GCC TGA GCT CAC AGG CCA    336

 337  TTC AGG TCT TCT AGA TGC CTT CTT GAG GCT GCT TGT GGC CAC CCA CAG    384

 385  ACA CTT GTA AGG AGG AGA GAA GTC AGC CTG GCA GAG AGA CTC TGA AAT    432

 433  GAG GGA TTA GAG GTG TTC AAG GAG CAA GAG CTT CAG CCT GAA GAC AAG    480

 481  GGA GCA GTC CCT GAA GAC GCT TCT ACT GAG AGG TCT GCC ATG GCC TCT    528

   1                                                      Met Ala Ser      3

 529  CTT GGC CTC CAA CTT GTG GGC TAC ATC CTA GGC CTT CTG GGG CTT TTG    576

   4  Leu Gly Leu Gln Leu Val Gly Tyr Ile Leu Gly Leu Leu Gly Leu Leu     19

 577  GGC ACA CTG GTT GCC ATG CTG CTC CCC AGC TGG AAA ACA AGT TCT TAT     624

  20  Gly Thr Leu Val Ala Met Leu Leu Pro Ser Trp Lys Thr Ser Ser Tyr      35

 625  GTC GGT GCC AGC ATT GTG ACA GCA GTT GGC TTC TCC AAG GGC CTC TGG     672

  36  Val Gly Ala Ser Ile Val Thr Ala Val Gly Phe Ser Lys Gly Leu Trp      51

 673  ATG GAA TGT GCC ACA CAC AGC ACA GGC ATC ACC CAG TGT GAC ATC TAT     720

  52  Met Glu Cys Ala Thr His Ser Thr Gly Ile Thr Gln Cys Asp Ile Tyr      67

 721  AGC ACC CTT CTG GGC CTG CCC GCT GAC ATC CAG GCT GCC CAG GCC ATG     768

  68  Ser Thr Leu Leu Gly Leu Pro Ala Asp Ile Gln Ala Ala Gln Ala Met      83

 769  ATG GTG ACA TCC AGT GCA ATC TCC TCC CTG GCC TGC ATT ATC TCT GTG     816

  84  Met Val Thr Ser Ser Ala Ile Ser Ser Leu Ala Cys Ile Ile Ser Val      99

 817  GTG GGC ATG AGA TGC ACA GTC TTC TGC CAG GAA TCC CGA GCC AAA GAC     864

 100  Val Gly Met Arg Cys Thr Val Phe Cys Gln Glu Ser Arg Ala Lys Asp     115

 865  AGA GTG GCG GTA GCA GGT GGA GTC TTT TTC ATC CTT GGA GGC CTC CTG     912

 116  Arg Val Ala Val Ala Gly Gly Val Phe Phe Ile Leu Gly Gly Leu Leu     131

 913  GGA TTC ATT CCT GTT GCC TGG AAT CTT CAT GGG ATC CTA CGG GAC TTC     960

 132  Gly Phe Ile Pro Val Ala Trp Asn Leu His Gly Ile Leu Arg Asp Phe     147

 961  TAC TCA CCA CTG GTG CCT GAC AGC ATG AAA TTT GAG ATT GGA GAG GCT    1008

 148  Tyr Ser Pro Leu Val Pro Asp Ser Met Lys Phe Glu Ile Gly Glu Ala     163

1009  CTT TAC TTG GGC ATT ATT TCT TCC CTG TTC TCC CTG ATA GCT GGA ATC    1056

 164  Leu Tyr Leu Gly Ile Ile Ser Ser Leu Phe Ser Leu Ile Ala Gly Ile     179

1057  ATC CTC TGC TTT TCC TGC TCA TCC CAG AGA AAT CGC TCC AAC TAC TAC    1104

 180  Ile Leu Cys Phe Ser Cys Ser Ser Gln Arg Asn Arg Ser Asn Tyr Tyr     195

1105  GAT GCC TAC CAA GCC CAA CCT CTT GCC ACA AGG AGC TCT CCA AGG CCT    1152

 196  Asp Ala Tyr Gln Ala Gln Pro Leu Ala Thr Arg Ser Ser Pro Arg Pro     211

1153  GGT CAA CCT CCC AAA GTC AAG AGT GAG TTC AAT TCC TAC AGC CTG ACA    1200

 212  Gly Gln Pro Pro Lys Val Lys Ser Glu Phe Asn Ser Tyr Ser Leu Thr     227

1201  GGG TAT GTG TGA AGA ACC AGG GGC CAG AGC TGG GGG GTG GCT GGG TCT    1248

 228  Gly Tyr Val ***                                                     231

1249  GTG AAA AAC AGT GGA CAG CAC CCC GAG GGC CAC AGG TGA GGG ACA CTA    1296

1297  CCA CTG GAT CGT GTC AGA AGG TGC TGC TGA GGA TAG ACT GAC TTT GGC    1344

1345  CAT TGG ATT GAG CAA AGG CAG AAA TGG GGG CTA GTG TAA CAG CAT GCA    1392

1393  GGT TGA ATT GCC AAG GAT GCT CGC CAT GCC AGC CTT TCT GTT TTC CTC    1440

1441  ACC TTG CTG CTC CCC TGC CCT AAG TCC CCA ACC CTC AAC TTG AAA CCC    1488

1489  CAT TCC CTT AAG CCA GGA CTC AGA GGA TCC CTT TGC CCT CTG GTT TAC    1536

1537  CTG GGA CTC CAT CCC CAA ACC CAC TAA TCA CAT CCC ACT GAC TGA CCC    1584

1585  TCT GTG ATC AAA GAC CCT CTC TCT GGC TGA GGT TGG CTC TTA GCT CAT    1632

1633  TGC TGG GGA TGG GAA GGA GAA GCA GTG GCT TTT GTG GGC ATT GCT CTA    1680

1681  ACC TAC TTC TCA AGC TTC CCT CCA AAG AAA CTG ATT GGC CCT GGA ACC    1728

1729  TCC ATC CCA CTC TTG TTA TGA CTC CAC AGT GTC CAG ACT AAT TTG TGC    1776

1777  ATG AAC TGA AAT AAA ACC ATC CTA CGG TAT CCA GGG AAC AGA AAG CAG    1824

1825  GAT GCA GGA TGG GAG GAC AGG AAG GCA GCC TGG GAC ATT TAA AAA AAA    1872

1873  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A      1918

D：Blastp结果

Query＝SP82[基因＝SP82](230个氨基酸)

>SP_R0：O88552 O88552 mus musculus(mouse).claudin-2.11/1998

长度＝230

分值＝326bits(826)，预计值＝1e-88

相同性＝159/203(78％)，相似性＝166/203(81％)

Query：28  PSWKTSSYVGASIVTAVGFSKGLWMECATHSTGITQCDIYSTLLGLPADIQAAQAMMVTX 87

           P+W+TSSYVGASIVTAVGFSKGLWMECATHSTGITQCDIYSTLLGLPADIQAAQAMMVT

Sbjct：28  PNWRTSSYVGASIVTAVGFSKGLWMECATHSTGITQCDIYSTLLGLPADIQAAQAMMVTS 87

Query：88  XXXXXXXXXXXVVGMRCTVFCQESRAKDRXXXXXXXXXXXXXXXXXXPVAWNLHGILRDF 147

                      VVGMRCTVFCQ+SRAKDR                  PVAWNLHGILRDF

Sbjct：88  SAMSSLACIISVVGMRCTVFCQDSRAKDRVAVVGGVFFILGGILGFIPVAWNLHGILRDF 147

Query：148 YSPLVPDSMKFEIGEALYLGIISSLFSLIAGIILCFSCSSQRNRSNYYDAYQAQPLATRS 207

           YSPLVPDSMKFEIGEALYLGIIS+LFSL+AG+ILCFSCS Q NR+NYYD YQAQPLATRS

Sbjct：148 YSPLVPDSMKFEIGEALYLGIISALFSLVAGVILCFSCSPQGNRTNyYDGYQAQPLATRS 207

Query：208 SPRPGQPPKVKSEFNSYSLTGYV 230

           SPR  Q PK KSEFNSYSLTGYV

Sbjct：208 SPRSAQQPKAKSEFNSYSLTGYV 230

E：Blastn结果

Query＝SP82[org＝Homo sapiens](1918个核苷酸)

>GB_RO：AF072128 AF072128 Mus musculus claudin-2 mRNA，complete cds.

              7/1998

长度＝791

分值＝747bits(377)，预计值＝0.0

相同性＝647/737(87％)，相似性＝647/737(87％)

Query：500 cttctactgagaggtctgccatggcctctcttggcctccaacttgtgggctacatcctag 559

           |||||||||||||||||||||||||||| |||||| | ||||| ||||||||||||||||

Sbjct：28  cttctactgagaggtctgccatggcctcccttggcgttcaactggtgggctacatcctag 87

Query：560 gccttctggggcttttgggcacactggttgccatgctgctccccagctggaaaacaagtt 619

           ||||| ||||||| || ||||||    ||||||||||||| |||| ||||  ||| ||||

Sbjct：88  gccttttggggctgttaggcacatccattgccatgctgcttcccaactggcgaacgagtt 147

Query：620 cttatgtcggtgccagcattgtgacagcagttggcttctccaagggcctctggatggaat 679

           | ||||| ||||||||||||||||| || |||||||| |||||||||||||||||||| |

Sbjct：148 cctatgttggtgccagcattgtgacggcggttggcttttccaagggcctctggatggagt 207

Query：680 gtgccacacacagcacaggcatcacccagtgtgacatctatagcacccttctgggcctgc 739

           |||| |||||||||||||||||||||||||| || ||||| || |||||| | || || |

Sbjct：208 gtgcgacacacagcacaggcatcacccagtgcgatatctacagtacccttttaggacttc 267

Query：740 ccgctgacatccaggctgcccaggccatgatggtgacatccagtgcaatctcctccctgg 799

           | ||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||| ||||| ||||

Sbjct：268  ctgctgacatccaggctgcccaggccatgatggtgacgtccagtgcaatgtcctcgctgg 327

Query：800  cctgcattatctctgtggtgggcatgagatgcacagtcttctgccaggaatcccgagcca 859

            | || ||||||||||||||||||||||||||||| || ||||||||||| || ||||| |

Sbjct：328  cttgtattatctctgtggtgggcatgagatgcaccgtgttctgccaggattctcgagcta 387

Query：860  aagacagagtggcggtagcaggtggagtctttttcatccttggaggcctcctgggattca 919

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Sbjct：388  aggacagagtggctgtagtgggtggagtctttttcatccttggtggcatcctgggcttta 447

Query：920  ttcctgttgcctggaatcttcatgggatcctacgggacttctactcaccactggtgcctg 979

            | || ||||| |||||||||||||| ||||| |||||||||||||| || ||||| ||||

Sbjct：448  tcccagttgcttggaatcttcatggcatccttcgggacttctactcgccgctggttcctg 507

Query：980  acagcatgaaatttgagattggagaggctctttacttgggcattatttcttccctgttct 1039

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Sbjct：508  acagcatgaaatttgagattggagaggctctgtacttgggcatcatctcagccctgtttt 567

Query：1040 ccctgatagctggaatcatcctctgcttttcctgctcatcccagagaaatcgctccaact 1099

            |  || |||| ||| ||||||| ||||||||||||||  ||||| | |||||  ||||||

Sbjct：568  ctttggtagccggagtcatcctttgcttttcctgctcgccccagggcaatcgtaccaact 627

Query：1100 actacgatgcctaccaagcccaacctcttgccacaaggagctctccaaggcctggtcaac 1159

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Sbjct：628  actatgatggctaccaggcccagcctcttgccactaggagctctccaagatctgctcaac 687

Query：1160 ctcccaaagtcaagagtgagttcaattcctacagcctgacagggtatgtgtgaagaacca 1219

              ||||||| ||||||||||||||| || ||||||||||| |||||||||||||||||||

Sbjct：688  agcccaaagccaagagtgagttcaactcatacagcctgactgggtatgtgtgaagaacca 747

Query：1220 ggggccagagctggggg 1236

            |||||||||||||||||

Sbjct：748  ggggccagagctggggg 764

2.SP192

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：4)长度：2390bp

  1  TGCTTCATCA TAAGTCGTGC TGCCGGCCAG GTTACTTAAG CACCCTTTTA

 51  ACAAGGAAAC CTTGTGGGAG ATCCAGCTGG CCGACTCGAG TTCAGAAACG

101  GGACCACAGA GGTTACACTC TGGGATCCTG GCCATGAGGT TGGATGCCTC

151  ACCTTACTGA AAGGAGACAC TGGACCTAAA TGGCGCAGCA TGATTTTGTT

201  CCTGCTTGGC TAAATTTCTC AACACCACAG TCAGCTAAGT CACCTACTGC

251  CACCTTCGAA AAACACGGAG AGCACCTACC CAGAGGAGAA GGTAGATTTG

301  GAGTAAGCCG CCGTCGACAT AATTCCTCTG ATGGTTTTTT TAACAATGGT

351  CCCCTACGAA CTGCAGGAGA TTCTTGGCAC CAGCCCTCCC TGTTCCGCCA

401  TGATTCTGTG GACTCTGGTG TCTCTAAGGG AGCATATGCT GGAATCACAG

451  GGAACCCATC TGGTTGGCAT AGCTCTTCCC GAGGTCATGA TGGCATGAGC

501  CAACGTAGTG GAGGTGGCAC AGGGAACCAT CGCCATTGGA ATGGCAGCTT

551  CCACTCCCGG AAAGGGTGTG CTTTTCAGGA AAAGCCACCT ATGGAGATTA

601  GGGAAGAAAA GAAAGAAGAC AAGGTGGAAA AGTTGCAGTT TGAAGAGGAG

651  GACTTTCCTT CCTTGAATCC AGAAGCTGGC AAACAGCATC AGCCATGCAG

701  ACCTATTGGG ACACCTTCTG GAGTATGGGA AAACCCGCCT AGTGCCAAGC

751  AACCCTCCAA GATGCTAGTT ATCAAAAAAG TTTCCAAAGA GGATCCTGCT

801  GCTGCCTTCT CTGCTGCATT CACCTCACCA GGATCTCACC ATGCAAATGG

851  GAACAAATTG TCATCCGTGG TTCCAAGTGT CTATAAGAAC CTGGTTCCTA

 901  AGCCTGTACC ACCTCCTTCC AAGCCTAATG CATGGAAAGC TAACAGGATG

 951  GAGCACAAGT CAGGATCCCT TTCCTCTAGC CGGGAGTCTG CTTTTACCAG

1001  TCCAATCTCT GTTACCAAAC CAGTGGTACT GGCTAGTGGT GCAGCTCTGA

1051  GTTCTCCCAA AGAGAGTCCC TCCAGCACCA CCCCTCCAAT TGAGATCAGC

1101  TCCTCTCGTC TGACCAAGTT GACCCGCCGA ACCACCGACA GGAAGAGTGA

1151  GTTCCTGAAA ACTCTGAAGG ATGACCGGAA TGGAGACTTC TCAGAGAATA

1201  GAGACTGTGA CAAGCTGGAA GATTTGGAGG ACAACAGCAC ACCTGAACCA

1251  AAGGAAAATG GGGAGGAAGG CTGTCATCAA AATGGTCTTG CCCTCCCTGT

1301  AGTGGAAGAA GGGGAGGTTC TCTCACACTC TCTAGAAGCA GAGCACAGGT

1351  TATTGAAAGC TATGGGTTGG CAGGAATATC CTGAAAATGA TGAGAATTGC

1401  CTTCCCCTCA CAGAGGATGA GCTCAAGGAG TTCCACATGA AGACAGAGCA

1451  GCTGAGAAGA AATGGCTTTG GAAAGAATGG CTTCTTGCAG AGCCGCAGTT

1501  CCAGCCTGTT CTCCCCTTGG AGAAGCACTT GCAAAGCAGA GTTTGAGGAC

1551  TCAGACACCG AAACCAGTAG CAGTGAAACA TCAGATGACG ATGCCTGGAA

1601  GTAGGCATAT AAATGCTCAC AGTTAAATCT GACCCAGTAA ACTCTGTGTG

1651  TTTAGGGAGT ATACAAAAGA AATCGTTCTT TTCCTTTTCT TATGTTGTTG

1701  AATACTTCAT TCACAAGGGA AATAATCATA TCCCAAAGAG AGAGCAATTG

1751  GCTTGTTTTG CTTTTGTTAT TGTTCTTCCC TGTTATCTGC TTTATAGAGA

1801  GAAGTTTGTG TGGTGGGACA GATTTTTTAA ACACACTCAT ACACACACAC

1851  ACATACACAC CCAGTATATA TGGGGCGATG CACAGGTAGG AGCTGGCAGT

1901  GCAGGGAAGA GGAGACACTG GTCTGCAGCA ACAGCTTCTA CTACCAGCCC

1951  TTGGGGCACT CACCCCTGTG ATCAAGCAAT CATTGTCAAT GACAAAGTGA

2001  CTATTGAAGT TATAATTGTA TTAAATTAAT GCTAATAATT TGGATATTTT

2051  ATTTTATTTT TGGCTGCTCG GGTAACTTTA GCCCTTAACC AAGCATATGT

2101  GGGTTTTTTT GGTTGTTTTT TTGTTTTTGT TTTTTTTTTC TTTTTCCTTT

2151  TTGGGTACAG CTGTAAAATA TTTGGATATA GGAAATGTTG TGTTATTCTT

2201  GCAGCCTTGA TATTCAGGGT GGATTGTAAA ATATAAATTT TTGTGAGATT

2251  TCAAAGATTA AGATTATTTT GATAACATTA TTTACAGATT TAAAAGATGT

2301  GGTTATCACA AGTCTCGAGG GGGAAACTAC TGCATAAAAT AACTAACTTG

2351  GAATAAATAT TTTGCATCAG TTAAAAAAAA AAAAAAAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：5)长度：474个氨基酸

   1  MAQHDFVPAW LNFSTPQSAK SPTATFEKHG EHLPRGEGRF GVSRRRHNSS

  51  DGFFNNGPLR TAGDSWHQPS LFRHDSVDSG VSKGAYAGIT GNPSGWHSSS

 101  RGHDGMSQRS GGGTGNHRHW NGSFHSRKGC AFQEKPPMEI REEKKEDKVE

 151  KLQFEEEDFP SLNPEAGKQH QPCRPIGTPS GVWENPPSAK QPSKMLVIKK

 201  VSKEDPAAAF SAAFTSPGSH HANGNKLSSV VPSVYKNLVP KPVPPPSKPN

 251  AWKANRMEHK SGSLSSSRES AFTSPISVTK PVVLASGAAL SSPKESPSST

 301  TPPIEISSSR LTKLTRRTTD RKSEFLKTLK DDRNGDFSEN RDCDKLEDLE

 351  DNSTPEPKEN GEEGCHQNGL ALPVVEEGEV LSHSLEAEHR LLKAMGWQEY

 401  PENDENCLPL TEDELKEFHM KTEQLRRNGF GKNGFLQSRS SSLFSPWRST

 451  CKAEFEDSDT ETSSSETSDD DAWK

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：6)

克隆号和蛋白名称：PP192

起始编码子：  180 ATG    终止编码子：1604 TAG

蛋白质分子量：52298.77

   1   TG CTT CAT CAT AAG TCG TGC TGC CGG CCA GGT TAC TTA AGC ACC CTT    47

  48  TTA ACA AGG AAA CCT TGT GGG AGA TCC AGC TGG CCG ACT CGA GTT CAG    95

 96  AAA CGG GAC CAC AGA GGT TAC ACT CTG GGA TCC TGG CCA TGA GGT TGG    143

144  ATG CCT CAC CTT ACT GAA AGG AGA CAC TGG ACC TAA ATG GCG CAG CAT    191

  1                                                  Met Ala Gln His      4

192  GAT TTT GTT CCT GCT TGG CTA AAT TTC TCA ACA CCA CAG TCA GCT AAG    239

  5  Asp Phe Val Pro Ala Trp Leu Asn Phe Ser Thr Pro Gln Ser Ala Lys     20

240  TCA CCT ACT GCC ACC TTC GAA AAA CAC GGA GAG CAC CTA CCC AGA GGA    287

 21  Ser Pro Thr Ala Thr Phe Glu Lys His Gly Glu His Leu Pro Arg Gly     36

288  GAA GGT AGA TTT GGA GTA AGC CGC CGT CGA CAT AAT TCC TCT GAT GGT    335

 37  Glu Gly Arg Phe Gly Val Ser Arg Arg Arg His Asn Ser Ser Asp Gly     52

336  TTT TTT AAC AAT GGT CCC CTA CGA ACT GCA GGA GAT TCT TGG CAC CAG    383

 53  Phe Phe Asn Asn Gly Pro Leu Arg Thr Ala Gly Asp Ser Trp His Gln     68

384  CCC TCC CTG TTC CGC CAT GAT TCT GTG GAC TCT GGT GTC TCT AAG GGA    431

 69  Pro Ser Leu Phe Arg His Asp Ser Val Asp Ser Gly Val Ser Lys Gly     84

432  GCA TAT GCT GGA ATC ACA GGG AAC CCA TCT GGT TGG CAT AGC TCT TCC    479

 85  Ala Tyr Ala Gly Ile Thr Gly Asn Pro Ser Gly Trp His Ser Ser Ser    100

480  CGA GGT CAT GAT GGC ATG AGC CAA CGT AGT GGA GGT GGC ACA GGG AAC    527

101  Arg Gly His Asp Gly Met Ser Gln Arg Ser Gly Gly Gly Thr Gly Asn    116

528  CAT CGC CAT TGG AAT GGC AGC TTC CAC TCC CGG AAA GGG TGT GCT TTT    575

117  His Arg His Trp Asn Gly Ser Phe His Ser Arg Lys Gly Cys Ala Phe    132

576  CAG GAA AAG CCA CCT ATG GAG ATT AGG GAA GAA AAG AAA GAA GAC AAG    623

133  Gln Glu Lys Pro Pro Met Glu Ile Arg Glu Glu Lys Lys Glu Asp Lys    148

624  GTG GAA AAG TTG CAG TTT GAA GAG GAG GAC TTT CCT TCC TTG AAT CCA    671

149  Val Glu Lys Leu Gln Phe Glu Glu Glu Asp Phe Pro Ser Leu Asn Pro    164

672  GAA GCT GGC AAA CAG CAT CAG CCA TGC AGA CCT ATT GGG ACA CCT TCT    719

165  Glu Ala Gly Lys Gln His Gln Pro Cys Arg Pro Ile Gly Thr Pro Ser    180

720  GGA GTA TGG GAA AAC CCG CCT AGT GCC AAG CAA CCC TCC AAG ATG CTA    767

181  Gly Val Trp Glu Asn Pro Pro Ser Ala Lys Gln Pro Ser Lys Met Leu    196

768  GTT ATC AAA AAA GTT TCC AAA GAG GAT CCT GCT GCT GCC TTC TCT GCT    815

197  Val Ile Lys Lys Val Ser Lys Glu Asp Pro Ala Ala Ala Phe Ser Ala    212

816  GCA TTC ACC TCA CCA GGA TCT CAC CAT GCA AAT GGG AAC AAA TTG TCA    863

213  Ala Phe Thr Ser Pro Gly Ser His His Ala Asn Gly Asn Lys Leu Ser    228

864  TCC GTG GTT CCA AGT GTC TAT AAG AAC CTG GTT CCT AAG CCT GTA CCA    911

229  Ser Val Val Pro Ser Val Tyr Lys Asn Leu Val Pro Lys Pro Val Pro    244

912  CCT CCT TCC AAG CCT AAT GCA TGG AAA GCT AAC AGG ATG GAG CAC AAG    959

245  Pro Pro Ser Lys Pro Asn Ala Trp Lys Ala Asn Arg Met Glu His Lys    260

 960  TCA GGA TCC CTT TCC TCT AGC CGG GAG TCT GCT TTT ACC AGT CCA ATC    1007

 261  Ser Gly Ser Leu Ser Ser Ser Arg Glu Ser Ala Phe Thr Ser Pro Ile     276

1008  TCT GTT ACC AAA CCA GTG GTA CTG GCT AGT GGT GCA GCT CTG AGT TCT    1055

 277  Ser Val Thr Lys Pro Val Val Leu Ala Ser Gly Ala Ala Leu Ser Ser     292

1056  CCC AAA GAG AGT CCC TCC AGC ACC ACC CCT CCA ATT GAG ATC AGC TCC    1103

 293  Pro Lys Glu Ser Pro Ser Ser Thr Thr Pro Pro Ile Glu Ile Ser Ser     308

1104  TCT CGT CTG ACC AAG TTG ACC CGC CGA ACC ACC GAC AGG AAG AGT GAG    1151

 309  Ser Arg Leu Thr Lys Leu Thr Arg Arg Thr Thr Asp Arg Lys Ser Glu     324

1152  TTC CTG AAA ACT CTG AAG GAT GAC CGG AAT GGA GAC TTC TCA GAG AAT    1199

 325  Phe Leu Lys Thr Leu Lys Asp Asp Arg Asn Gly Asp Phe Ser Glu Asn     340

1200  AGA GAC TGT GAC AAG CTG GAA GAT TTG GAG GAC AAC AGC ACA CCT GAA    1247

 341  Arg Asp Cys Asp Lys Leu Glu Asp Leu Glu Asp Asn Ser Thr Pro Glu     356

1248  CCA AAG GAA AAT GGG GAG GAA GGC TGT CAT CAA AAT GGT CTT GCC CTC    1295

 357  Pro Lys Glu Asn Gly Glu Glu Gly Cys His Gln Asn Gly Leu Ala Leu     372

1296  CCT GTA GTG GAA GAA GGG GAG GTT CTC TCA CAC TCT CTA GAA GCA GAG    1343

 373  Pro Val Val Glu Glu Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Glu Ala Glu     388

1344  CAC AGG TTA TTG AAA GCT ATG GGT TGG CAG GAA TAT CCT GAA AAT GAT    1391

 389  His Arg Leu Leu Lys Ala Met Gly Trp Gln Glu Tyr Pro Glu Asn Asp     404

1392  GAG AAT TGC CTT CCC CTC ACA GAG GAT GAG CTC AAG GAG TTC CAC ATG    1439

 405  Glu Asn Cys Leu Pro Leu Thr Glu Asp Glu Leu Lys Glu Phe His Met     420

1440  AAG ACA GAG CAG CTG AGA AGA AAT GGC TTT GGA AAG AAT GGC TTC TTG    1487

 421  Lys Thr Glu Gln Leu Arg Arg Asn Gly Phe Gly Lys Asn Gly Phe Leu     436

1488  CAG AGC CGC AGT TCC AGC CTG TTC TCC CCT TGG AGA AGC ACT TGC AAA    1535

 437  Gln Ser Arg Ser Ser Ser Leu Phe Ser Pro Trp Arg Ser Thr Cys Lys     452

1536  GCA GAG TTT GAG GAC TCA GAC ACC GAA ACC AGT AGC AGT GAA ACA TCA    1583

 453  Ala Glu Phe Glu Asp Ser Asp Thr Glu Thr Ser Ser Ser Glu Thr Ser     468

1584  GAT GAC GAT GCC TGG AAG TAG GCA TAT AAA TGC TCA CAG TTA AAT CTG    1631

 469  Asp Asp Asp Ala Trp Lys ***                                         475

1632  ACC CAG TAA ACT CTG TGT GTT TAG GGA GTA TAC AAA AGA AAT CGT TCT    1679

1680  TTT CCT TTT CTT ATG TTG TTG AAT ACT TCA TTC ACA AGG GAA ATA ATC    1727

1728  ATA TCC CAA AGA GAG AGC AAT TGG CTT GTT TTG CTT TTG TTA TTG TTC    1775

1776  TTC CCT GTT ATC TGC TTT ATA GAG AGA AGT TTG TGT GGT GGG ACA GAT    1823

1824  TTT TTA AAC ACA CTC ATA CAC ACA CAC ACA TAC ACA CCC AGT ATA TAT    1871

1872  GGG GCG ATG CAC AGG TAG GAG CTG GCA GTG CAG GGA AGA GGA GAC ACT    1919

1920  GGT CTG CAG CAA CAG CTT CTA CTA CCA GCC CTT GGG GCA CTC ACC CCT    1967

1968  GTG ATC AAG CAA TCA TTG TCA ATG ACA AAG TGA CTA TTG AAG TTA TAA    2015

2016  TTG TAT TAA ATT AAT GCT AAT AAT TTG GAT ATT TTA TTT TAT TTT TGG    2063

2064  CTG CTC GGG TAA CTT TAG CCC TTA ACC AAG CAT ATG TGG GTT TTT TTG    2111

2112  GTT GTT TTT TTG TTT TTG TTT TTT TTT TCT TTT TCC TTT TTG GGT ACA    2159

2160  GCT GTA AAA TAT TTG GAT ATA GGA AAT GTT GTG TTA TTC TTG CAG CCT    2207

2208  TGA TAT TCA GGG TGG ATT GTA AAA TAT AAA TTT TTG TGA GAT TTC AAA    2255

2256  GAT TAA GAT TAT TTT GAT AAC ATT ATT TAC AGA TTT AAA AGA TGT GGT    2303

2304  TAT CAC AAG TCT CGA GGG GGA AAC TAC TGC ATA AAA TAA CTA ACT TGG    2351

2352  AAT AAA TAT TTT GCA TCA GTT AAA AAA AAA AAA AAA AAA                2390

3.PP79

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：7)长度：1626bp

   1  CTGACCTCAA GTGATCCACC CACCTCTACC TCCCAAAGTG CTGGGATTAC

  51  AGGTGTGAGC CACCATGCCA GGCCCTCTTA ACCTCTTCAA GTCTGTTTTC

 101  TCATCTGCAA AACAGAGGTA ATAAGATCAG TATCTTCTTA ATGGAAGCAC

 151  CTGGACTACA TTTTTTTCAT TCATTGTTAT CATAAATGAG GACTAACCTG

 201  TCTCCCGTTG GGAGTTTTGA ACCTAGACCT CATGTCTTCA TGACGTCATC

 251  ACTGCCCCAG GCCCAGCTGT GTCCCTACAC CAGCCCCAGC TGACGCATCT

 301  TCTTTTTCTG CCTGTAGAGA TGGTTACAAT GCCTGGCGTG ATGCATTCTG

 351  GCCTTCGCAG ATCCTGGCGG GGCTGTGCCA ACGCTGTGGC CTCCCTGCCC

 401  CTGAATACCG AGCCGGTGCT GTCAAGGTGG GCAGCAAAGT CTTCCTGACA

 451  CCACCGGAGA CCCTGCCCCC AGGGATCTCT TCACATGTGG ATTGACATCT

 501  TTCCTCAAGA TGTGCCTGCT CCACCCCCAG TTGACATCAA GCCTCGGCAG

 551  CCAATCAGCT ATGAGCTCAG AGTTGTCATC TGGAACACGG AGGATGTGGT

 601  TCTGGATGAC GAGAATCCAC TCACCGGAGA GATGTCGAGT GACATCTATG

 651  TGAAGAGCTG GGTGAAGGGG TTGGAGCATG ACAAGCAGGA GACAGACGTT

 701  CACTTCAACT CCCTGACTGG GGAGGGGAAC TTCAATTGGC GCTTTGTGTT

 751  CCGCTTTGAC TACCTGCCCA CGGAGCGGGA GGTGAGCGTC TGGCGCAGGT

 801  CTGGACCCTT TGCCCTGGAG GAGGCGGAGT TCCGGCAGCC TGCAGTGCTG

 851  GTCCTGCAGG TCTGGGACTA TGACCGCATC TCTGCCAATG ACTTCCTTGG

 901  ATCCCTGGAG TTGCAGCTAC CAGACATGGT GCGTGGGGCC CGGGGCCCCG

 951  AGCTCTGCTC TGTGCAGCTG GCCCGCAATG GGGCCGGGCC GAGGTGCAAT

1001  CTGTTTCGCT GCCGCCGCCT GAGGGGCTGG TGGCCGGTAG TGAAGCTGAA

1051  GGAGGCAGAG GACGTGGAGC GGGAGGCGCA GGAGGCTCAG GCTGGCAAGA

1101  AGAAGCGAAA GCAGAGGAGG AGGAAGGGCC GGCCAGAAGA CCTGGAGTTC

1151  ACAGACATGG GTGGCAATGT GTACATCCTC ACGGGCAAGG TGGAGGCAGA

1201  GTTTGAGCTG CTGACTGTGG AGGAGGCCGA GAAACGGCCA GTGGGGAAGG

1251  GGCGGAAGCA GCCAGAGCCT CTGGAGAAAC CCAGCCGCCC CAAAACTTCC

1301  TTCAACTGGT TTGTGAACCC GCTGAAGACC TTTGTCTTCT TCATCTGGCG

1351  CCGGTACTGG CGCACCCTGG TGCTGCTGCT ACTGGTGCTG CTCACCGTCT

1401  TCCTCCTCCT GGTCTTCTAC ACCATCCCTG GCCAGATCAG CCAGGTCATC

1451  TTCCGTCCCC TCCACAAGTG ACTCTCGCTG ACCTTGGACA CTCACCCAGG

1501  GTGCCAACCC TTCAATGCCT GCTCCTGGAA GTCTTTCTTA CCCATGTGAG

1551  CTACCCCAGA GTCTAGTGCT TCCTCTGAAT AAACCTATCA CAGCCCCTGA

1601  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：8)长度：328个氨基酸

   1  MWIDIFPQDV PAPPPVDIKP RQPISYELRV VIWNTEDVVL DDENPLTGEM

  51  SSDIYVKSWV KGLEHDKQET DVHFNSLTGE GNFNWRFVFR FDYLPTEREV

 101  SVWRRSGPFA LEEAEFRQPA VLVLQVWDYD RISANDFLGS LELQLPDMVR

 151  GARGPELCSV QLARNGAGPR CNLFRCRRLR GWWPVVKLKE AEDVEREAQE

 201  AQAGKKKRKQ RRRKGRPEDL EFTDMGGNVY ILTGKVEAEF ELLTVEEAEK

 251  RPVGKGRKQP EPLEKPSRPK TSFNWFVNPL KTFVFFIWRR YWRTLVLLLL

 301  VLLTVFLLLV FYTIPGQISQ VIFRPLHK

C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：9)

克隆号和蛋白名称：PP79

起始编码子：  485 ATG    终止编码子：1471 TAG

蛋白质分子量：38386.24

   1    C TGA CCT CAA GTG ATC CAC CCA CCT CTA CCT CCC AAA GTG CTG GGA      46

  47  TTA CAG GTG TGA GCC ACC ATG CCA GGC CCT CTT AAC CTC TTC AAG TCT      94

  95  GTT TTC TCA TCT GCA AAA CAG AGG TAA TAA GAT CAG TAT CTT CTT AAT     142

 143  GGA AGC ACC TGG ACT ACA TTT TTT TCA TTC ATT GTT ATC ATA AAT GAG     190

 191  GAC TAA CCT GTC TCC CGT TGG GAG TTT TGA ACC TAG ACC TCA TGT CTT     238

 239  CAT GAC GTC ATC ACT GCC CCA GGC CCA GCT GTG TCC CTA CAC CAG CCC     286

 287  CAG CTG ACG CAT CTT CTT TTT CTG CCT GTA GAG ATG GTT ACA ATG CCT     334

 335  GGC GTG ATG CAT TCT GGC CTT CGC AGA TCC TGG CGG GGC TGT GCC AAC     382

 383  GCT GTG GCC TCC CTG CCC CTG AAT ACC GAG CCG GTG CTG TCA AGG TGG     430

 431  GCA GCA AAG TCT TCC TGA CAC CAC CGG AGA CCC TGC CCC CAG GGA TCT     478

 479  CTT CAC ATG TGG ATT GAC ATC TTT CCT CAA GAT GTG CCT GCT CCA CCC     526

   1          Met Trp Ile Asp Ile Phe Pro Gln Asp Val Pro Ala Pro Pro      14

 527  CCA GTT GAC ATC AAG CCT CGG CAG CCA ATC AGC TAT GAG CTC AGA GTT     574

  15  Pro Val Asp Ile Lys Pro Arg Gln Pro Ile Ser Tyr Glu Leu Arg Val      30

 575  GTC ATC TGG AAC ACG GAG GAT GTG GTT CTG GAT GAC GAG AAT CCA CTC     622

  31  Val Ile Trp Asn Thr Glu Asp Val Val Leu Asp Asp Glu Asn Pro Leu      46

 623  ACC GGA GAG ATG TCG AGT GAC ATC TAT GTG AAG AGC TGG GTG AAG GGG     670

  47  Thr Gly Glu Met Ser Ser Asp Ile Tyr Val Lys Ser Trp Val Lys Gly      62

 671  TTG GAG CAT GAC AAG CAG GAG ACA GAC GTT CAC TTC AAC TCC CTG ACT     718

  63  Leu Glu His Asp Lys Gln Glu Thr Asp Val His Phe Asn Ser Leu Thr      78

 719  GGG GAG GGG AAC TTC AAT TGG CGC TTT GTG TTC CGC TTT GAC TAC CTG     766

  79  Gly Glu Gly Asn Phe Asn Trp Arg Phe Val Phe Arg Phe Asp Tyr Leu      94

 767  CCC ACG GAG CGG GAG GTG AGC GTC TGG CGC AGG TCT GGA CCC TTT GCC     814

  95  Pro Thr Glu Arg Glu Val Ser Val Trp Arg Arg Ser Gly Pro Phe Ala     110

 815  CTG GAG GAG GCG GAG TTC CGG CAG CCT GCA GTG CTG GTC CTG CAG GTC     862

 111  Leu Glu Glu Ala Glu Phe Arg Gln Pro Ala Val Leu Val Leu Gln Val     126

 863  TGG GAC TAT GAC CGC ATC TCT GCC AAT GAC TTC CTT GGA TCC CTG GAG     910

 127  Trp Asp Tyr Asp Arg Ile Ser Ala Asn Asp Phe Leu Gly Ser Leu Glu     142

 911  TTG CAG CTA CCA GAC ATG GTG CGT GGG GCC CGG GGC CCC GAG CTC TGC     958

 143  Leu Gln Leu Pro Asp Met Val Arg Gly Ala Arg Gly Pro Glu Leu Cys     158

 959  TCT GTG CAG CTG GCC CGC AAT GGG GCC GGG CCG AGG TGC AAT CTG TTT    1006

 159  Ser Val Gln Leu Ala Arg Asn Gly Ala Gly Pro Arg Cys Asn Leu Phe     174

1007  CGC TGC CGC CGC CTG AGG GGC TGG TGG CCG GTA GTG AAG CTG AAG GAG    1054

 175  Arg Cys Arg Arg Leu Arg Gly Trp Trp Pro Val Val Lys Leu Lys Glu     190

1055  GCA GAG GAC GTG GAG CGG GAG GCG CAG GAG GCT CAG GCT GGC AAG AAG    1102

 191  Ala Glu Asp Val Glu Arg Glu Ala Gln Glu Ala Gln Ala Gly Lys Lys     206

1103  AAG CGA AAG CAG AGG AGG AGG AAG GGC CGG CCA GAA GAC CTG GAG TTC    1150

 207  Lys Arg Lys Gln Arg Arg Arg Lys Gly Arg Pro Glu Asp Leu Glu Phe     222

1151  ACA GAC ATG GGT GGC AAT GTG TAC ATC CTC ACG GGC AAG GTG GAG GCA    1198

 223  Thr Asp Met Gly Gly Asn Val Tyr Ile Leu Thr Gly Lys Val Glu Ala     238

1199  GAG TTT GAG CTG CTG ACT GTG GAG GAG GCC GAG AAA CGG CCA GTG GGG    1246

 239  Glu Phe Glu Leu Leu Thr Val Glu Glu Ala Glu Lys Arg Pro Val Gly     254

1247  AAG GGG CGG AAG CAG CCA GAG CCT CTG GAG AAA CCC AGC CGC CCC AAA    1294

 255  Lys Gly Arg Lys Gln Pro Glu Pro Leu Glu Lys Pro Ser Arg Pro Lys     270

1295  ACT TCC TTC AAC TGG TTT GTG AAC CCG CTG AAG ACC TTT GTC TTC TTC    1342

 271  Thr Ser Phe Asn Trp Phe Val Asn Pro Leu Lys Thr Phe Val Phe Phe     286

1343  ATC TGG CGC CGG TAC TGG CGC ACC CTG GTG CTG CTG CTA CTG GTG CTG    1390

 287  Ile Trp Arg Arg Tyr Trp Arg Thr Leu Val Leu Leu Leu Leu Val Leu     302

1391  CTC ACC GTC TTC CTC CTC CTG GTC TTC TAC ACC ATC CCT GGC CAG ATC    1438

 303  Leu Thr Val Phe Leu Leu Leu Val Phe Tyr Thr Ile Pro Gly Gln Ile     318

1439  AGC CAG GTC ATC TTC CGT CCC CTC CAC AAG TGA CTC TCG CTG ACC TTG    1486

 319  Ser Gln Val Ile Phe Arg Pro Leu His Lys ***                         329

1487  GAC ACT CAC CCA GGG TGC CAA CCC TTC AAT GCC TGC TCC TGG AAG TCT    1534

1535  TTC TTA CCC ATG TGA GCT ACC CCA GAG TCT AGT GCT TCC TCT GAA TAA    1582

1583  ACC TAT CAC AGC CCC TGA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA         1626

 D：Blastp结果

Query＝PP79[基因＝PP79](328个氨基酸)

>SP_HUM：O75923 O75923 homo sapiens(human).dysferlin.5/1999

长度＝2080

分值＝230bits(581)，预计值＝1e-59

相同性＝127/332(38％)，相似性＝177/332(53％)，缺口＝45/332(13％)

Query：1    MWIDIFPQDVPAP-PPVDIKPRQPISYELRVVIWNTEDVVLDDENPLTGEMSSDIYVKSW 59

            MW+D+FP+ +  P PP +I PR+   + LR +IWNT DV+LDD + LTGE  SDIYVK W

Sbjct：1785 MWVDLFPKALGRPGPPFNITPRRARRFFLRCIIWNTRDVILDDLS-LTGEKMSDIYVKGW 1843

Query：60   VKGLEHDKQETDVHFNSLTGEGNFNWRFVFRFDYLPTEREVSVWRRSGPFALEEAEFRQP 119

            + G E  KQ+TDVH+ SL GEGNFNWRF+F FDYLP E+  ++ ++   + L++ E + P

Sbjct：1844 MIGFEEHKQKTDVHYRSLGGEGNFNWRFIFPFDYLPAEQVCTIAKKDAFWRLDKTESKIP 1903

Query：120  AVLVLQVWDYDRISANDFLGSLELQLPDMVRGARGPELCSVQLARNGAGPR--CNLFRCR 177

            A +V Q+WD D+ S +DFLGSL+L L  M + A+  + CS+    +   P    +LF  +

Sbjct：1904 ARVVFQIWDNDKFSFDDFLGSLQLDLNRMPKPAKTAKKCSLDQLDDAFHPEWFVSLFEQK 1963

Query：178  RLRGWWPVVKLKEAEDVXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXPEDLEFTDMGGNVYILTGKVE 237

             ++GWWP V    AE+                                 G   IL GK+E

Sbjct：1964 TVKGWWPCV----AEE---------------------------------GEKKILAGKLE 1986

Query：238  AEFELLTVEEAEKRPVGKGRKQPE---PLEKPSRPKTSFNWFVNPLKTFVFFIWRRY-WR 293

               E++   E E+RP G+GR +P     LE P RP TSF WF +P KT  F +WRR+ W

Sbjct：1987 MTLEIVAESEHEERPAGQGRDEPNMNPKLEDPRRPDTSFLWFTSPYKTMKFILWRRFRWA 2046

Query：294  XXXXXXXXXXXXXXXXXXYTIPGQISQVIFRP 325

                              Y  P   +  + +P

Sbjct：2047 IILFIILFILLLFLAIFIYAFPNYAAMKLVKP 2078

>SP_IN：Q17388 Q17388 caenorhabditis elegans.fer-1.1/1999

长度＝2034

分值＝135bits(336)，预计值＝6e-31

相同性＝94/348(27％)，相似性＝150/348(43％)，缺口＝83/348(23％)

Query：1    MWIDIFPQDVPA-PPPVDIKPRQPISYELRVVIWNTEDVVLDDENPLTGEMSSDIYVKSW 59

            M++DIFP +  A P P +I PR+PI+Y+LR+ + +    +    +    E  SD+YVK++

Sbjct：1676 MFVDIFPMEYGAIPAPFNIAPRKPINYQLRIAVMDVRGAIPVKRS--FAEPVSDLYVKAF 1733

Query：60   VKGLEHDKQETDVHFNSLTGEGNFNWRFVFRFDYLPTEREVSVWRRSGPFALEEAEFRQP 119

            + G+     +TD HF  L G G FNWRF+  FDY P E++V  + ++  F    E    P

Sbjct：1734 INGMTKG-HKTDTHFRVLDGTGEFNWRFLLNFDYNPWEKKVVAYTKNRFFCKPVEELVDP 1792

Query：120  AVLVLQVWDYDRISANDFLGSLELQLPDMVRGARGPE--------------LCSVQLARN 165

             +LV+++WD ++   +  LG +EL L D + G   P                C     R

Sbjct：1793 -ILVIELWDKNKFRKDRLLGDIELDLLDFIEGIGSPSDVGVYSTKKRQRGVKCPKCCTRR 1851

Query：166  GAGPRC-------------------------------------NLFRCRRLRGWWPVVKL 188

            G   +C                                     N+F  R L GWWP++

Sbjct：1852 GCLCKCCIFCFETKCLCGKRKVKKKPFPKPVLFVEPEGYDDTVNIFESRNLYGWWPMLTE 1911

Query：189  KEAEDVXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXPEDL--EFTDMGGNVYILTGKVEAEFELLTVE 246

            +   +                       P++   +  D+G +   + G VE +  LLT +

Sbjct：1912 EYPHE----------------------EPQNAKKKNDDVGKDPKWIMGLVEMDMLLLTKQ 1949

Query：247  EAEKRPVGKGRKQPEP---LEKPSRPKTSFNWFVNPLKTFVFFIWRRY 291

            EA++ P GK R +P     LEKP R   + +W V+ +K  + + W  Y

Sbjct：1950 EADQEPAGKKRSEPNHSPFLEKPDRKSWANSWLVSRIKPCIKYFWHYY 1997

4.PP1009

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：10)长度：1605bp

  1  CAACGGGGTC CTATTGCCCT TTTACGATCC CGACTCCAGC ATCGTCTACC

 51  TGTGTGGCAA GGGCGACAGC AGCATTCGGT ACTTTGAGAT TACCGACGAG

101  CCGCCTTTCG TGCACTACCT GAACACGTTC AGCAGCAAAG AGCCGCAGCG

151  GGGCATGGGT TTCATGCCCA AAAGGGGACT GGATGTCAGC AAGTGTGAGA

201  TCGCCCGGTT CTACAAGCTA CACGAAAGAA AGTGTGAACC TATCATCATG

251  ACTGTGCCCC GCAAGTCAGA CCTCTTCCAG GACGATCTGT ACCCGGATAC

 301  GCCAGGCCCG GAGCCGGCCC TAGAAGCGGA CGAATGGCTA TCCGGCCAGG

 351  ACGCCGAACC CGTGCTCATT TCGCTGAGGG ACGGCTATGT GCCCCCCAAG

 401  CACCGCGAGC TCCGGGTCAC GAAGCGCAAC ATCCTGGACG TGCGCCCGCC

 451  CTCCGGCCCC CGCCGCAGCC AGTCGGCCAG CGACGCCCCC TTGTCGCAGC

 501  ACACCCTGGA GACGCTGCTG GAAGAGATCA AGGCCCTCCG CGAGCGGGTG

 551  CAGGCCCAGG AGCAGCGCAT CACGGCTCTG GAGAACATGC TGTGCGAGCT

 601  GGTGGACGGC ACGGACTAGC CCCGCGCGCC AGGCAGGCGG AGCGGGGCGG

 651  GGCGCACAAG CTCGGCCCCG CCCCGGCTTT TAGTCCCGAA CTCCGGACCC

 701  CGCCTTCTTG GGCTGGGCCC GGGGGCGGGA CTGGGGAGGG AACTCCGCCC

 751  CTCGCGGGAG ACCAGAACTC TTGGAGCTTA GGGGAGACCC ACGTCGCTCC

 801  AGCGGAGGCT GGACTGCGAG CCTCGTCTGG GACTCGGCTG GAGCTGGCCT

 851  AGGGAGGCCT GGGGTAACCT GGGGGGCTCA GCAATGGTGC TGCACGGCGA

 901  GGTGGTGTCC CCCTTTGTCC TCCGCCCAGG GCAGGGAAAG TGCTTAGTAT

 951  TAGCGTGATG CTTGGGGTTA TTGGAGCCTG AGCTTGACCT CAAACGGGTG

1001  GCGATTTGAT GGGTACCCCC AGGCTGGGGA AAATGACAGC GCTTCTCCTA

1051  ATCAGCTCAC TGGATTCCAT CACCCTGAGC GGTAAACCAG ATGGGCGTCA

1101  CCCCAGTTCT GCAGACACAT ACACAACCCG TTTGCTGCAG AGCCGGACCC

1151  AGTGGCTACA CCCACAGCGG TCTGTGGTAG AGAACTCTCT TCCTTCTTTC

1201  CACCGACAGG GGCGAGGGGT GTTTCCTCGC GGCAGCCCCC GCGAAGAAAT

1251  CTCGAGAGAA CTGGCATGAG GAGTTAGGTT CATCACAAAT ACACACACAC

1301  TGCCCCCAAC CCTCTGCCGT TGCCTCTCTC AGAAAAACAA GACGTACTGA

1351  ATGAAATATT TTACTAAGCG TTCAGTCTGT GCCTCCTGCA TGGGTGGGAG

1401  TGAGGGGAAC GAGACCCCCA GCCTCTGCAA ATGCTACCCC CAGGCTCCTG

1451  GGAGACCTGG CGATGCACTC CTGGGCTCAG GGTCCATCAG GCAGCCTCTT

1501  ACCCTAGAGC TCTCTCCACT CTGAGGTTCA GAAGGACCCC AACCCACACC

1551  GTAGGCGTTC CCCCCAAGTA AAGTTAGGTA GCAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1601  AAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：11)长度：172个氨基酸

   1  MAIRPGRRTR AHFAEGRLCA PQAPRAPGHE AQHPGRAPAL RPPPQPVGQR

  51  RPLVAAHPGD AAGRDQGPPR AGAGPGAAHH GSGEHAVRAG GRHGLAPRAR

 101  QAERGGAHKL GPAPAFSPEL RTPPSWAGPG GGTGEGTPPL AGDQNSWSLG

 151  ETHVAPAEAG LRASSGTRLE LA

C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：12)

克隆号和蛋白名称：PP1009

起始编码子：  334 ATG    终止编码子：852 TAG

蛋白质分子量：17387.35

   1  CAA CGG GGT CCT ATT GCC CTT TTA CGA TCC CGA CTC CAG CAT CGT CTA     48

  49  CCT GTG TGG CAA GGG CGA CAG CAG CAT TCG GTA CTT TGA GAT TAC CGA     96

  97  CGA GCC GCC TTT CGT GCA CTA CCT GAA CAC GTT CAG CAG CAA AGA GCC    144

 145  GCA GCG GGG CAT GGG TTT CAT GCC CAA AAG GGG ACT GGA TGT CAG CAA    192

 193  GTG TGA GAT CGC CCG GTT CTA CAA GCT ACA CGA AAG AAA GTG TGA ACC    240

 241  TAT CAT CAT GAC TGT GCC CCG CAA GTC AGA CCT CTT CCA GGA CGA TCT    288

 289  GTA CCC GGA TAC GCC AGG CCC GGA GCC GGC CCT AGA AGC GGA CGA ATG    336

   1                                                              Met      1

 337  GCT ATC CGG CCA GGA CGC CGA ACC CGT GCT CAT TTC GCT GAG GGA CGG    384

   2  Ala Ile Arg Pro Gly Arg Arg Thr Arg Ala His Phe Ala Glu Gly Arg     17

 385  CTA TGT GCC CCC CAA GCA CCG CGA GCT CCG GGT CAC GAA GCG CAA CAT     432

  18  Leu Cys Ala Pro Gln Ala Pro Arg Ala Pro Gly His Glu Ala Gln His      33

 433  CCT GGA CGT GCG CCC GCC CTC CGG CCC CCG CCG CAG CCA GTC GGC CAG     480

  34  Pro Gly Arg Ala Pro Ala Leu Arg Pro Pro Pro Gln Pro Val Gly Gln      49

 481  CGA CGC CCC CTT GTC GCA GCA CAC CCT GGA GAC GCT GCT GGA AGA GAT     528

  50  Arg Arg Pro Leu Val Ala Ala His Pro Gly Asp Ala Ala Gly Arg Asp      65

 529  CAA GGC CCT CCG CGA GCG GGT GCA GGC CCA GGA GCA GCG CAT CAC GGC     576

  66  Gln Gly Pro Pro Arg Ala Gly Ala Gly Pro Gly Ala Ala His His Gly      81

 577  TCT GGA GAA CAT GCT GTG CGA GCT GGT GGA CGG CAC GGA CTA GCC CCG     624

  82  Ser Gly Glu His Ala Val Arg Ala Gly Gly Arg His Gly Leu Ala Pro      97

 625  CGC GCC AGG CAG GCG GAG CGG GGC GGG GCG CAC AAG CTC GGC CCC GCC     672

  98  Arg Ala Arg Gln Ala Glu Arg Gly Gly Ala His Lys Leu Gly Pro Ala     113

 673  CCG GCT TTT AGT CCC GAA CTC CGG ACC CCG CCT TCT TGG GCT GGG CCC     720

 114  Pro Ala Phe Ser Pro Glu Leu Arg Thr Pro Pro Ser Trp Ala Gly Pro     129

 721  GGG GGC GGG ACT GGG GAG GGA ACT CCG CCC CTC GCG GGA GAC CAG AAC     768

 130  Gly Gly Gly Thr Gly Glu Gly Thr Pro Pro Leu Ala Gly Asp Gln Asn     145

 769  TCT TGG AGC TTA GGG GAG ACC CAC GTC GCT CCA GCG GAG GCT GGA CTG     816

 146  Ser Trp Ser Leu Gly Glu Thr His Val Ala Pro Ala Glu Ala Gly Leu     161

 817  CGA GCC TCG TCT GGG ACT CGG CTG GAG CTG GCC TAG GGA GGC CTG GGG     864

 162  Arg Ala Ser Ser Gly Thr Arg Leu Glu Leu Ala ***                     173

 865  TAA CCT GGG GGG CTC AGC AAT GGT GCT GCA CGG CGA GGT GGT GTC CCC     912

 913  CTT TGT CCT CCG CCC AGG GCA GGG AAA GTG CTT AGT ATT AGC GTG ATG     960

 961  CTT GGG GTT ATT GGA GCC TGA GCT TGA CCT CAA ACG GGT GGC GAT TTG    1008

1009  ATG GGT ACC CCC AGG CTG GGG AAA ATG ACA GCG CTT CTC CTA ATC AGC    1056

1057  TCA CTG GAT TCC ATC ACC CTG AGC GGT AAA CCA GAT GGG CGT CAC CCC    1104

1105  AGT TCT GCA GAC ACA TAC ACA ACC CGT TTG CTG CAG AGC CGG ACC CAG    1152

1153  TGG CTA CAC CCA CAG CGG TCT GTG GTA GAG AAC TCT CTT CCT TCT TTC    1200

1201  CAC CGA CAG GGG CGA GGG GTG TTT CCT CGC GGC AGC CCC CGC GAA GAA    1248

1249  ATC TCG AGA GAA CTG GCA TGA GGA GTT AGG TTC ATC ACA AAT ACA CAC    1296

1297  ACA CTG CCC CCA ACC CTC TGC CGT TGC CTC TCT CAG AAA AAC AAG ACG    1344

1345  TAC TGA ATG AAA TAT TTT ACT AAG CGT TCA GTC TGT GCC TCC TGC ATG    1392

1393  GGT GGG AGT GAG GGG AAC GAG ACC CCC AGC CTC TGC AAA TGC TAC CCC    1440

1441  CAG GCT CCT GGG AGA CCT GGC GAT GCA CTC CTG GGC TCA GGG TCC ATC    1488

1489  AGG CAG CCT CTT ACC CTA GAG CTC TCT CCA CTC TGA GGT TCA GAA GGA    1536

1537  CCC CAA CCC ACA CCG TAG GCG TTC CCC CCA AGT AAA GTT AGG TAG CAA    1584

1585  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA                                        1605

5.PP1045

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：13)长度：3108bp

   1  TCTGTGGCCA TTGCCACTCA CCTGGGAGCT CAGGTGTTGG GGGCTGAGCA

  51  GCAGTGCCCC AGCGCGGAGC CTCCACGTGC TGTCCTCGTA CTTCCTTCGT

 101  GGGCGCCGCT GCTCCCCTGG GCGCCTCAGC CCAGCTCCTC TGCTGACAGC

 151  CAGCTGCTGT CTCTGCCTGG CTTTTTTGTT GTTGGTCGTC CTGGAGATCC

 201  AAGTGTCAAA TTACCGTCGC GAGGGGGAGC CCGAGGAAGC CCTGCTTGGG

 251  AACTTGTCCT CCAACTTCAT GTCCCGGTGC CTCACCTCTG CCCTGAGAGC

 301  GCTGCTCAGG GACAAGACAA GCTCTCTCTC TCCTCCTCCT TCCTCCTCCT

 351  CTCCCTCTCC CCGACTCCCA CGCCGTGGGC TGGGCCTGGG TTGGGAGCTG

 401  AAGAAAGAAG TCGGCTCTCT GCCTTCCTGG CCAGGAGGAC CCTGGGGAGG

 451  CTCCACCTGA GCCTGTGGAG GGGAGTCCTG CAGCGCTCTC AGGTCTGGGG

 501  CACCCACCCT GCCCTCAGGA AGGCCACCCC TTCTGTCCCT CTGGCCACTC

 551  CCTGGCTGGT CCCTCCCTCT GGCCTCTCTC AGGAACAACA GTAAACAGTG

 601  GGGAGCTGGT GGCCCTCTCA AGCTGAGCAG GAGGCTTTGC AACCAGTCCC

 651  TGGGGAGGCC CTTGTGCCGC TCAGCATCTG AAGGCGTCTT GGGGGAGAAC

 701  TTGGAATCCT GAGTGACCTG GGAGTGGCCT GCGCGCCCGG CAAGGCGCCT

 751  CATGTTCCTT GTGAGGTGCC GCCATGCCGC CATTGCCAAG TACTTCGGGG

 801  ATGCGCTGCC TGCCTGCGCC AAAGGCTGCG ACCACTGCCA GAACCCCACG

 851  GCCGTGCGGA GGCGGCTGGA GGCCTTGGAG CGCAGCAGCA GCTGGAGCAA

 901  GACCTGCATC GGGCCCTCCC AGGGGAACGG CTTTGACCCC GAGCTGTACG

 951  AGGGAGGCCG CAAGGGCTAC GGGGACTTCA GCAGGTATGA CGAAGGTTCT

1001  GGAGGCAGCG GGGATGAAGG CAGAGATGAG GCCCACAAGC GGGAGTGGAA

1051  CCTCTTCTAT CAGAAGCAGA TGCAGCTGCG CAAGGGCAAA GACCCCAAGA

1101  TAGAAGAATT TGTACCCCCA GATGAGAACT GTCCCCTGAA AGAGGCTTCT

1151  AGCAGGAGGA TCCCCAGGCT GACTGTGAAG GCACGGGAGC ACTGCCTGCG

1201  GCTTCTGGAG GAGGCGCTGA GCAGCAACCG CCAGTCAACA CGTACCGCTG

1251  ATGAAGCTGA CCTCCGGGCC AAGGCCGTGG AGCTGGAACA TGAGACATTC

1301  CGGAACGCCA AGGTGGCCAA CCTCTACAAG GCCAGCGTGC TGAAGAAGGT

1351  GGCCGATATC CACAGAGCCT CCAAGGATGG GCAGCCCTAT GACATGGGAG

1401  GCAGTGCCAA GAGCTGCAGT GCCCAAGCTG AGCCCCCGGA GCCCAATGAG

1451  TATGACATTC CACCAGCCTC CCATGTGTAC TCGCTCAAAC CCAAGCGGGT

1501  GGGAGCTGGT TTCCCCAAAG GCTCCTGCCC GTTCCAGACG GCCACGGAAC

1551  TGATGGAGAC GACTCGGATC AGGGAGCAAG CCCCCCAGCC CGAGCGGGGA

1601  GGCGAGCATG AGCCCCCGAG CCGGCCCTGT GGCCTCCTGG ATGAGGATGG

1651  GAGTGAGCCC CTCCCTGGGC CCAGAGGGGA GGTCCCTGGA GGCAGCGCTC

1701  ACTATGGGGG GCCCTCCCCT GAGAAGAAGG CAAAAAGTTC CTCTGGGGGC

1751  AGCTCCCTTG CCAAGGGCCG GGCTAGCAAG AAACAGCAGC TCCTAGCCAC

1801  AGCGGCCCAC AAGGATTCTC AGAGCATCGC CCGCTTCTTC TGCCGAAGGG

1851  TGGAAAGCCC AGCTCTGCTG GCATCAGCCC CAGAGGCAGA AGGTGCCTGC

1901  CCCTCCTGTG AGGGGGTTCA GGGACCCCCG ATGGCCCCAG AGAAGTACAC

1951  AGGGGAGGAA GATGGAGCCG GGGGACATTC GCCTGCCCCT CCCCAGACTG

2001  AGGAGTGCCT CAGGGAGAGG CCAAGCACCT GCCCGCCCAG AGACCAGGGC

2051  ACCCCTGAAG TCCAGCCCAC CCCTGCAAAG GACACATGGA AGGGCAAGCG

2101  GCCTCGATCC CAGCAGGAGA ACCCAGAGAG CCAGCCTCAG AAGAGGCCAC

2151  GCCCCTCAGC CAAGCCCTCC GTCGTAGCTG AGGTCAAGGG CAGCGTCTCG

2201  GCCAGCGAAC AGGGCACCTT GAATCCCACG GCTCAAGACC CCTTCCAGCT

2251  CTCCGCTCCT GGCGTCTCCT TGAAGGAGGC TGCAAATGTT GTGGTCAAGT

2301  GCCTCACCCC TTTCTACAAG GAGGGCAAGT TTGCTTCCAA GGAGTTGTTT

2351  AAAGGCTTTG CCCGCCACCT CTCACACTTG CTGACTCAGA AGACCTCTCC

2401  TGGAAGGAGC GTGAAAGAAG AGGCCCAGAA CCTCATCAGG CACTTCTTCC

2451  ATGGCCGGGC CCGGTGCGAG AGCGAAGCTG ACTGGCATGG CCTGTGTGGC

2501  CCCCAGAGAT GACCAACTGC TGGCTGGGCA GGGCCCGCGT CCTCCCCCAG

2551  ATTCTAGCAT GGGTCATCCT GGGCCTCACC TGCTGATGCC AGGGCCATCG

2601  TCTTTTCTCA GTCCTTCTCC TTTCCAACCA TACTTGGCTT TGGGGATGAC

2651  CCCAGACACC CCCTGAATCC AGGTCAGAGG TCAGCCCACC TTTCTTTCTG

2701  CTTGCAAAGC CTATAGACCC TTCTCAGAGC GGTCCTCATG GCTGGGTTTT

2751  CTGGGACACA TGTCGAGGAC AGAAGGTGGA GGGTGGTGGA GCTGCTGCTG

2801  GAAGAAGGGG AAGGAAGAGT GGCCCCTCCC CGAGTTCTAA GTCAGGATGA

2851  GGCCCACCTG TCCAAGGTAT CGGAACCTAC CCAGGGGACC CTCAGATCCT

2901  CCACCCACTC CCCCATCCAT TACGATGCCA GCTTCCAGCC TTGCCCAGGT

2951  CAGAGCTGTG GCAGAGGAGA GGCAGCCAGG CCCTGTTCCT GCTCAGCTCC

3001  TGCTCAGGAA GGCCAGGCCT GACAGATGTT TGGGAGAGGA ATAAAGTTGT

3051  GTTGTTGTGG GGCATGCAGG CGTGCACACA GCCCTTTTCA AAAAAAAAAA

3101  AAAAAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：14)长度：586个氨基酸

   1  MFLVRCRHAA IAKYFGDALP ACAKGCDHCQ NPTAVRRRLE ALERSSSWSK

  51  TCIGPSQGNG FDPELYEGGR KGYGDFSRYD EGSGGSGDEG RDEAHKREWN

 101  LFYQKQMQLR KGKDPKIEEF VPPDENCPLK EASSRRIPRL TVKAREHCLR

 151  LLEEALSSNR QSTRTADEAD LRAKAVELEH ETFRNAKVAN LYKASVLKKV

 201  ADIHRASKDG QPYDMGGSAK SCSAQAEPPE PNEYDIPPAS HVYSLKPKRV

 251  GAGFPKGSCP FQTATELMET TRIREQAPQP ERGGEHEPPS RPCGLLDEDG

 301  SEPLPGPRGE VPGGSAHYGG PSPEKKAKSS SGGSSLAKGR ASKKQQLLAT

 351  AAHKDSQSIA RFFCRRVESP ALLASAPEAE GACPSCEGVQ GPPMAPEKYT

 401  GEEDGAGGHS PAPPQTEECL RERPSTCPPR DQGTPEVQPT PAKDTWKGKR

 451  PRSQQENPES QPQKRPRPSA KPSVVAEVKG SVSASEQGTL NPTAQDPFQL

 501  SAPGVSLKEA ANVVVKCLTP FYKEGKFASK ELFKGFARHL SHLLTQKTSP

 551  GRSVKEEAQN LIRHFFHGRA RCESEADWHG LCGPQR

C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：15)

克隆号和蛋白名称：PP1045

起始编码子：  752 ATG  终止编码子：2512 TGA

蛋白质分子量：63841.11

   1    T CTG TGG CCA TTG CCA CTC ACC TGG GAG CTC AGG TGT TGG GGG CTG     46

  47  AGC AGC AGT GCC CCA GCG CGG AGC CTC CAC GTG CTG TCC TCG TAC TTC     94

  95  CTT CGT GGG CGC CGC TGC TCC CCT GGG CGC CTC AGC CCA GCT CCT CTG    142

 143  CTG ACA GCC AGC TGC TGT CTC TGC CTG GCT TTT TTG TTG TTG GTC GTC    190

 191  CTG GAG ATC CAA GTG TCA AAT TAC CGT CGC GAG GGG GAG CCC GAG GAA    238

 239  GCC CTG CTT GGG AAC TTG TCC TCC AAC TTC ATG TCC CGG TGC CTC ACC    286

 287  TCT GCC CTG AGA GCG CTG CTC AGG GAC AAG ACA AGC TCT CTC TCT CCT    334

 335  CCT CCT TCC TCC TCC TCT CCC TCT CCC CGA CTC CCA CGC CGT GGG CTG    382

 383  GGC CTG GGT TGG GAG CTG AAG AAA GAA GTC GGC TCT CTG CCT TCC TGG    430

 431  CCA GGA GGA CCC TGG GGA GGC TCC ACC TGA GCC TGT GGA GGG GAG TCC    478

 479  TGC AGC GCT CTC AGG TCT GGG GCA CCC ACC CTG CCC TCA GGA AGG CCA    526

 527  CCC CTT CTG TCC CTC TGG CCA CTC CCT GGC TGG TCC CTC CCT CTG GCC    574

 575  TCT CTC AGG AAC AAC AGT AAA CAG TGG GGA GCT GGT GGC CCT CTC AAG    622

 623  CTG AGC AGG AGG CTT TGC AAC CAG TCC CTG GGG AGG CCC TTG TGC CGC    670

 671  TCA GCA TCT GAA GGC GTC TTG GGG GAG AAC TTG GAA TCC TGA GTG ACC    718

 719  TGG GAG TGG CCT GCG CGC CCG GCA AGG CGC CTC ATG TTC CTT GTG AGG    766

   1                                              Met Phe Leu Val Arg      5

 767  TGC CGC CAT GCC GCC ATT GCC AAG TAC TTC GGG GAT GCG CTG CCT GCC    814

   6  Cys Arg His Ala Ala Ile Ala Lys Tyr Phe Gly Asp Ala Leu Pro Ala     21

 815  TGC GCC AAA GGC TGC GAC CAC TGC CAG AAC CCC ACG GCC GTG CGG AGG     862

  22  Cys Ala Lys Gly Cys Asp His Cys Gln Asn Pro Thr Ala Val Arg Arg      37

 863  CGG CTG GAG GCC TTG GAG CGC AGC AGC AGC TGG AGC AAG ACC TGC ATC     910

  38  Arg Leu Glu Ala Leu Glu Arg Ser Ser Ser Trp Ser Lys Thr Cys Ile      53

 911  GGG CCC TCC CAG GGG AAC GGC TTT GAC CCC GAG CTG TAC GAG GGA GGC     958

  54  Gly Pro Ser Gln Gly Asn Gly Phe Asp Pro Glu Leu Tyr Glu Gly Gly      69

 959  CGC AAG GGC TAC GGG GAC TTC AGC AGG TAT GAC GAA GGT TCT GGA GGC    1006

  70  Arg Lys Gly Tyr Gly Asp Phe Ser Arg Tyr Asp Glu Gly Ser Gly Gly      85

1007  AGC GGG GAT GAA GGC AGA GAT GAG GCC CAC AAG CGG GAG TGG AAC CTC    1054

  86  Ser Gly Asp Glu Gly Arg Asp Glu Ala His Lys Arg Glu Trp Asn Leu     101

1055  TTC TAT CAG AAG CAG ATG CAG CTG CGC AAG GGC AAA GAC CCC AAG ATA    1102

 102  Phe Tyr Gln Lys Gln Met Gln Leu Arg Lys Gly Lys Asp Pro Lys Ile     117

1103  GAA GAA TTT GTA CCC CCA GAT GAG AAC TGT CCC CTG AAA GAG GCT TCT    1150

 118  Glu Glu Phe Val Pro Pro Asp Glu Asn Cys Pro Leu Lys Glu Ala Ser     133

1151  AGC AGG AGG ATC CCC AGG CTG ACT GTG AAG GCA CGG GAG CAC TGC CTG    1198

 134  Ser Arg Arg Ile Pro Arg Leu Thr Val Lys Ala Arg Glu His Cys Leu     149

1199  CGG CTT CTG GAG GAG GCG CTG AGC AGC AAC CGC CAG TCA ACA CGT ACC    1246

 150  Arg Leu Leu Glu Glu Ala Leu Ser Ser Asn Arg Gln Ser Thr Arg Thr     165

1247  GCT GAT GAA GCT GAC CTC CGG GCC AAG GCC GTG GAG CTG GAA CAT GAG    1294

 166  Ala Asp Glu Ala Asp Leu Arg Ala Lys Ala Val Glu Leu Glu His Glu     181

1295  ACA TTC CGG AAC GCC AAG GTG GCC AAC CTC TAC AAG GCC AGC GTG CTG    1342

 182  Thr Phe Arg Asn Ala Lys Val Ala Asn Leu Tyr Lys Ala Ser Val Leu     197

1343  AAG AAG GTG GCC GAT ATC CAC AGA GCC TCC AAG GAT GGG CAG CCC TAT    1390

 198  Lys Lys Val Ala Asp Ile His Arg Ala Ser Lys Asp Gly Gln Pro Tyr     213

1391  GAC ATG GGA GGC AGT GCC AAG AGC TGC AGT GCC CAA GCT GAG CCC CCG    1438

 214  Asp Met Gly Gly Ser Ala Lys Ser Cys Ser Ala Gln Ala Glu Pro Pro     229

1439  GAG CCC AAT GAG TAT GAC ATT CCA CCA GCC TCC CAT GTG TAC TCG CTC    1486

 230  Glu Pro Asn Glu Tyr Asp Ile Pro Pro Ala Ser His Val Tyr Ser Leu     245

1487  AAA CCC AAG CGG GTG GGA GCT GGT TTC CCC AAA GGC TCC TGC CCG TTC    1534

 246  Lys Pro Lys Arg Val Gly Ala Gly Phe Pro Lys Gly Ser Cys Pro Phe     261

1535  CAG ACG GCC ACG GAA CTG ATG GAG ACG ACT CGG ATC AGG GAG CAA GCC    1582

 262  Gln Thr Ala Thr Glu Leu Met Glu Thr Thr Arg Ile Arg Glu Gln Ala     277

1583  CCC CAG CCC GAG CGG GGA GGC GAG CAT GAG CCC CCG AGC CGG CCC TGT    1630

 278  Pro Gln Pro Glu Arg Gly Gly Glu His Glu Pro Pro Ser Arg Pro Cys     293

1631  GGC CTC CTG GAT GAG GAT GGG AGT GAG CCC CTC CCT GGG CCC AGA GGG    1678

 294  Gly Leu Leu Asp Glu Asp Gly Ser Glu Pro Leu Pro Gly Pro Arg Gly     309

1679  GAG GTC CCT GGA GGC AGC GCT CAC TAT GGG GGG CCC TCC CCT GAG AAG    1726

 310  Glu Val Pro Gly Gly Ser Ala His Tyr Gly Gly Pro Ser Pro Glu Lys     325

1727  AAG GCA AAA AGT TCC TCT GGG GGC AGC TCC CTT GCC AAG GGC CGG GCT    1774

 326  Lys Ala Lys Ser Ser Ser Gly Gly Ser Ser Leu Ala Lys Gly Arg Ala     341

1775  AGC AAG AAA CAG CAG CTC CTA GCC ACA GCG GCC CAC AAG GAT TCT CAG    1822

 342  Ser Lys Lys Gln Gln Leu Leu Ala Thr Ala Ala His Lys Asp Ser Gln     357

1823  AGC ATC GCC CGC TTC TTC TGC CGA AGG GTG GAA AGC CCA GCT CTG CTG    1870

 358  Ser Ile Ala Arg Phe Phe Cys Arg Arg Val Glu Ser Pro Ala Leu Leu     373

1871  GCA TCA GCC CCA GAG GCA GAA GGT GCC TGC CCC TCC TGT GAG GGG GTT    1918

 374  Ala Ser Ala Pro Glu Ala Glu Gly Ala Cys Pro Ser Cys Glu Gly Val     389

1919  CAG GGA CCC CCG ATG GCC CCA GAG AAG TAC ACA GGG GAG GAA GAT GGA    1966

 390  Gln Gly Pro Pro Met Ala Pro Glu Lys Tyr Thr Gly Glu Glu Asp Gly     405

1967  GCC GGG GGA CAT TCG CCT GCC CCT CCC CAG ACT GAG GAG TGC CTC AGG    2014

 406  Ala Gly Gly His Ser Pro Ala Pro Pro Gln Thr Glu Glu Cys Leu Arg     421

2015  GAG AGG CCA AGC ACC TGC CCG CCC AGA GAC CAG GGC ACC CCT GAA GTC    2062

 422  Glu Arg Pro Ser Thr Cys Pro Pro Arg Asp Gln Gly Thr Pro Glu Val     437

2063  CAG CCC ACC CCT GCA AAG GAC ACA TGG AAG GGC AAG CGG CCT CGA TCC    2110

 438  Gln Pro Thr Pro Ala Lys Asp Thr Trp Lys Gly Lys Arg Pro Arg Ser     453

2111  CAG CAG GAG AAC CCA GAG AGC CAG CCT CAG AAG AGG CCA CGC CCC TCA    2158

 454  Gln Gln Glu Asn Pro Glu Ser Gln Pro Gln Lys Arg Pro Arg Pro Ser     469

2159  GCC AAG CCC TCC GTC GTA GCT GAG GTC AAG GGC AGC GTC TCG GCC AGC    2206

 470  Ala Lys Pro Ser Val Val Ala Glu Val Lys Gly Ser Val Ser Ala Ser     485

2207  GAA CAG GGC ACC TTG AAT CCC ACG GCT CAA GAC CCC TTC CAG CTC TCC    2254

 486  Glu Gln Gly Thr Leu Asn Pro Thr Ala Gln Asp Pro Phe Gln Leu Ser     501

2255  GCT CCT GGC GTC TCC TTG AAG GAG GCT GCA AAT GTT GTG GTC AAG TGC    2302

 502  Ala Pro Gly Val Ser Leu Lys Glu Ala Ala Asn Val Val Val Lys Cys     517

2303  CTC ACC CCT TTC TAC AAG GAG GGC AAG TTT GCT TCC AAG GAG TTG TTT    2350

 518  Leu Thr Pro Phe Tyr Lys Glu Gly Lys Phe Ala Ser Lys Glu Leu Phe     533

2351  AAA GGC TTT GCC CGC CAC CTC TCA CAC TTG CTG ACT CAG AAG ACC TCT    2398

 534  Lys Gly Phe Ala Arg His Leu Ser His Leu Leu Thr Gln Lys Thr Ser     549

2399  CCT GGA AGG AGC GTG AAA GAA GAG GCC CAG AAC CTC ATC AGG CAC TTC    2446

 550  Pro Gly Arg Ser Val Lys Glu Glu Ala Gln Asn Leu Ile Arg His Phe     565

2447  TTC CAT GGC CGG GCC CGG TGC GAG AGC GAA GCT GAC TGG CAT GGC CTG    2494

 566  Phe His Gly Arg Ala Arg Cys Glu Ser Glu Ala Asp Trp His Gly Leu     581

2495  TGT GGC CCC CAG AGA TGA CCA ACT GCT GGC TGG GCA GGG CCC GCG TCC    2542

 582  Cys Gly Pro Gln Arg ***                                             587

2543  TCC CCC AGA TTC TAG CAT GGG TCA TCC TGG GCC TCA CCT GCT GAT GCC    2590

2591  AGG GCC ATC GTC TTT TCT CAG TCC TTC TCC TTT CCA ACC ATA CTT GGC    2638

2639  TTT GGG GAT GAC CCC AGA CAC CCC CTG AAT CCA GGT CAG AGG TCA GCC    2686

2687  CAC CTT TCT TTC TGC TTG CAA AGC CTA TAG ACC CTT CTC AGA GCG GTC    2734

2735  CTC ATG GCT GGG TTT TCT GGG ACA CAT GTC GAG GAC AGA AGG TGG AGG    2782

2783  GTG GTG GAG CTG CTG CTG GAA GAA GGG GAA GGA AGA GTG GCC CCT CCC    2830

2831  CGA GTT CTA AGT CAG GAT GAG GCC CAC CTG TCC AAG GTA TCG GAA CCT    2878

2879  ACC CAG GGG ACC CTC AGA TCC TCC ACC CAC TCC CCC ATC CAT TAC GAT    2926

2927  GCC AGC TTC CAG CCT TGC CCA GGT CAG AGC TGT GGC AGA GGA GAG GCA    2974

2975  GCC AGG CCC TGT TCC TGC TCA GCT CCT GCT CAG GAA GGC CAG GCC TGA    3022

3023  CAG ATG TTT GGG AGA GGA ATA AAG TTG TGT TGT TGT GGG GCA TGC AGG    3070

3071  CGT GCA CAC AGC CCT TTT CAA AAA AAA AAA AAA AAA AA                 3108

D：Blastp结果

Query＝PP1045[基因＝PP1045](586个氨基酸)

>SP_IN：Q19046 Q19046 caenorhabditis elegans.e03a3.2 protein.5/1999

长度＝809

分值＝53.1bits(125)，预计值＝6e-06

相同性＝49/219(22％)，相似性＝84/219(37％)，缺口＝11/219(5％)

Query：5   RCRHAAIAKYFGDA-LPACAKGCDHCQNPTAVXXXXXXXXXXXXXXKTCI----GPSQGN 59

           RCRH +IA+F D      C   CD+C++PT                   +      S  +

Sbjct：573 RCRHVSIASFFDDTECRPCKTNCDYCRDPTKTIRNVEAFINSEASTGRSMFRKSASSGES 632

Query：60  GFDPELYEGGRKG---YGDFXXXXXXXXXXXXXXXXXAHKREWNLFYQKQMQLRKGKDP- 115

           GFD  +Y GG++G     +                    KR  ++  Q+  + R+   P

Sbjct：633 GFD-SVYGGGKRGGETEDELLSAASTSKDAMDRMEQEEAKRVRSVISQEFAKRRQAAPPP 691

Query：116 -KIEEFVPPDENCPLKEASSRRIPRLTVKAREHCLRLLEEALSSNRQSTRTADEADLRAK 174

                 V P  +  + +     I  +T++ RE+ +R L  AL SN   +        +

Sbjct：692 RATARRVEPATDVNVIKPEQNVIKNVTLETRENWVRFLHRALDSNWIVSGPPAGVTTKQC 751

Query：175 AVELEHETFRNAKVANLYKASVLKKVADIHRASKDGQPY 213

           A +LE+  +  +K    YK     K+A+I + +    P+

Sbjct：752 AEQLEYGLYSISKNETTYKNKCGHKLAEIKKLTLKNAPF 790

6.PP1195

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：16)长度：2854bp

   1  GGCACCACAG GTTGGCCAGG TGCCCGTCAC ACCAGCCCCA AGTGCCCCAG

  51  GGGTCGTGCA GACCTGTCCA GGTGTGCTGC TGACCAGCAG GGCTGGCCGC

 101  TCATGGAGAC GCATCACCAG CCCGCTCCCA GCATCCTGCT CCATGAAGGC

 151  CGACCGCTCC ATGGCTGGGT CCTCAGGTTC TGAGCTGAAG GGGGAGAAAA

 201  AAACCCTGTG AGAGGCCACA GAGCAGGCCC AGGACCCAGA ACGGGCATCT

 251  CCTGCCATGG CAAGGCCTGC AGGCTCCCAA CGGTTGGGGT GCCCAGCCGC

 301  ATCAGCAGCA CCAGGCCACC CCTGCCAATC GAGGCATGGG CTTGCTTTCT

 351  CTAATATTGT TTCTGGGTGC TAAGGTTACA ACAGCAAACA AGACTGACTC

 401  ATTCCTTTTC TCCACGGGAC TTACTGTCTT ATCATCCCCT GGACTCAAGA

 451  TGAGGGTGCT AGGATGCCCT CCCACACCAC CCCAGCTTAC CCAGGGGCAC

 501  ACCTCAGGGT ATGTGGACCT GCACAAAGGT CCCTTCCTTA GCCCCATGAG

 551  ACACCCCAGG GGACACACAG GTCCACAGAT CCTGCCACAG GCCTGGGAAC

 601  CCATTGGCAG GAGAGTAAGA CAGTGCAGGG GTCCACAAAC ATTTCTTAAG

 651  GGGCCAGAGA GTAAATACTT CAGGCTTTGC AGGCCAGACA TTCTCTGTTG

 701  CAAAACGCAA TTCTGCTATT GTAGCTCAAA GGCGGCTATA GACAACTCAG

 751  AAGTTAATGA GTGTGTTGTG TCCCAATGAA ACTTGATTTA CAAAAGCAGG

 801  AGACTGGCCT GTAGCCTTAG TTTGCCAACC CCTGGATGAG TGGGTTCCCA

 851  GGTCTGCAGT GAGAAGGGGA GAGGCCAGGG CAGTGGCGAG CAGGAGAGAA

 901  GGCAGCTGAG GATGGGAGGC CTACCAGGCC CTGAACAGAG AGTGCGTGCT

 951  GCCCACCTTC ATGAGGAGCC GGTGCTGCAG GTCCAGAGGT GCCTCTTTAA

1001  AGAAAGATGC CAGCTTGTCG TAGACGGTCA CAGCCCTGCA ATGAAATCAT

1051  GGCAGGACTA TTGCATTAGT CCAGCGTGGA GGCTACTTTC TGCTCAAACC

1101  ACTCATTTGG GTCCCGTGCC CAACGTCACC CATCCTCAGC AAAACCACCA

1151  TTATTTCCTT CTGCCTGGTT TCCAGAAAGT TCCCCTAAAG CCCTGAGGAA

1201  TCACCGAATG AAAGGGGCTT TTTACAAACA GGAAACTTAA GTGGAGTGCC

1251  AATACACAAC ATGGATTGCA GCAGGCTCGG TCTAAGATAA AACCAGACGG

1301  TGGACAACAG GCCAGGTAAG ACCCACATGG TCTGCACTCC CTGGTTCTGT

1351  TATTGTGTGG AGGAATGTCT TAGTCTGTTG CTCCTGTGGG TGTAGCTAAA

1401  GCACAAACCA GGAGTCCTCA TCCTTAGAAA GCAGTTAGAC AGACATCTGA

1451  GAACCAATCC CAAACTGCAG CCTTCCACAG AACCTTCTGG AACCTTCTGG

1501  AATGCAACTT ATTACTGCCA GAGGGTCTTT GATGAGAGTC TACTCTCCAC

1551  CATTTGTCTT CAGAGAGAAT ACCCACCTAT TCTCTTTCCG TGGAAAGGTA

1601  AGTTATTGGA GTTTATGCAG TCTGGTATAT TAATTGAGAG CTTTACTTCA

1651  AAGAATGTCA CGTTTATGGT TCAGTCTCAC AGACTGGGTT AAAAAGGCAG

1701  TGTTGACTAT TAAGTTGTAA ATTACTATGA TGATCATTAT TATTGAAGCA

1751  AGCTGTGAGA AATGAGCATT ATCTTACAAT ATCTGCATTT TAGTGAACCT

1801  GAAGGAAGAG TGTATTGCTG GAATTACAGA AGCCTGAGAA CCACAGGGGA

1851  ATTCTCACTG CAGGGTATTC AGGGTCAAAA GCTGATTCTA TTTTGCATGC

1901  TCAATCCTTC GTCAATTTAT TTTTATTTCT TTCTTTATTT TTTGAGACAG

1951  GGTCTTACTC TGTCGCCCAG GCTGGAAGGC CTTGGTGCAA TCTCAGCTCA

2001  CTGCAACCTC GCCTCCCGGG TTCAAGTGAT TCTCCTGCCT CAGCCTCCCA

2051  CGTGACTGGG ATTACAGGTT TTTGCTTGTC TGATGACTGA TGGCTCCACC

2101  CAGACCTGCC AACCACTCCC GCGGCCCCAT CCAGAAGTGG CTCAGCGTGC

2151  ATGAGGACCA TCTCCAACAT CCCTGTGATT GTACCCCCAA CCAACCAGCA

2201  GCAAGAACCT ATTGCCTAGT CACCTCCCCT CTCTTTCCCC AACTATCATT

2251  GAAAAAGTCT GGCTTCCAAA TTTTCCGGGA GACTGATTTG GGTAATAATA

2301  AAACTCCAGT CTTCTGTTCA GCCAGCTCTG CATGAATTAA GCTCTTTCTC

2351  TATTGCAATT TTCCTGTCTT GATAAATTGT CTCTACCTGG GCAGGGGGCA

2401  AAATGAACCC ATAGGGTGGT TACAGTACCT TGCTGGGTCA CTTGATATTC

2451  CTGGAGGGTC ACGGGAAGCG CTATGTGAAT CCCACTTCTG ATATTGTAAG

2501  ATTCTCTCCA GGGCCTGAAA GCTTAAGGGG TTGAGCAACT CCTCCCTTCT

2551  CAGGCCCAGC CCCAGGGCGC AAGGCCGCTT GCATCAGCAG CGTGCGTGAG

2601  CAGATGCGCC AGCAAGATAG CAAAAGCAGG AAGAGAGCCA GCCGGAAGAC

2651  AAGTACCTCT GAAGATGGAG AAAGAGGCCA TCTGGGTACA ACGTTGCAGT

2701  TACGTCAGAC CAGGACACTT CCTGTTTACA GGAGACTATA AAACCTTTGC

2751  CCCATCCTCA CTTGGGGCTG ACGCCGTTTT AGGCCTCAGC CCACCAGCAC

2801  CCAGGCTCTC ATTAAAACAG CATGTTGCTC CAAATAAAAA AAAAAAAAAA

2851  AAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：17)长度：147个氨基酸

   1  MGLLSLILFL GAKVTTANKT DSFLFSTGLT VLSSPGLKMR VLGCPPTPPQ

  51  LTQGHTSGYV DLHKGPFLSP MRHPRGHTGP QILPQAWEPI GRRVRQCRGP

 101  QTFLKGPESK YFRLCRPDIL CCKTQFCYCS SKAAIDNSEV NECVVSQ

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：18)

克隆号和蛋白名称：PP1195

起始编码子：  336 ATG    终止编码子：779 TGA

蛋白质分子量：16162.07

   1   GG CAC CAC AGG TTG GCC AGG TGC CCG TCA CAC CAG CCC CAA GTG CCC      47

  48  CAG GGG TCG TGC AGA CCT GTC CAG GTG TGC TGC TGA CCA GCA GGG CTG      95

  96  GCC GCT CAT GGA GAC GCA TCA CCA GCC CGC TCC CAG CAT CCT GCT CCA     143

 144  TGA AGG CCG ACC GCT CCA TGG CTG GGT CCT CAG GTT CTG AGC TGA AGG     191

 192  GGG AGA AAA AAA CCC TGT GAG AGG CCA CAG AGC AGG CCC AGG ACC CAG     239

 240  AAC GGG CAT CTC CTG CCA TGG CAA GGC CTG CAG GCT CCC AAC GGT TGG     287

 288  GGT GCC CAG CCG CAT CAG CAG CAC CAG GCC ACC CCT GCC AAT CGA GGC     335

 336  ATG GGC TTG CTT TCT CTA ATA TTG TTT CTG GGT GCT AAG GTT ACA ACA     383

   1  Met Gly Leu Leu Ser Leu Ile Leu Phe Leu Gly Ala Lys Val Thr Thr      16

 384  GCA AAC AAG ACT GAC TCA TTC CTT TTC TCC ACG GGA CTT ACT GTC TTA     431

  17  Ala Asn Lys Thr Asp Ser Phe Leu Phe Ser Thr Gly Leu Thr Val Leu      32

 432  TCA TCC CCT GGA CTC AAG ATG AGG GTG CTA GGA TGC CCT CCC ACA CCA     479

  33  Ser Ser Pro Gly Leu Lys Met Arg Val Leu Gly Cys Pro Pro Thr Pro      48

 480  CCC CAG CTT ACC CAG GGG CAC ACC TCA GGG TAT GTG GAC CTG CAC AAA     527

  49  Pro Gln Leu Thr Gln Gly His Thr Ser Gly Tyr Val Asp Leu His Lys      64

 528  GGT CCC TTC CTT AGC CCC ATG AGA CAC CCC AGG GGA CAC ACA GGT CCA     575

  65  Gly Pro Phe Leu Ser Pro Met Arg His Pro Arg Gly His Thr Gly Pro      80

 576  CAG ATC CTG CCA CAG GCC TGG GAA CCC ATT GGC AGG AGA GTA AGA CAG     623

  81  Gln Ile Leu Pro Gln Ala Trp Glu Pro Ile Gly Arg Arg Val Arg Gln      96

 624  TGC AGG GGT CCA CAA ACA TTT CTT AAG GGG CCA GAG AGT AAA TAC TTC     671

  97  Cys Arg Gly Pro Gln Thr Phe Leu Lys Gly Pro Glu Ser Lys Tyr Phe     112

 672  AGG CTT TGC AGG CCA GAC ATT CTC TGT TGC AAA ACG CAA TTC TGC TAT     719

 113  Arg Leu Cys Arg Pro Asp Ile Leu Cys Cys Lys Thr Gln Phe Cys Tyr     128

 720  TGT AGC TCA AAG GCG GCT ATA GAC AAC TCA GAA GTT AAT GAG TGT GTT     767

 129  Cys Ser Ser Lys Ala Ala Ile Asp Asn Ser Glu Val Asn Glu Cys Val     144

 768  GTG TCC CAA TGA AAC TTG ATT TAC AAA AGC AGG AGA CTG GCC TGT AGC     815

 145  Val Ser Gln ***                                                     148

 816  CTT AGT TTG CCA ACC CCT GGA TGA GTG GGT TCC CAG GTC TGC AGT GAG     863

 864  AAG GGG AGA GGC CAG GGC AGT GGC GAG CAG GAG AGA AGG CAG CTG AGG     911

 912  ATG GGA GGC CTA CCA GGC CCT GAA CAG AGA GTG CGT GCT GCC CAC CTT     959

 960  CAT GAG GAG CCG GTG CTG CAG GTC CAG AGG TGC CTC TTT AAA GAA AGA    1007

1008  TGC CAG CTT GTC GTA GAC GGT CAC AGC CCT GCA ATG AAA TCA TGG CAG    1055

1056  GAC TAT TGC ATT AGT CCA GCG TGG AGG CTA CTT TCT GCT CAA ACC ACT    1103

1104  CAT TTG GGT CCC GTG CCC AAC GTC ACC CAT CCT CAG CAA AAC CAC CAT    1151

1152  TAT TTC CTT CTG CCT GGT TTC CAG AAA GTT CCC CTA AAG CCC TGA GGA    1199

1200  ATC ACC GAA TGA AAG GGG CTT TTT ACA AAC AGG AAA CTT AAG TGG AGT    1247

1248  GCC AAT ACA CAA CAT GGA TTG CAG CAG GCT CGG TCT AAG ATA AAA CCA    1295

1296  GAC GGT GGA CAA CAG GCC AGG TAA GAC CCA CAT GGT CTG CAC TCC CTG    1343

1344  GTT CTG TTA TTG TGT GGA GGA ATG TCT TAG TCT GTT GCT CCT GTG GGT    1391

1392  GTA GCT AAA GCA CAA ACC AGG AGT CCT CAT CCT TAG AAA GCA GTT AGA    1439

1440  CAG ACA TCT GAG AAC CAA TCC CAA ACT GCA GCC TTC CAC AGA ACC TTC    1487

1488  TGG AAC CTT CTG GAA TGC AAC TTA TTA CTG CCA GAG GGT CTT TGA TGA    1535

1536  GAG TCT ACT CTC CAC CAT TTG TCT TCA GAG AGA ATA CCC ACC TAT TCT    1583

1584  CTT TCC GTG GAA AGG TAA GTT ATT GGA GTT TAT GCA GTC TGG TAT ATT    1631

1632  AAT TGA GAG CTT TAG TTC AAA GAA TGT CAC GTT TAT GGT TCA GTC TCA    1679

1680  CAG ACT GGG TTA AAA AGG CAG TGT TGA CTA TTA AGT TGT AAA TTA CTA    1727

1728  TGA TGA TCA TTA TTA TTG AAG CAA GCT GTG AGA AAT GAG CAT TAT CTT    1775

1776  ACA ATA TCT GCA TTT TAG TGA ACC TGA AGG AAG AGT GTA TTG CTG GAA    1823

1824  TTA CAG AAG CCT GAG AAC CAC AGG GGA ATT CTC ACT GCA GGG TAT TCA    1871

1872  GGG TCA AAA GCT GAT TCT ATT TTG CAT GCT CAA TCC TTC GTC AAT TTA    1919

1920  TTT TTA TTT CTT TCT TTA TTT TTT GAG ACA GGG TCT TAC TCT GTC GCC    1967

1968  CAG GCT GGA AGG CCT TGG TGC AAT CTC AGC TCA CTG CAA CCT CGC CTC    2015

2016  CCG GGT TCA AGT GAT TCT CCT GCC TCA GCC TCC CAC GTG ACT GGG ATT    2063

2064  ACA GGT TTT TGC TTG TCT GAT GAC TGA TGG CTC CAC CCA GAC CTG CCA    2111

2112  ACC ACT CCC GCG GCC CCA TCC AGA AGT GGC TCA GCG TGC ATG AGG ACC    2159

2160  ATC TCC AAC ATC CCT GTG ATT GTA CCC CCA ACC AAC CAG CAG CAA GAA    2207

2208  CCT ATT GCC TAG TCA CCT CCC CTC TCT TTC CCC AAC TAT CAT TGA AAA    2255

2256  AGT CTG GCT TCC AAA TTT TCC GGG AGA CTG ATT TGG GTA ATA ATA AAA    2303

2304  CTC CAG TCT TCT GTT CAG CCA GCT CTG CAT GAA TTA AGC TCT TTC TCT    2351

2352  ATT GCA ATT TTC CTG TCT TGA TAA ATT GTC TCT ACC TGG GCA GGG GGC    2399

2400  AAA ATG AAC CCA TAG GGT GGT TAC AGT ACC TTG CTG GGT CAC TTG ATA    2447

2448  TTC CTG GAG GGT CAC GGG AAG CGC TAT GTG AAT CCC ACT TCT GAT ATT    2495

2496  GTA AGA TTC TCT CCA GGG CCT GAA AGC TTA AGG GGT TGA GCA ACT CCT    2543

2544  CCC TTC TCA GGC CCA GCC CCA GGG CGC AAG GCC GCT TGC ATC AGC AGC    2591

2592  GTG CGT GAG CAG ATG CGC CAG CAA GAT AGC AAA AGC AGG AAG AGA GCC    2639

2640  AGC CGG AAG ACA AGT ACC TCT GAA GAT GGA GAA AGA GGC CAT CTG GGT    2687

2688  ACA ACG TTG CAG TTA CGT CAG ACC AGG ACA CTT CCT GTT TAC AGG AGA    2735

2736  CTA TAA AAC CTT TGC CCC ATC CTC ACT TGG GGC TGA CGC CGT TTT AGG    2783

2784  CCT CAG CCC ACC AGC ACC CAG GCT CTC ATT AAA ACA GCA TGT TGC TCC    2831

2832  AAA TAA AAA AAA AAA AAA AAA AA                                     2854

D：Blastp结果

Query＝PP1195[基因＝PP1195](147个氨基酸)

>SP_IN：O61603 O61603 drosophila melanogaster(fruit fly).eyelid.

5/1999

长度＝2715

分值＝31.3bits(69)，预计值＝4.5

相同性＝15/38(39％)，相似性＝19/38(49％)

Query：43  GCPPTPPQLTQGHTSGYVDLHKGPFLSPMRHPRGHTGP 80

           G  PTPPQ  QG+ +G   +H G  + P  H     GP

Sbjct：781 GGSPTPPQGPQGYGNGPTGMHPGMPMGPPHHMGPPHGP 818

7.PP1345

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：19)长度：1837bp

   1  AGGAGGAACA CTTCCACTAA AAGAAACATC AAGATTACTA TGAACTATTA

  51  GCTGTGACTG CACCCGGGCA CTTGAGCTCC TCATATCAGG AGACTACTAG

 101  GCAAGAACAG TCACCATTCT TTGAGGGATA ATTAATCCTG ATCATCAGGA

 151  GGAGGTACAG CTGCTGTTAA GCAATGGAGG GAAGGGAGGT ATATCTTTGG

 201  TACTCAGTTG ATTCACGTGG AGACTTCTTG GTATTCCTTT GCCCAATTTT

 251  TTTTTCTTTT TCTTTTTCAG AGGTGGAGTC TCTGTCACCC AGGCTGGAGT

 301  GCAGTGGCAC CATCTCGGCT CACTGCAACC TCTGCCTCCT GGGTTCAAGC

 351  TATTCTCCTG CCTCAGCCTC CCGAGTAACT GGGATTACAG GCATGTGCCA

 401  CCATGCCCAG CTGATTTTTG TATTTTTAGT AAAGATGGAG TTTCGCCATG

 451  TTGGCCAGAC TAGTTTTGAA CTTCTGGCCT CAAGCAGTCC ACCTGCCTCA

 501  GCTTCCCAAA GTGCTGGGAT TACAGGCGTG AGCCACTGCG CCTGGCCCCT

 551  TGCCCAATAT TTATAAAATA ATTATACAAG TGCCCAGACC GTGACCTGAG

 601  CAGGATATGC TGACTTCAGG CTCAGCCCCC TCAGGGCTGA GGGTCTAAAT

 651  CATGCCTCCG TGGAAGTGAC GGAGACCGGA ACACGTGCTG GCTGAGGGTA

 701  AGGAGGATCT AGAATGGATA GTAGAAGAGG GAGATGATGA GTATCAGTTG

 751  TGGCCTCAAG ACCAGTCAGT GATGGAGGTT GTAGTTTGTC CAACTTACTT

 801  TCCTAAGTTT CCCCCAGGAA AGGAGGTCCA CCAGAACTTA AACCAAAAAG

 851  TAGAGCTGAG CAGCACAAAT GTGGGCTGTA GTGGACACCA TCCTGTGCTG

 901  CCCAGACCCC CCAGCCACCA TGCTTCCTGG GCCTCTTCCC ACAGCTACTG

 951  GGAGTGCTCT CAGCCAGCAG CCTTCAGCTG TCAGCCCCCT GGGAATTTTC

1001  CTCAATGGAA GAGTTACCTC ACTGACATAC CCCTTTCCCA GGCAGGTCAG

1051  TTCAAGGTTA TGAAGGCCTG GCCCCACTGC CTCAACTTGA CAACTTGGAA

1101  GGGCCATCTC AGCTTCAAGA CCCTCCCATG AGACTGGCTG AGGTCTTCAT

1151  ACAGCATCGG AGCCCAATTT ATCTCTCTGA GCAATCCTGC TTCCTTTCCT

1201  GCCCCCTTCC CAAGAGCAAT CCCTGATAAA CTTCCCGCAT GCTAATCTCC

1251  ATCTCAGAGT CTACTTTCCA AGGAAGTGGG CCTATAACAT AGCTCTTCCA

1301  GTTTTTGTTA ACAATTCTAG AACAGGGGTC AGCAAACTTT TTTTTTTTTT

1351  CTTTTGAGAC GGAGTCTCAC TCCGTCACCA GGCTGGAGTG CAGTGGCGCG

1401  ATCTTGGCTC ACTGCAACCT CTGCCTCCCG GGTTCAAGCG ATTCTCCTGC

1451  CTCAGCCTCC CGAGTAGCTG GGACTACCAT GCCACCACAC CCAGCTAATT

1501  TTTTTATTTT TAGAGAGATT GGGTTTCACC ATGTTGGCCA GGATGGTCTT

1551  GATCTCTTGA CCTCGTGATC CGCGCTCCTC GGCCTCCCAA AGTGCTGGGA

1601  TTATAGACAT GAATCCCCAC ACCCGGCCAG CAAACTTTTT TAAAGGAACA

1651  GATAGTAAAT ATTTTAAGCT TTGTGAGCCA CATGGTCTCT GTCACAACTA

1701  TTCAGCTCTG CTATTGTAAT ACAAAAGCAG CTGTGGACAG TATGTAAATG

1751  AATGAATGTG GCTGTGTTCC AATAAAACTT TATTTCCCAA AAAAAAAAAA

1801  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：20)长度：130个氨基酸

   1  MEGREVYLWY SVDSRGDFLV FLCPIFFSFS FSEVESLSPR LECSGTISAH

  51  CNLCLLGSSY SPASASRVTG ITGMCHHAQL IFVFLVKMEF RHVGQTSFEL

 101  LASSSPPASA SQSAGITGVS HCAWPLAQYL

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：21)

克隆号和蛋白名称：PP1345

起始编码子：174 ATG    终止编码子：566 TAA

蛋白质分子量：14152.40

   1   AG GAG GAA CAC TTC CAC TAA AAG AAA CAT CAA GAT TAC TAT GAA CTA      47

  48  TTA GCT GTG ACT GCA CCC GGG CAC TTG AGC TCC TCA TAT CAG GAG ACT      95

  96  ACT AGG CAA GAA CAG TCA CCA TTC TTT GAG GGA TAA TTA ATC CTG ATC     143

 144  ATC AGG AGG AGG TAC AGC TGC TGT TAA GCA ATG GAG GGA AGG GAG GTA     191

   1                                          Met Glu Gly Arg Glu Val       6

 192  TAT CTT TGG TAC TCA GTT GAT TCA CGT GGA GAC TTC TTG GTA TTC CTT     239

   7  Tyr Leu Trp Tyr Ser Val Asp Ser Arg Gly Asp Phe Leu Val Phe Leu      22

 240  TGC CCA ATT TTT TTT TCT TTT TCT TTT TCA GAG GTG GAG TCT CTG TCA     287

  23  Cys Pro Ile Phe Phe Ser Phe Ser Phe Ser Glu Val Glu Ser Leu Ser      38

 288  CCC AGG CTG GAG TGC AGT GGC ACC ATC TCG GCT CAC TGC AAC CTC TGC     335

  39  Pro Arg Leu Glu Cys Ser Gly Thr Ile Ser Ala His Cys Asn Leu Cys      54

 336  CTC CTG GGT TCA AGC TAT TCT CCT GCC TCA GCC TCC CGA GTA ACT GGG     383

  55  Leu Leu Gly Ser Ser Tyr Ser Pro Ala Ser Ala Ser Arg Val Thr Gly      70

 384  ATT ACA GGC ATG TGC CAC CAT GCC CAG CTG ATT TTT GTA TTT TTA GTA     431

  71  Ile Thr Gly Met Cys His His Ala Gln Leu Ile Phe Val Phe Leu Val      86

 432  AAG ATG GAG TTT CGC CAT GTT GGC CAG ACT AGT TTT GAA CTT CTG GCC     479

  87  Lys Met Glu Phe Arg His Val Gly Gln Thr Ser Phe Glu Leu Leu Ala     102

 480  TCA AGC AGT CCA CCT GCC TCA GCT TCC CAA AGT GCT GGG ATT ACA GGC     527

 103  Ser Ser Ser Pro Pro Ala Ser Ala Ser Gln Ser Ala Gly Ile Thr Gly     118

 528  GTG AGC CAC TGC GCC TGG CCC CTT GCC CAA TAT TTA TAA AAT AAT TAT     575

 119  Val Ser His Cys Ala Trp Pro Leu Ala Gln Tyr Leu ***                 131

 576  ACA AGT GCC CAG ACC GTG ACC TGA GCA GGA TAT GCT GAC TTC AGG CTC     623

 624  AGC CCC CTC AGG GCT GAG GGT CTA AAT CAT GCC TCC GTG GAA GTG ACG     671

 672  GAG ACC GGA ACAC GT GCT GGC TGA GGG TAA GGA GGA TCT AGA ATG GAT     719

 720  AGT AGA AGA GGG AGA TGA TGA GTA TCA GTT GTG GCC TCA AGA CCA GTC     767

 768  AGT GAT GGA GGT TGT AGT TTG TCC AAC TTA CTT TCC TAA GTT TCC CCC     815

 816  AGG AAA GGA GGT CCA CCA GAA CTT AAA CCA AAA AGT AGA GCT GAG CAG     863

 864  CAC AAA TGT GGG CTG TAG TGG ACA CCA TCC TGT GCT GCC CAG ACC CCC     911

 912  CAG CCA CCA TGC TTC CTG GGC CTC TTC CCA CAG CTA CTG GGA GTG CTC     959

 960  TCA GCC AGC AGC CTT CAG CTG TCA GCC CCC TGG GAA TTT TCC TCA ATG    1007

1008  GAA GAG TTA CCT CAC TGA CAT ACC CCT TTC CCA GGC AGG TCA GTT CAA    1055

1056  GGT TAT GAA GGC CTG GCC CCA CTG CCT CAA CTT GAC AAC TTG GAA GGG    1103

1104  CCA TCT CAG CTT CAA GAC CCT CCC ATG AGA CTG GCT GAG GTC TTC ATA    1151

1152  CAG CAT CGG AGC CCA ATT TAT CTC TCT GAG CAA TCC TGC TTC CTT TCC    1199

1200  TGC CCC CTT CCC AAG AGC AAT CCC TGA TAA ACT TCC CGC ATG CTA ATC    1247

1248  TCC ATC TCA GAG TCT ACT TTC CAA GGA AGT GGG CCT ATA ACA TAG CTC    1295

1296  TTC CAG TTT TTG TTA ACA ATT CTA GAA CAG GGG TCA GCA AAC TTT TTT    1343

1344  TTT TTT TCT TTT GAG ACG GAG TCT CAC TCC GTC ACC AGG CTG GAG TGC    1391

1392  AGT GGC GCG ATC TTG GCT CAC TGC AAC CTC TGC CTC CCG GGT TCA AGC    1439

1440  GAT TCT CCT GCC TCA GCC TCC CGA GTA GCT GGG ACT ACC ATG CCA CCA    1487

1488  CAC CCA GCT AAT TTT TTT ATT TTT AGA GAG ATT GGG TTT CAC CAT GTT    1535

1536  GGC CAG GAT GGT CTT GAT CTC TTG ACC TCG TGA TCC GCG CTC CTC GGC    1583

1584  CTC CCA AAG TGC TGG GAT TAT AGA CAT GAA TCC CCA CAC CCG GCC AGC    1631

1632  AAA CTT TTT TAA AGG AAC AGA TAG TAA ATA TTT TAA GCT TTG TGA GCC    1679

1680  ACA TGG TCT CTG TCA CAA CTA TTC AGC TCT GCT ATT GTA ATA CAA AAG    1727

1728  CAG CTG TGG ACA GTA TGT AAA TGA ATG AAT GTG GCT GTG TTC CAA TAA    1775

1776  AAC TTT ATT TCC CAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1823

1824  AAA AAA AAA AAA AA                                                 1837

8.PP1744

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：22)长度：1996bp

   1  GGACGAGAGC ACAAGGAGAT CCACCAGCAG AGGCAGGAGG ACGAGGAGGA

  51  TAAACCCAGG CAGGTGGAGG TGCATCAAGA GCCCGGGGCA GCGGTGCCCA

 101  GAGGCCAGGA GGCCCCTGAA GGCAAGGCCA GGGAGACGGT GGAGAATCTG

 151  CCTCCCCTGC CTTTGGACCC TGTCCTCAGA GCTCCTGGGG GCCGCCCTGC

 201  TCCATCCCAG GACCTTAACC AGCGCTCCCT GGAGCACTCT GAGGGGCCTG

 251  TGGGCAGAGA CCCTGCTGGC CCTCCTGACG GCGGCCCTGA CACAGAGCCT

 301  CGGGCAGCCC AGGGCAAGCT GAGAGATGGC CAGAAGGATG CCGCCCCCAG

 351  GGCAGCTGGC ACTGTGAAGG AGCTCTGAGG ACAGGGTCCT CAGAGCTCCT

 401  GGGGGCCGCC CTGCTCCATC CCAGGACCTT AACCAGCGCT CCCTGGAGCA

 451  CTCTGAGGGG CCTGTGGGCA GAGACCCTGC TGGCCCTCCT GACGGCGGCC

 501  CTGACACAGA GCCTCGGGCA GCCCAGGGCA AGCTGAGAGA TGGCCAGAAG

 551  GATGCCGCCC CCAGGGCAGC TGGCACTGTG AAGGAGCTCC CCAAGGGCCC

 601  GGAGCAGGTG CCCGTGCCAG ACCCCGCCAG GGAAGCCGGG GGCCCAGAGG

 651  AGCGCCTCGC AGAGGAATTC CCTGGGCAAA GTCAGGACGT TACTGGCGGT

 701  TCCCAAGACA GGAAAAAACC TGGGAAGGAG GTGGCAGCCA CTGGCACCAG

 751  CATTCTGAAG GAAGCCAACT GGCTCGTGGC AGGGCCAGGA GCAGAGACGG

 801  GGGACCCTCG CATGAAGCCC AAGCAAGTGA GCCGAGACCT GGGCCTTGCA

 851  GCGGACCTGC CCGGTGGGGC GGAAGGAGCA GCTGCACAGC CCCAGGCTGT

 901  GTTACGCCAG CCGGAACTGC GGGTCATCTC TGATGGCGAG CAGGGTGGAC

 951  AGCAGGGCCA CCGGCTGGAC CATGGCGGTC ACCTGGAGAT GAGAAAGGCC

1001  CGCGGGGGGG ACCATGTGCC TGTGTCCCAC GAGCAGCCGA GAGGCGGGGA

1051  GGACGCTGCT GTCCAGGAGC CCAGGCAGAG GCCAGAGCCA GAGCTGGGGC

1101  TCAAACGAGC TGTCCCGGGG GGCCAGAGGC CGGACAATGC CAAGCCCAAC

1151  CGGGACCTGA AACTGCAGGC TGGCTCCGAC CTCCGGAGGC GACGGCGGGA

1201  CCTTGGCCCT CATGCAGAGG GTCAGCTGGC CCCGAGGGAT GGGGTCATTG

1251  GCCTTAACCC CCTGCCTGAT GTCCAGGTGA ACGACCTCCG TGGCGCCCTG

1301  GATGCCCAGC TCCGCCAGGC TGCGGGGGGA GCTCTGCAGG TGGTCCACAG

1351  CCGGCAGCTT AGACAGGCGC CTGGGCCTCC AGAGGAGTCC TAGCACCTGC

1401  TGGCCATGAG GGCCACGCCA GCCACTGCCC TCCTCGGCCA GCAGCAGGTC

1451  TGTCTCAGCC GCATCCCAGC CAAACTCTGG AGGTCACACT CGCCTCTCCC

1501  CAGGGTTTCA TGTCTGAGGC CCTCACCAAG TGTGAGTGAC AGTATAAAAG

1551  ATTCACTGTG GCATCGTTTC CAGAATGTTC TTGCTGTCGT TCTGTTGCAG

1601  CTCTTAGTCT GAGGTCCTCT GACCTCTAGA CTCTGAGCTC ACTCCAGCCT

1651  GTGAGGAGAA ACGGCCTCCG CTGCGAGCTG GCTGGTGCAC TCCCAGGCTC

1701  AGGCTGGGGA GCTGCTGCGT CTGTGGTCAG GCCTCCTGCT CCTGCCAGGG

1751  AGCACGCGTG GTCTTCGGGT TGAGCTCGCC CGTGCGTGGA GGTGCGCATG

1801  GCTGCTCATG GTCCCAACAC AGGCTACTGT GAGAGCCAGC ATCCAACCCC

1851  ACGCTTGCAG TGACTCAGAA TGATAATTAT TATGACTGTT TATCGATGCT

1901  TCCCCCAGTG TGGTAGAAAG TCTTGAATAA ACACTTTTGC CTTCACCCAA

1951  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：23)长度：193个氨基酸

   1  MKPKQVSRDL GLAADLPGGA EGAAAQPQAV LRQPELRVIS DGEQGGQQGH

  51  RLDHGGHLEM RKARGGDHVP VSHEQPRGGE DAAYQEPRQR PEPELGLKRA

 101  VPGGQRPDNA KPNRDLKLQA GSDLRRRRRD LGPHAEGQLA PRDGV IGLNP

 151  LPDVQVNDLR GALDAQLRQA AGGALQVVHS RQLRQAPGPP EES

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：24)

克隆号和蛋白名称：PP1744

起始编码子：  812 ATG    终止编码子：1393 TAG

蛋白质分子量：20631.96

   1    G GAC GAG AGC ACA AGG AGA TCC ACC AGC AGA GGC AGG AGG ACG AGG      46

  47  AGG ATA AAC CCA GGC AGG TGG AGG TGC ATC AAG AGC CCG GGG CAG CGG      94

  95  TGC CCA GAG GCC AGG AGG CCC CTG AAG GCA AGG CCA GGG AGA CGG TGG     142

 143  AGA ATC TGC CTC CCC TGC CTT TGG ACC CTG TCC TCA GAG CTC CTG GGG     190

 191  GCC GCC CTG CTC CAT CCC AGG ACC TTA ACC AGC GCT CCC TGG AGC ACT     238

 239  CTG AGG GGC CTG TGG GCA GAG ACC CTG CTG GCC CTC CTG ACG GCG GCC     286

 287  CTG ACA CAG AGC CTC GGG CAG CCC AGG GCA AGC TGA GAG ATG GCC AGA     334

 335  AGG ATG CCG CCC CCA GGG CAG CTG GCA CTG TGA AGG AGC TCT GAG GAC     382

 383  AGG GTC CTC AGA GCT CCT GGG GGC CGC CCT GCT CCA TCC CAG GAC CTT     430

 431  AAC CAG CGC TCC CTG GAG CAC TCT GAG GGG CCT GTG GGC AGA GAC CCT     478

 479  GCT GGC CCT CCT GAC GGC GGC CCT GAC ACA GAG CCT CGG GCA GCC CAG     526

 527  GGC AAG CTG AGA GAT GGC CAG AAG GAT GCC GCC CCC AGG GCA GCT GGC     574

 575  ACT GTG AAG GAG CTC CCC AAG GGC CCG GAG CAG GTG CCC GTG CCA GAC     622

 623  CCC GCC AGG GAA GCC GGG GGC CCA GAG GAG CGC CTC GCA GAG GAA TTC     670

 671  CCT GGG CAA AGT CAG GAC GTT ACT GGC GGT TCC CAA GAC AGG AAA AAA     718

 719  CCT GGG AAG GAG GTG GCA GCC ACT GGC ACC AGC ATT CTG AAG GAA GCC     766

 767  AAC TGG CTC GTG GCA GGG CCA GGA GCA GAG ACG GGG GAC CCT CGC ATG     814

   1                                                              Met       1

 815  AAG CCC AAG CAA GTG AGC CGA GAC CTG GGC CTT GCA GCG GAC CTG CCC     862

   2  Lys Pro Lys Gln Val Ser Arg Asp Leu Gly Leu Ala Ala Asp Leu Pro      17

 863  GGT GGG GCG GAA GGA GCA GCT GCA CAG CCC CAG GCT GTG TTA CGC CAG     910

  18  Gly Gly Ala Glu Gly Ala Ala Ala Gln Pro Gln Ala Val Leu Arg Gln      33

 911  CCG GAA CTG CGG GTC ATC TCT GAT GGC GAG CAG GGT GGA CAG CAG GGC     958

  34  Pro Glu Leu Arg Val Ile Ser Asp Gly Glu Gln Gly Gly Gln Gln Gly      49

 959  CAC CGG CTG GAC CAT GGC GGT CAC CTG GAG ATG AGA AAG GCC CGC GGG    1006

  50  His Arg Leu Asp His Gly Gly His Leu Glu Met Arg Lys Ala Arg Gly      65

1007  GGG GAC CAT GTG CCT GTG TCC CAC GAG CAG CCG AGA GGC GGG GAG GAC    1054

  66  Gly Asp His Val Pro Val Ser His Glu Gln Pro Arg Gly Gly Glu Asp      81

1055  GCT GCT GTC CAG GAG CCC AGG CAG AGG CCA GAG CCA GAG CTG GGG CTC    1102

  82  Ala Ala Val Gln Glu Pro Arg Gln Arg Pro Glu Pro Glu Leu Gly Leu      97

1103  AAA CGA GCT GTC CCG GGG GGC CAG AGG CCG GAC AAT GCC AAG CCC AAC    1150

  98  Lys Arg Ala Val Pro Gly Gly Gln Arg Pro Asp Asn Ala Lys Pro Asn     113

1151  CGG GAC CTG AAA CTG CAG GCT GGC TCC GAC CTC CGG AGG CGA CGG CGG    1198

 114  Arg Asp Leu Lys Leu Gln Ala Gly Ser Asp Leu Arg Arg Arg Arg Arg     129

1199  GAC CTT GGC CCT CAT GCA GAG GGT CAG CTG GCC CCG AGG GAT GGG GTC    1246

 130  Asp Leu Gly Pro His Ala Glu Gly Gln Leu Ala Pro Arg Asp Gly Val     145

1247  ATT GGC CTT AAC CCC CTG CCT GAT GTC CAG GTG AAC GAC CTC CGT GGC    1294

 146  Ile Gly Leu Asn Pro Leu Pro Asp Val Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly     161

1295  GCC CTG GAT GCC CAG CTC CGC CAG GCT GCG GGG GGA GCT CTG CAG GTG    1342

 162  Ala Leu Asp Ala Gln Leu Arg Gln Ala Ala Gly Gly Ala Leu Gln Val     177

1343  GTC CAC AGC CGG CAG CTT AGA CAG GCG CCT GGG CCT CCA GAG GAG TCC    1390

 178  Val His Ser Arg Gln Leu Arg Gln Ala Pro Gly Pro Pro Glu Glu Ser     193

1391  TAG CAC CTG CTG GCC ATG AGG GCC ACG CCA GCC ACT GCC CTC CTC GGC    1438

 194  ***                                                                 194

1439  CAG CAG CAG GTC TGT CTC AGC CGC ATC CCA GCC AAA CTC TGG AGG TCA    1486

1487  CAC TCG CCT CTC CCC AGG GTT TCA TGT CTG AGG CCC TCA CCA AGT GTG    1534

1535  AGT GAC AGT ATA AAA GAT TCA CTG TGG CAT CGT TTC CAG AAT GTT CTT    1582

1583  GCT GTC GTT CTG TTG CAG CTC TTA GTC TGA GGT CCT CTG ACC TCT AGA    1630

1631  CTC TGA GCT CAC TCC AGC CTG TGA GGA GAA ACG GCC TCC GCT GCG AGC    1678

1679  TGG CTG GTG CAC TCC CAG GCT CAG GCT GGG GAG CTG CTG CGT CTG TGG    1726

1727  TCA GGC CTC CTG CTC CTG CCA GGG AGC ACG CGT GGT CTT CGG GTT GAG    1774

1775  CTC GCC CGT GCG TGG AGG TGC GCA TGG CTG CTC ATG GTC CCA ACA CAG    1822

1823  GCT ACT GTG AGA GCC AGC ATC CAA CCC CAC GCT TGC AGT GAC TCA GAA    1870

1871  TGA TAA TTA TTA TGA CTG TTT ATC GAT GCT TCC CCC AGT GTG GTA GAA    1918

1919  AGT CTT GAA TAA ACA CTT TTG CCT TCA CCC AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1966

1967  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA                            1996

9.PP1757

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：25)长度：2279bp

   1  GCATTCTAGT GCGACCTTGT TTACACCTCC CCTGGCTCAG TCACACAGCT

  51  GTGTGGTAGG CTACTAGAAG TGTTTAGTAG TTGTCACTGG GATCATGCTG

 101  ATGTGGCCCC ATCCCCGCCT CTCCCTGCCC TGTGATATCG GAGGAAACCT

 151  GACAGAGCAA ATTGGCCATG GCCAAGAAAA AGGAAAAGAA AGAGTGCCAC

 201  CAAAAGCAGG GAGCCCTAAG GGAGCAGTTA CAGGTCCTCT TTGGATTCCA

 251  GCACGACGCA TCAAACCATA CCATGACGTG ACTAGGACCC AACCTAGAAA

 301  TGAAGGAACT GACCCTACAG GACTCACAAC CCTGGATAAT GCAGTGTCCT

 351  CGGACGGCAA CAAGCTCTGG ACATTACCTG GGGGATGCTG AAGGCGGCAA

 401  CTGAGGAGGC TGAATGAATC CTGCTCCAGA CACAGACACC ATTCACTCCA

 451  GATAATTTGT TGCTTGCTAT GCTCTCTGTT GTACATTGCA ACTCGCATAG

 501  GGATGCAAAG CCGGAATAAG AGCAATGACC ACCATGCCTG ACAGACCTGT

 551  TGCTGCGCAC ACCTGTACTC TCCAATGAAC AAGACTGAAT GCAAAAAAAA

 601  CAGAAAATGG GGAGATTTAG GGGATCAGTC AGTGTGGTTG GAAAATTGTA

 651  AGATGAAGTT ACAGGATATA GACACAAACC TTCTTGGAAG GCCAGAAGGT

 701  TTGCATAGCT TCAGTAAAGG ATTTGGCTGA AATCCTTTTT ACCTCTAATC

 751  CCCTTTACCT TGAGTTGATA GCAATAGAGC AAATAACATG GGAATGTGGG

 801  GGAGTTTATC TGAATAGCTT GTTTACTCAT GTGGTCCTAA GACCAACCTT

 851  TGATTATCCG CAGGTGCATG ATTGCTCTCT ACCTGGGGGC AGGGGGAGTT

 901  AATTACCCAC AGGTGGAGCT GAAGAGCCAG GAGGCTCAGA GTCTGCAGCA

 951  GCAGCAGGAC CAGTACCTGG GTCATCTGCA GCAGTATGTG GCCACCTATC

1001  AGCAGCAGGT GGTCACCTAT CAGCAGCTGA CCTCTGAGGA GGAGGAGCTG

1051  CACAACCAGT TACTGCTGCA GACCCAGCTC GTGGACCGGC TGCAGCAGCA

1101  GAAAGCTCAA AGCAAAGCTG TGGCCAAGAT GGGCTGCCAA GAGTTGCGGG

1151  AGACCCAGGA GCACCTGGAA GCTATCAGCC AGCAGAACCA GCAGCCTCAG

1201  GCCCAGTTGA GCCTCATGGC TCTCCCTGGG GAAGGAGATG GACAGTGAGG

1251  AGGAGGAGGA GGTGCCTCAG CCCATGCCAA GCATCCCGGA GGATCTAGAG

1301  AGCCAGAAGG CCATGGTGGC ATTTTTCAAC TCAGCTGTAG CTAGTGCCGA

1351  GGAGGAGCAG GCACGGCTAT GTGGGCAGCT GAAGGAGTGC ACTGCCAGCG

1401  CCTGGCTCAT CTGTTGGCCT CGGCCCAGAA GGAACCTGAG GCAGCAGCCC

1451  CAGCCCCAAG AACTGGGGGT GATCCCATGT GTGGGGAGAC CCACCAGGCC

1501  CTGCAGGGGG CCATGGAGAA GCTGTGGGAG AGTACATCGC ACTGTACCAG

1551  AGCCAGAGGG CAGTGCGGAA GGAGGAGGAG TGCATCAGCA GGCTGGCCCA

1601  GGACAAGGGA GAGGTGAAGG TGAAGCTGCT GGAGCTGGCG TGGCTTGTGG

1651  ACGACTGCAA CAAGTGGCAT AGCAGATTCC TGGCAGCTGC CCAGAACCCT

1701  GCTGATGAGC CCACTCCAGG GGCCCCCGCC CCCCAGTAGC TTGGGGCTAC

1751  TGACAAGCCA GGGTAGTGAG TAGAGTCCTC AGGCACAGTG GGCACGCAGG

1801  AGCAGGGGAG GGCTCCCACA GCACCCTGCC TCCCTCTCTC CAAAGATCTT

1851  TGTGAGGTGA GCCTTGCCAG CAGTGGGGAG TCTGCACAAG GAGAGGCGGG

1901  GAAGCATTCT CCCTGTGACA ACCCCACTGA GCAGCAGATC ATGCAACTGC

1951  TTCATGAGAT GCAGAACCTC CAGGAGCACC CAGGCTTGGG CAGCAGCCCT

2001  TGCATTCCTT TTTTGTACCA GACTGATGAG AACAATGAGG TGAAGATCAC

2051  CATCATCTAA AAGCCGGCCA CTGTCAGCAA AACCTGGGGA AGTGGGGCTG

2101  GAGGCTCTGC CCCTACCATG TCCCTACCAC CCCTTCCCAG TCAACCCTTT

2151  ACCCTCACAG TAGCAAGCAT AAGACCCCTG TCTAATGTGG GGAGACAGGT

2201  GGAGATGAGG TGAAGATCAC CATAATCTAA AAGGCCACTA AATAAAAAAA

2251  TAAAAAATTT TAAAAAAAAA AAAAAAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：26)长度：144个氨基酸

   1  MDSEEEEEVP QPMPSIPEDL ESQKAMVAFF NSAVASAEEE QARLCGQLKE

  51  CTASAWLICW PRPRRNLRQQ PQPQELGVIP CVGRPTRPCR GPWRSCGRVH

 101  RTVPEPEGSA EGGGVHQQAG PGQGRGEGEA AGAGVACGRL QQVA

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：27)

克隆号和蛋白名称：PP1757

起始编码子：  1238 ATG    终止编码子：1672 TAG

蛋白质分子量：15481.60

   1    G CAT TCT AGT GCG ACC TTG TTT ACA CCT CCC CTG GCT CAG TCA CAC     46

  47  AGC TGT GTG GTA GGC TAC TAG AAG TGT TTA GTA GTT GTC ACT GGG ATC     94

  95  ATG CTG ATG TGG CCC CAT CCC CGC CTC TCC CTG CCC TGT GAT ATC GGA    142

 143  GGA AAC CTG ACA GAG CAA ATT GGC CAT GGC CAA GAA AAA GGA AAA GAA    190

 191  AGA GTG CCA CCA AAA GCA GGG AGC CCT AAG GGA GCA GTT ACA GGT CCT    238

 239  CTT TGG ATT CCA GCA CGA CGC ATC AAA CCA TAC CAT GAC GTG ACT AGG    286

 287  ACC CAA CCT AGA AAT GAA GGA ACT GAC CCT ACA GGA CTC ACA ACC CTG    334

 335  GAT AAT GCA GTG TCC TCG GAC GGC AAC AAG CTC TGG ACA TTA CCT GGG     382

 383  GGA TGC TGA AGG CGG CAA CTG AGG AGG CTG AAT GAA TCC TGC TCC AGA     430

 431  CAC AGA CAC CAT TCA CTC CAG ATA ATT TGT TGC TTG CTA TGC TCT CTG     478

 479  TTG TAC ATT GCA ACT CGC ATA GGG ATG CAA AGC CGG AAT AAG AGC AAT     526

 527  GAC CAC CAT GCC TGA CAG ACC TGT TGC TGC GCA CAC CTG TAC TCT CCA     574

 575  ATG AAC AAG ACT GAA TGC AAA AAA AAC AGA AAA TGG GGA GAT TTA GGG     622

 623  GAT CAG TCA GTG TGG TTG GAA AAT TGT AAG ATG AAG TTA CAG GAT ATA     670

 671  GAC ACA AAC CTT CTT GGA AGG CCA GAA GGT TTG CAT AGC TTC AGT AAA     718

 719  GGA TTT GGC TGA AAT CCT TTT TAC CTC TAA TCC CCT TTA CCT TGA GTT     766

 767  GAT AGC AAT AGA GCA AAT AAC ATG GGA ATG TGG GGG AGT TTA TCT GAA     814

 815  TAG CTT GTT TAC TCA TGT GGT CCT AAG ACC AAC CTT TGA TTA TCC GCA     862

 863  GGT GCA TGA TTG CTC TCT ACC TGG GGG CAG GGG GAG TTA ATT ACC CAC     910

 911  AGG TGG AGC TGA AGA GCC AGG AGG CTC AGA GTC TGC AGC AGC AGC AGG     958

 959  ACC AGT ACC TGG GTC ATC TGC AGC AGT ATG TGG CCA CCT ATC AGC AGC    1006

1007  AGG TGG TCA CCT ATC AGC AGC TGA CCT CTG AGG AGG AGG AGC TGC ACA    1054

1055  ACC AGT TAC TGC TGC AGA CCC AGC TCG TGG ACC GGC TGC AGC AGC AGA    1102

1103  AAG CTC AAA GCA AAG CTG TGG CCA AGA TGG GCT GCC AAG AGT TGC GGG    1150

1151  AGA CCC AGG AGC ACC TGG AAG CTA TCA GCC AGC AGA ACC AGC AGC CTC    1198

1199  AGG CCC AGT TGA GCC TCA TGG CTC TCC CTG GGG AAG GAG ATG GAC AGT    1246

   1                                                      Met Asp Ser       3

1247  GAG GAG GAG GAG GAG GTG CCT CAG CCC ATG CCA AGC ATC CCG GAG GAT    1294

   4  Glu Glu Glu Glu Glu Val Pro Gln Pro Met Pro Ser Ile Pro Glu Asp      19

1295  CTA GAG AGC CAG AAG GCC ATG GTG GCA TTT TTC AAC TCA GCT GTA GCT    1342

  20  Leu Glu Ser Gln Lys Ala Met Val Ala Phe Phe Asn Ser Ala Val Ala      35

1343  AGT GCC GAG GAG GAG CAG GCA CGG CTA TGT GGG CAG CTG AAG GAG TGC    1390

  36  Ser Ala Glu Glu Glu Gln Ala Arg Leu Cys Gly Gln Leu Lys Glu Cys      51

1391  ACT GCC AGC GCC TGG CTC ATC TGT TGG CCT CGG CCC AGA AGG AAC CTG    1438

  52  Thr Ala Ser Ala Trp Leu Ile Cys Trp Pro Arg Pro Arg Arg Asn Leu      67

1439  AGG CAG CAG CCC CAG CCC CAA GAA CTG GGG GTG ATC CCA TGT GTG GGG    1486

  68  Arg Gln Gln Pro Gln Pro Gln Glu Leu Gly Val Ile Pro Cys Val Gly      83

1487  AGA CCC ACC AGG CCC TGC AGG GGG CCA TGG AGA AGC TGT GGG AGA GTA    1534

  84  Arg Pro Thr Arg Pro Cys Arg Gly Pro Trp Arg Ser Cys Gly Arg Val      99

1535  CAT CGC ACT GTA CCA GAG CCA GAG GGC AGT GCG GAA GGA GGA GGA GTG    1582

 100  His Arg Thr Val Pro Glu Pro Glu Gly Ser Ala Glu Gly Gly Gly Val     115

1583  CAT CAG CAG GCT GGC CCA GGA CAA GGG AGA GGT GAA GGT GAA GCT GCT    1630

 116  His Gln Gln Ala Gly Pro Gly Gln Gly Arg Gly Glu Gly Glu Ala Ala     131

1631  GGA GCT GGC GTG GCT TGT GGA CGA CTG CAA CAA GTG GCA TAG CAG ATT    1678

 132  Gly Ala Gly Val Ala Cys Gly Arg Leu Gln Gln Val Ala ***             145

1679  CCT GGC AGC TGC CCA GAA CCC TGC TGA TGA GCC CAC TCC AGG GGC CCC    1726

1727  CGC CCC CCA GTA GCT TGG GGC TAC TGA CAA GCC AGG GTA GTG AGT AGA    1774

1775  GTC CTC AGG CAC AGT GGG CAC GCA GGA GCA GGG GAG GGC TCC CAC AGC    1822

1823  ACC CTG CCT CCC TCT CTC CAA AGA TCT TTG TGA GGT GAG CCT TGC CAG    1870

1871  CAG TGG GGA GTC TGC ACA AGG AGA GGC GGG GAA GCA TTC TCC CTG TGA    1918

1919  CAA CCC CAC TGA GCA GCA GAT CAT GCA ACT GCT TCA TGA GAT GCA GAA    1966

1967  CCT CCA GGA GCA CCC AGG CTT GGG CAG CAG CCC TTG CAT TCC TTT TTT    2014

2015  GTA CCA GAC TGA TGA GAA CAA TGA GGT GAA GAT CAC CAT CAT CTA AAA    2062

2063  GCC GGC CAC TGT CAG CAA AAC CTG GGG AAG TGG GGC TGG AGG CTC TGC    2110

2111  CCC TAC CAT GTC CCT ACC ACC CCT TCC CAG TCA ACC CTT TAC CCT CAC    2158

2159  AGT AGC AAG CAT AAG ACC CCT GTC TAA TGT GGG GAG ACA GGT GGA GAT    2206

2207  GAG GTG AAG ATC ACC ATA ATC TAA AAG GCC ACT AAA TAA AAA AAT AAA    2254

2255  AAA TTT TAA AAA AAA AAA AAA AAA A                                  2279

Claims (5)

1.一种分离的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列选自下组：

(a)编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸，所述蛋白具有选自下组的氨基酸序列：

SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。

2.如权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26。

3.如权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的序列选自下组：

SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：27的编码区序列或全长序列。

4.一种载体，其特征在于，它含有权利要求1所述的多核苷酸。

5.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它是选自下组的一种宿主细胞：

(a)用权利要求4所述的载体转化或转导的宿主细胞；

(b)用权利要求1所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。