CN116784482A - 具有风味提升、长效释放的燕窝肽微胶囊组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种具有风味提升、长效释放的燕窝肽微胶囊组合物及其制备方法,其中的燕窝肽组合物包含燕窝肽和γ‑环糊精,燕窝肽和γ‑环糊精的质量比为1:(3‑7)。通过将燕窝肽和γ‑环糊精以前述质量比共同制备组合物,可有效改善燕窝肽的不良口感和风味,长效释放,拓展燕窝肽的应用场景。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域,特别是涉及一种具有风味提升、长效释放的燕窝肽微胶囊组合物及其制备方法。
背景技术
燕窝经过蛋白酶水解后生成的燕窝肽,与燕窝类似,也具有优良的促进细胞增殖、抗炎、抗病毒等生理活性。且相比于燕窝,燕窝肽具有更优异的抗氧化和美白功效。此外,燕窝肽的分子量较低,能够迅速地被人体吸收,且其吸收率大于相同蛋白含量的燕窝。由于燕窝肽具有上述优势,因此燕窝肽被认为是一种在食品、药品、护肤品等领域具有广泛应用前景的生物活性物质。
但是,燕窝肽口感不佳,限制了燕窝肽的应用。
发明内容
基于此,有必要提供一种能够改善燕窝肽口感和风味的具有风味提升、长效释放的燕窝肽微胶囊组合物及其制备方法。
本发明的第一方面提供了一种燕窝肽组合物,所述燕窝肽和所述γ-环糊精的质量比为1:(3-7)。
在一些实施例中,所述燕窝肽和所述γ-环糊精的质量比为1:(3-6)。
在一些实施例中,所述燕窝肽组合物为冻干粉或燕窝肽溶液;
可选地,所述冻干粉是将所述燕窝肽和所述γ-环糊精混合后配制成混合溶液,然后将所述混合溶液进行加热、预冻、冻干后制备得到;
可选地,所述燕窝肽溶液是将所述冻干粉溶于水中制备得到;
进一步可选地,所述燕窝肽溶液中含有的燕窝肽的质量百分比浓度为0.01%-1%。
本发明的第二方面提供了一种燕窝肽组合物的制备方法,包括如下步骤:
将所述燕窝肽和所述γ-环糊精按照质量比为1:(3-7)混合,制备所述燕窝肽组合物。
在一些实施例中,所述燕窝肽组合物的制备方法包括如下步骤:
将所述燕窝肽和所述γ-环糊精混合,加入溶剂,制备混合溶液;
加热并搅拌所述混合溶液;
将加热后的所述混合溶液进行预冻、冻干,制备所述燕窝肽组合物。
本发明的第三方面提供了一种燕窝肽风味提升和长效释放的方法,包括如下步骤:将燕窝肽和γ-环糊精按照质量比为1:(3-7)混合,制备组合物。
在一些实施例中,所述燕窝肽风味提升和长效释放的方法包括如下步骤:
将所述燕窝肽和所述γ-环糊精混合,加入溶剂,制备混合溶液;
加热并搅拌所述混合溶液;
将加热后的所述混合溶液进行预冻、冻干。
在一些实施例中,所述燕窝肽和所述γ-环糊精的质量比为1:(3-6)。
在一些实施例中,所述燕窝肽在所述混合溶液中的质量占比为1%-10%。
在一些实施例中,所述加热的温度为40℃-80℃,时间为60min-180min。
在一些实施例中,所述预冻的温度为-80℃,时间为6h-24h。
在一些实施例中,所述冻干的温度为-35℃~-45℃,时间为24h-48h。
在一些实施例中,所述溶剂包括纯化水。
本发明的第四方面提供了一种如本发明第一方面的燕窝肽组合物在制备食品、药品和/或护肤品中的应用。
上述的具有风味提升、长效释放的燕窝肽微胶囊组合物及其制备方法,燕窝肽组合物包括质量比为1:(3-7)的燕窝肽和γ-环糊精;通过将燕窝肽和γ-环糊精以前述质量比共同制备组合物,可有效改善燕窝肽的口感和风味,长效释放,提升食用者的愉悦度,拓展燕窝肽的应用场景。
燕窝肽的风味提升和长效释放的方法包括:将燕窝肽和γ-环糊精混合,加入溶剂,制备混合溶液;加热并搅拌混合溶液;将加热后的混合溶液进行预冻、冻干;采用上述方法可有效降低燕窝肽的不良口感,本发明的技术人员推测可能是由于:混合溶液进行加热时,至少有部分燕窝肽和γ-环糊精形成燕窝肽微胶囊,并且燕窝肽微胶囊中燕窝肽的疏水性氨基酸位于γ-环糊精的空腔内;由于燕窝肽中呈现不良口感的是疏水性氨基酸,γ-环糊精的空腔亦具有疏水性,则燕窝肽微胶囊中燕窝肽的疏水性氨基酸可与γ-环糊精的空腔结合,服用燕窝肽溶液的过程中,疏水性氨基酸与舌头接触的几率大大降低,从而使用者仅能够轻微地感受到甚至不会感受到不良口感或风味。此外,γ-环糊精具有轻微的甜味,亦可掩盖疏水性氨基酸的不良口感。
附图说明
图1为实施例1-5和对比例1-5中燕窝肽溶液清除ABTS+自由基的结果示意图。
具体实施方式
为了便于理解本发明,下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳实施例。但是,本发明可以以许多不同的形式来实现,并不限于本文所描述的实施例。相反地,提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义,本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的,不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
本发明中,以开放式描述的技术特征中,包括所列举特征组成的封闭式技术方案,也包括包含所列举特征的开放式技术方案。
本发明中,涉及到数值区间,如无特别说明,上述数值区间内视为连续,且包括该范围的最小值及最大值,以及这种最小值与最大值之间的每一个值。进一步地,当范围是指整数时,包括该范围的最小值与最大值之间的每一个整数。此外,当提供多个范围描述特征或特性时,可以合并该范围。换言之,除非另有指明,否则本文中所公开之所有范围应理解为包括其中所归入的任何及所有的子范围。
本文仅具体地公开了一些数值范围。然而,任意下限可以与任意上限组合形成未明确记载的范围;以及任意下限可以与其它下限组合形成未明确记载的范围,同样任意上限可以与任意其它上限组合形成未明确记载的范围。此外,每个单独公开的点或单个数值自身可以作为下限或上限与任意其它点或单个数值组合或与其它下限或上限组合形成未明确记载的范围。
本发明中的温度参数,如无特别限定,既允许为恒温处理,也允许在一定温度区间内进行处理。所述的恒温处理允许温度在仪器控制的精度范围内进行波动。
在发明的描述中,“多种”的含义是至少两种,例如两种,三种等,除非另有明确具体的限定。
如果没有特别的说明,本发明的所有实施方式以及可选实施方式可以相互组合形成新的技术方案。如果没有特别的说明,本发明的所有技术特征以及可选技术特征可以相互组合形成新的技术方案。
如果没有特别的说明,本发明的所有步骤可以顺序进行,也可以随机进行,优选是顺序进行的。
相关技术中,燕窝肽具有不良口感,限制了燕窝肽的应用。本发明的技术人员研究发现,燕窝经过蛋白酶水解后,蛋白酶水解会暴露燕窝中的疏水性氨基酸残基,导致燕窝肽具有不愉悦的口感。
目前,相关技术中用以改善肽类物质口感的方法主要有:吸附法、酶水解法、使用呈味物质。但是,吸附法会导致活性肽的大量损失;酶水解法会导致肽含量降低;使用呈味物质掩盖的同时,也会给产品带来其他异味,如酸味。
基于上述问题,本发明第一方面提供了一种燕窝肽溶液,包含燕窝肽和γ-环糊精,燕窝肽和所述γ-环糊精的质量比为1:(3-7)。
燕窝肽组合物中燕窝肽和γ-环糊精的质量比为1:(3-7)。作为示例,燕窝肽溶液中燕窝肽和γ-环糊精的质量比可以为但不限定于1:3、1:3.3、1:3.5、1:3.8、1:4、1:4.3、1:4.5、1:4.7、1:5、1:5.3、1:5.5、1:5.8、1:6、1:6.3、1:6.5、1:6.8、1:7或者上述任意两个比例之间的范围。燕窝肽组合物中燕窝肽和γ-环糊精的质量比在上述范围内时,既可以使得燕窝肽组合物配制成溶液时具有较高的包封率,又可使燕窝肽组合物配制成溶液时呈现澄清状态。
可理解地,通过将燕窝肽和γ-环糊精以1:(3-7)的质量比共同制备组合物,可有效改善燕窝肽的不良口感或风味,改善使用者的使用愉悦度。此外,还可控制和减缓燕窝肽在体内的提前释放,促进燕窝肽的完整吸收;同时不会对燕窝肽的抗氧化活性产生影响。
在一些实施方式中,燕窝肽和γ-环糊精的质量比为1:(3-6)。
在一些实施方式中,燕窝肽组合物为冻干粉或燕窝肽溶液。
在一些可选的实施方式中,冻干粉是将燕窝肽和γ-环糊精混合后配制成混合溶液,然后将混合溶液进行加热、预冻、冻干后制备得到。
在一些可选的实施方式中,燕窝肽溶液是将冻干粉溶于水中制备得到。
在一些实施方式中,燕窝肽溶液中含有的燕窝肽的质量百分比浓度为0.01%-1%。作为示例,燕窝肽溶液中含有的燕窝肽的总质量占燕窝肽溶液的总质量的百分比可以为但不限定于0.01%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1%或者上述任意两个数值之间的范围。
在一些实施方式中,燕窝肽组合物中,至少有部分燕窝肽和γ-环糊精形成至少一个燕窝肽微胶囊;燕窝肽微胶囊中燕窝肽的疏水性氨基酸位于γ-环糊精的空腔内。
在一些实施方式中,燕窝肽微胶囊的平均粒径为486.5nm-567.7nm;例如,可以为但不限定于486.5nm、490nm、500nm、510nm、520nm、530nm、540nm、550nm、560nm、567.7nm或者上述任意两个数值之间的范围。
本发明的第二方面提供了一种燕窝肽组合物的制备方法,包括如下步骤:将燕窝肽和γ-环糊精按照质量比为1:(3-7)混合,制备燕窝肽组合物。
在一些实施方式中,燕窝肽组合物的制备方法包括如下步骤:将燕窝肽和γ-环糊精混合,加入溶剂,制备混合溶液;加热并搅拌混合溶液;将加热后的混合溶液进行预冻、冻干,制备燕窝肽组合物。
本发明的第三方面提供了一种燕窝肽风味提升和长效释放的方法,包括如下步骤:将燕窝肽和γ-环糊精按照质量比为1:(3-7)混合,制备组合物。
在一些实施例中,燕窝肽风味提升和长效释放的方法包括如下步骤:将燕窝肽和γ-环糊精混合,加入溶剂,制备混合溶液;加热并搅拌混合溶液;将加热后的混合溶液进行预冻、冻干。
需要说明的是,冻干后还包括将冻干产物进行粉碎和过筛处理的步骤。在一些可选的实施方式中,采用40-60目筛对粉碎后的冻干产物进行过筛处理。
可理解地,采用上述方法可有效降低燕窝肽的不良口感,本发明的技术人员推测可能是由于:混合溶液进行加热时,至少有部分燕窝肽和γ-环糊精形成燕窝肽微胶囊微胶囊,并且燕窝肽微胶囊中燕窝肽的疏水性氨基酸位于γ-环糊精的空腔内;由于燕窝肽中呈现不良口感的是疏水性氨基酸,γ-环糊精的空腔亦具有疏水性,则燕窝肽微胶囊中燕窝肽的疏水性氨基酸可与γ-环糊精的空腔结合,服用燕窝肽溶液的过程中,疏水性氨基酸与舌头接触的几率大大降低,从而使用者仅能够轻微地感受到甚至不会感受到不良口感或风味。此外,γ-环糊精具有轻微的甜味,亦可掩盖疏水性氨基酸的不良口感。
进一步地,通过上述燕窝肽风味提升和长效释放方法,还可控制和减缓燕窝肽在体内的提前降解,并促进燕窝肽的完整吸收;同时不会对燕窝肽的抗氧化活性产生影响。
在一些实施方式中,燕窝肽γ-环糊精的质量比为1:(3-6)。
在一些实施方式中,燕窝肽在混合溶液中的质量占比为1%-10%。燕窝肽在混合溶液中的质量占比在上述范围时,γ-环糊精和燕窝肽的浓度适中,γ-环糊精包合燕窝肽形成微胶囊的机率更大。作为示例,燕窝肽在混合溶液中的质量占比可以为但不限定于1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%、5%、5.5%、6%、6.5%、7%、7.5%、8%、8.5%、9%、9.5%、10%或者上述任意两个数值之间的范围。
在一些实施例中,加热的温度为40℃-80℃;例如,可以为但不限定于40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃或者上述任意两个数值之间的范围。加热温度在上述范围时,γ-环糊精可充分溶解于溶剂中,有助于驱动燕窝肽-γ-环糊精微胶囊的形成。
加热时间为60min-180min;例如,可以为但不限定于60min、70min、80min、90min、100min、110min、120min、130min、140min、150min、160min、170min、180min或者上述任意两个数值之间的范围。
作为一种可能的实施方式,预冻的温度为-80℃;预冻时间为6h-24h;例如,可以为但不限定于6h、7h、8h、9h、10h、11h、12h、13h、14h、15h、16h、17h、18h、19h、20h、21h、22h、23h、24h或者上述任意两个数值之间的范围。
在一些实施方式中,冻干的温度为-35℃~-45℃;例如可以为但不限定于-35℃、-36℃、-37℃、-38℃、-39℃、-40℃、-41℃、-42℃、-43℃、-44℃、-45℃或者上述任意两个数值之间的范围。冻干的温度在上述范围内时,冻干粉末光滑完整、水分含量低,利于储存,且节省能耗。
冻干时间为24h-48h;例如,可以为但不限定于24h、25h、27h、30h、33h、35h、38h、40h、43h、45h、48h或者上述任意两个数值之间的范围。
在一些实施例中,溶剂包括纯化水。
本发明的第四方面还提供了一种第一方面的燕窝肽组合物在制备食品、药品和/或护肤品中的应用。
下述结合具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
需要说明的是,下述各实施例和对比例中采用的燕窝肽中,分子量在1kDa以下的质量占比为37.28%,分子量在1~5kDa范围内的质量占比为42.44%,分子量在5kDa以上的质量占比为20.28%。
一、燕窝肽溶液的制备
实施例1
将燕窝肽和γ-环糊精以1:3的质量比混合均匀,加入纯化水,配制成燕窝肽的最终浓度为1%的混合溶液;将混合溶液于50℃搅拌反应60min后,置于-80℃预冻8h,再放置于-35℃冷冻干燥24h,压碎,过40目筛,向其中加入纯化水,配制成燕窝肽的最终质量浓度为0.05%的燕窝肽溶液,无菌灌装。
实施例2-8
实施例2-8中燕窝肽溶液的制备方法和实施例1中燕窝肽的制备方法基本相似,主要区别在于:燕窝肽和γ-环糊精的质量比、混合溶液中燕窝肽的质量浓度、加热温度和/或时间、预冻时间、冻干温度和/或时间、燕窝肽溶液中燕窝肽的最终质量浓度中的至少一项不同。具体详见表1。
需要说明的是,燕窝肽溶液中燕窝肽的最终质量浓度是指燕窝肽溶液中含有的燕窝肽的总质量占燕窝肽溶液的总质量的百分比;混合溶液中燕窝肽的质量浓度是指燕窝肽在混合溶液中的质量占比。
对比例1
对比例1和实施例1的区别在于:采用α-环糊精替代γ-环糊精,其他均相同。具体详见表1。
对比例2
对比例2和实施例1的区别在于:采用β-环糊精替代γ-环糊精,其他均相同。具体详见表1。
表1
其中,n1表示燕窝肽和环糊精的质量比,w1表示混合溶液中燕窝肽的质量浓度,T1表示加热温度,t1表示加热时间,t2表示预冻时间,T2表示冻干温度,t3表示冻干时间,w2表示燕窝肽溶液中燕窝肽的最终质量浓度。
对比例3
将燕窝肽溶于纯化水,配制成燕窝肽的最终质量浓度为0.05%的燕窝肽溶液,无菌灌装。
对比例4
将燕窝肽溶于纯化水,配制成燕窝肽的最终质量浓度为0.1%的燕窝肽溶液,无菌灌装。
对比例5
将燕窝肽溶于纯化水,配制成燕窝肽的最终质量浓度为0.2%的燕窝肽溶液,无菌灌装。
二、性能测试试验
试验1
测定环糊精对燕窝肽的包封率,并采用电子舌智能味觉分析系统客观评价实施例1-6和对比例1-5中制备的燕窝肽溶液的味觉值,具体操作如下:
(1)包封率测定:测定不同浓度燕窝肽在280nm处的吸光度,绘制标准曲线,并以此计算样品中的燕窝肽含量。包封率的计算如下式所示:
(2)电子舌味觉分析:在每次测试前对系统进行校准和自检。将实施例1-6和对比例1-5中制备的燕窝肽溶液分别放入测定杯中,以30M KCl和0.3M酒石酸作为参考溶液,样品的苦味、涩味和甜味分别由电子舌系统的苦味传感器(CO0)、涩味传感器(AE1)和甜味传感器(GL1)进行量化。
包封率测试结果和电子舌味觉分析结果分别如表2所示。
表2
组别 | 包封率 | 苦味值 | 涩味值 | 甜味值 |
实施例1 | 65.27% | 2.18 | 0.97 | 0.85 |
实施例2 | 71.45% | 1.64 | 0.54 | 1.04 |
实施例3 | 79.23% | 0.96 | 0.31 | 1.39 |
实施例4 | 80.96% | 1.02 | 0.35 | 1.58 |
实施例5 | 80.68% | 1.13 | 0.37 | 1.89 |
实施例6 | 81.92% | 0.87 | 0.29 | 1.43 |
对比例1 | 34.48% | 4.26 | 1.31 | 0.79 |
对比例2 | 48.51% | 3.15 | 1.18 | 0.84 |
对比例3 | — | 5.25 | 1.58 | 0.01 |
对比例4 | — | 6.51 | 2.06 | 0.01 |
对比例5 | — | 8.93 | 2.95 | 0.02 |
由表2可知,实施例1中燕窝肽的包封率显著高于对比例1-2中燕窝肽的包封率,且与对比例1-2中燕窝肽溶液相比,实施例1中燕窝肽溶液具有更低的涩味值和苦味值;表明至少部分燕窝肽和γ-环糊精形成了微胶囊,γ-环糊精有更大的内部空腔,能够容纳更多的燕窝肽分子;且包封率与涩味值及苦味值呈负相关关系,包封率越高,涩味值和苦味值越低。同时,微胶囊中燕窝肽的疏水性氨基酸位于γ-环糊精的空腔内,由于燕窝肽中呈现苦味和涩味的是疏水性氨基酸,γ-环糊精的空腔亦具有疏水性,则微胶囊中燕窝肽的疏水性氨基酸可与γ-环糊精的空腔结合,从而可降低燕窝肽的苦味值和涩味值。
由实施例1-3的结果可知,随着γ-环糊精用量的增加,燕窝肽的包封率进一步上升,涩味值和苦味值进一步降低;表明包封率与涩味值及苦味值呈负相关关系,包封率越高,涩味值和苦味值越低。
由实施例3-5的结果可知,在γ-环糊精与燕窝肽比例不变的条件下,随着燕窝肽溶液中燕窝肽最终浓度的增加,燕窝肽的包埋率、燕窝肽溶液的苦味值和涩味值变化微弱,几乎不变;表明γ-环糊精可显著改善燕窝肽不愉悦的口感。
由实施例1-3的结果可知,随着γ-环糊精添加比例的增大,燕窝肽溶液的甜味值逐渐增大;由实施例3-5的结果可知,随着燕窝肽溶液中燕窝肽最终浓度的增加,燕窝肽溶液的甜味值亦逐渐增大;这是由于γ-环糊精本身具有微甜口感,可增加燕窝肽溶液的甜度。
由实施例3-5和对比例3-5的结果比对可知,对比例3-5中燕窝肽溶液的苦味值和涩味值分别显著高于实施例3-5中燕窝肽溶液的苦味值和涩味值,且对比例3-5中燕窝肽溶液的苦味值和涩味值随着燕窝肽浓度的增加而明显增大,实施例3-5中燕窝肽溶液的苦味值和涩味值随着燕窝肽浓度的增加变化并不明显;表明γ-环糊精可显著改善燕窝肽不愉悦的口感。
试验2
采用下述方法测定实施例1-3和6以及对比例1-3中燕窝肽溶液,在体外胃肠模拟消化过程中的燕窝肽释放率、分子量分布和消化后的ABTS+自由基清除能力,具体操作如下:
(1)体外消化模拟:取50.0mL样品,用6.0mol/L的HCl溶液调节样品pH至2.00±0.02,将样品加入溶解有125mg胃蛋白酶的HCl溶液中(0.1mol/L、2.5mL),于37℃水浴2h;然后,用1.0mol/L的NaHCO3将上阶段孵育后所得样品pH调节至7.0±0.02,随后加入溶解有125mg胰酶和250mg胆酸的NaHCO3溶液(0.5mol/L、5.0mL),继续按上述条件孵育4h,离心,取上清液。
(2)分子量分布的测定:参考GB 31645-2018胶原蛋白肽的测定方法,采用高效体积排阻色谱法测定样品在消化前后的分子量分布,结果如表3所示。
(3)ABTS+自由基清除能力测试:将7.0mmol/L 2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐水溶液和2.45mmol/L过硫酸钾以1:1(v/v)的比例混合,室温避光反应12~16h,即为ABTS+溶液。随后用1.0mmol/L PBS缓冲液稀释,使其在734nm处吸光值为0.70±0.02。取消化后的微胶囊燕窝肽水或原燕窝肽水0.4mL,加入稀释后的ABTS+溶液4.0mL,避光反应6min后在734nm处测定吸光度A1,以蒸馏水替代ABTS+溶液作为空白测定吸光度A2,以蒸馏水替代样品作为对照组测定吸光度A0,结果如图1所示。
表3
组别 | <1kDa | 1~5kDa | >5kDa |
消化前 | 37.28% | 42.44% | 20.28% |
实施例1消化后 | 51.21% | 35.45% | 13.34% |
实施例2消化后 | 47.64% | 36.58% | 15.78% |
实施例3消化后 | 45.36% | 37.03% | 17.61% |
实施例6消化后 | 45.18% | 37.09% | 17.73% |
对比例1消化后 | 62.48% | 29.15% | 8.37% |
对比例2消化后 | 57.39% | 32.15% | 10.46% |
对比例3消化后 | 69.45% | 24.68% | 5.87% |
由表3中实施例1-3和6以及对比例1-3的结果可知,消化后,1kDa以下分子量的燕窝肽占比有不同程度的升高,1~5kDa和5kDa以上分子量的燕窝肽占比分别有不同程度的下降,表明燕窝肽在消化的过程中被不同程度地水解。
由实施例1和对比例1-2的结果可知,实施例1中燕窝肽分子量的分布变化程度小于对比例1-2中燕窝肽分子量的分布变化程度;由实施例1-3的结果可知,随着γ-环糊精用量的增大,消化后燕窝肽分子量分布变化程度逐渐减小;表明至少部分燕窝肽和γ-环糊精形成了微胶囊,γ-环糊精微胶囊技术能够有效延缓燕窝肽的释放,且保护了燕窝肽的结构,有助于其发挥生理活性。
ABTS+自由基被清除后,其在734nm处的吸光度降低,基于此可测定某物质对ABTS+自由基的清除能力,以表征该物质的抗氧化活性。由图1可知,由实施例1-3中燕窝肽溶液对ABTS+自由基的清除率能力和对比例3中燕窝肽溶液对ABTS+自由基的清除率能力无明显差异,实施例4中燕窝肽溶液对ABTS+自由基的清除率能力和对比例4中燕窝肽溶液对ABTS+自由基的清除率能力无明显差异,实施例5中燕窝肽溶液对ABTS+自由基的清除率能力和对比例5中燕窝肽溶液对ABTS+自由基的清除率能力无明显差异;表明相同燕窝肽含量下,包含燕窝肽微胶囊的燕窝肽溶液与不包含燕窝肽微胶囊的燕窝肽溶液对ABTS+自由基的清除率基本相同,γ-环糊精和燕窝肽形成微胶囊并不会降低燕窝肽的抗氧化活性。
由实施例3-5的结果比对和对比例3-5的结果比对可知,随着燕窝肽含量的增加,包含燕窝肽微胶囊的燕窝肽溶液和不包含燕窝肽微胶囊的燕窝肽溶液对ABTS+自由基的清除率分别显著增加;表明γ-环糊精包合燕窝肽保留了燕窝肽优异的抗氧化活性。
由实施例1-3的结果比对可知,燕窝肽溶液中燕窝肽的最终质量浓度相同的情况下,在不同条件下制备的燕窝肽溶液对ABTS+自由基的清除率无显著性差异。
试验3
采用下述方法测定实施例1-6和对比例1-5中燕窝肽溶液的浊度,具体操作如下:
将样品置于样品瓶中,采用浊度仪测定浊度。
表4
由表4中实施例1-5的结果可知,当燕窝肽与γ-环糊精的比例增大到1:7时,浊度显著增加,这导致燕窝肽溶液的表观品质下降。故燕窝肽与γ-环糊精的比例不能过大。此外,继续增大γ-环糊精的比例,包封率增加不显著,苦味和涩味的降低程度也不显著,综合考虑包封效果、口感和生产成本等因素,燕窝肽和γ-环糊精的质量比优选为1:(3-6)。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合,为使描述简洁,未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述,然而,只要这些技术特征的组合不存在矛盾,都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (14)
1.一种燕窝肽组合物,其特征在于,包含燕窝肽和γ-环糊精,所述燕窝肽和所述γ-环糊精的质量比为1:(3-7)。
2.如权利要求1所述的燕窝肽组合物,其特征在于,所述燕窝肽和所述γ-环糊精的质量比为1:(3-6)。
3.如权利要求1至2任一项所述的燕窝肽组合物,其特征在于,所述燕窝肽组合物为冻干粉或燕窝肽溶液;
可选地,所述冻干粉是将所述燕窝肽和所述γ-环糊精混合后配制成混合溶液,然后将所述混合溶液进行加热、预冻、冻干后制备得到;
可选地,所述燕窝肽溶液是将所述冻干粉溶于水中制备得到;
进一步可选地,所述燕窝肽溶液中含有的燕窝肽的质量百分比浓度为0.01%-1%。
4.一种如权利要求1至3任一项所述的燕窝肽组合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将所述燕窝肽和所述γ-环糊精按照质量比为1:(3-7)混合,制备所述燕窝肽组合物。
5.如权利要求4所述的燕窝肽组合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
将所述燕窝肽和所述γ-环糊精混合,加入溶剂,制备混合溶液;
加热并搅拌所述混合溶液;
将加热后的所述混合溶液进行预冻、冻干,制备所述燕窝肽组合物。
6.一种燕窝肽风味提升和长效释放的方法,其特征在于,包括如下步骤:将燕窝肽和γ-环糊精按照质量比为1:(3-7)混合,制备组合物。
7.如权利要求6所述的燕窝肽风味提升和长效释放的方法,其特征在于,包括如下步骤:
将所述燕窝肽和所述γ-环糊精混合,加入溶剂,制备混合溶液;
加热并搅拌所述混合溶液;
将加热后的所述混合溶液进行预冻、冻干。
8.如权利要求6所述的燕窝肽风味提升和长效释放的方法,其特征在于,所述燕窝肽和所述γ-环糊精的质量比为1:(3-6)。
9.如权利要求7所述的燕窝肽风味提升和长效释放的方法,其特征在于,所述燕窝肽在所述混合溶液中的质量占比为1%-10%。
10.如权利要求7所述的燕窝肽风味提升和长效释放的方法,其特征在于,所述加热的温度为40℃-80℃,时间为60min-180min。
11.如权利要求7所述的燕窝肽风味提升和长效释放的方法,其特征在于,所述预冻的温度为-80℃,时间为6h-24h。
12.如权利要求7所述的燕窝肽风味提升和长效释放的方法,其特征在于,所述冻干的温度为-35℃~-45℃,时间为24h-48h。
13.如权利要求7至12任一项所述的燕窝肽风味提升和长效释放的方法,其特征在于,所述溶剂包括纯化水。
14.如权利要求1至3任一项所述的燕窝肽组合物在制备食品、药品和/或护肤品中的应用。
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Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105661523A (zh) * | 2016-01-30 | 2016-06-15 | 合肥华方医药科技有限公司 | 一种阿胶掩味冻干粉、制备方法及应用 |
CN107920580A (zh) * | 2015-08-26 | 2018-04-17 | 株式会社明治 | 含有胶原蛋白肽及神经酰胺的组合物及其制造方法 |
CN111096462A (zh) * | 2019-12-25 | 2020-05-05 | 青岛正典生物科技有限公司 | 一种绿色生物酶解提纯燕窝多肽及其脱苦的方法 |
-
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107920580A (zh) * | 2015-08-26 | 2018-04-17 | 株式会社明治 | 含有胶原蛋白肽及神经酰胺的组合物及其制造方法 |
CN105661523A (zh) * | 2016-01-30 | 2016-06-15 | 合肥华方医药科技有限公司 | 一种阿胶掩味冻干粉、制备方法及应用 |
CN111096462A (zh) * | 2019-12-25 | 2020-05-05 | 青岛正典生物科技有限公司 | 一种绿色生物酶解提纯燕窝多肽及其脱苦的方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
柏玉香等: "γ-环糊精工业化生产的研究进展", 食品发酵与工业, 20 August 2021 (2021-08-20), pages 279 - 287 * |
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