CN116710563A - 基于副粘病毒病毒载体的抗covid-19重组疫苗 - Google Patents

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Abstract

描述了一种抗COVID‑19的活性或灭活的重组疫苗，其包含新城疫病毒载体和药学上可接受的载体、佐剂和/或赋形剂，所述疫苗的特征在于该病毒载体是能够产生细胞免疫反应的病毒且具有插入的外源SARS‑CoV‑2核苷酸序列。

Description

基于副粘病毒病毒载体的抗COVID-19重组疫苗
技术领域
本发明涉及用于预防和控制冠状病毒病2019(COVID-19)的技术，更具体地，涉及一种重组病毒载体疫苗，该疫苗插入了外源核苷酸序列，该外源核苷酸序列编码具有抗严重急性呼吸综合症冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)的抗原活性的蛋白质，以及药学上可接受的载体、佐剂和/或赋形剂。
背景技术
冠状病毒(Coronaviruses，CoVs)是引起普通感冒和严重疾病的病毒家族，例如中东呼吸综合症(Middle East Respiratory Syndrome，MERS-CoV)和严重急性呼吸综合症(Severe Acute Respiratory Syndrome，SARS-CoV)。严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)是冠状病毒病2019(COVID-19)爆发的病原体。2020年3月11日，世界卫生组织(World Health Organization，WHO)宣布COVID-19为大流行病。
目前没有可用于治疗COVID-19的药物或疫苗，据报道，大量死亡主要发生在患有并发症的老年患者中。截至2020年5月4日，全球报告病例超过340万例，死亡人数超过23.9万例，并继续增加，主要发生欧洲和美国，这两个国家的老年人群感染率较高。迄今为止，遏制COVID-19传播的唯一有效措施包括隔离人群、隔离感染者、暂停大部分商业活动和企业，以及对症状严重的患者进行强化临床治疗。然而，采取此类遏制措施对当今正在与这一大流行病作斗争的所有国家的经济产生了巨大影响。
在寻找针对这种新兴传染病的解决方案的过程中，载体化疫苗提供了一种不涉及整个病原体的活性(活)疫苗方法。根据来自WHO的信息(https://www.who.int/blueprint/priority-diseases/key-action/novel-coronavirus-la ndscape-ncov.pdf，2020年5月4日查询)，一些机构和制药公司正在研发基于人类腺病毒、MVA、VSV和麻疹等载体的抗COVID-19重组疫苗。在这方面，以前在SARS-CoV病毒的情况下，用这些载体描述了几种载体化疫苗。然而，一组发现用MVA/SARS-CoV疫苗免疫的雪貂患上了肝炎(CZUB,Markus等人，Evaluation of modified vaccinia virus Ankara based recombinant SARS vaccineinferrets,Vaccine,2005,第23卷,第17-18期,p.2273-2279)。基于表达SARS-CoV的部分或完整刺突糖蛋白S的缺陷型5型人腺病毒的复制，已经在大鼠和猴子中评估了它们对SARS-CoV的疫苗构筑体的免疫原性(LIU,Ran-Yi等人，Adenoviral expression of a truncatedS1 subunit of SARS-CoV spike protein results in specific humoral immuneresponses against SARS-CoV in rats，Virus Research,2005,第112卷,第1-2期,p.24-31；和GAO,Wentao等人，Effects of a SARS-associated coronavirus vaccine inmonkeys，The Lancet,2003,vol.362,no.9399,p.1895-1896)，但免疫依赖于高剂量的疫苗，且安全性和保护功效尚未得到证实。还描述了用于表达SARS-CoV刺突糖蛋白的3型人类副流感病毒的减毒版本，一种常见的儿科呼吸系统病原体，这表明在仓鼠和非洲绿猴的挑战中，单次鼻内和气管内接种对SARS-CoV具有免疫原性和保护性(BISHT、Himani等人，Severe acute syndrome respiratory coronavirus spike protein Expressed byattenuated vaccinia virus protectively immunizes mice,Proceedings of theNational Academy of Sciences,2004,第101卷,第17期,p.6641-6646)。然而，对任何基于常见病原体的载体的担忧是，成年人群对先前的暴露具有显著的免疫力，这将限制病毒载体的感染和复制并降低其免疫原性。事实上，在啮齿类动物、非人类灵长类动物和人类中比较牛痘病毒载体化的疫苗和5型人腺病毒载体疫苗的免疫原性表明，对载体的预先存在的免疫力大大降低了这些疫苗的免疫原性(KANESA-THASAN,Niranjan等人，Safety andimmunogenicity of NYVAC-JEV and ALVAC-JEV attenuated recombinant Japaneseencephalitis virus-poxvirus vaccines in vaccinia-nonimmune and vaccinia-immune humans，Vaccine,2000,第19卷,第4-5期,p.483-491；SHARPE,Sally等人，Induction of simian immunodeficiency virus(SIV)-specific CTL in rhesusmacaques by vaccination with modified vaccinia virus Ankara expressing SIVtransgenes:influence of pre-existing anti-vector immunity，Journal of GeneralVirology,2001,第82卷,第9期,p.2215-2223；和ZHI,Yan等人，Efficacy of severe acuterespiratory syndrome vaccine based on a nonhuman primate adenovirus in thepresence of immunity against human adenovirus，Human gene therapy,2006,第17卷,第5期,p.500-506)。
另一方面，新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)已被描述为能够潜在用于研发人类疫苗载体的载体，例如在专利文件WO2011059334、US9476033或US10308913中。NDV是副粘病毒科的一种未分段的负链RNA病毒，其天然宿主是鸟类，因此在抗原性上不同于常见的人类病原体。DiNapoli等人的小组，2007(DINAPOLI，Joshua M.等人，Newcastledisease virus,a host range-restricted virus,as a vaccine vector forintranasal immunization against emerging pathogens,Proceedings of theNational Academy of Sciences,2007,第104卷,第23期,p.9788-9793)通过直接分析在SARS-CoV复制高峰期尸检收集的鼻腔和肺组织评估了一种表达SARS-CoV刺突糖蛋白S的NDV作为呼吸系统疫苗的局部载体，其中以SARS-CoV为目标病原体。结果发现，通过呼吸道用两剂这种疫苗免疫的非洲绿猴产生了SARS-CoV的中和抗体效价，其与在动物中观察到的二级反应相当，该动物用不同于SARS-CoV的实验疫苗免疫并用SARS-CoV攻击。当用表达刺突糖蛋白S的NDV免疫的动物接受高剂量SARS-CoV攻击时，在病毒复制高峰期通过尸检对肺组织进行的直接病毒分析显示，与对照动物相比，SARS-CoV肺滴度平均降低236倍或1,102倍。
尽管如此，SARS-CoV刺突糖蛋白S与SARS-CoV-2表现出重要的不同(WALLS，Alexandra C.等人，Structure,function,and antigenicity of the SARS-CoV-2spikeglycoprotein，Cell,2020)。冠状病毒的刺突糖蛋白(S)促进进入细胞，是抗体的主要靶标。根据Wall等人，2020，SARS-CoV-2刺突糖蛋白S在S1/S2亚基之间的边界处有一个弗林蛋白酶(furin)切割位点，该位点在生物发生过程中被加工，并将该病毒与SARS-CoV和SARS-相关的冠状病毒显著区分开。这是首次描述具有蛋白酶多元切割位点的冠状病毒。此外，刺突糖蛋白S具有亚稳态融合前(prefusion)构象，其变为高度稳定的融合后构象，有利于膜的融合，但很难重组生产。这样，就不可能知晓或推断基于NDV或某些其他病毒的抗COVID-19重组载体化疫苗是否对治疗或预防COVID-19有效，以及包括SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的病毒载体的构建是否将是稳定的，即在细胞系中连续传代数次后不会失去复制能力，以达到适合工业规模生产疫苗的病毒滴度。
此外，对于重组疫苗，尚未确定插入SARS-CoV-2基因以产生能够控制大流行病的免疫反应的最有效方法，更不用说新城疫病毒载体。
因此，完全有必要研发一种抗COVID-19的疫苗，为有效控制当前的大流行病提供足够水平的保护。
发明目的
鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种有效的抗冠状病毒病2019(COVID-19)的重组副粘病毒病毒载体疫苗。
本发明的另一个目的是提供重组副粘病毒病毒载体疫苗在控制COVID-19中的用途。
本发明的另一个目的是提供一种副粘病毒病毒载体的构筑体，其插入了编码对急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)具有抗原活性的蛋白质的外源核苷酸序列，其在细胞系中经历连续传代后是稳定的。
这些和其他目的通过根据本发明的抗COVID-19重组副粘病毒病毒载体疫苗而实现。
发明简要描述
为此，发明了一种重组疫苗，其包含基于新城疫病毒的病毒载体以及药学上可接受的载体、佐剂和/或赋形剂，该病毒载体插入了严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的外源核苷酸序列，能够产生细胞免疫反应。
发明详细描述
在本发明的研发过程中，意外发现一种重组疫苗，其包含能够产生细胞免疫反应的副粘病毒病毒载体，和药学上可接受的载体、佐剂和/或赋形剂，该病毒载体插入了编码针对综合症急性呼吸疾病冠状病毒2(SARS-CoV-2)抗原位点的外源核苷酸序列，该疫苗提供了针对冠状病毒病2019(COVID-19)的适当保护。
所使用的病毒载体可以是活性的(活的)或灭活的(死的)，灭活理解为起到病毒载体的作用并包含编码SARS-CoV-2抗原位点的核苷酸序列的重组病毒已经失去了复制的属性。通过本领域熟知的物理或化学程序实现灭活，优选通过用甲醛或β-丙内酯进行化学灭活(Office International des Epizooties 2008,Newcastle Disease.OIE Manual ofDiagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals.Office Internationaldes Epizooties,法国,p.576-589)。另一方面，据了解，活性或活的病毒保持其复制能力。
优选地，所使用的病毒载体是副粘病毒，其选自任何副粘病毒，包括任何血清型、基因型或遗传类别，包括弱毒性(lentogenic)病毒、中毒性(mesogenic)病毒和强毒性(velogenic)病毒。同样，优选使用副粘病毒，可以对其进行反向遗传技术以消除117位的苯丙氨酸和靠近Q114位的碱性氨基酸，它们对副粘病毒或包括在感染鸟类的禽腮腺病毒属(Avulavirus)中的副粘病毒具有致病性，例如新城疫病毒(NDV)或仙台(Sendai)病毒。更优选地，病毒载体是NDV并且所述病毒载体优选地选自弱毒株或中毒株，例如LaSota、B1、QV4、Ulster、Roakin、Komarov毒株。优选地，重组病毒来自LaSota毒株。甚至更优选地，NDV病毒载体包含SEQ ID NO：6或SEQ ID NO：14。
关于编码SARS-CoV-2抗原位点的外源核苷酸序列，在本发明的情况下，使用的核苷酸序列优选选自编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的序列或编码其衍生序列的序列。SARS-CoV-2刺突糖蛋白S包含两个功能性亚基，负责与宿主细胞受体结合(S1亚基)和病毒与细胞膜的融合(S2亚基)。在本发明的一优选实施方式中，编码SARS-CoV-2抗原位点的外源核苷酸序列选自编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S2亚基的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1或S2亚基的至少一个片段的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列具有至少80％同一性的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S2亚基的序列具有至少80％同一性的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列具有至少80％同一性的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1或S2亚基的至少一个片段的序列具有至少80％同一性的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列，其缺少位于与S1序列的第1至460位氨基酸对应的核苷酸之间的至少一个表位；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列，其缺少位于与S1序列的第1至460位氨基酸对应的核苷酸之间的至少一个表位；或编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列，通过在S2亚基中包含至少两个脯氨酸取代而稳定在其融合前的形式。在一优选实施方式中，位于与S1序列的第1至460位氨基酸对应的核苷酸之间的表位选自氨基酸序列SEQ ID NO：7、SEQID NO：8、SEQ ID NO：9或SEQ ID NO：10。在其它优选实施方式中，编码SARS-CoV-2抗原位点的外源核苷酸序列选自与序列SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：5中的任一个具有至少80％同一性的序列。在进一步优选实施方式中，编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列选自与翻译成氨基酸序列SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:13的任何一个的任一序列具有至少80％同一性的序列，该SARS-CoV-2刺突糖蛋白S通过在S2亚基中包括至少两个脯氨酸取代而稳定在其融合前的形式。
编码本发明疫苗的SARS-CoV-2抗原位点的外源核苷酸序列可以通过感兴趣的核苷酸序列的化学合成来制备，以便随后可以将其插入NDV病毒载体中。外源核苷酸序列的插入使用分子生物学的标准克隆技术进行，并且外源核苷酸序列可以插入到NDV基因组的任何基因间区域。将由此产生的感染性克隆转染到细胞培养物中以产生重组病毒或亲本病毒(parent virus)。
病毒通过在任何适合生长的系统(例如SPF鸡胚或商业细胞系)中或专门为病毒生长而设计的任何系统中连续传代进行复制，直到达到实现抗原反应所需的病毒浓度，优选在106.0和1010.0CEID50％(鸡胚感染剂量(Chicken Embryo Infectious Dose)50％)/mL之间。优选的是，一旦从细胞培养物中拯救出来，病毒在用于生长的系统中至少三次连续传代后是稳定的，从而实现工业规模的稳定生产。对于病毒分离，将病毒从适合生长的系统中取出并与细胞的或其他成分分离，通常采用众所周知的净化程序，如过滤、超滤、梯度离心、超速离心和柱层析，并可根据需要使用众所周知的程序进一步纯化，例如噬菌斑试验(plaqueassays)。
在疫苗是活性的实施方式中，它是天然的弱毒的活性疫苗病毒或通过本领域已知的方法减毒的疫苗病毒。另一方面，当疫苗被灭活时，一旦已经达到实现抗原反应所需的病毒浓度，病毒就会被灭活。优选地，通过本领域公知的物理或化学程序进行灭活，优选通过用甲醛、β-丙内酯或二乙烯亚胺(binary ethyleneimine，BEI)进行化学灭活。
用于本发明疫苗的药学上可接受的载体优选是水溶液或乳液。更具体地，在活性病毒疫苗的情况下优选水溶液，而在灭活疫苗的情况下优选使用的载体与免疫佐剂相容，该免疫佐剂用于增强对灭活疫苗的免疫应答。在疫苗被灭活的另一实施方式中，疫苗优选伴随有药学上可接受的佐剂。在使用佐剂的实施方式中，优选基于角鲨烯(squalene)的佐剂；优选称为或/>或/>的那些，诸如CpG-1018的TLR-9受体拮抗剂，或诸如R-DOTAP的阳离子脂质。
关于疫苗的施用，可以通过喷雾或雾化进行肌肉内、鼻内、皮下施用，对于每种情况使用适当的方式和形式，并取决于它是活性疫苗还是灭活疫苗。优选地，至少一次肌肉内和/或鼻内地进行疫苗施用。
在一个特别优选的实施方式中，至少两次施用疫苗以产生更高的免疫反应，通过维持施用途径或改变施用途径，根据所选择的施用途径施用的疫苗体积，病毒浓度优选在每剂106.0和108.5CEID50％/mL之间。优选地，疫苗以活性或灭活形式肌肉内施用两次，以其活性形式鼻内施用两次，或鼻内施用一次，随后肌肉内施用一次。在施用两次的实施方式中，疫苗的施用可以在第一次和第二次施用之间的7至35天的时期内进行，优选地在第一次和第二次施用之间的14至28天的时期内进行，并且更优选地它第一次以其活性形式通过鼻内途径施用，第二次以其活性或灭活形式通过肌肉内途径施用。
在本发明的另一个方面，已经发现可以鼻内施用一定剂量的活性病毒，该活性病毒包含严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的抗原位点，优选本发明的重组副粘病毒，随后是第二肌肉剂量的SARS-CoV-2抗原，实现了高效的免疫反应。优选地，第二剂的抗原是与第一剂相同的活性病毒，但是一旦已通过鼻内途径进行免疫，本领域技术人员可以推断可以肌肉内递送任何其他SARS-CoV-2抗原。仍更优选地，第二剂的抗原是与第一剂相同的灭活形式的病毒。
优选地，本发明的疫苗被配制为每剂0.5mL的体积，其含有与其肌肉内应用相对应的病毒浓度，无论是活性形式还是灭活形式。在施用途径是鼻内的实施方式中，优选的每剂体积是0.2mL。
此外，根据本发明原理的疫苗不会在哺乳动物中引起不良事件。
通过以下实施例将更好地理解本发明，这些实施例仅用于说明目的以允许透彻理解本发明的优选实施方式，并不意味着不存在可以基于上面的详细描述来实施的其他未示出的实施方式。
实施例1
NDV LaSota载体的生成
为了克隆NDV毒株LaSota的RNA基因组并由此产生质粒DNA形式的病毒载体，其被称为pLS11801140(SEQ ID NO：6)，首先通过三唑法(triazole method)从NDV毒株LaSota中提取总病毒RNA。从纯化的RNA，使用先前纯化的总RNA作为模板进行病毒基因组的cDNA(互补DNA)的合成。为了克隆NDV基因组的所有基因(15,183个碱基对(bp))，通过PCR扩增了7个具有“重叠”末端和内聚限制位点的片段。片段1(F1)跨越核苷酸(nt)1-1755，F2跨越nt1-3321，F3包含nt1755-6580，F4跨越6,151-10,210，F5跨越nt7,381-11,351，F6跨越nt11,351-14,995以及F7包含nt14,701-15,186。这7个片段使用标准连接技术组装到称为pLS11801140(SEQ ID NO：6)的克隆载体中，这允许重建NDV LaSota基因组，克隆后在P和M基因之间包含一个独特的SacII限制性位点，其用于在载体的该病毒区域中克隆任何感兴趣的基因。此外，生成了称为pLS11801140_L289A(SEQ ID NO:14)的另一个载体，其遵循上述针对pLS11801140的相同过程，但在NDV基因组的F基因中包含氨基酸L289A。
实施例2
在载体pNDVLS11801140的SacII位点克隆SARS-CoV-2的各种外源核苷酸序列
为了克隆源自SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的各种外源核苷酸序列，基于武汉-湖-1(Wuhan-Hu-1)株(登录号NC_045512.2)，以下6个版本的SARS-CoV-2刺突糖蛋白S基因使用Vector软件在计算机上进行了组装：
刺突S1/S2 SARS-CoV-2：未修饰的SARS-CoV-2刺突糖蛋白S(具有S1和S2亚基)的序列(SEQ ID NO：1)。
刺突S1 SARS-CoV-2/TMCyto：SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列与NDV的F基因的跨膜和细胞质序列(TMCyto)融合(SEQ ID NO：2)。
刺突S1/S2 SARS-CoV-2/TMCyto：SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的胞外域的序列与NDV的F基因的跨膜和细胞质序列(TMCyto)融合(SEQ ID NO：3)。
刺突S1/S2 SARS-CoV-2/PreF：SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的胞外域序列与NDV的F基因的跨膜和细胞质序列(TMCyto)融合，经过修饰，使NDV蛋白F获得融合前构象。刺突糖蛋白S的切割位点从RRAR突变为A，并且在氨基酸K986P和V987P中引入了2个脯氨酸突变(SEQ IDNO：4)。
刺突S1/S2 SARS-CoV-2/PreF/-ADE：SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的胞外域序列与NDV的F基因的跨膜和细胞质序列(TMCyto)融合，经过修饰，使得NDV蛋白F获得融合前构象并避免抗体依赖性感染(antibody dependent infection，ADE)扩增。刺突糖蛋白S的切割位点从RRAR突变为A，并在氨基酸K986P和V987P中引入了2个脯氨酸突变，并合成引入了与位于363至368位的氨基酸对应的表位的缺失(SEQ ID NO：5)。
刺突S1/S2 SARS-CoV-2/Hexapro：SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的胞外域序列稳定在其融合前形式，另外四个脯氨酸分布在合成基因中，以使由NDV表达的刺突糖蛋白具有更高的稳定性(SEQ ID NO：11)。
最初，上述序列被独立地克隆到pUC载体中。然后通过标准基因工程技术将pUC插入物亚克隆到独特的限制性位点SacII中，该位点位于质粒pLS11801140(SEQ ID NO:6)中包含的NDV LaSota基因组的P和M基因之间。质粒pLS11801140(SEQ ID NO：6)还包含所有转录和翻译信号序列，因此可以转录和翻译基因的五个版本中的每一个，从而生成SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的6个不同版本。作为克隆过程的结果，产生了六个NDV DNAc(互补DNA)克隆，分别称为：
pNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2。
pNDVLS/刺突S1 SARS-CoV-2/TMCyto。
pNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/TMCyto。
pNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/PreF。
pNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/PreF/-ADE。
pNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/Hexapro。
每个生成的质粒都通过PCR进行表征，以检测每个版本的SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的存在。它们的特征还在于限制酶消化，获得预期的限制模式。通过测序确认了每个版本的SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的PCR产物的稳定性和序列。
实施例4
重组病毒的产生
上文实施例中生成的每个质粒均通过化学方法进行转化，然后在37后在连续搅拌下在大肠杆菌(E.coli)中独立繁殖16小时。通过标准分子生物学程序纯化每个克隆的DNA。通过在Hep2和A-549细胞中使用脂质体，将十微克(将十微纯化的DNA用于转染实验。转染后48小时，从上清液中回收6次转染产生的每种重组病毒，并用于在无特定病原体(specificpathogen-free，SPF)鸡胚中进行病毒繁殖测定，以用于随后的疫苗制备。
实施例5
重组病毒的繁殖
用生产菌种接种SPF鸡胚，对于在前面的实施例中制备的每种重组病毒预先确定感染剂量。鸡胚在37确定孵育48小时，每天检查死亡率。这段时间过后，将活胚胎从一天冷藏到下一天，最好冷藏24小时；在无菌条件下收集羊膜尿囊液(amnio-allantoic fluid，FAA)，并通过离心净化。FAA用于通过血凝作用来表征从大肠杆菌细胞培养液中拯救的重组病毒的产生，并且通过RT-PCR，使用特异性引物扩增位于P和M基因之间的序列，并证明在每种回收的重组病毒中存在克隆的各种版本的SARS-CoV-2刺突糖蛋白S。一旦通过RT-PCR确定了同一性，就通过对每个插入物进行测序来确定各种插入物的稳定性。从SPF鸡胚的转染和繁殖试验中，产生了以下6种重组病毒：
rNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2。
rNDVLS/刺突S1 SARS-CoV-2/TMCyto。
rNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/TMCyto。
rNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/PreF。
rNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/PreF/-ADE。
rNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/Hexapro。
实施例6
制造抗COVID-19的活性和灭活疫苗
如先前本领域中所描述的，从FAA中纯化先前实施例中制备的病毒(SANTRY，LisaA.等人，Production and purification of high-titer Newcastle disease virusfor use in preclinical mouse models of cancer，Molecular Therapy-Methods&Clinical Development,2018,第9卷,p.181-191；和NESTOLA、Piergiuseppe等人，Improvedvirus purification processes for vaccines and gene therapy，Biotechnology andBioengineering,2015,第112卷,第5期,p.843-857.)。
制备活性疫苗以在水溶液中通过肌肉内和鼻内途径施用。为此，将FAA与稳定溶液(TPG)混合，以便根据疫苗中所需的体积获得具有四种不同浓度的三种疫苗：每个剂量提供至少107.0CEID50％/mL，每个剂量提供至少107.5CEID50％/mL，每个剂量提供至少108.0CEID50％/mL，以及每个剂量提供至少108.5CEID50％/mL。
表1显示了1L TPG稳定溶液的组成。
表1
成分 量
海藻糖二水合物 75.0g
磷酸氢二钠(Dibasic Sodium Phosphate) 1.30g
磷酸二氢钾(Monobasic Potassium Phosphate) 0.50g
谷氨酸单钠 0.90g
注射用水 1,000mL
同样，利用与活性疫苗相同的技术纯化的病毒，滴加10％甲醛的PBS溶液进行化学灭活，制成水-油-水型乳化液作为佐剂，在猪身上进行试验。油相相当于配方的25％，内部水相相当于配方的25％，且外部水相相当于配方的50％。使用无菌纯化水和司盘80和吐温80型表面活性剂制备水相。使用矿物油和司盘80和吐温80型表面活性剂制备油相。因此，获得了具有四种不同浓度的四种疫苗：每个剂量提供至少107.0CEID50％/mL，每个剂量提供至少107.5CEID50％/mL，每个剂量提供至少108.0CEID50％/mL，和每个剂量提供至少108.5CEID50％/mL。为制备乳液，在不断搅拌下将水相缓慢加入油相中。为了达到指定的颗粒尺寸，使用了均化器。
实施例7
连续传代中构筑体的稳定性测试
实施例7A-具有两个脯氨酸的蛋白S(刺突)的稳定性
如在实施例5中所述，根据实施例5制备的两个构筑体在SPF胚胎中进行连续传代，并测试回收的病毒以确认它们的稳定性和同一性，特别是关于插入的SARS-CoV-2抗原所获得的病毒滴度和持久性以及完整性。
称为rNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/PreF的实施例5的构筑体包含基因胞外域，它将融合到新城疫病毒F(融合)基因的跨膜和细胞质区(TMC或TMCyto)。这种融合确保了由该嵌合基因(胞外域+TMCyto)编码的刺突糖蛋白被整合到新城疫衣壳(Newcastle capsid)中，并作为主要抗原暴露在病毒表面。该版本中嵌合基因的核苷酸序列具有针对人类优化的密码子使用。去除了弗林蛋白酶(F)的切割位点，并在序列中引入了两个脯氨酸，以确保最终蛋白质的融合前结构。
根据文献和以往基于SARS-CoV病毒的研究，这种具有两个脯氨酸的结构能够稳定刺突糖蛋白的结构，从而产生具有正确构象的抗体来中和SARS-CoV-2病毒。
一旦生成，则通过RT-PCR对获得的亲本病毒进行表征，以确保克隆的刺突基因存在于NDV基因组中。新城疫基因组中刺突基因的同一性和稳定性也通过测序得到证实。免疫过氧化物酶也证实了亲本病毒表达的刺突蛋白的表达。
该亲本病毒通过在10天大的SPF鸡胚中连续传代两次以增加滴度并产生主种子，并在鸡胚中再传代一次以产生生产种子，从中配制实验疫苗。
主种子、生产种子和产生的实验疫苗的RT-PCR表征测试结果呈阳性，与插入的刺突基因对应的条带被扩增。然而，当对每一代的重组病毒进行测序时，发现了刺突基因中的三个突变是相同的。转录终止密码子位于亚基2的编码序列中，另外两个突变位于羧基末端区域。
在用于检测主种子、生产种子和实验疫苗中刺突糖蛋白表达的免疫过氧化物酶分析中，观察到表达逐渐降低。传代越多，抗刺突抗体检测到的蛋白质的量就越少，以至于实验疫苗导致刺突蛋白的百分比几乎为零。这些结果表明刺突基因可以通过RT-PCR检测到并保持插入到载体中；然而，随着鸡胚中的每一次传代，基因的稳定性被破坏。
尽管如此，由于主种子通过免疫过氧化物酶具有良好的刺突表达结果，因此该材料被用于配制用于猪临床前试验的疫苗。
然而，对0和21日龄接种疫苗的猪的血清分析表明，由实施例5的rNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/PreF版本的重组病毒表达的刺突蛋白未诱导特异性IgG抗体，也不诱导针对SARS-CoV-2的特异性中和抗体。
这一结果清楚地表明，尽管在序列中设计有两个脯氨酸的结构，但刺突蛋白的生成受到了损害，导致具有三维结构的刺突蛋白的表达不适合诱导中和抗体，与预期结果相反。
实施例7B-具有6个脯氨酸的蛋白S(刺突)的稳定性
rNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/Hexapro版本的刺突基因保留了与新城疫病毒F(融合)基因的跨膜和细胞质区(TMC或TMCyto)融合的刺突基因的胞外域。嵌合基因的核苷酸序列具有针对人类优化的密码子使用。去除了弗林蛋白酶(F)的切割位点，并在序列中引入了六个脯氨酸，以确保最终蛋白质的六-pro结构。
应用相同的工艺方法来生成六-pro亲本病毒和随后的主种子、生产种子和实验疫苗。使用该设计，根据实施例7A进行的相同测试，RT-PCR、测序、免疫过氧化物酶和SDS-PAGE(Coomassie)导致了与此类实施例7A的构筑体不同的quimeric刺突六-Pro蛋白的同一性和稳定性呈阳性。
实施例5中的重组病毒rNDVLS/刺突S1/S2 SARS-CoV-2/Hexapro用于SPF猪的临床前试验，针对SARS-CoV-2的IgG抗体和中和抗体检测结果呈阳性。
实施例8
评估抗COVID-19的活性疫苗在猪体内产生的安全性和免疫原性水平的研究
根据本发明的原理，进行了一项研究以评估疫苗在SPF猪体内的安全性和免疫原性。
对于这项研究，使用实施例1中生成的质粒pLS11801140_L289A(SEQ ID NO：14)和刺突S1/S2 SARS-CoV-2/Hexapro版本设计了一种病毒，遵循先前实施例2-6中描述的过程。
通过不同的施用途径(口服、肌肉内及其组合)，将疫苗配制为四个剂量：每个剂量107.0CEID50％/mL、107.5CEID50％/mL、108.0CEID50％/mL、108.5CEID50％/mL活病毒或活性病毒，两次施用剂量。安全水平通过测量疫苗施用后是否存在不良反应来确定。通过用于检测针对SARS-CoV-2的RBD蛋白(28dpv)的中和抗体(GenScript)的ELISA测试来比较两个剂量的疫苗施用后产生的免疫反应来评估免疫原性。表3显示了研究设计。
表3
其中：
IN＝鼻内，
IM＝肌肉内，
X＝1剂。
在不同实验组的研究中使用了总共62头相似年龄/体重(3-4周龄)的SPF猪。根据动物的体重将动物随机放置在隔离隔间中。在任何动物中均未观察到相关不良反应。
在整个研究期间观察动物的临床体征。监测的临床体征是每天早上呼吸异常、行为异常和直肠温度。出于动物保护的原因，每天不止一次观察动物。
临床报告中仅在第10组(灭活疫苗)观察到其中一只仔猪在接种后30秒出现不良反应，表现为流涎、抑郁和肌肉震颤；仔猪立即接受治疗，用冷水弄湿并评估反应；不良反应后5分钟，猪未出现严重临床表现，持续抑郁1小时，恢复正常。对于第二次疫苗应用，这头猪没有表现出任何种类的疫苗接种后不良反应。
整个试验过程中，各组仔猪日常检查均无明显临床表现。这表明使用的不同名称和施用途径的疫苗都是安全的，并且符合安全性测试。
为了确定病毒载量，采集样本(接种前第0天、第一次接种后1天和第二次接种后1天，鼻拭子)以根据疫苗病毒的遗传物质载量评估疫苗的存在。通过针对载体病毒(NDV)的RT-PCRtrq以及检测同一载体中编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白的插入物，评估了在处死后在肺组织样本中的遗传载量。
在基线取样和首次接种疫苗后24小时，所有样本对针对载体病毒(NDV)的遗传物质的检测均为阴性。
为了评估抗SARS-CoV-2刺突的抗体，使用了FDA授权的商业ELISA试剂盒(GenScript)，它以非功能性方式检测针对SARS-CoV-2病毒RBD的中和抗体。
通过产生针对SARS-CoV-2的RBD蛋白的中和抗体(GenScriptcPass)来评估疫苗接种诱导的免疫原性程度。在第一次接种疫苗后第0、21和28天采集血清学样本。第一次接种疫苗后35天各组的结果如下表4所示。
表4
应该注意的是，为了比较这些结果，纳入了在进行测试的同时受SARS-CoV-2影响患有该病的患者的血清，确定为Cx(+)，并且观察到对于几个组，平均滴度甚至高于恢复期患者的平均滴度。
此外，对于接受两次鼻内疫苗的第1组，使用口腔液进行相同的测试以检测局部免疫的可能性，在通过鼻内途径接受第一剂和通过肌肉内途径接受第二剂的第9组中观察到协同效应。在这方面，虽然没有可比较的结果，但第28天和第35天时第1组口腔液中的抗体水平呈阳性表明：当两剂鼻内施用时，在主要感染途径(上呼吸系统粘膜)中预防SARS-CoV-2病毒感染的可能性。
类似地，第二次施用后14天，第一次接种疫苗后第35天，所有存活的动物都被人道处死，并收集肺、淋巴结、肝脏、肾脏和脾脏样本，以通过RT-PCRtrq确定疫苗病毒的存在，以及使用平面测量技术和肺的宏观和微观变化对可能的肺部病变进行组织病理学评估，疫苗病毒存在于鼻内途径的肺部和肌肉内施用的区域。
在对猪进行人道主义处死和尸检后，发现所有动物的肺部均未显示出提示病毒感染的病变，因此使用的活性疫苗未显示出病变。在肌肉内疫苗施用的区域中，没有检测到活动性或慢性炎症过程，也没有发现纤维化或脓肿区域，因此表明通过鼻内或肌肉内途径施用疫苗不会在疫苗应用区域产生肺水平或组织水平的病变。
从本实施例可以看出，按照本发明的原理，可以获得稳定的重组病毒用于大规模工业化生产，其能够通过多种途径以活性或灭活形式施用，在哺乳动物模型中表现出安全性和免疫原性。
在同一实施例中，证明可以通过鼻内途径施用一剂包含SARS-CoV-2抗原位点的活性病毒(例如在实施例8中测试的实施方式中)，然后通过肌肉内途径施用第二剂同样的重组病毒。从该实验中，本领域技术人员可以推断，可以通过肌肉内途径施用任何其他SARS-CoV-2抗原以获得保护，因为已经表明通过鼻内途径施用第一剂疫苗足以刺激通过肌肉内途径对病毒抗原的全身反应，对病毒抗原的全身反应可以通过施用不同的疫苗来实现。
因此，即使当已经说明和描述本发明的具体实施方式时，也应强调可以进行多种修改，例如所使用的病毒作为病毒载体，以及使用的外源病毒序列。因此，除非根据现有技术和所附权利要求要求，否则本发明不应被解释为受到限制。
序列表
<110> 阿维-梅克斯实验室公司
<120> 基于副粘病毒病毒载体的抗COVID-19重组疫苗
<130> PCT21/218
<160> 14
<170> PatentIn 版本 3.5
<210> 1
<211> 3870
<212> DNA
<213> SARS-CoV2
<400> 1
ccgcggttag aaaaaatacg ggtagaaccg ccaccatgtt tgtttttctt gttttattgc 60
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atataaaatg gccatggtac atttggctag gttttatagc tggcttgatt gccatagtaa 3720
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<210> 2
<211> 2268
<212> DNA
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tttttccata ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc aagtcagagg 240
tggcgaaacc cgacaggact ataaagatac caggcgtttc cccctggaag ctccctcgtg 300
cgctctcctg ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct cccttcggga 360
agcgtggcgc tttctcatag ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta ggtcgttcgc 420
tccaagctgg gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc cttatccggt 480
aactatcgtc ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat cgccactggc agcagccact 540
ggtaacagga ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt gaagtggtgg 600
cctaactacg gctacactag aagaacagta tttggtatct gcgctctgct gaagccagtt 660
accttcggaa aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc tggtagcggt 720
ggtttttttg tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca agaagatcct 780
ttgatctttt ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta agggattttg 840
gtcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt 900
aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt 960
gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc 1020
gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg 1080
cgagacccac gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc cggaagggcc 1140
gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg 1200
gaagctagag taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca 1260
ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga 1320
tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct 1380
ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg 1440
cataattctc ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca 1500
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cgggataata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct 1620
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atactcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga 1860
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aaagtgccac ctgacgtcta agaaaccatt attatcatga cattaaccta taaaaatagg 1980
cgtatcacga ggccctttcg tctcgcgcgt ttcggtgatg acggtgaaaa cctctgacac 2040
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cgtcagggcg cgtcagcggg tgttggcggg tgtcggggct ggcttaacta tgcggcatca 2160
gagcagattg tactgagagt gcaccataaa attgtaaacg ttaatatttt gttaaaattc 2220
gcgttaaatt tttgttaaat cagctcattt tttaaccaat aggccgaaat cggcaaaatc 2280
ccttataaat caaaagaata gcccgagata gggttgagtg ttgttccagt ttggaacaag 2340
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ttaccaaaca gagaatccgt gagttacgat aaaaggcgaa ggagcaattg aagtcgcacg 2940
ggtagaaggt gtgaatctcg agtgcgagcc cgaagcacaa actcgagaaa gccttctgcc 3000
aacatgtctt ccgtatttga tgagtacgaa cagctcctcg cggctcagac tcgccccaat 3060
ggagctcatg gagggggaga aaaagggagt accttaaaag tagacgtccc ggtattcact 3120
cttaacagtg atgacccaga agatagatgg agctttgtgg tattctgcct ccggattgct 3180
gttagcgaag atgccaacaa accactcagg caaggtgctc tcatatctct tttatgctcc 3240
cactcacagg taatgaggaa ccatgttgcc cttgcaggga aacagaatga agccacattg 3300
gccgtgcttg agattgatgg ctttgccaac ggcacgcccc agttcaacaa taggagtgga 3360
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agcaacggaa ccccgttcgt cacagccggg gccgaagatg atgcaccaga agacatcacc 3480
gataccctgg agaggatcct ctctatccag gctcaagtat gggtcacagt agcaaaagcc 3540
atgactgcgt atgagactgc agatgagtcg gaaacaaggc gaatcaataa gtatatgcag 3600
caaggcaggg tccaaaagaa atacatcctc taccccgtat gcaggagcac aatccaactc 3660
acgatcagac agtctcttgc agtccgcatc tttttggtta gcgagctcaa gagaggccgc 3720
aacacggcag gtggtacctc tacttattat aacctggtag gggacgtaga ctcatacatc 3780
aggaataccg ggcttactgc attcttcttg acactcaagt acggaatcaa caccaagaca 3840
tcagcccttg cacttagtag cctctcaggc gacatccaga agatgaagca gctcatgcgt 3900
ttgtatcgga tgaaaggaga taatgcgccg tacatgacat tacttggtga tagtgaccag 3960
atgagctttg cgcctgccga gtatgcacaa ctttactcct ttgccatggg tatggcatca 4020
gtcctagata aaggtactgg gaaataccaa tttgccaggg actttatgag cacatcattc 4080
tggagacttg gagtagagta cgctcaggct cagggaagta gcattaacga ggatatggct 4140
gccgagctaa agctaacccc agcagcaagg aggggcctgg cagctgctgc ccaacgggtc 4200
tccgaggaga ccagcagcat agacatgcct actcaacaag tcggagtcct cactgggctt 4260
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aaacatccca atgccctcac ccgtagtcga cccctcgatt tgcggctcta tatgaccaca 4560
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aaagtacggg tagaagaggg atattcagag atcagggcaa gtctcccgag tctctgctct 4740
ctcctctacc tgatagacca ggacaaacat ggccaccttt acagatgcag agatcgacga 4800
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ggagaagcat gggagcatcc agccaccggc cagtcaagac aaccccgatc gacaggacag 4980
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ccctggaaac cagggcacag acgtgaacac agcatatcat ggacaatggg aggagtcaca 5340
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tgtatctgcg gatcatgtcc agccacctgt agactttgtg caagcgatga tgtctatgat 5460
ggaggcgata tcacagagag taagtaaggt tgactatcag ctagatcttg tcttgaaaca 5520
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catggaagcc aacttgggaa tgatgaagat tctggatccc ggttgtgcca acatttcatc 5640
tctgagtgat ctacgggcag ttgcccgatc tcacccggtt ttagtttcag gccctggaga 5700
cccctctccc tatgtgacac aaggaggcga aatggcactt aataaacttt cgcaaccagt 5760
gccacatcca tctgaattga ttaaacccgc cactgcatgc gggcctgata taggagtgga 5820
aaaggacact gtccgtgcat tgatcatgtc acgcccaatg cacccgagtt cttcagccaa 5880
gctcctaagc aagttagatg cagccgggtc gatcgaggaa atcaggaaaa tcaagcgcct 5940
tgctctaaat ggctaattac tactgccaca cgtagcgggt ccctgtccac tcggcatcac 6000
acggaatctg caccgagttc ccccccgcgg acccaaggtc caactctcca agcggcaatc 6060
ctctctcgct tcctcagccc cactgaatga tcgcgtaacc gtaattaatc tagctacatt 6120
taagattaag aaaaaatacg ggtagaattg gagtgcccca attgtgccaa gatggactca 6180
tctaggacaa ttgggctgta ctttgattct gcccattctt ctagcaacct gttagcattt 6240
ccgatcgtcc tacaagacac aggagatggg aagaagcaaa tcgccccgca atataggatc 6300
cagcgccttg acttgtggac tgatagtaag gaggactcag tattcatcac cacctatgga 6360
ttcatctttc aagttgggaa tgaagaagcc accgtcggca tgatcgatga taaacccaag 6420
cgcgagttac tttccgctgc gatgctctgc ctaggaagcg tcccaaatac cggagacctt 6480
attgagctgg caagggcctg tctcactatg atagtcacat gcaagaagag tgcaactaat 6540
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gtggcaaaca aatactcatc agtgaatgca gtcaagcacg tgaaagcgcc agagaagatt 6660
cccgggagtg gaaccctaga atacaaggtg aactttgtct ccttgactgt ggtaccgaag 6720
agggatgtct acaagatccc agctgcagta ttgaaggttt ctggctcgag tctgtacaat 6780
cttgcgctca atgtcactat taatgtggag gtagacccga ggagtccttt ggttaaatct 6840
ctgtctaagt ctgacagcgg atactatgct aacctcttct tgcatattgg acttatgacc 6900
actgtagata ggaaggggaa gaaagtgaca tttgacaagc tggaaaagaa aataaggagc 6960
cttgatctat ctgtcgggct cagtgatgtg ctcgggcctt ccgtgttggt aaaagcaaga 7020
ggtgcacgga ctaagctttt ggcacctttc ttctctagca gtgggacagc ctgctatccc 7080
atagcaaatg cttctcctca ggtggccaag atactctgga gtcaaaccgc gtgcctgcgg 7140
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aaataagctg cgtctctgag attgcgctcc gcccactcac ccagatcatc atgacacaaa 7320
aaactaatct gtcttgatta tttacagtta gtttacctgt ctatcaagtt agaaaaaaca 7380
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ggagacaaag ccgtcaacat atacacctca tcccagacag gatcaatcat agttaagctc 7620
ctcccgaatc tgcccaagga taaggaggca tgtgcgaaag cccccttgga tgcatacaac 7680
aggacattga ccactttgct cacccccctt ggtgactcta tccgtaggat acaagagtct 7740
gtgactacat ctggagggcg gagacagagg cgctttatag gcgccattat tggcggtgtg 7800
gctcttgggg ttgcaactgc cgcacaaata acagcggccg cagctctgat acaagccaaa 7860
caaaatgctg ccaacatcct ccgacttaaa gagagcattg ccgcaaccaa tgaggctgtg 7920
catgaggtca ctgacggatt atcgcaacta gcagtggcag ttgggaagat gcagcagttt 7980
gttaatgacc aatttaataa aacagctcag gaattagact gcatcaaaat tgcacagcaa 8040
gttggtgtag agctcaacct gtacctaacc gaattgacta cagtattcgg accacaaatc 8100
acttcacctg ctttaaacaa gctgactatt caggcacttt acaatctagc tggtggaaat 8160
atggattact tattgactaa gttaggtgta gggaacaatc aactcagctc attaatcggt 8220
agcggcttaa tcaccggtaa ccctattcta tacgactcac agactcaact cttgggtata 8280
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gtcggttctg tgatagaaga acttgacacc tcatactgta tagaaactga cttagattta 8460
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aatacgtcgg cctgtatgta ctcaaagacc gaaggcgcac ttactacacc atacatgact 8580
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ggtatcatat cgcaaaacta tggagaagcc gtgtctctaa tagataaaca atcatgcaat 8700
gttttatcct taggcgggat aactttaagg ctcagtgggg aattcgatgt aacttatcag 8760
aagaatatct caatacaaga ttctcaagta ataataacag gcaatcttga tatctcaact 8820
gagcttggga atgtcaacaa ctcgatcagt aatgctttga ataagttaga ggaaagcaac 8880
agaaaactag acaaagtcaa tgtcaaactg actagcacat ctgctctcat tacctatatc 8940
gttttgacta tcatatctct tgtttttggt atacttagcc tgattctagc atgctaccta 9000
atgtacaagc aaaaggcgca acaaaagacc ttattatggc ttgggaataa tactctagat 9060
cagatgagag ccactacaaa aatgtgaaca cagatgagga acgaaggttt ccctaatagt 9120
aatttgtgtg aaagttctgg tagtctgtca gttcagagag ttaagaaaaa actaccggtt 9180
gtagatgacc aaaggacgat atacgggtag aacggtaaga gaggccgccc ctcaattgcg 9240
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gcgccgttag ccaagttgcg ttagagaatg atgaaagaga ggcaaaaaat acatggcgct 9360
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cccttttata tagcatgggg gctagcacac ctagcgatct tgtaggcata ccgactagga 9480
tttccagggc agaagaaaag attacatcta cacttggttc caatcaagat gtagtagata 9540
ggatatataa gcaagtggcc cttgagtctc cgttggcatt gttaaatact gagaccacaa 9600
ttatgaacgc aataacatct ctctcttatc agattaatgg agctgcaaac aacagtgggt 9660
ggggggcacc tatccatgac ccagattata taggggggat aggcaaagaa ctcattgtag 9720
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ctctgcgttc catcaacctg gacgacaccc aaaatcggaa gtcttgcagt gtgagtgcaa 10020
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actcagctgt ccctacgcgg atggtacatg ggaggttagg gttcgacggc cagtaccacg 10140
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ctgcagtatt cgatagcaca tcccgcagtc gcattactcg agtgagttca agcagtacca 10860
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acatgtctta cccaggaact tgtattgatg tatgcagata tgatggaggg cagagatatg 12000
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cccaatgata tagcagaatc cgtgactcat gcaatcgcta ctgtattctc tggtttagaa 12300
cagaatcaag cagctgagat gttgtgtctg ttgcgtctgt ggggtcaccc actgcttgag 12360
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atggcggaag ggatcctagc cgatcagatt gcacctttct ttcagggaaa tggagtcatt 13020
caggatagca tatccttgac caagagtatg ctagcgatga gtcaactgtc ttttaacagc 13080
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gccaacattg cctctactgt agcacggcta tgcgagaacg ggcttcccaa agacttctgt 13860
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<212> PRT
<213> SARS-CoV-2
<400> 13
Met Phe Val Phe Leu Val Leu Leu Pro Leu Val Ser Ser Gln Cys Val
1 5 10 15
Asn Leu Thr Thr Arg Thr Gln Leu Pro Pro Ala Tyr Thr Asn Ser Phe
20 25 30
Thr Arg Gly Val Tyr Tyr Pro Asp Lys Val Phe Arg Ser Ser Val Leu
35 40 45
His Ser Thr Gln Asp Leu Phe Leu Pro Phe Phe Ser Asn Val Thr Trp
50 55 60
Phe His Ala Ile His Val Ser Gly Thr Asn Gly Thr Lys Arg Phe Asp
65 70 75 80
Asn Pro Val Leu Pro Phe Asn Asp Gly Val Tyr Phe Ala Ser Thr Glu
85 90 95
Lys Ser Asn Ile Ile Arg Gly Trp Ile Phe Gly Thr Thr Leu Asp Ser
100 105 110
Lys Thr Gln Ser Leu Leu Ile Val Asn Asn Ala Thr Asn Val Val Ile
115 120 125
Lys Val Cys Glu Phe Gln Phe Cys Asn Asp Pro Phe Leu Gly Val Tyr
130 135 140
Tyr His Lys Asn Asn Lys Ser Trp Met Glu Ser Glu Phe Arg Val Tyr
145 150 155 160
Ser Ser Ala Asn Asn Cys Thr Phe Glu Tyr Val Ser Gln Pro Phe Leu
165 170 175
Met Asp Leu Glu Gly Lys Gln Gly Asn Phe Lys Asn Leu Arg Glu Phe
180 185 190
Val Phe Lys Asn Ile Asp Gly Tyr Phe Lys Ile Tyr Ser Lys His Thr
195 200 205
Pro Ile Asn Leu Val Arg Asp Leu Pro Gln Gly Phe Ser Ala Leu Glu
210 215 220
Pro Leu Val Asp Leu Pro Ile Gly Ile Asn Ile Thr Arg Phe Gln Thr
225 230 235 240
Leu Leu Ala Leu His Arg Ser Tyr Leu Thr Pro Gly Asp Ser Ser Ser
245 250 255
Gly Trp Thr Ala Gly Ala Ala Ala Tyr Tyr Val Gly Tyr Leu Gln Pro
260 265 270
Arg Thr Phe Leu Leu Lys Tyr Asn Glu Asn Gly Thr Ile Thr Asp Ala
275 280 285
Val Asp Cys Ala Leu Asp Pro Leu Ser Glu Thr Lys Cys Thr Leu Lys
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Ser Phe Thr Val Glu Lys Gly Ile Tyr Gln Thr Ser Asn Phe Arg Val
305 310 315 320
Gln Pro Thr Glu Ser Ile Val Arg Phe Pro Asn Ile Thr Asn Leu Cys
325 330 335
Pro Phe Gly Glu Val Phe Asn Ala Thr Arg Phe Ala Ser Val Tyr Ala
340 345 350
Trp Asn Arg Lys Arg Ile Ser Asn Cys Val Ala Asp Tyr Ser Val Leu
355 360 365
Tyr Asn Ser Ala Ser Phe Ser Thr Phe Lys Cys Tyr Gly Val Ser Pro
370 375 380
Thr Lys Leu Asn Asp Leu Cys Phe Thr Asn Val Tyr Ala Asp Ser Phe
385 390 395 400
Val Ile Arg Gly Asp Glu Val Arg Gln Ile Ala Pro Gly Gln Thr Gly
405 410 415
Lys Ile Ala Asp Tyr Asn Tyr Lys Leu Pro Asp Asp Phe Thr Gly Cys
420 425 430
Val Ile Ala Trp Asn Ser Asn Asn Leu Asp Ser Lys Val Gly Gly Asn
435 440 445
Tyr Asn Tyr Leu Tyr Arg Leu Phe Arg Lys Ser Asn Leu Lys Pro Phe
450 455 460
Glu Arg Asp Ile Ser Thr Glu Ile Tyr Gln Ala Gly Ser Thr Pro Cys
465 470 475 480
Asn Gly Val Glu Gly Phe Asn Cys Tyr Phe Pro Leu Gln Ser Tyr Gly
485 490 495
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500 505 510
Leu Ser Phe Glu Leu Leu His Ala Pro Ala Thr Val Cys Gly Pro Lys
515 520 525
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530 535 540
Gly Leu Thr Gly Thr Gly Val Leu Thr Glu Ser Asn Lys Lys Phe Leu
545 550 555 560
Pro Phe Gln Gln Phe Gly Arg Asp Ile Ala Asp Thr Thr Asp Ala Val
565 570 575
Arg Asp Pro Gln Thr Leu Glu Ile Leu Asp Ile Thr Pro Cys Ser Phe
580 585 590
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595 600 605
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610 615 620
His Ala Asp Gln Leu Thr Pro Thr Trp Arg Val Tyr Ser Thr Gly Ser
625 630 635 640
Asn Val Phe Gln Thr Arg Ala Gly Cys Leu Ile Gly Ala Glu His Val
645 650 655
Asn Asn Ser Tyr Glu Cys Asp Ile Pro Ile Gly Ala Gly Ile Cys Ala
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675 680 685
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820 825 830
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Leu Ile Cys Ala Gln Lys Phe Asn Gly Leu Thr Val Leu Pro Pro Leu
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Leu Thr Asp Glu Met Ile Ala Gln Tyr Thr Ser Ala Leu Leu Ala Gly
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900 905 910
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Gly His His His His His His His His Ser Ala Trp Ser His Pro
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Gln Phe Glu Lys Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
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<210> 14
<211> 18394
<212> DNA
<213> NDV LaSota
<400> 14
tcttccgctt cctcgctcac tgactcgctg cgctcggtcg ttcggctgcg gcgagcggta 60
tcagctcact caaaggcggt aatacggtta tccacagaat caggggataa cgcaggaaag 120
aacatgtgag caaaaggcca gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc gttgctggcg 180
tttttccata ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc aagtcagagg 240
tggcgaaacc cgacaggact ataaagatac caggcgtttc cccctggaag ctccctcgtg 300
cgctctcctg ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct cccttcggga 360
agcgtggcgc tttctcatag ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta ggtcgttcgc 420
tccaagctgg gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc cttatccggt 480
aactatcgtc ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat cgccactggc agcagccact 540
ggtaacagga ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt gaagtggtgg 600
cctaactacg gctacactag aagaacagta tttggtatct gcgctctgct gaagccagtt 660
accttcggaa aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc tggtagcggt 720
ggtttttttg tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca agaagatcct 780
ttgatctttt ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta agggattttg 840
gtcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt 900
aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt 960
gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc 1020
gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg 1080
cgagacccac gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc cggaagggcc 1140
gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg 1200
gaagctagag taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca 1260
ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga 1320
tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct 1380
ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg 1440
cataattctc ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca 1500
accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata 1560
cgggataata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct 1620
tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact 1680
cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa 1740
acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc 1800
atactcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga 1860
tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg ttccgcgcac atttccccga 1920
aaagtgccac ctgacgtcta agaaaccatt attatcatga cattaaccta taaaaatagg 1980
cgtatcacga ggccctttcg tctcgcgcgt ttcggtgatg acggtgaaaa cctctgacac 2040
atgcagctcc cggagacggt cacagcttgt ctgtaagcgg atgccgggag cagacaagcc 2100
cgtcagggcg cgtcagcggg tgttggcggg tgtcggggct ggcttaacta tgcggcatca 2160
gagcagattg tactgagagt gcaccataaa attgtaaacg ttaatatttt gttaaaattc 2220
gcgttaaatt tttgttaaat cagctcattt tttaaccaat aggccgaaat cggcaaaatc 2280
ccttataaat caaaagaata gcccgagata gggttgagtg ttgttccagt ttggaacaag 2340
agtccactat taaagaacgt ggactccaac gtcaaagggc gaaaaaccgt ctatcagggc 2400
gatggcccac tacgtgaacc atcacccaaa tcaagttttt tggggtcgag gtgccgtaaa 2460
gcactaaatc ggaaccctaa agggagcccc cgatttagag cttgacgggg aaagccggcg 2520
aacgtggcga gaaaggaagg gaagaaagcg aaaggagcgg gcgctagggc gctggcaagt 2580
gtagcggtca cgctgcgcgt aaccaccaca cccgccgcgc ttaatgcgcc gctacagggc 2640
gcgtactatg gttgctttga cgtatgcggt gtgaaatacc gcacagatgc gtaaggagaa 2700
aataccgcat caggcgccat tcgccattca ggctgcgcaa ctgttgggaa gggcgatcgg 2760
tgcgggcctc ttcgctatta cgccagctgg cgaaaggggg atgtgctgca aggcgattaa 2820
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ttaccaaaca gagaatccgt gagttacgat aaaaggcgaa ggagcaattg aagtcgcacg 2940
ggtagaaggt gtgaatctcg agtgcgagcc cgaagcacaa actcgagaaa gccttctgcc 3000
aacatgtctt ccgtatttga tgagtacgaa cagctcctcg cggctcagac tcgccccaat 3060
ggagctcatg gagggggaga aaaagggagt accttaaaag tagacgtccc ggtattcact 3120
cttaacagtg atgacccaga agatagatgg agctttgtgg tattctgcct ccggattgct 3180
gttagcgaag atgccaacaa accactcagg caaggtgctc tcatatctct tttatgctcc 3240
cactcacagg taatgaggaa ccatgttgcc cttgcaggga aacagaatga agccacattg 3300
gccgtgcttg agattgatgg ctttgccaac ggcacgcccc agttcaacaa taggagtgga 3360
gtgtctgaag agagagcaca gagatttgcg atgatagcag gatctctccc tcgggcatgc 3420
agcaacggaa ccccgttcgt cacagccggg gccgaagatg atgcaccaga agacatcacc 3480
gataccctgg agaggatcct ctctatccag gctcaagtat gggtcacagt agcaaaagcc 3540
atgactgcgt atgagactgc agatgagtcg gaaacaaggc gaatcaataa gtatatgcag 3600
caaggcaggg tccaaaagaa atacatcctc taccccgtat gcaggagcac aatccaactc 3660
acgatcagac agtctcttgc agtccgcatc tttttggtta gcgagctcaa gagaggccgc 3720
aacacggcag gtggtacctc tacttattat aacctggtag gggacgtaga ctcatacatc 3780
aggaataccg ggcttactgc attcttcttg acactcaagt acggaatcaa caccaagaca 3840
tcagcccttg cacttagtag cctctcaggc gacatccaga agatgaagca gctcatgcgt 3900
ttgtatcgga tgaaaggaga taatgcgccg tacatgacat tacttggtga tagtgaccag 3960
atgagctttg cgcctgccga gtatgcacaa ctttactcct ttgccatggg tatggcatca 4020
gtcctagata aaggtactgg gaaataccaa tttgccaggg actttatgag cacatcattc 4080
tggagacttg gagtagagta cgctcaggct cagggaagta gcattaacga ggatatggct 4140
gccgagctaa agctaacccc agcagcaagg aggggcctgg cagctgctgc ccaacgggtc 4200
tccgaggaga ccagcagcat agacatgcct actcaacaag tcggagtcct cactgggctt 4260
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gccggggatg gggagaccca attcctggat ctgatgagag cggtagcaaa tagcatgagg 4380
gaggcgccaa actctgcaca gggcactccc caatcggggc ctcccccaac tcctgggcca 4440
tcccaagata acgacaccga ctgggggtat tgatggacaa aacccagcct gcttccacaa 4500
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agataccaca ggcacaatgc ggctcactaa caatcaaaac agagccgagg gaattagaaa 4680
aaagtacggg tagaagaggg atattcagag atcagggcaa gtctcccgag tctctgctct 4740
ctcctctacc tgatagacca ggacaaacat ggccaccttt acagatgcag agatcgacga 4800
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ggaggcgata tcacagagag taagtaaggt tgactatcag ctagatcttg tcttgaaaca 5520
gacatcctcc atccctatga tgcggtccga aatccaacag ctgaaaacat ctgttgcagt 5580
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gccacatcca tctgaattga ttaaacccgc cactgcatgc gggcctgata taggagtgga 5820
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catgaggtca ctgacggatt atcgcaacta gcagtggcag ttgggaagat gcagcagttt 7980
gttaatgacc aatttaataa aacagctcag gaattagact gcatcaaaat tgcacagcaa 8040
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agcggcttaa tcaccggtaa ccctattcta tacgactcac agactcaact cttgggtata 8280
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atcaaaggtt cagtcatcgc caactgcaag atgacaacat gtagatgtgt aaaccccccg 8640
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gttttatcct taggcgggat aactttaagg ctcagtgggg aattcgatgt aacttatcag 8760
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cccttttata tagcatgggg gctagcacac ctagcgatct tgtaggcata ccgactagga 9480
tttccagggc agaagaaaag attacatcta cacttggttc caatcaagat gtagtagata 9540
ggatatataa gcaagtggcc cttgagtctc cgttggcatt gttaaatact gagaccacaa 9600
ttatgaacgc aataacatct ctctcttatc agattaatgg agctgcaaac aacagtgggt 9660
ggggggcacc tatccatgac ccagattata taggggggat aggcaaagaa ctcattgtag 9720
atgatgctag tgatgtcaca tcattctatc cctctgcatt tcaagaacat ctgaatttta 9780
tcccggcgcc tactacagga tcaggttgca ctcgaatacc ctcatttgac atgagtgcta 9840
cccattactg ctacacccat aatgtaatat tgtctggatg cagagatcac tcacattcat 9900
atcagtattt agcacttggt gtgctccgga catctgcaac agggagggta ttcttttcta 9960
ctctgcgttc catcaacctg gacgacaccc aaaatcggaa gtcttgcagt gtgagtgcaa 10020
ctcccctggg ttgtgatatg ctgtgctcga aagtcacgga gacagaggaa gaagattata 10080
actcagctgt ccctacgcgg atggtacatg ggaggttagg gttcgacggc cagtaccacg 10140
aaaaggacct agatgtcaca acattattcg gggactgggt ggccaactac ccaggagtag 10200
ggggtggatc ttttattgac agccgcgtat ggttctcagt ctacggaggg ttaaaaccca 10260
attcacccag tgacactgta caggaaggga aatatgtgat atacaagcga tacaatgaca 10320
catgcccaga tgagcaagac taccagattc gaatggccaa gtcttcgtat aagcctggac 10380
ggtttggtgg gaaacgcata cagcaggcta tcttatctat caaggtgtca acatccttag 10440
gcgaagaccc ggtactgact gtaccgccca acacagtcac actcatgggg gccgaaggca 10500
gaattctcac agtagggaca tctcatttct tgtatcaacg agggtcatca tacttctctc 10560
ccgcgttatt atatcctatg acagtcagca acaaaacagc cactcttcat agtccttata 10620
cattcaatgc cttcactcgg ccaggtagta tcccttgcca ggcttcagca agatgcccca 10680
actcgtgtgt tactggagtc tatacagatc catatcccct aatcttctat agaaaccaca 10740
ccttgcgagg ggtattcggg acaatgcttg atggtgtaca agcaagactt aaccctgcgt 10800
ctgcagtatt cgatagcaca tcccgcagtc gcattactcg agtgagttca agcagtacca 10860
aagcagcata cacaacatca acttgtttta aagtggtcaa gactaataag acctattgtc 10920
tcagcattgc tgaaatatct aatactctct tcggagaatt cagaatcgtc ccgttactag 10980
ttgagatcct caaagatgac ggggttagag aagccaggtc tggctagttg agtcaattat 11040
aaaggagttg gaaagatggc attgtatcac ctatcttctg cgacatcaag aatcaaaccg 11100
aatgccggcg cgtgctcgaa ttccatgttg ccagttgacc acaatcagcc agtgctcatg 11160
cgatcagatt aagccttgtc aatagtctct tgattaagaa aaaatgtaag tggcaatgag 11220
atacaaggca aaacagctca tggttaacaa tacgggtagg acatggcgag ctccggtcct 11280
gaaagggcag agcatcagat tatcctacca gagtcacacc tgtcttcacc attggtcaag 11340
cacaaactac tctattactg gaaattaact gggctaccgc ttcctgatga atgtgacttc 11400
gaccacctca ttctcagccg acaatggaaa aaaatacttg aatcggcctc tcctgatact 11460
gagagaatga taaaactcgg aagggcagta caccaaactc ttaaccacaa ttccagaata 11520
accggagtgc tccaccccag gtgtttagaa gaactggcta atattgaggt cccagattca 11580
accaacaaat ttcggaagat tgagaagaag atccaaattc acaacacgag atatggagaa 11640
ctgttcacaa ggctgtgtac gcatatagag aagaaactgc tggggtcatc ttggtctaac 11700
aatgtccccc ggtcagagga gttcagcagc attcgtacgg atccggcatt ctggtttcac 11760
tcaaaatggt ccacagccaa gtttgcatgg ctccatataa aacagatcca gaggcatctg 11820
atggtggcag ctaggacaag gtctgcggcc aacaaattgg tgatgctaac ccataaggta 11880
ggccaagtct ttgtcactcc tgaacttgtc gttgtgacgc atacgaatga gaacaagttc 11940
acatgtctta cccaggaact tgtattgatg tatgcagata tgatggaggg cagagatatg 12000
gtcaacataa tatcaaccac ggcggtgcat ctcagaagct tatcagagaa aattgatgac 12060
attttgcggt taatagacgc tctggcaaaa gacttgggta atcaagtcta cgatgttgta 12120
tcactaatgg agggatttgc atacggagct gtccagctac tcgagccgtc aggtacattt 12180
gcaggagatt tcttcgcatt caacctgcag gagcttaaag acattctaat tggcctcctc 12240
cccaatgata tagcagaatc cgtgactcat gcaatcgcta ctgtattctc tggtttagaa 12300
cagaatcaag cagctgagat gttgtgtctg ttgcgtctgt ggggtcaccc actgcttgag 12360
tcccgtattg cagcaaaggc agtcaggagc caaatgtgcg caccgaaaat ggtagacttt 12420
gatatgatcc ttcaggtact gtctttcttc aagggaacaa tcatcaacgg gtacagaaag 12480
aagaatgcag gtgtgtggcc gcgagtcaaa gtggatacaa tatatgggaa ggtcattggg 12540
caactacatg cagattcagc agagatttca cacgatatca tgttgagaga gtataagagt 12600
ttatctgcac ttgaatttga gccatgtata gaatatgacc ctgtcaccaa cctgagcatg 12660
ttcctaaaag acaaggcaat cgcacacccc aacgataatt ggcttgcctc gtttaggcgg 12720
aaccttctct ccgaagacca gaagaaacat gtaaaagaag caacttcgac taatcgcctc 12780
ttgatagagt ttttagagtc aaatgatttt gatccatata aagagatgga atatctgacg 12840
acccttgagt accttagaga tgacaatgtg gcagtatcat actcgctcaa ggagaaggaa 12900
gtgaaagtta atggacggat cttcgctaag ctgacaaaga agttaaggaa ctgtcaggtg 12960
atggcggaag ggatcctagc cgatcagatt gcacctttct ttcagggaaa tggagtcatt 13020
caggatagca tatccttgac caagagtatg ctagcgatga gtcaactgtc ttttaacagc 13080
aataagaaac gtatcactga ctgtaaagaa agagtatctt caaaccgcaa tcatgatccg 13140
aaaagcaaga accgtcggag agttgcaacc ttcataacaa ctgacctgca aaagtactgt 13200
cttaattgga gatatcagac aatcaaattg ttcgctcatg ccatcaatca gttgatgggc 13260
ctacctcact tcttcgaatg gattcaccta agactgatgg acactacgat gttcgtagga 13320
gaccctttca atcctccaag tgaccctact gactgtgacc tctcaagagt ccctaatgat 13380
gacatatata ttgtcagtgc cagagggggt atcgaaggat tatgccagaa gctatggaca 13440
atgatctcaa ttgctgcaat ccaacttgct gcagctagat cgcattgtcg tgttgcctgt 13500
atggtacagg gtgataatca agtaatagca gtaacgagag aggtaagatc agacgactct 13560
ccggagatgg tgttgacaca gttgcatcaa gccagtgata atttcttcaa ggaattaatt 13620
catgtcaatc atttgattgg ccataatttg aaggatcgtg aaaccatcag gtcagacaca 13680
ttcttcatat acagcaaacg aatcttcaaa gatggagcaa tcctcagtca agtcctcaaa 13740
aattcatcta aattagtgct agtgtcaggt gatctcagtg aaaacaccgt aatgtcctgt 13800
gccaacattg cctctactgt agcacggcta tgcgagaacg ggcttcccaa agacttctgt 13860
tactatttaa actatataat gagttgtgtg cagacatact ttgactctga gttctccatc 13920
accaacaatt cgcaccccga tcttaatcag tcgtggattg aggacatctc ttttgtgcac 13980
tcatatgttc tgactcctgc ccaattaggg ggactgagta accttcaata ctcaaggctc 14040
tacactagaa atatcggtga cccggggact actgcttttg cagagatcaa gcgactagaa 14100
gcagtgggat tactgagtcc taacattatg actaatatct taactaggcc gcctgggaat 14160
ggagattggg ccagtctgtg caacgaccca tactctttca attttgagac tgttgcaagc 14220
ccaaatattg ttcttaagaa acatacgcaa agagtcctat ttgaaacttg ttcaaatccc 14280
ttattgtctg gagtgcacac agaggataat gaggcagaag agaaggcatt ggctgaattc 14340
ttgcttaatc aagaggtgat tcatccccgc gttgcgcatg ccatcatgga ggcaagctct 14400
gtaggtagga gaaagcaaat tcaagggctt gttgacacaa caaacaccgt aattaagatt 14460
gcgcttacta ggaggccatt aggcatcaag aggctgatgc ggatagtcaa ttattctagc 14520
atgcatgcaa tgctgtttag agacgatgtt ttttcctcca gtagatccaa ccacccctta 14580
gtctcttcta atatgtgttc tctgacactg gcagactatg cacggaatag aagctggtca 14640
cctttgacgg gaggcaggaa aatactgggt gtatctaatc ctgatacgat agaactcgta 14700
gagggtgaga ttcttagtgt aagcggaggg tgtacaagat gtgacagcgg agatgaacaa 14760
tttacttggt tccatcttcc aagcaatata gaattgaccg atgacaccag caagaatcct 14820
ccgatgaggg taccatatct cgggtcaaag acacaggaga ggagagctgc ctcacttgca 14880
aaaatagctc atatgtcgcc acatgtaaag gctgccctaa gggcatcatc cgtgttgatc 14940
tgggcttatg gggataatga agtaaattgg actgctgctc ttacgattgc aaaatctcgg 15000
tgtaatgtaa acttagagta tcttcggtta ctgtcccctt tacccacggc tgggaatctt 15060
caacatagac tagatgatgg tataactcag atgacattca cccctgcatc tctctacagg 15120
gtgtcacctt acattcacat atccaatgat tctcaaaggc tgttcactga agaaggagtc 15180
aaagagggga atgtggttta ccaacagatc atgctcttgg gtttatctct aatcgaatcg 15240
atctttccaa tgacaacaac caggacatat gatgagatca cactgcacct acatagtaaa 15300
tttagttgct gtatcagaga agcacctgtt gcggttcctt tcgagctact tggggtggta 15360
ccggaactga ggacagtgac ctcaaataag tttatgtatg atcctagccc tgtatcggag 15420
ggagactttg cgagacttga cttagctatc ttcaagagtt atgagcttaa tctggagtca 15480
tatcccacga tagagctaat gaacattctt tcaatatcca gcgggaagtt gattggccag 15540
tctgtggttt cttatgatga agatacctcc ataaagaatg acgccataat agtgtatgac 15600
aatacccgaa attggatcag tgaagctcag aattcagatg tggtccgcct atttgaatat 15660
gcagcacttg aagtgctcct cgactgttct taccaactct attacctgag agtaagaggc 15720
ctggacaata ttgtcttata tatgggtgat ttatacaaga atatgccagg aattctactt 15780
tccaacattg cagctacaat atctcatccc gtcattcatt caaggttaca tgcagtgggc 15840
ctggtcaacc atgacggatc acaccaactt gcagatacgg attttatcga aatgtctgca 15900
aaactattag tatcttgcac ccgacgtgtg atctccggct tatattcagg aaataagtat 15960
gatctgctgt tcccatctgt cttagatgat aacctgaatg agaagatgct tcagctgata 16020
tcccggttat gctgtctgta cacggtactc tttgctacaa caagagaaat cccgaaaata 16080
agaggcttaa ctgcagaaga gaaatgttca atactcactg agtatttact gtcggatgct 16140
gtgaaaccat tacttagccc cgatcaagtg agctctatca tgtctcctaa cataattaca 16200
ttcccagcta atctgtacta catgtctcgg aagagcctca atttgatcag ggaaagggag 16260
gacagggata ctatcctggc gttgttgttc ccccaagagc cattattaga gttcccttct 16320
gtgcaagata ttggtgctcg agtgaaagat ccattcaccc gacaacctgc ggcatttttg 16380
caagagttag atttgagtgc tccagcaagg tatgacgcat tcacacttag tcagattcat 16440
cctgaactca catctccaaa tccggaggaa gactacttag tacgatactt gttcagaggg 16500
atagggactg catcttcctc ttggtataag gcatctcatc tcctttctgt acccgaggta 16560
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cttctcgaac tgcatgtacc acatgaaact atctattaca atacgctctt ttcaaatgag 16680
atgaaccccc cgcaacgaca tttcgggccg accccaactc agtttttgaa ttcggttgtt 16740
tataggaatc tacaggcgga ggtaacatgc aaagatggat ttgtccaaga gttccgtcca 16800
ttatggagag aaaatacaga ggaaagcgac ctgacctcag ataaagtagt ggggtatatt 16860
acatctgcag tgccctacag atctgtatca ttgctgcatt gtgacattga aattcctcca 16920
gggtccaatc aaagcttact agatcaacta gctatcaatt tatctctgat tgccatgcat 16980
tctgtaaggg agggcggggt agtaatcatc aaagtgttgt atgcaatggg atactacttt 17040
catctactca tgaacttgtt tgctccgtgt tccacaaaag gatatattct ctctaatggt 17100
tatgcatgtc gaggagatat ggagtgttac ctggtatttg tcatgggtta cctgggcggg 17160
cctacatttg tacatgaggt ggtgaggatg gcgaaaactc tggtgcagcg gcacggtacg 17220
cttttgtcta aatcagatga gatcacactg accaggttat tcacctcaca gcggcagcgt 17280
gtgacagaca tcctatccag tcctttacca agattaataa agtacttgag gaagaatatt 17340
gacactgcgc tgattgaagc cgggggacag cccgtccgtc cattctgtgc ggagagtctg 17400
gtgagcacgc tagcgaacat aactcagata acccagatca tcgctagtca cattgacaca 17460
gttatccggt ctgtgatata tatggaagct gagggtgatc tcgctgacac agtatttcta 17520
tttacccctt acaatctctc tactgacggg aaaaagagga catcacttaa acagtgcacg 17580
agacagatcc tagaggttac aatactaggt cttagagtcg aaaatctcaa taaaataggc 17640
gatataatca gcctagtgct taaaggcatg atctccatgg aggaccttat cccactaagg 17700
acatacttga agcatagtac ctgccctaaa tatttgaagg ctgtcctagg tattaccaaa 17760
ctcaaagaaa tgtttacaga cacttctgta ctgtacttga ctcgtgctca acaaaaattc 17820
tacatgaaaa ctataggcaa tgcagtcaaa ggatattaca gtaactgtga ctcttaacga 17880
aaatcacata ttaataggct ccttttttgg ccaattgtat tcttgttgat ttaatcatat 17940
tatgttagaa aaaagttgaa ccctgactcc ttaggactcg aattcgaact caaataaatg 18000
tcttaaaaaa aggttgcgca caattattct tgagtgtagt ctcgtcattc accaaatctt 18060
tgtttggtgc gcgcagatct gtcatgatga tcattgcaat tggatccata tatagggccc 18120
gggttataat tacctcaggt cgacgtccca tggccattcg aattcgtaat catggtcata 18180
gctgtttcct gtgtgaaatt gttatccgct cacaattcca cacaacatac gagccggaag 18240
cataaagtgt aaagcctggg gtgcctaatg agtgagctaa ctcacattaa ttgcgttgcg 18300
ctcactgccc gctttccagt cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca 18360
acgcgcgggg agaggcggtt tgcgtattgg gcgc 18394

Claims (58)

1.一种能够产生细胞免疫反应的病毒载体，其特征在于，所述病毒载体是副粘病毒，其包括编码严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的抗原位点的外源核苷酸序列，所述外源核苷酸序列经过修饰以在鸡胚中至少3次连续传代后为所述病毒载体和所述抗原位点提供稳定性。
2.根据权利要求1所述的病毒载体，其特征还在于，所使用的病毒载体能够以活性或灭活形式使用。
3.根据权利要求1所述的病毒载体，其特征还在于，所述副粘病毒中去除了引起致病性的117位的苯丙氨酸和靠近Q114位的碱性氨基酸。
4.根据权利要求1所述的病毒载体，其特征还在于，所述副粘病毒选自新城疫病毒和仙台病毒。
5.根据权利要求4所述的病毒载体，其特征还在于，所述副粘病毒为新城疫病毒(NDV)。
6.根据权利要求5所述的病毒载体，其特征还在于，所述NDV选自LaSota、B1、QV4、Ulster、Roakin和Komarov毒株。
7.根据权利要求6所述的病毒载体，其特征还在于，所述NDV包含SEQ ID NO：6或SEQ IDNO：14。
8.根据权利要求1所述的病毒载体，其特征还在于，所述外源核苷酸序列选自编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的序列，或编码其衍生序列的序列。
9.根据权利要求8所述的病毒载体，其特征还在于，所述外源核苷酸序列选自编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S2亚基的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1或S2亚基的至少一个片段的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列具有至少80％同一性的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S2亚基的序列具有至少80％同一性的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列具有至少80％同一性的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1或S2亚基的至少一个片段的序列具有至少80％同一性的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列，其缺少位于与S1序列的第1至460位氨基酸对应的核苷酸之间的至少一个表位；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列，其缺少位于与S1序列的第1至460位氨基酸对应的核苷酸之间的至少一个表位；或编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列，其通过在S2亚基中包含至少两个脯氨酸取代而稳定在其融合前的形式。
10.根据权利要求9所述的病毒载体，其特征还在于，所述外源核苷酸序列选自与SEQID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：5中的任一序列具有至少80％同一性的序列；或选自与翻译成任何氨基酸序列SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12或SEQID NO：13的任何序列具有至少80％同一性的序列。
11.根据权利要求9所述的病毒载体，其特征还在于，位于与S1序列的1-460位氨基酸对应的核苷酸之间的所述表位选自氨基酸序列SEQ IDNO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：NO：9或SEQ ID NO：10。
12.一种抗冠状病毒病2019(COVID-19)的疫苗，其特征在于，它包含副粘病毒病毒载体以及药学上可接受的载体、佐剂和/或赋形剂，所述副粘病毒病病毒载体包含编码严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的抗原位点的外源核苷酸序列，所述外源核苷酸序列经过修饰以在鸡胚中至少3次连续传代后为所述病毒载体和所述抗原位点提供稳定性。
13.根据权利要求12所述的疫苗，其特征还在于，所述副粘病毒是活的或灭活的。
14.根据权利要求12所述的疫苗，其特征还在于，所述副粘病毒中去除了对副粘病毒具有致病性的117位苯丙氨酸和靠近Q114位的位置中的碱性氨基酸。
15.根据权利要求13所述的疫苗，其特征还在于，所述副粘病毒选自新城疫病毒和仙台病毒。
16.根据权利要求13所述的疫苗，其特征还在于，所述副粘病毒为新城疫病毒(NDV)。
17.根据权利要求16所述的疫苗，其特征还在于，所述NDV选自LaSota、B1、QV4、Ulster、Roakin和Komarov毒株。
18.根据权利要求16所述的疫苗，其特征还在于，所述NDV选自SEQ ID NO：6或SEQ IDNO：14。
19.根据权利要求12所述的疫苗，其特征还在于，所述外源核苷酸序列选自编码SARS-CoV-2刺突蛋白S的序列或编码其衍生序列的序列。
20.根据权利要求19所述的疫苗，其特征还在于，所述外源核苷酸序列选自编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S2亚基的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1或S2亚基的至少一个片段的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列具有至少80％同一性的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S2亚基的序列具有至少80％同一性的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列具有至少80％同一性的序列；与编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1或S2亚基的至少一个片段的序列具有至少80％同一性的序列；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列，其缺少位于与S1序列的第1至460位氨基酸对应的核苷酸之间的至少一个表位；编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1亚基的序列，其缺少位于与S1序列的第1至460位氨基酸对应的核苷酸之间的至少一个表位；或编码SARS-CoV-2刺突糖蛋白S的S1和S2亚基两者的序列，其通过在S2亚基中包含至少两个脯氨酸取代而稳定在其融合前的形式。
21.根据权利要求19所述的疫苗，其特征还在于，所述外源核苷酸序列选自与序列SEQID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：5中任一序列具有至少80％同一性的序列；或选自与翻译成任何氨基酸序列SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12或SEQID NO：13的任何序列具有至少80％同一性的序列。
22.根据权利要求19所述的疫苗，其特征还在于，位于与S1序列的1-460位氨基酸对应的核苷酸之间的表位选自氨基酸序列SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：NO：9或SEQID NO：10。
23.根据权利要求12所述的疫苗，其特征还在于，所述药学上可接受的载体优选为水溶液或乳剂。
24.根据权利要求23所述的疫苗，其特征还在于，所述药学上可接受的载体选自水-油乳剂、油-水乳剂和水-油-水乳剂。
25.根据权利要求24所述的疫苗，其特征还在于，所述药学上可接受的载体为水-油-水乳剂。
26.根据权利要求12所述的疫苗，其特征还在于，它包含根据施用途径确定的浓度在每体积剂量106.0CEID50％/mL和1010.0CEID50％/mL之间的病毒。
27.根据权利要求26所述的疫苗，其特征还在于，实现抗原反应所需的活性病毒浓度在每剂量106.0CEID50％/mL至108.5CEID50％/mL之间。
28.根据权利要求26所述的疫苗，其特征还在于，每剂量的体积为0.2mL至2mL。
29.根据权利要求12所述的疫苗，其特征还在于，它适于肌肉内、鼻内、皮下、通过喷雾或通过雾化施用。
30.根据权利要求29所述的疫苗，其特征还在于，它适于肌肉内或鼻内施用。
31.一种副粘病毒，包含编码严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的抗原位点的外源核苷酸序列，用于治疗或预防由所述冠状病毒引起的COVID-19疾病。
32.根据权利要求31所述的副粘病毒，其适于以0.2mL和2mL之间的体积以106.0CEID50％/mL和1010.0CEID50％/mL之间的剂量施用。
33.根据权利要求32所述的副粘病毒，其适于以106.5CEID50％/mL和108.5CEID50％/mL之间的剂量施用。
34.根据权利要求33所述的副粘病毒，其适于肌肉内、鼻内、皮下、通过喷雾或通过雾化施用。
35.根据权利要求33所述的副粘病毒，其适于以107.5CEID50％/mL和108.5CEID50％/mL之间的剂量鼻内施用。
36.根据权利要求33所述的副粘病毒，其适于以107.0CEID50％/mL和108.5CEID50％/mL之间的剂量肌肉内施用。
37.根据权利要求34至36中任一项所述的副粘病毒，其适于以两剂施用。
38.根据权利要求37所述的副粘病毒，其适于在第一剂和第二剂之间间隔7至35天施用。
39.根据权利要求38所述的副粘病毒，其适于在所述第一剂和所述第二剂之间间隔21至28天施用。
40.根据权利要求37所述的副粘病毒，其适于以第一剂通过鼻内途径施用和第二剂通过肌肉内途径施用。
41.根据权利要求31所述的副粘病毒，其适于产生针对SARS-CoV-2感染的粘膜免疫。
42.包含编码急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的抗原位点的外源核苷酸序列的副粘病毒用于制备由所述冠状病毒引起的COVID-19疾病的疫苗的用途。
43.根据权利要求42所述的副粘病毒的用途，其以0.2mL和2mL之间的体积以106.0CEID50％/mL和1010.0CEID50％/mL之间的剂量施用。
44.根据权利要求43所述的副粘病毒的用途，其以106.5CEID50％/mL和108.5CEID50％/mL之间的剂量施用。
45.根据权利要求43所述的副粘病毒的用途，肌肉内、鼻内、皮下、通过喷雾或通过雾化施用。
46.根据权利要求44所述的副粘病毒的用途，以107.5CEID50％/mL和108.5CEID50％/mL之间的剂量鼻内施用。
47.根据权利要求44所述的副粘病毒的用途，以107.0CEID50％/mL和108.5CEID50％/mL之间的剂量肌肉内施用。
48.根据权利要求45至47中任一项所述的副粘病毒的用途，以两剂施用。
49.根据权利要求48所述的副粘病毒的用途，在第一剂和第二剂之间间隔7至35天施用。
50.根据权利要求49所述的副粘病毒的用途，在所述第一剂和所述第二剂之间间隔21至28天施用。
51.根据权利要求48所述的副粘病毒的用途，其中第一剂鼻内施用，第二剂肌肉内施用。
52.根据权利要求42所述的副粘病毒的用途，其中所述副粘病毒产生针对SARS-CoV-2感染的粘膜免疫。
53.一种活性病毒，包含严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的抗原位点，适用于治疗或预防由所述冠状病毒引起的COVID-19疾病，第一剂通过鼻内途径，随后第二剂的SARS-CoV-2抗原通过肌肉内途径。
54.根据权利要求53所述的活性病毒，其中所述第二剂的抗原是与所述第一剂相同的活性病毒。
55.根据权利要求54所述的活性病毒，其中所述第二剂的抗原呈灭活形式。
56.包含严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的抗原位点的活性病毒用于制备疫苗的用途，所述疫苗用于治疗或预防由所述冠状病毒引起的COVID-19疾病，第一剂通过鼻内途径，随后第二剂的SARS-CoV-2抗原通过肌肉内途径。
57.根据权利要求56所述的用途，其中所述第二剂的抗原是与所述第一剂相同的活性病毒。
58.根据权利要求57所述的用途，其中所述第二剂的抗原是灭活形式。
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JOP20190256A1 (ar) * 2017-05-12 2019-10-28 Icahn School Med Mount Sinai فيروسات داء نيوكاسل واستخداماتها
US10689716B1 (en) * 2020-03-19 2020-06-23 University Of Miami Materials and methods for detecting coronavirus
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