CN116615218A - 治疗白癜风的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于治疗白癜风的药物组合物，包含作为黑色素瘤抑制活性(MIA)蛋白抑制剂的肽和蜗牛分泌物的组合。本发明还涉及包含该组合物的试剂盒和包含抗氧化剂的膳食补充剂。本发明还涉及组合物的用途或包含这种组合物的试剂盒用于预防和/或治疗白癜风的用途。

Description

治疗白癜风的药物组合物

技术领域

本发明涉及用于治疗和/或预防白癜风的药物组合物。

背景技术

白癜风是一种后天性皮肤疾病，其特征是色素减退或色素沉着，在世界人口中的患病率约为0.5至2％。

非节段性白癜风(NSV)是该病最常见的临床形式，其中色素脱失斑块通常是双侧的，并且具有某种对称性。

白癜风最常见的部位是面部、手指、手背、屈腕、肘部、膝盖、小腿、背踝、腋窝、腹股沟区、肛门生殖器区、肚脐和乳头。

表皮黑素细胞的缺失是白癜风的病理特征，但该病的病因是多因素的，目前仍不清楚。例如，导致非节段性白癜风的因素包括免疫因素、氧化应激或交感神经性障碍。另一方面，人们认为这种疾病也有一些遗传倾向(et al.,Vitiligo,N.Engl.J.Med.,2009,360,160-169)。

目前提出的药物治疗方法包括局部皮质类固醇、局部大环内酯类免疫调节剂，即钙调神经磷酸酶抑制剂他克莫司和吡美莫司，以及维生素D3类似物和抗氧化剂。另一方面，最常用的非药物治疗是紫外线辐射，包括UVA和UVB(Guerra et al.,Vitiligo:pathogenetic hypotheses and targets for current therapies,Current DrugMetabolism,2010,11,451-467)。

这些可用的治疗方法几乎没有效果，其中一些可能涉及一些不良影响的风险。

最近，也有人认为MIA蛋白(“黑色素瘤抑制活性”)参与了非节段性白癜风的发病机制，这是基于以下发现：与正常黑色素细胞不同，MIA蛋白在白斑质皮肤中表达，并且由于其与α5β1整合素相互作用，可导致黑素细胞的分离(黑素细胞出血)，从而干扰黑素细胞与基底膜的正常附着(Bordignon et al.,Role of alpha5beta1 integrin and MIA(melanoma inhibitory activity)in the pathogenesis of vitiligo,J.Dermatol.Sci.,2013,71(2),142-5)。在体内小鼠模型中，证实在动物尾部注射MIA会导致注射区域出现白癜风样色素脱失(Bordignon et al.,MIA(melanoma inhibitoryactivity)is able to induce vitiligo in an in-vivo mice model by directinjection in the tail,Vitiligo International Symposium 2016,MeetingAbstracts)。

因此，MIA被建议作为白癜风治疗的靶点，在国际专利申请WO-A-2012/127352中，提出了许多作为MIA抑制剂的肽和肽衍生物用于预防和治疗白癜风，其机制涉及抑制剂与MIA的结合，从而避免MIA与α5β1整合素的相互作用，这是黑色素细胞出血的原因。

然而，值得注意的是，文献WO-A-2012/127352没有提供任何显示这些物质对白癜风治疗有效性的工作实例，实际上，它没有给出任何关于使用这些MIA抑制剂有效治疗白癜风的合适方法或组合物的提示。

因此，仍然需要为白癜风的治疗和预防提供有效和安全的组合物。

发明概述

本发明的目的是包含MIA抑制剂和蜗牛分泌物的药物组合物。

本发明的另一方面是包含本发明的药物组合物和包含抗氧化剂的膳食补充剂的试剂盒。

本发明的另一方面是这种组合物或所述试剂盒在预防和/或治疗白癜风中的用途。

附图简述

图1显示了三个说明性示例，用于测试单个患者中三种不同组合物的疗效，以进行比较。

图2显示了实施例4中所述试验的一名患者在治疗前后的照片，其中面部左侧用组合物A治疗，并且面部右侧用组合物B治疗。

图3显示了实施例4中所述试验中的一名患者在治疗前后的照片，他们用组合物C治疗。

发明详述

本发明的目的是一种药物组合物，包含：

(a)具有选自SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:49的序列或其衍生物的MIA抑制剂肽；

(b)蜗牛分泌物；和

(c)至少一种药学上可接受的赋形剂。

本发明的作者已经开发了一种药物组合物，包含MIA抑制剂肽和蜗牛分泌物的组合，令人惊讶的是，与现有技术中迄今为止可用的治疗方法不同，该药物组合物对治疗白癜风非常有效。

根据本说明书以及在权利要求书中，除非上下文另有明确指示，否则通常在“一个”、“一种”或“所述”之前的单数表达也意味着包括复数形式。除非另有特别说明，所有百分比均以重量表示。前面加上“约”一词的数字值意味着还包括该值周围的某种变化，即变化或所述金额的±5％。由下端点和上端点定义的数值范围意味着还包括所述的端点，并且它们还包括任何较窄的子范围。

根据IUPAC-IUB生化命名委员会(Commission on Biochemical Nomenclature)，如波特兰出版社(Portland Press)1992年第2版(ISBN1-85578-005-4])中所述，如本领域技术人员所熟知的，氨基酸在此使用单字母代码表示。

MIA抑制剂肽

本发明组合物的组分之一是具有作为人黑色素瘤抑制活性(MIA)蛋白抑制剂活性的物质，特别是国际专利申请WO-A-2012/127352中公开的那些，即具有选自SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:49的肽：

-SEQ ID NO:01 VPHIPPN

-SEQ ID NO:02 MPPTQVS

-SEQ ID NO:03 QMHPWPP

-SEQ ID NO:04 QPPFWQF

-SEQ ID NO:05 TPPQGLA

-SEQ ID NO:06 IPPYNTL

-SEQ ID NO:07 AVRPAPL

-SEQ ID NO:08 GAKPHPQ

-SEQ ID NO:09 QQLSPLP

-SEQ ID NO:10 GPPPSPV

-SEQ ID NO:11 LPLTPLP

-SEQ ID NO:12 QLNVNHQARADQ

-SEQ ID NO:13 TSASTRPELHYP

-SEQ ID NO:14 TFLPHQMHPWPP

-SEQ ID NO:15 VPHIPPNSMALT

-SEQ ID NO:16 RLTLLVLIMPAP

-SEQ ID NO:17 YNLPKVSSNLSP

-SEQ ID NO:18 MPPTQVSKFRLI

-SEQ ID NO:19 ANIDATPLFLRA

-SEQ ID NO:20 LLRTTETLPMFL

-SEQ ID NO:21 SALEPLV

-SEQ ID NO:22 GSPTPNA

-SEQ ID NO:23 APSHATH

-SEQ ID NO:24 TTVGHSD

-SEQ ID NO:25 THFSTFT

-SEQ ID NO:26 SLLLDTS

-SEQ ID NO:27 SVAMKAHKPLLP

-SEQ ID NO:28 NTIPGFASKSLD

-SEQ ID NO:29 VSNYKFYSTTSS

-SEQ ID NO:30 VSRHQSWHPHDL

-SEQ ID NO:31 HLNILSTLWKYR

-SEQ ID NO:32 HNASPSWGSPVM

-SEQ ID NO:33 SHPWNAQRELSV

-SEQ ID NO:34 HHWPFWRTLPLS

-SEQ ID NO:35 WHTKFLPRYLPS

-SEQ ID NO:36 NNTSFTVVPSVP

-SEQ ID NO:37 SHLSTWKWWQNR

-SEQ ID NO:38 FHWHPRLWPLPS

-SEQ ID NO:39 WHWTYGWRPPAM

-SEQ ID NO:40 FHWRYPLPLPGQ

-SEQ ID NO:41 WHWPLFIPNTTA

-SEQ ID NO:42 WHNGIWWHYGVR

-SEQ ID NO:43 HHLNYLWPWTRV

-SEQ ID NO:44 FWHRWSTFPEQP

-SEQ ID NO:45 WHMSYFWTRPPQ

-SEQ ID NO:46 FHLNWPSRADYL

-SEQ ID NO:47 WHKNTNWPWRTL

-SEQ ID NO:48 ALSPSQSHPVRS

-SEQ ID NO:49 GTQSTAIPAPTD

或其衍生物。

在一个实施方案中，MIA抑制剂肽具有选自SEQ ID NO:12-20和27-49的序列，优选选自SEQ ID NO:34、37、39-43和45-47的序列。

在一个实施方案中，MIA抑制剂肽具有选自SEQ ID NO:34、38、40和41的序列。

优选地，MIA抑制剂肽具有序列SEQ ID NO:40；或其衍生物。

具有选自SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:49的序列的肽的衍生物是指在这些序列周围具有一些小变化的肽，仍然保持MIA抑制活性。以下描述了合适的变化示例。

一种合适的衍生物是具有上述序列之一的肽，其中存在一种额外的氨基酸或其中序列的一种氨基酸缺失。

另一种合适的衍生物是肽，其中所述序列的一个或多个氨基酸被另一种天然或非天然氨基酸取代，优选所述序列中不超过3种氨基酸被取代，优选不超过2种氨基酸，并且更优选仅一种氨基酸被其他天然或非自然氨基酸取代。

本领域众所周知的天然氨基酸是通常存在于天然蛋白质和肽中的20种氨基酸。

同样如本领域公知的，非天然(或非天然或不寻常)氨基酸基于天然氨基酸，但其中一个或多个原子被包含至多50个选自C、H、N、S、O、P、F、Cl、Br、I和Se的原子的官能团取代。这种非天然存在的氨基酸的合适的、非限制性的实例是反式-3-甲基脯氨酸、2,4-甲基脯氨酸、顺式-4-羟基脯氨酸、反式-4-羟基喹啉、N-甲基甘氨酸、异苏氨酸、N-甲基苏氨酸、羟乙基半胱氨酸、羟乙基同型半胱氨酸、硝基谷氨酰胺、高谷氨酰胺、哌啶酸、叔亮氨酸、去甲缬氨酸、2-氮杂苯丙氨酸、3-氮杂苯丙氨酸，4-氮杂苯丙氨酸和4-氟苯丙氨酸。本领域已知几种将非天然存在的氨基酸残基结合到肽或蛋白质中的方法。

其他合适的衍生物是序列1至49的肽，也包括具有氨基酸添加/缺失或取代的肽，如上所述，其中至少一种氨基酸被修饰，即，向其添加额外的部分或官能团。这种修饰可以具有改善肽的稳定性、溶解度和/或皮肤渗透性的目的。合适的修饰可以选自糖基化、乙酰化(例如N-末端)、酰胺化(例如C-末端)、羟基化(例如羟脯氨酸)、羧化(例如γ-羧谷氨酸)、磷酸化、烷基化、N-末端脂质化(即，通过酰胺键在N-末端添加饱和或不饱和的C₁₂-C₁₈脂肪酸，例如肉豆蔻酸或棕榈酸)，或异戊二烯化。肽序列的常见修饰是N末端的乙酰化和C末端的酰胺化。C-末端酰胺化包括形成式-CONH₂、-CONHR或-CONR₂的末端酰胺基，其中R通常是短(例如C₁-C₄)烷基。最简单和最常见的C-末端氨基是-CO-NH₂。

在一个实施方案中，MIA抑制剂肽衍生物是在N末端乙酰化和/或在C末端酰胺化的肽，优选在N末端被乙酰化和在C末端被酰胺化。

在特别优选的实施方案中，MIA抑制剂是肽：

选自SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:49，优选选自SEQ ID NO:12-20和27-49，更优选选自SEQ ID NO:34、37、39-43和45-47或SEQ ID NO:34、38、40和41，更优选为SEQ ID NO:60的肽；并且其中任选地

所述序列的至少一种氨基酸被修饰，并且其中所述修饰选自糖基化、乙酰化、酰胺化(C-末端)、羟基化(羟脯氨酸)、羧化(γ-羧谷氨酸)、磷酸化、烷基化、N-末端脂质化和预酰化，优选所述序列在N-末端被乙酰化和/或在C-末端被酰胺化，更优选在N末端乙酰化并在C末端酰胺化。

本文中可互换使用的“MIA抑制剂肽”或“MIA抑制物”术语广泛指组合物中使用的MIA抑制剂物质，如果其严格为肽序列或如上所述的修饰序列。

在一个实施方案中，MIA抑制剂肽具有如上所定义的序列且未被修饰。

这些肽及其衍生物可以按照肽合成中的标准方法制备，通常通过固相合成，或者可以从多种来源商购。

本发明的组合物可包含一种或多种MIA抑制剂肽，即单一MIA抑制剂物质或两种或多种MIA抑制剂的组合。当使用多于一种MIA抑制剂时，它们可以以任何比例使用，因此，本文所述的MIA抑制剂的量是指组合物中所含MIA抑制剂物质的总量。

如国际专利申请WO-A-2012/127352或国际专利申请WO-A-03/064457或文章Stoll等人(The extracellular human melanoma inhibitory activity(MIA)protein adoptsan SH3 domain-like fold,EMBO J.,2001,20(3),340-349)所公开的，在使用重组人MIA的噬菌体展示筛选试验中测定序列1至49的肽作为MIA抑制剂的活性。

如上所述，序列1至49的肽衍生物可使用标准方法测试其MIA抑制活性，可以使用标准方法测试其MIA抑制活性，例如使用重组人MIA的配体结合测定，如Stoll等人所讨论的(op.cit or as disclosed in Schmidt et al.,Targeting melanoma metastasis andimmunosuppression with a new mode of melanoma inhibitory activity(MIA)proteininhibition,2012,PLoS ONE 7(5):e37941)。

MIA抑制剂肽可以这样添加到组合物中，或者可以封装在不同的聚合物材料中，或者与不同的载体物质缀合，用于改善其通过角质层的透皮递送，以达到白斑黑素细胞中的目标MIA蛋白，它们位于表皮的底层，基底层，附着在基底膜上。

封装技术是本领域已知的用于递送活性成分的技术。

在一个实施方案中，MIA抑制剂肽使用脂质体技术微胶囊化。

脂质体通常用于皮肤制剂中，以改善活性物质通过皮肤层的渗透。如本领域公知的，脂质体是大小通常在约60nm至300nm之间的球形囊泡，并且最常由形成至少一个磷脂双层的磷脂组成，但也可以包括其他脂质。脂质体含有亲水性核心，亲水活性物质可以被包裹在其中，而疏水活性物质被结合在双层中，因此脂质体是亲水性和亲脂性活性物质的合适载体(Knoth et al.,Nanocarrier-Based Formulations:Production and CosmeceuticApplications,in:Cosmetic Formulation.Principles and Practice,Benson H.A.E.,Roberts M.S.,Rodrigues Leite-Silva V.and Walters K.A.,editors,CRC Press,2019)。脂质体可以通过众所周知的技术制备；通常，制备方法包括在有机相中混合成膜脂质、干燥、随后脂质的水合以及通过不同的机械处理(如超声处理、挤压或均质化)进一步减小尺寸。

在另一个实施方案中，MIA抑制剂被封装在由生物可降解聚合物制成的微胶囊或纳米胶囊内，如本领域公知的，例如，如用于递送序列1至49(WO-A-03/064457,op.cit)的肽的那些公开的，包括聚酯、聚氨基酸、聚氰基丙烯酸烷基酯、聚磷腈或聚环氧乙烷。用于封装的常见聚合物是例如聚乙烯醇(PVA)、聚乳酸(PLA)、聚(乳酸-乙醇酸)(PLGA)或它们与聚环氧乙烷或聚乙二醇的嵌段共聚物。其他合适的生物可降解聚合物是聚(富马酸丙二醇酯-co-乙二醇)[P(PF-co-EG)]嵌段共聚物、聚酸酐-聚(富马酸-co-癸二酸)酸酐、藻酸盐、葡聚糖、壳聚糖、羟基磷灰石、胶原、纤维蛋白、透明质酸、碳单体及其混合物。

在特定实施方案中，MIA抑制剂被封装在微胶囊或纳米胶囊内，该微胶囊或纳米胶囊内在外表面上附着有作为黑素皮质素1(MC1)受体激动剂的特定肽，并且这些微胶囊或纳米胶囊内被设计用于将封装的MIA抑制剂靶向递送至黑素细胞。所述靶向胶囊在专利申请WO-A-2015/075116中公开。

这些靶向微胶囊或纳米胶囊通常具有10nm至10000nm，优选50nm至5000nm，更优选100nm至1000nm，还更优选150nm至450nm，并且还更优选180nm至400nm的尺寸分布，如WO-A-2015/075116同前所述。微囊的大小可通过扫描电子显微镜(SEM)测定。

微胶囊优选为聚合物，通常由一种或多种生物可降解聚合物制成，例如，如上所述。需要形成靶向微胶囊的聚合物中的至少一种具有羧基，以通过将所述羧基与肽中的胺端基偶联而将肽MC1受体激动剂肽结合到外表面。

微胶囊可以任选地是双层聚合物微胶囊，包括芯聚合物(或“内层聚合物”)和外壳聚合物(或外层聚合物)。例如，核心聚合物可以是聚(D,L--丙交酯-co-乙交酯)(PLGA)，并且外壳聚合物可以是聚乙烯醇(PVA)。

所述靶向微胶囊或纳米胶囊的制备在WO-A-2015/075116(同前)中公开，并且通常涉及活性成分(在这种情况下为MIA抑制剂肽)和在合适溶剂中形成胶囊的聚合物的混合物，以及将MC1受体激动剂肽偶联到微胶囊或纳米胶囊的外表面的进一步步骤，所述MC1受体促动剂肽赋予对黑素体的亲和力。该步骤可以在形成胶囊之前或之后进行，优选在形成胶囊之后进行。

偶联到微胶囊或纳米胶囊外表面的MC1受体激动剂是下式的肽：

R₂-Ser-Tyr-Ser-Nle-Glu-His-DPhe-Arg-(AA)-Gly-Lys-DPro-Val-R₁

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中：

R1是基团-NH-(CH₂)₃-O-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)₃-NH₂，其中n是1-10的整数；例如，n是1，并且R₁来自乙二醇双(3-氨基丙基)醚(CAS No.2997-01-5)；在另一示例中，n是2，并且R₁来自二甘醇双(3-氨基丙基)醚，也称为4,7,10-三氧杂-1,13-十三烷二胺(CAS No.4246-51-9)；

R₂选自(C C_1-24烷基)-CO-、(C_2-24烯基)-CO-和(C_6-10芳基)-CO-；例如，R₂选自乙酰基、丙酰基、十五酰基、十六酰基和十七酰基(棕榈酰基)；和

AA是含有芳族基团的氨基酸；例如，AA可以选自色氨酸、3-(2-萘基)-D-丙氨酸、3-氨基-3-(1-萘基)丙酸、3-氨基3-(联苯)丙酸、苯丙氨酸、酪氨酸、组氨酸、5-羟基色氨酸和L-3,4-二羟基-苯丙氨酸。

在另一个实施方案中，MIA抑制剂肽与纳米颗粒(即，与脂质纳米颗粒、聚合物纳米颗粒、磁性纳米颗粒或金属纳米颗粒)缀合，所述纳米颗粒可充当载体以促进MIA抑制剂穿过角质层。

在一个特定实施方案中，MIA抑制剂肽与金纳米颗粒缀合，金纳米颗粒被描述为改善穿透皮肤(Gupta et al.,J.Phys.Chem.B,2016,7133-7142)。这些纳米颗粒具有涂覆MIA抑制剂肽的金芯。MIA抑制剂肽通常通过纳米颗粒金表面的负电荷与侧链中携带氨基的肽的氨基酸(赖氨酸、精氨酸、组氨酸、天冬酰胺或谷氨酰胺)的正电荷之间的静电离子键与金纳米颗粒结合。金纳米颗粒具有小于1000nm、优选包含在50和200nm之间的尺寸。缀合物可以通过用还原剂将Au(III)还原成Au(0)并处理用MIA抑制剂肽获得的金纳米颗粒来制备，例如，如国际专利申请WO-A-2019/185696中所公开的。

本发明组合物中MIA抑制剂肽的量，如果其为游离形式或与载体封装或缀合，如上所述，通常为0.0001％至1％，优选为0.0005％至0.1％，更优选为0.001％至0.05％，其中百分比以MIA抑制剂的重量相对于所述组合物的总重量来表示。

蜗牛分泌物

蜗牛分泌物，也称为蜗牛粘液，是一种粘液或身体分泌物，由蜗牛(腹足类)通过位于腹足类足部的腺体产生。这种粘液由水和复杂的物质混合物组成，包括蛋白聚糖、糖胺聚糖、糖蛋白酶、透明质酸、铜肽、抗菌肽和金属离子；主要成分是尿囊素、胶原蛋白、弹性蛋白和乙醇酸(Cillia et al.,Antimicrobial properties of terrestrial snail and slugmucus,J.Complement.Integr.Med.,2018,15(3))。

这种分泌物可以从活蜗牛中收集和回收，例如在专利US5538740或美国专利申请US-A-2018/0064635中公开的。一般来说，在腹足类受到一定的压力条件后，分泌物被收集并过滤。

蜗牛分泌物通常为液体形式，pH值通常在5-8范围内，密度通常为约1.0至约1.1g/ml，干残留物通常为0.1％至3％，优选为0.2％至2％，更优选为0.25％至1％，并且更优选包含在0.3％和0.7％之间。蛋白质含量通常在0.1-3mg/ml的范围内。

蜗牛分泌液可从多个来源商购，例如，西班牙Cobiosa公司(作为产品Poly-Hexilan PF出售)或意大利CENISIA Laboratorio di Fitocosmesi di Bruno Dott.saLaura Francesca&C.s.a.s.公司(作为Prodotto 580038出售)等。

可以使用不同种类的腹足类来获得这种分泌物，其中包括：Achatina fulica,Cornu aspersum(或Helix aspersa或Cryptomphalus aspersa或Cantareus aspersus),Helix pomatia,Helix hortensis,Helix nemoralis,Helix cardidula,Helixtchthyomma,Helix fructicicola,Helix strigella,Helix fruticum,Helix bidens,Helix arbostorum,Helix rotundata,Helix aculeata,Helix pulchella,Helixpersonata,Helix holoserica,Helix aperta,Helix parnassia,Helix alonensis,Helixcandidissima,Helix pisana或Helix gualteviana。在一个特定的实施方案中，蜗牛分泌物从Cornu aspersum获得，也被称为Helix aspersa,Cryptomphalus aspersa或Cantareusaspersus。

蜗牛分泌物的医药和化妆品用途已在现有技术中公开，例如作为抗微生物剂、用于伤口修复、用于皮肤保护或作为抗老化剂等用途。

本发明的作者惊奇地发现，MIA抑制剂物质和蜗牛分泌物的组合在治疗白癜风方面提供了优异的结果。

事实上，如对比实施例3中所公开的，发现尽管仅包含蜗牛分泌物的组合物对白癜风色素沉着皮肤没有任何作用，但该物质与MIA抑制剂的组合提供了最佳的抗白癜风效果，受影响区域的色素沉着显著重新。

本发明组合物中蜗牛分泌物的量通常为0.5％至15％，优选为1％至10％，更优选为2％至8％，还更优选为约5％，其中百分比以所述蜗牛分泌物的重量相对于所述组合物的总重量来表示。

本发明的组合物

本发明的组合物包含MIA抑制剂肽、蜗牛分泌物和至少一种药学上可接受的赋形剂。

术语“赋形剂”或“药学上可接受的赋形剂“是指药物组合物中非活性成分的成分，该成分可用于制备药物组合物，通常对人类药物用途是安全无毒的。特别是，本发明的组合物通常用于外用，局部应用于受影响的皮肤区域，因此药学上可接受的赋形剂特别是“皮肤病学上可接受”，即它适用于与人体皮肤组织接触且无毒。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物用于局部给药，即，将其涂抹在待治疗区域的皮肤上，即，在显示白斑色素性色素沉着或易于显示白斑色素沉着的区域。局部、皮肤或皮肤给药在此可互换使用。

可以使用适合局部给药的任何类型的制剂。通常，本发明的组合物是本领域公知的奶油、凝胶、奶油、乳液、糊状物、泡沫、溶液、悬浮液、乳液、牛奶或棒状制剂的形式。例如，奶油是介于奶油和凝胶之间的一种制剂：与奶油不同，奶油是凝胶水溶液或凝胶油，但看起来像奶油一样不透明，通常为白色。

合适的载体可以是例如无水的，作为脂肪、蜡、动物和植物油以及固体和液体烃的混合物。或者载体可以是水或亲水物质的水溶液。适宜地，载体可以是乳液的形式。乳液通常可以是水包油乳液、油包水乳液、水包油水包水、油包水包油或水包硅乳液。乳液通常可描述为具有连续水相(水包油和水包油)或连续油相(油包水和油包水)。油相可包括硅油、非硅油，例如石蜡烃、脂肪醇(例如硬脂醇、十六醇或十六烷醇)、脂肪酸(例如硬脂酸、油酸)、脂肪酸酯(例如肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯)、蜡或植物油(例如蓖麻油、菜籽油、棉籽油、荷荷巴油或花生油)或其混合物。水相可包含水或亲水物质的水溶液，例如醇(例如乙醇、异丙醇)、多元醇(例如甘油、山梨醇)、α-羟基酸、氨基酸、蛋白质水解物、单糖或多糖。

乳化剂是乳液的常见成分，是表面活性剂(表面活性剂)，包括非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂，阳离子表面活性剂和两性表面活性剂。除其他外，非离子表面活性剂包括乙氧基化脂肪醇、乙氧基脂肪酸酯、烷基葡糖苷或烷基低聚葡糖苷、乙氧化山梨醇脂肪酸酯、单甘油/聚甘油脂肪酸酯、乙氧基化甘油单酯、乙氧氧基化聚甘油酯、烷基二甲胺氧化物或泊洛沙姆等。阴离子表面活性剂包括碱性皂、烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、烷基磷酸盐、酰基肌氨酸盐或酰基异硫氰酸盐等。阳离子表面活性剂包括季铵盐或吡啶盐等。两性表面活性剂包括咪唑啉衍生物、甜菜碱、酰胺基甜菜碱和磺基甜菜碱。

配方中的其他常见成分包括润肤剂、保湿剂、防腐剂、粘度控制剂、抗氧化剂、pH调节剂、紫外线过滤器、螯合剂、香水和着色剂。常见的润肤剂有，例如，石蜡烃、硅酮、脂肪醇、脂肪酸、脂肪酸与醇的酯、甘油三酯、神经酰胺、磷脂和蜡。保湿剂包括多羟基醇、蛋白质和羟基酸。常见的防腐剂包括山梨酸及其盐、苯甲酸及其盐、对羟基苯甲酸酯、咪唑啉基脲、重氮烷基脲、DMDM乙内酰脲、羟甲基甘氨酸钠、甲基氯异噻唑啉酮/甲基异噻唑啉啉酮、苄醇和2-苯氧基乙醇等。还可以添加其他添加剂以控制制剂的粘度，例如黄原胶、结冷胶、阿拉伯胶、卡拉胶、壳聚糖、胶原蛋白、黄冈聚糖、果胶、淀粉衍生物、卡波姆、纤维素衍生物(例如羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素或羧甲基纤维素)、，聚酰胺、谷氨酰胺、胶体二氧化硅或蜡(例如蜂蜡或植物蜡)等。

组合物的一些成分可作为渗透促进剂，以促进活性成分渗透到整个角质层。常见的渗透促进剂是例如短链醇，例如乙醇或异丙醇；长链醇，如癸醇、己醇、月桂醇、肉豆蔻醇、辛醇、辛基十二醇或油醇；环状酰胺如氮酮；酯如乙酸乙酯-水杨酸辛酯、邻苯二甲酸酯、油酸乙酯、单酸甘油酯、单辛酸甘油酯、三辛酸甘油酯，肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯，单月桂酸丙二醇酯或单辛酸丙二醇酯；醚醇，如脂肪酸，如月桂酸、亚油酸、亚麻酸、肉豆蔻酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸或异硬脂酸；二醇如二丙二醇、丙二醇、1,2-丁二醇或1,3-丁二醇；吡咯烷酮如N-甲基-2-吡咯烷酮或2-吡咯烷酮；亚砜如癸基甲基亚砜或二甲基亚砜；阴离子表面活性剂；阳离子表面活性剂；非离子表面活性剂；萜类化合物，如丁香酚D-柠檬烯、薄荷醇、薄荷酮、法尼醇(farnesol)或苦苣(neridol)(例如在下列中讨论：LaneM.E.,Skin penetration enhancers,Int.J.Pharm.,2013,447,12-21；或Haque et al.,Chemical enhancer:a simplistic way to modulate barrier function of thestratum corneum,Adv.Pharm.Bull.,2018,8(2),169-179)。

本发明的组合物通常具有接近皮肤生理pH的微酸性pH。常见的酸度调节剂是有机酸，包括羟基酸和脂肪酸。化妆品乳液中一些最常见的pH调节剂是羟基酸，如乳酸或柠檬酸。

一种赋形剂可以执行多种功能。上述成分以及许多其他合适的皮肤科制剂赋形剂是本领域组合物的熟练配方师所熟知的。此类成分可从多家公司商购，如Comercial Química Massó、SA、Evonik、杜邦或Dow Corning等。

局部组合物的制备是根据皮肤病学组合物配方中技术人员熟知的程序进行的，通常包括混合和任选加热组分成分的简单步骤。

例如，通常可通过将油相和水相分别加热至约60至80℃的温度，然后在搅拌下混合以制备乳液来制备奶油。

组合物的主要成分和制备它们的步骤完全类似于用于制备局部化妆品配方的那些，并且例如在下列中有所描述：Cosmetic Formulation.Principles and Practice,Benson H.A.E.,Roberts M.S.,Rodrigues Leite-Silva V.and Walters K.A.,editors,CRC Press,2019，，或其他类似参考书。此外，欧盟委员会数据库“CosIng”中披露了受管制的化妆品物质和成分(https://ec.europa.eu/growth/tools-databases/cosing)。

典型地，例如，首先使用本领域公知的标准成分和程序制备乳膏、凝胶或乳液基础制剂，然后添加蜗牛分泌物和MIA抑制剂肽(以游离形式或胶囊形式)并充分混合，最后调节组合物的pH。

组合物的用途

如实施例3和4中所述的前瞻性临床试验所示，本发明的组合物对治疗白癜风非常有效，治疗后的色素沉着区域明显重新色素沉着。

因此，本发明的另一方面是用于预防和/或治疗白癜风的本发明组合物。

本发明的另一方面是预防和/或治疗有需要的患者白癜风的方法，包括施用治疗有效量的本发明组合物的步骤。

白癜风的治疗被理解为旨在改善白癜风症状的程序，即部分或完全恢复色素沉着或色素减退的皮肤斑块的正常色素沉着。

在一个实施方案中，白癜风的预防和/或治疗涉及非节段性白癜风的预防或治疗。

白癜风的预防旨在预防白癜风症状的发作，并针对已知易患白癜风的受试者，这些受试者要么在症状出现之前就已被早期诊断，例如通过检测黑素细胞中MIA蛋白的存在，或是否具有某种已知的遗传易感性。白癜风的预防还包括治疗以前患有白癜风并已康复的患者，即他们已经实现了白斑色素性色素沉着皮肤的重新着色，以防止他们再次患上白癜风症状。

典型地，本发明的组合物是局部施用的，即，将其散布在白斑皮肤贴剂上。

在一个实施方案中，本发明的组合物可以经皮递送，例如，通过离子电渗、超声或使用微针递送(Escobar-Chávez et al.Microneedles:a valuable physical enhancerto increase transdermal drug delivery,J.Clin.Pharmacol.,2011,51(7),964-977)。

被认为是“治疗有效”的组合物的用量可以根据许多因素而广泛变化，例如，疾病的严重程度和进展阶段，或所用的特定制剂。熟练的从业者可以在每种情况下容易地调整该量。一般而言，施用于受影响皮肤的局部组合物的量可以为每cm²皮肤表面积(mg/cm²)约0.1mg组合物至约100mg/cm²，优选约5mg/cm²至约10mg/cm²。

本发明的组合物可以每天局部施用一次或多次，例如每天两次、三次或四次。该组合物通常通过将其涂抹在皮肤上，通常仅涂抹在受影响的皮肤区域上。治疗的持续时间可以根据患者的发展进行调整。通常，根据白癜风症状的严重程度和疾病的演变，治疗可以维持数周，例如1、2、3或4周，或数月，例如1至12个月，甚至更长。熟练的医生可以容易地调整治疗的持续时间。

有利地，本发明组合物的治疗可与光疗结合，例如通过简单的阳光照射或使用日光浴床，以刺激黑素细胞的形成和迁移，从而促进恢复。事实上，如实施例4所示，本发明的组合物与阳光照射相结合，导致几乎完全恢复，即皮肤完全重新着色。

因此，本发明的另一个方面是一种用于预防和/或治疗有需要的患者的白癜风的方法，该方法包括施用治疗有效量的本发明组合物并使经治疗的皮肤区域暴露于光疗的步骤。

本文中使用的术语“光疗”或“光疗法”包括暴露于阳光或特定波长的辐射，例如，UV辐射，包括UVA和UVB辐射。因此，“光疗”可以通过简单地暴露在阳光下，或使用日光浴床，或使用辐射发射装置，特别是紫外线发射装置来进行。

光疗的持续时间不是决定性的，并且可以在例如每天约10分钟至约2小时的范围内，或者在每隔一天，或者每周两次或三次，以及其他合适的选择。

白癜风可以影响皮肤的任何区域，因此该组合物可以应用于任何受影响(脱色)的皮肤区域。受白癜风影响最常见的皮肤区域是手和脸，身体开口周围(眼睛、鼻孔、嘴巴、肚脐和生殖器区域)，以及身体褶皱内，如腋下和腹股沟，因此更需要治疗。

在一个实施方案中，本发明组合物用于治疗白癜风的用途可与抗氧化剂的用途相结合，特别是当治疗与光疗相结合时，以减少辐射暴露的可能负面影响。

抗氧化剂通常用于口服。合适的抗氧化剂尤其是维生素E、维生素C、类胡萝卜素(如番茄红素)、β胡萝卜素、α-胡萝卜素、绿茶提取物、锌、硒、Polypodium leucotomos提取物等，或其组合

它们可以配制成膳食口服补充剂，通常为片剂、粉末或胶囊，例如使用本领域已知的标准赋形剂和制备工艺。

在一个实施方案中，本发明涉及包含本发明组合物和包含抗氧化剂的膳食补充剂的试剂盒。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种试剂盒，该试剂盒包含本发明的组合物和一种膳食补充剂，该膳食补充剂包含用于预防和/或治疗白癜风的抗氧化剂。

本发明的另一个方面也是一种用于预防和/或治疗有需要的患者白癜风的方法，该方法包括以下步骤：施用治疗有效量的本发明组合物，将经治疗的皮肤区域暴露于光疗，并向患者施用抗氧化剂。

本发明可以根据以下实施方案来定义：

1.一种药物组合物，包含：

(a)具有选自SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:49的序列或其衍生物的MIA抑制剂肽；

(b)蜗牛分泌物；和

(c)至少一种药学上可接受的赋形剂。

2.根据实施方案1的药物组合物，其特征在于，所述序列选自SEQ ID NO:12-20和27-49，优选选自SEQ ID NO:34、37、39-43和45-47，或选自SEQ ID NO:34、38、40和41。

3.根据实施方案2的药物组合物，其特征在于，序列为SEQ ID NO:40。

4.根据实施方案1至3中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述衍生物选自：

i)其中添加一种附加氨基酸或其中删除一种氨基酸的序列；

ii)其中一种或多种氨基酸，优选不多于3种氨基酸，更优选不多于2种氨基酸，并且更优选仅一种氨基酸被另一种天然或非天然氨基酸取代的序列；和

iii)如根据i)或ii)的SEQ ID NO:1-49中定义的序列或其衍生物，其中至少一种氨基酸被修饰，并且其中所述修饰选自糖基化、乙酰化、酰胺化(C-末端)、羟基化(羟脯氨酸)、羧化(γ-羧谷氨酸盐)、磷酸化、烷基化、N-末端脂质化和预酰化；优选地，所述序列在N末端乙酰化和/或在C末端酰胺化；和更优选该序列在N末端乙酰化并在N末端酰胺化。

5.根据实施方案1至3中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述衍生物包含所述序列的至少一种氨基酸被修饰，并且其中所述修饰选自糖基化、乙酰化、酰胺化(C-末端)、羟基化(羟脯氨酸)、羧化(γ-羧谷氨酸)、磷酸化、烷基化、N-末端脂质化和预酰化；优选地，所述序列在N末端乙酰化和/或在C末端酰胺化；和更优选该序列在N末端乙酰化并在N末端酰胺化。

6.根据实施方案1至5中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述MIA抑制剂肽被封装或与载体纳米颗粒缀合。

7.根据实施方案6所述的药物组合物，其特征在于，所述MIA抑制剂肽被封装在微胶囊或纳米胶囊内，所述微胶囊或纳米胶囊在外表面上附着有作为黑素皮质素1(MC1)受体激动剂的特定肽。

8.根据实施方案7的药物组合物，其特征在于，MC1受体激动剂是下式的肽：

R₂-Ser-Tyr-Ser-Nle-Glu-His-DPhe-Arg-(AA)-Gly-Lys-DPro-Val-R₁

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中：

R₁是基团-NH-(CH₂)₃-O-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)₃-NH₂，其中n是1-10的整数；例如，n是1和R₁来自乙二醇双(3-氨基丙基)醚(CAS No.2997-01-5)；在另一示例中，n是2和R₁来自二甘醇双(3-氨基丙基)醚，也称为4,7,10-三氧杂-1,13-十三烷二胺(CAS No.4246-51-9)；

R₂选自(C_1-24烷基)-CO-、(C_2-24烯基)-CO-和(C_6-10芳基)-CO-；例如，R₂选自乙酰基、丙酰基、十五酰基、十六酰基和十七酰基(棕榈酰基)；和

AA是含有芳族基团的氨基酸；例如，AA可以选自色氨酸、3-(2-萘基)-D-丙氨酸、3-氨基-3-(1-萘基)丙酸、3-氨基-3(联苯)丙酸、苯丙氨酸、酪氨酸、组氨酸、5-羟色氨酸和L-3,4-二羟基-苯丙氨酸。

9.根据实施方案6的药物组合物，其特征在于，MIA抑制剂肽与金纳米粒子缀合。

10.根据实施方案1至9中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物中MIA抑制剂肽的量为0.0001％至1％，优选0.0005％至0.1％，更优选0.001％至0.05％，其中所述百分比以MIA抑制剂的重量相对于所述组合物的总重量来表示。

11.根据实施方案1至10中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物中蜗牛分泌物的量为0.5％至15％，优选1％至10％，更优选2％至8％，更优选约5％，其中所述百分比以所述蜗牛分泌物的重量相对于所述组合物的总重量来表示。

12.根据实施方案1至11中任一项的药物组合物，其特征在于，其用于局部使用。

13.根据实施方案12所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物选自奶油、凝胶、奶油、洗剂、糊剂、泡沫、溶液、悬浮液、乳液、牛奶和棒，优选选自奶油、凝胶体和奶油，更优选选自奶油和凝胶。

14.一种试剂盒，包含根据实施方案1至13中任一项的药物组合物和包含抗氧化剂的膳食补充剂。

15.根据实施方案1至13中任一项的药物组合物或根据实施方案14的试剂盒在预防和/或治疗白癜风中的用途。

16.根据实施方案15所述的药物组合物或试剂盒的用途，其特征在于，白癜风是非节段性白癜风。

17.一种预防和/或治疗有需要的患者白癜风的方法，包括施用治疗有效量的实施方案1至13的组合物的步骤。

18.一种用于预防和/或治疗有需要的患者白癜风的方法，包括施用治疗有效量的实施方案1至13的组合物并将治疗的皮肤区域暴露于光疗的步骤。

19.根据实施方案18的方法，其中光疗包括暴露于阳光或特定波长的辐射，例如UV辐射，包括UVA和UVB辐射。

20.根据实施方案18或19所述的方法，其中所述方法包括向患者施用抗氧化剂的附加步骤。

21.根据实施方案17至20中任一项所述的方法，其中白癜风是非节段性白癜风。

实施例

实施例1 MIA抑制剂肽

SEQ ID NO:40的MIA抑制剂用于制备实施例2的组合物。

制备实施例1：封装的MIA抑制剂肽

MIA抑制剂肽的靶向微胶囊制备为双层微胶囊，其中内部聚合物是(D,L-丙交酯-co-乙交酯)(PLGA)和外层聚合物是聚乙烯醇(PVA)，所述胶囊已将黑素皮质素1(MC1)受体激动剂肽棕榈酰-Ser-Tyr-Ser-Nle-Glu-His-DPhe-Arg-Trp-Gly-Lys-DPro-Val-NH-(CH₂)₃-(OCH₂CH₂)₂-CH₂-NH₂(SEQ ID NO:50)附着到表面，通过肽的氨基末端基团和可从PLGA获得的胶囊表面上的羧基之间的酰胺键与胶囊偶联。使用与国际专利申请WO-A-2015/075116的实施例1中公开的方法类似的方法制备所述微胶囊。

所获得的胶囊中MIA抑制剂肽的比例相对于胶囊的总重量为约35重量％。

这些靶向胶囊以包含约0.1重量％胶囊的水溶液的形式(该溶液还包含黄原胶、苯氧乙醇、辛基二醇、甘油、辛酸甘油酯和苯基丙醇)并入本发明的组合物(参见实施例2)。

制备实施例2：金抗MIA肽缀合物

MIA抑制剂肽(SEQ ID NO:40)按照与国际专利申请WO-A-2019/185696的实施例1和2中公开的程序类似的程序与金纳米粒子缀合，首先通过用柠檬酸钠还原金盐(HAuCl₄)制备金纳米粒子，然后加入MIA抑制剂多肽。

相对于金MIA抑制剂缀合物的总重量，MIA抑制剂肽在金缀合物中的比例为约25重量％。

将该缀合物以包含约0.5重量％的缀合物的水性分散体(该分散体还包含黄原胶和苯氧乙醇)的形式并入本发明的组合物(参见实施例2)。

实施例2本发明组合物的制备

使用下表中列出的组分制备根据本发明的组合物：

使用SEQ ID NO:40的MIA抑制剂(“抗MIA”)肽制备组合物。如实施例1中所公开的，添加以下物质：

封装在黑素细胞靶向胶囊(成分D2a)内

作为与金纳米颗粒(组分D2b)的缀合物

作为游离肽(组分D2c)

如实施例1中所公开的，将组分D2a和D2b作为溶液/分散体加入。将组分D2c(游离MIA抑制剂肽)作为水溶液(0.1重量％)加入。

因此，MIA抑制剂肽在组合物A、B、C和D中的比例分别为约0.0035％(35ppm)、0.0025％(25ppm)、0.005％(50ppm)和0.01％(100ppm)。

为了制备该组合物，将第一组分A1-A6加热至约70℃至75℃，并充分混合以获得第一液相(“相A”)。将组分B1-B8单独混合以形成溶液，将其加热至约70℃至75℃。将相A添加到该溶液中，并在高剪切Ultra Turrax混合器中以8000rpm乳化约3分钟，然后将乳液在叶片混合器中以300rpm搅拌约15分钟。在60℃下加入组分C1-C3，使混合物冷却至室温，最后加入组分D1、D2a/D2b/D2c和D3之一。检查组合物的最终pH值在5.5-6.5范围内(或用10％柠檬酸或10％NaOH调节)。

实施例3评估MIA抑制剂肽-蜗牛分泌组合的疗效的比较研究

在所进行的试验中，在白癜风患者中对多达三种成分进行了比较测试。为了获得可靠的对比数据，通过在不同的脱色区域使用这三种成分，对每个患者进行了测试。图1显示了随机处理位点的一些示例，例如三种假设测试组合物(1、2和3)。

为了评估MIA抑制剂肽和蜗牛分泌物的组合效果，比较了以下组合物：

使用与实施例1中公开的相同的赋形剂A1-A5、B1-B8、C1-C3和D3以相同的量制备比较I和比较II组合物，并调节水的量。比较I制剂包含5％的蜗牛分泌物(D1)，但没有MIA抑制剂，并且比较II制剂包含5％MIA抑制剂肽0.1％溶液(即50ppm)，但不包含蜗牛分泌物。式C包含5％的蜗牛分泌物和50ppm的MIA抑制剂肽。比较式的制备与实施例2中公开的类似。

在试验中，3名患有白癜风的受试者(2名女性和1名男性)使用三种制剂进行治疗。治疗了不同的解剖部位，包括面部、胸部、腋下、手臂、肘部、前臂、手腕、手、腹部、背部、臀部、大腿、膝盖和腿。

治疗包括在3个月的时间内，每天两次在治疗区域涂抹面霜。

治疗完成后，通过使用0-10等级评估治疗区域的再色素沉着的百分比来评估疗效，其中0表示无效果和10表示受影响区域的100％再色素沉着。

结果如下表所示：

组合物	效果
		比较-1	0
比较-2	2
		C	6

因此，仅包含蜗牛分泌物的组合物没有提供任何改善。仅包含MIA抑制剂的组合物仅提供白班贴剂的中度再色素沉着(约20％)。包含蜗牛分泌物和MIA抑制剂两者的本发明组合物(组合物C)提供了最佳结果，受影响的皮肤区域几乎有60％的色素沉着。

实施例4评估本发明组合物功效的临床研究

进行了一项前瞻性临床研究，以评估制剂A、B和C的有效性(实施例2)。

11名患有非节段性白癜风的患者(7名女性和4名男性，年龄18至60岁)入选。治疗了16个不同的解剖部位，即眼睛周围、嘴周围、颈部、胸部、腋下、手臂、肘部、前臂、手腕、手、腹部、背部、臀部、大腿、膝盖和腿。

通过在不同的色素脱失区域使用这三种制剂，对所有患者进行了测试。例如，如图1所示，对治疗部位进行随机化。

治疗包括每天两次在治疗区域涂抹面霜，持续5个月。在治疗期间，患者被要求接受一些阳光照射或使用日光浴床。患者还被要求服用口服抗氧化组合物(包括Polypodiumleucotomos提取物、绿茶提取物和维生素E)，以中和阳光照射可能产生的任何不良影响。

9名患者(即82％的患者)在所有三种治疗方案中都显示出至少部分色素沉着，而其中2名患者无应答。大多数受访者显示，白班色素沉着区域的显著再色素沉着，其中90％或更高的色素沉着程度。

三种测试组合物(A、B和C)之间没有发现显著差异。

例如，图2显示了一名患者在治疗前后的面部，左侧使用组合物A，和右侧使用组合物B。图3显示了另一名患者在治疗前后的面部，该患者接受了组合物C的治疗。

序列表

<110> 贝雅欧若拉实验室公司

M·博尔迪格农

<120> 治疗白癜风的药物组合物

<130> PCT4007.2

<150> EP20382617

<151> 2020-07-09

<160> 50

<170> BiSSAP 1.3.6

<210> 1

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 1

Val Pro His Ile Pro Pro Asn

1 5

<210> 2

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 2

Met Pro Pro Thr Gln Val Ser

1 5

<210> 3

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 3

Gln Met His Pro Trp Pro Pro

1 5

<210> 4

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 4

Gln Pro Pro Phe Trp Gln Phe

1 5

<210> 5

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 5

Thr Pro Pro Gln Gly Leu Ala

1 5

<210> 6

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 6

Ile Pro Pro Tyr Asn Thr Leu

1 5

<210> 7

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 7

Ala Val Arg Pro Ala Pro Leu

1 5

<210> 8

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 8

Gly Ala Lys Pro His Pro Gln

1 5

<210> 9

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 9

Gln Gln Leu Ser Pro Leu Pro

1 5

<210> 10

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 10

Gly Pro Pro Pro Ser Pro Val

1 5

<210> 11

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 11

Leu Pro Leu Thr Pro Leu Pro

1 5

<210> 12

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 12

Gln Leu Asn Val Asn His Gln Ala Arg Ala Asp Gln

1 5 10

<210> 13

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 13

Thr Ser Ala Ser Thr Arg Pro Glu Leu His Tyr Pro

1 5 10

<210> 14

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 14

Thr Phe Leu Pro His Gln Met His Pro Trp Pro Pro

1 5 10

<210> 15

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 15

Val Pro His Ile Pro Pro Asn Ser Met Ala Leu Thr

1 5 10

<210> 16

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 16

Arg Leu Thr Leu Leu Val Leu Ile Met Pro Ala Pro

1 5 10

<210> 17

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 17

Tyr Asn Leu Pro Lys Val Ser Ser Asn Leu Ser Pro

1 5 10

<210> 18

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 18

Met Pro Pro Thr Gln Val Ser Lys Phe Arg Leu Ile

1 5 10

<210> 19

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 19

Ala Asn Ile Asp Ala Thr Pro Leu Phe Leu Arg Ala

1 5 10

<210> 20

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 20

Leu Leu Arg Thr Thr Glu Thr Leu Pro Met Phe Leu

1 5 10

<210> 21

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 21

Ser Ala Leu Glu Pro Leu Val

1 5

<210> 22

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 22

Gly Ser Pro Thr Pro Asn Ala

1 5

<210> 23

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 23

Ala Pro Ser His Ala Thr His

1 5

<210> 24

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 24

Thr Thr Val Gly His Ser Asp

1 5

<210> 25

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 25

Thr His Phe Ser Thr Phe Thr

1 5

<210> 26

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 26

Ser Leu Leu Leu Asp Thr Ser

1 5

<210> 27

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 27

Ser Val Ala Met Lys Ala His Lys Pro Leu Leu Pro

1 5 10

<210> 28

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 28

Asn Thr Ile Pro Gly Phe Ala Ser Lys Ser Leu Asp

1 5 10

<210> 29

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 29

Val Ser Asn Tyr Lys Phe Tyr Ser Thr Thr Ser Ser

1 5 10

<210> 30

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 30

Val Ser Arg His Gln Ser Trp His Pro His Asp Leu

1 5 10

<210> 31

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 31

His Leu Asn Ile Leu Ser Thr Leu Trp Lys Tyr Arg

1 5 10

<210> 32

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 32

His Asn Ala Ser Pro Ser Trp Gly Ser Pro Val Met

1 5 10

<210> 33

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 33

Ser His Pro Trp Asn Ala Gln Arg Glu Leu Ser Val

1 5 10

<210> 34

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 34

His His Trp Pro Phe Trp Arg Thr Leu Pro Leu Ser

1 5 10

<210> 35

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 35

Trp His Thr Lys Phe Leu Pro Arg Tyr Leu Pro Ser

1 5 10

<210> 36

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 36

Asn Asn Thr Ser Phe Thr Val Val Pro Ser Val Pro

1 5 10

<210> 37

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 37

Ser His Leu Ser Thr Trp Lys Trp Trp Gln Asn Arg

1 5 10

<210> 38

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 38

Phe His Trp His Pro Arg Leu Trp Pro Leu Pro Ser

1 5 10

<210> 39

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 39

Trp His Trp Thr Tyr Gly Trp Arg Pro Pro Ala Met

1 5 10

<210> 40

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 40

Phe His Trp Arg Tyr Pro Leu Pro Leu Pro Gly Gln

1 5 10

<210> 41

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 41

Trp His Trp Pro Leu Phe Ile Pro Asn Thr Thr Ala

1 5 10

<210> 42

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 42

Trp His Asn Gly Ile Trp Trp His Tyr Gly Val Arg

1 5 10

<210> 43

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 43

His His Leu Asn Tyr Leu Trp Pro Trp Thr Arg Val

1 5 10

<210> 44

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 44

Phe Trp His Arg Trp Ser Thr Phe Pro Glu Gln Pro

1 5 10

<210> 45

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 45

Trp His Met Ser Tyr Phe Trp Thr Arg Pro Pro Gln

1 5 10

<210> 46

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 46

Phe His Leu Asn Trp Pro Ser Arg Ala Asp Tyr Leu

1 5 10

<210> 47

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 47

Trp His Lys Asn Thr Asn Trp Pro Trp Arg Thr Leu

1 5 10

<210> 48

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 48

Ala Leu Ser Pro Ser Gln Ser His Pro Val Arg Ser

1 5 10

<210> 49

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MIA抑制剂(MIA inhibitor)

<400> 49

Gly Thr Gln Ser Thr Ala Ile Pro Ala Pro Thr Asp

1 5 10

<210> 50

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221>

<222>

<223> MC1 受体激动剂; 4: Nleu; 7: DPhe; 12: DPro; 1: 乙酰化;

13: 酰胺化(MC1 receptor agonist; 4: Nleu; 7: DPhe; 12: DPro; 1:Acetylation;

13: Amidation)

<400> 50

Ser Tyr Ser Leu Glu His Phe Arg Trp Gly Lys Pro Val

1 5 10

Claims (14)

1.一种药物组合物，包含：

(a)黑色素瘤抑制活性蛋白(MIA)抑制剂肽，具有选自SEQ ID NO:12-20和27-49的序列或其衍生物，其中衍生物意味着所述肽在N末端乙酰化和/或在C末端酰胺化；

(b)蜗牛分泌物；和

(c)至少一种药学上可接受的赋形剂。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述序列选自SEQ ID NO:34、38、40和41。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述序列为SEQ IDNO:40。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述C-末端酰胺化包括形成式-CONH₂、-CONHR或-CONR₂的末端酰胺基，其中R是C₁-C₄烷基。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述MIA抑制剂肽被封装或与载体纳米颗粒缀合。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述MIA抑制剂肽被封装在微胶囊或纳米胶囊内，所述微胶囊或纳米胶囊在外表面上附着有作为黑素皮质素1(MC1)受体激动剂的特定肽。

7.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述MIA抑制剂肽与金纳米颗粒缀合。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物中MIA抑制剂肽的量占0.0001％至1％，以MIA抑制剂的重量相对于所述组合物的总重量来表示。

9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物中MIA抑制剂肽的量占0.0005％至0.1％，以MIA抑制剂的重量相对于所述组合物的总重量来表示。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物中蜗牛分泌物的量占0.5％至15％，以所述蜗牛分泌物的重量相对于所述组合物的总重量来表示。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物用于局部使用。

12.根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物选自乳膏和凝胶。

13.一种试剂盒，包含根据权利要求1至12中任一项所述的药物组合物和包含抗氧化剂的膳食补充剂。

14.根据权利要求1至12中任一项所述的药物组合物或根据权利要求13所述的试剂盒在预防和/或治疗白癜风中的用途。