CN116577498A - 用于检测尿液中hiv抗体的样品垫的应用、试纸条及样品垫处理液 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药检测技术领域，具体涉及用于检测尿液中HIV抗体的样品垫的应用、试纸条及样品垫处理液。本发明的样品垫由上层的玻璃纤维膜和下层的聚酯纤维膜组成，样品垫的上层采用样品垫处理液A处理，下层采用处理液B处理，样品垫处理液A与样品垫处理液B中均含高分子分散剂、封闭剂、表面活性剂，样品垫处理液A中还含有K2CO3‑HAc缓冲液，处理液B中还含有Na2CO3‑HAc缓冲液。本发明的样品垫对待测样品具有优异的过滤能力，能够延长待测样品与样品垫的接触时间。样品垫经处理液处理之后，能快速调节样品的pH，扩大样品检测的pH范围，同时提高免疫金的溶解释放速度，利于免疫金颗粒形成均匀层析形态，对消除假阳性、提高检测的灵敏度意义重大。
Description
技术领域
本发明属于医药检测技术领域，具体涉及用于检测尿液中HIV抗体的样品垫的应用，以及含有该样品垫的试纸条、用于该样品垫处理的样品垫处理液。
背景技术
人类免疫缺陷病毒是一种感染人类免疫系统细胞的病毒，该病毒通过破坏人体免疫细胞，使人体免疫系统失去抵抗力，进而导致各种疾病。
目前，HIV初筛的主要检测方法有：血液检测、口腔粘膜渗出液检测、尿液检测，但是血液检测或者口腔黏膜渗出液进行检测的检测方式，在检测过程中需要医护人员进行取样，若取样过程中操作不当极易戳伤检测对象的取样部位，致使检测时存在较大的感染风险。
以尿液为样本进行检测，由于检测过程中毋须医护人员取样，HIV感染的风险大大降低，因此，HIV的尿液检测方法成为研究的热点。
但是研究表明，尿液中HIV抗体的含量远低于血液，因此，采用普通的试纸条来检测尿液中HIV抗体时试纸条的灵敏度难以达到要求，此外，尿液中还含有大量的尿酸等酸性成分，这也使得尿液的pH值较低，个别尿液样品为弱酸性甚至强酸性，相较于呈弱碱性的血液而言，尿液中大量酸性成分的存在，极易引起检测线上捕获蛋白的电荷变化，从而导致胶体金检测方法的假阳性现象出现，使得HIV抗体的尿液检测方法相比于血液，唾液的检测方法而言准确率不高，因此，用于检测尿液中HIV抗体的试纸条既要有很好的灵敏度，又要避免假阳性的情况出现，这就对试纸条的质量提出了更高的要求。
并且，现有的用于HIV抗体或者常见病毒抗体检测的试纸条，其样品垫均是由一种膜材料构成的单层膜结构，这一结构特点使得待测样品在样品垫上的移动速率非常快，样品在样品垫上的停留时间较短，样品中含有的酸性物质来不及与样品垫中的试剂充分反应，待样品到达检测线时，这些未充分被反应的少量酸性成分会引起检测线上蛋白电荷变化，进而造成假阳性引起误判。
除此之外，现有的样品垫处理液中所采用的缓冲液多为Trils-HCl缓冲液、硼酸、柠檬酸、磷酸盐等缓冲液，以上的缓冲液普遍存在反应速率慢的问题，加之样品在样品垫上具有较快的移动速度，因此在对尿液进行检测时，尿液中的酸性成分难以被充分中和，容易造成检测结果的不准确。
因此，研发一种适合用于检测尿液中HIV抗体的、准确度及灵敏性更高的试纸条，避免现有的试纸条使用时可能出现的准确性差、检测的pH范围小等问题意义重大。
发明内容
为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种用于检测尿液中HIV抗体的样品垫的应用、试纸条及样品垫处理液。
本发明所提供的用于检测尿液中HIV抗体的样品垫由上层的玻璃纤维膜和下层的聚酯纤维膜组成；上层玻璃纤维膜经过样品垫处理液A浸泡后干燥，下层的聚酯纤维膜经过样品垫处理液B浸泡后干燥；所述的样品垫处理液A中，缓冲液为K2CO3-HAc，pH为9.0~10.0、浓度为80 mM ~130mM，每100mL的缓冲液中，含有高分子分散剂0.2 g ~2g，封闭剂0.2 g ~1.0g，表面活性剂0.1 g ~1.0g；所述的样品垫处理液B中，缓冲液为Na2CO3-HAc，pH为8.5~9.5、浓度为30 mM ~60 mM，每100mL的缓冲液中，含有高分子分散剂0.2 g ~2.0g，封闭剂0.2 g ~1.0g，表面活性剂0.1 g ~1.0g。
本发明中所提供的样品垫，完全区别于传统胶体金免疫层析试纸条的样品垫，其是由两层质地完全不同的膜组合而成，其中上层的玻璃纤维膜，质地疏松，经本发明的高pH、高浓度的样品垫处理液A处理后，处于弱碱性的环境中，能够中和待检测尿液样本中所含有的部分尿酸等酸性物质，起到初步过滤样品的作用和中和酸性物质的作用；同时，由于上层玻璃纤维膜的质地较为疏松，尿液样品在上层膜上能够保持合适的流动速度，为下层质地较细密的聚酯纤维膜（聚酯薄膜）比较缓慢地供应样品，延长了样品在样品垫上的停留时间，从而增加了样品垫中试剂与样品的反应时间。
另外，样品垫的下层膜是质地较细密的聚酯纤维膜，该膜经样品垫处理液B处理后，样品垫处理液B中的成分能够与上层样品垫渗透出来的样品充分接触并反应，进一步提高样品的稳定性。
本发明将两层质地差异显著的纤维膜组合制成的样品垫，能够实现对待检测尿液样品的良好过滤效果，同时对尿液样品的流动起到一定的缓冲作用，利于待检测样品与下层样品垫中的试剂充分反应，进而消除样品检测过程可能出现的由酸性物质引起的假阳性情况，而且，上层样品垫的过滤和缓冲作用还能够使样品的成分和流速趋于稳定，为层析过程中的免疫反应提供了适合的pH值及离子强度，利于提高尿液中HIV抗体检测的灵敏度。
本发明所提供的上述样品垫中，上层的玻璃纤维膜与下层的聚酯纤维膜的形状、大小相匹配，并且玻璃纤维膜与聚酯纤维膜的厚度之比为1~2：1。
优选的，上述的样品垫中，玻璃纤维膜与聚酯纤维膜的厚度之比为2：1。
优选的，玻璃纤维膜厚度为0.3~0.8mm。
优选的，玻璃纤维膜厚度为0.4~0.8mm。
优选的，玻璃纤维膜厚度为0.6~0.8mm。
优选的，上述的样品垫在样品垫处理液中的浸泡时间为10~20 min，然后于25~35℃条件下干燥处理10 h ~18h。
上述的样品垫处理液中，所述的高分子分散剂为聚乙二醇PEG、聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种；封闭剂为酪蛋白，表面活性剂为曲拉通-100。
优选的，所述的高分子分散剂为聚乙二醇PEG20000、聚乙烯吡咯烷酮。
此外，本发明还提供了一种用于检测尿液中HIV抗体的样品垫所采用的样品垫处理液，所述的样品垫处理液由样品垫处理液A和样品垫处理液B组成，样品垫处理液A和样品垫处理液B中均含有高分子分散剂、封闭剂、表面活性剂；所述的样品垫处理液A中，还含有缓冲液K2CO3-HAc；所述的样品垫处理液B中，还含有缓冲液Na2CO3-HAc。
进一步的，所述的样品垫处理液A中缓冲液K2CO3-HAc的pH为9.0~10.0、浓度为80mM~130mM，每100mL的缓冲液中，含有聚乙二醇PEG0.1g~1.0 g，聚乙烯吡咯烷酮0.1g~1.0 g，酪蛋白0.2g~1.0g，曲拉通-100为1g~1.0 g；所述的样品垫处理液B中缓冲液Na2CO3-HAc的pH为8.5~9.5、浓度为30mM~60 mM，每100mL的缓冲液中，含有聚乙二醇PEG0.1g~1.0 g，聚乙烯吡咯烷酮0.1g~1.0 g，酪蛋白0.2g~1.0 g，曲拉通-100为0.1g~1.0 g。
本发明中，上层样品垫经过样品垫处理液A处理、下层样品垫经过样品垫处理液B处理，由于样品垫处理液A与样品垫处理液B中的缓冲液种类不同且pH和浓度均不相同，所获得的上、下层样品垫的pH也能够保持在较高的水平，或者能够处于弱碱性条件，且上层、下层的样品垫的缓冲液离子浓度有显著差异，有利于将待检测的尿液样本中含有的酸性成分中和掉，为后续的层析检测提供了合适的离子强度。
此外，高pH的环境中样品垫还能提高免疫金的溶解释放速度，使得胶体金形成膜面层析形态，即便是偏酸性的尿液（pH＜7.0），胶体金颗粒也能够有效地释放，即本发明所获得的样品垫样品检测的pH范围更大，HIV抗体检测的适用性更强。
另外，普遍采用的缓冲液，例如Tris-HCl缓冲液、磷酸盐缓冲液，由于缓冲体系结合H+的速率慢，因而其与尿液中的酸性物质的中和作用较为缓慢，而本发明中采用的K2CO3-HAc、Na2CO3-HAc缓冲液结合和释放H+的速率快，反应更为充分，此外，K＋、Na+的释放更有利于抗原与抗体的免疫反应，因而能够达到更好的提高检测灵敏度，降低假阳性和假阴性情况的发生。
另外，本发明还提供了上述的样品垫在检测尿液中HIV抗体的试纸条中的应用。
并且，采用上述样品垫所制备出的用于检测尿液中HIV抗体的试纸条同样也是本发明所要保护的范围。
本发明的有益效果在于：
（1）本发明所提供的用于检测尿液中HIV抗体的样品垫，由上下两层质地不同的膜材料组成，该样品垫的双层结构能够对检测的尿液样品实现更充分的处理；其中，上层的样品垫是疏松且经高pH、高缓冲液浓度的样品垫处理液A处理的玻璃纤维膜，该层结构的存在能够中和待检测样本中部分尿酸等酸性物质，对样品起到良好的初步缓冲及过滤作用，同时也能够为下层的样品垫缓慢地供应样品；下层的样品垫是较细密的聚酯薄膜，通过下层样品垫的试剂与上层渗透出的样品进一步反应，使得待检测样品具有更加稳定的pH值和合适的离子强度，消除了由样品中酸性物质引起的假阳性，同时合适的pH和离子强度提高了检测的准确率；
（2）本发明中所提供的样品垫处理液，包含具有较高pH值、不同缓冲液浓度的样品垫处理液A和样品垫处理液B，使得上、下两层样品垫中离子浓度有一定的差异，使样品在不同的流速下与不同浓度和不同pH的试剂反应，能够为样品垫提供一个更为稳定的碱性环境，进一步使得下层样品垫上的样品在到达金标垫前pH值上升到7.5以上，避免了到达金标的样品呈酸性而引起免疫颗粒凝集或者使捕获抗原带正电荷从而引起的假阳性结果的出现；并且，缓冲液中释放的Na+、K+有利于抗原和待检测抗体的特异性免疫反应，进一步提高了尿液中HIV抗体检测的灵敏性和准确性；
（3）此外，本发明的样品垫处理液还能够提高免疫金的溶解释放速度，使得胶体金标记颗粒在层析过程中能够更好地以均匀的状态向前移动，不会出现呈束或呈团状态前行，即便pH较低的、偏酸性的尿液（pH＜7.0），免疫金颗粒也能够有效释放，扩大了检测样品pH的检测范围，增强了对HIV抗体检测的适用性。
附图说明
图1为本发明的实施例1所制备试纸条的结构示意图；
图2为本发明的实施例2所制备试纸条的结构示意图；
图3为本发明的实施例1中制备的试纸条的实物图；
其中，图1-2中，1-底板，2-上层样品垫，3-下层样品垫，4-金标垫，5-硝酸纤维素膜，6-吸水纸，7-检测线，8-质控线。
具体实施方式
为了能使本领域技术人员更好地理解本发明，现结合具体实施方式对本发明进行更进一步的阐述。
实施例1
（1）配制上层样品垫所需的样品垫处理液A，样品垫处理液A包含pH为9.5、浓度为100mM的K2CO3-HAc缓冲液，每100mL的缓冲液中，添加PEG 20000 为0.2g，聚乙烯吡咯烷酮0.1g，酪蛋白0.5g，曲拉通-100为0.3g。
将上层疏松的玻璃纤维膜浸泡于样品垫处理液A中15min，然后取出玻璃纤维膜沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（2）配制下层样品垫所需的样品垫处理液B，样品垫处理液B包含pH为8.5、30mM的Na2CO3-HAc缓冲液，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.5g，聚乙烯吡咯烷酮0.3g，酪蛋白0.5g，曲拉通-100为0.5g。
将下层的聚酯纤维膜浸泡于样品垫处理液B中15min，取出聚酯纤维膜，沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（3）样品垫上层的玻璃纤维膜厚度为0.6mm，下层的聚酯纤维膜厚度为0.3mm，然后组装好试纸条，组装后的试纸条其结构如附图1所示。
图1中，试纸条包括底板1，试纸条的底板1上设置有经样品垫处理液处理后的上层样品垫2与下层样品垫3、金标垫4、硝酸纤维素膜5和吸水纸6；硝酸纤维素膜5的两端分别搭接金标垫4和吸水纸6，在金标垫4的外侧搭接下层样品垫3，所述金标垫4喷涂胶体金标记的鼠抗人IgG或SPA；硝酸纤维素膜5上设有包被HIV重组抗原的检测线7、以及包被羊抗鼠IgG抗体的质控线8。
采用上述制备好的试纸条对300份尿液样本进行检测，同时以elisa方法做确证，计算假阳性率、假阴性率及准确率，检测结果如下表1所示。
其中，本发明中所选的人群为去医院检测过有HIV感染可能性的高风险人群，以下实施例和对比例所选人群类似不再说明。
表1 采用实施例1的试纸条对300份尿液样本进行检测的结果
根据表1中的检测结果计算本发明方法的假阳性率、假阴性率和准确率情况，计算结果如下：
假阳性率=0/(291+9)×100%=0；
假阴性率=0/(291+9)×100%=0；
准确率=(291+9)/(291+9)×100%=100%。
实施例2
试纸条的制备步骤（1）、（2）均同实施例1，但是步骤（3）中，试纸条组装后的结构如附图2所示，其中，上层的玻璃纤维膜的厚度与下层的聚酯纤维膜的厚度相同，均为0.4 mm。
采用上述制备好的试纸条对尿液样品进行检测，检测方法及准确率的计算均同实施例1，检测结果如下表2所示。
表2采用实施例2的试纸条对300份尿液样本进行检测的结果
根据表2中的检测结果计算本发明方法的假阳性率、假阴性率和准确率情况，计算结果如下：
假阳性率=1/(268+32)×100%=0.33%；
假阴性率=0/(268+32)×100%=0；
准确率=(267+32)/(268+32)×100%=99.67%。
本发明的实施例1~2中显示，采用本发明的样品垫处理液处理过的具有双层膜结构的样品垫，将其制成试纸条后，应用于尿液中HIV抗体的检测，检测的准确度较高，几乎没有假阳性，且无假阴性的情况出现。
实施例2中出现了0.33%的假阳性，可能是由于上层玻璃纤维膜厚度的减小，待测样品通过的时间较短，上层的样品垫不能充分的中和样本中的酸性物质而引起的。
对比例1
（1）配制pH为9.0、浓度为100 mM的K2CO3-HAc缓冲体系，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.1g、酪蛋白0.5g、曲拉通-100为0.3g作为样品垫处理液A，将疏松的玻璃纤维膜浸泡于样品垫处理液A中15min，取出玻璃纤维沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（2）配制pH为8.5、浓度30 mM的Na2CO3-HAc缓冲体系，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.5g、聚乙烯吡咯烷酮0.3g、酪蛋白0.5g、曲拉通-100为0.5g作为样品垫处理液B，将聚酯纤维膜浸泡于样品垫处理液B中15min，取出聚酯纤维膜，沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（3）按照如附图1所示组装试纸条，但是组装时将玻璃纤维膜层置于下层，将聚酯纤维膜层置于上层，玻璃纤维膜的厚度为0.6mm，聚酯纤维膜的厚度为0.3mm。
采用上述制备好的试纸条对尿液样品进行检测，检测方法及准确率的计算均同实施例1，检测结果如下表3所示。
表3采用对比例1的试纸条对300份尿液样本进行检测的结果
根据表3中的检测结果计算本发明方法的假阳性率、假阴性率和准确率情况，计算结果如下：
假阳性率=3/(296+4)×100%=1.00%；
假阴性率=0/(296+4)×100%=0%；
准确率=(293+4)/(296+4)×100%=99.00%。
从实验结果看出：将质地致密的聚酯纤维膜置于上层，质地疏松的玻璃纤维膜置于下层时，由于上层的聚酯纤维膜对于快速流动的样品缓冲能力有限，样品的初始流速较快，而且上层样品垫所含试剂浓度低，上层聚酯纤维膜样品垫中的大部分试剂没有充分发挥作用，导致大部分样品中的酸性物质通过上层膜到达下层玻璃纤维膜，几乎相当于样品没有经过良好的初步过滤，酸碱性不稳定，同时，下层的玻璃纤维膜由于质地疏松，且药剂浓度高，接近金标垫的部分所得样品通过短的流程进入金标垫，易携带较多的H＋，不能很好的使样品稳定化，最终导致待测样品与样品垫中的试剂反应不充分，而造成一定的假阳性情况出现。
但是，从检测的结果中也可以看出，两层样品垫也能够对样品起到一定的缓冲过滤作用，因此，一定程度上也提高了检测的准确度，如本对比例中，检测准确率高达99.0%。
对比例2
在实施例1的基础上，上下两层样品垫均采用相同浓度、相同pH的Na2CO3-HAc缓冲体系进行处理，并制备成试纸条进行检测，具体方法如下：
（1）配制上层样品垫所需的样品垫处理液A，样品垫处理液A包含pH为9.0、浓度80mM的Na2CO3-HAc缓冲液，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.2g，聚乙烯吡咯烷酮0.1g，酪蛋白0.5g，曲拉通-100为0.3g。
将上层疏松的玻璃纤维膜浸泡于样品垫处理液A中15 min，然后取出玻璃纤维膜沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（2）配制下层样品垫所需的样品垫处理液B，样品垫处理液B包含pH为9.0、浓度80mM的Na2CO3-HAc缓冲液，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.5g，聚乙烯吡咯烷酮0.3g，酪蛋白0.5g，曲拉通-100 为0.5g。
将下层的聚酯纤维膜浸泡于样品垫处理液B中15min，取出聚酯纤维膜，沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（3）样品垫的上层的玻璃纤维膜的厚度为0.6mm，下层的聚酯纤维膜的厚度为0.3mm，组装的试纸条的结构同附图1。
采用上述制备好的试纸条对尿液样品进行检测，检测方法及准确率的计算均同实施例1，检测结果如下表4所示。
表4采用对比例2的试纸条对300份尿液样本进行检测的结果
根据表4中的检测结果计算本发明方法的假阳性率、假阴性率和准确率情况，计算结果如下：
假阳性率=2/(288+12)×100%=0.67%；
假阴性率=1/(288+12)×100%=0.33%；
准确率=(286+11)/(288+12)×100%=99.0%。
该对比例中，上下两层的样品垫均采用相同浓度的、相同pH的Na2CO3-HAc缓冲液体系进行处理，所获得的试纸条对尿液中的HIV抗体进行检测时，同时出现了假阳性与假阴性的情况。
造成上述现象的原因在于：上下层的样品垫均采用80 mM的Na2CO3-HAc缓冲液体系处理，上层样品垫的pH值较低，缓冲液浓度低，不能为下层提供初步稳定化的样品，样品垫中的试剂不能很好地使样品稳定化，因而难以为抗原、抗体提供恰当的离子环境，从而造成假阳性与假阴性的情况。
更具体的，上层样品垫处理液浓度较低时，遇到酸性较强的尿液样品，不能很好地中和尿液的酸性，先进入下层样品垫后段的尿液样品反应流程短，在接近金标垫处样品依旧会携带部分H＋进入金标垫，从而引起假阳性；而下层样品垫处理液的浓度较高，进入下层样品垫前段的尿液样品又容易携带较高离子强度的Na＋进入抗原、抗体反应区，从而影响抗原和抗体的反应，所以当遇到中性或偏碱性的弱阳性样品时就会导致假阴性情况的出现。
对比例3
（1）配制上层样品垫所需的样品垫处理液A，样品垫处理液A包含pH为9.0、浓度90mM的K2CO3-HAc缓冲液，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.2g，聚乙烯吡咯烷酮0.1g，酪蛋白0.5g，曲拉通-100为0.3g。
将上层疏松的玻璃纤维膜浸泡于上述样品垫处理液A中15min，然后取出玻璃纤维膜沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（2）配制下层样品垫所需的样品垫处理液B，样品垫处理液B包含pH为9.0、浓度90mM的Na2CO3-HAc缓冲液，每100mL的缓冲液中，添加的PEG20000为0.5g，聚乙烯吡咯烷酮0.3g，酪蛋白0.5g，曲拉通-100为0.5g。
将下层的聚酯纤维膜浸泡于样品垫处理液B中15min，取出聚酯纤维膜，沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（3）样品垫的上层的玻璃纤维膜的厚度为0.6mm，下层的聚酯纤维膜的厚度为0.3mm，组装的试纸条的结构同附图1。
采用上述制备好的试纸条对尿液样品进行检测，检测方法及准确率的计算均同实施例1，检测结果如下表5所示。
表5采用对比例3的试纸条对300份尿液样本进行检测的结果
根据表5中的检测结果计算本发明方法的假阳性率、假阴性率和准确率情况，计算结果如下：
假阳性率=0/(283+17)×100%=0%；
假阴性率=4/(283+17)×100%=1.33%；
准确率=(283+13)/(283+17)×100%=98.67%。
与对比例2中不同的是，本对比例中的上下两层样品垫，分别采用了pH值较高的不同种类的缓冲液作为样品垫处理液的主要成分，很显然，分别采用不同的缓冲液成分处理上下两层不同的样品垫，克服了样品中酸性物质造成假阳性的问题，检测结果中也并无假阳性的情况出现。
但是上述的检测结果显示，假阴性率显著提高，可能的原因是：两层样品垫的pH值都比较高，但是缓冲液的离子强度相同，不能在不同的样品流速中给样品提供适合的反应试剂，下层的样品垫中没有很好的稳定化样品，也就不能够给抗原和抗体的免疫反应提供恰当的pH值和恰当的离子强度，从而减弱了抗原和抗体的免疫反应而引起假阴性，降低了检测的准确率。
对比例4
（1）配制样品垫处理液A，样品垫处理液A包含：pH为9.0、浓度100mM的硼酸缓冲液，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.1g，酪蛋白0.5g，曲拉通-100为0.3g，将疏松的玻璃纤维膜浸泡于样品垫处理液A中15min，取出玻璃纤维沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（2）配制样品垫处理液B，样品垫处理液B包含：pH为8.5、浓度30 mM的Tris-HCl缓冲体系，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.5g、聚乙烯吡咯烷酮0.3g，酪蛋白0.5g，曲拉通-100为0.3g，将聚酯纤维膜浸泡于样品垫处理液B中15min，取出聚酯纤维膜，沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（3）样品垫的上层的玻璃纤维膜的厚度为0.6mm，下层的聚酯纤维膜的厚度为0.3mm，组装的试纸条的结构同附图1。
采用上述制备好的试纸条对尿液样品进行检测，检测方法及准确率的计算均同实施例1，检测结果如下表6所示。
表6采用对比例4的试纸条对300份尿液样本进行检测的结果
根据表6中的检测结果计算本发明方法的假阳性率、假阴性率和准确率情况，计算结果如下：
假阳性率=3/(289+11)×100%=1.00%；
假阴性率=2/(289+11)×100%=0.67%；
准确率=(286+9)/(289+11)×100%=98.33%。
从检测结果中不难看出，当上层的玻璃纤维膜样品垫采用硼酸缓冲液体系进行处理，下层的聚酯纤维膜样品垫采用Tris-HCl缓冲液进行处理时，样本检测时的假阳性率达1%，假阴性率也高达0.67%，主要的原因是：硼酸缓冲液与尿液中酸性物质存在反应不充分问题，Tris-HCl缓冲液处理时不能很快地稳定样品的pH，且不能提供恰当的促进抗原、抗体免疫反应的离子强度，因而检测时可能同时出现假阳性与假阴性的情况，导致检测的准确率仅为98.33%。
对比例5
（1）配制样品垫处理液，样品垫处理液包含：pH为9.0、浓度100mM的硼酸缓冲体系，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.1 g、酪蛋白0.5g、曲拉通-100为0.3g，然后将疏松的玻璃纤维膜浸泡于样品垫处理液中15min，取出玻璃纤维沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（2）将上述的单层玻璃纤维膜按顺序组装成试纸条，其中玻璃纤维膜的厚度为0.6mm。
采用上述制备好的试纸条对尿液样品进行检测，检测方法及准确率的计算均同实施例1，检测结果如下表7所示。
表7 采用对比例5的试纸条对300份尿液样本进行检测的结果
根据表7中的检测结果计算本发明方法的假阳性率、假阴性率及准确率，计算结果如下：
假阳性率=5/(270+30)×100%=1.67%；
假阴性率=3/(270+30)×100%=1.00%；
准确率=（265+27）/(273+27)×100%=97.33%。
对比例6
（1）配制pH为9.0、浓度100 mM的K2CO3-HAc缓冲体系，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为 0.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.1g、酪蛋白0.5g、曲拉通-100为0.3g作为样品垫处理液，将疏松的玻璃纤维膜浸泡于上述样品垫处理液15min，取出玻璃纤维沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15h。
（3）将上述的单层玻璃纤维膜按顺序组装成试纸条，其中玻璃纤维膜的厚度为0.6mm。
采用上述制备好的试纸条对尿液样品进行检测，检测方法及准确率的计算均同实施例1，检测结果如下表8所示。
表8采用对比例6的试纸条对300份尿液样本进行检测的结果
根据表8中的检测结果计算本发明方法的假阳性率、假阴性率和准确率情况，计算结果如下：
假阳性率=6/(294+6)×100%=2.00%；
假阴性率=1/(294+6)×100%=0.33%；
准确率=(288+5)/(294+6)×100%=97.67%。
对比例7
（2）配制pH为8.5、浓度30 mM的Na2CO3-HAc缓冲体系，每100mL的缓冲液中，添加PEG20000为0.5 g、聚乙烯吡咯烷酮0.3 g、酪蛋白0.5 g、曲拉通-100为0.5 g作为样品垫处理液，将聚酯纤维膜浸泡于上述样品垫处理液15 min，取出聚酯纤维膜，沥出多余的溶液直到无溶液滴出，30℃条件下干燥处理15 h。
（3）将上述的单层聚酯纤维膜按顺序组装成试纸条，其中聚酯纤维膜的厚度为0.3mm。
采用上述制备好的试纸条对尿液样品进行检测，检测方法及准确率的计算均同实施例1，检测结果如下表9所示。
表9采用对比例7的试纸条对300份尿液样本进行检测的结果
根据表9中的检测结果计算本发明方法的假阳性率、假阴性率和准确率情况，计算结果如下：
假阳性率=8/(278+22)×100%=2.67%；
假阴性率=0/(278+22)×100%=0%；
准确率=(270+22)/(278+22)×100%=97.33%。
对比例5~7中，均采用单一的膜结构做为样品垫，样品垫经处理液处理之后获得的试纸条，应用于HIV抗体检测时，假阴性与假阳性率显著提高，检测的准确性较差，准确率仅为97%左右，产生这一现象的可能原因是：单层的玻璃纤维膜对于样品中杂质成分的过滤程度有限，样品在玻璃纤维膜上移动时，移动速率较快，样品中的酸性物质没有充分被中和从而导致捕获抗原电荷发生变化引起假阳性。
Claims (7)
1.用于检测尿液中HIV抗体的样品垫，其特征在于，所述样品垫由上层的玻璃纤维膜和下层的聚酯纤维膜组成；上层玻璃纤维膜经过样品垫处理液A浸泡后干燥，下层的聚酯纤维膜经过样品垫处理液B浸泡后干燥；所述的样品垫处理液A中，缓冲液为K2CO3-HAc且其pH为9.0~10.0、浓度为80 mM ~130mM，每100mL所述的缓冲液中，含有高分子分散剂0.2 g ~2g，封闭剂0.2 g ~1.0g，表面活性剂0.1 g ~1.0g；所述的样品垫处理液B中，缓冲液为Na2CO3-HAc且其pH为8.5~9.5、浓度为30 mM ~60mM，每100mL所述的缓冲液中，含有高分子分散剂0.2 g ~2g，封闭剂0.2 g ~1.0g，表面活性剂0.1 g ~1.0g。
2.如权利要求1所述的用于检测尿液中HIV抗体的样品垫，其特征在于，玻璃纤维膜与聚酯纤维膜的形状、大小相匹配，并且玻璃纤维膜与聚酯纤维膜的厚度之比为1~2：1。
3.如权利要求1所述的用于检测尿液中HIV抗体的样品垫，其特征在于，所述的高分子分散剂为聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种；封闭剂为酪蛋白，表面活性剂为曲拉通-100。
4.如权利要求1所述的用于检测尿液中HIV抗体的样品垫在检测尿液中HIV抗体的试纸条中的应用。
5.用于检测尿液中HIV抗体的试纸条，其特征在于，所述的试纸条具有权利要求1所述的样品垫。
6.用于检测尿液中HIV抗体的样品垫所采用的样品垫处理液，其特征在于，所述的样品垫处理液由样品垫处理液A和样品垫处理液B组成，样品垫处理液A和样品垫处理液B中均含有高分子分散剂、封闭剂、表面活性剂；所述的样品垫处理液A中，还含有缓冲液K2CO3-HAc；所述的样品垫处理液B中，还含有缓冲液Na2CO3-HAc。
7.如权利要求6所述的用于检测尿液中HIV抗体的样品垫所采用的样品垫处理液，其特征在于，所述的样品垫处理液A中缓冲液K2CO3-HAc的pH为9.0~10.0、浓度为80 mM ~130mM，每100mL缓冲液中，含有聚乙二醇0.1 g ~1.0g，聚乙烯吡咯烷酮0.1 g ~1.0g，酪蛋白0.2g~1.0g，曲拉通-100为0.1g~1.0g；所述的样品垫处理液B中缓冲液Na2CO3-HAc的pH为8.5~9.5、浓度为30 mM ~60mM，每100mL缓冲液中，含有聚乙二醇0.1 g ~1.0g，聚乙烯吡咯烷酮为0.1g ~1.0g，酪蛋白为0.2 g ~1.0g，曲拉通-100为0.1 g ~1.0g。
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Citations (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20080075285A (ko) * | 2007-02-12 | 2008-08-18 | 대한민국(관리부서 질병관리본부장) | 돼지혈청으로부터 일본뇌염바이러스 항체 검출을 위한면역크로마토그래피 진단 키트 |
| CN101487843A (zh) * | 2009-03-06 | 2009-07-22 | 关一夫 | 快速尿液hiv检测诊断试纸条及其制备方法和使用方法 |
| US20120064550A1 (en) * | 2009-05-11 | 2012-03-15 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for measurement of equol in biological sample by immunoassay, kit for the measurement, and method for determination of equol production ability of subject |
| CN102692504A (zh) * | 2012-06-26 | 2012-09-26 | 南京基蛋生物科技有限公司 | D-二聚体荧光免疫定量测定试纸条及其制备方法 |
| CN102707071A (zh) * | 2012-06-26 | 2012-10-03 | 南京基蛋生物科技有限公司 | Pct/crp联合检测用胶体金试纸条及其制备方法 |
| CN202814985U (zh) * | 2012-06-26 | 2013-03-20 | 南京基蛋生物科技有限公司 | 一种pct/crp全血检测试纸条 |
| CN103941019A (zh) * | 2014-04-10 | 2014-07-23 | 瑞莱生物工程（深圳）有限公司 | 快速定量检测l-fabp的免疫荧光试纸条及其制备方法 |
| CN104101708A (zh) * | 2013-04-11 | 2014-10-15 | 中国科学院化学研究所 | 一种基于上转换荧光/磁性纳米颗粒的免疫层析试纸及其制备方法 |
| JP2017015532A (ja) * | 2015-06-30 | 2017-01-19 | 田中貴金属工業株式会社 | 免疫クロマト分析装置及び免疫クロマト分析方法 |
| CN107515303A (zh) * | 2017-09-30 | 2017-12-26 | 广州万孚生物技术股份有限公司 | 检测尿液中hiv抗体的试纸条、检测杯及其制备方法 |
| CN206892112U (zh) * | 2017-07-19 | 2018-01-16 | 杨笑熳 | 一种对唾液中吗啡浓度进行定量检测的上转发光免疫层析试纸 |
| CN107727855A (zh) * | 2017-09-30 | 2018-02-23 | 广州万孚生物技术股份有限公司 | 用于检测尿液中hiv抗体的样品垫、样品垫处理液及试纸条 |
| KR20180032042A (ko) * | 2016-09-21 | 2018-03-29 | 주식회사 포스코 | 코어-시스 구조의 나노 섬유를 이용한 측방유동 분석에서의 신호 증폭 방법 및 이를 이용한 측방유동 분석 장치 |
| CN208092059U (zh) * | 2017-07-19 | 2018-11-13 | 杨笑熳 | 一种对唾液中甲基苯丙胺浓度进行定量检测的上转发光免疫层析试纸 |
| CN111089978A (zh) * | 2019-12-31 | 2020-05-01 | 南京拂晓生物科技有限公司 | 用于快速检测卵巢癌肿瘤标志物Legumain的胶体金免疫层析试剂盒及其制备方法 |
| KR20210001680A (ko) * | 2019-06-28 | 2021-01-06 | 주식회사 지엠디바이오텍 | 자동신호증폭이 가능한 측방유동면역센서 |
| CN115308406A (zh) * | 2022-07-19 | 2022-11-08 | 杭州协合医疗用品有限公司 | 一种双样品垫胶体金免疫层析试纸条 |
| CN115840042A (zh) * | 2023-02-24 | 2023-03-24 | 北京凡知医学科技有限公司 | 一种免疫层析试纸盒及其制备方法和应用 |
| CN116027035A (zh) * | 2023-03-30 | 2023-04-28 | 济南玖方生物科技有限公司 | 一种用于提高hiv1/2尿液胶体金免疫层析检测准确率的试剂盒及制备方法 |
| KR20230094506A (ko) * | 2021-12-21 | 2023-06-28 | 주식회사 미리메딕스 | 면역 크로마토그래피 검사의 감도 향상을 위한 방법 |
-
2023
- 2023-07-13 CN CN202310856188.9A patent/CN116577498B/zh active Active
Patent Citations (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20080075285A (ko) * | 2007-02-12 | 2008-08-18 | 대한민국(관리부서 질병관리본부장) | 돼지혈청으로부터 일본뇌염바이러스 항체 검출을 위한면역크로마토그래피 진단 키트 |
| CN101487843A (zh) * | 2009-03-06 | 2009-07-22 | 关一夫 | 快速尿液hiv检测诊断试纸条及其制备方法和使用方法 |
| US20120064550A1 (en) * | 2009-05-11 | 2012-03-15 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for measurement of equol in biological sample by immunoassay, kit for the measurement, and method for determination of equol production ability of subject |
| CN102692504A (zh) * | 2012-06-26 | 2012-09-26 | 南京基蛋生物科技有限公司 | D-二聚体荧光免疫定量测定试纸条及其制备方法 |
| CN102707071A (zh) * | 2012-06-26 | 2012-10-03 | 南京基蛋生物科技有限公司 | Pct/crp联合检测用胶体金试纸条及其制备方法 |
| CN202814985U (zh) * | 2012-06-26 | 2013-03-20 | 南京基蛋生物科技有限公司 | 一种pct/crp全血检测试纸条 |
| CN104101708A (zh) * | 2013-04-11 | 2014-10-15 | 中国科学院化学研究所 | 一种基于上转换荧光/磁性纳米颗粒的免疫层析试纸及其制备方法 |
| CN103941019A (zh) * | 2014-04-10 | 2014-07-23 | 瑞莱生物工程（深圳）有限公司 | 快速定量检测l-fabp的免疫荧光试纸条及其制备方法 |
| JP2017015532A (ja) * | 2015-06-30 | 2017-01-19 | 田中貴金属工業株式会社 | 免疫クロマト分析装置及び免疫クロマト分析方法 |
| KR20180032042A (ko) * | 2016-09-21 | 2018-03-29 | 주식회사 포스코 | 코어-시스 구조의 나노 섬유를 이용한 측방유동 분석에서의 신호 증폭 방법 및 이를 이용한 측방유동 분석 장치 |
| CN206892112U (zh) * | 2017-07-19 | 2018-01-16 | 杨笑熳 | 一种对唾液中吗啡浓度进行定量检测的上转发光免疫层析试纸 |
| CN208092059U (zh) * | 2017-07-19 | 2018-11-13 | 杨笑熳 | 一种对唾液中甲基苯丙胺浓度进行定量检测的上转发光免疫层析试纸 |
| CN107727855A (zh) * | 2017-09-30 | 2018-02-23 | 广州万孚生物技术股份有限公司 | 用于检测尿液中hiv抗体的样品垫、样品垫处理液及试纸条 |
| CN107515303A (zh) * | 2017-09-30 | 2017-12-26 | 广州万孚生物技术股份有限公司 | 检测尿液中hiv抗体的试纸条、检测杯及其制备方法 |
| KR20210001680A (ko) * | 2019-06-28 | 2021-01-06 | 주식회사 지엠디바이오텍 | 자동신호증폭이 가능한 측방유동면역센서 |
| CN111089978A (zh) * | 2019-12-31 | 2020-05-01 | 南京拂晓生物科技有限公司 | 用于快速检测卵巢癌肿瘤标志物Legumain的胶体金免疫层析试剂盒及其制备方法 |
| KR20230094506A (ko) * | 2021-12-21 | 2023-06-28 | 주식회사 미리메딕스 | 면역 크로마토그래피 검사의 감도 향상을 위한 방법 |
| CN115308406A (zh) * | 2022-07-19 | 2022-11-08 | 杭州协合医疗用品有限公司 | 一种双样品垫胶体金免疫层析试纸条 |
| CN115840042A (zh) * | 2023-02-24 | 2023-03-24 | 北京凡知医学科技有限公司 | 一种免疫层析试纸盒及其制备方法和应用 |
| CN116027035A (zh) * | 2023-03-30 | 2023-04-28 | 济南玖方生物科技有限公司 | 一种用于提高hiv1/2尿液胶体金免疫层析检测准确率的试剂盒及制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 解泉源;赖卫华;刘春梅;孙吉昌;邓省亮;刘成伟;魏华;游兴勇;熊勇华;: "大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制", 食品科学, no. 16 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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