CN116531315A - 一种卡泊三醇软膏及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物化学技术领域，提供了一种卡泊三醇软膏及其制备方法，该软膏由卡泊三醇和基质组成，基质由液体石蜡和凡士林组成；卡泊三醇以混悬状态均匀分散在基质中。本发明解决了单一油相的卡泊三醇软膏分散性差的技术问题，并兼顾对皮肤滞留量和药效的改善。

Description

一种卡泊三醇软膏及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物化学技术领域，具体涉及一种卡泊三醇软膏及其制备方法。

背景技术

卡泊三醇是维生素D3衍生物，疗效确切，主要用于治疗稳定的斑块型银屑病，适合局部治疗，已成为治疗该病的首选药物。

卡泊三醇软膏最初由LEO Pharma A/S以商品名Daivonex开发(在美国以Dovonex为商品名)，其处方由卡泊三醇、白凡士林、液状石蜡、聚氧乙烯(2)十八醚、丙二醇、全外消旋α生育酚、二水磷酸氢二钠、依地酸二钠和纯化水组成。

CN102770143B公开了含有卡泊三醇的组合物，其包括卡泊三醇、非离子表面活性剂、低级烷醇共溶剂(乙醇或丙醇)、石蜡载体和纯水。

上述现有技术中，卡泊三醇软膏都含有水相和油相，都添加有表面活性剂以提高卡泊三醇的稳定性。水相中的丙二醇、乙醇、丙醇等醇类共溶剂用于溶解卡泊三醇，但对皮肤有一定的刺激性，CN102770143B中添加甘油等抗刺激化合物保护皮肤避免刺激伤害。

为此，申请人着手研发单一油相的卡泊三醇软膏，以避免使用醇类共溶剂，进而降低软膏的刺激性，同时，也无需使用抗刺激化合物，进而有效控制生产成本。在研发过程中发现，在没有水相、醇类共溶剂存在的情况下，卡泊三醇于油相中分散均匀性差，通过循环高压均质使卡泊三醇不发生聚集，并通过较低的降温速度使卡泊三醇固体颗粒均匀镶嵌在半固体之间，在提高卡泊三醇于油相中的分散均匀性的过程中，申请人意外的发现，混悬状态并且均匀分散的卡泊三醇软膏，能够提升皮肤滞留量，延长药效。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种卡泊三醇软膏及其制备方法，解决了单一油相的卡泊三醇软膏分散性差的技术问题，并兼顾对皮肤滞留量和药效的改善。

(二)技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：

一种卡泊三醇软膏，其特征在于，

该软膏由卡泊三醇和基质组成，基质由液体石蜡和凡士林组成；

通过循环高压分散和控温低速降温工艺，使卡泊三醇以混悬状态均匀分散在基质中。

进一步的，该软膏中，按质量百分数计，卡泊三醇含量为0.005～0.2wt％，液体石蜡含量为5～40wt％，剩余为凡士林。

其中，液体石蜡也可以是轻质液状石蜡；凡士林可以是黄凡士林或白凡士林。

本发明还提供了上述卡泊三醇软膏的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、基质配制，在真空乳化搅拌机中，将凡士林加热至超过熔点，并完全熔融；

S2、活性相配制，在预混罐中加入液状石蜡，加入卡泊三醇，搅拌使其分散后接入循环高压均质机；

S3、混合，将步骤S1获得的熔融状态的凡士林降温至熔点后，将步骤S2获得的活性相加至真空乳化搅拌机中，均质混合至均匀；

S4、降温，将步骤S3获得的混合物料，搅拌降至室温；

S5、灌装。

进一步的，步骤S1中，凡士林加热至80～90℃，步骤S3中，凡士林降温至60～70℃；步骤S4中，混合物料降温至25～30℃。

进一步的，步骤S2中，高压均质参数如下，均质压力1000～2000bar，循环次数为100～300个/min。

进一步的，步骤S3中，均质混合参数如下，搅拌转速20～40rpm，均质转速2000～3000rpm，均质温度60～70℃，均质时间10～20min。

进一步的，步骤S4中，降温搅拌参数如下，搅拌转速20～40rpm，降温速率为0.1～0.3℃/min。

(三)有益效果

本发明具备以下有益效果：

(1)本发明的卡泊三醇软膏相较于原研药，皮肤滞留量提升了一倍，对皮肤的刺激性更弱；

(2)本发明的卡泊三醇软膏具有良好的稳定性；

(3)本发明的卡泊三醇软膏，仅有油相，没有水相，所以不需要使用W/O(油包水)乳化剂提高体系的稳定性，也不要添加抗氧剂，组成更加简单。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

本实施例的卡泊三醇组合物包括卡泊三醇0.005wt％、液状石蜡5wt％和白凡士林94.995％。

其制备方法如下：

S1、基质配制，在真空乳化搅拌机中，将凡士林加热至85℃，并完全熔融；

S2、活性相配制，在预混罐中加入液状石蜡，加入卡泊三醇，搅拌使其分散后接入循环高压均质机，高压均质参数如下，均质压力1500bar，循环次数为200个/min；

S3、混合，将步骤S1获得的熔融状态的凡士林降温至65℃，将步骤S2获得的活性相加至真空乳化搅拌机中，均质混合至均匀，均质混合参数如下，均质温度65℃，搅拌转速30rpm，均质转速2500rpm，均质时间15min；

S4、降温，将步骤S3获得的混合物料，搅拌降至室温，降温搅拌参数如下，搅拌转速30rpm，降温至25.0℃，降温速率0.2℃/min；

S5、灌装。

实施例2

本实施例的卡泊三醇组合物包括卡泊三醇0.01wt％、液状石蜡40wt％和黄凡士林59.99％。

实施例2的制备方法与实施例1相同。

实施例3

本实施例的卡泊三醇组合物包括卡泊三醇0.02wt％、轻质液状石蜡20wt％和白凡士林79.98％。

实施例3的制备方法与实施例1相同。

对比例1

本对比例的卡泊三醇组合物即原研药软膏，由俄罗斯原研药说明书可知，包括卡泊三醇0.005wt％、液状石蜡5wt％、白凡士林77.3605％、聚氧乙烯(2)十八醚5wt％、丙二醇10wt％、全外消旋α生育酚0.002wt％、依地酸二钠0.0065wt％、磷酸氢二钠0.026wt％、纯化水2.6wt％。

稳定性对比试验

加速条件：30±2℃/65±5％RH

稳定性实验检测方法：

1.性状：目视，本品为白色至微黄色软膏。

2.含量：

稀释剂：甲醇-0.01moL/L磷酸氢二铵＝70:30。

含量检测项内标溶液：称取甲睾酮20mg，至200mL量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，移取此溶液1mL至l0mL量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。

含量检测项供试品溶液：避光操作，精密称取测试样品(对应实施例的组合物)1.0g，精密加入10mL内标溶液和10mL稀释剂，置蒸气浴中加热融化，精密加入10mL正庚烷，立即剧烈振摇30min，静置分层，取下层溶液离心，用0.22μm PTFE滤膜滤过，弃去初滤液lmL，取续滤液。

含量检测项对照品溶液：

取卡泊三醇对照品25mg至100mL容量瓶，精密称定，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液；再移取储备液2mL至20mL容量瓶，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，再移取2ml至20mL容量瓶，加入10mL内标溶液，用稀释稀释剂至刻度，摇匀。

含量检测项系统适用性溶液：称取杂质C对照品12.5mg至100mL量瓶中[杂质C对照品购自标准药物(中国)有限公司，标准号：STDNO.85233C]，用适量稀释剂使其溶解，定容，即制成0.125mg/mL的溶液，作为杂质C贮备液，同法配制含卡泊三醇为0.125mg/mL的卡泊三醇贮备液[原料药，购自台耀化学股份有限公司CDE(国家药品监督管理局药品审评撰写)登记号：Y20170001615]。分别量取杂质C贮备液0.lmL和卡泊三醇贮备液1mL置50mL棕色容量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。

含量检测项色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂[Luna C18(2)，15cm×4.6mm，3μm；或与之等效相当的色谱柱]；以甲醇-水(70:30)为流动相；柱温为30℃，流速为1.0mL/min，检测波长为264nm，采集时间为40min；进样体积为100μL。

3.有关物质：

有关物质检测项稀释剂：乙腈-甲醇-0.01moL/L磷酸氢二铵＝20:50:30。

有关物质检测项供试品溶液：避光操作，精密称取测试样品(对应实施例的组合物)5.0g，精密加入10mL正庚烷，置40℃水浴中加热融化，精密加入10mL稀释剂，立即充分振摇15min，静置分层，取下层溶液离心(1000m，15min)，用0.22μm聚四氟乙烯材质滤膜滤过，弃去初滤液lmL，取续滤液。

有关物质检测项对照品溶液：精密移取对照品贮备液1mL，置100mL容量瓶中，用稀释剂定容，摇匀。

有关物质检测项系统适用性溶液：取卡泊三醇系统适用性对照品[购自欧洲药品质量局(European Directorate for the Quality of Medicines，EDQM)，目录代码(Catalogue Code)：Y0000473，含卡泊三醇、杂质B、杂质C和杂质D等]，取5mg用稀释溶解并转移至1000ml，定容。。

有关物质检测项色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Hypersil BDSC18，150*4.6mm，3μm或与之等效相当的色谱柱)；以甲醇-水(70:30)为流动相；柱温为28℃，流速为1.0mL/min，检测波长为264nm，采集时间为75min；进样体积为100μL。

4.黏度：

使用Brookfield黏度计(DV2T-RⅤ型)，配备T-F(96)转子，转速为20rpm，温度为25℃。取本品适量，挤入定制的容器中，轻振容器使样品不留间隙。置25℃水浴中恒温20分钟后开始测定，数据采样间隔为10秒，记录开始测定后70秒至120秒共6次测定值，6次数据的相对标准偏差不得过15％，计算6次测定值得平均值。

(1)对实施例1的卡泊三醇组合物进行稳定性实验，结果如下：

实施例1的卡泊三醇组合物，加速6个月的稳定性较好。

(2)对实施例2的卡泊三醇组合物进行稳定性实验，结果如下：

实施例2的卡泊三醇组合物，加速6个月的稳定性较好。

(3)对实施例3的卡泊三醇组合物进行稳定性实验，结果如下：

实施例3的卡泊三醇组合物，加速6个月的稳定性较好。

透皮实验

体外透皮实验按照以下方法进行：

1.实验条件

采用上药面积为1.77cm²，接收池体积为8mL的Franz扩散池，以巴马小香猪皮肤为渗透屏障(一月龄)，按10mg/cm²上药，上药量约27mg，接收液为生理盐水进行体外透皮试验，其中温度设置为32℃，转速600rpm，取样时间点为4、8、12、24h。

2.皮肤选择

药物的透皮试验最好选择人皮肤作为渗透屏障，由于伦理学的限制，自然人皮肤不易获得，而人工培植的人类皮肤的可靠性尚在评价过程中，且价格昂贵，不容易大量获得。猪皮肤在组织学上与人皮肤相似，是进行体外皮肤渗透实验的良好动物模型。本试验选择猪皮肤作为渗透屏障。

3.立体皮肤来源

巴马小香猪(一月龄)，-5℃冰箱冷冻保存待用，在两个月内使用。

4.皮肤处理

整块巴马小香猪皮肤使用前放置于生理盐水中，室温解冻后，沿猪皮的背脊线由上往下，向腹部方向依次裁剪，将皮肤裁成直径约为3cm的圆片，置于生理盐水中备用。注意将相邻的皮肤均分至各组制剂中，确保制剂间皮肤的相对一致性。上药前吸水纸吸干皮肤表面水分，检查皮肤的完整性及厚度。

5.离体猪皮肤经皮渗透试验

将处理好的猪皮肤放于干净的吸水纸上，角质层面向上，并将定量环置于皮肤正中央固定，采用适宜的上药工具将制剂均匀的涂抹在皮肤角质层上，上药量约为27mg。

上药后，将含药皮肤装于透皮装置中，其中含药层朝上面向样品池，不含药层朝下面向接收池。接收池中充满脱气处理过的接收液。接收池置于32℃加热块中，开启电磁搅拌器连续搅拌，转速600rpm，分别于4、8、12、24h取出全部接收液并补充等量恒温的接收液。透皮扩散仪参数设置：润管体积：1.5mL，充管体积：1.5mL，采样体积：5.0mL，补液体积：8.5mL，选择Go to Waste。接收液于5℃下保存，待处理测定。于24h终止试验，取各皮肤，分别按“6”、“7”收集处理皮肤上剩余凝胶和皮肤。

6.皮肤上剩余样品收集

按照“5离体猪皮肤经皮渗透试验”项下所述方法操作，用移液枪移取1mL稀释剂(水：甲醇：乙腈＝20：50：30)至供给池中，并用小勺子轻轻刮拭皮肤表面，尽可能将皮肤表面剩余凝胶溶解在稀释剂中，将洗涤液转移至50mL的容量瓶中，重复上述清洗操作7次。

将定量环放置在相应编号烧杯中，加入稀释剂，将烧杯涡旋15s，用同一吸管吸取烧杯中液体置50mL容量瓶中，重复3次，将容量瓶超声30min，取出，在烧杯中加入适量稀释剂，用烧杯中的稀释剂定容至刻度。使用0.22μmPTFE材质针式过滤器过滤，弃去2mL初滤液，取续滤液，室温放置，待测。

7.皮肤中滞留药物的提取

按照“6皮肤上剩余样品收集”项下所述方法操作，于试验完成后用吸水纸吸干皮肤表面残留溶剂。用剪刀剪下外围未直接接触样品的皮肤，只保留等同池口面积大小的皮肤(即1.77cm²)，将处理好的皮肤称重，称重后将皮肤剪碎至条状置研磨杯中，液氮冷冻至少1h。

皮肤冷冻后采用冷冻研磨仪研磨成粉末，加25mL稀释剂中，超声5分钟，将EP管上下振摇，再次超声5分钟，适量用0.22μmPTFE材质针式过滤器过滤，即为皮肤提取液，待测。

8.物料平衡是衡量试验方法重现性及科学性的重要指标。体外透皮试验中的透过量、猪皮肤中滞留量及皮肤、实验设备上残留药物收集量之和应与给药量一致即为物料平衡。考察试验方法和操作处理过程中是否存在药物流失导致的系统误差，评价该方法的科学性和稳定性。

按“5离体猪皮肤经皮渗透试验”、“6皮肤上样品凝胶收集”和“7皮肤中滞留药物的提取”项下方法，获得透皮实验含药接收液、皮肤中滞留量及残留药物，测定其中药物浓度，考察接收液、提取液和剩余药物中的卡泊三醇的总含量与给药量之间的百分比。

软膏含量测试：称取约27mg样品于10mL的EP管中，加入8mL稀释剂溶解，涡旋2min后将溶液转入50mL容量瓶中，重复上述清洗操作5次。然后用稀释剂定容至刻度，摇匀超声10min，使用0.22μmPTFE材质针式过滤器过滤，弃去2mL初滤液，取续滤液，室温备用。

按照上述检测方法，对实施例1至实施例3与对比例1组合物进行体外透皮对比，结果如下：

检测项	实施例1	实施例2	实施例3	对比例1
					皮肤滞留量	0.73μg/g	0.77μg/g	0.66μg/g	0.34μg/g

结论：

实施例1～3相较于对比例1显著提高皮肤滞留量。

动物实验

16只新西兰白兔，雌雄各半，根据分组前体重，将动物随机分为2组，每组8只。每组4只动物为破损皮肤，另外4只动物为正常皮肤，左侧皮肤给予供试品/原研药，右侧皮肤给予空白制剂作为阴性对照。首次给药前1天将动物背部脊柱两侧各剃去1块体毛，每侧去毛范围均不少于3cm×3cm，不可损伤皮肤。D-1各组中破损皮肤动物用75％酒精对背部脊柱两侧脱毛区域进行消毒，然后用消毒针头对脱毛区域划“井”字破口，破口横竖长度均为约2cm，破损以渗血为度。供试品组动物背部左侧去毛皮肤上涂布供试品卡泊三醇软膏，原研药组动物背部左侧去毛皮肤上涂布原研药卡泊三醇软膏，两组动物背部右侧去毛皮肤上均涂布空白制剂1％卡泊三醇软膏空白制剂，每只动物两侧均给药0.5g/次，然后用1层玻璃纸(约2.5cm×2.5cm)和2层纱布(约2.5cm×2.5cm)覆盖，再用无刺激性的胶布包裹固定；4小时后去除贴敷物，用蘸有氯化钠注射液的棉球清洁给药部位，并用干棉球擦干。第1次给药的敷贴物去除即可进行第2次给药。每天给药2次，共连续给药7天，试验期间每天进行临床观察。每天首次给药前和第2次给药去除贴敷物后1h以及末次给药去除贴敷物后30～60min、24h、48h和72h，期间每天观察1次。

给药局部肉眼观察

供试品组供试品侧：各观察时间点均未见刺激性反应。供试品组空白制剂侧：各观察时间点均未见刺激性反应。

原研药组原研药侧：第1天均未见刺激性反应，第2天正常皮肤和受损皮肤均出现轻度红斑和水肿，至第7天出现中度红斑和水肿；原研药组空白制剂侧：各观察时间点均未见刺激性反应。

结论：

本试验条件下，经兔皮肤连续7天给予供试品卡泊三醇软膏相较于原研药卡泊三醇软膏对给药部位皮肤刺激性更弱。

另本发明发现，现有卡泊三醇软膏的常规生产过程中，原料混合后的降温操作，是直接通过自来水冷却，降温速度为0.4～0.6℃/min，若降温速度采用0.5℃/min，实施例1所获产品的含量均匀度RSD将由0.4％提升至2.1％，即含量均匀度RSD值增大，均匀度变差，表明通过合理控制降温速度能够使得单一油相的卡泊三醇软膏混合更均匀，能够达到匀速释放的效果，且本发明为纯油相，油脂会促进水合作用，延长药效。

需要说明的是，在本文中，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (7)

1.一种卡泊三醇软膏，其特征在于，

该软膏由卡泊三醇和基质组成，基质由液体石蜡和凡士林组成；

通过循环高压分散和控温低速降温工艺，使卡泊三醇以混悬状态均匀分散在基质中。

2.如权利要求1所述的一种卡泊三醇软膏，其特征在于，该软膏中，按质量百分数计，卡泊三醇含量为0.005～0.2wt％，液体石蜡含量为5～40wt％，剩余为凡士林。

3.如权利要求1或2所述的卡泊三醇软膏的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

S1、基质配制，在真空乳化搅拌机中，将凡士林加热至超过熔点，并完全熔融；

S2、活性相配制，在预混罐中加入液状石蜡，加入卡泊三醇，搅拌使其分散后接入循环高压均质机；

S3、混合，将步骤S1获得的熔融状态的凡士林降温至熔点后，将步骤S2获得的活性相加至真空乳化搅拌机中，均质混合至均匀；

S4、降温，将步骤S3获得的混合物料，搅拌降至室温；

S5、灌装。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，凡士林加热至80～90℃，步骤S3中，凡士林降温至60～70℃；步骤S4中，混合物料降温至25～30℃。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中，高压均质参数如下，均质压力1000～2000bar，循环次数为100～300个/min。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中，均质混合参数如下，搅拌转速20～40rpm，均质转速2000～3000rpm，均质温度60～70℃，均质时间10～20min。

7.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S4中，降温搅拌参数如下，搅拌转速20～40rpm，降温速率为0.1～0.3℃/min。