CN116472958A - 提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，包括以下步骤：步骤一、将大叶千斤拔组培苗接种于固体快速繁殖培养基，继代至产生的带叶植株；步骤二、从带叶植株中选取带有顶芽和至少具2片叶片的茎段接种于固体生根培养基中，在温度为24‑26℃，湿度为45‑55％，光照为11‑13h/d条件下培养55‑65d，得大叶千斤拔组培苗，其中，固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.27‑0.36g/L的无水MgSO4、0.28‑0.32mg/L的萘乙酸。本发明具有极大促进大叶千斤拔的染料木素含量的积累，还能使其生物量得到显著提高的有益效果。
Description
技术领域
本发明涉及大叶千斤拔组培苗培育技术领域。更具体地说，本发明涉及一种提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法。
背景技术
大叶千斤拔(Flemingia macrophylla)为豆科千斤拔属植物，其根入药具祛风活血的功效。临床上可用于治疗风湿骨痛、腰肌劳损等症状，为妇科千金片、金鸡胶囊、金鸡冲剂、活络止痛丸等中成药的主要原料，亦为傣族、彝族、壮族习用的民族药，是药食两用的植物，具有很高的营养和药用价值。
大叶千斤拔的根部异黄酮类化合物含量非常丰富，是其药材的主要化学成分。染料木素则是大叶千斤拔异黄酮类化合物的特征成分与主要活性成分，具有抗氧化、抗炎镇痛、抗肝损伤、抗凝血、抑制血栓形成、促进神经恢复和抗癌等作用。
目前大叶千斤拔根部药材中染料木素含量较低，这对大叶千斤拔的利用率造成了较大的影响。
如何提高大叶千斤拔根干重，同步提高根部染料木素含量，进而提高大叶千斤拔染料木素产量，是目前急需解决的问题。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，极大促进大叶千斤拔的染料木素含量的积累，还能使其根干重得到显著提高。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，包括以下步骤：
步骤一、将大叶千斤拔丛生芽接种于固体快速繁殖培养基，继代至产生的带叶植株；
步骤二、从带叶植株中选取带有顶芽和至少具2片叶片的茎段接种于固体生根培养基中，在温度为24-26℃，湿度为45-55％，光照为11-13h/d条件下培养55-65d，得大叶千斤拔组培苗，其中，固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.27-0.36g/L的无水MgSO4、0.28-0.32mg/L的萘乙酸。
优选的是，固体快速繁殖培养基以MS培养基为基础培养基，添加1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤、0.5mg/L的吲哚乙酸、0.2mg/L的激动素。
优选的是，固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.27g/L的无水MgSO4、0.3mg/L的萘乙酸。
优选的是，步骤二中培养温度为25℃，湿度为50％。
优选的是，步骤二中光照为12h/d。
本发明至少包括以下有益效果：
通过外源Mg2+极大促进大叶千斤拔的染料木素含量的积累，还能使其根干重得到显著提高，具体的根干重最大为最小的2.57倍，染料木素含量最高为最低的7.02倍，进而使本申请大叶千斤拔组培苗的根部染料木素产量是对比例1(0g/L)的根部染料木素产量的17.91倍，即有效提高大叶千斤拔组培苗高根部染料木素产量。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本发明的其中一种技术方案所述不同组大叶千斤拔组培苗每克根干重中染料木素含量图；
图2为本发明的大叶千斤拔组培苗根部图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
<实施例1>
提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，包括以下步骤：
步骤一、将大叶千斤拔丛生芽接种于固体快速繁殖培养基，继代至产生带叶植株，其中，固体快速繁殖培养基以MS培养基为基础培养基，添加1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤、0.5mg/L的吲哚乙酸、0.2mg/L的激动素；
步骤二、从带叶植株中选取带有顶芽和至少具2片叶片的茎段接种于固体生根培养基中，在温度为25℃，湿度为50％，光照为12h/d条件下培养55-65d，得大叶千斤拔组培苗，其中，固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.27g/L的无水MgSO4、0.3mg/L的萘乙酸。
<实施例2>
提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，包括以下步骤：
同实施例1，不同的是固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.36g/L的无水MgSO4、0.3mg/L的萘乙酸。
<对比例1>
提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，包括以下步骤：
同实施例1，不同的是固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.3mg/L的萘乙酸。
<对比例2>
提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，包括以下步骤：
同实施例1，不同的是固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.045g/L的无水MgSO4、0.3mg/L的萘乙酸。
<对比例3>
提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，包括以下步骤：
同实施例1，不同的是固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.09g/L的无水MgSO4、0.3mg/L的萘乙酸。
<对比例4>
提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，包括以下步骤：
同实施例1，不同的是固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.18g/L的无水MgSO4、0.3mg/L的萘乙酸。
依据实施例1-2，对比例1-4的方案，每个方案处理获得3组组培苗，每组获得150-160株组培苗，针对每组分别测定农艺性状和根中染料木素含量，具体如下：
一、农艺形状，如下表1-2所示
表1不同组大叶千斤拔组培苗的根性状
表2不同组大叶千斤拔组培苗的株性状
注：表1、表2中每个指标以平均值±标准差表示；每组处理中小写字母不同表示不同处理间含量差异显著(P<0.05)。
根据表1可知，在固体生根培养基中添加Mg2+能够提高组培苗的根干重，对比例3中组培苗的根干重达到最大(0.42g)，其次为实施例1(0.27g/L)＝实施例2(0.36g/L)＞对比例4(0.18g/L)＞对比例1(0.045g/L)，分别为0.34g、0.24g和0.22g，实施例1-2的根干重为对比例1根干重的2.57倍，且具显著性差异；进一步，如图2所示，左边为依据对比例1方法获得的组培苗根部图，左边为依据实施例1方法获得的组培苗根部图，能够进一步印证上述结果。
二、根中染料木素含量测定，如下表3所示：
表3不同组大叶千斤拔组培苗每克根干重中染料木素含量
根据表1可知：不同浓度的Mg2+添加能够提高组培苗的根部染料木素含量，如图1、图2所示，随着Mg2+浓度的增加，大叶千斤拔的根部染料木素含量整体呈现先波动，后急剧增加的趋势，染料木素在实施例2(0.36g/L)处理下含量累积达到最高，为4.42mg/g，对比例1(0g/L)处理下最低，为0.63mg/g，其次为实施例1(0.27g/L)＞对比例4(0.18g/L)＞对比例2(0.045g/L)＞对比例3(0.09g/L)，分别为4.32mg/g、1.64mg/g、1.54mg/g和1.42mg/g，含量最高为最低的7.02倍，且具显著性差异。
综上可知，实施例1(0.27g/L)处理下，大叶千斤拔组培苗的根部染料木素产量为1.469mg，是对比例1(0g/L)的根部染料木素产量0.082mg的17.91倍，说明外源Mg2+不仅能够极大促进大叶千斤拔的染料木素含量的积累，还能使其生物量得到显著提高。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。
Claims (5)
1.提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、将大叶千斤拔丛生芽接种于固体快速繁殖培养基，继代至产生的带叶植株；
步骤二、从带叶植株中选取带有顶芽和至少具2片叶片的茎段接种于固体生根培养基中，在温度为24-26℃，湿度为45-55％，光照为11-13h/d条件下培养55-65d，得大叶千斤拔组培苗，其中，固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.27-0.36g/L的无水MgSO4、0.28-0.32mg/L的萘乙酸。
2.如权利要求1所述的提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，其特征在于，固体快速繁殖培养基以MS培养基为基础培养基，添加1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤、0.5mg/L的吲哚乙酸、0.2mg/L的激动素。
3.如权利要求1所述的提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，其特征在于，固体生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加0.27g/L的无水MgSO4、0.3mg/L的萘乙酸。
4.如权利要求1所述的提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，其特征在于，步骤二中培养温度为25℃，湿度为50％。
5.如权利要求1所述的提高大叶千斤拔组培苗根部染料木素产量的培育方法，其特征在于，步骤二中光照为12h/d。
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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