CN116270507A - 一种含脂蛋白脂酶刺激剂的舌下含片及其制备方法和应用 - Google Patents
一种含脂蛋白脂酶刺激剂的舌下含片及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种含脂蛋白脂酶刺激剂的舌下含片及其制备方法和应用。所述舌下压片包含脂蛋白脂酶刺激剂、填充剂、矫味剂、润滑剂、粘合剂,其中脂蛋白脂酶刺激剂为硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、PSS和扇贝多糖中的至少一种。所述舌下含片能够在短时间内促使活性成分透过舌下未角质化静脉丛吸收入血,刺激体内脂蛋白脂酶释放,并增加其活性,从而达到快速降血脂作用,另外,其与现有的制剂相比具有应用简单,吸收迅速,起效快,有效避开了首过效应,弥补了活性成分半衰期短的缺点。所述舌下压片可用于医学上有降低血脂治疗需求的治疗用药,也可用于高脂进食后快速降低血液内脂质含量的保健需求。
Description
技术领域
本发明属于药物制剂技术领域,具体涉及一种含脂蛋白脂酶刺激剂的舌下含片及其制备方法和应用。
背景技术
高脂血症是临床上常见的慢性代谢性疾病,目前我国高脂血症的患病率明显上升,呈年轻化的趋势,其与高血压、肥胖等因素有关,若不及时治疗或在日常生活中加以控制,很有可能引发心脑血管不良事件,严重的可危及患者生命。高脂血症的诱发因素包括内质网应激、载脂蛋白基因表达、氧化应激、炎性因子及肠道菌群等,其临床表现为血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白升高而血清高密度脂蛋白降低。目前临床对于高脂血症尚无有效的根治方法,多是采用长期服用他汀及贝特类药物进行控制,并兼以生活方式改变间接进行调节。但目前市场上的降血脂药以他汀及贝特类药物为化学性药物,毒副作用较强,起效较慢,不适用于日常降脂或保健长期服用。
脂蛋白脂酶是一种合成型蛋白酶,主要由心肌细胞、骨骼肌细胞、脂肪细胞和巨噬细胞等细胞合成,属于甘油三脂酶基因家族的糖蛋白。脂蛋白脂酶的N端包含了一个脂质和肝素结合位点,一个载脂蛋白的作用位点以及一个能发挥脂解作用的催化三联体。C端主要帮助脂蛋白脂酶形成同源二聚体并稳定保持其生物活性,且脂蛋白脂酶的功能具有一定的细胞组织特异性。脂蛋白脂酶具有水解血浆甘油三酯和升高高密度脂蛋白的作用,对防治动脉粥样硬化病变有利。
硫酸乙酰肝素蛋白聚糖是在体内多种细胞表面以及细胞外基质广泛表达的大分子糖蛋白。硫酸乙酰肝素蛋白聚糖是脂蛋白脂酶脂代谢过程中非常重要的辅助因子,当脂蛋白脂酶从实质细胞内分泌至细胞膜后,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖通过与脂酶的肝素结合区结合使成熟的脂酶从细胞膜转移至细胞间质并稳定其活性,随后脂酶和其复合物结合发挥脂解作用。
另外,口服快速降脂,尤其是无毒副作用情况下满足日常偶发降脂保健需求(如偶然高脂进食后的降脂需求)的产品,目前在市场上较为缺乏,因此,筛选合适的脂蛋白脂酶刺激剂并制备成相关口服药物或保健品,对于降低血液内脂质含量和改善高血脂症具有重要的意义。
发明内容
本发明提供了一种含脂蛋白脂酶刺激剂的舌下含片及其制备方法和应用。本发明选择了硫酸乙酰肝素蛋白聚糖作为脂蛋白脂酶刺激剂,并同时筛选获得了另外两种具有同样功效的物质作为脂蛋白脂酶刺激剂,制备成舌下含片,其有用量低,安全性高,可直接入血,快速降低血液内脂质含量。
为实现上述发明目的,本发明采用以下技术方案予以实现:
本发明提供了一种含脂蛋白脂酶刺激剂的舌下含片,其包含脂蛋白脂酶刺激剂、填充剂、矫味剂、润滑剂、粘合剂。
进一步地,所述舌下压片中脂蛋白脂酶刺激剂的含量为1mg/片~10mg/片;按重量份计,所述舌下压片中还包含80~950份填充剂、10~100份矫味剂、3~20份润滑剂、1~25份粘合剂。
进一步地,所述脂蛋白脂酶刺激剂为硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、PSS和扇贝多糖中的至少一种。
进一步地,所述填充剂为淀粉、糊精、糖粉、乳糖、微晶纤维素、甘露醇、葡聚糖、山梨醇、木糖醇、赤藓糖醇、蔗糖中的至少一种。
进一步地,所述矫味剂为糖浆、甜叶菊苷、西地脑、薄荷脑、阿斯巴甜中的至少一种。
进一步地,所述润滑剂为硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、氢化植物油中的至少一种。
进一步地,硬脂酸镁使用量范围为0.1%~2%;微粉硅胶使用量范围为0.1%~0.5%;滑石粉使用量范围为0.1%~5%。
进一步地,所述粘合剂为羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素中的至少一种。
进一步地,所述舌下压片中还含有10~60份崩解剂;所述崩解剂为干淀粉、羧甲基淀粉钠、羟基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、枸橼酸、碳酸氢钠中的至少一种。
综上,优选地,一种含脂蛋白脂酶刺激剂的舌下含片,其配方及成分含量为:硫酸乙酰肝素蛋白聚糖5mg/片,甘露醇500份,蔗糖35份,乳糖400份,阿斯巴甜10份,硬质酸镁5份,羟丙基甲基纤维素25份。
本发明还提供了所述的舌下含片的制备方法,其制备方法如下:
(1)将脂蛋白脂酶刺激剂、填充剂、矫味剂、润滑剂混合后,粉碎过筛,得到混合物料;
(2)在所述混合物料中加入粘合剂的水溶液,混合均匀后过筛,得到湿颗粒;
(3)将所述湿颗粒干燥至水分含量为3%~5%,加入润滑剂,压片包装,得到舌下压片。
本发明还提供了所述的舌下含片在制备降低血脂、治疗和/或预防高血脂症的药物或保健品中的应用。
本发明与现有技术相比,具有以下优点和有益效果:
1、本发明所述舌下压片选用口服的方式降脂,适用于大规模推广。
2、本发明所述舌下含片利用了舌下静脉丛吸收,避过和肝脏的首过效应,利于更少的活性成分发挥更大的作用效果。
3、本发明所述舌下含片选用的活性成分为酶激活剂,用量较低,基本无毒副作用。
4、本发明所述的舌下含片,活性成分直接入血,促使活性物质快速吸收入血,实现快速刺激脂酶释放及激活作用,有利于快速起效,快速降脂,达到快速降低高脂饮食后血脂含量的目的。
具体实施方式
结合以下具体实例对本发明的技术方案作进一步详细的说明。下述实施例中,如无特殊说明,所使用的实验方法均为常规方法,所用材料、试剂等均可从生物或化学试剂公司购买。
实施例1
一种含硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的舌下含片的配方及成分含量:
实施例2
一种含藻酸双酯钠(PSS)的舌下含片的配方及成分含量:
成分 | 配方4 | 配方5 | 配方6 |
PSS | 2.5g | 2.5g | 2.5g |
甘露醇 | 50g | 50g | 50g |
葡聚糖 | 3.5g | 3g | 2g |
乳糖 | 40g | 40g | 40g |
薄荷脑 | 1g | 1g | 1g |
滑石粉 | 0.5g | 1g | 2g |
羟丙基甲基纤维素 | 2.5g | 2.5g | 2.5g |
合计 | 100g | 100g | 100g |
片重 | 0.2g | 0.3g | 0.4g |
规格 | 5mg | 7.5mg | 10mg |
实施例3
一种含扇贝多糖(19)舌下含片的配方及成分含量:
其中,扇贝多糖(19)是以海湾扇贝(Argopecten irradians)为原料提取来的,其重均分子量为14.36kDa,硫酸基含量为5.21%-6.32%,主要由两种类肝素糖链结构组成:结构1为→4)-β-GlcA-(1→2)-α-Man-(1→;结构2为→4)-β-GlcA(1→3)-β-GalNAc-(1→;其分子结构式如下所示:
其中,R=SO3H或SO3Na。
扇贝多糖的制备方法:
1)酶解:
海湾扇贝去壳后,将贝壳肉剁碎保存在-20℃~-80℃。称量5g湿样品加入22.5mL0.05M PBS缓冲液(pH 8.0,含有2.5mL 0.05M Cys-EDTA-2Na和0.5%-1%胰蛋白酶),于37℃消化4h。然后混合液中加入木瓜蛋白酶(0.5%-1%)于50-65℃继续孵育3-4h。
2)终止消化:
酶解产物于100℃沸水浴5-10分钟终止消化,8000-12300g离心20-30min去除不溶性沉淀。收集上清液调节pH 7.0。
3)纯化:
将溶液过D204阴离子交换树脂柱(0.35–1.2mm,≥95%)(10cm×50cm),用蒸馏水平衡。洗脱程序为蒸馏水洗脱1.5倍柱体积,然后1.5M NaCl洗脱2倍柱体积,流速为500mL/h,收集洗脱溶液经旋转蒸发浓缩,浓缩液加入4倍体积的乙醇于4℃沉淀12-24h,7800g离心10min。收集沉淀除蛋白和色素,通过与胰蛋白酶孵育除蛋白(0.5%,40℃,5h),通过添加30% H2O2除色素(25℃,32h)。沉淀进行透析纯化(截留分子量为3kDa)。透析液旋转蒸发浓缩后冷冻干燥得到多糖产物,即为扇贝多糖。
4)产量:
多糖的产量以软体动物肉样品的湿重百分比计算为0.9%-1.5%。
实施例4
一种含硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的舌下含片的制备方法:
1)原料及辅料选择
称取活性成分硫酸乙酰肝素蛋白聚糖2.5g,填充剂:甘露醇50g、蔗糖3.5g、乳糖40g,矫味剂:阿斯巴甜1g,润滑剂:硬质酸镁0.5g,粘合剂:羟丙基甲基纤维素2.5g。
2)原辅料混合
将硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、甘露醇、蔗糖、乳糖、阿斯巴甜按比例依次加入混合均匀进行造粒,造粒完成后加入适量的硬脂酸镁混匀。
3)湿法制粒:混合物料中加入羟丙基甲基纤维素水溶液并合,得到软材;将软材过16目筛制粒并干燥,得到颗粒。
4)制软材
使用量控制在“握之成团,轻压即散”状态,并握后手掌上不沾粉为宜。
5)造粒
过筛后颗粒细粉过多,则粘合剂用量过少,加入粘合剂;若颗粒出现条状,则是加入粘合剂量过多。
6)干燥及整粒
将湿粒放入鼓风干燥箱干燥,烘干至颗粒水分含量为3~5%,将剩余硬脂酸镁加入物料中并搅拌均匀。
7)压片
将搅拌均匀的物料放入压片机中进行压制,工作压力为50kn,按照规格选择,厚度3mm为宜,得到舌下压片,密封保存。
实施例5:降血脂活性检测
选用实验大鼠作为模式动物,检测舌下含片降血脂效果:
选用体重为160g-180g,SPF级,雌性SD大鼠,隔夜禁食18h后,随机分4组,每组6只,利用生物方法测定脂肪酶释放活性。分别把含有5mg脂蛋白脂酶刺激剂的舌下含片,给于麻醉后的大鼠舌下,滴加适量生理盐水加速其崩解,药物崩解10min后采血,获取血浆,加入脂肪酶底物后,测试30s与15min A600吸光度检测血浆内脂肪酶释放活性。
实验步骤:
1.底物配制:
椰子油35g混于500ml 70-80℃水,充分搅拌5min,静止5min,重复5次。整个过程保持在70-80℃水浴中,自然冷却后置4℃冰箱使椰子油凝固,取出,晾干,备用。
溶液A:上述晾干后的椰子油50-60℃融化,加入丁基化羟基茴香醚10mg和半月桂酸甘油酯1.5g,充分搅拌使之溶解。
溶液B:吐温80 2g溶于少量热水(50-60℃)中,溶入尼泊金钠0.2g、EDTA-2Na50mg、蔗糖12.5g,加水至50ml搅拌使溶解完全。
磁力搅拌加热设置50-60℃混合溶液A和溶液B,将A液慢慢加入B液中,磁力搅拌30min。超声震荡30S,即制得底物母液。配置好后30-35℃水浴保存,保存期不超过3天。
2.底物工作液:
称取底物母液0.08g溶于50ml容量瓶中,纯化水定容。对底物工作液于35-40℃超声处理,至无可见乳滴,将上述工作液与水按1:2混合均匀,于600nm波长处测定吸光度(A),应在0.725-0.775范围内。
3.柠檬酸钠抗凝管:
取20g柠檬酸钠加入100ml生理盐水充分溶解,取2ml EP管,每管加入100ul柠檬酸钠溶液,80℃烘干既得。
4.对照及测试品配制:
实验样品分别为配方1、配方4、配方7制得的舌下含片,对照组只滴加生理盐水。
5.给药及采血:
药物崩解10min后采血,颈静脉取血2ml/只,加入到相应的抗凝管中,4℃2200rpm离心15min,取血浆置于37℃水浴中复温3min。
6.测试:
复温后的血浆加入37℃的底物工作液,底物血浆1:2混合,反应温度为25℃。分别测定混合反应液在30s和15min时的吸光度值,测定波长为600nm,得到A(30s),A(15min)。
表1:舌下压片对大鼠血脂的影响
测试结果如表1所示,A(30s)和A(15min)值的大小与血浆内的脂质含量多少成正比,A(30s)代表反应前脂质含量,A(15min)代表反应后脂质含量。而A(30s)-A(15min)间接反应降血脂的效率,对照组的血脂含量反应前后虽也有明显降低,但其明显小于配方1、配方4、配方7,说明配方1、配方4、配方7中舌下含片均有明显促降血脂作用。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其进行限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的普通技术人员来说,依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
Claims (10)
1.一种含脂蛋白脂酶刺激剂的舌下含片,其特征在于,所述舌下压片包含脂蛋白脂酶刺激剂、填充剂、矫味剂、润滑剂、粘合剂。
2.根据权利要求1所述的舌下含片,其特征在于,所述舌下压片中脂蛋白脂酶刺激剂的含量为1mg/片~10mg/片;按重量份计,所述舌下压片中还包含80~950份填充剂、10~100份矫味剂、3~20份润滑剂、1~25份粘合剂。
3.根据权利要求2所述的舌下含片,其特征在于,所述脂蛋白脂酶刺激剂为硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、PSS和扇贝多糖中的至少一种。
4.根据权利要求2所述的舌下含片,其特征在于,所述填充剂为淀粉、糊精、糖粉、乳糖、微晶纤维素、甘露醇、葡聚糖、山梨醇、木糖醇、赤藓糖醇、蔗糖中的至少一种。
5.根据权利要求2所述的舌下含片,其特征在于,所述矫味剂为糖浆、甜叶菊苷、西地脑、薄荷脑、阿斯巴甜中的至少一种。
6.根据权利要求2所述的舌下含片,其特征在于,所述润滑剂为硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、氢化植物油中的至少一种。
7.根据权利要求2所述的舌下含片,其特征在于,所述粘合剂为羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素中的至少一种。
8.根据权利要求2所述的舌下含片,其特征在于,所述舌下压片中还含有10~60份崩解剂;所述崩解剂为干淀粉、羧甲基淀粉钠、羟基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、枸橼酸、碳酸氢钠中的至少一种。
9.权利要求1~8任一项所述的舌下含片的制备方法,其特征在于,其制备方法如下:
(1)将脂蛋白脂酶刺激剂、填充剂、矫味剂、润滑剂混合后,粉碎过筛,得到混合物料;
(2)在所述混合物料中加入粘合剂的水溶液,混合均匀后过筛,得到湿颗粒;
(3)将所述湿颗粒干燥至水分含量为3%~5%,加入润滑剂,压片包装,得到舌下压片。
10.权利要求1~8任一项所述的舌下含片在制备降低血脂、治疗和/或预防高血脂症的药物或保健品中的应用。
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN117462516A (zh) * | 2023-08-04 | 2024-01-30 | 青岛海洋生物医药研究院 | 一种新型缓释微丸及其制备方法和其微丸片剂 |
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- 2023-03-02 CN CN202310189172.7A patent/CN116270507A/zh active Pending
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN117462516A (zh) * | 2023-08-04 | 2024-01-30 | 青岛海洋生物医药研究院 | 一种新型缓释微丸及其制备方法和其微丸片剂 |
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PB01 | Publication | ||
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