CN116223691A - 同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法 - Google Patents

同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN116223691A
CN116223691A CN202310439471.1A CN202310439471A CN116223691A CN 116223691 A CN116223691 A CN 116223691A CN 202310439471 A CN202310439471 A CN 202310439471A CN 116223691 A CN116223691 A CN 116223691A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sample
active metabolites
detected
statin
detection
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202310439471.1A
Other languages
English (en)
Inventor
左先波
刘丽宏
张丹
王晓星
杜雯雯
秦伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
China Japan Friendship Hospital
Original Assignee
China Japan Friendship Hospital
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by China Japan Friendship Hospital filed Critical China Japan Friendship Hospital
Priority to CN202310439471.1A priority Critical patent/CN116223691A/zh
Publication of CN116223691A publication Critical patent/CN116223691A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/065—Preparation using different phases to separate parts of sample
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，包括：步骤一、建立目标他汀类药物及其活性代谢产物的标准曲线；步骤二、对待测血样进行前处理，得待测样品；步骤三、采用UPLC‑MS/MS法对所述待测样品进行检测，并利用步骤一制备的标准曲线，对所述待测样品中的目标他汀类药物及其活性代谢产物进行定量。本发明的检测方法可同时检测11种不同极性、不同类型的他汀及其代谢产物，检测时间可控制在5.5分钟内，大大缩短了他汀类药物及其代谢产物的检测时间，且仅需2种内标化合物便可满足检测要求，大大节省了检测成本。

Description

同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法
技术领域
本发明涉及药物检测领域。更具体地说，本发明涉及一种同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法。
背景技术
他汀类药物在临床中广泛用于治疗高脂血症，对原发性高脂血症和混合型血脂异常治疗效果明显。他汀类药物能延缓动脉斑块在血管壁的聚集及沉淀，降低心肌梗死和中风的发病风险，是心血管疾病初级和次级预防的重要工具。长期高强度服用他汀类药物常引发肝功异常、肌肉疼痛甚至横纹肌溶解等严重不良反应。前期研究发现，药物的疗效和不良反应与药物体内暴露量相关。因此，明确药物在血液中的浓度对于规避不良反应、实时评估药物疗效尤为重要。
目前，单一他汀的药物浓度检测方法已有报道，如CN107144648A、CN111983113A、CN102384954A中记载。但随着临床合并用药、药物调整情况的增加，单一的药物浓度检测并不能及时评估患者的治疗情况。
发明内容
本发明的目的是提供一种同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，已满足临床对于他汀类药物合并用药的检测需求。
为了实现本发明的目的和其它优点，提供了一种同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，包括：
步骤一、建立目标他汀类药物及其活性代谢产物的标准曲线；
步骤二、对待测血样进行前处理，得待测样品；
步骤三、采用UPLC-MS/MS法对所述待测样品进行检测，并利用步骤一制备的标准曲线，对所述待测样品中的目标他汀类药物及其活性代谢产物进行定量。
优选的是，所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，所述目标他汀类药物及其活性代谢产物包括：阿托伐他汀、2-羟基阿托伐他汀、4-羟基阿托伐他汀、瑞舒伐他汀、普伐他汀、匹伐他汀、氟伐他汀、辛伐他汀、辛伐他汀酸、洛伐他汀、洛伐他汀酸。
优选的是，所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，所述前处理包括：将全血样本离心后，取上层血浆，加入含内标化合物的沉淀剂，再震荡离心，取上清液，即得所述待测样品，其中，所述上层血浆和所述沉淀剂的体积比为1:2-5，例如1:3、1:4等，所述沉淀剂为0.05％-0.5％的甲酸甲醇溶液，例如0.1％的甲酸甲醇溶液、0.2％的甲酸甲醇溶液、0.3％的甲酸甲醇溶液、0.4％的甲酸甲醇溶液等，所述沉淀剂的PH值为2.5-3.5，例如3.0。
优选的是，所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，所述上层血浆和所述沉淀剂的体积比为1:3，所述沉淀剂为0.1％的甲酸甲醇溶液。
优选的是，所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，所述内标化合物为阿托伐他汀-d5和瑞舒伐他汀-d6。
优选的是，所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，采用UPLC-MS/MS法进行检测时，
色谱条件：色谱柱：ACQUITY UPLCTM BEH C18 column 50mm×2.1mm 1.7μm；流速：0.2ml/min；进样体积：1μl；自动进样器温度：10℃；柱温：40℃；流动相：A：0.1％甲酸-10mmol乙酸铵水溶液，B：乙腈；梯度洗脱：0-3.0min，55％ A、45％B；3.0-5.0min，55％-90％A、余下为B；5.0-5.5min，90-55％ A、余下为B；
质谱条件：电离模式：电喷雾电离，正负离子切换模式；质谱扫描方式：多反应监测；毛细管电压：3.50kV；源和去溶剂的温度分别设置在150、350℃；吹扫气流量：1000l/h；碰撞气流量：0.13ml/min。
本发明至少包括以下有益效果：
第一、本发明的血液样本前处理方法，处理后可直接进样检测，无需再使用稀释剂稀释，且进样量仅为1μl，血液样本从收样到上样可控制在10分钟以内，大大节省了血液样本的前处理时间。
第二、本发明的检测方法所需血样样本少，仅需100ul的全血血浆样本即可满足检测要求。
第三、本发明的检测方法选用特定的色谱柱，并配合特定的检测条件，可同时检测11种不同极性、不同类型的他汀及其代谢产物，检测时间可控制在5.5分钟内，大大缩短了他汀类药物及其代谢产物的检测时间，且仅需2种内标化合物便可满足检测要求，大大节省了检测成本。
第四、本发明的检测方法的标准曲线范围能够完全覆盖11种他汀及其代谢物的治疗区间浓度和警戒浓度，尽可能的避免了实际临床样本可能超出检测线性范围的问题。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
需要说明的是，下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1：
建立目标他汀类药物及其活性代谢产物的标准曲线
1、配制标准品溶液
精密称取一定量的目标他汀类药物及其活性代谢产物的标准品，分别用甲醇溶解至储备液浓度，见下表，置于-80℃保存备用。精密吸取一定量的各标准品储备液进行混合，并利用空白血浆进行稀释，得到至少3种不同浓度的标准品样品液。
Figure BDA0004193356940000031
2、配制内标化合物储备液
精密称取一定量的阿托伐他汀-d5和瑞舒伐他汀-d6的标准品，分别用甲醇溶解至储备液浓度2000ng/ml。
3、制备标准品测试液
对标准品样品液进行前处理，具体地，将标准品样品液于3000rpm、4℃下离心3分钟，取上层清液100μl，加入含内标化合物的沉淀剂300μl，再震荡离心5分钟，取上清液，得标准品测试液。其中，内标化合物为阿托伐他汀-d5和瑞舒伐他汀-d6，内标化合物的终浓度为20ng/ml，沉淀剂为0.1％的甲酸甲醇溶液，沉淀剂使用0.1mol/L磷酸氢二钠溶液调整PH值至3.0.
4、检测
取1μl标准品测试液上样，采用UPLC-MS/MS法进行检测。检测设备：Waters I-CLASS UPLC色谱仪、T-QS三重四极杆质谱仪，美国Waters公司；色谱条件：色谱柱：ACQUITYUPLCTM BEH C18 column(50mm×2.1mm，1.7μm)；流速：0.2ml/min；进样体积：1μl；自动进样器温度：10℃；柱温：40℃；流动相：A：0.1％甲酸-10mmol乙酸铵水溶液，B：乙腈；梯度洗脱：0-3.0min，55％ A、45％B；3.0-5.0min，55％-90％ A、余下为B；5.0-5.5min，90-55％ A、余下为B；质谱条件：电离模式：电喷雾电离，正负离子切换模式(ESI+-ESI-)；质谱扫描方式：多反应监测(MRM)；毛细管电压为3.50kV；源和去溶剂的温度分别设置在150、350℃；吹扫气(氮气)流量为1000l/h；碰撞气(氩气)流量为0.13ml/min；其中，阿托伐他汀、瑞舒伐他汀、2-羟基阿托伐他汀、4-羟基阿托伐他汀、匹伐他汀为正离子扫描模式；氟伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀酸、洛伐他汀酸为负离子扫描模式。检测结果为目标化合物(目标他汀类药物及其活性代谢产物)响应值与内标化合物响应值的比值。
以目标化合物的浓度为横坐标，目标化合物响应值与内标化合物响应值的比值为纵坐标，制作标准曲线，见下表。
Figure BDA0004193356940000041
Figure BDA0004193356940000051
由此可知，在上述浓度范围内，目标他汀类药物及其活性代谢产物的线性良好，可用于目标他汀类药物及其活性代谢产物在全血样本中的含量测定，且定量范围能够完全满足临床样本中目标他汀类药物及其活性代谢产物的含量要求。
目标他汀类药物及其活性代谢产物的质谱检测参数及保留时间见下表。
Figure BDA0004193356940000052
由此可知，上述检测方法中，目标他汀类药物及其活性代谢产物能够全部被洗脱下来，并成功分离，各目标他汀类药物及其活性代谢产物间不会相互干扰，可实现准确测量。
实施例2：
精密度、准确性及回收率试验
1、配制标准品质控样本
采用空白血浆，对实施例1制备的标准品储备液进行稀释，得到不同浓度的标准品质控样本，见下表。
Figure BDA0004193356940000053
Figure BDA0004193356940000061
2、制备血浆质控样本
将标准品质控浓度H、M和L组别对应的各目标他汀类药物及其活性代谢产物进行混合，得到三种不同浓度的血浆质控样本溶液。
3、参照实施例1中的前处理方法制备血浆质控样本测试液。
4、参照实施例1中的检测方法进行检测。
血浆质控样本的精密度、准确性及回收率见下表。
Figure BDA0004193356940000062
由此可知，上述检测方法在血浆质控样本中的准确性好，绝对回收率均高于85％，精密度较高，RSD在-15至15之间，符合各项指标检测要求。
对比例1：
精密吸取一定量的11种目标他汀类药物及其活性代谢产物的标准品储备液进行混合，并利用空白血浆进行稀释，得血浆样本液，参照实施例1中的前处理方法制备血浆样本测试液，参照实施例1中的检测方法进行检测。其中，前处理时，分别采用甲醇、0.05％的甲酸甲醇溶液、0.1％的甲酸甲醇溶液、0.2％的甲酸甲醇溶液和0.5％的甲酸甲醇溶液作为沉淀剂。
计算各目标他汀类药物及其活性代谢产物的平均绝对回收率，结果见下表。
Figure BDA0004193356940000071
由此可知，向甲醇中添加0.05％-0.5％的甲酸，均有助于提高各目标他汀类药物及其活性代谢产物的回收率，其中，向甲醇中添加0.1％的甲酸，对各目标他汀类药物及其活性代谢产物的回收率提高最显著。
对比例2：
将阿托伐他汀和瑞舒伐他汀的标准品质控样本分别按照H、M和L组混合，得3个不同浓度的试验样本，对试验样本进行前处理制备试验样本测试液，其中，前处理时，分两组进行，第一组参照实施例1中的前处理方法进行处理，即先将内标化合物添加到沉淀剂中混匀，再将含内标化合物的沉淀剂添加到上层清液中，第二组先向上层清液中添加与第一组等量的内标化合物，再添加与第一组等量的沉淀剂。参照实施例1中的检测方法检测试验样本中阿托伐他汀和瑞舒伐他汀的浓度并计算日间精密度，结果见下表。
Figure BDA0004193356940000072
Figure BDA0004193356940000081
由此可知，先将内标化合物添加到沉淀剂中混匀，再将含内标化合物的沉淀剂添加到上层清液，待测物的日间精密度更高，更有助于常规检测。此外，先将内标化合物添加到沉淀剂中混匀，还可以减少操作时的取样时间，减少操作误差，提高检测效率，重现性和稳定性更好。
对比例3：
全血质控样本的制备方法同实施例2，不同之处在于：
前处理方法为：取200ul全血质控样本，加入0.1mol/L醋酸铵溶液(PH＝4)100ul和乙酸乙酯1ml，震荡5min，14000rpm离心15min，取上层有机相，真空浓缩40℃挥干30min，加甲醇200ul，涡旋3min复溶后，14000rpm离心5min，进样量10ul。
检测设备：Waters I-CLASS UPLC色谱仪、T-QS三重四极杆质谱仪，美国Waters公司。色谱柱：ACQUITY UPLCTM BEH C18 column(50mm×2.1mm，1.7μm)；流速：0.2ml/min；进样体积：10μl；自动进样器温度：10℃；柱温：40℃；流动相：A：0.2％甲酸水溶液，B：甲醇；梯度洗脱：0-3.0min，35％ A；3.0-3.5min，5％A；3.5-4min，5％ A；4.0-6.0min，35％ A。质谱条件：电离模式：电喷雾电离，正离子模式(ESI+)；质谱扫描方式：多反应监测(MRM)；毛细管电压为3.50kV；源和去溶剂的温度分别设置在150、550℃；吹扫气(氮气)流量为1000l/h；碰撞气(氩气)流量为0.13ml/min。
对比例3提供的检测方法需要更长的样本前处理时间和分析时间，但回收率更低，目标他汀类药物及其活性代谢产物在前处理过程中损失较多。若患者样本中目标他汀类药物及其活性代谢产物的含量较低，使用对比例3中的样本前处理方法和质谱检测方法，将无法准确定量。在批量样本检测时，无法保证所有待测物质的准确度。
这里说明的设备数量和处理规模是用来简化本发明的说明的。对本发明同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。

Claims (6)

1.同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，其特征在于，包括：
步骤一、建立目标他汀类药物及其活性代谢产物的标准曲线；
步骤二、对待测血样进行前处理，得待测样品；
步骤三、采用UPLC-MS/MS法对所述待测样品进行检测，并利用步骤一制备的标准曲线，对所述待测样品中的目标他汀类药物及其活性代谢产物进行定量。
2.如权利要求1所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，其特征在于，所述目标他汀类药物及其活性代谢产物包括：阿托伐他汀、2-羟基阿托伐他汀、4-羟基阿托伐他汀、瑞舒伐他汀、普伐他汀、匹伐他汀、氟伐他汀、辛伐他汀、辛伐他汀酸、洛伐他汀、洛伐他汀酸。
3.如权利要求1所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，其特征在于，所述前处理包括：将全血样本离心后，取上层血浆，加入含内标化合物的沉淀剂，再震荡离心，取上清液，即得所述待测样品，其中，所述上层血浆和所述沉淀剂的体积比为1:2-5，所述沉淀剂为0.05％-0.5％的甲酸甲醇溶液，所述沉淀剂的PH值为2.5-3.5。
4.如权利要求3所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，其特征在于，所述上层血浆和所述沉淀剂的体积比为1:3，所述沉淀剂为0.1％的甲酸甲醇溶液。
5.如权利要求3所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，其特征在于，所述内标化合物为阿托伐他汀-d5和瑞舒伐他汀-d6。
6.如权利要求1所述的同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法，其特征在于，采用UPLC-MS/MS法进行检测时，
色谱条件：色谱柱：ACQUITY UPLCTM BEH C18 column 50mm×2.1mm 1.7μm；流速：0.2ml/min；进样体积：1μl；自动进样器温度：10℃；柱温：40℃；流动相：A：0.1％甲酸-10mmol乙酸铵水溶液，B：乙腈；梯度洗脱：0-3.0min，55％A；3.0-5.0min，55％-90％A；5.0-5.5min，90-55％A；
质谱条件：电离模式：电喷雾电离，正负离子切换模式；质谱扫描方式：多反应监测；毛细管电压：3.50kV；源和去溶剂的温度分别设置在150、350℃；吹扫气流量：1000l/h；碰撞气流量：0.13ml/min。
CN202310439471.1A 2023-04-23 2023-04-23 同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法 Pending CN116223691A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310439471.1A CN116223691A (zh) 2023-04-23 2023-04-23 同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310439471.1A CN116223691A (zh) 2023-04-23 2023-04-23 同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116223691A true CN116223691A (zh) 2023-06-06

Family

ID=86579031

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310439471.1A Pending CN116223691A (zh) 2023-04-23 2023-04-23 同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116223691A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113588804B (zh) 一种检测血清中5-羟色胺和褪黑素浓度的试剂盒
CN111537648A (zh) 一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗结核病药物的试剂盒
CN111896647A (zh) 一种超高效液相色谱串联质谱技术检测尿液中21种有机酸的试剂盒
CN111257486A (zh) 检测血液中5种精神药物和主要代谢产物的方法及试剂盒
CN114002344A (zh) 奥氮平、阿立哌唑及脱氢阿立哌唑的检测方法及试剂盒
CN110715990A (zh) 一种同时检测血浆中acc007、拉米夫定和替诺福韦的方法
CN111665303B (zh) 超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中抗血小板药物的试剂盒
CN116773693A (zh) 液相色谱串联质谱法检测血液中11种抗高血压药物及1种代谢产物的方法及应用
CN109900841B (zh) 一种同时测定血浆中氨基糖苷类抗生素药物浓度的hplc-ms/ms方法
CN111208252B (zh) 一种人血浆中维a酸的定量检测方法
CN109709233A (zh) 一种检测血液、尿液中多种蘑菇毒素的方法
CN116223691A (zh) 同时检测多种他汀类药物及其活性代谢产物的方法
CN110806458A (zh) 同时检测血液中亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸含量的方法
CN110007023B (zh) 鱼体内磺胺类药物的高分辨质谱筛查方法及其与蛋白大分子相互作用的分析方法
CN114740125A (zh) 一种基于lc-ms的10种心血管药物血清的检测方法及其试剂盒
CN114397379A (zh) 一种液质联用测定血浆中奥硝唑浓度的方法
CN109298081B (zh) 一种新利司他中杂质a生物样品的测定方法
CN111812224A (zh) 一种检测血清中抗痴呆药物浓度的方法
CN111855852A (zh) 一种超高效液相色谱串联质谱技术检测尿液中21种有机酸的方法
CN105301155B (zh) 一种测定人血浆中丹参酮iia磺酸钠浓度的方法
CN115060819B (zh) 基于hplc-ms/ms单峰法同时测定人血浆中sun及su12662的方法
CN114563504B (zh) 一种测定血浆中游离醛固酮含量的方法及试剂盒
WO2024036702A1 (zh) 一种检测盐酸氨酮戊酸己酯的方法
CN112461983B (zh) 一种测定巴马小型猪皮肤生物样品中双氯芬酸钠的方法
CN114689770A (zh) 直接检测尿液中羟氯喹及其三种代谢产物的方法及检测试剂盒

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination