CN116178520B - 一种阳离子肽及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种阳离子肽，其氨基酸序列为：FLPIIGIGAVLKVLT TGLPALISWIKRKRQQ或者GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQIIPLF。该阳离子肽具有低溶血性和良好的抗菌抗肿瘤活性，可用于制备治疗肿瘤的产品，或者用于制备抗菌产品，同时该类肽可用于防止或者减轻肌腱损伤修复中包括肌腱粘连情况、疤痕组织、组织增生、炎症等中的一种或者两种以上不良情况的产生，可用于制备治疗肌腱损伤的产品，具有较大的临床转化价值。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一种阳离子肽及其应用。
背景技术
蜂毒肽是峰毒的主要成分和主要生物活性物质，是一种来源于蜜蜂毒液中的细胞溶解性多肽，具有α螺旋结构的两亲性多肽，分子式为C131H229N39O31，其一级结构的氨基酸残基顺序为Gly-Ile-Gly-Ala-Val-Leu-Lys-Val-Leu-Thr-Thr-Gly-Leu-Pro-Ala-Leu-Ile-Ser-Trp-Ile-Lys-Arg-Lys-Arg-Gln-Gln，相对分子量为2846.46，约占蜂毒干重的50％。大量研究表明，蜂毒肽具有极强的药理作用和生物学活性，在抗炎、阵痛、抗微生物、抗病毒及抗肿瘤等诸多领域都具有潜在的临床应用价值，在癌症治疗方面，蜂毒肽与传统的化疗药物相比更不易使癌细胞产生耐药性。然而，蜂毒肽还可以结合在红细胞膜表面，损伤红细胞膜结构，导致红细胞溶血，限制了其临床应用。局部使用也存在诸多约束，这极大的限制了蜂毒肽的临床使用。如何在保留蜂毒肽抗肿瘤、抗菌能力的同时降低其溶血能力是蜂毒肽临床应用中亟待解决的问题。
发明内容
面对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种基于蜂毒肽的阳离子肽，兼具了低溶血率和抗肿瘤、抗菌活性。
本发明还提供了所述阳离子肽在制备抗肿瘤产品、抗菌产品和/或治疗肌腱损伤的产品中的应用。
一种阳离子肽，其氨基酸序列为：FLPIIGIGAVLKVLTTGLPALISWI KRKRQQ(SEQ IDNO：1)或者GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ IIPLF(SEQ ID NO：2)。
所述阳离子肽在制备治疗肿瘤的产品中的应用。
所述肿瘤包括黑色素肿瘤、鳞癌、肺癌、肝癌、肠癌等中的一种或两种以上。
所述阳离子肽在制备抗菌产品中的应用。所述抗菌产品为具有抑菌和/或杀菌性能的产品。
所述抗菌产品包括对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌中的一种或两种以上的菌具有抑菌和/或杀菌作用的产品。
所述菌包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、溶血葡萄球菌、猪伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、鲍曼不动杆菌临床分离全耐药菌、副溶血弧菌、肠炎弧菌等中的一种或两种以上。
所述阳离子肽在制备治疗肌腱损伤的产品中的应用。
所述治疗肌腱损伤的产品包括防止或者减轻肌腱损伤修复中不良情况产生的产品，所述肌腱损伤修复中不良情况产生包括肌腱粘连情况、疤痕组织、组织增生、炎症等中的一种或者两种以上不良情况的产生。
所述产品可以是药品，也可以是医用辅料或者耗材等用于抗肿瘤、抗菌和/或治疗肌腱损伤的产品。
本发明利用固相合成方法合成所述阳离子肽，包括：以氯树脂为起始树脂载体，通过固相合成法依次缩合多肽序列中相对应的Fmoc-氨基酸，得到Fmoc-多肽-2-Cl树脂，脱保护，反复循环，得到多肽-2-Cl树脂，进行切割反应，切割液进行旋蒸、HPLC纯化，冻干，得到阳离子肽。
本发明应用五元肽对蜂毒肽进行结构改造，对蜂毒肽N端或者C端进行五元肽修饰，形成一类新型的阳离子肽的结构，大大改善了其溶血性；本发明基于蜂毒肽结构改造后的阳离子肽是带有阳离子电荷的具有生物活性的小肽，具有低溶血性和良好的抗菌抗肿瘤活性，可用于制备治疗肿瘤的产品，或者用于制备抗菌产品，同时该类肽可用于防止或者减轻肌腱损伤修复中包括肌腱粘连情况、疤痕组织、组织增生、炎症等中的一种或者两种以上不良情况的产生，可用于制备治疗肌腱损伤的产品，具有较大的临床转化价值。
附图说明
图1是阳离子肽1的HPLC图谱；
图2是阳离子肽1的质谱图谱；
图3是阳离子肽2的HPLC图谱；
图4是阳离子肽2的质谱图谱；
图5是蜂毒肽、阳离子肽1、阳离子肽2在不同浓度的溶血情况图以及阴性对照组、阳性对照组的溶血情况图；
图6是蜂毒肽、阳离子肽1和阳离子肽2的浓度与溶血率关系图；
图7是实施例4中不同浓度蜂毒肽作用下细胞生存率曲线图；
图8是实施例4中不同浓度阳离子肽1作用下细胞生存率曲线图；
图9是实施例4中不同浓度阳离子肽2作用下细胞生存率曲线图；
图10是实施例5中各实验组肿瘤的生长曲线图；横坐标时间为天数；
图11是实施例6中各实验组肿瘤的生长曲线图；横坐标时间为天数；
图12是实施例7中各实验组肿瘤的生长曲线图；横坐标时间为天数；
图13是实施例8中各实验组肿瘤的生长曲线图；横坐标时间为天数；
图14是治疗组和对照组组织学对比图；注：A：未治疗组(HE×100)；B：阳离子肽1(HE×200)；C：阳离子肽2(HE×100)；D：未治疗组(马松三色法染色×100)；E：阳离子肽1(马松三色法染色×200)；F：阳离子肽2(马松三色法染色×100)；其中，HE是苏木素伊红染色；
图15是未治疗组、蜂毒肽和本发明阳离子肽治疗跟腱损伤效果图。
具体实施方式
以下结合具体实施例与附图对本发明作进一步详细描述，以便本领域技术人员更好的理解本发明的技术方案，但本发明技术方案并不受其限制。
实施例1：阳离子肽1(FLPII-蜂毒肽)的制备
基于蜂毒肽的氨基酸序列设计的阳离子肽1的氨基酸序列为FLPIIGIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ(SEQ ID NO：1)。
以二氯树脂(CTC resin)为起始树脂载体，通过固相合成法依次缩合多肽序列中相对应的9-芴甲氧羰基-氨基酸(Fmoc-氨基酸)，得到Fmoc-多肽-2-Cl树脂，脱保护，反复循环，得到多肽-2-Cl树脂，进行切割反应，切割液进行旋蒸、HPLC纯化，冻干，得到阳离子肽1，具体合成路线如下：
按照上述合成路线，以二氯树脂为起始树脂载体，与芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-谷氨酰胺(Fmoc-Gln(Trt)-OH)、N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)和二氯甲烷(DCM)反应3h，二氯树脂、Fmoc-Gln(Trt)-OH、DIPEA三者摩尔比为1:2:4，加入适量20％哌啶(Piperidine)的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液(哌啶与DMF体积比1:4)反应20min脱去芴甲氧羰基(Fmoc)保护基团，得到N-三苯甲基-L-谷氨酰胺-二氯树脂(H-Gln(Trt)-CTC resin)；
接着与Fmoc-Gln(Trt)-OH、N,N'-二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-羟基苯并三唑(HOBt)和DMF反应1.5h，二氯树脂、Fmoc-Gln(Trt)-OH、DIC、HOBt四者摩尔比为1:3:3:3，加入适量20％哌啶/DMF溶液(哌啶与DMF体积比1:4)反应20min脱去Fmoc保护基团，得到N-三苯甲基-L-谷氨酰胺-N-三苯甲基-L-谷氨酰胺-二氯树脂(H-Gln(Trt)-Gln(Trt)-CTCresin)；
再与N-芴甲氧羰酰基-2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰-L-精氨酸(Fmoc-Arg(Pbf)-OH)、DIC、HOBt和DMF反应1.5h，二氯树脂、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、DIC、HOBt四者摩尔比为1:3:3:3，加入适量20％哌啶/DMF溶液(哌啶与DMF体积比1:4)反应20min脱去Fmoc保护基团，得到2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰-L-精氨酸-N-三苯甲基-L-谷氨酰胺-N-三苯甲基-L-谷氨酰胺-二氯树脂(H-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Gln(Trt)-CTC resin)；
然后与相应Fmoc保护的氨基酸偶联后脱保护，反复循环(Couping withrelevante Fmoc-protected amino acid and coupling cycle of deprotec-tion)，得到H-Phe-Leu-Pro-Ile-Ile-Gly-Ile-Gly-Ala-Val-Leu-Lys-Val-Leu-Th r(tBu)-Thr(tBu)-Gly-Leu-Pro-Ala-Leu-Ile-Ser(tBu)-Trp(Boc)-Ile-Lys(Boc)-Ar g(Pbf)-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Gln(Trt)-CTC resin，加入适量切割液三氟乙酸(TFA)反应3h，滤掉树脂，切割液进行旋蒸、HPLC纯化，冻干，得到阳离子肽1：H-Phe-Leu-Pro-Ile-Ile-Gly-Ile-Gly-Ala-Val-Leu-Lys-Val-Leu-Thr-Thr-Gly-Leu-Pro-Ala-Leu-Ile-Ser-Trp-Ile-Lys-Arg-Lys-Arg-Gln-Gln-OH。
阳离子肽1的表征见图1和图2。
实施例2：阳离子肽2(蜂毒肽-FLPII)的制备
基于蜂毒肽的氨基酸序列设计的阳离子肽2的氨基酸序列为GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQIIPLF(SEQ ID NO：2)。
以二氯树脂为起始树脂载体，通过固相合成法依次缩合多肽序列中相对应的Fmoc-氨基酸，得到Fmoc-多肽-2-Cl树脂，脱保护，反复循环，得到多肽-2-Cl树脂，进行切割反应，切割液进行旋蒸、HPLC纯化，冻干，得到阳离子肽2，具体合成路线如下：
按照上述合成路线，以二氯树脂为起始树脂载体，与芴甲氧羰基-苯丙氨酸(Fmoc-Phe-OH)、DIPEA和DCM反应3h，二氯树脂、Fmoc-Phe-OH、DIPEA三者摩尔比为1:2:4，加入适量20％哌啶/DMF溶液(哌啶与DMF体积比1:4)反应20min脱去Fmoc保护基团，得到苯丙氨酸-二氯树脂(H-Phe-CTC resin)；
接着与芴甲氧羰基-亮氨酸(Fmoc-Leu-OH)、DIC、HOBt和DMF反应1.5h，二氯树脂、Fmoc-Leu-OH、DIC、HOBt四者摩尔比为1:3:3:3，加入适量20％哌啶/DMF溶液(哌啶与DMF体积比1:4)反应20min脱去Fmoc保护基团，得到亮氨酸-苯丙氨酸-二氯树脂(H-Leu-Phe-CTCresin)；
再与芴甲氧羰基-脯氨酸(Fmoc-Pro-OH)、DIC、HOBt和DMF反应1.5h，二氯树脂、Fmoc-Pro-OH、DIC、HOBt四者摩尔比为1:3:3:3，加入适量20％哌啶/DMF溶液(哌啶与DMF体积比1:4)反应20min脱去Fmoc保护基团，得到脯氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-二氯树脂(H-Pro-Leu-Phe-CTC resin)；
然后与相应Fmoc保护的氨基酸偶联后脱保护，反复循环，得到H-Gly-Ile-Gly-Ala-Val-Leu-Lys-Val-Leu-Thr(tBu)-Thr(tBu)-Gly-Leu-Pro-Ala-Leu-Ile-Ser-Trp(Boc)-Ile-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Gln(Trt)-Ile-Ile-Pro-Leu-Phe-CTC resin，加入适量切割液TFA反应3h，滤掉树脂，切割液进行旋蒸、HPLC纯化，冻干，得到阳离子肽2：H-Gly-Ile-Gly-Ala-Val-Leu-Lys-Val-Leu-Thr-Thr-Gly-Leu-Pro-Ala-Leu-Ile-Ser-Trp-Ile-Lys-Arg-Lys-Arg-Gln-Gln-Ile-Ile-Pro-Leu-Phe-OH。
阳离子肽2的表征见图3和图4。
本发明中，按照设计好的阳离子肽1和阳离子肽2的氨基酸序列合成阳离子肽1和阳离子肽2即可，所选用的氨基酸保护基的种类没有特别的限制，本领域现有的氨基酸保护基均适用，合成时选择相应的反应条件和脱保护基反应条件均可实现本发明阳离子肽1和阳离子肽2的合成。
实施例3：阳离子肽溶血性的测定
向抗凝管2mL血液(兔血)中加入4mLPBS缓冲液(pH7.4)，以3500rpm离心5min，并丢弃上清液。用4mLPBS缓冲液洗涤红细胞3-4次，直到上清液清澈透明，弃上清液，最后在红细胞中加入适量PBS缓冲液，制成2％(体积百分比)的红细胞悬浮液。将1mL2％红细胞悬浮液与4mLPBS缓冲液的混合物设为阴性对照组，将阳离子肽1、阳离子肽2、蜂毒肽分别浸泡在由1mL2％红细胞悬浮液与4mLPBS缓冲液组成的混合物中，将1mL 2％红细胞悬浮液与4mL2％(体积百分比)曲拉通(trizon)的PBS缓冲液的混合物设为阳性对照组，所有样本均在37℃培养2h。培养好后各取1mL混合物，以3500rpm离心5分钟；在96孔板中收集200μL上清液；在545nm下测量每个样品的吸光度。结果见图5和图6，图中显示应用蜂毒肽4μM(11.39μg/mL)时候溶血率可达到100％；而应用本发明阳离子肽1(FLPII-蜂毒肽)、阳离子肽2(蜂毒肽-FLPII)在4μM(14.08μg/mL)浓度时，溶血率分别为18％、25％，在15μM(52.8μg/mL)浓度时，溶血率分别为35％、36％；本发明蜂毒肽-FLPII、FLPII-蜂毒肽在相同浓度下的溶血率相当，随着浓度升高溶血率呈缓慢上升趋势，但上升幅度不大；该结果表明本发明对蜂毒肽进行结构改造后的阳离子肽1、阳离子肽2具有低溶血率，提高了其临床应用的安全性。
实施例4：细胞毒性实验
细胞毒性的测定：依次设多个梯度浓度，将处在对数生长期的小鼠黑色素瘤细胞B16F10按每孔4000个细胞加入到96孔板中，37℃，5％(体积百分比)CO2条件孵育12小时后加入用pH7.4PBS缓冲液配制的浓度梯度的药物，加药后继续孵育48小时，而后加入CCK-8试剂，2小时后酶标仪下检测，收集数据，绘制细胞生存率曲线，并计算IC50值，结果见图7-9。图中显示：本发明阳离子肽1与阳离子肽2的IC50值分别为54.32μg/mL(15.43μM)、24.04μg/mL(6.83μM)；该结果表明本发明对蜂毒肽进行结构改造后的阳离子肽1与阳离子肽2兼具了低溶血率和较高的抑制黑色素肿瘤的生物活性，具有临床应用价值，可用于制备治疗恶性黑色素肿瘤等肿瘤的产品，该产品可以是药品，也可以是医用辅料或者耗材等用于治疗恶性黑色素肿瘤等肿瘤的产品。
实施例5：肿瘤体内治疗实验
皮下肿瘤模型的建立，20只裸鼠皮下每只注射80万到100万的B16F10肿瘤细胞，随机分成四组：a.控制组：每只每次注射200μLPBS缓冲溶液(pH7.4)；B：蜂毒肽组，每只每次注射200μg蜂毒肽；C：阳离子肽1组，每只每次注射200μg阳离子肽1，D：阳离子肽2组，每只每次注射200μg阳离子肽2。每两天给药一次，用卡尺记录肿瘤尺寸，计算肿瘤体积，监测和记录老鼠体重，观察肿瘤大小变化，分析不同组小鼠的相对肿瘤体积。肿瘤的生长曲线如图10。图中显示本发明阳离子肽1与阳离子肽2对B16F10肿瘤的抑制效果相当，与控制组对比，对B16F10肿瘤具有较好的抑制作用；该结果表明本发明对蜂毒肽进行结构改造后的阳离子肽1与阳离子肽2兼具了低溶血率和较高的抑制黑色素肿瘤的生物活性，具有临床应用价值，可用于制备治疗恶性黑色素肿瘤等肿瘤的产品，该产品可以是药品，也可以是医用辅料或者耗材等用于治疗恶性黑色素肿瘤等肿瘤的产品。
实施例6：肿瘤体内治疗实验
皮下肿瘤模型的建立，20只裸鼠皮下每只注射80万到100万的鳞癌A431肿瘤细胞，随机分成四组：a.控制组：注射PBS缓冲溶液(pH7.4)(每只每次200μL)，B，注射蜂毒肽组(每只每次200μg)，C注射阳离子肽1(FLPII-蜂毒肽，每只每次200μg)，D、注射阳离子肽2(蜂毒肽-FLPII，每只每次200μg)。每两天给药一次，用卡尺记录肿瘤尺寸，计算肿瘤体积，监测和记录老鼠体重，观察肿瘤大小变化，分析不同组小鼠的相对肿瘤体积。肿瘤的生长曲线如图11。图中显示蜂毒肽、本发明阳离子肽1、本发明阳离子肽2对鳞癌A431肿瘤细胞的抑制效果相当，与控制组对比，对鳞癌A431肿瘤细胞具有显著的抑制作用；该结果表明本发明对蜂毒肽进行结构改造后的阳离子肽1与阳离子肽2兼具了低溶血率和显著的抑制鳞癌肿瘤的生物活性，具有临床应用价值，可用于制备治疗鳞癌等肿瘤的产品，该产品可以是药品，也可以是医用辅料或者耗材等用于治疗鳞癌等肿瘤的产品。
实施例7：肿瘤体内治疗实验
皮下肿瘤模型的建立，20只裸鼠皮下每只注射80万到100万的肺癌A549肿瘤细胞，随机分成四组：a.控制组：注射PBS缓冲溶液(pH7.4)(每只每次200μL)，B，注射蜂毒肽组(每只每次200μg)，C注射阳离子肽1(FLPII-蜂毒肽，每只每次200μg)，D、注射阳离子肽2(蜂毒肽-FLPII，每只每次200μg)。每两天给药一次，用卡尺记录肿瘤尺寸，计算肿瘤体积，监测和记录老鼠体重，观察肿瘤大小变化，分析不同组小鼠的相对肿瘤体积。肿瘤的生长曲线如图12。图中显示蜂毒肽、本发明阳离子肽1、本发明阳离子肽2对肺癌A549肿瘤细胞的抑制效果相当，与控制组对比，对肺癌A549肿瘤细胞具有显著的抑制作用；该结果表明本发明对蜂毒肽进行结构改造后的阳离子肽1与阳离子肽2兼具了低溶血率和显著的抑制肺癌肿瘤的生物活性，具有临床应用价值，可用于制备治疗肺癌等肿瘤的产品，该产品可以是药品，也可以是医用辅料或者耗材等用于治疗肺癌等肿瘤的产品。
实施例8：肿瘤体内治疗实验
皮下肿瘤模型的建立，20只裸鼠皮下每只注射80万到100万的肠癌Sw480肿瘤细胞，随机分成四组：a.控制组：每只每次注射PBS缓冲溶液(200μL)，B，注射蜂毒肽组(每只每次200μg)，C注射阳离子肽1(FLPII-蜂毒肽，每只每次200μg)，D、注射阳离子肽2(蜂毒肽-FLPII，每只每次200μg)。每两天给药一次，用卡尺记录肿瘤尺寸，计算肿瘤体积，监测和记录老鼠体重，观察肿瘤大小变化，分析不同组小鼠的相对肿瘤体积。肿瘤的生长曲线如图13。图中显示蜂毒肽、本发明阳离子肽1、本发明阳离子肽2对肠癌Sw480肿瘤细胞的抑制效果相当，与控制组对比，对肠癌Sw480肿瘤细胞具有显著的抑制作用；该结果表明本发明对蜂毒肽进行结构改造后的阳离子肽1与阳离子肽2兼具了低溶血率和显著的抑制肠癌肿瘤的生物活性，具有临床应用价值，可用于制备治疗肠癌等肿瘤的产品，该产品可以是药品，也可以是医用辅料或者耗材等用于治疗肠癌等肿瘤的产品。
实施例9：抗菌测试
对蜂毒肽和阳离子肽进行最小抑菌浓度(MIC)测试，使用肉汤稀释法。将浓度为256μg/mL的阳离子肽等样品溶液(用LB液体培养基配制)分别点入96孔聚苯乙烯板第一排孔中，每孔100μL，每种样品重复3次，后排每孔加入50μL LB液体培养基，使用排枪从第一排孔吸取50μL样品溶液加入第二排孔与第二排孔充分吹打混合，再从第二排孔吸取50μL加入第三排孔与第三排孔吹打混合，如此依次进行两倍稀释，设置不同浓度梯度的样品实验组。另设1列只加100μL LB液体培养基的空白组以及一列100μL菌浓度为5×105CFU/mL而不含样品的对照组(菌+LB液体培养基)。实验使用了革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌SA29213株，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌USA300株，以及革兰氏阴性的鲍曼不动杆菌Ab BAA747标准株，大肠埃希菌等。细菌过夜培养，配制得0.5麦氏浊度标准的菌悬液，1:100稀释后，向样品实验组每孔加入50μL，此时1至8孔样品浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1μg/mL。温箱培养24h，用酶标仪OD600测取96孔板中各孔洞吸光度值，细菌生长率＝(OD实验组-OD空白组)/(OD对照组-OD空白组)，结果见下表1。结果显示本发明对蜂毒肽进行结构改造后的阳离子肽1与阳离子肽2兼具了低溶血率和对革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌均有较好的抑菌杀菌作用，具有临床应用价值，可用于制备抗菌产品，例如对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌中的一种或两种以上的菌具有抑菌和/或杀菌作用的产品，所述菌包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、溶血葡萄球菌、猪伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、鲍曼不动杆菌临床分离全耐药菌、副溶血弧菌、肠炎弧菌等中的一种或两种以上。
表1
实施例10：大鼠跟腱损伤模型的实验研究
将大鼠后侧跟腱挤压伤，伤口处分别局部注射蜂毒肽、本发明阳离子肽各200μg一次(2周内注射一次)，两周以后观察跟腱修复情况，治疗组及模型对照组(未治疗组)大鼠跟腱均顺利愈合，未观察到跟腱断裂及局部感染、明显畸形等情况，说明本发明阳离子肽对跟腱等肌腱愈合无负面影响。对比治疗组及模型对照组(未治疗组)的跟腱情况发现：蜂毒肽治疗组、本发明阳离子肽1和阳离子肽2治疗组大多数样本中大鼠肌腱表面较光滑无疤痕，少量样本可见粘连组织附着，但肌腱粘连范围较少且粘连程度较轻，而且疤痕较少，具体见图15；肌腱与腱周组织间隙清楚干净，肌腱损伤处胶原纤维和成纤维细胞轻微增加，但排列较规则，少量样本可见肌腱周围肉芽组织轻度增生，炎性细胞浸润较少、不明显，具体见图14。对照组(未治疗组)大鼠腱周组织发出条索样粘连组织附着于肌腱断端(见图15)，肌腱与腱周组织间隙存在，肌腱损伤处胶原纤维和成纤维细胞增多较明显，且排列明显不规则，肌腱周围肉芽组织重度增生，可见明显炎性细胞浸润(见图14)。图中显示本发明阳离子肽1和阳离子肽2对跟腱等肌腱损伤的愈合有利，能够防止或者减轻跟腱等肌腱损伤修复中的肌腱粘连情况、疤痕组织、组织增生、炎症等中的一种或者两种以上不良情况的产生；该结果显示本发明阳离子肽1和阳离子肽2可用于制备治疗跟腱等肌腱损伤的产品，例如用于制备防止或者减轻跟腱等肌腱损伤修复中的肌腱粘连情况、疤痕组织、组织增生、炎症等中的一种或者两种以上不良情况的产生的产品，该产品可以是药品，也可以是医用辅料或者耗材等用于治疗跟腱等肌腱损伤的产品。
Claims (7)
1.一种阳离子肽，其特征在于，所述阳离子肽的氨基酸序列为：FLPIIGIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ或者GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQIIPLF。
2.根据权利要求1所述的阳离子肽在制备治疗肿瘤的产品中的应用，其特征在于，所述肿瘤包括黑色素肿瘤、鳞癌、肺癌、肠癌中的一种或两种以上。
3.根据权利要求1所述的阳离子肽在制备抗菌产品中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗菌产品包括对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌中的一种或两种以上的菌具有抑菌和/或杀菌作用的产品。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述菌包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、溶血葡萄球菌、猪伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、鲍曼不动杆菌临床分离全耐药菌、副溶血弧菌、肠炎弧菌中的一种或两种以上。
6.根据权利要求1所述的阳离子肽在制备治疗肌腱损伤的产品中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述治疗肌腱损伤的产品包括防止或者减轻肌腱损伤修复中不良情况产生的产品，所述肌腱损伤修复中不良情况产生包括肌腱粘连情况、疤痕组织、组织增生、炎症中的一种或者两种以上不良情况的产生。
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