CN116157137A - 维持微血管完整性的方法 - Google Patents

维持微血管完整性的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN116157137A
CN116157137A CN202180057764.2A CN202180057764A CN116157137A CN 116157137 A CN116157137 A CN 116157137A CN 202180057764 A CN202180057764 A CN 202180057764A CN 116157137 A CN116157137 A CN 116157137A
Authority
CN
China
Prior art keywords
treating
preventing
composition
microvascular
cannabinol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202180057764.2A
Other languages
English (en)
Inventor
A·施穆勒维茨
A·祖洛夫-沙尼
E·布雷纳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sespak Co ltd
Original Assignee
Sespak Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sespak Co ltd filed Critical Sespak Co ltd
Publication of CN116157137A publication Critical patent/CN116157137A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/658—Medicinal preparations containing organic active ingredients o-phenolic cannabinoids, e.g. cannabidiol, cannabigerolic acid, cannabichromene or tetrahydrocannabinol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本公开提供了一种预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法，其包括向受试者施用包含选定的大麻素的组合物，从而维持微血管的完整性。

Description

维持微血管完整性的方法
本申请要求获得2020年8月3日提交的美国临时申请号63/060,245的权益，所述美国临时申请的内容通过引用整体纳入本文。
本公开涉及某些基于大麻素的疗法在预防和/或治疗微血管(microvascular)完整性损伤，以及与受伤的微血管系统(microvasculature)有关的病症中的用途。特别是，本公开涉及用所公开的组合物中含有Δ9-四氢大麻酚(THC)的药物组合物预防和/或治疗相关疾病的方法。
微血管系统由身体中最小的血管组成。微血管(microvessel)的常见实例包括但不限于：小动脉(从动脉延伸和分支出来的小直径血管，通向毛细血管)、毛细血管(最小的血管)、后小动脉(连接小动脉和毛细血管的血管)、小静脉(使脱氧的血液从毛细血管床返回到被称为静脉的较大血管的血管)和末端小动静脉间通路(直接从毛细血管床接收血液的静脉血管，是静脉的支流)。
微血管系统的主要功能是运输物质。水和溶质由血液携带通过微血管，并通过血管壁与周围组织进行交换。这种运输功能高度依赖于微血管系统的结构和流经它的血液的生物物理行为。微血管网络的流体动力学阻力决定了给定灌注压下的总体血流量，它取决于微血管的数量、大小和排布，支配其直径的被动和主动机制，并取决于在其中流动的血液的表观黏度。
组织灌注的调节发生在微循环中。在那里，小动脉控制血液流向毛细血管。随着血管平滑肌对各种刺激的反应，小动脉收缩和舒张，改变其直径和血管紧张度。血压升高导致的血管扩张是对动脉血管壁中的肌肉收缩的基本刺激。因此，尽管全身血压变化，微循环血流仍保持不变。这种机制存在于人体的所有组织和器官中。此外，神经系统也参与了微循环的调节。交感神经系统激活较小的小动脉，包括终端。去甲肾上腺素和肾上腺素对α和β肾上腺素受体有影响。其他激素(儿茶酚胺、肾素-血管紧张素、血管加压素和心房钠尿肽)在血流中循环，并可对微循环产生影响，导致血管舒张或血管收缩。许多激素和神经肽与经典神经递质一起释放。
小动脉响应于组织中产生的代谢刺激。当组织代谢增加时，分解代谢产物积累导致血管扩张。内皮细胞开始控制肌肉紧张度和小动脉血流组织。循环中的内皮功能包括激活和灭活循环激素和其他血浆成分。还有合成和分泌血管扩张剂和血管收缩剂的物质，以根据需要修改宽度。由小动脉循环的血流的变化能够在内皮细胞中产生反应。
微血管系统损伤在各种病症中都能观察到，包括但不限于衰老过程、糖尿病、动脉硬化、慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)、门静脉闭锁(肝脏微血管发育不良)、非酒精性脂肪肝(NAFLD)、慢性肾脏疾病、小血管疾病、多囊卵巢综合症、慢性炎症、创伤性脑损伤(TBI)等。微血管系统损伤也对血脑屏障(BBB)产生负面影响。对于某些所述病症，微血管损伤在所述病症发展之前就已经存在，并且可能是导致该病症的原因或原因之一。对于一些病症，微血管损伤在病症发展过程中或之后进展。
为了诊断微血管系统损伤，要检查受影响个体的病史和家族史。微血管系统损伤的检查通常包括成像的压力测试、冠状动脉造影、正电子发射断层扫描(PET)、CT扫描或CT血管成像(CTA)扫描、MRI和内皮功能障碍测试。
微血管损伤的治疗往往取决于损伤的根本原因，无论它是由高血压、高胆固醇、肥胖、糖尿病、衰老还是脑损伤造成的。目前还没有关于预防微血管损伤的研究，对其唯一的建议是控制疾病的主要风险因素——高血压、高胆固醇和肥胖。对已经存在的微血管损伤的药物治疗包括控制可能导致心脏病发作的小血管狭窄和缓解疼痛的药物。通常开出的一些药物包括硝酸甘油、β阻滞剂、钙通道阻滞剂、他汀类药物、血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂、血管紧张素II受体阻滞剂(ARB)、雷诺嗪(Ranexa)和阿斯匹林。毋庸置疑，这些疗法中的每一种往往也伴随着不希望出现的副作用。因此，有必要开发一种既能预防又能治疗，和/或可作为当前疗法的辅助手段的安全有效的疗法。
大麻是蔷薇目、大麻科的开花植物的一个属，包括三个不同的品种，即大麻(Cannabis sativa)、印度大麻(Cannabis indica)和莠草大麻(Cannabis ruderalis)，它们原产于中亚和南亚。大麻长期以来一直被用于生产大麻纤维、种子和种子油、用于医疗目的，同时也是一种消遣性药物。从药理上讲，大麻含有483种已知的化合物，包括至少85种不同的大麻素。大麻素、萜类化合物和其他化合物由腺体毛状体分泌，腺体毛状体在雌性植物的花萼和苞片上存在最为丰富。
大麻素是一类多样化的化学化合物，它作用于细胞上的大麻素受体，抑制脑中的神经递质释放。大麻素受体属于G蛋白偶联受体超家族中的一类细胞膜受体。作为典型的G蛋白偶联受体，大麻素受体含有七个跨膜结构域。有两种已知的大麻素受体亚型，称为CB1和CB2，并有越来越多的证据表明有更多的亚型。CB1受体主要在脑(中枢神经系统)中表达，但也在肺、肝和肾中表达。CB2受体主要在免疫系统和造血细胞中表达。CB1和CB2受体的蛋白质序列约44％相似。
这些化合物包括内源性大麻素(由人类和动物在体内自然产生，如花生四烯酸乙醇胺(Anandamide)(AEA)和2-花生四烯酸甘油酯(2-Arachidonoylglycerol)(2-AG))、植物性大麻素(存在于大麻和其他一些植物中，如四氢大麻酚(THC)、大麻二酚(CBD)和大麻酚(CBN))，以及合成大麻素(通过化学方法制造：JWH-018、JWH-073、CP-47,497、JWH-200和大麻环己醇(cannabicyclohexanol))。
所有类别的植物性大麻素都来自大麻萜酚类化合物，主要区别在于该前体的环化方式。典型大麻素是通过脱羧作用(由热、光或碱性条件催化)从各自的2-羧酸(2-COOH)中得到的。植物性大麻素(来自大麻植物的那些大麻素)包括但不限于：四氢大麻酚(THC)、四氢大麻酚酸(THCA)、大麻二酚(CBD)、大麻酚(CBN)、大麻萜酚(CBG)、大麻环萜酚(CBC)、大麻环酚(CBL)、次大麻酚(CBV)、四氢次大麻酚(THCV)、次大麻二酚(CBDV)、次大麻环萜酚(CBCV)、次大麻萜酚(Cannabigerovarin，CBGV)和大麻萜酚单甲醚(CBGM)。区分大麻素的主要方法是根据其精神活性的程度。例如，CBG、CBC和CBD已知不是心理活性剂，而THC、THCA、CBN和CBDL以及其他一些大麻素则已知具有不同程度的精神活性。
最引人注目的大麻素是植物性大麻素Δ9-四氢大麻酚(THC)，它是大麻植物的主要精神活性成分。THC对CB1和CB2受体的亲和力大致相同，它具有诸如镇痛剂、精神活性剂、肌肉松弛剂、解痉剂、支气管扩张剂、神经保护剂、抗氧化剂和抗瘙痒剂等活性。
屈大麻酚是THC纯异构体的国际非专有名称(INN)，(-)-反式-Δ9-四氢大麻酚。合成的屈大麻酚在市场上被称为Marinol。在美国，Marinol属于三类药物(Schedule IIIdrug)，可通过处方获得，被认为是非麻醉品且身体或精神依赖的风险很低。Marinol已被美国食品和药物管理局(FDA)批准用于治疗艾滋病患者的厌食症，以及治疗接受化疗的患者的难治性恶心和呕吐。屈大麻酚的类似物纳比隆(nabilone)具有作为止吐剂和神经性疼痛的辅助镇痛剂的治疗用途，在加拿大市售可得，商品名为Cesamet，由ValeantPharmaceuticals生产。Cesamet也已获得FDA批准，并于2006年开始在美国销售。纳比隆是二类药物。
有关THC的毒性信息主要是基于动物研究的结果。毒性取决于给药途径和实验动物。人类静脉注射屈大麻酚的估计致死剂量为30毫克/千克。THC的不良反应主要是精神作用。已证实THC中毒会在急性期损伤认知功能，包括对计划、组织、解决问题、作出决定和控制冲动的能力的影响。一些研究表明，大麻使用者比非使用者患精神病的风险更大。此外，长期使用与载脂蛋白C-III(apoC-III)的水平升高有关。apoC-III水平升高会诱发高甘油三酯血症的发生。
大麻二酚(CBD)是一种主要的植物性大麻素，在选定的栽培品种中占植物提取物的高达40％。与四氢大麻酚(THC)相比，CBD被认为具有更广泛的医学应用范围。一种含有CBD的口服液在美国获得了孤儿药认证(orphan drug status)，用于治疗Dravet综合症，商品名为Epidiolex。CBD能够减少THC引起的认知障碍和视觉空间联想记忆的缺陷。CBD似乎还能抵消THC诱导睡眠的作用。Sativex(GW制药公司)是第一个获得全面市场批准的天然大麻植物衍生品。Sativex是一种口喷剂，用于治疗多发性硬化症(MS)引起的神经性疼痛、痉挛、膀胱过度活动和其他症状。每支喷雾剂递送的CBD与THC的比例接近1:1，其固定剂量为2.7毫克THC和2.5毫克CBD。内源性大麻素系统是一个古老的、进化保守的、无处不在的脂质信号系统，存在于所有脊椎动物中，并且似乎在整个人体中具有重要的调节功能。内源性大麻素系统已被牵涉到非常广泛的生理以及病理生理过程中，包括神经发育、免疫功能、炎症、食欲、代谢和能量平衡、心血管功能、消化、骨骼发育和骨密度、突触可塑性和学习、疼痛、生殖、精神疾病、精神运动行为、记忆、觉醒/睡眠周期，以及压力和情绪状态的调节。
该系统由大麻素1和2(CB1和CB2)受体、CB受体配体N-花生四烯酸乙醇胺(anandamide或AEA)和2-花生四烯酸甘油酯(2-AG)以及内源性大麻素合成和降解酶脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)和单酰甘油脂肪酶(MAGL)组成。AEA和2-AG被认为是大麻素信号的主要内源性介质，但也描述了其他发挥类似大麻素效应的内源性分子。这些其他分子包括2-花生四烯甘油醚、N-花生四烯酰多巴胺(NADA)、维罗达明(virodhamine)、N-高-□亚麻酰乙醇胺(HEA)和N-二十二碳四烯酰乙醇胺(DEA)。棕榈酰乙醇胺(PEA)和油酰乙醇胺(OEA)分子等似乎不与大麻素受体结合，而是与属于一类核受体/转录因子(称为过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR))的特定同工酶结合(5)。然而，这些内源性大麻素样化合物可能通过竞争性抑制FAAH，和/或通过对其他受体(如瞬时受体电位香草素(TRPV1)通道)的直接别构效应来增强花生四烯酸乙醇胺的作用。这些类型的作用通常被称为所谓的协同效应。
内源性大麻素是花生四烯酸衍生物，它们是根据细胞的需要从膜磷脂前体按需合成的。
花生四烯酸乙醇胺(N-花生四烯酸乙醇胺，AEA)是内源性大麻素系统的主要成分之一，是THC的模拟物。它的作用既可以是脑中的中枢作用，也可以是身体其他部位的外周作用，主要由中枢神经系统的CB1和外周的CB2介导。然而，由于脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)的作用，其半衰期短，对潜在的治疗用途来说是一个不利因素。
虽然有许多关于大麻治疗价值的传闻报道，但支持熏制大麻用于治疗各种疾病的安全性和有效性的临床研究有限，但数量在慢慢增加。在THC的许多治疗意义中，我们可以发现它在姑息治疗(疼痛和其他痛苦症状，以及提高生活质量)、治疗呕吐和恶心、消耗性综合症(恶病质，例如，由感染或肿瘤造成的组织损伤)、艾滋病和癌症患者的食欲不振(厌食症)和神经性厌食症，以及多发性硬化症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、脊髓损伤、癫痫、关节炎和肌肉骨骼疾病、运动障碍、青光眼、哮喘、高血压、精神障碍、阿尔茨海默病和痴呆症、炎症、胃肠系统疾病、抗肿瘤特性和动脉硬化中的潜在用途。
本公开提供使用以特定的剂量和剂量范围的大麻素来预防和/或治疗微血管损伤，从而解决由这种损伤导致的许多病症。特别是，预防和/或治疗微血管损伤可以改善创伤性脑损伤(TBI)的症状和对BBB、门静脉闭锁(肝脏微血管发育不良)或慢性炎症的损伤。
发明内容
本公开提供基于大麻素的组合物和剂型，用于预防和/或治疗微血管完整性损伤，以及与受伤微血管系统有关的病症。特别是，本公开涉及用所公开的组合物中含有Δ9-四氢大麻酚(THC)的药物组合物预防和/或治疗相关疾病的方法。
本公开部分基于出乎意料的实验结果，即某些剂型的大麻素可保护小血管免受伤害并治疗受损的微血管系统，从而维持微血管的完整性。
在一个方面，本公开提供了一种药物组合物，其包括治疗有效量的大麻素或其盐。在某些实施方案中，药物组合物包含一种以上的大麻素。
在某些实施方案中，药物组合物包含约0.01mg至约600mg的至少一种大麻素或其盐。在某些实施方案中，至少一种大麻素是Δ9-四氢大麻酚(THC)。在某些实施方案中，药物组合物包含约0.01毫克、0.05毫克、0.1毫克、0.5毫克、1毫克、2.5毫克、5毫克或10毫克THC。每种可能性都代表本公开的一个单独的实施方案。
在某些实施方案中，所述至少一种大麻素是CBD。在某些实施方案中，药物组合物包含约0.1毫克、0.5毫克、1毫克、10毫克、50毫克、100毫克、300毫克或600毫克CBD。每种可能性代表本公开的一个单独的实施方案。
在某些实施方案中，药物组合物包含约0.01至600毫克的其他大麻素或其盐。在某些实施方案中，其他大麻素包括但不限于植物性大麻素，如四氢大麻酚酸(THCA)、大麻酚(CBN)、大麻萜酚(CBG)、大麻环萜酚(CBC)、大麻环酚(CBL)、次大麻酚(CBV)、四氢次大麻酚(THCV)、次大麻二酚(CBDV)、次大麻环萜酚(CBCV)、次大麻萜酚(CBGV)和大麻萜酚单甲醚(CBGM)。在某些实施方案中，其他大麻素包括但不限于内源性大麻素，如花生四烯酸乙醇胺(AEA)和2-花生四烯酸甘油酯(2-AG)。在某些实施方案中，其他大麻素包括但不限于合成大麻素，如HU-210、HU-211、HU-308、HU-433、JWH-018、JWH-073、CP-47,497、JWH-200和大麻环己醇。每种可能性都代表本公开的一个单独的实施方案。
在某些实施方案中，基于大麻素的组合物被配制为用于全身给药。在某些实施方案中，药物组合物被配制成用于口服、阴道、直肠、口腔粘膜、鼻腔、舌下、吸入、局部、胃肠外、静脉内、肌内或皮下给药。每种可能性都代表了本公开的一个单独的实施方案。在某些实施方案中，药物组合物被配制为用于口服、局部或口腔粘膜/面颊给药。在某些实施方案中，药物组合物被配制为溶液剂或栓剂。
本公开的实施方案还提供包含上述药物组合物的剂量单位。
在另一个方面，本公开进一步提供如上所述的基于大麻素的组合物用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法。在某些实施方案中，微血管完整性损伤是由于衰老过程、糖尿病、动脉硬化、慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)、门静脉闭锁(肝脏微血管发育不良)、非酒精性脂肪肝(NAFLD)、慢性肾脏疾病、小血管疾病、多囊卵巢综合症、慢性炎症、创伤性脑损伤(TBI)等。在某些实施方案中，基于大麻素的组合物用于制造预防和/或治疗需要的受试者的微血管完整性损伤的药物。
在另一个方面，本公开还提供了一种预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法，其包括向需要的受试者施用治疗有效量的至少一种大麻素或其盐。
在某些实施方案中，治疗有效量的大麻素或其盐为约0.01毫克至约600毫克。在某些实施方案中，所述至少一种大麻素是THC。在某些实施方案中，所述THC的量约为0.01毫克、0.05毫克、0.1毫克、0.5毫克、1毫克、2.5毫克、5毫克或10毫克THC。在某些实施方案中，所述至少一种大麻素是CBD。在某些实施方案中，所述CBD的量约为0.1毫克、0.5毫克、1毫克、10毫克、50毫克、100毫克、300毫克或600毫克CBD。每种可能性代表本公开的一个单独实施方案。
在某些实施方案中，大麻素被配制成用于全身给药。在某些实施方案中，大麻素被配制成用于口服、阴道、直肠、口腔粘膜、鼻腔、舌下、吸入、局部、胃肠外、静脉内、肌内或皮下给药。每种可能性都代表本公开的一个单独的实施方案。在某些实施方案中，大麻素被配制为用于口服、局部或口腔粘膜/面颊给药。在某些实施方案中，大麻素被配制为溶液剂或栓剂。
在某些实施方案中，上述方法中所述的大麻素被口服给药。在某些实施方案中，大麻素每天给药一次。在某些实施方案中，大麻素每天给药一次以上。
本公开的其他目标、特征和优点将从以下描述中变得更为明确。
附图说明
为了提供对本公开的非限制性实施方案的理解，参考所附的附图，这些附图不一定按比例绘制，其中参考数字指的是本公开的示例性实施方案的组分。附图仅是示例性的，不应被解释为限制性的。
图1A是使用造影剂增强(contrast-enhanced)MRI通过CE-MRI(T1序列)计算的通透性图对血脑屏障通透性的分析。
图1B是使用造影剂增强MRI对血脑屏障通透性的分析，显示注射非渗透性Gd基对比剂后对比增强斜率的累积分布函数。注意暴露于TBI的动物中分布的右移，表明有较大数量的体素为阳性体素(即更高的通透性)。病理性的BBB被定义为斜率值高于对照组的第95百分位。
图1C是使用造影剂增强MRI对血脑屏障通透性的分析，显示在敏感和有复原力的大鼠的TBI之后，具有病理性体素的脑容量百分比(％)增加。
图1D是使用造影剂增强MRI对血脑屏障通透性的分析，显示在THC处理过的大鼠和对照组大鼠的TBI之后，具有病理性体素的脑容量百分比(％)增加。在重复THC治疗组中观察到中等程度的下降(不显著)。请注意，重复THC治疗的动物与对照组相比没有差异。*p<0.05；**p<0.01；*p<0.001。
图2A显示，通过开窗法，在重复THC处理的动物中，血脑屏障通透性降低。开窗法允许直接观察微血管系统的解剖结构和功能，同时记录脑活动。
图2B显示，通过允许渗透性测量的荧光血管成像法，在重复THC处理的动物中血脑屏障通透性降低。
图2C显示，通过允许渗透性测量的荧光血管成像法，在重复THC处理的动物中血脑屏障通透性降低。
图3A显示了使用阵发性慢波事件(PSWE)作为脑功能障碍的新型生物标志物，其中PSWE被检测为独特的、短暂的EEG事件，这表征了功能失调的大脑皮层。PSWE被定义为至少连续5秒的EEG减慢(中位频率<6Hz)。
图3B显示了使用阵发性慢波事件(PSWE)作为脑功能障碍的新型生物标志物，其中PSWE的数量在对照组和治疗组大鼠的ECoG记录中被计数。请注意，生理盐水和THC1处理的大鼠中的PSWE数量明显增加，而重复施用THC的结果是降低发生率。***p<0.001，**p<0.01。
具体实施方案
本公开还提供了基于大麻素的组合物和剂型在治疗与微血管完整性损伤有关的疾病、病症和病况中的使用方法。
所公开的实施方案的基于大麻素的组合物与目前的治疗方法相比提供了改进的治疗实体，表现出预防和治疗活性，同时一直没有发生通常与处理微血管损伤的普通药物相关的严重不良事件。本文所述的实施方案是基于这样的发现，即大麻素在确定的剂量下起到保护微血管系统免受损伤和/或修复微血管损伤的作用。
本公开在一个方面提供了基于大麻素的组合物，其包含至少一种大麻素或其盐。
如本文所用，“药物组合物”是指本文所述的活性剂与其他化学成分如生理上合适的载体和赋形剂的制剂。药物组合物的目的是为了便于向生物体施用化合物。如本文所用，短语“药学上可接受的载体”是指对生物体无明显刺激且不影响所施用化合物的生物活性和特性的载体、赋形剂或稀释剂。佐剂包括在这些短语之下。
如本文所用，术语“赋形剂”是指添加到药物组合物中以进一步促进活性成分施用的惰性物质。赋形剂的实例，但不限于此，包括碳酸钙、磷酸钙、各种糖类和各类淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇。
如本文所用，术语“衍生物”是指其核心结构与参考化合物相同或近似，但具有化学或物理修饰(例如不同的或另外的侧基)的化合物。
如本文所用，术语“载体”是指与化合物一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介物。这种药物载体可以是无菌液体，如水和油。水或盐水溶液以及葡萄糖和甘油水溶液优选被用作载体，特别是用于注射液。合适的药物载体在E.W.Martin的“Remington'sPharmaceutical Sciences”第18版中有描述。
如本文所用，短语“药学上可接受的”是指在生理上可耐受，并且在给人施用时通常不会产生过敏或类似毒性的分子实体和组合物。优选地，特别是当制剂用于人时，术语“药学上可接受的”可指经管理机构(例如，美国食品和药物管理局)批准或被列入用于动物的公认药典(例如，美国药典)。
如本文所用，术语“大麻素”一般是指作用于细胞中的大麻素受体、改变脑中的神经递质释放的一类不同的化学化合物之一。这些化合物包括内源性大麻素(由动物在体内自然产生)、植物性大麻素(存在于大麻和其他一些植物中)和合成大麻素(人工制造，包括各种不同的化学类别：在结构上与THC有关的经典大麻素，非经典大麻素(仿大麻素(cannabimimetics))，包括氨基烷基吲哚、1,5-二芳基吡唑、喹啉和芳基磺酰胺以及与内源性大麻素有关的二十烷酸)。
如本文所用，术语“盐”是指活性成分的任何形式，其中活性成分具有离子形式并与反离子(阳离子或阴离子)耦合或处于溶液中。这也包括活性成分与其他分子和离子的复合物，特别是通过离子相互作用而复合的复合物。
本公开在另一个方面还提供了包含上述任何一种药物组合物或由上述任何一种药物组合物组成的剂量单位。药物的配制和给药技术在本领域是众所周知的，可以在“Remington's Pharmaceutical Sciences”，Mack Publishing Co.，Easton,Pa.中找到。
本公开的组合物可通过本领域众所周知的方法制造，例如，通过常规的混合、溶解、制粒、制糖衣、研磨、乳化、包封、包埋或冻干方法。
根据本公开使用的组合物可使用一种或多种生理学上可接受的载体以常规方式配制，所述载体包括赋形剂和辅助剂，其有利于将活性成分加工成可用于制药的制剂。适当的制剂取决于所选择的给药途径。
对于局部施用，组合物的活性成分可以配制成膏状物、软膏剂、溶液剂、药物贴片、喷剂、洗剂、搽剂、涂膜剂、固体制剂如硅片等。
如本文使用的，术语“局部”是指将公开的组合物直接施用于受试者的皮肤(人类或非人类的皮肤)的至少一部分/区域，以达到所需效果，例如，治疗本文所述的皮肤病。
对于注射，药物组合物的活性成分可以配制在水溶液中，优选在生理上相容的缓冲液中，如汉克溶液、林格溶液或生理盐缓冲液。对于经粘膜给药，配方中使用适合于待渗透的屏障的渗透剂。这样的渗透剂在本领域中通常是已知的。
术语“粘膜给药”涉及向粘膜，如口腔或唇粘膜或呼吸道粘膜(如鼻粘膜)递送组合物。
对于口服给药，可以通过将活性化合物与本领域中众所周知的可接受的载体相结合来容易地配制该组合物。这样的载体使药物组合物可以配制成片剂、丸剂、糖衣丸、胶囊剂、液体、凝胶、糖浆剂、膏剂、悬浮液等，用于患者的口服摄入。用于口服使用的药理学制剂可以使用固体赋形剂来制备，在根据需要添加合适的助剂之后，任选地研磨所得混合物，并且加工颗粒的混合物，以获得片剂或糖衣丸芯。特别地，合适的赋形剂为填充剂，例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；纤维素制剂，例如玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素(HPMC)和羧甲基纤维素钠(CMC)；和/或生理学上可接受的聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可加入崩解剂，例如交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐，例如海藻酸钠。
术语“口服给药”是指可通过吞咽、咀嚼、吸吮或饮用口服剂型来给予活性剂的任何给药方法。固体剂型的实例包括基本上不在口中或口腔内释放药物的常规片剂、多层片剂、胶囊剂、囊片(caplet)等。
提供具有合适的包衣的糖衣丸芯。为此，可使用浓缩的糖溶液，其可任选地含有阿拉伯树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、CARBOPOL凝胶、聚乙二醇、二氧化钛、漆溶液(lacquersolution)和合适的有机溶剂或溶剂混合物。可将染料或颜料加入到片剂或糖衣丸包衣中用于鉴定或表征活性化合物剂量的不同结合。
可口服使用的药物组合物包括由明胶和增塑剂如甘油或山梨糖醇制成的硬或软密封胶囊。胶囊可含有与填料如乳糖、粘合剂如淀粉、润滑剂如滑石或硬脂酸镁，以及任选的稳定剂混合的活性成分。在软胶囊中，活性成分可溶解或悬浮在合适的液体，例如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇中。此外，可加入稳定剂。用于口服给药的所有制剂应该以适合所选给药途径的剂量。
对于颊和舌下给药，组合物可采用以常规方式配制或在粘合剂载体中配制的片剂或锭剂的形式。
本文所述的组合物可配制用于胃肠外给药，例如，通过栓塞注射或连续输液。注射用制剂可以以单位剂量形式呈现，例如以安瓿或多剂量容器呈现，具有任选添加的防腐剂。该组合物可以是油性或水性媒介物中的悬浮液、溶液或乳剂，并且可以包含如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂的制剂。
用于胃肠外给药的药物组合物包括水溶性形式的活性制剂的水溶液。此外，可将活性成分的悬浮液制备为适当的油性或水基注射悬浮液。合适的亲脂性溶剂或媒介物包括脂肪油，如芝麻油，或合成脂肪酸酯，如油酸乙酯、甘油三酯或脂质体。水性注射悬浮液可含有增加悬浮液粘度的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖。任选地，悬浮液还可包含适当的稳定剂或增加活性成分溶解度的试剂，以允许制备高浓度的溶液。
另外，活性成分可以是粉末形式的，用于在使用前用合适的媒介物，例如无菌、无热原、水基溶液构成。
本发明的组合物也可以使用原位形成的储库(ISFD)进行递送。原位形成的储库的实例包括半固体聚合物，其可作为熔化物注入，并在冷却到体温时形成储库。对这种ISFD的要求包括25-658℃范围内的低熔化温度或玻璃转化温度以及0.05-0.8dl/g范围内的内在粘度。在0.05dl/g的粘度阈值以下，无法观察到延迟扩散，而在0.8dl/g以上，ISFD不再可用针头注射。在高于378℃但低于658℃的温度下，这些聚合物表现得像粘性流体，该流体凝固成高粘性的储库。药物通过混合被纳入熔融的聚合物中，而无需应用溶剂。热塑性浆料(TP)可用于生成皮下药物库，从所述药物库中扩散到全身循环中。
原位交联聚合物系统利用交联聚合物网络来控制大分子在较长时期内的扩散。使用原位交联植入物需要在交联反应过程中保护生物活性物质。这可以通过封装在快速降解的明胶微粒子中来实现。
ISFD也可以基于聚合物沉淀。将不溶于水且可生物降解的聚合物溶解在生物相容的有机溶剂中，向其中加入药物，混合后形成溶液或悬浮液。当该制剂被注射到体内时，水可混溶的有机溶剂消散，水渗透到有机相中。这导致了聚合物的相分离和沉淀，在注射部位形成了一个储库。这种系统的一个实例是ATRIGELE。
热诱导胶凝系统也可作为ISFD使用。众多聚合物显示出溶解度随环境温度的函数而突变。热敏聚合物的原型是聚(N-异丙基丙烯酰胺)，聚-NIPAAM，它表现出相当尖锐的低临界溶液温度。
热塑性糊剂，如由AP Pharma开发的新一代聚(原酸酯)也可用于储库药物递送。此类糊剂包括在室温下为半固体的聚合物，因此不再需要为药物纳入和注射而加热。可以通过不大于22号的针头进行注射。药物可以呈干燥且因此稳定的状态混入系统。注射时的皱缩或肿胀被认为是微不足道的，因此，最初的药物爆发预计比其他类型的ISFD要低。通过表面侵蚀的自催化降解提供了一个额外的优势。
本公开的组合物也可以从医疗设备中递送，例如矫形外科植入物、隐形眼镜、微针阵列、贴片等。
缓释(SR)、延长释放(ER、XR或XL)、延时释放或定时释放、控释(CR)或连续释放(CR)丸剂是配制成缓慢溶解并随时间释放药物的片剂或胶囊剂。配置缓释片剂使得将活性成分包埋入不溶性物质(如丙烯酸树脂、多糖等)的基质中，使溶解的药物通过基质中的孔扩散出来。在一些SR制剂中，基质会物理性地膨胀形成凝胶，因此药物首先必须溶解在基质中，然后通过外表面排出。控释和缓释的区别在于控释是完全零序释放。也就是说，药物随着时间的推移而释放，与浓度无关。另一方面，缓释意味着药物在一定时间内缓慢释放。它可能是也可能不是控释。
适合在本公开范围内使用的药物组合物包括组合物，其中以达到预期目的的有效量包含活性成分。更具体地说，“治疗有效量”是指有效预防、缓解或改善疾病或病症的症状或副作用，或延长被治疗受试者的生存期的活性成分的量。治疗有效量的确定完全在本领域技术人员的能力范围内，特别是考虑到本文提供的详细公开内容。
对于在本公开的方法中使用的任何制剂，剂量或治疗有效量可从体外和细胞培养试验中初步估计。例如，可以在动物模型中配制剂量以达到所需的浓度或滴度。此类信息可用于更准确地确定人的有用剂量。
所述组合物的每种化合物的剂量取决于若干因素，包括：给药方法、待治疗的疾病、疾病的严重程度、是要治疗还是要预防疾病以及待治疗的人的年龄、体重和健康。此外，关于特定患者的药物基因组学(基因型对治疗的药代动力学、药效学或疗效概况的影响)信息可能会影响所用剂量。
所述组合物内的大麻素，例如THC或CBD，在口服时的剂量可以是每天每50公斤受试者0.01毫克至约600毫克大麻素，在每24小时600毫克或12毫克/公斤的最大单剂量内。
可能不需要每天连续给药；治疗方案可能需要几个周期，在此期间不给药，或者在急性疾病恶化期间根据需要提供治疗。
在另一个方面，本公开还提供上述基于大麻素的组合物，或上述的剂量单位，用于预防和/或治疗由微血管损伤或损害导致的病症的方法。
微血管损伤被定义为体内较细血管(包括毛细血管)的损伤。微血管完整性损伤的来源各不相同，可由衰老过程、糖尿病、动脉硬化、慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)、门静脉闭锁(肝脏微血管发育不良)、非酒精性脂肪肝(NAFLD)、慢性肾脏疾病、小血管疾病、多囊卵巢综合症、慢性炎症、创伤性脑损伤(TBI)等引起，而不限于此。例如，糖尿病的微血管并发症如神经病变可导致感觉丧失和足部溃疡的发生，而创伤性脑损伤期间的微血管完整性丧失可导致脑缺氧、脑灌注压降低和缺血。
本文使用的术语“预防”，包括但不限于以下任何一个或多个：防止发生或继续、防止、避免、阻止、停止、抵制、阻碍、抑制所公开的实施方案的疾病或病症的一个或多个症状或副作用。
本文使用的术语“治疗”包括但不限于以下任何一种或多种：消除、改善、抑制、减弱、阻止、清除、减少、延迟、停止、缓解或防止所公开的实施方案的疾病或病症的一个或多个症状或副作用。
在另一个方面，本公开还提供上述药物组合物或上述剂量单位，用于预防和/或治疗微血管损伤的方法。
在另一个方面，本公开还提供了一种预防和/或治疗有需要的人类受试者的微血管损伤的方法，该方法包括以下步骤：向受试者施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含至少一种大麻素或其盐，从而预防和/或治疗微血管损伤。
可能需要也可能不需要增加剂量；治疗方案可能需要减少药物剂量。
本文所述的活性成分的毒性和疗效可通过标准制药的体外细胞培养或实验动物来确定。从这些体外和细胞培养试验以及动物研究中获得的数据可用于配制用于人类的剂量范围。取决于所采用的剂型和所利用的给药途径，剂量可能不同。确切的配方、给药途径和剂量可由医生个人根据病人的情况来选择。(Fingl,1975)
根据待治疗的病症的严重性和反应性，给药可以是单次或多次给药，治疗过程持续数天至数周，或直到倾向于治愈或实现疾病状态的减弱。
合适的给药途径例如可以包括口服、直肠、阴道、局部、鼻腔、经鼻、经粘膜、肠内或胃肠外给药，包括肌内注射、皮下注射和髓内注射，以及鞘内注射、直接脑室内注射、静脉内注射、腹膜内注射、鼻内注射、眼内注射或通过吸入或吸出(aspiration)(抽吸(smoking))。或者，药物组合物可以局部给药，而不是以全身方式给药，例如，通过将药物组合物直接注射到患者的组织区域。
在某些实施方案中，将大麻素口服给药。在某些实施方案中，大麻素通过口服粘膜途径给药。在某些实施方案中，大麻素通过外用途径给药。在某些实施方案中，大麻素每日给药。在某些实施方案中。
如果需要，本公开的组合物可在包装或分配器装置中呈现，例如FDA批准的试剂盒，其可包含一个或多个含有活性成分的单位剂量形式。例如，该包装可包括金属或塑料箔，如塑料定型包装。该包装或分配器装置可随附给药说明。该包装或分配器装置还可随附一份由监管药品生产、使用或销售的政府机构规定的格式的通知，该通知反映了该机构对人或兽医用药的组合物形式的批准。例如，这种通知可以包括由美国食品和药物管理局批准的用于处方药的标签或批准的产品插页。也可制备包括在药学上可接受的载体中配制的本发明的制剂的组合物、将其放置于适当的容器中，并标明用于治疗指定的炎症性疾病，如上文进一步详述。
对具体实施方案的上述描述将充分揭示组合物和方法的一般性质，以至于其他人可以通过应用现有知识，在不进行不适当的实验且不偏离通用概念的情况下，很容易地修改和/或改造为各种应用的此类具体实施方案，因此，此类改造和修改应该并且旨在被理解为公开实施方案的含义和等效范围内。应当理解的是，本文采用的短语或术语是为了描述而不是限制。
提出以下实施例是为了更充分地说明本公开的一些实施方案。然而，它们绝不应被解释为限制本公开的广泛范围。本领域技术人员可以很容易地设计出本文所公开的原理的许多变化和修改，而不会偏离本公开的范围。
本公开的非限制性实施方案将在下文中进行更充分地描述。然而，所公开的主题可以以许多不同的形式体现出来，并且不应该被理解为限于本文所阐述的实施方案。相反，提供这些实施方案是为了使本公开内容彻底和完整，并将向本领域技术人员充分传达本公开的范围。在本说明书和权利要求书中，除非上下文有明确规定，否则单数形式的“一个(a)”、“一个(an)”和“所述(the)”包括复数指称。
实施例
实施例1：评估选定剂量的THC在大鼠模型中作为轻度创伤性脑损伤和脑微血管系统完整性的治疗药物的效果。
复杂的轻度创伤性脑损伤(mTBI)是常见的，并可能伴随持续的神经系统后遗症。当重复发生时，轻度TBI会增加神经退行性疾病甚至死亡的风险。本研究的目的是测试超低剂量THC在轻度重复性脑损伤与神经系统并发症模型中的作用。
我们在8周大的雄性Sprague-Dawley大鼠中诱发了mTBI。单次撞击与短暂的神经功能障碍有关，撞击后24小时完全恢复，常规MRI检查中没有明显的脑内损伤。反复撞击后，60％的动物表现出明显的神经系统恶化，包括瘫痪、痫性发作和体重减轻。动物被随机分为三个治疗组：单剂量THC(0.002毫克/千克)，在每次TBI(每天最多5次撞击)后重复剂量，以及一个媒介物组，注射单剂量或重复剂量的媒介物溶液。所有的实验和数据分析都是由对治疗无识别能力的研究人员无分别地进行的。
对于每个实验组(17-18只大鼠)，我们分析了神经系统的评分和体重下降。在动物的子组中，进行了MRI的结构解剖。进行对比增强(CE)MRI和活体显微镜检查，以进行脉管完整性(BBB通透性)的检查。
所有的动物程序都得到了达尔豪斯大学实验动物委员会的批准。动物在12:12的反向光照:黑暗周期中被双层饲养，食物和水都可自由取用。8周大的雄性Sprague-Dawley大鼠(Charles River,Quebec,Canada-strain 001)按照加拿大动物护理委员会的实验动物护理和使用指南进行护理。
方法
采用闭端、高度为1米、冲击重量为500克的落重法(weight drop)模型，以产生轻度脑损伤。所有动物在每次撞击前30分钟进行行为测试。在每次撞击之前，对所有rmTBI动物进行2L/min的O2和3.5％的异氟醚注射，持续3分钟(或直到没有踏板反射)。除非神经系统恶化(见下文)，否则每天对动物进行一次撞击，连续五天，总共最多5次撞击。每次撞击后的恢复情况都被拍摄下来，用于离线分析创伤后的痫性发作情况、获得完全恢复的时间等。对照组，未受创伤的动物，每天用2L/min的O2和3.5％的异氟醚进行类似的治疗(3分钟，或直到没有踏板反射)，但没有受到冲击。
治疗阶段：创伤后10分钟，对所有动物进行静脉注射，包括：第一次撞击后进行一次THC处理，注射一次媒介物溶液，重复注射THC(每次撞击后注射)，或重复注射媒介物溶液。THC注射液是在1:1:18的乙醇:克列莫佛(cremaphor):生理盐水的媒介物溶液中制备的，剂量为0.002毫克/千克。所使用的注射量为1mL/kg。
皮层脑电图记录：在第一次撞击3周后按照描述(Bar-Klein，2017)植入电极和无线发射器。简而言之，在立体定位架和0.8-2％异氟醚麻醉下，暴露头骨并为螺钉插入钻孔(每侧距离喙部0.5毫米或距离尾部3.5毫米且距离侧面1毫米(4个螺钉，每半球2个)。一个无线发射器(Data Science International,Saint Paul,MN,US)被放置在背侧的皮下口袋中，其导线被连接到颅骨螺钉上。连接处用骨接合剂隔离和固定，使每个半球都有一个ECoG通道。连续的双通道ECoG(采样率，1000赫兹)从笼子里自由移动的动物身上无线记录，为期2周。
活体显微镜检查：为了直接观察皮层微血管系统，按照以前的描述，使用了开窗法(Prager，2010；Schoknecht，2016)。简而言之，在第一次受伤后5-8天，用氯胺酮(100毫克/毫升，0.08毫升/100克)和赛拉嗪(20毫克/毫升，0.06毫升/100克)的混合物对大鼠进行深度麻醉。尾部静脉被插管，动物被置于立体定位架中。体温保持在37.0±0.5℃下(RWD LifeScience CO,LTD)，并通过鼻管提供富氧空气(99.5％)。在右半球的运动-躯体感觉皮层上钻出一个开颅骨窗(距离囟门：尾部4毫米，额部2毫米，外侧5毫米)，并小心地取出硬膜。
在骨窗周围建立一个骨接合剂环，用人工脑脊液(aCSF，pH7.4)持续灌注皮层，所述人工脑脊液含有(单位：mM)：129NaCl、21NaHCO3、1.25NaH2PO4、1.8MgSO4、1.6CaCl2、3KCl和10葡萄糖。通过注射BBB非渗透性染料NaFlu(MW＝376Da，诺华，1mg/ml，分别在生理盐水中，Ex/Em，470/525nm)进行荧光血管成像，以定量评估BBB的完整性。使用EMCCD相机从脑皮层的表面获取图像(1530帧，5Hz)。为了进行量化，对图像进行了预处理(图像大小调整和登记)，并将其分割成动脉、静脉和血管外部分。血管外部分的曲线下的平均面积被用作衡量BBB通透性的指标。
磁共振成像：扫描方案和分析如报告所述(Bar-Klein等人，2017；Tagge等人，2017)。简而言之，在rmTBI方案后的1周和1个月，使用3特斯拉安捷伦系统在异氟烷麻醉(1-2％)和恒定氧流量(99％，11/h)下进行动态造影剂增强MRI(DCE-MRI)。在成像过程中，使用呼吸监测器连续监测呼吸。扫描方案包括：(i)标准T2-加权快速自旋回波序列(重复时间：2500毫秒；回波时间：64毫秒；回波序列长度为16，回波间隔为8毫秒；46次平均数；128×128数据矩阵，产生0.297毫米的面内分辨率和1毫米的切片厚度；采集时间：15.3分钟)；在注射钆之前获得(ii)双平衡稳态自由进动(bSSFP)3D T1-加权扫描(重复时间：8毫秒；回波时间：4毫秒；4个频率，10秒段延迟；176x160x146的数据矩阵，导致0.25毫米的平面分辨率和0.3毫米的第二相位维度；采集时间：13.1分钟)，一次是在注射钆基示踪剂(莫迪司(multihance)；钆贝酸二葡甲胺(gadobenate dimeglumine),IV,～211.6mg/大鼠)之前，一次是在注射之后约25分钟进行；(iii)进行了10次横向T1加权梯度回波经典扫描(重复时间：6.03ms；回波时间：2.98ms；翻转角：20o；20次平均值；108×108数据矩阵，产生0.352毫米的面内分辨率和1.2毫米的切片厚度；采集时间：3分钟)，其中一次是在注射莫迪司(钆贝酸二葡甲胺，IV，～211.6mg/大鼠)之前，另八次则是在注射之后进行。最后一次横向T1加权扫描是在作为最后时间点的注射后约40分钟获得的。分析是使用内部的Matlab脚本进行的。预处理包括登记、提取脑容量和创建脑屏蔽对象。为了将BBB的完整性可视化(以斜率图像表示)，我们使用了线性动态方法，对连续8次对比后T1扫描的动态扫描强度拟合出一条线性曲线。也就是说，信号s(t)被拟合为一条线性曲线，即：s(t)＝A H t+B，其中斜率(A)是造影剂从脑中洗入或洗出的速度。此外，为了对BBB功能障碍进行定量比较，“病理性”体素阈值被设定为任何斜率值超过无撞击、麻醉对照动物(n＝6)的95％百分位斜率值。
结果
THC对微血管完整性的影响：脑部磁共振成像(MRI)在第一次受伤后一周和一个月进行。正如旨在反映轻度TBI的模型所预期的那样，结构性MRI显示没有解剖学上的病变。然而，与以前在脑震荡足球运动员中的发现一致(Weissberg等人，JAMA Neurology，2015)，造影剂增强MRI显示造影剂的脑积累，表明血脑屏障(BBB)的泄漏。我们计算了代表最大正常脑通透性的阈值，即在健康非损伤对照大鼠95％的脑容量中观察到的阈值。我们接下来计算了每个脑中渗透性高于阈值的脑容量的百分比，称为具有“病理性BBB”的脑。通透率值的累积分布函数显示受伤动物向右移动(图1)，表明创伤动物的通透率值较高，特别是在敏感组。与对照组相比，受伤大鼠脑容量中存在BBB功能障碍的百分比明显较高。每天用THC治疗的动物，显示出具有受损BBB的脑容量适度减少。
从mTBI暴露的动物(n＝30)绘制所有测量的神经系统评分的分布图，显示第1天的数据有明显的单一分布。相比之下，在第4天(在3次重复撞击之后)，可以看到明显的双峰分布。因此，我们认为在随访期间任何一天的神经学(DUCS)评分<6分的大鼠为“敏感”大鼠，而始终评分>＝6分的动物为“有复原力”。
活体显微镜检查：为了证实MRI结果表明THC对微血管完整性有保护作用，我们在第一次受伤后用开窗法的活体显微镜检查直接观察小皮层血管6-8天。如我们以前的报告(Prager等人，2010年；Schoknecht等人，2016年；Vazana等人，2016年；见图2)，在外围注射荧光剂(又称荧光血管成像)后测量BBB的通透性。与我们的MRI数据一致，与注射媒介物的对照组相比，重复THC治疗的动物的皮质微血管通透性较低，这表明微血管完整性得到了保护。
THC对脑损伤的EEG生物标志物的影响：损伤后3-4周记录皮层脑电图(ECoG)(见方法)。对以下脑损伤的结果指标进行定量、客观和无分别地评估：“阵发性慢波事件”(PSWE)：这些是短暂的、阵发性的脑皮层减速，最近被证明是受伤后的特征，可能是BBB被剥夺的脑皮层。该算法量化了每个记录中的事件数量(中值频率下降<5赫兹持续至少6秒的时间窗口)。从图3中可以看出，虽然对照组动物显示出很少的事件，但TBI暴露的大鼠显示出大量的PSWE/天。有趣的是，与上述的MRI和成像数据一致，暴露于THC反复治疗的大鼠，其PSWE的数量有轻微的减少，且差异较大(图3)。
总结
为检测自发痫性发作，进行了皮层脑电图记录。每天注射THC将神经系统并发症的风险从60％降低到35％。来自CE-MRI以及活体显微镜检查的数据表明，用THC反复治疗对创伤引起的BBB破裂有轻微的保护和治疗作用。
实施例2：评估THC和CBD对大鼠增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)模型中视网膜、脉络膜和外脉络膜的血流变化的影响。
糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病最常见的并发症之一，是西方国家劳动年龄段人群失明的主要原因。DR的一个主要病理变化是微血管并发症，如无灌注血管、微动脉瘤、点/斑点出血、棉絮状斑、静脉串珠样改变、血管袢、血管渗漏和新生血管。
本研究的目的是评估THC和/或CBD在治疗链脲霉素(STZ)诱导的大鼠模型中DR发展所产生的微血管损伤的效果。
研究变量和终点：每天测量一次死亡率和发病率。每天进行临床观察，特别注意被注射的受试者的跛行、感染或水肿的迹象。在整个研究过程中进行体重测量，特别是在到达时、研究开始前以及此后研究终止时每周进行一次体重测量。
本研究的原则是基于注射STZ诱导胰腺发生不可逆变化导致糖尿病发展的知识。使用体重为150-220克的雄性Wistar大鼠。静脉注射STZ(60mg/kg)。注射六到八小时后，血清胰岛素值下降达4倍，在持续的高血糖之后，出现了低血糖阶段。糖尿病症状的严重程度和发病情况取决于STZ的剂量。在60mg/kg剂量的静脉注射后，24-48小时后已经出现症状，高血糖高达800mg％，葡萄糖尿症和酮血症。
组织学上可以看到β细胞的脱颗粒现象。10-14天后，达到稳定状态，可以使用动物进行药理试验。
动物处理：动物处理是根据美国国家卫生研究院(NIH)和实验动物护理评估和认证协会(AAALAC)的指导方针以及Pharmaseed的SOP进行的。动物被安置在42.5x26.5x18.5厘米的独立通风笼(IVC)中(最多3只大鼠/笼)，不锈钢顶栅便于塑料瓶装的颗粒状食物和饮用水；床上用品：用于评估小儿麻痹症的独立纸质床上用品。垫料与笼子一起每天更换一次。动物自由采食商业啮齿动物食物(Teklad Certified Global 18％ Protein Diet，Harlan cat#2018SC)。动物可以自由获取消毒和酸化的饮用水(pH值在2.5和3.5之间)，这些水来自市政供应，并根据Pharmaseed的SOP No.214：“水系统”进行处理。
研究设计：大鼠在接收当天被随机分配到笼子里。在第0天进行分配并随机分配到相关组别。动物被分配到七个治疗组，如下所示：
-OM对照组(原始)
-1M对照组(注射STZ，非糖尿病患者)
-2M对照组(注射STZ，糖尿病患者(DM))
-3M DM THC处理0.002毫克/公斤
-4M DM THC处理0.02mg/kg
-5M DM CBD处理0.02mg/kg
-6M DM CBD处理0.2mg/kg
注射STZ后，每天监测动物的血糖水平(BG)、多尿症和生命体征。不发生糖尿病的动物(BG>250)被分配到1M组。糖尿病发生后五天，开始用按照上文所列的THC或CBD治疗动物，再持续五天。
糖尿病发生后五天，开始用按照上文所列的THC或CBD治疗动物，再持续五天。
每天进行一次发病率和死亡率检查。在试验期间将被人道地杀死的动物，在解释试验结果时被认为是在试验期间死亡的动物。如果在研究预定终止前死亡，将尽可能在接近死亡时间的情况下进行大体病理学评估。将尽可能精确地记录死亡时间。
每天观察动物的毒性/不良症状，直到研究终止。根据Pharmaseed的SOP No.010“实验动物称重”，在到达时、注射STZ前、注射STZ后两天，以及此后每周一次记录体重。
在注射STZ后2、3个月，用戊巴比妥钠(40mg/kg，i.p.)麻醉大鼠，从腹主动脉取血样，并立即摘除眼睛。
视网膜免疫荧光染色：将视网膜用4％多聚甲醛溶液在4℃下温育过夜，然后用阻断缓冲液(5％BSA，0.5％Triton X-100在PBS中)在室温下阻断1-3h，然后用CD31抗体在4℃下温育1天或2天，然后用洗涤缓冲液(0.5％Triton X-100在PBS中)每20min清洗一次。洗涤6次后，将视网膜与FITC-结合的抗大鼠IgG抗体温育2小时。再洗涤6次后，将视网膜放在玻片上，装入明胶，用盖玻片覆盖，并在荧光显微镜下拍照。血管的数量是按照描述的方法计算的(Huang CX 2006)。首先，在图片的中央画两条线，构成一个十字。然后，计算穿过这两条线的血管数量。
组织学评估：从正常大鼠和糖尿病大鼠中分离出视网膜组织，然后用4％多聚甲醛溶液固定。随后对样品进行切片(5微摩尔/升)，用苏木精和伊红染色并在显微镜下检查。

Claims (34)

1.一种预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法，其包括向有需要的受试者施用包含一种或多种大麻素的组合物，从而预防和/或治疗微血管完整性损伤。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述微血管完整性损伤是由于衰老过程、糖尿病、动脉硬化、慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)、门静脉闭锁(肝脏微血管发育不良)、非酒精性脂肪肝(NAFLD)、慢性肾脏疾病、小血管疾病、多囊卵巢综合症、慢性炎症或创伤性脑损伤(TBI)。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述大麻素以约0.01毫克至约600毫克的剂量范围施用。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述大麻素通过口服、阴道、直肠、口腔粘膜、鼻腔、舌下、吸入、局部、胃肠外、静脉内、肌内或皮下给药途径施用。
5.根据权利要求1至4所述的方法，其中所述一种或多种大麻素是四氢大麻酚(THC)、四氢大麻酚酸(THeA)、大麻二酚(CBO)、大麻酚(CBN)、大麻萜酚(CBG)、大麻环萜酚(CBC)、大麻环酚(CBL)、次大麻酚(CBV)、四氢次大麻酚(THCV)、次大麻二酚(CBDV)、次大麻环萜酚(CBCV)、次大麻萜酚(CBaV)和大麻萜酚单甲醚(CBGM)、花生四烯酸乙醇胺(AEA)和2-花生四烯酸甘油酯(2-AG)、HU-210、HU-211、HU-308、HU-433、JWH-018、JWH-073、CP-47、497、JWH-200、大麻环己醇或其任何组合。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述一种或多种大麻素来自属于大麻科的植物的部分。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述植物是大麻、印度大麻或莠草大麻，或其麻类品种。
8.根据权利要求5所述的方法，其中所述大麻素是THC。
9.根据权利要求8所述的方法，其中THC的服用剂量为约0.001毫克至约0.5毫克。
10.根据权利要求8所述的方法，其中THC的服用剂量为约0.5毫克至约2.5毫克。
11.根据权利要求8所述的方法，其中THC的服用剂量为约2.5毫克至约10毫克。
12.根据权利要求5所述的方法，其中所述大麻素是CBD。
13.根据权利要求12所述的方法，其中CBD的服用剂量为约0.1毫克至约10毫克。
14.根据权利要求12所述的方法，其中CBD的服用剂量为约10毫克至约100毫克。
15.根据权利要求12所述的方法，其中CBD的服用剂量为约100毫克至约600毫克。
16.根据权利要求5所述的方法，其中所述大麻素是含有所述大麻素的植物提取物。
17.根据权利要求1至16所述的方法，其中所述受试者为人类。
18.一种用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，所述组合物包含一种或多种大麻素，所述方法包括向需要的受试者施用所述组合物，从而预防和/或治疗微血管完整性损伤。
19.根据权利要求18所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中所述微血管完整性损伤是由于衰老过程、糖尿病、动脉硬化、慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)、门静脉闭锁(肝脏微血管发育不良)、非酒精性脂肪肝(NAFLD)、慢性肾脏疾病、小血管疾病、多囊卵巢综合症、慢性炎症或创伤性脑损伤(TBI)。
20.根据权利要求18所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中大麻素以约0.01毫克至约600毫克的剂量范围施用。
21.根据权利要求20所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中大麻素通过口服、阴道、直肠、口腔粘膜、鼻腔、舌下、吸入、局部、胃肠外、静脉内、肌内注射或皮下给药途径施用。
22.根据权利要求18-21所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中所述一种或多种大麻素是四氢大麻酚(THC)、四氢大麻酚酸(THeA)、大麻二酚(CBO)、大麻酚(CBN)、大麻萜酚(CBG)、大麻环萜酚(CBC)、大麻环酚(CBL)、次大麻酚(CBV)、四氢次大麻酚(THCV)、次大麻二酚(CBDV)、次大麻环萜酚(CBCV)、次大麻萜酚(CBaV)和大麻萜酚单甲醚(CBGM)、花生四烯酸乙醇胺(AEA)和2-花生四烯酸甘油酯(2-AG)、HU-210、HU-211、HU-308、HU-433、JWH-018、JWH-073、CP-47,497、JWH-200、大麻环己醇或其任何组合。
23.根据权利要求22所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中所述一种或多种大麻素来源于属于大麻科植物的部分。
24.根据权利要求23所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中所述植物是大麻、印度大麻或莠草大麻，或其大麻品种。
25.根据权利要求22所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中所述大麻素是THC。
26.根据权利要求25所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中THC的服用剂量为约0.001mg至约0.5mg。
27.根据权利要求25所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中THC的服用剂量为约0.5毫克至约2.5毫克。
28.根据权利要求25所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中THC的服用剂量为约2.5毫克至约10毫克。
29.根据权利要求22所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中所述大麻素是CBD。
30.根据权利要求29所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中CBD的服用剂量为约0.1毫克至约10毫克。
31.根据权利要求29所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中CBD的服用剂量为约10毫克至约100毫克。
32.根据权利要求29所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中CBD的服用剂量为约100毫克至约600毫克。
33.根据权利要求22所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中所述大麻素是含有所述大麻素的植物提取物。
34.根据权利要求18至33所述的用于预防和/或治疗微血管完整性损伤的方法的组合物，其中受试者是人类。
CN202180057764.2A 2020-08-03 2021-08-02 维持微血管完整性的方法 Pending CN116157137A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063060245P 2020-08-03 2020-08-03
US63/060,245 2020-08-03
PCT/IB2021/057064 WO2022029606A1 (en) 2020-08-03 2021-08-02 Methods for maintaining microvascular integrity

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116157137A true CN116157137A (zh) 2023-05-23

Family

ID=80117722

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180057764.2A Pending CN116157137A (zh) 2020-08-03 2021-08-02 维持微血管完整性的方法

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20230302025A1 (zh)
EP (1) EP4188364A4 (zh)
JP (1) JP2023537302A (zh)
CN (1) CN116157137A (zh)
AU (1) AU2021322987A1 (zh)
CA (1) CA3172130A1 (zh)
IL (1) IL300281A (zh)
WO (1) WO2022029606A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024184146A1 (en) 2023-03-03 2024-09-12 Wista Laboratories Ltd. Diaminophenothiazine for the treatment of microvascular brain disease disease

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107530318A (zh) * 2015-03-02 2018-01-02 阿福金制药有限责任公司 用大麻素的局部区域神经影响性疗法
CN110603047A (zh) * 2017-03-16 2019-12-20 伊祖恩制药公司 大麻素制剂及剂量

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6916852B2 (en) * 2003-05-12 2005-07-12 University Of Tennessee Research Foundation Method for regulation of microvascular tone
WO2019036243A1 (en) * 2017-08-16 2019-02-21 Molecular Infusions, Llc Formulations

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107530318A (zh) * 2015-03-02 2018-01-02 阿福金制药有限责任公司 用大麻素的局部区域神经影响性疗法
CN110603047A (zh) * 2017-03-16 2019-12-20 伊祖恩制药公司 大麻素制剂及剂量

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LVIECHOULAM R AND SHOHAMI E: "Endocannabinoids and traumatic brain injury"Mol Neurobiol,", MOL NEUROBIOL, vol. 36, no. 1, pages 1402 *

Also Published As

Publication number Publication date
JP2023537302A (ja) 2023-08-31
IL300281A (en) 2023-04-01
WO2022029606A1 (en) 2022-02-10
US20230302025A1 (en) 2023-09-28
EP4188364A1 (en) 2023-06-07
EP4188364A4 (en) 2024-08-21
CA3172130A1 (en) 2022-02-10
AU2021322987A1 (en) 2023-03-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Shim et al. Ginkgo biloba extract and bilberry anthocyanins improve visual function in patients with normal tension glaucoma
CN107530317A (zh) 大麻素类和n‑酰基乙醇胺的组合
CN102548571A (zh) 用于预防和治疗脑部疾病和疾病状态的组合物和方法
CN105434337B (zh) 盐酸普萘洛尔亚微乳凝胶及其制备方法和用途
WO2020183455A1 (en) Cannabinoid combinations for treating low back pain
Cheng et al. Neuroprotective effects of exogenous irisin in kainic acid-induced status epilepticus
Uziel et al. Full-spectrum cannabis extract microdepots support controlled release of multiple phytocannabinoids for extended therapeutic effect
CN103520151B (zh) γ-和δ-生育酚及其衍生物作为辐射防护剂的医药用途
CN116157137A (zh) 维持微血管完整性的方法
RU2309733C2 (ru) Фармацевтическая система доставки витамина с и витамина е и применение комбинации витаминов с и е для профилактики или лечения состояний, связанных с окислительной нагрузкой
US9034845B2 (en) Compositions for treating rosacea
CN106999468B (zh) 熊脱氧胆酸和水飞蓟素改进cpt-11疗效和毒性的制药用途
CN109640969A (zh) 用于減少体重的皮下注射剂及其用途
CN107349190A (zh) 芳姜黄酮的应用
US11638736B2 (en) Compositions for preventing or treating diseases or disorders associated with neuro-inflammation, neuro-apoptosis, or neuro- oxidative damage and uses thereof
CN107405372A (zh) 乳香胶的分离级分用于治疗视神经病变的用途
CN105343107A (zh) 雷公藤红素在制备防治视网膜退行性改变相关疾病药物中的应用
Hommer et al. The effect of orally administered low-dose dronabinol on retinal blood flow and oxygen metabolism in healthy subjects
CN100370973C (zh) 一种治疗胸痹的中药制剂
Lu et al. Hypothermic properties of dexmedetomidine provide neuroprotection in rats following cerebral ischemia‑reperfusion injury
US20220000833A1 (en) Compositions and methods for treating obstructive sleep apnea
WO2020183457A1 (en) Cannabinoid combinations for treating diabetic neuropathy
CN105944104B (zh) 一种治疗消化道溃疡的药物组合物
EP4338798A1 (en) Pharmaceutical preparation containing genistein for use in the prevention or treatment of glaucoma and/or ocular hypertension
CN108403881A (zh) 一种治疗老年痴呆的药物组合物及其制备方法与用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination