CN116059189A - 一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂及其制备方法，涉及中药技术领域。本发明是将人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂与天然高分子载体溶液混合后经真空干燥成型，以获得一种中药膜剂。相比于原水剂，本发明膜剂具有使用方便，药物剂量更为精确的优势，而且患者可自行施药，施药后载体膜能自行降解，无需取出。本发明的膜剂无毒且易降解。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂及其制备方法。
背景技术
中药水剂在我国临床上应用已有多年，以医院自行配置使用为主，包括内服和外敷，用在外科、皮肤科和妇科等。但是对于某些粘膜给药，需要专业人员对患者进行施药，患者不能自行完成。例如利用中药水剂对人乳头瘤病毒感染进行施药。
一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂，采用先进的萃取工艺技术制成，其药理作用是选择性破坏癌细胞膜和线粒体等膜性系统，使瘤细胞发生退行性变与坏死，同时对感染的HPV有很好的抑制增殖和清除作用。
目前人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂施药通常是将药物浸渍或涂覆于医用棉布上，施药后约4-6小时后取出，需由专业人员施药，患者不能自行完成，影响依从性，而且随访时间还需延长，给患者和专业人员均造成不便。
此外，将人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂浸渍或涂覆于医用棉布上对粘膜施药时，不仅难以准确控制中药剂量和保证药效的稳定性，而且会造成中药水剂的浪费。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂及其制备方法。本发明是将人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂与天然高分子载体溶液混合后经真空干燥成型，以获得一种中药膜剂。本发明膜剂具有使用方便，患者可自行施药且施药后可自行降解，无需取出，同时本发明的膜剂无毒且易降解。
本发明是采用以下技术方案实现的：
一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将天然高分子载体与去离子水搅拌混合，经过处理使其混合均匀后制成载体溶液；
S2、在所述载体溶液中添加人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂，机械搅拌均匀后得到混合溶液；
S3、将所述混合溶液进行超声处理10-30min，然后滴加到模具并进行真空干燥成型，冷却至室温后得到一种中药膜剂。
优选的，所述天然高分子载体包括但不限于壳聚糖、海藻酸钠、胶原蛋白中的一种，所述载体溶液中天然高分子载体的质量浓度根据载体的不同而有所区别。当所述载体为壳聚糖时，所述载体溶液中壳聚糖的浓度为10-30mg/mL，当载体为胶原蛋白时，所述载体溶液胶原蛋白的浓度为0.2-1g/mL。
优选的，本发明所述中药水剂是由北京派特博恩生物技术开发有限公司所提供的专用于人乳头瘤病毒感染防治的中药制剂。
优选的，步骤S1所述的搅拌转速为800～1000r/min，首选1000r/min，搅拌时间为15min-3h。
更优选的，所述载体溶液和所述人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂的体积比因载体的不同而有所区别(如壳聚糖溶液：中药水剂＝100:1到20:1，胶原蛋白溶液：中药水剂＝1:6到3:5)。
优选的，所述S2所述的搅拌转速800～1000r/min，首选1000r/min，搅拌时间为2-3h，首选3h。
优选的，步骤S3所述模具因载体的不同而有所区别(如壳聚糖和海藻酸钠用的是直径33mm的六孔板，胶原蛋白用的是聚苯乙烯板，板子的主体长度为120mm，主体宽度为75mm)。
优选的，步骤S3所述真空干燥的真空度为0.05MPa-0.08Mpa，干燥温度为室温到60℃，干燥时间为18～48h，优选24h。
本发明的另一目的是提供一种利用上述方法制备的人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明的中药膜剂具有载药剂量可控、稳定性好的特点，同时本发明中药膜剂为自支撑膜，具有温敏特性和较好的强韧性；本发明的中药膜剂厚度为1-2μm，易于降解，无毒副作用。
附图说明：
图1是实施实例1中药膜剂样品的光学照片；
图2是实施例1中药水剂和载体-中药水溶液样品的Raman光谱图；
图3是实施例1载体-中药膜剂的傅里叶红外光谱图(FT-IR)；
图4是实施例2中药水剂和载体-中药水剂溶液样品的核磁共振氢谱(1H NMR)图；
图5是实施例2中载体-中药膜剂傅里叶红外光谱图(FT-IR)；
图6是实施例1和实施例2中人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂的吸光度标准曲线；
图7是实施例1和实施例2膜剂作用于HaCaT细胞后细胞存活率柱状图；
图8是实施例1和实施例2膜剂作用于Hela细胞后细胞存活率柱状图；
图9是实施例1膜剂作用于小鼠阴道后的组织解剖切片图；
图10是实施例2膜剂作用于小鼠阴道后的组织解剖切片图。
具体实施方式
为使本发明的目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细的说明。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容更加透彻全面。
下面利用人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂制成一种中药膜剂，具体如下：
实施例1
一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，步骤如下：
S1、将2.0g壳聚糖与99mL去离子水混合，然后滴加1mL的冰醋酸，搅拌3h后制成载体溶液。其搅拌转速为800～1000r/min，优选1000r/min。
S2、称取30mL载体溶液中添加750μL人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂，机械搅拌3h，转速为1000r/min，得到混合溶液；
S3、将所述混合溶液进行超声处理15min，然后滴加到直径33mm的六孔板中，每个孔滴入5mL的混合溶液后再进行真空干燥处理，真空度为0.05Mpa，干燥温度为60℃，干燥时间为24h；干燥箱冷却到室温后即可得到一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂。
实施例2
一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，与实施例1的区别在于载体种类、载体溶液的质量浓度、载体溶液和中药水剂剂量比、模具、干燥温度和时间的不同。具体步骤如下：
S1、将质量为6.0g、浓度为0.4g/mL的胶原蛋白水浴加热至90℃，边加热边搅拌，搅拌转速为1000r/min，搅拌30min后制成载体溶液；
S2、载体溶液中添加2mL人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂，机械搅拌3h，转速为1000r/min，得到混合溶液；
S3、将所述混合溶液进行超声处理15min，然后滴加到聚苯乙烯板上，板子的主体长度为120mm，主体宽度为75mm，再进行真空干燥处理，真空度为0.05Mpa，干燥温度为室温，干燥时间为24h；干燥箱冷却到室温后即可得到一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂。
将本发明制备的人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂进行如下检测：
1)对所制备的样品肉眼观察，表面平整、较为光滑。
2)对实施例1所制备的样品进行拉曼光谱(Raman)分析，结果表明，在负载了中药水剂以后，膜剂在2500cm-1～3500cm-1呈现了药物的振动峰，且载药后，载体的光谱峰位几乎未发生变化，说明负载药物以后载体的结构并未发生改变，推测药物是以物理吸附方式负载于载体上。
3)对实施例一所制备的样品进行傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析，结果表明，1548cm-1对应-NH2上N-H的弯曲振动峰，1409cm-1对应C-H的弯曲振动峰，1152cm-1对应C-O-C的振动峰，1071cm-1和1024cm-1分别对应二级醇和一级醇上C-O的伸缩振动峰。在负载药物后，载体的特征吸收峰基本未变且各振动峰之间的相对强度无明显变化，说明药物的加入并没有引起化学反应，进一步证实药物物理分散在载体基体中。
4)对实施例2所制备的样品进行核磁振动光谱(1H NMR)分析，结果表明，酚类药物的特征峰4-7.5在载体载药后出现，同样，载药水剂中也出现了醇类药物(0.6-6.3)和环状芳香α-二酮(6-7)，说明具有羟基和烯醇类质子特征的金银花、蛇床子和鸦胆子等药物与载体复合成功。此外，烷基(0.5-3)、芳胺(3-6)、酰胺类(6-9.5)特征峰在中药原药和载药水剂中均可能存在，对应于大青叶和苦参等药物。2.7-5为水的特征峰，符合中药水剂和载体与中药复合水剂特点。
5)对实施例2所制备的样品进行傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析，结果表明，1660-1600cm-1区域为酰胺I带的特征吸收峰，是由多肽羰基的伸缩振动引起的强吸收，1550cm-1处的中强吸收为酰胺II带，这是与N-H弯曲振动和C-N伸缩振动相关的；而1320-1220cm-1间的弱吸收则被认为是酰胺III带。在负载药物后，载体的特征吸收峰与各振动峰的相对强度和位置基本无变化，药物的加入并没有引起化学反应。
6)对所制备膜剂经紫外-分光光度计检测，绘制了中药水剂的浓度-吸光度曲线。结果显示标准曲线线性相关。根据下式可以求出膜剂的载药量和包封率：
载药量＝膜剂中药物的量/膜的质量×100％
包封率＝(药物起始量-未包封的量)/药物起始量×100％
计算结果，实施例1中膜剂的载药量为0.76μL/mg，包封率为79.9％；实施例2中膜剂的载药量为3.89μL/mg，包封率为78.7％。其中，载药量的单位是中药水剂的体积与成膜后的膜剂质量的比值。
7)检测作用于HaCaT细胞后细胞存活率，结果表明载体本身对HaCaT细胞无影响，而载药后膜剂对HaCaT细胞有着明显的抑制作用，与中药水剂的抑制效果相近。
8)检测作用于Hela细胞后细胞存活率，结果表明载体本身对Hela细胞无影响，载药后膜剂对Hela细胞抑制作用明显，与中药水剂有着相近的抑制效果。
9)观察膜剂作用于小鼠阴道后的解剖切片结果表明，实施例2为正常的肝脏、脾脏、心、肺、肾、脑。生殖系统中子宫内膜未见异常，柱状上皮连续性良好，未见水肿或坏死，无炎性增生。阴道壁表明角化程度不高。上皮下层可见密集深染颗粒，上皮细胞结构未见改变，细胞形态正常。其他部分正常。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (8)
1.一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将天然高分子载体与去离子水搅拌混合，经过处理使其混合均匀后制成载体溶液；
S2、在所述载体溶液中添加人乳头瘤病毒感染防治专用中药水剂，机械搅拌均匀后得到混合溶液；
S3、将所述混合溶液进行超声处理10-30min，然后滴加到模具并进行真空干燥成型，冷却至室温后得到一种中药膜剂。
2.根据权利要求1所述人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，其特征在于，所述处理根据载体的不同而有所区别。
3.根据权利要求2所述人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，其特征在于，所述天然高分子载体包括但不限于壳聚糖、海藻酸钠、胶原蛋白中的一种，当所述载体为壳聚糖时，所述载体溶液中壳聚糖的浓度为10-30mg/mL，当载体为胶原蛋白时，所述载体溶液胶原蛋白的浓度为0.2-1g/mL。
4.根据权利要求2所述人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，其特征在于，所述中药水剂是由北京派特博恩生物技术开发有限公司所提供的专用于人乳头瘤病毒感染防治的中药制剂。
5.根据权利要求1所述人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，其特征在于，步骤S1所述的搅拌转速为800～1000r/min，搅拌时间为15min-3h。
6.根据权利要求1所述人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，其特征在于，所述S2所述的搅拌转速800～1000r/min，搅拌时间2-3h。
7.根据权利要求1所述人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂的制备方法，其特征在于，步骤S3所述真空干燥的真空度为0.05MPa-0.08Mpa，干燥温度为室温到60℃，干燥时间为18-48h。
8.一种人乳头瘤病毒感染防治专用中药膜剂，其特征在于，利用权利要求1～7任意一种方法制备而成。
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