CN112022902A - 一种碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备方法及应用 - Google Patents

一种碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种紫草桉叶油微乳凝胶制备方法及应用。本发明用氟康唑片与柠檬酸为原料，经水热法一步合成碳点，用于氟康唑的改性，制备碳点改性氟康唑，以此与桉叶油制备微乳液，再制备碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶，充分发挥碳点、氟康唑与桉叶油协同抗真菌作用，用于妇女生殖道感染治疗，具有效果显著，优于阳性对照药，氟康唑在其中含量低，且无耐药性等特点。

Description

一种碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备方法及应用
技术领域
本发明属于中药制剂技术领域，具体是涉及一种碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备方法及应用。
背景技术
微乳是由表面活性剂、助表面活性剂、水相和油相按适当比例自发形成的透明或半透明、各向同性的热力学稳定的液-液分散体系。微乳对水溶性及脂溶性药物均具有良好的溶解性,可增大难溶性药物的溶解度、提高易溶性药物的稳定性；适于口服、注射或经皮给药。微乳虽然是药物的优良载体，但微乳较低的豁度使其在外用透皮给药制剂中应用受到影响，单独应用微乳制剂时，很难使药物在皮肤表面滞留较长时间，因此给药的剂量会受到影响，往往会影响药物的实际应用。凝胶剂是随着现代化工业发展而产生的一种新剂型，是指含有溶解状态药物的澄明的半固体制剂，具有溶胀性、脱水收缩性、透过性和化合性，既有交联结构存在又具有部分的固体性质，能够在较长的时间里与用药部位紧密粘附，能使半固体制剂在静置时保持一定形状，而在外力作用下又可以流动、变形。微乳凝胶是将微乳加至凝胶基质如卡波姆、黄胞胶、角叉菜胶等中形成的凝胶。
碳点（Carbon dots）是一种新型纳米尺寸碳材料，由于具有独特的好的生物相容性、水容性、低毒性、光学稳定性、表面丰富的基团，包括羧基、羟基、氨基等受到极大关注。以碳点对抗生素进行改性制备新型抗菌剂成为新的研究热点。桉叶油有芳香味、挥发性，主要化学成分是萜类化合物及其含氧衍生物，具有抗菌、抗氧化、抗炎、促渗、杀虫驱蚊止痒及防腐作用。利用将桉叶油得到的微乳液辅以碳点改性抗生素制备新型微乳凝胶抗菌剂，尤其是真菌抗菌剂，用于妇女生殖道感染的研究未见报道。
本发明用氟康唑片与柠檬酸为原料，经水热法一步合成碳点，用于氟康唑的改性，制备碳点改性氟康唑，以此与桉叶油制备微乳液，再制备碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶，充分发挥碳点、氟康唑与桉叶油协同抗真菌作用，用于妇女生殖道感染治疗，效果显著，优于阳性对照药，且无抗药性。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备方法，以及用于妇女生殖道感染治疗。
本发明的目的通过以下技术方案予以实现。
除非另有说明，本发明所采用的百分数均为重量百分数。
本发明的技术方案主要基于以下认识：
一种碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备方法，其特征在于， 其方法制备方法包括以下步骤：
（1）碳点的制备：称取0.4-0.6份研磨细的氟康唑片粉末与0.2-0.4份柠檬酸混合均匀，加入到100 份超纯水中，超声10-20min，并转移至聚四氟乙烯反应釜，于200℃加热6-10 h，自然冷却后，12000 rpm 离心15 min，再用孔径为0.22μm滤膜过滤，得到水溶性碳点。
（2）碳点改性氟康唑的制备：0.05份1-乙基-3-(3-(二甲氨基)丙基)碳二亚胺盐酸盐及0.05份N-羟基硫代琥珀酰亚胺加入到步骤（1）制备的5-7份碳点中，室温反应4-6 h；然后将0.005-0.008份的氟康唑溶于pH 7.4的 2 份 PBS缓冲溶液加入其中，室温搅拌反应5-7 h，将溶液过1000 -1300Da透析膜透析24 h，移出未反应的碳点及氟康唑，制得碳点改性氟康唑。
（3）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备：将卡波姆-940于去离子水中，使其充分溶胀，制得凝胶基质；在步骤（2）制备的碳点改性氟康唑中加入桉叶油、吐温-80及丙三醇，搅拌混合均匀，边揽拌边加入到已经溶胀好的基质中，充分揽拌使之分散均匀，得到碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶。
所述卡波姆-940于去离子水质量比为0.005-0.01：1。
所述碳点改性氟康唑、桉叶油、吐温-80、丙三醇与凝胶基质质量比为0.02-0.05：0.02-0.05：0.01-0.05：0.15-0.20：1。
制备得到的碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶用于妇女生殖道感染治疗。相对于现有技术，本发明具有以下优点：
1、本发明充分利用以氟康唑为原料制备的碳点能通过扩散作用破坏细菌细胞壁，结合真菌的DNA和RNA，阻止重要基因表达，从而达到杀菌作用的特点，将其用于氟康唑改性，制备的碳点改性氟康唑与桉叶油形成的微乳凝胶，具有好的协同抗真菌、抗炎等作用。
2、本发明制备的碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶用作抗真菌剂，与阳性对照药氟康唑相比，大大降低氟康唑用量，抗真菌效果显著，无耐药性。
3、本发明首次用抗真菌药制剂制备碳点，充分利用制剂中的淀粉、糖等辅料富含碳、氮特点，再用于抗真菌药的改性，复配桉叶油制备新型抗真菌剂，用于妇女生殖道感染治疗，与现有抗真菌药相比，用量少、效果好。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明，但实施例并不是对本发明技术方案的限定，所有基于本发明所作出的变化或等同替换均应属于本发明的保护范围。
实施例1：
（1）碳点的制备：以重量份计，称取0.4份研磨细的氟康唑片粉末与0.2 份柠檬酸混合均匀，加入到100份超纯水中，超声10 min，并转移至聚四氟乙烯反应釜，于200℃加热6 h，自然冷却后，12000 rpm 离心15 min，再用孔径为0.22μm滤膜过滤，得到水溶性碳点。
（2）碳点改性氟康唑的制备：以重量份计，0.05份 1-乙基-3-(3-(二甲氨基)丙基)碳二亚胺盐酸盐及0.05份N-羟基硫代琥珀酰亚胺加入到步骤（1）制备的5份碳点中，室温反应4 h；然后将0.005 份的氟康唑溶于pH 7.4的 2 份 PBS缓冲溶液加入其中，室温搅拌反应5 h，将溶液过1000 -1300Da透析膜透析24 h，移出未反应的碳点及氟康唑，制得碳点改性氟康唑。
（3）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备：将0.5份卡波姆-940于100份去离子水中，使其充分溶胀，制得凝胶基质；在步骤（2）制备的5份碳点改性氟康唑中加入2份桉叶油、1份吐温-80及20份丙三醇，搅拌混合均匀，边揽拌边加入到已经溶胀好的基质中，充分揽拌使之分散均匀，得到碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶。
（4）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶感观指标及稳定性考察：见表1
表1碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶感观指标和实验指标综合评价
考察指标 要求 样品考察结果
外观性状 淡黄色均匀的半固体凝胶 淡黄色均匀的半固体凝胶
均匀性 整体均匀一致，无团聚颗粒、气泡等 整体均匀一致，无团聚颗粒
涂展性 有弹性，容易涂抹，涂抹后皮肤表面舒适 有弹性，容易涂抹，涂抹后皮肤表面舒适
变色时间 60℃恒温水浴加热，3 h内微乳凝胶颜色未变深 60℃恒温水浴加热，3 h内未变色
耐热稳定性 50℃恒温放置24h，微乳凝胶应均匀无分层或沉淀现象 无分层或沉淀现象
耐寒稳定性 -4℃恒温放置24 h，微乳凝胶应均匀无分层或沉淀现象 无分层或沉淀现象
（5）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶治疗需氧菌性阴道炎疾病的临床疗效。选择30 例需氧菌性阴道炎疾病患者为研究对象，随机分为治疗组和对照组，各15人，分别以碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶（治疗组）和双唑泰阴道凝胶（对照组）外用治疗。治愈：经1周治疗后，患者白带恢复正常，阴道疼痛症状完全消失，分泌物正常，无异常气味及颜色；有效：经1周治疗后，患者白带异味与治疗前相比明显减轻，分泌物颜色由黄绿色变为淡黄色，阴道疼痛程度减轻比较明显；无效：治疗前后，患者阴道分泌物、白带颜色及阴道疼痛程度无任何变化或加重。其结果见表2。
表2 两组患者临床疗效对比
组别 治愈 有效 无效 总有效率
治疗组 14（93%） 1（7%） 0 100
对照组 9（60%） 4（27%） 2（13%） 87%
妇科研究发现：需氧菌性阴道炎属于感染性疾病的一种，主要由需氧菌感染引起，病情不断发展，导致患者产过氧化氢的乳杆菌数量明显减少，而大肠埃希菌、葡萄球菌、B族链球菌等需氧菌明显增加，同时患者分泌物明显增多，阴道黏膜发生炎性改变，且上皮细胞有脱离现象，性交后，阴道疼痛程度更明显。结果显示，采用碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶治疗治疗妇科需氧菌性阴道炎的效果要大于双唑泰阴道凝胶，且发明凝胶剂氟康唑含量低，产品具有明显的优势。
实施例2：
（1）碳点的制备：以重量份计，称取0.5份研磨细的氟康唑片粉末与0.3 份柠檬酸混合均匀，加入到100份超纯水中，超声12 min，并转移至聚四氟乙烯反应釜，于200℃加热7 h，自然冷却后，12000 rpm 离心15 min，再用孔径为0.22μm滤膜过滤，得到水溶性碳点。
（2）碳点改性氟康唑的制备：以重量份计，0.05份 1-乙基-3-(3-(二甲氨基)丙基)碳二亚胺盐酸盐及0.05份N-羟基硫代琥珀酰亚胺加入到步骤（1）制备的6份碳点中，室温反应5 h；然后将0.006 份的氟康唑溶于pH 7.4的 2 份 PBS缓冲溶液加入其中，室温搅拌反应5 h，将溶液过1000 -1300Da透析膜透析24 h，移出未反应的碳点及氟康唑，制得碳点改性氟康唑。
（3）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备：将0.6 份卡波姆-940于100份去离子水中，使其充分溶胀，制得凝胶基质；在步骤（2）制备的3份碳点改性氟康唑中加入3份桉叶油、2份吐温-80及15份丙三醇，搅拌混合均匀，边揽拌边加入到已经溶胀好的基质中，充分揽拌使之分散均匀，得到碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶。
（4）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶感观指标及稳定性考察：同实施例1。
（5）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶治疗阴道炎的临床疗效。选择有皮肤发红、破损伴渗血新生儿为研究对象，随机分为治疗组和对照组，各15人，分别以碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶（治疗组）和银离子妇科外用抗菌凝胶（对照组）外用治疗。疗效判定标准：痊愈：自觉症状及体征均消失，白带镜检病原菌消失，清洁度为Ⅰ°～Ⅱ°；显效：自觉症状及体征明显缓解，白带镜检病原菌消失，清洁度为Ⅱ°～Ⅲ°；有效：自觉症状及体征减轻，白带镜检病原菌消失，清洁度为Ⅲ°度以上；无效：自觉症状及体征无变化，病原体未消失。结果见表3。
表3 两组阴道炎临床疗效对比
组别 痊愈 显效 有效 无效
治疗组 15（100%） 13（87%） 2（13%） 0
对照组 11（73%） 8（53%） 3（20%） 4（27%）
结果显示，采用碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶治疗阴道炎，具有较好治疗效果。
实施例3：
（1）碳点的制备：以重量份计，称取0.4份研磨细的氟康唑片粉末与0.2 份柠檬酸混合均匀，加入到100份超纯水中，超声14 min，并转移至聚四氟乙烯反应釜，于200℃加热8 h，自然冷却后，12000 rpm 离心15 min，再用孔径为0.22μm滤膜过滤，得到水溶性碳点。
（2）碳点改性氟康唑的制备：以重量份计，0.05份 1-乙基-3-(3-(二甲氨基)丙基)碳二亚胺盐酸盐及0.05份N-羟基硫代琥珀酰亚胺加入到步骤（1）制备的7份碳点中，室温反应6 h；然后将0.008 份的氟康唑溶于pH 7.4的 2 份 PBS缓冲溶液加入其中，室温搅拌反应5 h，将溶液过1000 -1300Da透析膜透析24 h，移出未反应的碳点及氟康唑，制得碳点改性氟康唑。
（3）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备：将0.8 份卡波姆-940于100份去离子水中，使其充分溶胀，制得凝胶基质；在步骤（2）制备的4份碳点改性氟康唑中加入2份桉叶油、5份吐温-80及18份丙三醇，搅拌混合均匀，边揽拌边加入到已经溶胀好的基质中，充分揽拌使之分散均匀，得到碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶。
（4）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶感观指标及稳定性考察：同实施例1。
（5）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶治疗宫颈糜烂的临床疗效。选择30例宫颈糜烂患者为研究对象，随机分为治疗组和对照组，各20人，分别以碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶（治疗组）和壳聚糖妇科凝胶（对照组）外用治疗。疗效评价标准：痊愈：镜下可见宫颈光滑、完整，糜烂现象消失；显效：宫颈糜烂程度改善至少一个级别，糜烂面有明显愈合迹象；有效：糜烂程度改善不足一个级别，但糜烂面有愈合迹象；无效：治疗后糜烂程度并无明显改善或出现加重。阴道分泌物增多疗效：痊愈：阴道穹隆仅有少量分泌物；显效：阴道内分泌物分泌显著减少；有效：分泌物略微减少但并未充满穹隆；无效：分泌物充满阴道穹隆。结果见表4、表5。
总有效率=（痊愈+显效+有效）/总例数×100%
表4 两组患者宫颈糜烂临床疗效对比
组别 治愈 显效 有效 无效 总有效率
治疗组 14（70%） 5（25%） 1（5%） 0 100%
对照组 6（30%） 8（40%） 2（10%） 4（20%） 80%
表5 两组患者阴道分泌物增多临床疗效对比
组别 治愈 显效 有效 无效 总有效率
治疗组 15（75%） 5（25%） 0 0 100%
对照组 4（20%） 5（25%） 4（20%） 7（35%） 65%
结果表明，碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶治疗宫颈糜烂能够有效促进创面愈合，改善阴道分泌物增多现象，效果满意。
实施例4：
（1）碳点的制备：以重量份计，称取0.5份研磨细的氟康唑片粉末与0.4 份柠檬酸混合均匀，加入到100份超纯水中，超声15 min，并转移至聚四氟乙烯反应釜，于200℃加热10 h，自然冷却后，12000 rpm 离心15 min，再用孔径为0.22μm滤膜过滤，得到水溶性碳点。
（2）碳点改性氟康唑的制备：以重量份计，0.05份 1-乙基-3-(3-(二甲氨基)丙基)碳二亚胺盐酸盐及0.05份N-羟基硫代琥珀酰亚胺加入到步骤（1）制备的6份碳点中，室温反应5 h；然后将0.007 份的氟康唑溶于pH 7.4的 2 份 PBS缓冲溶液加入其中，室温搅拌反应5 h，将溶液过1000 -1300Da透析膜透析24 h，移出未反应的碳点及氟康唑，制得碳点改性氟康唑。
（3）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备：将1 份卡波姆-940于100份去离子水中，使其充分溶胀，制得凝胶基质；在步骤（2）制备的2份碳点改性氟康唑中加入5份桉叶油、3份吐温-80及16份丙三醇，搅拌混合均匀，边揽拌边加入到已经溶胀好的基质中，充分揽拌使之分散均匀，得到碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶。
（4）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶感观指标及稳定性考察：同实施例1。

Claims (4)

1.一种碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备方法，其特征在于， 其方法制备方法包括以下步骤：
（1）碳点的制备：称取0.4-0.6份研磨细的氟康唑片粉末与0.2-0.4份柠檬酸混合均匀，加入到100 份超纯水中，超声10-20min，并转移至聚四氟乙烯反应釜，于200℃加热6-10 h，自然冷却后，12000 rpm 离心15 min，再用孔径为0.22μm滤膜过滤，得到水溶性碳点；（2）碳点改性氟康唑的制备：0.05份1-乙基-3-(3-(二甲氨基)丙基)碳二亚胺盐酸盐及0.05份N-羟基硫代琥珀酰亚胺加入到步骤（1）制备的5-7份碳点中，室温反应4-6 h；然后将0.005-0.008份的氟康唑溶于pH 7.4的 2 份 PBS缓冲溶液加入其中，室温搅拌反应5-7 h，将溶液过1000 -1300Da透析膜透析24 h，移出未反应的碳点及氟康唑，制得碳点改性氟康唑；（3）碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶制备：将卡波姆-940于去离子水中，使其充分溶胀，制得凝胶基质；在步骤（2）制备的碳点改性氟康唑中加入桉叶油、吐温-80及丙三醇，搅拌混合均匀，边揽拌边加入到已经溶胀好的基质中，充分揽拌使之分散均匀，得到碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶。
2.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，所述卡波姆-940于去离子水质量比为0.005-0.01：1。
3.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，所述碳点改性氟康唑、桉叶油、吐温-80、丙三醇与凝胶基质质量比为0.02-0.05：0.02-0.05：0.01-0.05：0.15-0.20：1。
4.根据权利要求1的一种制备碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶方法，其特征在于，制备得到的碳点改性氟康唑桉叶油微乳凝胶用于妇女生殖道感染治疗。
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