CN116019012A - 一种雪兔草莓脱毒育苗方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种雪兔草莓脱毒育苗方法，其包括外植体选取、外植体消毒灭菌、茎尖处理、初代培养等步骤，实现通过组织培养进行脱毒育苗，步骤科学合理，不仅有利于雪兔草莓提纯更新，快速繁殖优质无病毒种苗，且可有效提高雪兔草莓产量及品质；目前雪兔草莓还没有茎尖组织快繁体系，本发明可以通过组织培养的方法快速获得雪兔草莓脱毒苗。

Description

一种雪兔草莓脱毒育苗方法

技术领域

本发明涉及草莓种植技术领域，尤其涉及一种雪兔草莓脱毒育苗方法。

背景技术

雪兔草莓果肉洁白，完全成熟的果实是粉嫩的颜色，香软多汁，有一种冰淇淋的味道，目前具有非常高的经济价值。

然而草莓是蔷薇科草莓属宿根性多年生常绿草本植物，属于多倍体。草莓的传统培育方法多为匍匐茎繁殖和分株繁殖，不仅效率较低，不利于优良品种的推广，而且极易感染病毒。我国已鉴定明确的草莓病毒有四种，即草莓斑驳病毒(SMOV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)、草莓皱缩病毒(SCRV)和草莓镶脉病毒(SVBV)。四种苗普遍感染病毒是草莓生产中的瓶颈问题，感染病毒的草莓比未感染病毒的草莓长势弱、抗性差、产量明显下降，果品品质与商品性状变劣。对于病毒病，目前还没有药剂可以治理。

而采用匍匐茎繁殖和分株繁殖在栽培过程中一旦感染病毒，病毒不仅快速传播，并且病毒还会积累在草莓植株体内，会导致种苗退化，导致草莓的产量及品种严重下降。因此，培育无病毒母本苗、栽培无病毒苗木是防治草莓病毒病的根本对策。

发明内容

因此，基于以上背景，本发明对现有技术改进，提供一种雪兔草莓脱毒育种方法，能够实现雪兔草莓安全快速繁育出脱毒苗，有效提高雪兔草莓产量及品质。

本发明提供的技术方案为：

一种雪兔草莓脱毒育苗方法，其包括如下步骤：

S1：外植体选取

4-5月，当雪兔草莓匍匐茎长13-25cm长时，从生长健壮、无病虫害的雪兔草莓匍匐茎尖上剪取2-6cm的顶芽；

S2：外植体消毒灭菌

1)将步骤S1所取雪兔草莓茎尖外植体上的大叶片剥去；

2)用流水冲洗3个小时；

3)用质量分熟75％的乙醇浸泡消毒15-30s，再用4％的次氯酸钠或者0.1％氯化汞浸泡消毒10-15min，最后用灭菌后的蒸馏水冲洗3次，每次30s；

S3：茎尖处理

将茎尖外植体剥去幼叶，用解剖刀切取0.6-0.8cm茎尖生长点；

S4：初代培养

将剥取得茎尖接种到初代培养基上进行培养，30d后，草莓茎尖可诱导再生出不定芽；

S5：继代培养

将初代培养基中生长的丛生芽切取成每个丛芽后，接种到继代培养基中培养30d后，再进行下一次继代根培养，继代培养3次；

S6：生根培养

选取生长健壮的丛生苗转入到生根培养基中，生根培养4周后，炼苗移栽即可。

优选地，步骤S4中的初代培养基为：

MS培养基，5-10g/L琼脂，15-35g/L蔗糖，0.3-1mg/L 6-BA(6-苄氨基嘌呤)，0.1-0.2mg/L IBA(吲哚丁酸)。

优选地，步骤S5中的继代培养基为：

MS培养基，5-10g/L琼脂，15-35g/L蔗糖，0.3-1.5mg/L 6-BA，0.05-0.15mg/L IBA；

所述继代培养基的PH采用1％的氢氧化钠调节到5.8-6.0。

优选地，步骤S6中的生根培养基为：

1/2MS培养基，15-35g/L蔗糖，5-10g/L琼脂，0.2-1mg/L IBA；

所述生根培养基的PH为5.8-6.0。

采用本发明实现的有益效果为：

1)本发明通过草莓茎尖组织培养进行脱毒育苗，步骤科学合理，通过对草莓茎尖进行脱毒培养，不仅有利于雪兔草莓提纯更新，快速繁殖优质无病毒种苗，且可有效提高雪兔草莓产量及品质；

2)目前雪兔草莓还没有茎尖组织快繁体系，本发明可以通过组织培养的方法快速获得雪兔草莓脱毒苗。

3)本发明培养基配制合理，不仅成本低，并且还可延长雪兔草莓外植体在组培瓶内时间。

4)本发明的脱毒效率高(99.8％以上)，且可大大节省育苗时间，移栽成活率达100％。

附图说明

附图1为实施例1的通过组织培养进行脱毒育苗的过程照片。

具体实施方式

现将详细地提供本发明实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本发明。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本发明进行多种修改和变化而不背离本发明的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。

因此，旨在本发明覆盖落入所附权利要求的范围及其等同范围中的此类修改和变化。本发明的其它对象、特征和方面公开于以下详细描述中或从中是显而易见的。本领域普通技术人员应理解本讨论仅是示例性实施方式的描述，而非意在限制本发明更广阔的方面。下面结合实施例对本发明做进一步说明。

实施例1：一种雪兔草莓脱毒育苗方法，其包括如下步骤：

S1：外植体选取

4-5月，当雪兔草莓匍匐茎长13-25cm长时，从生长健壮、无病虫害的雪兔草莓匍匐茎尖上剪取2-6cm的顶芽；

4-5月是雪兔匍匐茎生长最多的季节；

S2：外植体消毒灭菌

1)将步骤S1所取雪兔草莓茎尖外植体上的大叶片剥去；

2)用流水冲洗3个小时；

3)用质量分熟75％的乙醇浸泡消毒15-30s，再用4％的次氯酸钠或者0.1％氯化汞浸泡消毒10-15min，最后用灭菌后的蒸馏水冲洗3次，每次30s；

S3：茎尖处理

将茎尖外植体剥去幼叶，用解剖刀切取0.6-0.8cm茎尖生长点；

S4：初代培养

将剥取得茎尖接种到初代培养基上进行培养，30d后，草莓茎尖可诱导再生出不定芽；

初代培养基为：

MS培养基，7g/L琼脂，30g/L蔗糖，0.6mg/L 6-BA，0.2mg/L IBA。

S5：继代培养

将初代培养基中生长的丛生芽切取成每个丛芽后，接种到继代培养基中培养30d后，再进行下一次继代根培养，继代培养3次；

继代培养基为：

MS培养基，7g/L琼脂，30g/L蔗糖，0.8mg/L 6-BA，0.1mg/L IBA；

所述继代培养基的PH采用1％的氢氧化钠调节到5.8-6.0。

S6：生根培养

选取生长健壮的丛生苗转入到生根培养基中，生根培养4周后，炼苗移栽即可。

生根培养基为：

1/2MS培养基，30g/L蔗糖，6g/L琼脂，0.3mg/L IBA；

所述生根培养基PH可采用1％的氢氧化钠调节到为5.8-6.0。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

Claims (4)

1.一种雪兔草莓脱毒育苗方法，其特征在于，其包括如下步骤：

S1：外植体选取

4-5月，当雪兔草莓匍匐茎长13-25cm长时，从生长健壮、无病虫害的雪兔草莓匍匐茎尖上剪取2-6cm的顶芽；

S2：外植体消毒灭菌

1)将步骤S1所取雪兔草莓茎尖外植体上的大叶片剥去；

2)用流水冲洗3个小时；

3)用质量分熟75％的乙醇浸泡消毒15-30s，再用4％的次氯酸钠或者0.1％氯化汞浸泡消毒10-15min，最后用灭菌后的蒸馏水冲洗3次，每次30s；

S3：茎尖处理

将茎尖外植体剥去幼叶，用解剖刀切取0.6-0.8cm茎尖生长点；

S4：初代培养

将剥取得茎尖接种到初代培养基上进行培养，30d后，草莓茎尖可诱导再生出不定芽；

S5：继代培养

将初代培养基中生长的丛生芽切取成每个丛芽后，接种到继代培养基中培养30d后，再进行下一次继代根培养，继代培养3次；

S6：生根培养

选取生长健壮的丛生苗转入到生根培养基中，生根培养4周后，炼苗移栽即可。

2.根据权利要求1所述的一种雪兔草莓脱毒育苗方法，其特征在于，步骤S4中的初代培养基为：

MS培养基，5-10g/L琼脂，15-35g/L蔗糖，0.3-1mg/L 6-BA，0.1-0.2mg/L IBA。

3.根据权利要求1所述的一种雪兔草莓脱毒育苗方法，其特征在于，步骤S5中的继代培养基为：

MS培养基，5-10g/L琼脂，15-35g/L蔗糖，0.3-1.5mg/L 6-BA，0.05-0.15mg/L IBA；

所述继代培养基的PH采用1％的氢氧化钠调节到5.8-6.0。

4.根据权利要求1所述的一种雪兔草莓脱毒育苗方法，其特征在于，步骤S6中的生根培养基为：

1/2MS培养基，15-35g/L蔗糖，5-10g/L琼脂，0.2-1mg/L IBA；

所述生根培养基的PH为5.8-6.0。

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