CN115960784A

CN115960784A - 一种植物乳杆菌zjuf sys1及其应用

Info

Publication number: CN115960784A
Application number: CN202211720993.0A
Authority: CN
Inventors: 冯凤琴; 沈飞
Original assignee: Hangzhou Kangyuan Food Science And Technology Co ltd; Zhejiang University ZJU
Current assignee: Hangzhou Kangyuan Food Science And Technology Co ltd; Zhejiang University ZJU
Priority date: 2022-12-30
Filing date: 2022-12-30
Publication date: 2023-04-14
Anticipated expiration: 2042-12-30

Abstract

本发明公开了一种植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1及其应用，属于微生物技术领域。所述植物乳杆菌ZJUF SYS1的保藏号为CCTCC NO:M 2022662。本发明还提供了植物乳杆菌ZJUF SYS1在制备缓解便秘和抑制胃肠道致病菌的药物或功能食品中的应用。植物乳杆菌ZJUF SYS1能够有效缓解便秘，该菌株在胃肠环境中具有较好的耐受性，能达到肠道发挥功效，有效抑制胃肠道致病菌在胃肠道内定殖，有利于肠道健康。本发明为便秘治疗提供了一种有效的益生菌株，对便秘治疗药物开发具有重要意义。

Description

一种植物乳杆菌ZJUF SYS1及其应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种植物乳杆菌(Lactiplantibacillusplantarum)ZJUF SYS1及其应用。

背景技术

根据便秘罗马III诊断标准，功能性便秘的症状特征是一星期中排便次数少于3次，或3天以上才排便，并伴有大便形态异常，排便紧张或便不尽，且不符合肠应激综合征的诊断标准的。长期便秘极易诱发痔疮、肛裂等疾病，从而加大了治愈便秘的难度，使得患者容易丧失治疗的信心。

便秘形成原因很多，研究发现肠道微生态参与了便秘的发生和发展，便秘患者有一个共同的肠道菌群特征就是存在严重的菌群紊乱。粪便硬度和肠道菌群的丰度呈负相关，人体肠道内的粪便组成1/3是菌，2/3是食物残渣，依靠肠道菌群对食物残渣的发酵使大便变软，但是工作压力或者生活不良习惯可以造成一个人肠道的菌群不足，而无法正常发酵导致粪便变硬。另外，肠道菌群失调影响结肠蠕动，抑制肠道运动，促进便秘发生。近年来许多研究发现精神心理因素对功能性便秘的发生、临床表现有明显的影响，病态行为、感情障碍和胃肠传输时间有显著相关性。

目前，便秘的治疗包括改善饮食习惯、增加膳食纤维的摄取量等常规疗法，使用泻剂、促动力药、促分泌剂等药物治疗，中医中药，以及利用科学仪器等生物反馈治疗。这其中较为常用且可行性较高的防治手段还是药物治疗，但是利用药物治疗各类便秘在临床应用中逐渐显示出的问题不容忽视，例如疗效有待进一步观察、不良用药反应逐渐显现等缺陷，比如神经刺激性泻药如大黄、番泻叶、芦荟长期使用会导致结肠黑变病、肠蠕动减弱、平滑肌萎缩等。

传统的用药方案大多是对症治疗，没有办法从根本上解决便秘的问题。口服微生态制剂是目前临床上药物治疗方案中的主要辅助治疗手段之一，活菌制剂无需通过全身吸收，不易引起不良反应，而且具有多方面的生理性获益。益生菌就是微生物制剂中重要的一部分，目前在缓解便秘方面主要采用的菌类为双歧杆菌、乳酸菌和肠球菌这三大类。

植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum/Lactobacillus plantarum)是乳酸菌的一种，植物乳杆菌具有发酵产酸使肠道pH值降低的特性，是潜在缓解便秘的优良菌种。例如专利文献CN 113564084 A、CN 110692726A、CN 110699271A等报道了植物乳杆菌在缓解便秘方面的用途。

由于植物乳杆菌不同菌株的基因组和功能存在很大差异，挖掘更多对缓解便秘有益的植物乳杆菌是本领域技术人员需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够有效治疗功能性便秘的新的植物乳杆菌菌株，将其用于开发缓解便秘的药物或功能食品。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明从四川泡菜中分离获得一株新的益生菌株，通过微生物学性状分析以及16S rRNA基因比对分析，鉴定该菌株为植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)，因此将其命名为植物乳杆菌ZJUF SYS1(Lactobacillus plantarum ZJUF SYS1)。

植物乳杆菌ZJUF SYS1于2022年5月18日保藏于中国典型培养物保藏中心(地址：中国武汉，武汉大学)，保藏号为：CCTCC NO:M 2022662。

通过体外模拟胃肠环境抗性研究发现，植物乳杆菌ZJUF SYS1在pH为2.5的酸性环境中3h后的活菌计数存活率为97.06％，再在含有1.8％胆盐的模拟肠液中8h后存活率达65.95％，表明本发明提供的植物乳杆菌ZJUF SYS1在胃肠环境中有较好的耐受性，能到达肠道发挥功效。

通过自凝集实验发现，植物乳杆菌ZJUF SYS1到22h时自凝集率高达78％，显著性高于模式菌株LGG，表明与肠道的黏附能力强，容易形成益生生物膜，进而保护机体。

通过交互凝集实验发现，植物乳杆菌ZJUF SYS1与病原菌(大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌与金黄色葡萄球菌)的凝集率随着时间延长而上升，尤其该益生菌与金黄色葡萄球菌的凝集率显著性高于LGG，表明植物乳杆菌ZJUF SYS1能在肠道中与致病菌较好的凝集，并顺利排出体外，有利于肠道健康。

因此，本发明提供了植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1在制备抑制胃肠道致病菌的药物或功能食品中的应用。

进一步的，植物乳杆菌ZJUF SYS1通过与胃肠道致病菌凝集抑制胃肠道致病菌在胃肠道内定殖，有利于肠道健康。

具体的，所述胃肠道致病菌包括大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌中的一种或多种。

本发明进一步通过斑马鱼便秘模型和小鼠便秘模型验证植物乳杆菌ZJUF SYS1具有较好的便秘缓解作用。具体的，在斑马鱼便秘模型中，植物乳杆菌ZJUF SYS1的干预可以显著性加速肠道蠕动，其蠕动速度接近正常组，该结果与阳性对照吗丁啉的作用无显著性差异。在小鼠便秘模型中，植物乳杆菌ZJUF SYS1干预后，显著性加快了便秘小鼠的肠蠕动，主要表现在显著性缩短首颗黑便排出时间，显著性提升粪便颗粒数至正常水平。除促进肠蠕动外，植物乳杆菌ZJUF SYS1的干预使便秘小鼠的粪便含水量恢复至正常水平。

因此，本发明提供了植物乳杆菌ZJUF SYS1在制备缓解便秘的药物或功能食品中的应用。

进一步的，所述植物乳杆菌ZJUF SYS1通过促进肠蠕动、提高粪便含水量进而缓解便秘。

进一步的，所述便秘为功能性便秘。

利用本发明的植物乳杆菌ZJUF SYS1可以制备成药物组合物。该药物组合物含有药学有效剂量的植物乳杆菌ZJUF SYS1的活菌形式。此外，所述药物组合物还可以含有合适的药物载体。本发明的药物组合物可以为胶囊、溶液或可饮用悬浮液、袋装粉剂等形式，每一单一剂量一般含有植物乳杆菌ZJUF SYS1菌株约为10⁷～10¹⁰CFU。本发明的药物组合物可用于防治便秘相关性疾病。

具体的，本发明提供了一种预防或治疗便秘的药物组合物，包括有效剂量的植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1和药学上可接受的载体。

优选的，所述药物组合物中含有活性植物乳杆菌(Lactiplantibacillusplantarum)ZJUF SYS1的有效剂量为10⁷～10¹⁰CFU。

优选的，所述药物组合物制剂形式为口服制剂。

利用本发明的植物乳杆菌ZJUF SYS1还可以制备成食品、保健品或食品配料的形式，这些食品、保健品或食品配料可用于防治便秘，提高使用者的健康水平。

具体的，本发明提供了一种缓解便秘的功能食品或食品配料，包括植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1和食品上可接受的辅料。

所述食品可以为含有本发明植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUFSYS1活菌的发酵乳、发酵果蔬、酵素、复合制剂等形式。

本发明具备的有益效果：

本发明提供了一种新的植物乳杆菌ZJUF SYS1，该菌株在胃肠环境中具有较好的耐受性，能达到肠道发挥功效。植物乳杆菌ZJUF SYS1的自凝集能力和与胃肠道病原菌交互凝胶能力显著高于模式菌鼠李糖乳杆菌，抑制胃肠道致病菌在胃肠道内定殖，有利于肠道健康。通过斑马鱼便秘模型和小鼠便秘模型发现植物乳杆菌ZJUF SYS1能够有效缓解便秘，本发明为便秘治疗提供了一种有效的益生菌株，对便秘治疗药物开发具有重要意义。

附图说明

图1为植物乳杆菌ZJUF SYS1自凝集性及其与病原菌的交互凝集性，其中A为益生菌的自凝集率，B为益生菌与大肠杆菌的交互凝集率，C为益生菌与鼠伤寒沙门氏菌的交互凝集率，D为益生菌与金黄色葡萄球菌的交互凝集率，图中*代表p＜0.05，**代表p＜0.01。

图2为植物乳杆菌ZJUF SYS1对斑马鱼肠蠕动的影响，图中a，b等不同字母表示组间的显著性差异(p＜0.05)。

图3为比较植物乳杆菌ZJUF SYS1与其他植物乳杆菌对斑马鱼肠蠕动的影响，图中*表示与CON组比较，**代表p＜0.01；#表示与LOP组比较，#代表p＜0.05，##代表p＜0.01。

图4为比较植物乳杆菌ZJUF SYS1与双歧杆菌BB12对斑马鱼肠蠕动的影响，图中*表示与CON组比较，**代表p＜0.01；#表示与LOP组比较，#代表p＜0.05，##代表p＜0.01。

图5为小鼠实验各组别小鼠能量摄入与体重增长情况，其中A为能量摄入，B为体重增长，图中a，b等不同字母表示组间的显著性差异(p＜0.05)。

图6为小鼠排便与小肠推进情况，其中A为首颗黑便排出时间，B为5h内排便颗粒数，C为5h内粪便湿重，D为5h内粪便干重，E为粪便水分含量，图中a，b等不同字母表示组间的显著性差异(p＜0.05)。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。以下实施例仅用于说明本发明，不用来限制本发明的适用范围。在不背离本发明精神和本质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所做的修改或替换，均属于本发明的范围。

下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。

实施例1：植物乳杆菌ZJUF SYS1的筛选分离与鉴定

(1)菌株的筛选与分离：

取5g四川泡菜加入到45mL 0.85％的灭菌生理盐水中摇匀，使用生理盐水梯度稀释至10^-5、10^-6、10^-7，分别涂布于MRS培养基上，每个梯度做3个平行。将涂布后的平板置于厌氧箱内，37℃培养24～48h。挑选差异明显的菌落在MRS固体培养基上划线分离，37℃厌氧培养24～48h，连续划线3～5次后，挑取单菌落进行过氧化氢滴定实验，挑取的单菌落在滴有5％过氧化氢液的载玻片上产生气泡则为过氧化氢酶试验阳性，未产生气泡的则为过氧化氢酶试验阴性，试验阴性菌株为疑似益生菌株。

(2)菌株鉴定：

将疑似益生菌株ZJUF SYS1进行革兰氏染色，并进行16S rRNA基因菌种鉴定，由上海派森诺生物有限公司完成鉴定。

ZJUF SYS1的16S rRNA的碱基序列如SEQ ID NO.1所示。结合生物学特征以及16SrRNA基因比对，确认ZJUF SYS1为一株植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)，命名为植物乳杆菌ZJUF SYS1(Lactobacillus plantarum ZJUF SYS1)。

将植物乳杆菌ZJUF SYS1于2022年5月18日保藏于中国典型培养物保藏中心(地址：中国武汉，武汉大学)，保藏号为：CCTCC NO:M2022662，并于2022年5月25日鉴定为存活。

实施例2：植物乳杆菌ZJUF SYS1体外益生性能试验

(1)模拟人工胃肠耐受性

模拟胃液(GJ)：胃蛋白酶(1:10000)加入PBS(pH2.5)中，浓度为3.5g/L。

模拟肠液(IJ)：NaHCO₃ 11g/L，NaCl 2g/L，胰蛋白酶1g/L，猪胆盐18g/L，调整pH值为8.0，0.22μm膜过滤除菌备用。

经冷冻离心后得到活菌体，PBS(pH7.4)洗两次，调整活菌浓度约为10⁹CFU/mL，将0.5mL菌悬液加入4.5mL模拟胃液中，同时采用MRS琼脂倾注平板法计数，置于厌氧培养箱中37℃培养。待3h后，取样分别采用MRS琼脂倾注平板计数法计数。待GJ处理3h后，取0.5mL的GJ培养液加入4.5mL的IJ中，8h后采用MRS琼脂倾注平板法计数，置于厌氧培养箱中37℃下培养24-48h后计数。每个菌株做三个平行。

存活率(％)＝logα/logβ×100％

注：α＝经过模拟胃肠液处理之后的乳酸菌活菌数，β＝未处理前的活菌数。

结果如表1所示，植物乳杆菌ZJUF SYS1的胃肠转运能力较好，经过胃液(pH2.5)消化下存活率高达97.06％，经模拟肠液后的存活率为65.95％，在整个胃肠过程的存活率为64.01％，与模式菌鼠李糖乳杆菌(LGG)接近。

表1

(2)自凝集性与交互凝集性

使用PBS制备浓度为10⁸CFU/mL的菌液，取10⁸CFU/mL的菌悬液4ml加入无菌离心管中，在0、2、4、8、12、22h静置状态下取上层清液200ul加入到96孔板中，在600nm下测定吸光值。按照公式计算自凝集率。

自凝集率(％)＝(A₀-A_t)/A₀×100％

A₀：0h时样品的OD值；A_t：不同时间段样品的OD值。

将测试益生菌菌株与病原菌(大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌与金黄色葡萄球菌)分别活化培养，培养18h，分别将培养物经5000rpm离心5min，并用无菌PBS缓冲液洗涤菌体细胞沉淀，调节OD₆₀₀为0.50±0.05，将等量(500μL)的测试益生菌菌株分别和3种致病性菌细胞悬液混合均匀，充分振荡5min，37℃静置培养。在2h、4h、8h、16h静置状态下取上层清液200μL加入到96孔板中，在600nm下测定吸光值。按照公式计算交互凝集率。

交互凝集率(％)＝[(A_pat+A_lab)-2×A_mix]/(A_pat+A_lab)×100％

A_pat和A_lab：病原菌及益生菌0h的OD值；A_mix：混匀液不同时间段OD值。

自凝集结果如图1A所示，凝集作用是细胞之间的黏附作用，同一菌株细胞之间的自凝集力(Autoaggregation)是其与肠道黏附能力和其在肠道中形成有益生物膜能力相关的一个生物学性质。自凝集力强的乳酸菌，与肠道的黏附能力越强，容易形成益生生物膜，进而保护机体。通过自凝集实验结果发现，随着时间的延长，菌株间会自我凝集沉淀，到22h时，植物乳杆菌ZJUF SYS1菌株的自凝集率达78％，显著性高于模式菌株LGG。

益生菌与病原菌的交互凝集结果如图1B～1D所示，随着时间的延长，植物乳杆菌ZJUF SYS1与病原菌凝集率上升，在8h前，与大肠杆菌的交互凝集率LGG高于ZJFU SYS1，在8h时，该ZJFU SYS1与金黄色葡萄球菌的凝集率显著性高于LGG与该病原菌的凝集率；对沙门氏菌的交互凝集率则植物乳杆菌ZJUF SYS1与LGG相似，无显著性差异。益生菌的交互凝集作用能使其在肠道中与致病菌较好的凝集，并顺利排出体外，有利于肠道健康。

实施例3：斑马鱼便秘模型评价植物乳杆菌ZJUF SYS1的便秘缓解作用

本实施例采用便秘斑马鱼模型评价植物乳杆菌ZJUF SYS1缓解便秘的能力，斑马鱼与人的基因相似率高达87％，肠道与人也很相似，于是使用盐酸洛哌丁胺(Lop)成功造成便秘模型。

一、比较植物乳杆菌ZJUF SYS1在不同浓度下对便秘作用的影响

将发育12h后的斑马鱼胚胎用吸管移取到6孔板上，每孔加入20个斑马鱼胚胎以及6mL含有苯硫脲的胚胎培养液(每1mL胚胎培养液中含有苯硫脲母液10μL)，隔日更换3mL新配制的苯硫脲和胚胎培养液混合液，连续培养2d。斑马鱼发育至第5d后，移去每孔中的苯硫脲和胚胎培养液的混合液，各实验组分别加入不同浓度的受试样品6mL，其中对照组(CON)为空白对照，加入E3斑马鱼培养用系统水，模型组(LOP)加入10ug/mL盐酸洛哌丁胺(Lop)，实验组LOP-AC为10ug/mL Lop与50ug/mL阳性药物多潘立酮(AC)，实验组LOP-LGG(8)为10ug/mL Lop与10⁸CFU/mL鼠李糖乳杆菌(LGG)，实验组LOP-SYS1(8)为10ug/mL Lop与10⁸CFU/mL ZJUF SYS1，实验组LOP-SYS1(7)为10ug/mL Lop与10⁷CFU/mL ZJUF SYS1，实验组LOP-SYS1(6)为10ug/mL Lop与10⁶CFU/mL ZJUF SYS1。每组平行3份，药物处理24h后，利用显微镜录像记录斑马鱼肠蠕动情况。

在显微镜下记录观察，记录斑马鱼鱼泡后第四节鱼骨所对应的蠕动峰两次之间所需的时间(称为首个蠕动峰出现时间)，利用软件进行图片分析，比较不同药物处理组与空白对照组、造模组之间的斑马鱼肠道蠕动速度差异。

实验结果如图2所示，斑马鱼模型结果显示，使用Lop造模后，与空白对照相比，斑马鱼肠道首个蠕动峰显著性变慢，而在浓度10⁸CFU/mL与10⁷CFU/mL剂量下植物乳杆菌ZJUFSYS1的干预可以显著性加速肠道蠕动，其蠕动速度接近正常组，其缓解便秘能力与多潘立酮无显著性差异，而模式菌LGG则未表现出该作用。

二、比较不同植物乳杆菌菌株对便秘缓解的作用

本实验比较植物乳杆菌ZJUF SYS1与其他植物乳杆菌的缓解便秘的能力，比较的菌株有植物乳杆菌YSHM1、ZW、MYN8、HN9、YJ24，均为课题组前期分离获得的植物乳杆菌菌株。YSHM1、ZW、YJ24均分离自四川泡菜，MYN8分离自云南奶酪，基因比对分析鉴定为植物乳杆菌；HN9参见申请号为201711404582.X的中国专利。

斑马鱼便秘模型处理方法同上。各实验组设置如下：对照组(CON)为空白对照，加入E3斑马鱼培养用系统水，模型组(LOP)加入10ug/mL盐酸洛哌丁胺(Lop)，实验组LOP-AC为10ug/mL Lop与50ug/mL阳性药物多潘立酮(AC)，各益生菌干预组(LOP-YSHM1、LOP-ZW、LOP-MYN8、LOP-HN9、LOP-YJ24)为10ug/mL Lop与10⁸CFU/mL各植物乳杆菌。

每组平行3份，药物处理24h后，利用显微镜录像记录斑马鱼肠蠕动情况，方法同上。

实验结果如图3所示，斑马鱼模型结果显示，使用Lop造模后，与空白对照相比，斑马鱼肠道首个蠕动峰显著性变慢，对比Lop造模组，植物乳杆菌ZJUF SYS1的干预可以显著性加速肠道蠕动，对比其他几组植物乳杆菌(包括植物乳杆菌YSHM1、ZW、MYN8、HN9、YJ24)，植物乳杆菌ZJUF SYS1干预后的肠道蠕动作用具有显著性优势。

三、比较植物乳杆菌ZJUF SYS1与双歧杆菌BB12的便秘缓解作用

双歧杆菌BB12是被广泛认可具有缓解便秘作用的益生菌，本实验通过斑马鱼便秘模型比较植物乳杆菌ZJUF SYS1与双歧杆菌BB12的便秘缓解作用。本实验使用的BB12生产厂家为丹麦科汉森股份有限公司。

斑马鱼便秘模型处理方法同上。各实验组设置如下：对照组(CON)为空白对照，加入E3斑马鱼培养用系统水，模型组(LOP)加入10ug/mL盐酸洛哌丁胺(Lop)，实验组LOP-AC为10ug/mL Lop与50ug/mL阳性药物多潘立酮(AC)，实验组LOP-SYS1(8)、LOP-SYS1(7)、LOP-SYS1(6)分别为10ug/mL Lop与10⁸、10⁷、10⁶CFU/mL ZJUF SYS1，实验组LOP-BB12(8)、LOP-BB12(7)、LOP-BB12(6)分别为10ug/mL Lop与10⁸、10⁷、10⁶CFU/mL BB12。

实验结果如图4所示，可以发现，在10⁸CFU/mL剂量下BB12比SYS1略促进肠道蠕动，而在10⁷CFU/mL与10⁶CFU/mL剂量下植物乳杆菌SYS1的肠蠕动促进效果优于双歧杆菌BB12，尤其是在10⁷CFU/mL剂量下，其肠蠕动促进效果依旧显著。

实施例4：小鼠便秘模型评价益生菌便秘缓解作用

(1)菌粉制备

将活化好的植物乳杆菌ZJUF SYS1按照1％的接种量接种到无菌的MRS液体培养基中，37℃培养24h，5000rpm离心得到菌体，用含有5％的脱脂奶粉和5％的乳糖的灭菌混合液作为冻干保护剂重悬菌体，放入冷冻干燥机中冻干。最后，采用倾注平板法计数冻干后得到的菌粉。

(2)实验喂养及分组情况

将6周龄健康雄性BALB/C小鼠36只放入动物房内饲喂普通饲料平衡7d，使其适应实验环境(12h白天/黑夜)。平衡期结束后，随机分成3组，分别为正常组(CON，灌胃无菌生理盐水16天，2次/天，每日10:00开始灌胃无菌生理盐水10mg/kg.bw，半小时后灌胃无菌生理盐水，0.20mL/次)，模型组(LOP，每日10:00开始灌胃盐酸洛哌丁胺10mg/kg.bw，1次/天，半小时后灌胃无菌生理盐水0.20mL/次)，干预组(LOP-SYS1，每日10:00开始灌胃盐酸洛哌丁胺10mg/kg.bw，1次/天，半小时后灌胃植物乳杆菌ZJUF SYS1，5*10¹⁰CFU/mL，0.20mL/次)。小鼠每组12只，分为3笼，每笼4只，环境(22±2℃)，湿度30-70％，小鼠自由摄食和饮水，每4天记录1次体重、采食量。第14天进行首粒黑便实验与5h内排便颗粒数实验。本动物实验中所用的方法均经过浙江中医药大学伦理委员会审阅并批准(No20220425-28)。

(3)小鼠排便实验

小鼠灌胃第14天进行小鼠排便实验。检测方法如下：实验第13天晚上给予小鼠禁食不禁水16h，实验第14天，各组均灌胃盐酸洛哌丁胺10mg/kg.bw，空白对照组灌胃同等体积的蒸馏水。0.5h后，空白组和模型对照组用墨汁灌胃，样品组灌胃含有对应内容物的墨汁溶液，并开始计时。将小鼠放置代谢笼中，立即恢复正常饮食。观察并记录每只小鼠首粒排黑便时间，以模型组最后一只小鼠的首粒黑便时间为终止时间，超过模型组首粒黑便时间的处理组则说明无效。搜集5h内粪便并分析排便粒数、5h内粪便总重量(湿重)和粪便含水量。

体重和能量摄入结果如图5所示，体重和能量摄入是研究小鼠生长情况的重要指标，以第16天进行数据统计，图5A和5B分别为小鼠的平均每日能量摄入量和体重增重值，在实验期内，各组别小鼠的能量摄入量无显著性区别，而体重增长则模型组显著性低于正常对照组，而植物乳杆菌ZJUF SYS1干预后，其体重增长与正常组无显著性差异。

首颗黑便时间、5h排便颗粒数、干湿重、粪便水分含量指标是评价小鼠便秘最直观的指标，实验结果如图6所示。LOP造模后小鼠对比正常对照组的首颗黑便时间显著性延长、5h内粪便颗粒数显著性降低，粪便含水量显著性降低，粪便湿重显著性降低，说明LOP成功将小鼠造成便秘模型。使用植物乳杆菌ZJUF SYS1干预后，显著性加快了便秘小鼠的肠蠕动，主要表现在显著性缩短首颗黑便时间，显著性提升粪便颗粒数至正常水平。除促进肠蠕动外，植物乳杆菌ZJUF SYS1的干预使便秘小鼠的粪便含水量恢复至正常水平。

Claims

1.一种植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1，其特征在于，该植物乳杆菌的保藏号为CCTCC NO:M 2022662。

2.如权利要求1所述的植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1在制备抑制胃肠道致病菌的药物或功能食品中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述胃肠道致病菌包括大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌中的一种或多种。

4.如权利要求1所述的植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1在制备缓解便秘的药物或功能食品中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述便秘为功能性便秘。

6.一种预防或治疗便秘的药物组合物，其特征在于，包括有效剂量的如权利要求1所述的植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1和药学上可接受的载体。

7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中含有活性植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1的有效剂量为10⁷～10¹⁰CFU。

8.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物制剂形式为口服制剂。

9.一种缓解便秘的功能食品或食品配料，其特征在于，包括如权利要求1所述的植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)ZJUF SYS1和食品上可接受的辅料。