CN116790431A - 能够缓解便秘与腹泻的婴儿源动物双歧杆菌乳亚种、微生物菌剂及其应用 - Google Patents

能够缓解便秘与腹泻的婴儿源动物双歧杆菌乳亚种、微生物菌剂及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及微生物领域，尤其涉及能够缓解便秘与腹泻的婴儿源动物双歧杆菌乳亚种、微生物菌剂及其应用。本发明提供了动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)AUI2301，其保藏编号为：CGMCC No.26770。本发明的AUI2301来源于中国健康婴儿的粪便，属于婴幼儿肠道的优势菌种之一。在便秘模型中，AUI2301能够显著缩短首次排黑便时间，并回调乙酰胆碱脂酶水平；在腹泻模型中，干预第二天即可显著降低腹泻评分并降低盲肠器官指数；在两个模型中的效果优于目前广泛应用的鼠李糖乳杆菌LGG。

Description

能够缓解便秘与腹泻的婴儿源动物双歧杆菌乳亚种、微生物 菌剂及其应用
技术领域
本发明涉及微生物领域，尤其涉及能够缓解便秘与腹泻的婴儿源动物双歧杆菌乳亚种、微生物菌剂及其应用。
背景技术
肠道微生物在维持宿主健康中发挥重要作用，大量共生细菌在胃肠道内寄居、繁殖，并对维持最佳的宿主生理生化代谢过程具有至关重要的影响。微生物菌群通过直接抵御入侵微生物或协调合适的免疫应答以保护宿主免受感染。随着人们生活工作压力的增加，饮食结构的改变，以及过度服用抗生素药物等外界因素，导致人体肠道微生物的组成和代谢活动发生改变，从而影响宿主肠道微生物的结构和健康。
便秘是一种常见的胃肠道疾病，主要表现为排便次数少，排便困难和粪便干硬等。目前认为便秘的发生于肠道神经系统功能性障碍，内脏高敏感性，胃肠动力减慢等多种因素有关。
抗生素相关性腹泻(AAD)是一种肠道菌群失调疾病，主要是由于长期使用抗生素引起。据统计，在接受抗生素治疗的患者中，约有5％至39％的患者可能出现轻至中度腹泻。AAD的主要机制包括破坏肠道屏障、影响免疫平衡、破坏肠道微生物组的正常组成以及改变肠道代谢产物。
双歧杆菌是婴儿胃肠道的主要成员之一，作为益生菌，它可以通过调整肠道菌群、代谢产生短链脂肪酸、缓解炎症反应、增强结肠蠕动、增强肠道屏障的稳定性等来保护肠道，同时释放肠道神经递质和肠道免疫反应物质来调节肠道运动，此外，益生菌还能够缓解腹泻状态，修复器官损伤。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了能够缓解便秘与腹泻的婴儿源动物双歧杆菌乳亚种、微生物菌剂及其应用。本发明的动物双歧杆菌乳亚种AUI2301(保藏编号为CGMCCNO.26770)来源于中国健康婴儿的粪便，属于婴幼儿肠道的优势菌种之一。在便秘模型中，AUI2301能够显著缩短首次排黑便时间，并回调乙酰胆碱脂酶水平；在腹泻模型中，干预第二天即可显著降低腹泻评分并降低盲肠器官指数；在两个模型中的效果优于目前广泛应用的鼠李糖乳杆菌GG(Lacticaseibacillus rhamnosus GG，LGG)。动物双歧杆菌AUI2301可用于制备能够治疗或预防便秘和抗生素相关性腹泻的食品或药品，特别可用于具有干预或治疗便秘和抗生素相关性腹泻的婴幼儿奶粉中。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalissubsp.lactis)，其保藏编号为：CGMCC No.26770。
本发明还提供了微生物菌剂，包括上述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)以及可接受的助剂。
本发明还提供了上述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)和/或上述微生物菌剂在制备干预和/或治疗功能性便秘的产品中的应用。
在本发明的一些实施方案中，上述应用中，所述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalissubsp.lactis)和/或所述微生物菌剂改善排便状态和/或缩短排便时间。
在本发明的一些实施方案中，上述应用中，所述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalissubsp.lactis)和/或所述微生物菌剂促进兴奋性神经递质AchE的分泌和/或降低抑制性神经递质NO的分泌。
在本发明的一些实施方案中，上述应用中，所述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalissubsp.lactis)和/或所述微生物菌剂松弛平滑肌和/或促进胃肠道运动。
本发明还提供了上述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)和/或上述微生物菌剂在制备干预和/或治疗抗生素相关腹泻的产品中的应用。
在本发明的一些实施方案中，上述应用中，所述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalissubsp.lactis)和/或所述微生物菌剂缓解腹泻状态和/或与所述抗生素相关腹泻的器官的损伤。
本发明还提供了产品，包括上述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalis subsp.lactis)和/或上述微生物菌剂以及可接受的助剂或辅料。
在本发明的一些实施方案中，上述产品中，包括：益生菌制品。
在本发明的一些实施方案中，上述产品中，所述益生菌制品包括：发酵乳、乳饮料、活菌制剂和/或发酵果蔬饮料中的一种或多种。
本发明提供了动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalissubsp.lactis)，其保藏编号为：CGMCC No.26770。
本发明的有益效果包括：
(1)本发明的动物双歧杆菌乳亚种AUI2301(保藏编号为CGMCC NO.26770)来源于中国健康婴儿的粪便，属于婴幼儿肠道的优势菌种之一。在便秘模型中，AUI2301能够显著缩短首次排黑便时间，并回调乙酰胆碱脂酶水平；在腹泻模型中，干预第二天即可显著降低腹泻评分并降低盲肠器官指数；在两个模型中的效果优于目前广泛应用的鼠李糖乳杆菌GG(Lacticaseibacillus rhamnosus GG，LGG)。动物双歧杆菌乳亚种AUI2301可用于制备能够治疗或预防便秘和抗生素相关性腹泻的食品或药品，特别可用于具有干预或治疗便秘和抗生素相关性腹泻的婴幼儿奶粉中。
(2)本发明的动物双歧杆菌乳亚种AUI2301具有较好的耐酸和耐胆盐能力、免疫调节能力。体内动物实验表明，本发明的动物双歧杆菌乳亚种AUI2301具有干预或治疗便秘的能力，具有干预或治疗抗生素相关性腹泻的能力，可用于发酵乳，乳酸菌饮料等食品、功能性食品与药品的生产中。
生物保藏说明
生物材料：AUI2301；分类命名：动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalissubsp.lactis)；于2023年03月09日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；保藏编号：CGMCCNo.26770。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1示实施例4中AUI2301产生物胺能力测定的图片；其中：A示AUI2301实验组、B示LGG对照组、C示金黄色葡萄球菌；其中：①示组氨酸脱羧酶；②示赖氨酸脱羧酶、③示酪氨酸脱羧酶、④示鸟氨酸脱羧酶；
图2示AUI2301实验组和LGG对照组的溶血能力测定图片；其中：左示AUI2301，右示LGG；
图3示空白组、模型组、LGG对照组和s59实验组(即为本发明AUI2301菌株)的便秘型小鼠血清中一氧化氮(NO)的含量；
图4示空白组、模型组、LGG对照组和s59实验组(即为本发明AUI2301菌株)的便秘型小鼠血清中乙酰胆碱酯酶(AchE)的含量；
图5示空白组、模型组、LGG对照组和s59实验组(即为本发明AUI2301菌株)的腹泻型小鼠的粪便含水量；
图6示空白组、模型组、LGG对照组和s59实验组(即为本发明AUI2301菌株)的腹泻型小鼠的盲肠器官指数；
图7示本发明菌株的镜检图；
图8示本发明菌株的菌落图。
具体实施方式
本发明公开了能够缓解便秘与腹泻的婴儿源动物双歧杆菌乳亚种、微生物菌剂及其应用。
应该理解，表述“……中的一种或多种”单独地包括每个在所述表述后叙述的物体以及所述叙述的物体中的两者或更多者的各种不同组合，除非从上下文和用法中另有理解。与三个或更多个叙述的物体相结合的表述“和/或”应该被理解为具有相同的含义，除非从上下文另有理解。
术语“包括”、“具有”或“含有”，包括其语法同义语的使用，通常应该被理解为开放性和非限制性的，例如不排除其他未叙述的要素或步骤，除非另有具体陈述或从上下文另有理解。
应该理解，只要本发明仍可操作，步骤的顺序或执行某些行动的顺序并不重要。此外，两个或更多个步骤或行动可以同时进行。
本文中的任何和所有实例或示例性语言如“例如”或“包括”的使用，仅仅打算更好地说明本发明，并且除非提出权利要求，否则不对本发明的范围构成限制。本说明书中的任何语言都不应解释为指示任何未要求保护的要素对于本发明的实践是必不可少的。
此外，用以界定本发明的数值范围与参数皆是约略的数值，此处已尽可能精确地呈现具体实施例中的相关数值。然而，任何数值本质上不可避免地含有因个别测试方法所致的标准偏差。因此，除非另有明确的说明，应当理解本公开所用的所有范围、数量、数值与百分比均经过“约”的修饰。在此处，“约”通常是指实际数值在一特定数值或范围的正负10％、5％、1％或0.5％之内。
本实施例采用传统涂布平板分离法从采集的样品中分离乳酸菌，通过模拟人体胃肠道的环境来筛选具有耐酸与耐胆盐能力的菌株，确保其可到达胃肠道中，从而进一步探究其对肠道疾病的治疗作用。功能性便秘小鼠通过灌胃盐酸洛哌丁胺进行造模，抗生素相关性腹泻小鼠通过灌胃盐酸林可霉素进行造模。
本发明目的是提供一株能够干预或治疗便秘和抗生素相关性腹泻的动物双歧杆菌；
本发明通过以下步骤获得动物双歧杆菌AUI2301：
本发明提供的AUI2301菌株(保藏编号为CGMCC No.26770)与s59菌株与为同一株菌株；
通过改良MRS培养基从新鲜婴儿粪便中分离双歧杆菌；
通过对分离株进行人工胃液耐受性和耐胆盐测试，获得良好耐受性菌株；
通过对AUI2301进行抗生素耐药性测试，产生物胺能力测试和溶血性测试，获得安全性菌株；
利用动物模型研究AUI2301对功能性便秘和抗生素相关性腹泻的干预或治疗作用。
本发明中，相关试剂及培养基配方：
改良MRS培养基：称取牛肉膏10.0g，酵母浸膏5.0g，蛋白胨10.0g，葡萄糖20.0g，醋酸钠5.0g，吐温-80 1mL，K2HPO42.0 g，柠檬酸三铵2.0g,MgSO4·7H2O 0.20g，MnSO4·4H2O0.05g，蒸馏水1000mL，121℃灭菌15min，冷却备用，使用前加入200μL/10mL半胱氨酸盐酸盐溶液和100μL/10mL莫匹罗星。
生理盐水：9.0g的Nacl溶于1000mL蒸馏水中，121℃灭菌15min，冷却备用。
墨汁：取10.0g阿拉伯胶，加少量水煮沸，后加入5.0g活性炭至上述溶液中煮沸三次，待冷却后定容到100mL，放入4℃冰箱冷藏备用，用前摇匀。
人工胃液的配制：分别取0.5g NaCl和0.3g胃蛋白酶溶解于去离子水中并定容至100mL，用1.0mol/L的盐酸调pH至2.5，0.22μm滤膜过滤除菌，4℃冰箱冷藏备用。
模拟胆盐的配制：称取一定量的胆盐于MRS液体培养基中，使其胆盐浓度(w/v)为0.075％、0.1％，调节pH至6.5±0.2，121℃灭菌15min，冷却备用。
模拟肠液配制方法：称取0.1％胰蛋白酶和0.075％或0.1％胆盐溶解于PBS，用0.1mol/L NaOH调pH至8.0，0.22μm滤膜过滤除菌，4℃冰箱冷藏备用。
AUI2301菌悬液的制备：将活化好的动物双歧杆菌AUI2301，37℃静置厌氧培养24h后，6000r/min离心10min，用无菌生理盐水洗涤离心两次后获得菌泥，用PBS溶液调整活菌数为1.0×109CFU/mL。
LGG对照组菌悬液的制备：将活化好的鼠李糖乳杆菌(LGG)，37℃静置培养24h后，6000r/min离心10min，用无菌生理盐水洗涤离心两次后获得菌泥，用PBS溶液调整活菌数为1.0×109CFU/mL。
实验动物为SPF级3-4周龄KM小鼠，购于济南朋悦实验动物繁殖有限公司；测定的一氧化氮(NO)、乙酰胆碱酯酶(AchE)水平用购自于上海酶联生物科技有限公司的试剂盒，胆盐购自于北京索莱宝科技有限公司；胰蛋白酶和胃蛋白酶自于生工生物工程(上海)股份有限公司。
本发明实施例1～实施例7中，所用原料及试剂均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1样品采集
专业人员在婴儿排便时间守候，采集4g左右的婴儿新鲜粪便中心样品置于装有30％体积分数甘油的10mL无菌离心管中，加入灭菌液体石蜡油密封。
实施例2双歧杆菌的分离
将实施例1获得的婴儿新鲜粪便样品稀释至10-2、10-3和10-4稀释度，倾注于改良MRS培养基中，于37℃厌氧培养48h，每个平板挑选3-4个菌落，形态不同、具有典型乳酸菌菌落形态特征且有溴甲酚紫变色(变黄)反应的单菌落，随后在含0.3％溴甲酚紫的改良MRS琼脂培养基上进行纯化和产酸复筛，直至得到纯化的单菌落。
实施例3AUI2301的耐受消化应激能力试验
将活化好的AUI2301取1.0mL菌悬液分别接种至9.0mL 0.075％胆盐浓度的改良MRS培养基中，于37℃厌氧培养，分别在0h和3h用平板计数法测定活菌数；
将活化好的AUI2301取1.0mL菌悬液分别接种至9.0mL 0.1％胆盐浓度的改良MRS培养基中，于37℃厌氧培养，分别在0h和3h用平板计数法测定活菌数；
AUI2301活化至2代，取1.0mL AUI2301菌悬液接种至9.0mL的pH 2.5人工胃液，于37℃厌氧培养，分别在0h和3h利用平板计数法测定活菌数；
根据公式计算存活率：
存活率(％)＝应激后的活菌数/初始活菌数×100％，如表1所示，菌株AUI2301对0.075％胆盐、0.1％胆盐均具有良好耐受性，处理3h后存活率均在60％以上；同时，该菌对人工胃液也表现出良好的耐受性，存活率高达79.13％。
表1AUI2301耐酸耐胆盐能力
菌株名称 0.075％胆盐 0.1％胆盐 人工胃液
处理前活菌数(108CFU/mL) 15.17±1.02 15.17±1.02 15.17±1.02
处理前活菌数(108CFU/mL) 11.87±0.57 9.23±0.68 8.47±0.03
存活率(％) 78.24±3.75 60.88±4.49 79.13±4.21
实施例4AUI2301的安全性评价
(1)抗生素耐药性评价
吸取100μL菌悬液(用无菌PBS调节OD600至0.6)均匀涂布于20mL已凝固的改良MRS琼脂培养基表面，待菌液完全吸收后，用无菌镊子将药敏纸片贴于培养基表面，静置30min后转移至37℃倒置厌氧培养18～24h，待抑菌圈出现后立即取出测量直径。使用LGG作为对照菌株。
表2AUI2301抗生素耐药性
注：S：敏感(sensitivity)；I：中介(insensitive)；R：耐药(resistant)
由表2可知，AUI2301对大多数抗生素敏感，对四环素和环丙沙星表现中介，对链霉素表现出耐药。
(2)AUI2301产生物胺能力测定
取活化2代的AUI2301菌悬液分别划线于添加了相应前体氨基酸的氨基酸脱羧酶检测培养基，37℃倒置厌氧培养48h后观察平板颜色变化，若无颜色变化则结果为阴性，若平板变紫则结果为阳性。以LGG和金黄色葡萄球菌作为对照菌株。
表3AUI2301产生物胺能力
菌株名称 组胺 尸胺 酪胺 腐胺
AUI2301 - - - -
LGG - - - -
金黄色葡萄球菌 - + + +
由表3和图1可知，AUI2301不产生组胺、尸胺、酪胺、腐胺。
(3)AUI2301溶血性测试
取活化2代的AUI2301菌悬液划线于哥伦比亚血琼脂平板，37℃倒置厌氧培养48h后观察单菌落周围颜色变化。以LGG作为对照菌株，若单菌落周围出现草绿色圈，为α溶血，若单菌落周围出现透明圈则为β溶血，若菌落周围无颜色变化为γ溶血，即不溶血。
表4AUI2301的溶血性
菌株名称 溶血结果
AUI2301 不溶血
LGG 不溶血
由表4和图2可知，AUI2301不溶血。
实施例5AUI2301对功能性便秘小鼠的影响
(1)动物分组和建立功能性便秘模型的方法：
昆明小鼠适应性喂养一周后，分为4组，每组8只。鼠李糖乳杆菌(LGG)对照组，模型组，AUI2301实验组(活化2代)连续造模7天(10μL/g，一天一次)灌胃盐酸洛哌丁胺(10mg/kgBW)。建立便秘模型后，空白组和模型对照组灌相同剂量的无菌生理盐水，鼠李糖乳杆菌(LGG)对照组和AUI2301实验组灌相同剂量的含该组受试菌的菌悬液，连续干预14天(10μL/g,一天一次)。
(2)对功能性便秘小鼠排便和小肠运动功能的影响：
在实验结束后，禁食不禁水16小时，将每组中的4只小鼠单独放入笼子里，各组灌胃洛哌丁胺10mg/kg诱导小鼠功能性便秘模型，30min后实验组给予含菌的墨汁，空白组和模型组给予空白墨汁。以灌墨汁后开始，记录各小鼠首次排黑便时间以及6h排黑便粒数和重量。其余4只各组灌胃洛哌丁胺10mg/kg诱导小鼠功能性便秘模型，LGG对照组和AUI2301实验组给予含对应菌株的墨汁，空白组和模型组给予空白墨汁。给予墨汁后25min小鼠脱颈椎处死，迅速取出幽门至盲肠部分的肠道，不改变肠道长度的情况下拉直，计算墨汁推进率。
墨汁推进率＝L1/L0×100％
式中：L1(cm)为墨汁推进长度；L0(cm)为幽门到盲肠的长度。
表5AUI2301对小鼠排便和小肠运动功能的影响
注：不同字母表示具有差异性(p<0.05)
结果如表5所示，与空白组相比，模型组小鼠首次排黑便时间显著延长(p<0.01)，6h拍黑便粒数减少(p<0.05)，墨汁推进率降低(p<0.01)，说明小鼠造模成功。与模型组相比，给予动物双歧杆菌AUI2301干预后，其首次排黑便时间缩短(p<0.01)，6h排黑便粒数增加(p<0.05)，墨汁推进率升高(p<0.01)；与LGG对照组相比，均无显著差异，说明本发明菌株AUI2301可以改善便秘小鼠的排便状态，肠运动状态。
(3)对功能性便秘小鼠血清神经递质表达水平的影响
结果如图3、图4和表6所示，与空白组相比，模型组小鼠血清中的AchE水平显著降低(p<0.01)，NO水平显著升高(p<0.01)。与模型组相比，动物双歧杆菌AUI2301干预后的小鼠血清中AchE水平显著增高(p<0.01)，NO水平显著降低(p<0.01)；与空白组相比，AUI2301的AchE水平无显著差异，而NO水平也接近正常水平。因此菌株AUI2301能够促进兴奋性神经递质AchE的分泌，降低抑制性神经递质NO的含量，说明本发明菌株AUI2301能够松弛平滑肌，促进胃肠道运动。
表6AUI2301对NO和AchE表达水平的影响
组别 NO(μmol/L) AchE(nmol/L)
空白组 30.40±1.46c 155.43±3±7.16a
模型组 43.33±0.98a 86.42±19.80c
LGG对照组 33.88±2.15b 119.92±16.39b
AUI2301实验组 34.56±1.84b 139.42±3.79ab
实施例6AUI2301对抗生素相关性腹泻小鼠的影响
(1)动物分组和建立抗生素相关性腹泻小鼠的方法
昆明小鼠适应性喂养一周后，分为4组，每组8只。鼠李糖乳杆菌(LGG)对照组，模型组，AUI2301实验组(活化2代)连续造模3天(10μL/g，一天两次)灌胃盐酸林可霉素(3g/kgBW)。建立ADD模型后，空白组和模型组灌相同剂量的无菌生理盐水，鼠李糖乳杆菌(LGG)对照组和AUI2301实验组灌相同剂量的含该组受试菌的菌悬液，连续干预6天(10μL/g,一天一次)。
(2)对抗生素相关性腹泻小鼠粪便含水量的影响
如图5和表7所示，与模型组相比，AUI2301实验组的粪便含水量率先恢复正常，说明本发明菌株AUI2301能够缓解腹泻状况。
表7AUI2301对小鼠粪便含水量的影响
组别 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
空白组 59 60.5 61.1 60.2 58.6 60.5 59.2 61.2 60.7 60.6
模型组 58 72.6 68.2 68.8 66.4 65.3 64.5 63 61.8 61
LGG对照组 60 68.5 68.6 68.7 64.7 65 64.6 65.5 62.1 61.7
AUI2301实验组 56.5 71 71.6 68.6 63.2 63.7 62 62.9 62.5 62.7
(3)对抗生素相关性腹泻小鼠器官指数的影响
如图6和表8所示，模型组小鼠的盲肠指数为3.19±0.06％，显著高于空白组1.73±0.07％(p<0.01)，AUI2301实验组和LGG对照组干预后的盲肠指数下降到1.96±0.11％和2.18±0.14％，而AUI2301无明显差异(p>0.05)，说明本发明菌株能够有效缓解部分器官的损伤。
表8AUI2301对盲肠指数的影响
组别 盲肠指数(％)
空白组 1.78±0.07c
模型组 3.19±0.06a
LGG对照组 2.18±0.14b
AUI2301实验组 1.96±0.11bc
实施例7菌株的鉴定
分别观察菌落形态和镜检形态，如图7和图8所示。
菌株16S rDNA测序鉴定：以菌株AUI2301的基因组DNA作为PCR的扩增模板，采用通用16S rDNA引物进行PCR扩增；电泳检测扩增产物后，
送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行测序。将测序得到的序列提交
BLAST进行比对分析，如SEQ ID NO:1所示结果见表9。
表916S rDNA对比结果
菌株 菌种 同源性
AUI2301 动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis) 100％
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)，其特征在于，其保藏编号为：CGMCCNo.26770。
2.微生物菌剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)以及可接受的助剂。
3.如权利要求1所述的动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)和/或如权利要求2所述的微生物菌剂在制备干预和/或治疗功能性便秘的产品中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)和/或所述微生物菌剂改善排便状态和/或缩短排便时间。
5.如权利要求3或4所述的应用，其特征在于，所述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)和/或所述微生物菌剂促进兴奋性神经递质AchE的分泌和/或降低抑制性神经递质NO的分泌。
6.如权利要求3至5任一项所述的应用，其特征在于，所述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)和/或所述微生物菌剂松弛平滑肌和/或促进胃肠道运动。
7.如权利要求1所述的动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)和/或如权利要求2所述的微生物菌剂在制备干预和/或治疗抗生素相关腹泻的产品中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)和/或所述微生物菌剂缓解腹泻状态和/或与所述抗生素相关腹泻的器官的损伤。
9.产品，其特征在于，包括如权利要求1所述的动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)和/或如权利要求2所述的微生物菌剂以及可接受的助剂或辅料。
10.如权利要求9所述的产品，其特征在于，包括：益生菌制品。
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