CN115957250A - 大籽獐牙菜总黄酮的提取及其在清除氧自由基中的应用 - Google Patents
大籽獐牙菜总黄酮的提取及其在清除氧自由基中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115957250A CN115957250A CN202211291678.0A CN202211291678A CN115957250A CN 115957250 A CN115957250 A CN 115957250A CN 202211291678 A CN202211291678 A CN 202211291678A CN 115957250 A CN115957250 A CN 115957250A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- swertia
- franch
- davidi
- swertia davidi
- total flavonoids
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241001530209 Swertia Species 0.000 title claims abstract description 71
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 title claims abstract description 35
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 title claims abstract description 35
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 34
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims description 17
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 title abstract description 24
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 title abstract description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 title abstract description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 72
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 claims abstract description 38
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 claims abstract description 38
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 claims abstract description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 27
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 claims abstract description 26
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 11
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 10
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 36
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 7
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 abstract description 17
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 13
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 abstract 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 20
- -1 aglycones Chemical class 0.000 description 18
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 12
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 10
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 10
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 10
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 7
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 7
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 6
- WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N pyrogallol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1O WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 4
- HDPISCIDKUMRDI-UHFFFAOYSA-M N(=O)[O-].[Na+].[N+](=O)([O-])[O-].[Al+3] Chemical compound N(=O)[O-].[Na+].[N+](=O)([O-])[O-].[Al+3] HDPISCIDKUMRDI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 3
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 229940079877 pyrogallol Drugs 0.000 description 3
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 235000008658 Artemisia capillaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000092668 Artemisia capillaris Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241001071795 Gentiana Species 0.000 description 1
- 241001135871 Gentiana scabra Species 0.000 description 1
- 241001071804 Gentianaceae Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000967255 Swertia macrosperma Species 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- HEILIGJNYTWOHU-UHFFFAOYSA-N ethanol 2-hydroxybenzoic acid Chemical compound CCO.OC(=O)C1=CC=CC=C1O HEILIGJNYTWOHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 150000007964 xanthones Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明提供了一种大籽獐牙菜总黄酮的制备方法及其在清除氧自由基中的应用,属于植物有效成分分离领域和医药领域。本发明将大籽獐牙菜洗净,阴干,粉碎后通过加热回流法或、超声波辅助法提取得大籽獐牙菜总黄酮粗提物,再将总黄酮粗提物用水充分溶解后加入D‑101大孔吸附树脂柱中静置吸附后;用甲醇溶液洗脱,洗脱液浓缩至稠膏,得到大籽獐牙菜总黄酮。总黄酮的自由基清除活性结果显示,大籽獐牙菜总黄酮具有良好的体外DPPH自由基清除活性,羟基自由基清除活性和超氧阴离子消除活性,可以作为活性成分用于制备清除自由基的保健品和药物。
Description
技术领域
本发明涉及一种大籽獐牙菜总黄酮的制备方法,并对大籽獐牙菜总黄酮的体外DPPH自由基清除活性,羟基自由基清除活性和超氧阴离子消除活性进行研究,以期用于制备自由基清除活性的保健品和药物中,属于植物有效成分分离领域和医药领域。
背景技术
大籽獐牙菜(学名:
Swertia macrosperma (C. B. Clarke) C. B. Clarke)是龙胆科獐牙菜属植物,别名龙胆草。主要产于西藏、四川等高海拔地区,贵州、广西、湖北等地也有分布,是一种传统的民间全草用药材,在藏药中常作为“蒂达”和“藏茵陈”的替代品,主要用来治疗肝胆疾病,具有清热解毒、疏肝利胆之功效。迄今文献报道从大籽獐牙菜中分离得到的化合物主要包括黄酮及苷元、山酮、环烯醚萜、甾体及三萜类等。药理研究表明该属植物具有抗氧化、强心、抗菌、抗内毒素、降血糖、保肝、及抗肝脏自发性脂质过氧化等作用。熊成文等研究了大籽樟牙菜抗氧化作用,通过测定大籽樟牙菜不同提取部位对血浆总抗氧化能力(T-AOC)、对家兔肝脏自发性脂质过氧化作用,发现大籽璋牙菜具有很强的提高血浆总抗氧化能力及抗肝脏自发性脂质过氧化的作用。目前,对于大籽獐牙菜提取物及活性部位对体外DPPH自由基清除活性,羟基自由基清除活性和超氧阴离子消除活性的研究尚未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种大籽獐牙菜总黄酮的制备方法,并测定了总黄酮的体外DPPH自由基清除活性,羟基自由基清除活性和超氧阴离子消除活性,为大籽獐牙菜提取物制备自由基清除活性的保健品和药物研究提供数据支撑。
一、大籽獐牙菜总黄酮的制备
本发明大籽獐牙菜总黄酮的制备方法,包括以下工艺步骤:
(1)将大籽獐牙菜洗净,阴干,再粉碎至细度为0.1~3.0 厘米。
(2)将大籽獐牙菜粉用醇-水混合溶液进行提取,提取液经过滤,浓缩,得到总黄酮粗提物。
醇-水混合溶液中,醇为甲醇或乙醇,醇在溶液中的体积百分数为30~100%。
总黄酮粗提物可以通过加热回流法提取,具体提取工艺为:大籽獐牙菜粉与醇-水混合溶液的质量比为1:5~1:15,加热温度为50~100℃,提取2~3次,每次提取1.0~2.0小时。
总黄酮粗提物也可以通过超声波辅助提取,具体提取工艺为:大籽獐牙菜粉与醇-水混合溶液的质量比为1:5~1:15,加热温度为50~80℃,提取2~3次,每次提取0.5~1.0小时。
(3)将总黄酮粗提物用水充分溶解后加入D-101大孔吸附树脂柱中,静置吸附24小时;用3.5倍量的60%甲醇溶液洗脱,洗脱液分别浓缩至稠膏,得到大籽獐牙菜总黄酮。
(4)使用亚硝酸钠-硝酸铝法测定大籽獐牙菜总黄酮的含量。结果显示,加热回流法提取的浸膏中总黄酮含量最高为67.0%。超声波辅助提取浸膏中总黄酮含量最高为65.0%。
二、大籽獐牙菜总黄酮的活性测定
1、大籽獐牙菜总黄酮体外DPPH自由基清除活性
实验步骤:精密称取 40.0 毫克的 DPPH 试剂,加100 毫升无水乙醇溶解,避光保存。分别准确吸取2.0 毫升不同质量浓度的样品溶液,加入2.0 毫升L 0.4 毫克/毫升DPPH溶液,混合均匀,室温下避光反应30 分钟后,用无水乙醇调零,测定溶液在517 纳米处测定吸光度A1;然后用无水乙醇代替样品溶液后在同一波长处测定吸光度为A0;用无水乙醇代替DPPH溶液后测定的吸光度为A2。用维生素C(Vc)作阳性对照组,每个样品重复测三次取均值代入计算DPPH自由基清除率的公式中进行抗氧化活性研究。计算公式如下:
DPPH自由基清除率(%)=[A0-(A1-A2)/A0]×100%
式中,A0表示DPPH溶液+无水乙醇的吸光度;A1表示DPPH自由基溶液+样品溶液的吸光度;A2表示样品溶液+无水乙醇的吸光度。
图1为大籽獐牙菜提取液对DPPH自由基的消除能力。由图 1 可以看出,加热回流法和超声波法提取大籽獐牙菜中总黄酮的样品浓度与DPPH 自由基的清除能力均具有较好的量效关系。当样品溶液的浓度从0.05毫克/毫升增加到 0.8 毫克/毫升时,加热回流样品对DPPH 自由基的消除能力从50.66%增加到92.11%,超声提取组对 DPPH 自由基的消除能力从34.98%增加到90.64%;从0.08毫克/毫升增加到1.6毫克/毫升时,加热回流组对DPPH自由基的清除能力从92.11%增加到92.54%,超声组对DPPH自由基的清除能力从90.64%增加到90.96%,DPPH自由基清除能力趋于平缓;样品浓度为1.6毫克/毫升时,加热回流组对DPPH自由基清除能力最大达到92.54%,超声组对DPPH自由基清除能力最大达到90.96%。阳性对照组维生素C(Vc)部分的不同浓度均对DPPH自由基具有较强的清除能力,随着维生素C(Vc)浓度的升高DPPH自由基清除能力增加不明显,当维生素C(Vc)浓度达到0.4 毫克/毫升后,DPPH自由基清除率达到平衡,继续增加维生素C(Vc)浓度DPPH自由基的消除能力不再发生变化。
2、大籽獐牙菜总黄酮体外羟基自由基清除活性
实验步骤:取不同浓度系列的测试提取的大籽獐牙菜总黄酮2 毫升,再分别加入9毫摩尔/升的FeSO4·7H2O溶液0.5 毫升和4.5 摩尔/升的水杨酸-乙醇溶液0.5 毫升,摇匀后加入H2O2溶液,在37℃条件下恒温水浴放置30 分钟,取出后510 纳米波长处测定总黄酮对·OH自由基的清除能力,以维生素C(Vc)为对照品,通过测定不同浓度的总黄酮对羟基自由基的清除能力来评价其抗氧化活性。
羟基自由基清除率(%)=[A0-(A1-A2)/A0]×100%
式中,A0表示2 毫升水+0.5 毫升 FeSO4·7H2O溶液+2 毫升水杨酸溶液+2 毫升H2O2溶液的吸光度;A1表示2 毫升样品溶液+0.5 毫升L FeSO4·7H2O溶液+2 毫升水杨酸溶液+2 毫升 H2O2溶液的吸光度;A2表示2 毫升样品溶+0.5 毫升 FeSO4·7H2O溶液+2 毫升水杨酸溶液+2 毫升水的吸光度。
图2为大籽獐牙菜提取液对羟基自由基的消除率。如图2所示,以加热回流法提取总黄酮和以超声辅助提取的及维生素C(Vc)c均对•OH自由基具有一定的清除能力,在0.1~2.5 毫克/毫升质量浓度范围内,随着浓度的增加对•OH自由基清除能力先增大再趋于平缓,且在同一质量浓度下,加热回流法提取的总黄酮对•OH自由基的清除能力较超声辅助提取总黄酮强,表明回流法和超声辅助提取的大籽獐牙菜中的总黄酮对•OH自由基均具有较好的清除能力。
3、大籽獐牙菜总黄酮体外超氧阴离子消除活性
实验步骤:分别取不同浓度系列的测试提取的大籽獐牙菜总黄酮1 毫升,再加3毫升 50毫摩尔/升 Tris-Hcl缓冲液,并在25℃条件下水浴反应20 分钟后,加0.6 毫升 20毫摩尔/升邻苯三酚溶液,保温4 分钟后滴加1 毫升 10 毫摩尔/升盐酸终止该反应。最后在325 纳米波长处测定以上样品溶液对超氧阴离子的清除能力,相同条件下测定空白对照溶液吸光度,以维生素C(Vc)为阳性对照组。
超氧阴离子的清除率(%)=[A0-(A1-A2)/A0]×100%
式中,A0表示1 毫升蒸馏水+3 毫升 Tris-Hcl缓冲液+0.6 毫升邻苯三酚溶液+1毫升盐酸的吸光度;A1表示1 毫升样液+3 毫升Tris-Hcl缓冲液+0.6 毫升邻苯三酚溶液+1毫升盐酸的吸光度;A2表示1 毫升样液+3 毫升 Tris-Hcl缓冲液+0.6 毫升蒸馏水+1 毫升盐酸的吸光度。
图3为大籽獐牙菜提取液中的总黄酮对超氧阴离子消率。由图 3可知,不同提取法制备的大籽獐牙菜中的总黄酮及维生素C(Vc)均对超氧阴离子具有一定的清除能力,在质量浓度为0.05~1.0 毫克/毫升质量浓度范围内,随着提取液质量浓度的增加对超氧阴离子的清除率也逐渐增大,这说明二者之间存在明显的量效关系。加热回流法和超声辅助提取的提取液在质量浓度为0.8 毫克/毫升时,提取液中的总黄酮对超氧阴离子清除率分别为46.43%,30.23%,分别相当于该浓度下维生素C(Vc)清除超氧阴离子能力的51.83%及33.75%,表明大籽獐牙菜总黄酮对超氧阴离子具有较好的清除能力。
综上所述,本发明通过加热回流法、超声波辅助法提取了大籽獐牙菜总黄酮粗提物,再将总黄酮粗提物用水充分溶解后加入D-101大孔吸附树脂柱中静置吸附后;用60%甲醇溶液洗脱,洗脱液分别浓缩至稠膏,得到大籽獐牙菜总黄酮。总黄酮具有良好的体外DPPH自由基清除活性,羟基自由基清除活性和超氧阴离子消除活性,可以作为活性成分用于制备清除自由基的保健品和药物。
附图说明
图1为大籽獐牙菜提取液对DPPH自由基的消除能力。
图2为大籽獐牙菜提取液对羟基自由基的消除率。
图3为大籽獐牙菜提取液中的总黄酮对超氧阴离子消率。
具体实施方式
实施例1、加热回流法制备大籽獐牙菜总黄酮
(1)将大籽獐牙菜洗净,阴干,再进行粉碎,粉碎细度为0.1~3.0 厘米;
(2)将10.0 克粉碎后的大籽獐牙菜用60%的乙醇-水为提取溶剂进行加热回流提取,加热温度为60℃,提取3次,每次提取2.0小时,大籽獐牙菜和提取溶剂的质量比为1:10,提取完过滤,合并滤液,再进行浓缩,得到总黄酮粗提物;
(3)将大籽獐牙菜总黄酮粗提物A用水充分溶解,加入D-101大孔吸附树脂柱中,静置吸附24 小时,之后按顺序分别用3.5倍量的纯水、30%甲醇、60%甲醇、85%甲醇和甲醇洗脱,各段洗脱液分别浓缩至稠膏,分别命名为A1(水相)、A2(30%甲醇相)、A3(60%甲醇相)、A4(85%甲醇相)和A5(甲醇相);洗脱液分别浓缩至稠膏;
4)使用亚硝酸钠-硝酸铝法测定大籽獐牙菜各段洗脱液总黄酮的含量。经检测,A3(60%甲醇相)部分浸膏中黄酮含量最高,为67.0%。总黄酮的自由基清除活性结果显示,其对DPPH自由基的清除率为92.54%,对羟基自由基的消除率为80.06%,对超氧阴离子的消除率为50.01%;
(6)以大籽獐牙菜总黄酮为活性组分,按药剂学可接受的辅料和规工艺制备成内服制剂,如胶囊剂、片剂、颗粒剂等。
实施例2、用超声波辅助提取法制备大籽獐牙菜总黄酮
(1)将大籽獐牙菜洗净,阴干,再进行粉碎,粉碎细度为0.1~3.0 厘米;
(2)将10.0 克粉碎后的大籽獐牙菜用65%的乙醇-水为提取溶剂进行超声波辅助提取,超声提取温度为55℃,提取2次,每次提取0.6小时,大籽獐牙菜和提取溶剂的质量比为1:5,提取完过滤,合并滤液,再进行浓缩,得到总黄酮粗提物;
(3)将大籽獐牙菜总黄酮粗提物用水充分溶解后加入D-101大孔吸附树脂柱中静置吸附24 小时,之后按顺序分别用3.5倍量的纯水、30%甲醇、60%甲醇、85%甲醇和甲醇洗脱,各段洗脱液分别浓缩至稠膏,分别命名为B1(水相)、B2(30%甲醇相)、B3(60%甲醇相)、B4(85%甲醇相)和B5(甲醇相),洗脱液分别浓缩至稠膏;
(4)使用亚硝酸钠-硝酸铝法测定大籽獐牙菜各段洗脱液总黄酮的含量:B3(60%甲醇相)部位浸膏中黄酮含量为65.0%。总黄酮的自由基清除活性结果显示,其对DPPH自由基的清除率为90.96%;对羟基自由基的消除率为71.92%对超氧阴离子的消除率为49.05%;
(5)以大籽獐牙菜总黄酮为活性组分,按药剂学可接受的辅料和规工艺制备成内服制剂,如胶囊剂、片剂、颗粒剂等。
Claims (8)
1.一种大籽獐牙菜总黄酮的制备方法,包括以下工艺步骤:
(1)将大籽獐牙菜洗净,阴干,再粉碎至细度为0.1~3.0 厘米;
(2)将大籽獐牙菜粉用醇-水混合溶液进行提取,提取液经过滤,浓缩,得到总黄酮粗提物;
(3)将总黄酮粗提物用水充分溶解后加入D-101大孔吸附树脂柱中,静置吸附24 小时;用3.5倍量的30~60%甲醇溶液洗脱,洗脱液分别浓缩至稠膏,得到大籽獐牙菜总黄酮。
2.如权利要求1所述一种大籽獐牙菜总黄酮的制备方法,其特征在于:所述醇-水混合溶液中,醇为甲醇或乙醇,醇在溶液中的体积百分数为30~100% 。
3.如权利要求1或2所述一种大籽獐牙菜总黄酮的制备方法,其特征在于:总黄酮粗提物通过加热回流法提取:大籽獐牙菜粉与醇-水混合溶液的质量比为1:5~1:15,加热温度为50~100℃,提取2~3次,每次提取1.0~2.0小时。
4.如权利要求1或2所述一种大籽獐牙菜总黄酮的制备方法,其特征在于:总黄酮粗提物通过超声波辅助提取:大籽獐牙菜粉与醇-水混合溶液的质量比为1:5~1:15,加热温度为50~80℃,提取2~3次,每次提取0.5~1.0小时。
5.如权利要求1所述方法制备的大籽獐牙菜总黄酮,其特征在于:具有体外DPPH自由基清除活性。
6.如权利要求1所述方法制备的大籽獐牙菜总黄酮,其特征在于:具有体外羟基自由基清除活性。
7.如权利要求1所述方法制备的大籽獐牙菜总黄酮,其特征在于:具有体外超氧阴离子消除活性。
8.如权利要求1所述方法制备的大籽獐牙菜总黄酮在制备具有自由基清除活性保健品和药物中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211291678.0A CN115957250A (zh) | 2022-10-21 | 2022-10-21 | 大籽獐牙菜总黄酮的提取及其在清除氧自由基中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211291678.0A CN115957250A (zh) | 2022-10-21 | 2022-10-21 | 大籽獐牙菜总黄酮的提取及其在清除氧自由基中的应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN115957250A true CN115957250A (zh) | 2023-04-14 |
Family
ID=87360749
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202211291678.0A Pending CN115957250A (zh) | 2022-10-21 | 2022-10-21 | 大籽獐牙菜总黄酮的提取及其在清除氧自由基中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN115957250A (zh) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1730027A (zh) * | 2004-08-06 | 2006-02-08 | 青海普兰特药业有限公司 | 从獐牙菜属主要药用植物中制备抗肝炎活性部位的方法 |
CN101053589A (zh) * | 2007-04-30 | 2007-10-17 | 王智森 | 藏茵陈有效成分的提取方法 |
CN105232669A (zh) * | 2015-11-05 | 2016-01-13 | 山西大学 | 一种酸枣叶黄酮提取物及其制备方法和应用 |
CN111184763A (zh) * | 2020-01-18 | 2020-05-22 | 黑龙江中医药大学 | 一种云南獐牙菜提取物及其应用 |
-
2022
- 2022-10-21 CN CN202211291678.0A patent/CN115957250A/zh active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1730027A (zh) * | 2004-08-06 | 2006-02-08 | 青海普兰特药业有限公司 | 从獐牙菜属主要药用植物中制备抗肝炎活性部位的方法 |
CN101053589A (zh) * | 2007-04-30 | 2007-10-17 | 王智森 | 藏茵陈有效成分的提取方法 |
CN105232669A (zh) * | 2015-11-05 | 2016-01-13 | 山西大学 | 一种酸枣叶黄酮提取物及其制备方法和应用 |
CN111184763A (zh) * | 2020-01-18 | 2020-05-22 | 黑龙江中医药大学 | 一种云南獐牙菜提取物及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
熊成文,贾燕花: "大籽樟牙菜抗氧化作用的实验研究", 《北方药学》, vol. 11, no. 11, pages 104 - 106 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102600219B (zh) | 黄蜀葵花总黄酮提取物及其制备方法 | |
CN112716989A (zh) | 一种芹菜籽提取物及其制备方法与应用 | |
CN102850416A (zh) | 一种油橄榄叶提取物的制备方法及所用装置 | |
CN102133266A (zh) | 一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的制备方法 | |
CN101343225A (zh) | 高纯度二咖啡酰奎宁酸类化合物的制备方法 | |
US20190022159A1 (en) | Novel method for preparing purified extracts of harpagophytum procumbens | |
CN111961022B (zh) | 一种具有神经保护作用的双黄酮类化合物及其提取分离方法 | |
CN108558837B (zh) | 黄烷醇生物碱及其制备方法和应用 | |
CN101953866A (zh) | 一种白背三七总黄酮的制备方法及应用 | |
CN105017345B (zh) | 从夏枯草中同时提取四种化合物的方法及应用 | |
CN101229335A (zh) | 酶法制备黑刺菝葜总皂苷提取物的方法 | |
WO2012061984A1 (zh) | 制备芍药内酯苷和芍药苷的方法 | |
Wu et al. | Preparation of paeoniflorin from the stems and leaves of Paeonia lactiflora Pall.‘Zhongjiang’through green efficient microwave-assisted extraction and subcritical water extraction | |
CN111635442B (zh) | 从药用植物地梢瓜中制备三种单体化合物的方法及其体外抗氧化作用 | |
CN112159451A (zh) | 一种绞股蓝皂苷提取物及其制备方法 | |
CN102805767A (zh) | 具有抗淋球菌作用的热淋清颗粒原料头花蓼提取物 | |
CN111595972A (zh) | 一种多穗柯总黄酮提取物的制备方法及质量检测方法 | |
CN101531721B (zh) | 一种三萜皂苷单体的工业化制备方法 | |
CN109053756B (zh) | 苯丙素类酯型儿茶素及其制备方法和应用 | |
CN115957250A (zh) | 大籽獐牙菜总黄酮的提取及其在清除氧自由基中的应用 | |
CN109575102A (zh) | 延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用 | |
CN113512017B (zh) | 一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用 | |
CN105646638B (zh) | 长梗冬青苷的制备方法 | |
CN101791340B (zh) | 一种复方脑得生有效成分的纯化方法 | |
CN101332216B (zh) | 杏香兔耳风总酚酸提取物及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20230414 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |