CN113512017B - 一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用 - Google Patents

一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113512017B
CN113512017B CN202111065947.7A CN202111065947A CN113512017B CN 113512017 B CN113512017 B CN 113512017B CN 202111065947 A CN202111065947 A CN 202111065947A CN 113512017 B CN113512017 B CN 113512017B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
methanol
volume ratio
senecio
fractions
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202111065947.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113512017A (zh
Inventor
李志峰
冯艳
王�琦
冯育林
何明珍
欧阳辉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine
Jiangxi Bencao Tiangong Technology Co Ltd
Original Assignee
Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine
Jiangxi Bencao Tiangong Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Jiangxi Bencao Tiangong Technology Co Ltd filed Critical Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine
Priority to CN202111065947.7A priority Critical patent/CN113512017B/zh
Publication of CN113512017A publication Critical patent/CN113512017A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113512017B publication Critical patent/CN113512017B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/34—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D309/36—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with oxygen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D309/38—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with oxygen atoms directly attached to ring carbon atoms one oxygen atom in position 2 or 4, e.g. pyrones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本申请属于医药技术领域，具体涉及一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用，所述化合物的名称为5‑亚乙基‑2‑甲基‑3‑亚甲基‑6‑氧代四氢‑2H‑吡喃‑2‑羧酸。本发明所述化合物的制备方法操作简单，可以分离获得纯的化合物，实验表明，本发明所述化合物能显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO量，对致炎因子LPS诱导的炎症具有缓解作用，因此，可以开发成为用于缓解炎症相关的药物。

Description

一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用。
背景技术
炎症（inflammation）就是平时所说的“发炎”，是生物组织受到某种刺激如外伤、感染等损伤因子的刺激所发生的一种以防御反应为主的基本病理过程。通常情况下，炎症是有益的，是人体的自动的防御反应。但过度炎症反应会导致多种组织、器官的严重损害，长期炎症会引发动脉粥样硬化、类风湿性关节炎，甚至癌症等疾病的产生。
NO是机体重要的效应分子和信使分子。当巨噬细胞受到致炎因子如LPS的刺激后会诱导产生诱导型NOS（iNOS），从而催化L-精氨酸变成NO自由基使机体产生大量的NO。大量的NO可以在酶的作用下生成强毒性的羟基，引起细胞损伤，进而导致炎症反应，如果化合物可以降低NO的释放量，可以证明化合物具有抗炎作用。
莱菔叶千里光为菊科千里光属植物莱菔叶千里光Senecioraphanifolius Wall. ex DC.的全草。主要分布于我国西藏（亚东、林芝、拉萨、错那、波密等）；尼泊尔、印度东北部、不丹、缅甸北部等也有分布。其根茎、叶均可入药，清热止痛，祛风止痒，解毒疗疮。用于伤口发炎，肿胀疼痛，皮炎，跌打损伤，其相关品种具有抗炎作用。在本发明中，申请人经探索制备到了一种化合物，其与莱菔叶千里光中主要活性成分的化合物类型不同，在此探究此化合物是否同样具有抗炎作用。
发明内容
本发明的目的是对莱菔叶千里光的化学成分进行深入研究，提供一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用。
本发明是通过以下技术方案实现的：一种莱菔叶千里光中的化合物，所述化合物的名称为5-亚乙基-2-甲基-3-亚甲基-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-羧酸，其化学结构式如下：
Figure 987896DEST_PATH_IMAGE001
。
进一步地，上述化合物的制备方法包括以下步骤：
（1）取莱菔叶千里光，加入乙醇溶液回流提取，提取液经过滤、减压浓缩至无醇味，得提取物；
（2）将提取物蒸干水分，加入乙醇增溶后去除不溶物，得上清液；
（3）取步骤（2）得到的上清液经大孔树脂柱，分别用水、体积比为25%、50%、75%、95%的乙醇-水各洗脱5个柱体积，浓缩，干燥，得馏分1、2、3、4、5；
（4）取馏分1进行色谱分离纯化，得到所述化合物。
进一步地，步骤（4）所述馏分1进行色谱分离纯化的步骤具体为：
S1、取馏分1经硅胶柱层析，用体积比为4:1、1:1的二氯甲烷-甲醇，纯甲醇，体积比为1:1的甲醇-水，进行梯度洗脱，每个梯度洗脱4个柱体积，获得体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分；
S2、取体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分，经硅胶柱层析，用体积比为4：1的二氯甲烷-甲醇洗脱得6个馏分a、b、c、d、e、f；
S3、取馏分a、b、c、d合并，经过凝胶柱层析，用体积比为3:7的二氯甲烷-甲醇洗脱得7个馏分A、B、C、D、E、F、G；
S4、取馏分C、D合并，经ODS中低压柱层析，用体积比为1:20、1:10、1:5、3:10、2:5、1:2、3:5的甲醇-水及纯甲醇洗脱，获得体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分；
S5、取体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分，用制备高效液相色谱，分离得到纯的化合物。
进一步地，步骤（1）中，乙醇溶液的体积浓度为25-95%，乙醇溶液的加入量与莱菔叶千里光的质量比为（10-14）：1，提取次数为2-4次，提取时间为2-3h，提取温度为60-80℃。
进一步地，步骤（2）中加入乙醇增溶的具体方法为，加入乙醇使含提取物的溶液中含醇量达5-50%。
进一步地，步骤（3）的大孔树脂为AB-8、D101、HP-20、XAD-4、HPD100、DM301或者HPD400型树脂，所述上清液与树脂体积比为1:2。
进一步地，步骤S1中，所述硅胶柱为200-300目，馏分1与硅胶的体积比为1:10；
步骤S2中，体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分与硅胶的体积比为1:30；
步骤S3中，所述凝胶柱的色谱条件为：色谱柱尺寸100cm×6.0cm，粒径70µm，流速0.6ml/min，a、b、c、d四个馏分与凝胶的体积比为1:15；
步骤S4中，所述ODS中低压柱层析的色谱条件为：色谱柱尺寸50cm×5.5cm，粒径10µm，流速20ml/min；
步骤S5中，所述制备高效液相色谱的色谱条件为：ODS色谱柱，乙腈-水10:90为流动相，保留时间为52min。
本发明还公开了莱菔叶千里光中的化合物在制备抗炎症药物中的应用。
进一步地，所述炎症模型为LPS引起的炎症反应。
本发明还公开了一种药物制剂，包括治疗有效量的所述莱菔叶千里光中的化合物和药学上可接受的载体，将其制备成口服制剂或注射制剂，所述口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、脂肪乳剂、微囊或者滴丸，所述注射制剂为注射液或者粉针剂。
由上述技术方案可知，本发明所述化合物的制备方法操作简单，可以分离获得纯的化合物5-亚乙基-2-甲基-3-亚甲基-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-羧酸。
实验表明，本发明所述化合物可显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO量，对致炎因子LPS诱导的炎症具有缓解作用。因此，本发明提供了所述化合物在制备缓解炎症相关的药物中的应用。
附图说明
图1为本发明莱菔叶千里光中的化合物的化学结构式；
图2为本发明莱菔叶千里光中的化合物的高分辨率质谱图；
图3为本发明莱菔叶千里光中的化合物的1H NMR谱图；
图4为本发明莱菔叶千里光中的化合物的13C NMR谱图；
图5为本发明莱菔叶千里光中的化合物的HSQC谱图；
图6为本发明莱菔叶千里光中的化合物的HMBC谱图；
图7为本发明莱菔叶千里光中的化合物的毒性测试结果图；
图8为本发明莱菔叶千里光中的化合物预处理对LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO含量的影响效果图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
如无特殊说明，本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。
实施例1
本实施例提供了一种莱菔叶千里光中的化合物，所述化合物的名称为5-亚乙基-2-甲基-3-亚甲基-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-羧酸，其化学结构式如附图1所示。
该化合物的制备方法为：
（1）取干燥的莱菔叶千里光药材，加入12倍量的70%（体积浓度）乙醇溶液，在70℃回流提取3次，每次2.5h，过滤，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到提取物；
（2）取步骤（1）的提取物蒸干水分，加入乙醇使含提取物的溶液中含醇量为40%，用离心机离心除去不溶物，得到上清液。
（3）取步骤（2）得到的上清液经HP-20型大孔树脂柱吸附（体积比：样品/树脂=1:2），分别用水、体积比为25%、50%、75%、95%的乙醇-水各洗脱5个柱体积，浓缩，干燥，得馏分1、2、3、4、5；
（4）取馏分1经250目的硅胶柱层析（体积比：样品/硅胶=1/10），用体积比为4:1、1:1的二氯甲烷-甲醇，纯甲醇，体积比为1:1的甲醇-水，进行梯度洗脱，每个梯度洗脱4个柱体积，获得体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分；取体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分，经硅胶柱层析（体积比：样品/硅胶=1/30），用体积比为4：1的二氯甲烷-甲醇洗脱得6个馏分a、b、c、d、e、f；取馏分a、b、c、d合并，经过凝胶柱层析（体积比：样品/凝胶=1/15），用体积比为3:7的二氯甲烷-甲醇洗脱得7个馏分A、B、C、D、E、F、G；取馏分C、D合并，经ODS中低压柱层析，用体积比为1:20、1:10、1:5、3:10、2:5、1:2、3:5的甲醇-水及纯甲醇洗脱，获得体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分；取体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分，用制备高效液相色谱，分离得到纯的化合物。（收率55.6mg，纯度99.6%）。
其中，凝胶柱的色谱条件为：色谱柱尺寸100cm×6.0cm，粒径70µm，流速0.6ml/min。
ODS中低压柱层析的色谱条件为：色谱柱尺寸50cm×5.5cm，粒径10µm，流速20ml/min。
制备高效液相色谱的色谱条件为：ODS色谱柱，乙腈-水10:90为流动相，保留时间为52min。
实施例2
本实施例提供了一种莱菔叶千里光中的化合物， 该化合物的制备方法为：
（1）取干燥的莱菔叶千里光药材，加入10倍量的95%乙醇溶液，在60℃回流提取2次，每次2h，过滤，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到提取物；
（2）取步骤（1）的提取物蒸干水分，加入乙醇使含提取物的溶液中含醇量为5%，用离心机离心除去不溶物，得到上清液。
（3）取步骤（2）得到的上清液经D101型大孔树脂柱吸附，分别用水、体积比为25%、50%、75%、95%的乙醇-水各洗脱5个柱体积，浓缩，干燥，得馏分1、2、3、4、5；
（4）取馏分1经200目的硅胶柱层析，用体积比为4:1、1:1的二氯甲烷-甲醇，纯甲醇，体积比为1:1的甲醇-水，进行梯度洗脱，每个梯度洗脱4个柱体积，获得体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分；取体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分，经硅胶柱层析，用体积比为4：1的二氯甲烷-甲醇洗脱得6个馏分a、b、c、d、e、f；取馏分a、b、c、d合并，经过凝胶柱层析，用体积比为3:7的二氯甲烷-甲醇洗脱得7个馏分A、B、C、D、E、F、G；取馏分C、D合并，经ODS中低压柱层析，用体积比为1:20、1:10、1:5、3:10、2:5、1:2、3:5的甲醇-水及纯甲醇洗脱，获得体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分；取体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分，用制备高效液相色谱，分离得到纯的化合物。（收率54.9mg，纯度99.5%）。
其余与实施例1相同。
实施例3
本实施例提供了一种莱菔叶千里光中的化合物， 该化合物的制备方法为：
（1）取干燥的莱菔叶千里光药材，加入14倍量的25%乙醇溶液，在80℃回流提取4次，每次3h，过滤，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到提取物；
（2）取步骤（1）的提取物蒸干水分，加入乙醇使含提取物的溶液中含醇量为50%，用离心机离心除去不溶物，得到上清液。
（3）取步骤（2）得到的上清液经HPD100型大孔树脂柱吸附，分别用水、体积比为25%、50%、75%、95%的乙醇-水各洗脱5个柱体积，浓缩，干燥，得馏分1、2、3、4、5；
（4）取馏分1经300目的硅胶柱层析，用体积比为4:1、1:1的二氯甲烷-甲醇，纯甲醇，体积比为1:1的甲醇-水，进行梯度洗脱，每个梯度洗脱4个柱体积，获得体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分；取体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分，经硅胶柱层析，用体积比为4：1的二氯甲烷-甲醇洗脱得6个馏分a、b、c、d、e、f；取馏分a、b、c、d合并，经过凝胶柱层析，用体积比为3:7的二氯甲烷-甲醇洗脱得7个馏分A、B、C、D、E、F、G；取馏分C、D合并，经ODS中低压柱层析，用体积比为1:20、1:10、1:5、3:10、2:5、1:2、3:5的甲醇-水及纯甲醇洗脱，获得体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分；取体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分，用制备高效液相色谱，分离得到纯的化合物。（收率55.2mg，纯度99.3%）。
其余与实施例1相同。
一、化合物的结构解析
主要利用波谱学技术，包括紫外、红外、质谱、核磁共振（1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR）鉴定其结构，其波谱数据及解析过程如下：
（1）取实施例1得到的化合物进行结构分析，该化合物为白色无定形粉末，高分辨率质谱ESI-TOF-MS：197.0803[M+H+]。确定分子式为C10H12O4，NMR谱中δC:167.9(C-11)、161.2(C-6)，表明结构中存在羰基；δC: 15.2,5.9，δH:0.74,1.21,(each 3H, s)为两个甲基信号，δC:161.2,140.5,122.2,67.9,27.1,δH:2.25(1H,d,J=16.5Hz,H-4a),2.34(1H,d,J=16.4Hz,H-4b)，结合不饱和度计算，表明结构有一个6元内酯结构，δC : 140.5 (C-3),102.1(C-9), δH: 4.11(1H,s,H-9a),4.49(1H,s,H-9b)，表明结构有一个双键，δC : 129.8(C-7),122.2(C-5), δH: 5.28(1H,s,H-7)，表明结构中还有一个双键，然后结合HMBC，HSQC等二维核磁共振波谱数据，确定化合物的最终结构，结构式如附图1所示，化学名为5-亚乙基-2-甲基-3-亚甲基-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-羧酸。具体图谱详见附图2-6。
（2）该化合物的波谱数据如下：
1HNMR (600MHz, DMSO) δ: 0.74,1.21(each,3H, s, -CH3), 2.25(1H,d, J=16.4Hz, H-4a), 2.34(1H,d, J=16.5Hz, H-4b), 4.49(1H,s,H-9a)，4.11(1H,s,H-9b)，5.28(1H,m,J=7.2Hz,14.3Hz,H-7)。
13CNMR (150MHz,DMSO): 167.9(C-11),161.2(C-6),140.5(C-3),129.8(C-7),122.2(C-5),102.1(C-9),67.9(C-2),27.1(C-4),15.2(C-10),5.9(C-8)。
二、化合物的药效实验研究
（一）实验材料与动物
1.药物和试剂
RAW264.7细胞（中国医学科学院基础医学研究所），噻唑蓝（MTT）（北京梦怡美生物科技有限公司），RPMI-1640（北京索莱宝科技有限公司），PBS（北京索莱宝科技有限公司），胎牛血清（gemini），胰蛋白酶（北京索莱宝科技有限公司），生物级二甲基亚砜（DMSO）（北京索莱宝科技有限公司），CCK8试剂盒（大连美仑生物科技有限公司）。
2.实验仪器
倒置电子显微镜（日本OLYMPUS：CKX41），酶标仪（美国Molecular Devices：SpectraMax i3），MCV-B161S（T）型超净工作台（日本SANYO），MCO-20ACI型CO2恒温培养箱（美国Thermo公司），BS125S型万分之一天平（瑞士梅特勒-托利多），TDL-5C型台式微量离心机（德国Eppendorf公司）。
（二）实验方法
1.探究实施例1制得到的化合物毒性检测（CCK-8法RAW264.7细胞毒性实验）
采用CCK-8法检测实施例1制备得到的化合物对RAW264.7细胞的毒性。取对数生长期的RAW264.7细胞，用含10%FBS培养液的1640培养基调整细胞密度到5×104cell/ml，接种于96孔板中，将含不同药物浓度（400、200、100、50、25、12.5µmol/L）化合物的细胞培养液以100 μL/孔加入 96 孔板中，另设正常细胞对照组中加入无药物的细胞培养液，每组6个复孔。于37 ℃、5% CO2培养24 h后，弃去上清液加入10%的CCK-8溶液，每孔100 μL，于酶标仪450 nm 处测定吸光度（OD值），计算细胞存活率。
2.探究实施例1制得到的化合物对LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO含量的影响
标准曲线的绘制：标准品稀释成浓度为0，1.56，3.125，6.25，12.5，25，50，100mM的溶液，加入等量的Griess试剂，用酶标仪在波长550nm处测定吸光度，绘制标准曲线。
采用Griess法测定实施例1制得到的化合物对LPS诱导的RAW264.7细胞产生NO的抑制作用。取对数生长期的RAW264.7细胞接种于 96 孔板中（5×104个细胞/孔），37 ℃、5%CO2条件下培养24 h，弃去旧培养基，给药组每孔加入100μL含药DMEM培养基，模型组和空白组每孔加入100μL空白培养基，培养1h后，除空白组外，其余各组加入100μL的LPS（2μg/ml）溶液，继续培养24h, 24h后，每孔吸取50μL上清液于新的96孔板中，先后加入GriessⅠ液50μL与GriessⅡ液50 μL，用酶标仪在550 nm处测其OD 值，计算NO释放量。
3.统计学方法
实验数据以
Figure 623146DEST_PATH_IMAGE002
表示，使用SPSS 19.0统计软件进行t检验比较，P <0.05为有统计学意义。
三、实验结果
1.实施例1制得到的化合物毒性检测（CCK-8法RAW264.7细胞毒性实验）结果见图7，结果显示，该化合物浓度在12.5~400µm/L范围内均没有细胞毒性，故将化合物高中低剂量设为200、100、50μm/L进行后期实验的给药。
2.实施例1制得到的化合物对LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO含量的影响，结果见图8。其中，*代表与模型组相比较，##代表与空白组相比较，差异显著（*P<0.05，**P<0.01，##P<0.01）。
结果显示，在LPS诱导的RAW264.7细胞模型建立以后给予实施例1化合物高中低剂量后，细胞释放NO结果如图8，与模型组比较，给药组细胞释放NO的量明显降低，说明50、100、200μm/L的化合物均能显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO。
以上实验结果表明，本发明实施例1制备得到的化合物可显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO量，对致炎因子LPS诱导的炎症具有缓解作用。因此，可以开发成为用于缓解炎症相关的药物或保健品。
本领域技术人员可将本发明所得化合物直接或间接加入制备不同剂型时所需的药学上可接受的各种常用辅料，如填充剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂等，以常规药物制剂方法，制成常用口服制剂或注射制剂，口服制剂可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂、脂肪乳剂、微囊或者滴丸，注射制剂可以为注射液或者粉针剂。
最后应说明的是，以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种莱菔叶千里光中的化合物的制备方法，其特征在于：所述化合物的名称为5-亚乙基-2-甲基-3-亚甲基-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-羧酸，其化学结构式如下：
Figure 407280DEST_PATH_IMAGE001
；
所述化合物的制备方法包括以下步骤：
（1）取莱菔叶千里光，加入乙醇溶液回流提取，提取液经过滤、减压浓缩至无醇味，得提取物；
（2）将提取物蒸干水分，加入乙醇增溶后去除不溶物，得上清液；
（3）取步骤（2）得到的上清液经大孔树脂柱，分别用水、体积比为25%、50%、75%、95%的乙醇-水各洗脱5个柱体积，浓缩，干燥，得馏分1、2、3、4、5；
（4）取馏分1进行色谱分离纯化，得到所述化合物；
步骤（4）所述馏分1进行色谱分离纯化的步骤具体为：
S1、取馏分1经硅胶柱层析，用体积比为4:1、1:1的二氯甲烷-甲醇，纯甲醇，体积比为1:1的甲醇-水，进行梯度洗脱，每个梯度洗脱4个柱体积，获得体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分；
S2、取体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分，经硅胶柱层析，用体积比为4：1的二氯甲烷-甲醇洗脱得6个馏分a、b、c、d、e、f；
S3、取馏分a、b、c、d合并，经过凝胶柱层析，用体积比为3:7的二氯甲烷-甲醇洗脱得7个馏分A、B、C、D、E、F、G；
S4、取馏分C、D合并，经ODS中低压柱层析，用体积比为1:20、1:10、1:5、3:10、2:5、1:2、3:5的甲醇-水及纯甲醇洗脱，获得体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分；
S5、取体积比为3:10的甲醇-水洗脱得到的馏分，用制备高效液相色谱，分离得到纯的化合物。
2.根据权利要求1所述的莱菔叶千里光中的化合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，乙醇溶液的体积浓度为25-95%，乙醇溶液的加入量与莱菔叶千里光的质量比为（10-14）：1，提取次数为2-4次，提取时间为2-3h，提取温度为60-80℃。
3.根据权利要求1所述的莱菔叶千里光中的化合物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中加入乙醇增溶的具体方法为，加入乙醇使含提取物的溶液中含醇量达5-50%。
4.根据权利要求1所述的莱菔叶千里光中的化合物的制备方法，其特征在于：步骤（3）的大孔树脂为AB-8、D101、HP-20、XAD-4、HPD100、DM301或者HPD400型树脂，所述上清液与树脂体积比为1:2。
5.根据权利要求1所述的莱菔叶千里光中的化合物的制备方法，其特征在于：
步骤S1中，所述硅胶柱为200-300目，馏分1与硅胶的体积比为1:10；
步骤S2中，体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇洗脱下来的馏分与硅胶的体积比为1:30；
步骤S3中，所述凝胶柱的色谱条件为：色谱柱尺寸100cm×6.0cm，粒径70µm，流速0.6ml/min，a、b、c、d四个馏分与凝胶的体积比为1:15；
步骤S4中，所述ODS中低压柱层析的色谱条件为：色谱柱尺寸50cm×5.5cm，粒径10µm，流速20ml/min；
步骤S5中，所述制备高效液相色谱的色谱条件为：ODS色谱柱，乙腈-水10:90为流动相，保留时间为52min。
6.一种莱菔叶千里光中的化合物在制备抗炎症药物中的应用，其特征在于：所述化合物的名称为5-亚乙基-2-甲基-3-亚甲基-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-羧酸，其化学结构式如下：
Figure 630451DEST_PATH_IMAGE001
。
7.根据权利要求6所述的莱菔叶千里光中的化合物在制备抗炎症药物中的应用，其特征在于：所述炎症为LPS引起的炎症反应。
8.一种药物制剂，其特征在于：包括治疗有效量的化合物和药学上可接受的载体，将其制备成口服制剂或注射制剂，所述化合物的名称为5-亚乙基-2-甲基-3-亚甲基-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-羧酸，其化学结构式如下：
Figure 226517DEST_PATH_IMAGE001
，所述口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、脂肪乳剂、微囊或者滴丸，所述注射制剂为注射液或者粉针剂。
CN202111065947.7A 2021-09-13 2021-09-13 一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用 Active CN113512017B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111065947.7A CN113512017B (zh) 2021-09-13 2021-09-13 一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111065947.7A CN113512017B (zh) 2021-09-13 2021-09-13 一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113512017A CN113512017A (zh) 2021-10-19
CN113512017B true CN113512017B (zh) 2021-12-24

Family

ID=78063313

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111065947.7A Active CN113512017B (zh) 2021-09-13 2021-09-13 一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113512017B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1189153A (zh) * 1995-05-09 1998-07-29 拜尔公司 可用作杀虫剂和除草剂的烷基－二卤代苯基取代的酮烯醇
KR20050052839A (ko) * 2003-12-01 2005-06-07 주식회사 태평양 생약재 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1513158A (en) * 1974-11-29 1978-06-07 Bellon R Lab Dry extracts of plants of the senecio genus
US9475789B2 (en) * 2014-04-02 2016-10-25 Wellhead Biological Technology Corp. Use of polyenylpyrrole derivatives for treating inflammation
CN104473988A (zh) * 2014-12-24 2015-04-01 广东海洋大学 千里光注射液及其制备方法与应用
CN109248184A (zh) * 2018-11-06 2019-01-22 贵州工程应用技术学院 一种新颖的千里光中总黄酮类物质的提取方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1189153A (zh) * 1995-05-09 1998-07-29 拜尔公司 可用作杀虫剂和除草剂的烷基－二卤代苯基取代的酮烯醇
KR20050052839A (ko) * 2003-12-01 2005-06-07 주식회사 태평양 생약재 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
STRUCTURE–ACTIVITY RELATIONSHIPS OF PYRROLIZIDINE ALKALOIDS IN INSECT CHEMICAL DEFENSE AGAINST THE ORB-WEAVING SPIDER Nephila clavipes;KARINA LUCAS SILVA等;《Journal of Chemical Ecology》;20020430;第28卷(第4期);第657-668页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113512017A (zh) 2021-10-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105130796B (zh) 一种二萜类化合物及其制备方法与应用
AU2022352631B2 (en) Azulene compound, and preparation method therefor and use thereof
CN101279964A (zh) 愈创木烷型倍半萜、其制备方法及其医药用途
CN1210289C (zh) 两头尖提取物的制备工艺和用途
CN110464771A (zh) 一种裸花紫珠药效标准提取物及其制备方法
CN111454317B (zh) 具有抗炎活性的人参二醇型三萜皂苷、三七叶提取物、药物组合物和化妆品组合物
CN111253247B (zh) 一种具有抗炎活性的新酚酸类化合物的制备方法及应用
CN113512017B (zh) 一种莱菔叶千里光中的化合物及其制备方法与应用
CN107708717B (zh) 白鹤灵芝醌c作为神经细胞凋亡抑制剂的应用
CN104027403B (zh) 一种远志糖酯有效部位的制备方法
Milani et al. Antipromastigote and cytotoxic activities of flavonoids from Fridericia speciosa leaves
CN109232491A (zh) 一种华泽兰中苯并呋喃类化合物的制备方法及用途
CN106543117B (zh) 具有抗肿瘤活性的间双四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物及其制备方法与应用
CN102362877B (zh) 一种雾水葛提取物的应用
CN106749124B (zh) 具有抗肿瘤活性的邻双四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物及其制备方法与应用
CN111925404B (zh) 一种木脂素类化合物的制备方法与应用
CN108164574B (zh) 小花清风藤中的一种化合物及其制备方法与应用
CN113968869A (zh) 愈创木烷倍半萜内酯类化合物Artemvulactone及其制备方法和应用
CN102670698B (zh) 千斤拔提取物在制备防治糖尿病药物中的应用
CN105732736B (zh) 一种苯丙素类化合物的制备方法
CN109970839A (zh) 三萜皂苷类化合物及其制备方法和医药用途
CN114533719B (zh) 松香烷型二萜类化合物在制备抗炎药物中的应用
RU2804299C1 (ru) Способ получения ореганола а, обладающего нефротропной и нейротропной активностью
CN112300185B (zh) 肝毒性降低的生物碱类化合物及其制备方法和用途
Maji et al. Immunomodulatory effect of Wedelia chinensis and demethylwedelolactone by interfering with various inflammatory mediators

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant