CN109575102A - 延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及公开了延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。所涉及延龄草甾体总皂苷及其含量大于90％主要为偏诺皂苷类成分、延龄草皂苷类成分、薯蓣皂苷类成分、甾醇皂苷类成分、呋甾烷皂苷类成分、苯骈甾烷皂苷类成分和克里托皂苷类成分，上述延龄草甾体总皂苷及其中甾体类成分中的一种或多种皂苷类化合物用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。所涉及的偏诺皂苷类化合物本身是偏诺皂苷元、偏诺皂苷元‑3‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基(1→2)‑β‑D‑葡萄糖苷(或称为重楼皂苷Ⅵ)、偏诺皂苷元‑3‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基(1→4)‑[α‑L‑吡喃鼠李糖基(1→2)]‑β‑D‑葡萄糖苷和偏诺皂苷元‑3‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基(1→4)‑α‑L‑吡喃鼠李糖基(1→4)‑[α‑L‑吡喃鼠李糖基(1→2)]‑β‑D‑葡萄糖苷(或称为重楼皂苷Ⅶ)中的一种或多种皂苷类化合物用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。

Description

延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物在制备治疗溃疡 性结肠炎药物中的应用
技术领域
本发明涉及公开了延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，属于中医药制备技术领域。
背景技术
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种常见的炎症性肠道疾病，临床表现为腹泻、腹痛、黏液脓血便，兼有里急后重等。常反复发作，治疗难度较大，是世界卫生组织(WHO)定义的世界难治病之一。现代医学多以激素、水杨酸制剂等治疗UC，但其具有副作用大、易复发等问题，而英夫利昔单抗等新型生物制剂价格昂贵，普通患者难以承受，故寻求疗效确切、副作用少、价格适宜的UC治疗新药成为临床的迫切需求。传统中药在治疗溃疡性结肠炎中表现出疗效显著、复发率低、毒副作用小等独特优势，因此开展中药防治UC及其作用机制研究成为当前研究热点和方向。
延龄草为百合科延龄草属植物延龄草Trillium tschonoskii Maxim.，俗名头顶一颗珠、芋儿七、狮儿七等，是传统的名贵中药，有延年益寿的功效。具有镇静安神、活血止血、消肿、解毒等功，主治头晕目眩、失眠、跌打损伤、外伤出血等疾病，是恩施土家族著名民间药之一。目前国内外对延龄草属植物的药理活性研究表明延龄草有较强的抗氧化、抗炎、免疫调节、抗癌和抗衰老等作用。本发明首次证实延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物具有治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)的功能疗效。本实验采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合法建立溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型，研究证实延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物对UC模型大鼠的具有显著治疗作用。为寻找疗效明确、副作用小、能直接减轻或缓解结肠炎症反应、提高治疗效果、降低溃疡性结肠炎及其他炎症性肠病的发病率，提高病人生存质量都具有十分重要的意义。上述研究没有公开报道。
发明内容
本发明公开了延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。
本发明采用了下述技术方案。
延龄草甾体总皂苷的制备方法：将延龄草药材粉碎成粗粉，用0-100％乙醇浸泡0.5-2小时，4-12倍量溶剂加热回流提取2-4次，每次1-3小时，过滤，合并滤液。上述滤液在45-80℃减压浓缩至0.5-1.5g生药材/ml，0-4℃冷藏过夜，析胶，过滤，滤液再用正丁醇萃取回收得浸膏稀释上大孔吸附树脂或滤液直接上大孔吸附树脂AB-8型或D-101型或HPD-400或各种型号大孔吸附树脂富集，依次用乙醇水由0-30％洗脱后，再用乙醇水85％洗脱得到甾体总皂苷洗脱部位，收集乙醇水30-85％的洗脱部位即得甾体总皂苷，在45-80℃减压回收溶剂至乙醇适量浓度，用冷冻干燥法或喷雾干燥进行干燥，收集冻干粉或喷雾干燥粉，即得。其中，延龄草总提物上大孔吸附树脂的30-85％乙醇洗脱部位并且其甾体总皂苷含量大于90％，其中偏诺皂苷类的偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、27-羟基-偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、3-乙酰基-偏诺皂苷元、dioscoreanoside I和偏诺皂苷元的含量为60-70％，延龄草皂苷类的trillenoside A、deoxytrillenoside A、24-acetyl-deoxytrillenoside A、24-epiacetyl-deoxytrillenoside A、24-methoxy-trillenoside A、trillenoside B、24-acetyl-trillenoside B、24-acetyl-deoxytrillenoside B、trillenoside C、epitrillenogenin-24-O-acetate-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrilleno-genin-24-O-acetate-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyran-oside]和epitrillenogenin-1-O-[4-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabino-pyranoside]的含量为8-15％，薯蓣皂苷类的重楼皂苷V、重楼皂苷Ⅲ、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,21,23,24-五羟基-1β-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→3)-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,23,24-四羟基-1β-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→3)-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,21,23,24-五羟基-1β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和薯蓣皂苷元的含量为5-8％，甾醇类的β-脱皮激素、pinnatasterone、Δ5,13-20βF,22αF,25αF螺甾烯-3β,21α-二醇、polypodine B、intergristerone B和sileneoside G的含量2-5％，呋甾烷皂苷类的26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷和26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量为2-5％，苯骈甾烷皂苷类的parispseudoside B、Aethioside A和16′-hydroxyl-parispseudoside B的含量为1-3％，克里托皂苷类的26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16-羟基-22-酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量为1-2％，上述延龄草甾体总皂苷及其中的甾体皂苷类化合物用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
偏诺皂苷类化合物中偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷(pennogenin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside，或称为重楼皂苷Ⅵ)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(pennogenin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)]-β-D-glucopyranoside)和偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(pennogenin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)]-β-D-glucopyranoside，或称为重楼皂苷Ⅶ)的制备方法，其特征在于步骤如下：
(1).将延龄草药材粉碎成粗粉，用0-100％乙醇浸泡，加入4-12倍量溶剂加热回流提取若干次，过滤，合并滤液；
(2).上述滤液减压浓缩至0.5-1.5g生药材/ml，冷藏过夜，析胶，过滤，滤液再用有机溶剂萃取或滤液上大孔吸附树脂进行梯度洗脱，回收有机溶剂，得浸膏上硅胶柱；
(3).上硅胶柱后依次用三氯甲烷：甲醇或二氯甲烷：甲醇或三氯甲烷：甲醇：水或二氯甲烷：甲醇：水梯度洗脱，以上述偏诺皂苷类化合物中偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷和偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷的3种皂苷作为对照品TLC或HPLC检测，合并相应流份；
(4).将上述偏诺皂苷类化合物中偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷和偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷的相应流份减压浓缩蒸干，用适量乙醇溶解，过滤，减压回收乙醇至含醇量为10-40％之间，析胶，过滤，滤液中加入适量的聚酰胺，搅拌0.5-3小时，静置4-24小时，过滤，滤液中加入适量活性炭，搅拌0.5-3小时，静置4-24小时，过滤，滤液用喷雾干燥或冷冻干燥法进行干燥，收集喷雾干燥粉或冻干粉，用10-95％
乙醇结晶并重结晶，即得。
更具体地，步骤(1)中，加入4-12倍量溶剂加热回流提取2-4次，每次1-3小时。
更具体地，步骤(2)中，于0-4℃冷藏过夜。
更具体地，步骤(2)中，减压浓缩温度为45-80℃。
更具体地，步骤(2)中，滤液经大孔吸附树脂富集，依次用乙醇水由0-30％洗脱后，再用乙醇水85％洗脱得到甾体总皂苷洗脱部位，收集乙醇水为30-85％的洗脱部位，回收洗脱液得浸膏上硅胶柱。
进一步优选，步骤(3)中主要收集三氯甲烷：甲醇：水为65：35：1或60：30：1的洗脱流份。
前述方法制备的偏诺皂苷类化合物，其有效成分为偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷(或称为重楼皂苷Ⅵ)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷和偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(或称为重楼皂苷Ⅶ)中的一种或多种用于制备治疗治疗溃疡性结肠炎药物。
本发明采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合法建立溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型，通过溃疡性结肠炎(UC)模型，研究上述延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物或偏诺皂苷类化合物对UC模型大鼠一般生活状态、结肠组织损伤程度、HE组织病理学检查、UC模型大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)含量、血清中炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-ɑ含量的变化，明确延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物或偏诺皂苷类化合物对UC模型大鼠的治疗作用。
采用MTT法检测偏诺皂苷类化合物偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、27-羟基-偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、3-乙酰基-偏诺皂苷元、dioscoreanoside I和偏诺皂苷元，延龄草皂苷类化合物trillenoside A、deoxytrillenoside A、24-acetyl-deoxytrillenoside A、24-epiacetyl-deoxytrillenoside A、24-methoxy-trillenoside A、trillenoside B、24-acetyl-trillenoside B、24-acetyl-deoxytrillenoside B、trillenoside C、epitrillenogenin-24-O-acetate-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamno-pyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrilleno-genin-24-O-acetate-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]和epitrilleno genin-1-O-[4-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]，薯蓣皂苷类化合物重楼皂苷V、重楼皂苷Ⅲ、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,21,23,24-五羟基-1β-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→3)-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,23,24-四羟基-1β-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→3)-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,21,23,24-五羟基-1β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和薯蓣皂苷元，甾醇类化合物β-脱皮激素、pinnatasterone、Δ5,13-20βF,22αF,25αF螺甾烯-3β,21α-二醇、polypodine B、intergristerone B和sileneoside G，呋甾烷皂苷类化合物26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷和26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，苯骈甾烷皂苷类化合物parispseudoside B、Aethioside A和16′-hydroxyl-parispseudoside B，克里托皂苷类化合物26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16-羟基-22-酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷中的一种或多种甾体皂苷类化合物对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞活力的影响，明确甾体皂苷类活性成分。
上述所述延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物或偏诺皂苷类化合物药物的制剂剂型为口服液、颗粒剂、胶囊剂、片剂、泡腾片、糖浆剂、丸剂、膏滋剂、软胶囊、软膏剂、乳剂、散剂、缓释剂、控释剂、靶向制剂、粉针剂、水针剂、注射剂、雾化剂、微乳剂、凝胶剂、纳米制剂，所述药物还包括各种单方和复方制剂。
本发明的优点是：提供了延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物或偏诺皂苷类化合物提取与制备方法，所得延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物或偏诺皂苷类化合物可用于制备治疗溃疡性结肠炎药物的口服液、颗粒剂、胶囊剂、片剂、泡腾片、糖浆剂、丸剂、膏滋剂、软胶囊、软膏剂、乳剂、散剂、缓释剂、控释剂、靶向制剂、粉针剂、水针剂、注射剂、雾化剂、微乳剂、凝胶剂、纳米制剂或各种已知剂型或各种可接受制剂剂型的药物的原料药。
附图说明
图1是实施例2中延龄草甾体总皂苷及4个偏诺皂苷单体对UC模型大鼠血清中SOD活力的影响
图2是实施例2中延龄草甾体总皂苷及4个偏诺皂苷单体对UC模型大鼠血清中MDA活力的影响
图3是实施例2中延龄草甾体总皂苷及4个偏诺皂苷单体对UC模型大鼠血清中炎症因子IL-6的影响
图4是实施例2中延龄草甾体总皂苷及4个偏诺皂苷单体对UC模型大鼠血清中炎症因子IL-1β的影响
图5是实施例2中延龄草甾体总皂苷及4个偏诺皂苷单体对UC模型大鼠血清中炎症因子TNF-α的影响
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述：
实施例1
延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物和偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷和偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷的制备方法：将延龄草药材粉碎成粗粉，用70％乙醇浸泡1小时，10倍量溶剂加热回流提取3次，每次2小时，过滤，合并滤液。上述滤液在65℃减压浓缩至1.0g生药材/ml，0-4℃冷藏过夜，析胶，过滤，滤液再用正丁醇等有机溶剂萃取，回收有机溶剂，得浸膏加水混悬，上AB-8型号大孔吸附树脂富集，依次用水、30％乙醇和85％乙醇洗脱，得到各洗脱部位，用冷冻干燥法进行干燥，收集冻干粉，即得。其中85％的洗脱部位以甾体皂苷类成分为主，甾体皂苷总含量大于90％，即得延龄草甾体总皂苷。将上述延龄草甾体总皂苷既30-85％乙醇的洗脱部位的浸膏加入等量的100-200目硅胶拌匀，50℃减压挥干溶剂，研匀，干法上样，上常压硅胶柱(200-300目，硅胶量为浸膏的30倍)，上样后依次用三氯甲烷：甲醇：水梯度洗脱，主要收集三氯甲烷：甲醇：水为150:10:1-65：35：1的流份，以上述延龄草甾体皂苷类化合物偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、27-羟基-偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、3-乙酰基-偏诺皂苷元、dioscoreanoside I、偏诺皂苷元、trillenoside A、deoxytrillenosideA、24-acetyl-deoxytrillenoside A、24-epiacetyl-deoxytrillenoside A、24-methoxy-trillenoside A、trillenoside B、24-acetyl-trillenoside B、24-acetyl-deoxytrillenoside B、trillenoside C、epitrillenogenin-24-O-acetate-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→3)-α-L-arabinopyranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamno-pyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrilleno-genin-24-O-acetate-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrilleno genin-1-O-[4-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、重楼皂苷V、重楼皂苷Ⅲ、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,21,23,24-五羟基-1β-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→3)-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,23,24-四羟基-1β-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→3)-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,21,23,24-五羟基-1β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、薯蓣皂苷元、β-脱皮激素、pinnatasterone、Δ5,13-20βF,22αF,25αF螺甾烯-3β,21α-二醇、polypodine B、intergristerone B、sileneoside G、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、parispseudoside B、AethiosideA、16′-hydroxyl-parispseudoside B、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16-羟基-22-酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等单体作为对照品TLC或HPLC检测，合并相应流份。上述流份于45℃减压浓缩蒸干，用适量蒸馏水混悬，上反相硅胶ODS-C18柱色谱，依次用乙醇水由0-50％洗脱，再用乙醇水50-95％洗脱，主要收集60％-80％洗脱液用冷冻干燥法进行干燥，收集冻干粉，用10-95％乙醇结晶并重结晶，即得。或者用制备高效液相色谱技术分离纯化，用乙醇水50-95％洗脱，洗脱液经适当浓缩用喷雾干燥进行干燥，收集喷雾干燥粉，用10-95％乙醇结晶并重结晶，即得。采用上述方法制备上述延龄草甾体皂苷类45个单体化合物纯度为97.6-99.0％；色谱条件C18色谱柱(4.6mm×150mm，5μm)，流动相为乙腈-水(10％-100％梯度洗脱)，检测波长为203nm，流速为1.0ml/min，柱温30℃，进样量20μl。
实施例2
本发明采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合法建立溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型，研究延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物和偏诺皂苷类化合物对UC模型大鼠的治疗作用，旨在为延龄草药材的临床实际应用提供科学依据，为一类创制新药提供理论依据。
1实验材料与分组给药
1.1药物：延龄草甾体总皂苷为30％乙醇水洗脱后用85％乙醇水洗脱部位(简称30％-85％乙醇洗脱部位，1g相当于生药82.3g)，柳氮磺吡啶片(SASP)，偏诺皂苷元，偏诺皂苷1(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷)、偏诺皂苷2(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)、偏诺皂苷3(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)均为白色粉末，由笔者实验室自行分离得到，质量分数大于98％。
1.2实验与分组：雄性大鼠130只，按体重随机分为空白组、模型组、阳性组(SASP为400mg/kg)、甾体总皂苷(30％-85％乙醇洗脱部位)高剂量组(176mg/kg)、甾体总皂苷(30％-85％乙醇洗脱部位)中剂量组(88mg/kg)、偏诺皂苷1(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷)中剂量组(60mg/kg)，偏诺皂苷1(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷)高剂量组(90mg/kg)，偏诺皂苷2(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中剂量组(60mg/kg)，偏诺皂苷2(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)高剂量组(90mg/kg)，偏诺皂苷3(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中剂量组(60mg/kg)，偏诺皂苷3(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)高剂量组(90mg/kg)，偏诺皂苷元中剂量组(37mg/kg)，偏诺皂苷元高剂量组(54mg/kg)，每组10只大鼠。按上述剂量灌胃给药，正常组及模型组给予等量生理盐水。每天1次，连续给药7天。
2评价指标与结果
2.1 UC大鼠一般情况观察
参照Cooper HS评分系统，进行疾病活动指数(DAI)评分。空白组大鼠毛色洁白光滑，大便正常，无腹泻、便血及死亡情况。通过2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇造模后出现大鼠少动、厌食、大便不成形及稀便、肛周污秽、个别肉眼可见黏液血便。与模型组比较，给药后上述症状有不同程度改善，其中SASP组、延龄草甾体总皂苷中高剂量组、偏诺皂苷1(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组、偏诺皂苷2(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组、偏诺皂苷3(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组、偏诺皂苷元中高剂量组大鼠在体重、食欲和血便情况得到了显著改善。与模型组比较，阳性药SASP、偏诺皂苷3(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量与模型组相比差异极显著(p<0.01)，偏诺皂苷1(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组和偏诺皂苷2(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组与模型组比较差异显著(p<0.05)。
2.2 UC大鼠结肠粘膜损伤大体形态观察
空白组大鼠结肠颜色新鲜，没有出现水肿、充血和溃疡现象，结肠表面光滑、有弹性，黏膜皱襞清晰。模型组大鼠结肠颜色暗，肠壁增厚、肠腔狭窄、与周围组织黏连，肠黏膜严重充血水肿、糜烂，形成大面积溃疡，且结肠长度缩短。给药后，阳性药SASP组、延龄草甾体总皂苷中高剂量组、偏诺皂苷1(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组、偏诺皂苷2(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组、偏诺皂苷3(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组、偏诺皂苷元中高剂量组大鼠结肠颜色得到改善，结肠粘膜基本无充血、淤血、水肿，糜烂和溃疡面积明显减少。其中以偏诺皂苷3(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量最为显著，偏诺皂苷1(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组和偏诺皂苷2(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组与模型组比较差异显著。
2.3延龄草甾体总皂苷及其甾体类化合物对UC大鼠血清中MDA和SOD的影响
与空白组比较，模型组大鼠血清中MDA含量显著升高(P<0.01)，SOD活力明显下降(P<0.01)。与模型组比较，阳性药SASP组及偏诺皂苷3(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组大鼠血清中MDA含量极显著降低(P<0.01)和SOD含量极显著升高(P<0.01)，偏诺皂苷1(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组和偏诺皂苷2(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组大鼠血清中SOD含量显著升高(P<0.05)。结果见表1、图1和图2。
表1延龄草甾体总皂苷及4个偏诺皂苷单体对UC模型大鼠血清中SOD、MDA含量的影响
注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01
2.4延龄草甾体总皂苷及其甾体类化合物对UC大鼠血清中炎症因子IL-6、TN F-α和IL-1β含量变化的影响
与空白组比较，模型组大鼠血清中炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β含量明显升高(P<0.01)。与模型组比较，阳性药SASP组、偏诺皂苷3(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组大鼠血清中炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β含量明显下降，表现极显著差异(P<0.01)，偏诺皂苷1(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组和偏诺皂苷2(偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷)中高剂量组大鼠血清中炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β含量显著下降(P<0.05)。结果见表2、图3和图4。
表2延龄草甾体总皂苷及4个偏诺皂苷单体对UC模型大鼠血清炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的影响
注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01
实施例3
化学研究表明，延龄草有效部位30-85％乙醇洗脱物以甾体皂苷类成分为主，且甾体皂苷总含量大于90％，本发明对该有效部位采用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、ODS(C-18)反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和制备高效液相等色谱技术分离纯化，通过理化常数测定、NMR和MS等方法解析鉴定了45个甾体皂苷类成分。鉴定结果如表3，共分离得到七大类结构母核的甾体皂苷类成分，其中化合物1-8为偏诺皂苷类成分，化合物9-22为延龄草皂苷类成分，化合物23-29为薯蓣皂苷类成分，化合物30-35为甾醇类成分，化合物36-39为呋甾烷皂苷类成分，化合物40-42为苯骈甾烷皂苷类成分，化合物43-45为克里托皂苷类成分。采用MTT法检测对上述45个甾体皂苷类化合物单体化合物对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞活力的影响，具体化合物结构、名称和生物活性见下表3：
表3延龄草中分离鉴定的甾体皂苷类化合物结构、名称和生物活性

Claims (9)

1.延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：本身是延龄草总提物上大孔吸附树脂的30-85％乙醇洗脱部位并且其甾体总皂苷含量大于90％，其中偏诺皂苷类的偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、27-羟基-偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、3-乙酰基-偏诺皂苷元、dioscoreanoside I和偏诺皂苷元的含量为60-70％，延龄草皂苷类的trillenoside A、deoxytrillenoside A、24-acetyl-deoxytrillenoside A、24-epiacetyl-deoxytrillenoside A、24-methoxy-trillenoside A、trillenoside B、24-acetyl-trillenoside B、24-acetyl-deoxytrillenoside B、trillenoside C、epitrillenogenin-24-O-acetate-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrilleno-genin-24-O-acetate-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopy-ranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]和epitrillenogenin-1-O-[4-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]的含量为8-15％，薯蓣皂苷类的重楼皂苷V、重楼皂苷Ⅲ、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,21,23,24-五羟基-1β-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→3)-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,23,24-四羟基-1β-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→3)-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、(23s,24s,25s)-螺甾-5-烯-1β,3β,21,23,24-五羟基-1β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[O-β-D-吡喃木糖基(1→3)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和薯蓣皂苷元的含量为5-8％，甾醇类的β-脱皮激素、pinnatasterone、Δ5,13-20βF,22αF,25αF螺甾烯-3β,21α-二醇、polypodine B、intergristerone B和sileneoside G的含量2-5％，呋甾烷皂苷类的26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷和26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量为2-5％，苯骈甾烷皂苷类的parispseudoside B、Aethioside A和16′-hydroxyl-parispseudoside B的含量为1-3％，克里托皂苷类的26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16-羟基-22-酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量为1-2％，上述延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
2.偏诺皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：本身是偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷(或称为重楼皂苷Ⅵ)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷和偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(或称为重楼皂苷Ⅶ)、偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、27-羟基-偏诺皂苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、3-乙酰基-偏诺皂苷元、dioscoreanoside I和偏诺皂苷元中的一种或多种用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
3.根据权利要求1中所述延龄草皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：本身是trillenoside A、deoxytrillenoside A、24-acetyl-deoxytrillenoside A、24-epiacetyl-deoxytrillenoside A、24-methoxy-trillenosideA、trillenoside B、24-acetyl-trillenoside B、24-acetyl-deoxytrillenoside B、trillenoside C、epitrillenogenin-24-O-acetate-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,3,4,-tri-O-acetyl-α-L-rhamno pyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrilleno-genin-24-O-acetate-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]、epitrillenogenin-1-O-[2,4,-di-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]和epitrilleno genin-1-O-[4-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]中的一种或多种用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
4.根据权利要求1中所述甾醇类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：本身是β-脱皮激素、pinnatasterone、Δ5,13-20βF,22αF,25αF螺甾烯-3β,21α-二醇、polypodine B、intergristerone B和sileneoside G中的一种或多种用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
5.根据权利要求1中所述呋甾烷皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：本身是26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷和26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25s)-5α-呋甾烷-△5(6),20(22)-二烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷中的一种或多种用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
6.根据权利要求1中所述苯骈甾烷皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：本身是parispseudoside B、Aethioside A和16′-hydroxyl-parispseudoside B中的一种或多种用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
7.根据权利要求1中所述克里托皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：本身是26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16,22-二酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-Δ5(6),17(20)-二烯-16-羟基-22-酮-呋甾烷-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷中的一种或多种用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
8.根据权利要求1、2、3、4、5、6、7中任一项所述延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：所述药物的制剂剂型为口服液、颗粒剂、胶囊剂、片剂、泡腾片、糖浆剂、丸剂、膏滋剂、软胶囊、软膏剂、乳剂、散剂、缓释剂、控释剂、靶向制剂、粉针剂、水针剂、注射剂、雾化剂、微乳剂、凝胶剂、纳米制剂，所述药物还包括各种单方制剂和复方制剂。
9.根据权利要求1、2、3、4、5、6、7中任一项所述延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：所述延龄草甾体总皂苷及其中甾体皂苷类化合物或偏诺皂苷类化合物来源为百合科延龄草属植物延龄草Trilliumtschonoskii Maxim.、吉林延龄草Trillium kamtschaticum Pall.ex Pursh.(白花延龄草Trillium camschatcense Ker Gawl.)和西藏延龄草Trillium govanianum Wall.exRoyle.的根及根茎或全草。或所述甾体皂苷类化合物或偏诺皂苷类化合物来源为百合科重楼属植物云南重楼(滇重楼)Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.、七叶一枝花(华重楼)Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara.、狭叶重楼Paris polyphylla var.stenophylla Franch.、巴山重楼Paris bashanensisF.T.Wang&Tang.、凌云重楼Paris cronquistii(Takht.)H.Li.、金线重楼Paris delavayiFranch.、海南重楼Paris dunniana H.Lév.、球药隔重楼Paris fargesii Franch.、长柱重楼Paris forrestii(Takht.)H.Li.、禄劝花叶重楼Paris luquanensis H.Li.、毛重楼Paris mairei H.Lév.、花叶重楼Paris marmorata Stearn.、四叶重楼Paris quadrifoliaL.、皱叶重楼Paris rugosa H.Li&Kurita.、黑籽重楼Paris thibetica Franch.、北重楼Paris verticillata M.Bieb.、南重楼Paris vietnamensis(Takht.)H.Li.的根茎或全草。
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