CN115918529B - 一种百合试管鳞茎增殖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及百合试管鳞茎增殖的方法，1）将“泰山A9”种球鳞茎培养成试管小鳞茎；2）将试管小鳞茎在无菌条件下分割，选取整齐一致的单体小鳞茎，剪去上部叶片，接种于含有40毫升培养基的组培瓶中，进行培养；培养条件为：相对湿度75‑80%，温度22‑25℃，3）调节电流、占空比以及光源与植株距离，使光强保持2000 LX，照射40天。该方法能促进百合试管鳞茎形成，增加百合试管鳞茎扩增倍数，节约时间，操作简单。
Description
技术领域
本发明涉及一种百合试管鳞茎增殖的方法。
背景技术
百合是继世界五大鲜切花后的又一新秀，其无论从花色品种上，还是价格上都位居鲜切花市场的前列。百合除可观赏外，其鳞茎还有丰富的营养成分，有食用和药用价值，研究、开发百合种业前景广阔。我国虽然是百合属的分布中心，但是90%以上种球依赖进口，据海关统计，2019年我国百合种球进口数量达到3.4亿粒。目前，百合种球的国产化研究却相对缓慢，尚处于探索起步阶段。
利用试管内结鳞茎，不但可以促进壮苗、改善试管苗质量、缩短组培苗在大田的生长周期，减轻组培苗出瓶后的工作量，降低污染和重新感染病毒的机率，从而提高移栽成活率，而且有利于贮藏、运输和种质保存，对研究物质积累和器官形成与发育规律也有重要意。目前百合试管鳞茎诱导主要集中在外植体来源、消毒试剂的选择及消毒时间、激素配比、糖浓度以及温光互补等方面，而对不同光质非连续性光照时间促进百合试管鳞茎形成的研究未见报道。本发明提供一种全新的百合试管鳞茎增殖方法。
发明内容
本发明提供一种百合试管鳞茎增殖的方法，解决技术问题是促进百合试管鳞茎形成，增加百合试管鳞茎扩增倍数，节约时间，操作简单。
为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：
一种百合试管鳞茎增殖的方法，按照以下步骤进行：
1）将“泰山A9”种球鳞茎培养成试管小鳞茎；
2）将试管小鳞茎在无菌条件下分割，选取整齐一致的单体小鳞茎，剪去上部叶片，接种于含有40毫升培养基的组培瓶中，进行培养；
培养条件为：相对湿度75-80%，温度22-25℃，
3）调节电流、占空比以及光源与植株距离，使光强保持2000 LX，照射40天。
所述电流是使功率为10CK；所述占空比是75%；所述光源与植株距离是45-55cm。
所述光源是至少包括红蓝光。
所述光源是红蓝绿光。
发明具有以下有益技术效果：
1．本申请促进百合试管鳞茎形成，增加百合试管鳞茎扩增倍数，节约时间，操作简单。
具体实施方式
下面结合具体实例进一步说明本发明。
实施例1
一种百合试管鳞茎增殖的方法，按照以下步骤进行：
1）将“泰山A9”种球鳞茎培养成试管小鳞茎；
2）将试管小鳞茎在无菌条件下分割，选取整齐一致的单体小鳞茎，剪去上部叶片，接种于含有40毫升培养基的组培瓶中，进行培养；
培养条件为：相对湿度75-80%，温度22-25℃，
3）调节电流、占空比以及光源与植株距离，使光强保持2000 LX，照射40天；
所述培养基配方表如下
| 成分 | 分子量 | 使用浓度（mg/L） |
| 硝酸钾 | 101.11 | 950 |
| 硝酸铵 | 80.4 | 825 |
| 磷酸二氢钾 | 136.09 | 85 |
| 硫酸镁 | 246.47 | 185 |
| 氯化钙 | 147.02 | 220 |
| 碘化钾 | 166.01 | 0.83 |
| 硼酸 | 61.83 | 6.2 |
| 硫酸锰 | 223.01 | 22.3 |
| 硫酸锌 | 287.54 | 8.6 |
| 钼酸钠 | 241.95 | 0.25 |
| 硫酸铜 | 249.68 | 0.025 |
| 氯化钴 | 237.93 | 0.025 |
| 乙二胺四乙酸二钠 | 372.25 | 37.3 |
| 硫酸亚铁 | 278.03 | 28.7 |
| 肌醇 | 100 | |
| 甘氨酸 | 2 | |
| 盐酸硫胺素 | 0.1 | |
| 盐酸吡哆醇 | 0.5 | |
| 烟酸 | 0.5 | |
| 吲哚乙酸 | 1.0 | |
| 蔗糖 | 342.31 | 30g/L |
| 琼脂 | 7g/L |
所述电流是使功率为10CK；所述占空比是75%；所述光源与植株距离是50cm。
所述光源是红蓝光。
一种百合试管鳞茎增殖的方法，按照以下步骤进行：
1）将“泰山A9”种球鳞茎培养成试管小鳞茎；
2）将试管小鳞茎在无菌条件下分割，选取整齐一致的单体小鳞茎，剪去上部叶片，接种于含有40毫升培养基的组培瓶中，进行培养；
培养条件为：相对湿度75-80%，温度22-25℃，
3）调节电流、占空比以及光源与植株距离，使光强保持2000 LX，照射40天；
所述培养基配方表如下
| 成分 | 分子量 | 使用浓度（mg/L） |
| 硝酸钾 | 101.11 | 950 |
| 硝酸铵 | 80.4 | 825 |
| 磷酸二氢钾 | 136.09 | 85 |
| 硫酸镁 | 246.47 | 185 |
| 氯化钙 | 147.02 | 220 |
| 碘化钾 | 166.01 | 0.83 |
| 硼酸 | 61.83 | 6.2 |
| 硫酸锰 | 223.01 | 22.3 |
| 硫酸锌 | 287.54 | 8.6 |
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| 硫酸铜 | 249.68 | 0.025 |
| 氯化钴 | 237.93 | 0.025 |
| 乙二胺四乙酸二钠 | 372.25 | 37.3 |
| 硫酸亚铁 | 278.03 | 28.7 |
| 肌醇 | 100 | |
| 甘氨酸 | 2 | |
| 盐酸硫胺素 | 0.1 | |
| 盐酸吡哆醇 | 0.5 | |
| 烟酸 | 0.5 | |
| 吲哚乙酸 | 1.0 | |
| 蔗糖 | 342.31 | 30g/L |
| 琼脂 | 7g/L |
所述电流是使功率为10CK；所述占空比是75%；所述光源与植株距离是50cm。
所述光源是红蓝绿光。
针对CK（白光）、实施例1（用RB表示）和实施例2（用RBG表示）本申请做了如下实验：
控制不同光质控制系统，见表1
表1
非连续性光照处理，见表2
表2
| 光照时间(h) | 白天光照时段 | 打破黑暗补光时间 |
| 14 | 6:00-20:00 | 0 |
| 14 | 6:00-19:00 | 0:00-1:00 |
| 14 | 6:00-17:00 | 23:00-2:00 |
| 14 | 6:00-15:00 | 22:00-3:00 |
| 14 | 6:00-13:00 | 21:00-4:00 |
试验设计，见表3
表3
| 处理 | 组合 |
| CK1 | 对照1：CK+14（连续光照） |
| CK2 | 对照2: RB+14（连续光照） |
| CK3 | 对照3: RBG+14（连续光照） |
| CK4 | 对照4：CK+13+1（非连续光照） |
| CK5 | 对照5：CK+11+3（非连续光照） |
| CK6 | 对照6：CK+9+5（非连续光照） |
| CK7 | 对照7：CK+7+7（非连续光照） |
| T1 | 试验组1：RB+13+1（非连续光照） |
| T2 | 试验组2：RB+11+3（非连续光照） |
| T3 | 试验组3：RB+9+5（非连续光照） |
| T4 | 试验组4：RB+7+7（非连续光照） |
| T5 | 试验组5：RBG+13+1（非连续光照） |
| T6 | 试验组6：RBG+11+3（非连续光照） |
| T7 | 试验组7：RBG+9+5（非连续光照） |
| T8 | 试验组8：RBG+7+7（非连续光照） |
观测指标
培养40天时，每个处理随机抽取10瓶，测定鳞茎平均鲜重，鳞茎平均直径，新增鳞茎个数，增大倍数，结鳞茎率。
试验结果，见表4
表4
结果分析：红光+蓝光+绿光，打破黑暗补光3-5小时均有利于试管鳞茎的形成。
补充试验
在上述试验的基础上用红光+蓝光+绿光照射，再进行打破黑暗补光时间选择试验（其他试验条件同上），见表5
表5
| 处理 | 光处理 | 光照时间(h) | 白天光照时段 | 打破黑暗补光时间段 |
| CK | RBG | 14 | 6:00-17:00 | 23:00-2:00 |
| ST1 | RBG | 14 | 6:00-17:00 | 20:00-23:00 |
| ST2 | RBG | 14 | 6:00-17:00 | 23:00-0:00；1:00-2:00；3:00-4:00 |
| ST3 | RBG | 14 | 6:00-17:00 | 23:00-0:00；3:00-4:00 |
补充试验结果见表6
表6
结果分析：红光+蓝光+绿光，打破黑暗补光促进试管鳞茎的形成，不受打破时间点的限制。
综上所述：红光+蓝光+绿光，打破黑暗补光3-5小时均有利于试管鳞茎的形成。且不受打破时间点的限制。
Claims (2)
1.一种百合试管鳞茎增殖的方法，其特征在于，按照以下步骤进行：
1）将“泰山A9”种球鳞茎培养成试管小鳞茎；
2）将试管小鳞茎在无菌条件下分割，选取整齐一致的单体小鳞茎，剪去上部叶片，接种于含有40毫升培养基的组培瓶中，进行培养；
培养条件为：相对湿度75-80%，温度22-25℃，
3）调节电流、占空比以及光源与植株距离，使光强保持2000 LX，光照时间为14小时/天，打破黑暗补光3-5小时，照射40天；所述光源是红蓝绿光，光量比例为3:2:1。
2.如权利要求1所述百合试管鳞茎增殖的方法，其特征在于，所述电流是使功率为10CK；所述占空比是75%；所述光源与植株距离是45-55cm。
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