CN115804756B - 超临界流体制备奥硝唑脂质体及其制剂 - Google Patents
超临界流体制备奥硝唑脂质体及其制剂 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115804756B CN115804756B CN202211696211.4A CN202211696211A CN115804756B CN 115804756 B CN115804756 B CN 115804756B CN 202211696211 A CN202211696211 A CN 202211696211A CN 115804756 B CN115804756 B CN 115804756B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ornidazole
- liposome
- mixed solution
- supercritical fluid
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- IPWKIXLWTCNBKN-UHFFFAOYSA-N Madelen Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CC(O)CCl IPWKIXLWTCNBKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 178
- 229960002313 ornidazole Drugs 0.000 title claims abstract description 177
- 239000002502 liposome Substances 0.000 title claims abstract description 123
- 239000012530 fluid Substances 0.000 title claims abstract description 60
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 56
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 26
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 114
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 62
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 60
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims description 41
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 claims description 33
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 claims description 33
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 31
- RSWGJHLUYNHPMX-UHFFFAOYSA-N Abietic-Saeure Natural products C12CCC(C(C)C)=CC2=CCC2C1(C)CCCC2(C)C(O)=O RSWGJHLUYNHPMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- KHPCPRHQVVSZAH-HUOMCSJISA-N Rosin Natural products O(C/C=C/c1ccccc1)[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 KHPCPRHQVVSZAH-HUOMCSJISA-N 0.000 claims description 30
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 30
- KHPCPRHQVVSZAH-UHFFFAOYSA-N trans-cinnamyl beta-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC=CC1=CC=CC=C1 KHPCPRHQVVSZAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N Ethane Chemical compound CC OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- CIJQGPVMMRXSQW-UHFFFAOYSA-M sodium;2-aminoacetic acid;hydroxide Chemical compound O.[Na+].NCC([O-])=O CIJQGPVMMRXSQW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 26
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 24
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 23
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 23
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 8
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 4
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 claims description 2
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004808 supercritical fluid chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 22
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 abstract description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 abstract description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 abstract description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 20
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 20
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 14
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 12
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 11
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 10
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 7
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 7
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 6
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 6
- 238000013400 design of experiment Methods 0.000 description 5
- 239000010408 film Substances 0.000 description 5
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 3
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 3
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007982 barbital buffer Substances 0.000 description 2
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N diphosphatidyl glycerol Natural products OP(O)(=O)OCC(OP(O)(O)=O)COP(O)(O)=O FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 238000013441 quality evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JQWAHKMIYCERGA-UHFFFAOYSA-N (2-nonanoyloxy-3-octadeca-9,12-dienoyloxypropoxy)-[2-(trimethylazaniumyl)ethyl]phosphinate Chemical class CCCCCCCCC(=O)OC(COP([O-])(=O)CC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC JQWAHKMIYCERGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SFRUVBWDAJNXSB-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;but-1-enylbenzene Chemical compound CCC=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C SFRUVBWDAJNXSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFYTTYVSDVWNMY-UHFFFAOYSA-N 2-Methyl-5-nitroimidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1 FFYTTYVSDVWNMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYDWQPKRHOGLPA-UHFFFAOYSA-N 5-nitroimidazole Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CN=CN1 VYDWQPKRHOGLPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000606124 Bacteroides fragilis Species 0.000 description 1
- 241000606123 Bacteroides thetaiotaomicron Species 0.000 description 1
- 241000283153 Cetacea Species 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical compound CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186394 Eubacterium Species 0.000 description 1
- 241000605909 Fusobacterium Species 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001599018 Melanogaster Species 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000194019 Streptococcus mutans Species 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 208000031975 Yang Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229940107161 cholesterol Drugs 0.000 description 1
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229960000913 crospovidone Drugs 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000007919 dispersible tablet Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000887 hydrating effect Effects 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 229940031703 low substituted hydroxypropyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 229940042880 natural phospholipid Drugs 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 1
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 235000013809 polyvinylpolypyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000523 polyvinylpolypyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- OABYVIYXWMZFFJ-ZUHYDKSRSA-M sodium glycocholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 OABYVIYXWMZFFJ-ZUHYDKSRSA-M 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
- 239000008307 w/o/w-emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/54—Improvements relating to the production of bulk chemicals using solvents, e.g. supercritical solvents or ionic liquids
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种超临界流体制备奥硝唑脂质体的方法及其制剂。本发明采用超临界流体技术，优选超临界流体种类，优化制备工艺参数，制备得到的奥硝唑脂质体溶剂残留量低，保障了用药安全。同时优选脂质体包封材料，提高了奥硝唑脂质体的包封率，降低了渗漏率，提升了奥硝唑脂质体的物理稳定性和化学稳定性。通过本发明制备的奥硝唑脂质体进一步制备的制剂，与市售制剂相比，稳定性高。
Description
技术领域
本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种超临界流体制备奥硝唑脂质体的方法及其制剂。
背景技术
奥硝唑，化学名为1-(3-氯-2-羟丙基)-2-甲基-5-硝基咪唑，是一种5-硝基咪唑类抗生素，用于治疗由脆弱拟杆菌、狄氏拟杆菌、卵园拟杆菌、多形拟杆菌、普通拟杆菌、梭状芽胞杆菌、真杆菌、消化球菌和消化链球菌、幽门螺杆菌、黑色素拟杆菌、梭杆菌、CO2噬织维菌、牙龈类杆菌等敏感厌氧菌所引起的多种感染性疾病。
目前国内上市奥硝唑产品主要有奥硝唑片、奥硝唑分散片、奥硝唑胶囊、奥硝唑注射液，由于奥硝唑微溶于水溶解缓慢，所以奥硝唑注射液普通工艺中都会用到有机溶剂增溶，但是也增大了生产的危险性，而且奥硝唑本身对光不稳定，所以无论固体制剂还是液体制剂，在运输、贮存、使用过程中都会对其稳定性产生影响，同样也增大了临床使用的安全性。
近年来，脂质体的研究在药物载体输送系统中已经成为药物新剂型研究中非常活跃的领域，脂质体适合于生物体内降解、无毒性和无免疫原性等，因此脂质体包囊药物已愈来愈受到重视并得到广泛应用。
中国专利CN101716153公开了一种奥硝唑脂微球固体制剂，利用氢化蛋黄卵磷脂、胆固醇、泊洛沙姆188、甘氨胆酸钠和活性成分奥硝唑的组合，采用薄膜分散技术制成奥硝唑脂微球，然后再和一定的辅料混合制成固体制剂如片剂和胶囊。但是薄膜分散法缺点为溶剂去除不完全，溶剂残留量大，用药安全难以保障。
中国专利CN102626389公开了一种奥硝唑脂质体注射剂及其制法，是由奥硝唑、二月桂酰磷脂酰甘油、大豆甾醇、吐温60、海藻糖制成，但是其奥硝唑脂质体包封率仅为87％-89％，贮存180天后，奥硝唑脂质体的渗漏率达到0.5％，稳定性效果不够理想。
发明内容
克服现有技术的不足，本发明提供了一种奥硝唑脂质体，优选载体膜材料对活性成分奥硝唑进行包封，解决了奥硝唑脂质体包封率低、渗漏率较高，稳定性不理想得问题，提高了奥硝唑脂质体的包封率和稳定性，采用超临界流体技术制备奥硝唑脂质体，解决了溶剂残留问题，提高了用药安全性和生产安全性。
具体而言，本发明的技术方案如下：
本发明提供了一种奥硝唑脂质体的制备方法，所述方法为超临界流体法，包括以下步骤：
(1)将磷脂、胆固醇溶于水和有机溶剂的混合溶液，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；
(2)将混合液A调节pH，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；
(3)将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
进一步的，所述水和有机溶剂的混合溶液为水和乙醇的混合溶液，水和乙醇的体积比为10:1-3，优选为10：2。
进一步的，所述混合液A的pH调节至6.8-8.5，优选为7.9，所述pH调节使用的是甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液。
进一步的，所述超临界流体选自超临界乙醇、超临界乙烯、超临界乙烷、超临界丙烯、超临界丙烷、超临界正戊烷中的一种，优选为超临界乙烷。
进一步的，所述磷脂选自二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇中的一种，所述磷脂优选为二磷脂酰甘油。
其中，以重量比计算，所述磷脂的用量为奥硝唑的3-8倍，优选为，磷脂的用量为奥硝唑的5倍。
其中，以重量比计算，所述胆固醇的用量为奥硝唑的0.5-2倍，优选的，所述胆固醇的用量为奥硝唑的1倍。
其中，以重量比计算，所述松香基葡萄糖苷的用量为奥硝唑的0.1-0.8倍，优选的，所述松香基葡萄糖苷的用量为奥硝唑的0.5倍。
本发明的第二个目的在于提供一种奥硝唑脂质体，由本发明所述方法制备而成。
本发明的第三个目的在于提供一种奥硝唑制剂，所述奥硝唑制剂包含本发明所述的奥硝唑脂质体，所述奥硝唑制剂为胶囊剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
本发明采用超临界流体技术制备奥硝唑脂质体，优选超临界流体种类，优化制备工艺参数，溶剂残留量低，保障了用药安全。
本发明优选脂质体包封材料，尤其是加入了一定比例的松香基葡萄糖苷，提高了奥硝唑脂质体的包封率，降低了渗漏率，增加了奥硝唑脂质体的物理稳定性和化学稳定性。
通过本发明制备的奥硝唑脂质体进一步制备的制剂，与市售制剂相比，稳定性有所提高，有关物质含量低。
附图说明
图1：超临界流体种类对奥硝唑脂质体包封率的影响
图2：pH对奥硝唑脂质体载药量、包封率的影响
图3：pH对奥硝唑脂质体平均粒径的影响
图4：松香基葡萄糖苷对奥硝唑脂质体渗漏率的影响
图5：溶剂对奥硝唑脂质体载药量的影响
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明做进一步的说明，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例，实施例仅用于解释本发明。本领域技术人员应该理解的是，凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
一、检测手段
1.Zeta电位法测定脂质体平均粒径
精确吸取制备的脂质体样品溶液放入zeta电位分析仪中待测池内，光散射波长622nm散射角度154°，粒径测量经8-12次取样测量平均得到脂质体平均粒径分布。
2.超滤离心法测定脂质体的包封率和载药量
采用超滤离心法对奥硝唑脂质体的包封率和载药量进行测定，将脂质体放入配有超滤膜的超滤管中，在适宜的转速下离心，游离药物在离心力的作用下可通过超滤膜，而脂质体则被截留，从而实现二者的分离，测得3-5批样品的包封率和载药量，计算平均。
3.气相色谱法残留溶剂测定
照中国药典2020版气相色谱法(通则0521)测定。
色谱柱：毛细管柱：固定液为聚乙二醇(PEG-20M)的毛细管柱。
填充柱：以直径为0.18-0.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相。
系统适用性试验：(1)用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的理论板数一般不低于5000；填充柱的理论板数一般不低于1000。(2)色谱图中，待测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
4.脂质体的化学稳定性测定
化学稳定性的衡量主要为氧化反应，其易发生于含不饱和脂肪酸的磷脂，是脂肪酸中的双键被氧化物氧化发生断裂的过程。氧化的最终产物会使磷脂中的游离脂肪酸含量上升，酸值升高。在氧化反应的中间过程，生成大量过氧化物和自由基，表现为磷脂的过氧化值上升。正常情况下，使磷脂发生氧化的氧化物为空气中的氧气。光照、温度、金属离子、未知杂质等都可成为氧化反应的催化条件，使氧化加剧。天然磷脂含有大量不饱和脂肪酸，杂质多，因此非常容易发生氧化。磷脂氧化指数：氧化指数＝A233nm/A215nm；一般规定磷脂氧化指数应小于0.2。
二、制备方法对奥硝唑脂质体质量的影响
1.实验设计
配方：
制备方法：
1.1冷冻干燥法制备奥硝唑脂质体
将配方量的达奥硝唑、磷脂、胆固醇、松香基葡萄糖苷溶于乙醇中，冷冻干燥得到冻干粉末，加入奥硝唑的悬浊水溶液，水化，得到奥硝唑脂质体。
1.2超临界乙烷制备奥硝唑脂质体
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.3薄膜分散法制备奥硝唑脂质体
将配方量的奥硝唑、磷脂、胆固醇、松香基葡萄糖苷溶于三氯甲烷或乙醇水溶液，混合均匀，减压旋蒸除去有机溶剂，得到薄膜，加入甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液水化，振摇30分钟，转速为400-700r/min，超声，用组织捣碎机高速匀质乳化10-15分钟，转速8000r/min，用0.45μm微孔滤膜过滤，得到奥硝唑脂质体。
1.4二次乳化法备奥硝唑脂质体
将配方量的磷脂、胆固醇、松香基葡萄糖苷溶于乙醇，加入奥硝唑水溶液，乳化得到W/O初乳，加入12倍的水混合，乳化得到W/O/W乳液，水浴蒸发去除有机溶剂乙醇，得到奥硝唑脂质体。
2.奥硝唑脂质体质量验证
气相色谱法测定残留溶剂含量，对上述四种制备方法(冷冻干燥法、超临界乙烷法、薄膜分散法、二次乳化法)获得的奥硝唑脂质体进行溶剂含量残留测定。
表1残留溶剂测定
表1结果显示，本发明采用的超临界乙烷法能够较好的去除有机溶剂，溶剂残留含量低，降低毒性。
三、超临界流体种类对奥硝唑脂质体的质量影响
1.实验设计
配方：
制备方法：
1.1超临界乙烷制备奥硝唑脂质体
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.2超临界二氧化碳制备奥硝唑脂质体
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体二氧化碳使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.3超临界丙烷制备奥硝唑脂质体
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体丙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.4超临界乙醇制备奥硝唑脂质体
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙醇使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.5超临界乙烯制备奥硝唑脂质体
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烯使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
2.奥硝唑脂质体质量验证
采用超滤离心法对奥硝唑脂质体的包封率进行测定，对上述不同超临界流体制备的奥硝唑脂质体进行包封率测定。
图1显示，本发明超临界乙烷法制备奥硝唑脂质体能够更好的包封药物，传统的超临界二氧化碳制备方法不适用于制备包封奥硝唑。
四、缓冲溶液及pH对奥硝唑脂质体的质量影响
1.实验设计
配方：
制备方法：
1.1 pH
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH＝5.5、6.0、6.8、7.9、8.5、9.0、9.5，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.2缓冲溶液体系
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A分别使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液、巴比妥缓冲溶液调节pH＝7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
2.奥硝唑脂质体质量验证
采用超滤离心法对奥硝唑脂质体的包封率、载药量进行测定，采用Zeta电位法测定脂质体平均粒径，对上述不同pH条件下以及不同缓冲溶液体系中制备的奥硝唑脂质体进行包封率、载药量、平均粒径的测定。
表2缓冲溶液体系对奥硝唑脂质体的包封率、载药量、平均粒径的影响
| 甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液 | 巴比妥缓冲溶液 | |
| 载药量(％) | 19.44±0.27 | 11.32±0.55 |
| 包封率(％) | 92.34±0.65 | 80.28±0.89 |
| 平均粒径(nm) | 120.53±3.45 | 142.64±12.61 |
图2-3以及表2显示，本发明超临界乙烷法在甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液体系中，pH范围为6.8-8.5下，制备的奥硝唑脂质体包封率高，载药量高、粒径分布均匀。
五、松香基葡萄糖苷对奥硝唑脂质体稳定性的影响
1.实验设计
1.1配方1：
制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.2配方2：
制备方法：同配方1。
1.3配方3：
制备方法：同配方1。
1.4配方4：
制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.5配方5：
制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.6配方6：
制备方法：同配方1。
1.7配方7：
制备方法：
将磷脂、胆固醇、松香基葡萄糖苷溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
2.奥硝唑脂质体稳定性的影响
2.1物理稳定性考察
采用超滤离心法测定，将配方1-7制备的奥硝唑脂质体放置于25℃下，在0d、30d、60d、120d、180d时分别测定包封率，计算奥硝唑脂质体渗漏率。
2.2化学稳定性考察
将配方1-7制备的奥硝唑脂质体放置于25℃下，在180d时分别测定磷脂的氧化程度，用氧化指数表示。
表3奥硝唑脂质体的氧化指数
| 氧化指数 | |
| 配方1 | 0.054 |
| 配方2 | 0.071 |
| 配方3 | 0.087 |
| 配方4 | 0.175 |
| 配方5 | 0.205 |
| 配方6 | 0.166 |
| 配方7 | 0.152 |
根据图4和表3可以发现，松香基葡萄糖苷在本发明奥硝唑脂质体中起到稳定剂的作用，可以使得奥硝唑脂质体保持物理稳定性和化学稳定性。
六、溶剂对奥硝唑脂质体载药量的影响
1.实验设计
配方：
A组制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
B组制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和甲醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
C组制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和三氯甲烷的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
D组制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(1:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
E组制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(10:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
F组制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(10:3体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH-7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
2.奥硝唑脂质体质量评价
采用超滤离心法对奥硝唑脂质体的载药量进行测定，对上述A-F组制备的奥硝唑脂质体进行载药量的测定。
图5显示，溶剂的种类和比例对于磷脂、胆固醇膜材料的溶解能力不同，制备得到的奥硝唑脂质体载药量不同。本发明优选了溶剂，提高了奥硝唑脂质体的载药量。
七、奥硝唑脂质体及制剂
1.奥硝唑脂质体
实施例1奥硝唑脂质体配方：
制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(5:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH＝7.9，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于48℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到25Mpa，保持30min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
实施例2奥硝唑脂质体
配方：
制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(10:1体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH＝6.8，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于40℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到17Mpa，保持40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。实施例3奥硝唑脂质体
配方：
制备方法：
将磷脂、胆固醇溶于水和乙醇的混合溶液(10:3体积比)，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；将混合液A使用甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液调节pH＝8.5，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；将混合液B密封于55℃的反应釜中，通入超临界流体乙烷使压力达到30Mpa，保持25min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体。
1.2奥硝唑脂质体的质量验证
实施例1-3奥硝唑脂质体质量验证
表4实施例1-3奥硝唑脂质体质量验证
| 载药量(％) | 包封率(％) | 平均粒径(nm) | 储存180d渗漏率(％) | |
| 实施例1 | 19.43 | 94.31 | 118.62±4.4 | 0.07 |
| 实施例2 | 18.65 | 92.55 | 120.36±5.6 | 0.09 |
| 实施例3 | 17.82 | 93.84 | 117.64±6.3 | 0.10 |
根据表4对奥硝唑的质量评价结果可知，本发明制备的奥硝唑脂质体载药量高、包封率高、琉璃鲸均匀、稳定性高。
2.奥硝唑制剂
2.1奥硝唑制剂的制备
实施例4奥硝唑胶囊
实施例1奥硝唑脂质体按对应载药量计算量取，加入适量填充剂(糊精)、崩解剂(低取代羟丙纤维素)、润滑剂(硬脂酸镁)，制粒，装入胶囊，得到奥硝唑胶囊。
实施例5奥硝唑胶囊
实施例2奥硝唑脂质体按对应载药量计算量取，加入适量填充剂(甘露醇)、崩解剂(羧甲淀粉钠)、润滑剂(微粉硅胶)，制粒，装入胶囊，奥硝唑胶囊。
实施例6奥硝唑胶囊
实施例3奥硝唑脂质体按对应载药量计算量取，加入适量填充剂(淀粉)、崩解剂(交联聚维酮)、润滑剂(滑石粉)，制粒，装入胶囊，奥硝唑胶囊。
参比制剂：市售奥硝唑胶囊(扬**药业集团**有限公司)
2.2奥硝唑制剂的质量验证
有关物质的测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。
供试品溶液：取本品，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液。
对照溶液：精密量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释制成每1ml中含0.5μg的溶液，摇匀。
对照品溶液：取杂质Ⅰ对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中含0.2μg的溶液。
系统适用性溶液：取供试品溶液适量，加热回流1小时，放冷，取此溶液与上述对照品溶液1：1混合，摇匀。
色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm或效能相当的色谱柱)；以甲醇-水(20：80)为流动相；检测波长为318nm；进样体积为20μl。
系统适用性要求：系统适用性溶液色谱图中，奥硝唑峰的保留时间约为24分钟，杂质Ⅰ峰、热降解产物1峰(相对保留时间约为0.28)、热降解产物2峰(相对保留时间约为0.56)、奥硝唑峰与各峰之间的分离度均应符合要求。
测定法：精密量取供试品溶液、对照溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的1.5倍。
限度：供试品溶液色谱图中如有与杂质Ⅰ(2-甲基-5-硝基咪唑)峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.2％，其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(0.5％)。
加速试验：按市售包装，温度40±2，℃相对湿度75％±5％条件下放置6个月，在试验期间的第0个月、第6个月末分别取样，测实施例4-6、参比制剂的奥硝唑胶囊的有关物质含量。
表5实施例4-6、参比制剂的奥硝唑胶囊的有关物质含量
表5显示，本发明奥硝唑脂质体制备的奥硝唑胶囊有关物质含量低，稳定性高。
Claims (9)
1.一种奥硝唑脂质体的制备方法，其特征在于，所述方法为超临界流体法，包括以下步骤：
(1)将磷脂、胆固醇溶于水和有机溶剂的混合溶液，加入奥硝唑水溶液，振荡、超声，得到混合液A；
(2)将混合液A调节pH，加入松香基葡萄糖苷，得到混合液B；
(3)将混合液B密封于40-55℃的反应釜中，通入超临界流体使压力达到17-30Mpa，保持25-40min后，释放超临界流体，获得奥硝唑脂质体；
所述水和有机溶剂的混合溶液为水和乙醇的混合溶液，水和乙醇的体积比为10:1-3；
混合液A的pH调节至6.8-8.5，所述pH调节使用的是甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液；所述超临界流体选自超临界乙烷；以重量比计算，所述松香基葡萄糖苷的用量为奥硝唑的0.1-0.8倍；以重量比计算，所述磷脂的用量为奥硝唑的3-8倍，所述胆固醇的用量为奥硝唑的0.5-2倍。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水和乙醇的体积比为10：2。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述混合液A的pH调节至7.9。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷脂选自二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇中的一种。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以重量比计算，所述磷脂的用量为奥硝唑的5倍。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以重量比计算，所述胆固醇的用量为奥硝唑1倍。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以重量比计算，所述松香基葡萄糖苷的用量为奥硝唑的0.5倍。
8.一种奥硝唑脂质体，其特征在于，由权利要求1所述方法制备而成。
9.一种奥硝唑制剂，其特征在于，所述奥硝唑制剂包含权利要求8所述的奥硝唑脂质体。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211696211.4A CN115804756B (zh) | 2022-12-28 | 2022-12-28 | 超临界流体制备奥硝唑脂质体及其制剂 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211696211.4A CN115804756B (zh) | 2022-12-28 | 2022-12-28 | 超临界流体制备奥硝唑脂质体及其制剂 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115804756A CN115804756A (zh) | 2023-03-17 |
| CN115804756B true CN115804756B (zh) | 2024-04-05 |
Family
ID=85486929
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211696211.4A Active CN115804756B (zh) | 2022-12-28 | 2022-12-28 | 超临界流体制备奥硝唑脂质体及其制剂 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115804756B (zh) |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006069929A (ja) * | 2004-08-31 | 2006-03-16 | Konica Minolta Medical & Graphic Inc | 真菌症治療製剤およびその製造方法 |
| JP2006298839A (ja) * | 2005-04-21 | 2006-11-02 | Konica Minolta Medical & Graphic Inc | リポソーム含有製剤 |
| CN101716153A (zh) * | 2009-12-22 | 2010-06-02 | 海南永田药物研究院有限公司 | 一种奥硝唑脂微球固体制剂 |
| CN102565271A (zh) * | 2012-01-10 | 2012-07-11 | 扬子江药业集团南京海陵药业有限公司 | 一种奥硝唑的质量控制方法 |
| CN102626389A (zh) * | 2012-04-19 | 2012-08-08 | 海南灵康制药有限公司 | 一种奥硝唑脂质体注射剂 |
| EP2593796A2 (en) * | 2010-07-16 | 2013-05-22 | Auckland Uniservices Limited | Bacterial nitroreductase enzymes and methods relating thereto |
| CN103446054A (zh) * | 2013-07-25 | 2013-12-18 | 蔡海德 | 脂质体组合药物及其分子分散法工业化生产工艺和质量控制 |
| CN103655219A (zh) * | 2013-11-27 | 2014-03-26 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 超临界二氧化碳制备纳米熊果苷脂质体的方法 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6576625B2 (en) * | 2001-03-16 | 2003-06-10 | Panacea Biotic Limited | Targeted vesicular constructs for cytoprotection and treatment of H. pylori infections |
| EP1776948B1 (en) * | 2004-08-11 | 2015-12-09 | Konica Minolta Medical & Graphic, Inc. | Method of producing liposome-containing preparation |
| DK3517541T3 (da) * | 2012-05-08 | 2020-09-07 | Nicox Ophthalmics Inc | Polymorf form af fluticasonpropionat |
| CN113197851A (zh) * | 2015-05-06 | 2021-08-03 | 辛纳吉勒公司 | 包含药物粒子的药用悬浮液、用于其配给的装置、以及其使用方法 |
-
2022
- 2022-12-28 CN CN202211696211.4A patent/CN115804756B/zh active Active
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006069929A (ja) * | 2004-08-31 | 2006-03-16 | Konica Minolta Medical & Graphic Inc | 真菌症治療製剤およびその製造方法 |
| JP2006298839A (ja) * | 2005-04-21 | 2006-11-02 | Konica Minolta Medical & Graphic Inc | リポソーム含有製剤 |
| CN101716153A (zh) * | 2009-12-22 | 2010-06-02 | 海南永田药物研究院有限公司 | 一种奥硝唑脂微球固体制剂 |
| EP2593796A2 (en) * | 2010-07-16 | 2013-05-22 | Auckland Uniservices Limited | Bacterial nitroreductase enzymes and methods relating thereto |
| CN102565271A (zh) * | 2012-01-10 | 2012-07-11 | 扬子江药业集团南京海陵药业有限公司 | 一种奥硝唑的质量控制方法 |
| CN102626389A (zh) * | 2012-04-19 | 2012-08-08 | 海南灵康制药有限公司 | 一种奥硝唑脂质体注射剂 |
| CN103446054A (zh) * | 2013-07-25 | 2013-12-18 | 蔡海德 | 脂质体组合药物及其分子分散法工业化生产工艺和质量控制 |
| CN103655219A (zh) * | 2013-11-27 | 2014-03-26 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 超临界二氧化碳制备纳米熊果苷脂质体的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Supercritical fluid methods: An alternative to conventional methods to prepare liposomes;William, B等;《CHEMICAL ENGINEERING JOURNAL》;20200301;第383卷;全文 * |
| 高效液相色谱法测定奥硝唑脂质体凝胶的含量;李锐等;《中国医院药学杂志》;20110615;第31卷(第11期);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115804756A (zh) | 2023-03-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ceren Ertekin et al. | Stability studies on piroxicam encapsulated niosomes | |
| US11946917B2 (en) | Detection method of polyethylene glycol monomethyl ether residue in medicinal materials | |
| Zgoulli et al. | Microencapsulation of erythromycin and clarithromycin using a spray-drying technique | |
| CN115804756B (zh) | 超临界流体制备奥硝唑脂质体及其制剂 | |
| Mondal et al. | Development and validation of RP-HPLC method to determine letrozole in different pharmaceutical formulations and its application to studies of drug release from nanoparticles | |
| CN101416939B (zh) | 葛根素液体制剂及其制备方法 | |
| CN113041220B (zh) | 一种以tpgs为载体的柚皮素纳米混悬剂及其制备方法与应用 | |
| CN114557966B (zh) | 真空履带式烘箱生产依维莫司固体分散体的方法 | |
| CN107184566B (zh) | 含有叶黄素的药物组合物及其制备方法和制剂 | |
| CN111329838B (zh) | 一种紫杉醇脂质体药物组合物及其制备方法 | |
| CN107449844B (zh) | 一种测定二巯丁二酸制剂溶出度的方法 | |
| Strum et al. | Bioavailability of sulfonamide suspensions I: Dissolution profiles of sulfamethizole using paddle method | |
| Lin et al. | Quality evaluation of drug-loaded liposomes | |
| TWI777327B (zh) | 一種具有區分力的醋酸甲地孕酮懸濁液溶離曲線測定方法 | |
| CN116211868B (zh) | 一种头孢克肟抗生素片剂及其制备方法 | |
| CN115887406B (zh) | 一种克唑替尼胶囊的制备方法 | |
| CN112326822B (zh) | 华佗再造丸hplc特征图谱及其构建方法和应用 | |
| CN107213122A (zh) | 一种注射用奥美拉唑钠冻干粉针剂及其制备方法 | |
| CN104857516B (zh) | 一种细辛脑注射液及其制备工艺 | |
| CN117752603A (zh) | 一种人参炔醇纳米胶束及其制备方法 | |
| CN116850248A (zh) | 咳克平胶囊及其制备方法 | |
| CN115969784A (zh) | 曲安奈德注射液的制备方法 | |
| CN112697922A (zh) | 一种测定布洛芬混悬液溶出度的方法 | |
| Tiwari et al. | FORMULATION DEVELOPMENT AND EVALUATION OF PHOSPHOLIPID COMPLEX OF SMILAX CHINA EXTRACT FOR EFFECTIVE TREATMENT OF DIABETES | |
| CN117137868A (zh) | 布洛芬直肠泡沫剂及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |