CN115746171B - 一种制备依诺肝素钠的方法 - Google Patents
一种制备依诺肝素钠的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115746171B CN115746171B CN202211594315.4A CN202211594315A CN115746171B CN 115746171 B CN115746171 B CN 115746171B CN 202211594315 A CN202211594315 A CN 202211594315A CN 115746171 B CN115746171 B CN 115746171B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- weight
- parts
- sodium
- heparin
- benzethonium chloride
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 229960005153 enoxaparin sodium Drugs 0.000 title claims abstract description 66
- CIJQTPFWFXOSEO-NDMITSJXSA-J tetrasodium;(2r,3r,4s)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-6-[(1r,2r,3r,4r)-4-[(2r,3s,4r,5r,6r)-5-acetamido-6-[(4r,5r,6r)-2-carboxylato-4,5-dihydroxy-6-[[(1r,3r,4r,5r)-3-hydroxy-4-(sulfonatoamino)-6,8-dioxabicyclo[3.2.1]octan-2-yl]oxy]oxan-3-yl]oxy-2-(hydroxy Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1O)NC(C)=O)O[C@@H]1C(C[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](OC2C(O[C@@H](OC3[C@@H]([C@@H](NS([O-])(=O)=O)[C@@H]4OC[C@H]3O4)O)[C@H](O)[C@H]2O)C([O-])=O)[C@H](NC(C)=O)[C@H]1C)C([O-])=O)[C@@H]1OC(C([O-])=O)=C[C@H](O)[C@H]1O CIJQTPFWFXOSEO-NDMITSJXSA-J 0.000 title claims abstract description 66
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims abstract description 86
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims abstract description 69
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 64
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 51
- -1 Heparin benzethonium chloride salt Chemical class 0.000 claims abstract description 48
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 33
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 32
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 31
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 23
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 21
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 19
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 16
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 14
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 8
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 90
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 38
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 30
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 29
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 29
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 28
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 20
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 claims description 17
- 229960001008 heparin sodium Drugs 0.000 claims description 17
- KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N benzyl chloride Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1 KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229940073608 benzyl chloride Drugs 0.000 claims description 10
- YRTWNFXASSUQEW-UHFFFAOYSA-M sodium;methanol;acetate Chemical compound [Na+].OC.CC([O-])=O YRTWNFXASSUQEW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 9
- 239000004519 grease Substances 0.000 claims description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 9
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 5
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 abstract description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 abstract 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 9
- 230000029226 lipidation Effects 0.000 description 8
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229960000610 enoxaparin Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000003055 low molecular weight heparin Substances 0.000 description 1
- 229940127215 low-molecular weight heparin Drugs 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000004886 process control Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种制备依诺肝素钠的方法，其包括以下步骤，将肝素钠用纯水溶解后，加入苄索氯铵水溶液，室温进行反应1‑3小时，反应结束后离心，用水洗涤沉淀物，得到肝素苄索氯铵盐；2)肝素苄索氯铵盐洗脱，在室温条件下，将肝素苄索氯铵盐溶解于N,N‑二甲基甲酰胺上样，上样结束后用二氯甲烷与乙醇的混合溶液洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；3)肝素苄酯制备，4)依诺肝素钠制备。本发明对肝素苄索氯铵盐进行洗脱，相对于对其他中间产物或者最终产物依诺肝素钠进行洗脱，可以更加有效地减少小分子量依诺肝素钠的比例，提高中分子依诺肝素钠的比例。
Description
技术领域
本发明公开涉及一种制备依诺肝素钠的方法。
背景技术
依诺肝素钠是用于预防和治疗深静脉血栓或肺栓塞的抗凝血剂的一种低分子量肝素。依诺肝素钠为白色或类白色粉末，无味，有引湿性，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。在水溶液中有强负电荷，能与一些阳离子结合成分子络合物。水溶液在pH值7时较稳定。
在生产过程中，肝素钠的质量对依诺肝素钠终产品有很大影响。这是因为肝素钠分子结构异常复杂，分子量难以固定，不同工艺来源的肝素钠直接影响依诺肝素的产品质量。尤其是部分肝素钠原料厂商因为工艺控制问题，出现肝素钠的分子量分布不符合要求的情况。
发明内容
为了解决上述问题，本发明公开提供一种制备依诺肝素钠的方法，所述方法包括以下步骤：
1)肝素苄索氯铵盐制备
将肝素钠用纯水溶解后，加入苄索氯铵水溶液，室温进行反应1-3小时，反应结束后离心，用水洗涤沉淀物，得到肝素苄索氯铵盐；
2)肝素苄索氯铵盐洗脱
在室温条件下，将肝素苄索氯铵盐溶解于N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用二氯甲烷与乙醇的混合溶液洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
3)肝素苄酯制备
在肝素苄索氯铵盐洗脱液中加入氯化苄，在30-40℃下进行酯化，酯化20-40小时后结束，冷却至室温，加入醋酸钠甲醇沉淀，分离沉淀并用甲醇洗涤，干燥得肝素苄酯；
4)依诺肝素钠制备
将肝素苄基脂溶于纯化水中，在60℃条件下搅拌加入氢氧化钠，反应30-60min，盐酸调pH至6-8，过滤，加入氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12-24小时，收集沉淀，收集到的沉淀加入沉淀10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入过氧化氢，反6-12小时，过滤，加入氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到依诺肝素钠。
本发明对肝素苄索氯铵盐进行洗脱，相对于对其他中间产物或者最终产物依诺肝素钠进行洗脱，可以更加有效地减少小分子量依诺肝素钠的比例，提高中分子依诺肝素钠的比例。
参考以下详细说明更易于理解本申请的上述以及其它特征、方面和优点。
具体实施方案
肝素钠，购自于安徽中弘生物工程有限公司，平均分子量为12000。其中低于5000分子量的占33.5％，5000-20000的为45.8％。
实施例1
将100重量份的肝素钠溶于1000重量份的纯化水中，将150重量份的苄索氯铵溶于2000重量份的纯化水中，在室温下将上述两种溶液混合，搅拌离心，收集沉淀，干燥，得到肝素苄索氯铵盐(收率94.7％)；
在室温条件下，将100重量份的肝素苄索氯铵盐溶解于500重量份的N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用100重量份的二氯甲烷与乙醇的混合溶液(二氯甲烷与乙醇的质量比为1:1)洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
将肝素苄索氯铵盐洗脱液加入300重量份的氯化苄，继续搅拌反应20小时，过滤，加入醋酸钠甲醇溶液，离心，收集沉淀，用甲醇洗涤，烘干，得肝素苄基脂，脂化率11.5％；
将100重量份的肝素苄基脂溶于800重量份的纯化水中，在60℃条件下搅拌加入10重量份的氢氧化钠，反应30nim，用2M盐酸调pH至6～8，过滤，加入10％体积的氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12小时，收集沉淀，得到依诺肝素钠粗品；
得到依诺肝素钠粗品加入依诺肝素钠粗品10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入1％体积的过氧化氢，反应6小时，过滤，加入10％质量的氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到水分低于5％的依诺肝素钠。得到的依诺肝素钠经过分析，231nm吸收系数为15.5，分子量分布为，小于2000为19.2％，2000-8000为72.3％其余为大于8000。
实施例2
将100重量份的肝素钠溶于1000重量份的纯化水中，将150重量份的苄索氯铵溶于2000重量份的纯化水中，在室温下将上述两种溶液混合，搅拌离心，收集沉淀，干燥，得到肝素苄索氯铵盐(收率94.7％)；
在室温条件下，将100重量份的肝素苄索氯铵盐溶解于500重量份的N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用100重量份的二氯甲烷与乙醇的混合溶液(二氯甲烷与乙醇的质量比为1:0.8)洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
将肝素苄索氯铵盐洗脱液加入300重量份的氯化苄，继续搅拌反应20小时，过滤，加入醋酸钠甲醇溶液，离心，收集沉淀，用甲醇洗涤，烘干，得肝素苄基脂，脂化率11.8％；
将100重量份的肝素苄基脂溶于800重量份的纯化水中，在60℃条件下搅拌加入10重量份的氢氧化钠，反应30nim，用2M盐酸调pH至6～8，过滤，加入10％体积的氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12小时，收集沉淀，得到依诺肝素钠粗品；
得到依诺肝素钠粗品加入依诺肝素钠粗品10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入1％体积的过氧化氢，反应6小时，过滤，加入10％质量的氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到水分低于5％的依诺肝素钠。得到的依诺肝素钠经过分析，231nm吸收系数为17.6，分子量分布为，小于2000为15.0％，2000-8000为78.3％，其余为大于8000。
实施例3
将100重量份的肝素钠溶于1000重量份的纯化水中，将150重量份的苄索氯铵溶于2000重量份的纯化水中，在室温下将上述两种溶液混合，搅拌离心，收集沉淀，干燥，得到肝素苄索氯铵盐(收率94.7％)；
在室温条件下，将100重量份的肝素苄索氯铵盐溶解于500重量份的N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用100重量份的二氯甲烷与乙醇的混合溶液(二氯甲烷与乙醇的质量比为1:1.5)洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
将肝素苄索氯铵盐洗脱液加入300重量份的氯化苄，继续搅拌反应20小时，过滤，加入醋酸钠甲醇溶液，离心，收集沉淀，用甲醇洗涤，烘干，得肝素苄基脂，脂化率12.4％；
将100重量份的肝素苄基脂溶于800重量份的纯化水中，在60℃条件下搅拌加入10重量份的氢氧化钠，反应30nim，用2M盐酸调pH至6～8，过滤，加入10％体积的氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12小时，收集沉淀，得到依诺肝素钠粗品；
得到依诺肝素钠粗品加入依诺肝素钠粗品10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入1％体积的过氧化氢，反应6小时，过滤，加入10％质量的氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到水分低于5％的依诺肝素钠。得到的依诺肝素钠经过分析，231nm吸收系数为16.9，分子量分布为，小于2000为16.2％，2000-8000为78.6％，其余为大于8000。
实施例4
将100重量份的肝素钠溶于1000重量份的纯化水中，将150重量份的苄索氯铵溶于2000重量份的纯化水中，在室温下将上述两种溶液混合，搅拌离心，收集沉淀，干燥，得到肝素苄索氯铵盐(收率94.7％)；
在室温条件下，将100重量份的肝素苄索氯铵盐溶解于500重量份的N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用100重量份的二氯甲烷与乙醇的混合溶液(二氯甲烷与乙醇的质量比为1:3)洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
将肝素苄索氯铵盐洗脱液加入300重量份的氯化苄，继续搅拌反应20小时，过滤，加入醋酸钠甲醇溶液，离心，收集沉淀，用甲醇洗涤，烘干，得肝素苄基脂，脂化率12.4％；
将100重量份的肝素苄基脂溶于800重量份的纯化水中，在60℃条件下搅拌加入10重量份的氢氧化钠，反应30nim，用2M盐酸调pH至6～8，过滤，加入10％体积的氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12小时，收集沉淀，得到依诺肝素钠粗品；
得到依诺肝素钠粗品加入依诺肝素钠粗品10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入1％体积的过氧化氢，反应6小时，过滤，加入10％质量的氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到水分低于5％的依诺肝素钠。得到的依诺肝素钠经过分析，231nm吸收系数为16.9，分子量分布为，小于2000为11.9％，2000-8000为72.1％，其余为大于8000。
实施例5
将100重量份的肝素钠溶于1000重量份的纯化水中，将150重量份的苄索氯铵溶于2000重量份的纯化水中，在室温下将上述两种溶液混合，搅拌离心，收集沉淀，干燥，得到肝素苄索氯铵盐(收率94.7％)；
在室温条件下，将100重量份的肝素苄索氯铵盐溶解于500重量份的N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用100重量份的二氯甲烷与乙醇的混合溶液(二氯甲烷与乙醇的质量比为1:0.2)洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
将肝素苄索氯铵盐洗脱液加入300重量份的氯化苄，继续搅拌反应20小时，过滤，加入醋酸钠甲醇溶液，离心，收集沉淀，用甲醇洗涤，烘干，得肝素苄基脂，脂化率12.4％；
将100重量份的肝素苄基脂溶于800重量份的纯化水中，在60℃条件下搅拌加入10重量份的氢氧化钠，反应30nim，用2M盐酸调pH至6～8，过滤，加入10％体积的氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12小时，收集沉淀，得到依诺肝素钠粗品；
得到依诺肝素钠粗品加入依诺肝素钠粗品10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入1％体积的过氧化氢，反应6小时，过滤，加入10％质量的氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到水分低于5％的依诺肝素钠。得到的依诺肝素钠经过分析，231nm吸收系数为16.9，分子量分布为，小于2000为11.2％，2000-8000为70.1％，其余为大于8000。
对比例1
将100重量份的肝素钠溶于1000重量份的纯化水中，将150重量份的苄索氯铵溶于2000重量份的纯化水中，在室温下将上述两种溶液混合，搅拌离心，收集沉淀，干燥，得到肝素苄索氯铵盐(收率94.7％)；
在室温条件下，将100重量份的肝素苄索氯铵盐溶解于500重量份的N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用100重量份的1.5mol/L的氯化钠水溶液洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
将肝素苄索氯铵盐洗脱液加入300重量份的氯化苄，继续搅拌反应20小时，过滤，加入醋酸钠甲醇溶液，离心，收集沉淀，用甲醇洗涤，烘干，得肝素苄基脂，脂化率11.8％；
将100重量份的肝素苄基脂溶于800重量份的纯化水中，在60℃条件下搅拌加入10重量份的氢氧化钠，反应30nim，用2M盐酸调pH至6～8，过滤，加入10％体积的氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12小时，收集沉淀，得到依诺肝素钠粗品；
得到依诺肝素钠粗品加入依诺肝素钠粗品10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入1％体积的过氧化氢，反应6小时，过滤，加入10％质量的氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到水分低于5％的依诺肝素钠。得到的依诺肝素钠经过分析，231nm吸收系数为14.8，分子量分布为，小于2000为19.2％，2000-8000为72.6％，其余为大于8000。
对比例2
将100重量份的肝素钠溶于1000重量份的纯化水中，将150重量份的苄索氯铵溶于2000重量份的纯化水中，在室温下将上述两种溶液混合，搅拌离心，收集沉淀，干燥，得到肝素苄索氯铵盐(收率94.7％)；
在室温条件下，将100重量份的肝素苄索氯铵盐溶解于500重量份的N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用100重量份的二氯甲烷洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
将肝素苄索氯铵盐洗脱液加入300重量份的氯化苄，继续搅拌反应20小时，过滤，加入醋酸钠甲醇溶液，离心，收集沉淀，用甲醇洗涤，烘干，得肝素苄基脂，脂化率11.9％；
将100重量份的肝素苄基脂溶于800重量份的纯化水中，在60℃条件下搅拌加入10重量份的氢氧化钠，反应30nim，用2M盐酸调pH至6～8，过滤，加入10％体积的氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12小时，收集沉淀，得到依诺肝素钠粗品；
得到依诺肝素钠粗品加入依诺肝素钠粗品10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入1％体积的过氧化氢，反应6小时，过滤，加入10％质量的氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到水分低于5％的依诺肝素钠。得到的依诺肝素钠经过分析，231nm吸收系数为14.1，分子量分布为，小于2000为21.3％，2000-8000为74.1％，其余为大于8000。
对比例3
将100重量份的肝素钠溶于1000重量份的纯化水中，将150重量份的苄索氯铵溶于2000重量份的纯化水中，在室温下将上述两种溶液混合，搅拌离心，收集沉淀，干燥，得到肝素苄索氯铵盐(收率94.7％)；
在室温条件下，将100重量份的肝素苄索氯铵盐溶解于500重量份的N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用100重量份的乙醇洗涤，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
将肝素苄索氯铵盐洗脱液加入300重量份的氯化苄，继续搅拌反应20小时，过滤，加入醋酸钠甲醇溶液，离心，收集沉淀，用甲醇洗涤，烘干，得肝素苄基脂，脂化率12.1％；
将100重量份的肝素苄基脂溶于800重量份的纯化水中，在60℃条件下搅拌加入10重量份的氢氧化钠，反应30nim，用2M盐酸调pH至6～8，过滤，加入10％体积的氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12小时，收集沉淀，得到依诺肝素钠粗品；
得到依诺肝素钠粗品加入依诺肝素钠粗品10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入1％体积的过氧化氢，反应6小时，过滤，加入10％质量的氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到水分低于5％的依诺肝素钠。得到的依诺肝素钠经过分析，231nm吸收系数为13.5，分子量分布为，小于2000为22.2％，2000-8000为71.3％，其余为大于8000。
通过上述的实验可以发现，对肝素苄索氯铵盐进行洗脱，相对于对其他中间产物或者最终产物依诺肝素钠进行洗脱，可以更加有效地减少小分子量依诺肝素钠的比例，提高中分子依诺肝素钠的比例。
以上所述，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (1)
1.一种制备依诺肝素钠的方法，其特征在于，所述制备依诺肝素钠的方法包括以下步骤：
将100重量份的肝素钠溶于1000重量份的纯化水中，将150重量份的苄索氯铵溶于2000重量份的纯化水中，在室温下将上述两种溶液混合，搅拌离心，收集沉淀，干燥，得到肝素苄索氯铵盐；
在室温条件下，将100重量份的肝素苄索氯铵盐溶解于500重量份的N,N-二甲基甲酰胺上样，上样结束后用100重量份的二氯甲烷与乙醇的混合溶液洗涤，所述二氯甲烷与乙醇的质量比为1:0.2，再用1.5mol/L的氯化钠水溶液洗脱，洗脱终点为263nm紫外吸收值曲线至基线平稳，收集肝素苄索氯铵盐洗脱液；
将肝素苄索氯铵盐洗脱液加入300重量份的氯化苄，继续搅拌反应20小时，过滤，加入醋酸钠甲醇溶液，离心，收集沉淀，用甲醇洗涤，烘干，得肝素苄基脂；
将100重量份的肝素苄基脂溶于800重量份的纯化水中，在60℃条件下搅拌加入10重量份的氢氧化钠，反应30nim，用2M盐酸调pH至6～8，过滤，加入10％体积的氯化钠溶液，加入4倍体积的甲醇，放置12小时，收集沉淀，得到依诺肝素钠粗品；
得到的依诺肝素钠粗品加入依诺肝素钠粗品10倍体积的纯化水，完全溶解后，加入1％体积的过氧化氢，反应6小时，过滤，加入10％质量的氯化钠，加入4倍体积的甲醇，干燥，得到水分低于5％的依诺肝素钠。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211594315.4A CN115746171B (zh) | 2022-12-13 | 2022-12-13 | 一种制备依诺肝素钠的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211594315.4A CN115746171B (zh) | 2022-12-13 | 2022-12-13 | 一种制备依诺肝素钠的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115746171A CN115746171A (zh) | 2023-03-07 |
| CN115746171B true CN115746171B (zh) | 2024-04-09 |
Family
ID=85345624
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211594315.4A Active CN115746171B (zh) | 2022-12-13 | 2022-12-13 | 一种制备依诺肝素钠的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115746171B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104086674A (zh) * | 2014-07-28 | 2014-10-08 | 常州千红生化制药股份有限公司 | 一种制备依诺肝素钠的工艺 |
| CN107033259A (zh) * | 2016-12-22 | 2017-08-11 | 青岛九龙生物医药集团有限公司 | 一种降低依诺肝素钠中乙酸钠杂质含量的方法 |
| CN109485749A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-03-19 | 江西浩然生物医药有限公司 | 一种层析和超滤分离技术制备依诺肝素钠的方法 |
| CN115043959A (zh) * | 2022-05-25 | 2022-09-13 | 湖北亿诺瑞生物制药有限公司 | 一种高收率依诺肝素钠的制备方法 |
-
2022
- 2022-12-13 CN CN202211594315.4A patent/CN115746171B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104086674A (zh) * | 2014-07-28 | 2014-10-08 | 常州千红生化制药股份有限公司 | 一种制备依诺肝素钠的工艺 |
| CN107033259A (zh) * | 2016-12-22 | 2017-08-11 | 青岛九龙生物医药集团有限公司 | 一种降低依诺肝素钠中乙酸钠杂质含量的方法 |
| CN109485749A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-03-19 | 江西浩然生物医药有限公司 | 一种层析和超滤分离技术制备依诺肝素钠的方法 |
| CN115043959A (zh) * | 2022-05-25 | 2022-09-13 | 湖北亿诺瑞生物制药有限公司 | 一种高收率依诺肝素钠的制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115746171A (zh) | 2023-03-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5389140B2 (ja) | ヘパリン誘導多糖類混合物、その製造およびそれを含有する医薬組成物 | |
| CN104086674B (zh) | 一种制备依诺肝素钠的工艺 | |
| US20080182820A1 (en) | Mixtures of sulfated oligosaccharides | |
| KR20180008554A (ko) | 폴리사카라이드의 제조방법 | |
| CN115746171B (zh) | 一种制备依诺肝素钠的方法 | |
| CN107236057B (zh) | 一种获得达肝素钠的降解方法 | |
| CN109627352B (zh) | 一种玉米须多糖的脱色工艺 | |
| CN111518229A (zh) | 一种除去舒更葡糖钠精制品中元素杂质和色素的方法 | |
| RU2670767C1 (ru) | Способ получения низкомолекулярного гепарина | |
| CN107141373A (zh) | 一种新的达肝素钠的制备工艺 | |
| EP4071179A1 (en) | Purification method for beta-1, 3-glucan ester derivative | |
| CN112029009B (zh) | 一种火龙果花多糖的制备方法 | |
| CN106883321B (zh) | 一种从肝素钠副产物中提取舒洛地特原料药的方法 | |
| JP4186460B2 (ja) | 精製された、ヘパリン、その塩もしくはヘパリン誘導体の製造方法および精製された、低分子ヘパリン、その塩もしくはヘパリン誘導体の製造方法 | |
| CN108409806B (zh) | 一种分离制备矮牵牛素-3-o-葡萄糖苷的方法 | |
| CN101418049A (zh) | 一种透明质酸的制备方法 | |
| CN109485749A (zh) | 一种层析和超滤分离技术制备依诺肝素钠的方法 | |
| CN115417937A (zh) | 一种含双抗凝血酶结合序列的肝素十二糖及其制备方法与应用 | |
| CN110679997B (zh) | 一种含烟叶多糖及其衍生多糖高保润性的烟丝 | |
| CN115043959A (zh) | 一种高收率依诺肝素钠的制备方法 | |
| CN109666086B (zh) | 一种高纯度肝素季铵盐的制备方法及其应用 | |
| CN106977627A (zh) | 一种依诺肝素钠生产方法 | |
| CN111517923A (zh) | 一种Ag+配位树脂络合分离三种不饱和漆酚单体的方法 | |
| CN106699929A (zh) | 一种降低达肝素钠中乙醇残留的方法 | |
| LU502373B1 (en) | Method for preparing agar with low melting point |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |