CN115666572A - 用于预防或治疗流行性rna病毒传染病的药物组合物 - Google Patents

用于预防或治疗流行性rna病毒传染病的药物组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN115666572A
CN115666572A CN202180032608.0A CN202180032608A CN115666572A CN 115666572 A CN115666572 A CN 115666572A CN 202180032608 A CN202180032608 A CN 202180032608A CN 115666572 A CN115666572 A CN 115666572A
Authority
CN
China
Prior art keywords
pyronaridine
pharmaceutically acceptable
pharmaceutical composition
infection
artemisinin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202180032608.0A
Other languages
English (en)
Inventor
柳济万
朱青
郑显圭
赵金实
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shin Poong Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Shin Poong Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shin Poong Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Shin Poong Pharmaceutical Co Ltd
Publication of CN115666572A publication Critical patent/CN115666572A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A61K31/167—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the nitrogen of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. lidocaine, paracetamol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A61K31/37—Coumarins, e.g. psoralen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A61K31/609—Amides, e.g. salicylamide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及咯萘啶或其药学上可接受的盐和/或青蒿素或其衍生物用于预防或治疗流行性RNA病毒传染病的用途，更具体地，涉及用于预防或治疗流行性RNA病毒传染病，特别是2019冠状病毒病(COVID‑19)的药物组合物，该组合物包含治疗有效量的咯萘啶或其药学上可接受的盐和/或青蒿素或其衍生物，以及药学上可接受的载体。

Description

用于预防或治疗流行性RNA病毒传染病的药物组合物
技术领域
本发明涉及咯萘啶或其药学上可接受的盐，和/或青蒿素或其衍生物 用于预防或治疗流行性RNA病毒感染的用途。更具体地，本发明涉及用 于预防或治疗流行性RNA病毒感染——特别是2019冠状病毒病 (COVID-19)的药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的咯萘啶或其 药学上可接受的盐，和/或青蒿素或其衍生物，以及药学上可接受的载体。
背景技术
具有RNA基因组的RNA病毒具有比DNA病毒更高的突变率，并 且容易产生适应宿主和环境变化的突变体。由于这种特性，很难通过抗 病毒剂或预防性疫苗来控制RNA病毒。此外，RNA病毒编码一种RNA 依赖性RNA聚合酶(RNA-dependent RNApolymerase，RdRp)，该RNA聚合酶以病毒基因组中的RNA为模板来合成RNA，而宿主细胞的RNA 聚合酶以DNA为模板来合成RNA，不能作用于RNA病毒的复制。RNA 病毒根据基因组的极性以及基因组RNA与mRNA的极性是否相同，分 为正链单链RNA病毒、负链单链RNA病毒和双链RNA(dsRNA)病毒。
近期在世界范围内蔓延并引发全球公共卫生危机的急性病毒感染正 通过运输和贸易从病毒起源国向其他国家迅速蔓延，全球对治疗药物的 开发需求巨大。特别地，2009年的H1N1流感、2014年西非以及2019 年刚果民主共和国的埃博拉病毒和2016年的寨卡病毒引发的流行病都是 RNA病毒感染。
冠状病毒像寨卡病毒一样，是属于正链RNA病毒家族的病毒，具有 大小为25-32kb的正链单链RNA基因组，并且是能够感染鸟类和哺乳动 物等人类和动物的细胞的人畜共患病病毒。冠状病毒具有一种其中特征 性的棒状刺突蛋白从其外膜突出的结构。冠状病毒是一个具有多种成员 的病毒家族，包括SARS-CoV、MERS-CoV和SARS-CoV-2(2019-nCoV)， 它们分别导致了2003年出现的严重急性呼吸综合症(SARS)、2012年在 沙特阿拉伯新出现的中东呼吸综合症(MERS)以及最近被世界卫生组织 (WHO)宣布为国际关注的突发公共卫生事件(PHEIC)的2019冠状病毒病 (COVID-19、2019-nCoV感染)。
SARS-CoV导致严重急性呼吸综合症，据记录该综合症在8,096名患 者中的死亡率约为10％。通常伴有高热和肌痛，2-7天后出现干咳无痰， 10-20％的患者出现呼吸衰竭。由于尚未确立合适的治疗方法，因此可以 使用非典型肺炎的抗菌药物，并联合使用如奥司他韦或利巴韦林等的抗 病毒剂或类固醇。
MERS-CoV被认为是一种从骆驼等动物宿主传播给人类的病毒，可 导致严重急性呼吸综合症和肾功能衰竭，在包括中东在内的26个国家造 成约2000例感染，死亡率为35.6％(WHO，2016)。潜伏期约5天，并伴 有发热、咳嗽、气短和肺炎。它在家庭成员或医疗机构成员之间以有限 传播的方式流行，并且通常在患有糖尿病等基础疾病的人中发展为严重 疾病。
SARS-CoV-2(2019-nCoV)是一种导致COVID-19的病毒。经过1-14 天的潜伏期后，出现从轻微到严重的各种呼吸系统症状，例如咳嗽、发 热、乏力、气短、肺炎或急性呼吸窘迫综合征等，很少出现咳痰、咽痛 和腹泻。由于没有针对它的选择性抗病毒剂，因此正在使用单独的对症 治疗或与先前用于其他病毒性疾病的抗病毒剂的治疗相结合。
具体而言，它们中最近爆发的COVID-19在目前没有任何治疗或疫 苗可用的情况下迅速传播(Li等人，2020)，并且尚未建立用于该疾病的 适合的细胞或动物检测系统。目前，中韩两国已报道临床使用或专家推 荐的药物包括氯喹、瑞德西韦(Wang等人，2020)、洛匹那韦、法匹拉韦、 利巴韦林、干扰素等，超过80项临床试验正在进行中(Maxmen等人，2020)。特别是，由于SARS-CoV-2属于冠状病毒家族，因此以前已知对 MERS-CoV或SARS-CoV(SARS-CoV核苷酸序列与SARS-CoV-2的同源 性约为79.5％)具有抗病毒作用的试剂引起关注(Zhou等人，2020)，包括 如氯硝柳胺等的试剂(Xu等人，2020)。
鉴于SARS或COVID-19病例，当与患者密切接触时，感染的风险 非常高：病毒通过雾化的呼吸道飞沫对人口稠密环境中的许多人具有相 当高的传播能力。此外，由这些冠状病毒引起的急性病毒感染正通过运 输和贸易从病毒起源国迅速传播到其他国家，从而引发全球公共卫生危 机。
然而，迄今为止，对用于有效抑制、治疗或预防此类引起流行的呼 吸系统病毒病原体的适当方案的开发还不充分。因此，为了全世界人类 的健康和幸福，迫切需要开发一种药物来对抗这些疾病。
此外，虽然它们的呼吸系统感染的临床症状有些相似，并且它们属 于同一个RNA病毒家族，但病毒之间在遗传和结构水平上有差异，据报 道，这些差异会影响抗病毒药物的敏感性和疗效。此外，病毒中的这些 分子遗传学差异导致传播途径、病毒结合的宿主受体、传播率、潜伏期 和/或感染部位的差异，从而导致临床症状和治疗效果的差异，因此开发 和应用适合的针对目标病毒的试剂非常重要。
此外，鉴于呼吸系统传染病的快速传播、高死亡率以及全球健康和 经济风险，除了花费至少一到几年来开发新药和疫苗之外，基于安全性 已通过临床试验和实际使用经验得到保证的的药物的药物重新定位，探 索预防、改善或治疗RNA病毒感染，特别是冠状病毒引起的呼吸系统疾 病的可能性，可能是一个非常有效且成本效益好的策略。
发明内容
技术问题
本发明的一个目的是提供咯萘啶或其药学上可接受的盐，和/或青蒿 素或其衍生物在预防或治疗流行性RNA病毒感染中的用途。
本发明的另一个目的是提供一种用于预防或治疗流行性RNA病毒 感染的药物组合物，该组合物包含治疗有效量的咯萘啶或其药学上可接 受的盐，和/或青蒿素或其衍生物，以及药学上可接受的载体。
本发明的又一个目的是提供一种通过使用咯萘啶或其药学上可接受 的盐和/或青蒿素或其衍生物来预防或治疗流行性RNA病毒感染的方法。
解决技术问题的技术方案
为了实现上述目的，本发明提供了一种用于预防或治疗流行性RNA 病毒感染的药物组合物，该组合物包含治疗有效量的咯萘啶或其药学上 可接受的盐和/或青蒿素或其衍生物，以及药学上可接受的载体。
此外，本发明提供了咯萘啶或其药学上可接受的盐和/或青蒿素或其 衍生物在预防或治疗流行性RNA病毒感染中的用途。
此外，本发明提供了一种预防或治疗流行性RNA病毒感染的方法， 该方法包括将治疗有效量的咯萘啶或其药学上可接受的盐和/或青蒿素或 其衍生物给药至有需要的个体。
下文详细描述本发明。
根据本发明的一个方面，提供了一种用于预防或治疗流行性RNA病 毒感染的药物组合物，该组合物包含治疗有效量的下式1的咯萘啶或其 药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体：
[式1]
Figure BDA0003922101400000041
根据本发明的另一方面，提供了一种用于预防或治疗流行性RNA病 毒感染的药物组合物，其包含治疗有效量的下式2的青蒿素或其衍生物， 以及药学上可接受的载体：
[式2]
Figure BDA0003922101400000051
根据本发明的另一方面，提供了一种用于预防或治疗流行性RNA病 毒感染的药物组合物，其包含治疗有效量的上式1的咯萘啶或其药学上 可接受的盐，和上式2的青蒿素或其衍生物，以及药学上可接受的载体。
在根据本发明的一个实施方案中，咯萘啶的药学上可接受的盐的实 例可以包括由磷酸、硫酸、盐酸、乙酸、甲磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、 马来酸或富马酸形成的酸加成盐，但不限于此。在根据本发明的另一个 实施方案中，咯萘啶的药学上可接受的盐可以是咯萘啶四磷酸盐。
在根据本发明的另一个实施方案中，青蒿素衍生物的实例可以包括 二氢青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚和蒿乙醚，但不限于此。在根据本发明 的另一个实施方案中，青蒿素衍生物可以是青蒿琥酯。
根据本发明的另一个实施方案，在包含治疗有效量的咯萘啶或其药 学上可接受的盐、青蒿素或其衍生物以及药学上可接受的载体的药物组 合物中，咯萘啶或其药学上可接受的盐与青蒿素或其衍生物的重量比可 以为10:1至1:10。在根据本发明的另一个实施方案中，咯萘啶或其药学 上可接受的盐与青蒿素或其衍生物的重量比可以为1:1至6:1。在根据本 发明的另一个实施方案中，咯萘啶或其药学上可接受的盐与青蒿素或其 衍生物的重量比可以为1:1至4:1。在根据本发明的另一个实施方案中， 咯萘啶或其药学上可接受的盐与青蒿素或其衍生物的重量比可以为3:1。
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指如下所述的无毒的：生 理学上可接受的，并且当给药至人类时不抑制活性成分的作用，并且通 常不会引起胃肠道疾病、过敏反应如头晕或类似反应。本发明的药物组 合物可以根据给药途径通过本领域已知的方法与药学上可接受的载体一 起以各种方式配制。给药途径不限于此，而是可以口服或肠胃外给药。 肠胃外给药途径包括例如各种途径，例如经皮、鼻内、腹膜内、肌内、 皮下、静脉内等。
当本发明的药物组合物口服给药时，根据本领域已知的方法，本发 明的药物组合物可以与合适的口服给药载体一起配制成散剂、颗粒剂、 片剂、丸剂、糖衣丸、胶囊、液剂、凝胶剂、糖浆、混悬剂、植入膜剂、 注射剂、栓剂等。合适的载体的实例可以包括糖类、淀粉类、纤维素类 以及填充剂，糖类包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木 糖醇、赤藓糖醇和麦芽糖醇；淀粉类包括玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀 粉和马铃薯淀粉；纤维素类包括纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、 羟丙基甲基纤维素和低取代羟甲基纤维素；以及填充剂，例如明胶和聚 乙烯吡咯烷酮。此外，如果需要，可以添加交联聚维酮、羟基乙酸淀粉 钠、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钠、琼脂、海藻酸或海藻酸钠 作为崩解剂。此外，药物组合物还可以包括助流剂、抗凝剂、增塑剂、 润滑剂、润湿剂、增味剂、乳化剂、防腐剂等。
此外，当肠胃外给药时，根据本领域已知的方法，本发明的药物组 合物可以与合适的肠胃外载体一起配制成注射剂、栓剂、经皮给药和鼻 腔吸入剂的形式。在注射剂的情况下，必须对其进行消毒并保护其免受 细菌和真菌等微生物的污染。用于注射剂的合适载体的实例包括但不限 于含有水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)、它们的 混合物和/或植物油的溶剂或分散介质。更优选地，合适的载体包括Hanks 溶液、Ringer溶液、含有三乙醇胺的磷酸盐缓冲盐水(PBS)或无菌注射用 水、10％乙醇、40％丙二醇和等渗溶液(如5％葡萄糖)。为了保护注射剂 免受微生物污染，可以进一步含有各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如对羟 基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等。此外，在大多数情况下，注射剂可以进一步包含等渗剂，例如糖或氯化钠。
这些制剂描述于药物化学中众所周知的处方文献(Remington’s PharmaceuticalScience，第15版，1975，MackPublishing Company，Easton，Pennsylvania)中。
在通过吸入给药的情况下，根据本发明使用的化合物可以通过使用 合适的推进剂——例如二氯氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧 化碳或其他合适的气体从加压包装或喷雾器以喷雾剂的形式方便地递 送。在加压气雾剂的情况下，剂量单位可以通过提供阀门以输送计量的 量来确定。例如，可将用于吸入器或吹入器的胶囊和药筒配制成包含基 于合适粉剂基质的粉剂混合物。
作为其他药学上可接受的载体，可以参考以下文献(Remington’sPharmaceutical Sciences，第19版，MackPublishing Company，Easton， PA,1995)中描述的可接受的载体。
在本发明的另一个实施方案中，咯萘啶或其药学上可接受的盐与药 学上可接受的载体一起配制。
如上所述，可用于本发明的“药学上可接受的载体”可以是制药领 域中常规使用的任何一种。代表性实例可以包括乳糖、糊精、淀粉、预 胶化淀粉、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、低取代羟 丙基纤维素、羟乙基纤维素、乙基纤维素、甲基纤维素、聚乙二醇、二 氧化硅、水滑石、硅酸铝镁、氢氧化铝、硅酸铝、偏硅酸铝镁、膨润土 及它们的混合物。除了载体之外，本发明的药物组合物可以进一步包含 用于在体内给药时在与水性介质接触时快速崩解和溶解的崩解剂、用于 增加溶解或吸收的增溶剂或表面活性剂、以及用于增加流动性或润滑性 的助流剂或润滑剂。崩解剂的实例可以包括交联聚维酮、羟基乙酸淀粉 钠、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钠、琼脂、海藻酸或海藻酸钠。 助流剂或润滑剂的实例可以包括胶体二氧化硅、二氧化硅、滑石、硬脂 酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂酸富马酸钠、硬脂酸或二氧化硅。然 而，它不限于所列举的实例。根据本发明的另一个实施方案，提供了一 种药物组合物，其包含40重量％至80重量％的咯萘啶或其药学上可接受 的盐、1重量％至30重量％的微晶纤维素、0.1重量％至5重量％的二氧 化硅、1重量％至10重量％的羟丙基纤维素、1重量％至10重量％的低 取代羟丙基纤维素、2重量％至20重量％的羟基乙酸淀粉钠和1重量％ 至10重量％的硬脂酸镁。
在本发明的另一个实施方案中，青蒿素或其衍生物与药学上可接 受的载体一起配制。除了载体之外，本发明的药物组合物可以进一步包 含用于在体内给药时在与水性介质接触时快速崩解和溶解的崩解剂、用 于增加溶解或吸收的增溶剂或表面活性剂、以及用于增加流动性或润滑 性的助流剂或润滑剂。载体的实例可以包括微晶纤维素、乳糖水合物、 甘露糖醇、淀粉、预胶化淀粉、低取代羟基纤维素、羟基纤维素、羟丙 基纤维素、低取代羟丙基纤维素或羟丙基甲基纤维素。崩解剂的实例可 以包括交联聚维酮、羟基乙酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基纤 维素钠、琼脂、海藻酸或海藻酸钠。助流剂或润滑剂的实例可以包括胶 体二氧化硅、二氧化硅、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂 酸富马酸钠、硬脂酸或二氧化硅。表面活性剂的代表性实例可以包括月 桂基硫酸钠(sodiumlauryl sulfate)及其衍生物、泊洛沙姆(poloxamer)及其 衍生物、饱和聚乙醇酸化甘油酯(saturatedpolyglycolized glyceride，又名 gelucire)、labrasol、各种聚山梨醇酯(例如，聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月 桂酸酯(下文称为吐温20)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单棕榈酸酯(以下称为 吐温40)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单硬脂酸酯(以下称为吐温60)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯(以下称为吐温80))、脱水山梨糖醇酯(例如脱水 山梨糖醇单月桂酸酯(以下称为Span 20)、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯(以下 称为Span 40)、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯(以下称为Span 60)、脱水山梨 糖醇单油酸酯(以下称为Span 80)、脱水山梨糖醇三月桂酸酯(以下称为 Span 25)、脱水山梨糖醇三油酸酯(以下称为Span 85)、脱水山梨糖醇三硬 脂酸酯(以下称为Span 65))、克列莫佛(cremophor)、PEG-60氢化蓖麻油、 PEG-40氢化蓖麻油、月桂基谷氨酸钠(sodium lauryl glutamate)或椰油酰 两性基二乙酸二钠(disodium cocoamphodiacetate)。然而，它不限于所列 举的实例。根据本发明的另一个实施方案，提供了一种药物组合物，其 包含10重量％至50重量％的青蒿素或其衍生物、30重量％至70重量％ 的微晶纤维素、2重量％至20重量％的低取代羟丙基纤维素、2重量％至20重量％的羟基乙酸淀粉钠，0.1重量％至5重量％的二氧化硅、0.5重量％ 至15重量％的月桂基硫酸钠和0.1重量％至5重量％的硬脂酸镁。
在本发明的另一个实施方案中，咯萘啶或其药学上可接受的盐和 青蒿素或其衍生物与药学上可接受的载体一起配制。除了载体之外，本 发明的药物组合物可以进一步包含用于在体内给药时在与水性介质接触 时快速崩解和溶解的崩解剂、用于增加溶解或吸收的增溶剂或表面活性 剂、以及用于增加流动性或润滑性的助流剂或润滑剂。载体的实例可以 包括乳糖、糊精、淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、 羟丙基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、乙基纤维素、甲 基纤维素、聚乙二醇、二氧化硅、水滑石、硅酸铝镁、氢氧化铝、硅酸 铝、偏硅酸铝镁、膨润土、丁基羟基甲苯及它们的混合物。表面活性剂 的代表性实例可以包括月桂基硫酸钠及其衍生物、泊洛沙姆及其衍生物、 饱和聚乙醇酸化甘油酯(saturatedpolyglycolized glyceride，又名gelucire)、 labrasol、各种聚山梨醇酯(例如，聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯(下 文称为吐温20)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单棕榈酸酯(以下称为吐温40)、 聚氧乙烯脱水山梨糖醇单硬脂酸酯(以下称为吐温60)、聚氧乙烯脱水山 梨糖醇单油酸酯(以下称为吐温80))、脱水山梨糖醇酯(例如脱水山梨糖醇 单月桂酸酯(以下称为Span 20)、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯(以下称为Span40)、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯(以下称为Span 60)、脱水山梨糖醇单油酸 酯(以下称为Span 80)、脱水山梨糖醇三月桂酸酯(以下称为Span 25)、脱 水山梨糖醇三油酸酯(以下称为Span 85)、脱水山梨糖醇三硬脂酸酯(以下 称为Span 65))、克列莫佛、PEG-60氢化蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、 月桂基谷氨酸钠或椰油酰两性基二乙酸二钠，但不限于此。崩解剂的实 例可以包括交联聚维酮、羟基乙酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、羧甲 基纤维素钠、琼脂、海藻酸或海藻酸钠。助流剂或润滑剂的实例可以包 括胶体二氧化硅、二氧化硅、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、 硬脂酸富马酸钠、硬脂酸或二氧化硅。然而，它不限于所列举的实例。 根据本发明的另一个实施方案，提供了一种药物组合物，其包含15重量％至60重量％的咯萘啶或其药学上可接受的盐、5重量％至20重量％的青 蒿素或其衍生物、5重量％至30重量％的微晶纤维素、10重量％至40重 量％的交联聚维酮、2重量％至15重量％的低取代羟丙基纤维素、1重量％ 至10重量％的月桂基硫酸钠、5重量％至30重量％的聚乙二醇、0.1重量％ 至5重量％的羟丙基纤维素、0.001重量％至1重量％丁基羟基甲苯、0.1 重量％至5重量％二氧化硅和0.5重量％至10重量％硬脂酸镁。
本发明的药物组合物可以配制为散剂、颗粒剂、片剂、胶囊、干糖 浆、包衣剂、注射剂、栓剂、经皮给药、吸入给药等。
在本发明的另一个实施方案中，本发明的药物组合物可以与一种或 多种具有抗病毒功效的附加药物组合给药以预防和治疗流行性RNA病 毒感染。
在本发明的另一个实施方案中，其他抗病毒剂的实例可以包括病毒 复制抑制剂、解旋酶抑制剂、病毒蛋白酶抑制剂和病毒细胞进入抑制剂， 但不限于此。在本发明的另一个实施方案中，其他抗病毒剂可以为例如 利巴韦林、干扰素、氯硝柳胺或它们的组合，但不限于此。
在本发明的另一个实施方案中，流行性RNA病毒传染病的实例可以 包括但不限于寨卡病毒感染、埃博拉病毒感染以及由新型流感病毒和冠 状病毒感染引起的呼吸系统疾病。在本发明的另一个实施方案中，由冠 状病毒感染引起的呼吸系统疾病的实例可以包括但不限于，严重急性呼 吸综合症(SARS)、中东呼吸综合症(MERS)或2019冠状病毒病(COVID-19)。在本发明的另一个实施方案中，由冠状病毒感染引起的呼 吸系统疾病可以是2019冠状病毒病(COVID-19)。
在本发明中，术语“预防”是指通过施用本发明的药物组合物来抑 制或延缓流行性RNA病毒感染的发生、传播和复发的任何行为，并且术 语“治疗”是指通过施用本发明的药物组合物来改善或有益地改变疾病 的症状的任何行为。
此外，如本文所用，术语“治疗有效量”是指表现出比阴性对照更 高的反应的量，并且优选是指足以预防或治疗流行性RNA病毒感染的 量。用于患者的治疗剂量通常为50mg/天至2,000mg/天，并且更优选100 mg/天至1,000mg/天，这取决于病症的严重程度以及是单独给药还是组 合给药，还是与其他药物组合给药。可以通过口服或肠胃外途径每天一 次或分次剂量给药。然而，治疗有效量可以根据如疾病的类型和严重程 度、患者的年龄、体重、健康状况和性别、给药途径和治疗周期等各种 因素适当改变。
尽管本发明描述了预防和治疗人类中的流行性RNA病毒感染，优选 人类中由冠状病毒感染引起的呼吸系统疾病，更优选人类中的 COVID-19，但本发明可用于治疗在动物和人类中的感染性RNA病毒， 特别是冠状病毒科中引起呼吸系统疾病的病毒，更特别是引起COVID-19 的病毒。
本发明的问题不限于上述技术问题，本领域技术人员通过以下描述 将清楚地理解其他未提及的技术问题。此外，以上描述不以任何方式限 制所要求保护的发明，此外，所讨论的特征的组合对于本发明的方案不 是绝对必要的。
发明的有益效果
本发明提供了一种用于预防或治疗流行性RNA病毒感染的药物组 合物，其包含治疗有效量的咯萘啶或其药学上可接受的盐和/或青蒿素或 其衍生物作为活性成分。根据本发明的药物组合物可以通过有效抑制流 行性RNA病毒感染，而有效地用于预防或治疗，例如由冠状病毒引起的 呼吸系统疾病如COVID-19。
附图说明
图1是在感染后24小时测量时，用作为本发明的活性成分之一的咯 萘啶四磷酸盐预处理的关于对SARS-CoV-2的抑制作用和细胞毒性的浓 度-反应曲线。
图2是在感染后24小时测量时，咯萘啶四磷酸盐同时处理的关于对SARS-CoV-2的抑制作用和细胞毒性的浓度-反应曲线。
图3示出了在感染后24小时和48小时测量青蒿琥酯(本发明的活性 成分之一)同时处理对SARS-CoV-2的抑制作用并与作为对照的氯喹进行 比较的结果。
图4示出了通过组合方式以不同比例的咯萘啶四磷酸盐和青蒿琥酯 的组合对SARS-CoV-2感染细胞的抑制作用的比较结果，并且在最佳比 例下，在感染后24小时和48小时对病毒的抑制作用进行比较。
图5是当咯萘啶四磷酸盐或青蒿琥酯同时处理病毒感染时，人肺细 胞系Calu-3细胞感染后24小时和48小时测量的对SARS-CoV-2的抑制 作用和细胞毒性的浓度-反应曲线，与作为对照的羟基氯喹进行了比较。
图6是在药物处理48小时后测量时，通过用咯萘啶四磷酸盐或青蒿 琥酯对人肺细胞系Calu-3细胞进行感染后处理的关于对SARS-CoV-2的 抑制作用的浓度-反应曲线。
图7示出了仓鼠感染SARS-CoV-2并在感染后1小时口服给药低剂 量或高剂量的以3:1的比例组合的咯萘啶四磷酸盐和青蒿琥酯，每天一 次，持续3天，或在感染后25小时单独使用高剂量的咯萘啶四磷酸盐， 然后在感染后第4天分析肺中的病毒滴度，并与未给药的病毒接种对照 组进行比较的结果。
具体实施方式
以下，将通过实施例更详细地说明本发明的构成和效果。然而，这 些实施例仅是说明性的，并且本发明的范围不限于此。
实施例1：咯萘啶四磷酸盐单片剂的制备
将羟丙基纤维素溶解在乙醇中以制备粘合溶液。在使用制得的粘合 溶液对咯萘啶四磷酸盐进行湿法制粒后，将所得产品干燥并制粒。将低 取代羟丙基纤维素、羟基乙酸淀粉钠、微晶纤维素和二氧化硅混合。通 过添加硬脂酸镁进行润滑后，通过压片制备片剂。
[表1]
Figure BDA0003922101400000131
实施例2：青蒿琥酯单片剂的制备
使用筛子筛分二氧化硅和月桂基硫酸钠。将过筛后的二氧化硅和月 桂基硫酸钠与青蒿琥酯、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素和羟基乙酸 淀粉钠混合，加入硬脂酸镁进行润滑，然后压片以制备片剂。所获得的 产品用薄膜包衣剂包衣。
[表2]
Figure BDA0003922101400000132
实施例3：咯萘啶四磷酸盐/青蒿琥酯复方片剂的制备
将作为熔融分散载体的聚乙二醇、作为活性成分的丁基羟基甲苯和 青蒿琥酯混合，加热熔融，然后快速冷却并细粉碎。然后，将微晶纤维 素、低取代羟丙基纤维素、交联聚维酮和硬脂酸镁混合，得到混合物1。 将羟丙基纤维素溶解在乙醇中后，将咯萘啶四磷酸盐湿法制粒、干燥并 制粒，得到混合物2。将混合物1、混合物2、月桂基硫酸钠、二氧化硅 和交联聚维酮混合，然后向其中加入硬脂酸镁以润滑混合物，随后压片 以制备片剂。将所获得的产品用薄膜包衣剂包衣。
[表3]
Figure BDA0003922101400000141
为了确定本发明的咯萘啶或其盐、青蒿素或其衍生物是否具有抗冠 状病毒的抗病毒活性，如以下实验例将试剂单独和组合处理，并评价对 病毒感染的抑制率。
实验例1：咯萘啶四磷酸盐的抗病毒效果评价(预处理)
在实验例1中，在用SARS-CoV-2(韩国分离株)感染细胞之前，对咯 萘啶四磷酸盐进行1小时的预处理，并评价对病毒感染的抑制功效。
1)病毒和宿主细胞的制备
Vero细胞购自美国典型培养物保藏中心(ATCC)，并在37℃和5％CO2下在补充有10％热灭活胎牛血清(FBS)和抗生素的Dulbecco氏改良的 Eagle培养基(DMEM)中培养。SARS-CoV-2由韩国疾病控制和预防中心 (KCDC)提供。病毒扩增后，通过噬斑测定来确定病毒滴度，噬斑测定通 过计数在病毒感染后用于病毒扩增的细胞中形成的病毒噬斑来进行。
2)使用免疫荧光染色成像确定抗病毒功效
将Vero细胞以每孔1.2×104个细胞的密度接种在μClear板中，并在 实验前24小时在培养基中用在0.05-50μM的浓度范围内的一系列10个 药物稀释液预处理细胞1小时，然后以0.0125的感染复数(MOI)将SARS-CoV-2接种到细胞中。感染后24小时，用4％甲醛固定细胞，并 使用针对SARS-CoV-2的N蛋白的抗体通过免疫荧光染色分析感染的细 胞。通过成像分析程序，与阳性对照和阴性对照进行比较，将感染率计 算为受感染细胞数与细胞总数的比率。药物的抗病毒效果以浓度-反应曲 线表示，并且使用Graph Prism(第8版)分析程序，计算50％有效浓度 (EC50，抑制病毒感染诱导的细胞毒性50％的浓度)和50％细胞毒性浓度 (CC50，与正常细胞相比，在50％的细胞中造成损伤的化合物的浓度)如等 式1所示计算。
<等式1>
Sigmoidal模型，Y＝最大响应+(最大响应–最小响应)/(1+(IC50/X)曲线坡度)
结果如图1所示，在用SARS-CoV-2感染Vero细胞的情况下，在50 μM的咯萘啶浓度下观察到70％的病毒抑制率，但通过药物预处理细胞毒 性也增加了17％。Vero细胞是从非洲绿猴(Chlorocebussp.)的肾上皮细胞 中分离出来的，并被称为1型IFN缺陷细胞。在之前的研究中，在Vero 细胞中测量咯萘啶对埃博拉病毒的体外抗病毒功效时，在低于CC50(CC50＝1.3μM)的浓度下没有观察到抗病毒活性，但当接种到人源性Hela细胞 中时，据报道CC50更高，并且在无毒浓度下显示出抗病毒活性(EC50＝ 0.42-1.12μM，CC50＝3.1μM)。此外，在受到埃博拉病毒攻击的小鼠模 型中，咯萘啶显著抑制死亡率和病毒感染率(Lane等人，2015)。众所周 知，抗病毒剂的功效可能在体外或体内测量系统中有所不同，这取决于 所测试的宿主细胞及其细胞内免疫信号通路的特征差异(Lane等人， 2015)，因此，另外建立了基于人源性宿主细胞的测定，并且在各种细胞 系和动物研究中进一步证实了咯萘啶的抗病毒功效。
实验例2：咯萘啶四磷酸盐对SARS-CoV-2病毒的抑制作用(同时处 理)
在实验例2中，当在SARS-CoV-2(韩国分离株)感染时同时处理细胞 时，评价了咯萘啶对病毒感染的抑制作用。已知氯喹通过提高核内体pH 值来来抑制病毒与细胞的结合和SARS-CoV宿主受体的糖基化从而显示 抗病毒功效(Vincent等人，2005)。由于具有类似于氯喹的结构的咯萘啶 预期也通过类似的机制发挥作用，因此在病毒感染时同时用咯萘啶处理 并测量其抗病毒功效。通过对实验例1中使用的一些实验条件进行优化， 在细胞毒性相对较低的测试条件下进行实验。
1)病毒和宿主细胞的制备
Vero细胞在37℃和5％CO2下，在补充有10％热灭活胎牛血清(FBS) 和抗生素的Dulbecco氏改良的Eagle培养基(DMEM)中培养。 SARS-CoV-2由韩国疾病控制和预防中心(KCDC)提供。病毒扩增后，通 过qRT-PCR测量RNA拷贝数来确定病毒滴度。
2)使用RNA拷贝数测量抗病毒功效
将咯萘啶四磷酸盐溶解在DMSO中后，使用培养基将其稀释至 0.033-100μM的浓度。实验前24小时，将SARS-CoV-2接种于以2×104个细胞/孔的密度接种在96孔板中的Vero细胞中(MOI＝0.01)，并将含有 各药物稀释液的培养基添加到每个孔中。感染后24小时，收集细胞上清 液，提取RNA，针对RdRp基因进行qRT-PCR。通过比较药物与对照的 病毒RNA拷贝数来分析药物的抗病毒功效。用由RNA拷贝数反算病毒 滴度得到的病毒感染抑制率(％抑制)来绘制药物浓度-反应曲线，并且使 用GraphPrism(第8版)分析程序，计算50％有效浓度(EC50，抑制病毒滴 度50％的浓度)，如实验例1所示。
3)细胞毒性测量(％细胞毒性)
使用基于四唑盐的测定法(WST-1)测量细胞毒性。WST-1通过仅存在 于活细胞中的线粒体脱氢酶转化为称为甲臜的显色物质。在每个孔中加 入10μLWST-1预混物后，将细胞再培养1小时，并通过ELISA测量其 吸光度来计算产生的甲臜量。计算50％细胞毒性浓度(CC50，与正常细胞 相比，在50％的细胞中造成损伤的化合物浓度)。
结果如图2所示，咯萘啶在同时处理时表现出浓度依赖性方式的抗 病毒效果，在某些高浓度下观察到细胞毒性，但在非细胞毒性浓度下， 针对SARS-CoV-2病毒的抗病毒活性超过90％抑制率(EC50＝8.27μM， CC50＝11.54μM；选择性指数，SI>1.40)。
实验例3：青蒿琥酯对SARS-CoV-2的抑制作用(同时处理)
在实验例3中，在与实验例2相同的实验条件下测量青蒿琥酯的抗 病毒功效。
1)病毒和宿主细胞的制备
Vero细胞和病毒的制备方法与实验例2相同。
2)使用RNA拷贝数测量抗病毒功效
将青蒿琥酯溶解在DMSO中，然后使用培养基稀释至3.13μM、12.5 μM和50μM的浓度。实验前24小时，将SARS-CoV-2接种至以2×104个细胞/孔的密度于96孔板中的Vero细胞中(MOI＝0.01)，并且将含有各 药物稀释液的培养基添加到每个孔中。感染后24小时和48小时，收集 细胞上清液，对RdRp基因进行qRT-PCR来计算病毒滴度，并计算病毒 感染抑制率(％抑制率)，如实验例2所示。使用氯喹作为对照。
3)细胞毒性测量(％细胞毒性)
以与实验例2中所示相同的方法测量细胞毒性。
结果如图3所示，青蒿琥酯以浓度依赖性方式表现出抗病毒活性， 并且在50μM浓度下显示出83％的病毒抑制率。在12.5μM时，感染后 24小时(24hpi)和感染后48小时(48hpi)的抑制率分别为40％和51％。此 外，在3.13μM时，感染后48小时的抑制率为39％。在所有测试条件下 都没有显著的细胞毒性。与用作对照的咯萘啶或氯喹相比，青蒿琥酯的EC50较低，抑制SARS-CoV-2的起效时间较慢，但具有持久的抗病毒效 果，显示出病毒抑制率随时间缓慢增加的模式。
实验例4：咯萘啶四磷酸盐/青蒿琥酯组合对SARS-CoV-2的抑制作 用
与在感染埃博拉病毒的豚鼠模型中未显示出抗病毒作用的氯喹不 同，咯萘啶在埃博拉病毒攻击的小鼠模型中显著改善了病毒滴度和存活 率。因此，推测氯喹可能还具有不同的作用机制，其中提出了免疫调节 机制，例如1型IFN-1途径(Lane等人，2019)。青蒿琥酯还在体外试验 中显示出对埃博拉病毒的抗病毒功效，但比咯萘啶弱(Gignox等人，2016)。因此，在实验例4中，评价了两种药物在不同组合比例下根据组 合处理的抗病毒功效的变化。
1)病毒和宿主细胞的制备
Vero细胞和病毒的制备方法与实验例2相同。
2)使用RNA拷贝数测量抗病毒功效
将咯萘啶四磷酸盐和青蒿琥酯溶解在DMSO中，使用培养基以1:1、 3:1、10:1等各种组合比例稀释至各种浓度。实验前24小时，将 SARS-CoV-2接种于以2×104个细胞/孔的密度接种至96孔板的Vero细胞 (MOI＝0.01)，并且将含有各药物稀释液的培养基添加到每个孔中。感染 后24小时，收集细胞上清液，对RdRp基因进行qRT-PCR，计算病毒滴 度和病毒感染抑制率(％抑制率)，如实验例2所示。当10μM咯萘啶四磷 酸盐与3.3μM青蒿琥酯组合处理时，分别在感染后24小时和48小时测 量病毒滴度，并与作为对照的氯喹和洛匹那韦进行比较。
3)细胞毒性测量(％细胞毒性)
以与实验例2中所示相同的方法测量细胞毒性。
结果如图4所示，青蒿琥酯与咯萘啶组合处理的抗病毒效果高于青 蒿琥酯单独处理，并且随着咯萘啶在组合中的比例越高，抗病毒效果增 加。具体来说，当10μM咯萘啶四磷酸盐和3.3μM青蒿琥酯组合(比例 3:1)时，对病毒感染的抑制率达到90-100％，比用作对照的氯喹或洛匹那 韦的抗病毒效果更高。在这种情况下，对感染的抑制率可以保持长达48小时。在图4所示的所有组合比例中均未观察到显著的细胞毒性，并且 当10μM的咯萘啶四磷酸盐和3.3μM的青蒿琥酯组合处理时，与单独使 用10μM的咯萘啶四磷酸盐处理相比，观察到较低的细胞毒性(减少 49.5％)。
实验例5：咯萘啶四磷酸盐或青蒿琥酯对人肺细胞系SARS-CoV-2 的抑制作用(同时处理)
据报道，人类和其他动物的抗病毒作用可能存在物种差异，例如受 体结构。因此，为了确认在人肺细胞系中的功效，在实验例5中，当将 SARS-CoV-2(韩国分离株)接种到Calu-3细胞(人肺细胞系)中时，用咯萘 啶磷酸盐或青蒿琥酯处理并评价了抑制病毒感染的功效。在 SARS-CoV-2(韩国分离株)感染时同时处理细胞时，在人肺细胞系Calu-3 细胞中评价了咯萘啶四磷酸盐或青蒿琥酯对病毒感染的抑制作用。
1)病毒和宿主细胞的制备
Calu-3细胞在37℃和5％CO2下在补充有10％热灭活胎牛血清(FBS) 和抗生素的Dulbecco氏改良的Eagle培养基(DMEM)中培养。 SARS-CoV-2由韩国疾病控制和预防中心(KCDC)提供。
2)使用RNA拷贝数测量抗病毒功效
溶解在DMSO中后，使用培养基将咯萘啶四磷酸盐稀释至0.033-100 μM的浓度。实验前24小时，将SARS-CoV-2接种至以2×104个细胞/孔 的密度接种于96孔板中的Vero细胞(MOI＝0.01)，并且将含有各药物稀 释液的培养基中添加到每个孔中。在感染后24小时和48小时，对RdRp 基因进行qRT-PCR，如实验例2所示。从RNA拷贝数反算病毒滴度的病 毒感染抑制率(％抑制率)绘制药物浓度-反应曲线，并且使用GraphPrism (第8版)分析程序，计算50％有效浓度(EC50，抑制病毒滴度50％的浓度)， 如实验例1所示。
3)细胞毒性测量(％细胞毒性)
以与实验例2中相同的方法测量细胞毒性。
结果如图5所示，当在感染时同时处理时，咯萘啶和青蒿琥酯均以 浓度依赖性方式在人肺细胞系中表现出抗病毒效果。此外，在感染后24 小时(24hpi)和感染后48小时(48hpi)，它们在非细胞毒性浓度下表现出 对SARS-CoV-2的抗病毒活性，抑制率超过90％(咯萘啶感染后48小时 IC50＝8.58μM，CC50>100μM；选择性指数，SI>11.66；青蒿琥酯感染后48小时IC50＝0.45μM，CC50>100μM；选择性指数，SI>220.8)。具 体而言，在青蒿琥酯的情况下，与猴肾细胞系Vero细胞相比，人肺细胞 系的效果显著增加。与此相反，在低于50μM时，羟基氯喹在人肺细胞 系中没有显示出抗病毒效果，而羟基氯喹在猴细胞系中显示出抗病毒功 效。
实验例6：感染后咯萘啶四磷酸盐或青蒿琥酯处理对人肺细胞系 SARS-CoV-2的抑制作用
在实验例6中，在SARS-CoV-2(韩国分离株)接种后0、2、4、6、8、 10、12、24和36小时，分别在Calu-3细胞中用咯萘啶四磷酸盐或青蒿 琥酯处理，并且评价了每种药物对病毒感染的抑制作用保持多长时间。
1)病毒和宿主细胞的制备
Calu-3细胞和病毒以与实验例5中所示相同的方法制备。
2)使用病毒噬斑测定法测量抗病毒功效
将咯萘啶四磷酸盐和青蒿琥酯分别溶解在DMSO中后，使用培养基 将其稀释至12.5μM。接种SARS-CoV-2(MOI＝0.1)后1小时，去除上清 液，洗涤Calu-3细胞，然后添加含有2％牛血清的DMEM培养基。分别 在0、2、4、6、8、10、12、24和36小时添加含有药物的培养基。在每 次药物处理后48小时，收集细胞上清液并进行噬斑测定，其中在用于病 毒扩增的细胞Vero细胞中计数由传染性病毒感染产生的斑块。将含有2％ 琼脂糖的DMEM-F12培养基层铺在感染的Vero细胞层上，培养72小时 后，用结晶紫复染计数斑块数。用从形成的斑块数反向计算出的病毒滴 度的病毒感染抑制率(％抑制)，分析药物的抗病毒功效，并与对照进行比 较。
结果如图6所示，当12.5μM咯萘啶处理时显示出最大的抗病毒功 效(在感染后长达6小时添加时抑制>99％，在感染后长达12小时添加时 抑制>94％，并且在感染后长达24小时添加时抑制90％)。另一方面，12.5 μM青蒿琥酯处理，在感染后长达6小时添加时显示出92-96％的抑制作 用，在感染后长达12小时添加时显示>90％的抑制作用，并且在感染后长达24小时添加时显示出48％的抑制作用。
实验例7：咯萘啶四磷酸盐/青蒿琥酯组合在COVID-19动物模型中 对SARS-CoV-2的抑制作用
在实验例7中，将咯萘啶四磷酸盐和青蒿琥酯(以3:1的比例组合)口 服给药感染了SARS-CoV-2(韩国分离株)的仓鼠，以评价动物体内的抗病 毒功效。
1)制备用于SARS-CoV-2接种的病毒和仓鼠
SARS-CoV-2病毒由韩国疾病控制和预防中心(KCDC)提供。作为实 验动物模型，使用对SARS-CoV-2高度易感且供应限制较少的叙利亚仓 鼠，并将SARS-CoV-2(1×106PFU/100μL)分别以50μL的量接种到仓鼠 的两个鼻腔通道中。
2)使用噬斑测定测量体内抗病毒功效
鼻腔接种SARS-CoV-2后1小时，以3:1的比例口服给药咯萘啶四磷 酸盐(180mg/kg或360mg/kg)和青蒿琥酯(60mg/kg或120mg/kg)每天一 次，连续3天，评价两种药物组合对SARS-CoV-2的体内抗病毒功效。 作为比较实验组，在感染后25小时口服给药单独的咯萘啶360mg/kg一 次，以评价单独的咯萘啶的感染后功效持续时间。咯萘啶四磷酸盐和青 蒿琥酯均在临用前制备，完全溶解在5％碳酸氢钠中，并口服给药。作为 对照组，使用未接种病毒的正常对照组(Mock)和同时仅给药溶剂的载体 对照组。在感染后4天，切除肺的左叶和右叶，提取病毒，并通过如实 验例6中所述的噬斑测定分析肺组织中的病毒滴度。将通过噬斑测定量 化的肺病毒滴度标准化为肺组织的总重量(g)，然后转换为log值以计算 最终滴度(Log10噬斑形成单位/g，Log10PFU/g)。
结果如图7所示，在感染后4天，肺组织中感染性病毒滴度的降 低在咯萘啶四磷酸盐(P)-青蒿琥酯(A)180/60mg/kg和360/120mg/kg联合 给药组中均具有统计学意义[Log10PFU中位数：病毒攻击载体对照组的 8.30vs PA180/60mg/kg联合给药组的7.22(p<0.001)vs PA360/120mg/kg 联合给药组的7.61(p＝0.046)]。另一方面，当单独口服给药咯萘啶四磷酸 盐时，在给药360mg/kg的高剂量时，在肺组织中观察到感染性病毒滴 度显著降低，并且即使在感染后25小时给药一次也观察到显著的抑制作 用[病毒攻击载体对照组的中位数Log10PFU 8.30vs单次高剂量25hpi给 药组7.22(p<0.001)]。

Claims (32)

1.一种用于预防或治疗流行性RNA病毒感染的药物组合物，其包含治疗有效量的咯萘啶或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
2.一种用于预防或治疗流行性RNA病毒感染的药物组合物，其包含治疗有效量的青蒿素或其衍生物，以及药学上可接受的载体。
3.一种用于预防或治疗流行性RNA病毒感染的药物组合物，其包含治疗有效量的咯萘啶或其药学上可接受的盐，和青蒿素或其衍生物，以及药学上可接受的载体。
4.根据权利要求1或3所述的药物组合物，其中所述咯萘啶的药学上可接受的盐选自磷酸盐、硫酸盐、盐酸盐、乙酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、马来酸盐和富马酸盐。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，其中所述咯萘啶的药学上可接受的盐为咯萘啶四磷酸盐。
6.根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述咯萘啶或其药学上可接受的盐与所述青蒿素或其衍生物的重量比为10:1至1:10。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其中所述咯萘啶或其药学上可接受的盐与所述青蒿素或其衍生物的重量比为1:1至6:1。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中所述咯萘啶或其药学上可接受的盐与所述青蒿素或其衍生物的重量比为3:1。
9.根据权利要求2或3所述的药物组合物，其中所述青蒿素衍生物选自二氢青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚和蒿乙醚。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其中所述青蒿素衍生物是青蒿琥酯。
11.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其进一步包含至少一种其他抗病毒剂。
12.根据权利要求11所述的药物组合物，其中所述其他抗病毒剂选自病毒复制抑制剂、解旋酶抑制剂、病毒蛋白酶抑制剂和病毒细胞进入抑制剂。
13.根据权利要求12所述的药物组合物，其中所述其他抗病毒剂选自利巴韦林、干扰素、氯硝柳胺及它们的组合。
14.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其中所述流行性RNA病毒感染选自寨卡病毒感染、埃博拉病毒感染、由新型流感病毒或冠状病毒感染引起的呼吸系统疾病。
15.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述由冠状病毒感染引起的呼吸系统疾病选自严重急性呼吸综合症(SARS)、中东呼吸综合症(MERS)和2019冠状病毒病(COVID-19)。
16.根据权利要求15所述的药物组合物，其中所述由冠状病毒感染引起的呼吸系统疾病是2019冠状病毒病(COVID-19)。
17.治疗有效量的咯萘啶或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗流行性RNA病毒感染的药物中的用途。
18.治疗有效量的青蒿素或其衍生物在制备用于预防或治疗流行性RNA病毒感染的药物中的用途。
19.治疗有效量的咯萘啶或其药学上可接受的盐和青蒿素或其衍生物在制备用于预防或治疗流行性RNA病毒感染的药物中的用途。
20.根据权利要求17或19所述的用途，其中所述咯萘啶的药学上可接受的盐选自磷酸盐、硫酸盐、盐酸盐、乙酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、马来酸盐和富马酸盐。
21.根据权利要求20所述的用途，其中所述咯萘啶的药学上可接受的盐是咯萘啶四磷酸盐。
22.根据权利要求19所述的用途，其中，所述咯萘啶或其药学上可接受的盐与所述青蒿素或其衍生物的重量比为10:1至1:10。
23.根据权利要求22所述的用途，其中，所述咯萘啶或其药学上可接受的盐与所述青蒿素或其衍生物的重量比为1:1至6:1。
24.根据权利要求23所述的用途，其中，所述咯萘啶或其药学上可接受的盐与所述青蒿素或其衍生物的重量比为3:1。
25.根据权利要求18或19所述的用途，其中所述青蒿素衍生物选自二氢青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚和蒿乙醚。
26.根据权利要求25所述的用途，其中所述青蒿素衍生物是青蒿琥酯。
27.根据权利要求17至19中任一项所述的用途，其中所述药物进一步包含至少一种其他抗病毒剂。
28.根据权利要求27所述的用途，其中所述其他抗病毒剂选自病毒复制抑制剂、解旋酶抑制剂、病毒蛋白酶抑制剂和病毒细胞进入抑制剂。
29.根据权利要求28所述的用途，其中所述其他抗病毒剂选自利巴韦林、干扰素、氯硝柳胺及它们的组合。
30.根据权利要求17至19中任一项所述的用途，其中流行性RNA病毒传染病选自寨卡病毒感染、埃博拉病毒感染、由新型流感病毒或冠状病毒感染引起的呼吸系统疾病。
31.根据权利要求30所述的用途，其中所述由冠状病毒感染引起的呼吸系统疾病选自严重急性呼吸综合症(SARS)、中东呼吸综合症(MERS)和2019冠状病毒病(COVID-19)。
32.根据权利要求31所述的用途，其中所述由冠状病毒感染引起的呼吸系统疾病为2019冠状病毒病(COVID-19)。
CN202180032608.0A 2020-03-26 2021-03-25 用于预防或治疗流行性rna病毒传染病的药物组合物 Pending CN115666572A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2020-0037135 2020-03-26
KR20200037135 2020-03-26
PCT/KR2021/003742 WO2021194290A1 (ko) 2020-03-26 2021-03-25 유행성 rna 바이러스 감염질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115666572A true CN115666572A (zh) 2023-01-31

Family

ID=77892085

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180032608.0A Pending CN115666572A (zh) 2020-03-26 2021-03-25 用于预防或治疗流行性rna病毒传染病的药物组合物

Country Status (16)

Country Link
US (1) US20230132036A1 (zh)
EP (1) EP4129290A4 (zh)
JP (1) JP2023519277A (zh)
KR (1) KR20210120891A (zh)
CN (1) CN115666572A (zh)
AU (1) AU2021244009A1 (zh)
BR (1) BR112022019198A2 (zh)
CA (1) CA3172672A1 (zh)
CL (1) CL2022002588A1 (zh)
CO (1) CO2022014992A2 (zh)
CR (1) CR20220508A (zh)
EC (1) ECSP22081150A (zh)
IL (1) IL296721A (zh)
MX (1) MX2022011885A (zh)
PE (1) PE20230041A1 (zh)
WO (1) WO2021194290A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022076565A1 (en) * 2020-10-07 2022-04-14 Sorrento Therapeutics, Inc. Salicylanilide analogs for use in the treatment of coronavirus
WO2023172065A1 (ko) * 2022-03-08 2023-09-14 주식회사 위바이오트리 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 항 바이러스용 또는 항암용 조성물 및 이의 제조방법

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1319006A (zh) * 1998-09-22 2001-10-24 朱马制药有限公司 有机磷化合物在制备用于治疗或预防性治疗感染的药物或者在植物中作为杀真菌剂、杀菌剂或除草剂的用途
US20070142459A1 (en) * 2003-02-12 2007-06-21 Richard Schlegel Use of artemisinin for treating tumors induced by oncogenic viruses and for treating viral infections
CN101052392A (zh) * 2004-11-02 2007-10-10 新丰制药株式会社 可口服给药的抗疟药组合制剂及其制备方法
US20110206636A1 (en) * 2003-09-16 2011-08-25 Kemin Foods, LLC Use of Endoperoxides for the Treatment of Infections Caused by Flaviviridae, Including Hepatitis C, Bovine Viral Diarrhea and Classical Swine Fever Virus
CN105168500A (zh) * 2015-09-11 2015-12-23 青岛大学附属医院 一种用于治疗小儿口腔溃疡的药物组合物及其制备方法
US20160250181A1 (en) * 2011-10-25 2016-09-01 U.S. Phytotherapy, Inc. Alternative ACT with Natural Botanical Active GRAS Ingredients for Treatment and Prevention of the ZIKA Virus
CN115968285A (zh) * 2020-03-18 2023-04-14 Gmp生物技术有限公司 TGF-β抑制、用于其的药剂及组合物

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101857613B (zh) * 2010-06-03 2012-04-18 中国科学院新疆理化技术研究所 一枝蒿酮酸糖酯类衍生物及其制备方法和用途
CN101898966B (zh) * 2010-07-15 2013-04-17 中国科学院新疆理化技术研究所 含哌嗪环的一枝蒿酮酸酯类衍生物及其制备方法
US20140011829A1 (en) * 2012-07-06 2014-01-09 Robert Lewis Steele Artemisinin-Based Combination Therapy For Treating Viral Mediated Disease

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1319006A (zh) * 1998-09-22 2001-10-24 朱马制药有限公司 有机磷化合物在制备用于治疗或预防性治疗感染的药物或者在植物中作为杀真菌剂、杀菌剂或除草剂的用途
US20070142459A1 (en) * 2003-02-12 2007-06-21 Richard Schlegel Use of artemisinin for treating tumors induced by oncogenic viruses and for treating viral infections
US20110206636A1 (en) * 2003-09-16 2011-08-25 Kemin Foods, LLC Use of Endoperoxides for the Treatment of Infections Caused by Flaviviridae, Including Hepatitis C, Bovine Viral Diarrhea and Classical Swine Fever Virus
CN101052392A (zh) * 2004-11-02 2007-10-10 新丰制药株式会社 可口服给药的抗疟药组合制剂及其制备方法
US20160250181A1 (en) * 2011-10-25 2016-09-01 U.S. Phytotherapy, Inc. Alternative ACT with Natural Botanical Active GRAS Ingredients for Treatment and Prevention of the ZIKA Virus
CN105168500A (zh) * 2015-09-11 2015-12-23 青岛大学附属医院 一种用于治疗小儿口腔溃疡的药物组合物及其制备方法
CN115968285A (zh) * 2020-03-18 2023-04-14 Gmp生物技术有限公司 TGF-β抑制、用于其的药剂及组合物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
THOMAS R. LANE ET AL: "Repurposing the antimalarial pyronaridine tetraphosphate to protect against Ebola virus infection", 《PLOS NEGLECTED TROPICAL DISEASES》, vol. 13, no. 11, pages 0007890 *

Also Published As

Publication number Publication date
JP2023519277A (ja) 2023-05-10
CL2022002588A1 (es) 2023-05-26
EP4129290A4 (en) 2023-08-30
ECSP22081150A (es) 2023-02-28
CR20220508A (es) 2023-04-25
KR20210120891A (ko) 2021-10-07
CA3172672A1 (en) 2021-09-30
BR112022019198A2 (pt) 2022-11-16
US20230132036A1 (en) 2023-04-27
IL296721A (en) 2022-11-01
MX2022011885A (es) 2022-10-21
CO2022014992A2 (es) 2022-11-29
EP4129290A1 (en) 2023-02-08
WO2021194290A1 (ko) 2021-09-30
AU2021244009A1 (en) 2022-10-27
PE20230041A1 (es) 2023-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
McKee et al. Candidate drugs against SARS-CoV-2 and COVID-19
TWI566773B (zh) 用於治療ｃ型肝炎病毒之組合物
KR102421301B1 (ko) 호흡기 바이러스성 질환 치료를 위한 라도티닙의 용도
CN115666572A (zh) 用于预防或治疗流行性rna病毒传染病的药物组合物
CN113244212B (zh) 黄芩素在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染疾病的药物中的应用
TWI791212B (zh) 維多氟地莫司(Vidofludimus)用於治療或預防病毒性疾病
CN113521289A (zh) 15种药物有效成分在抗病毒感染中的应用
WO2021207399A1 (en) Hydrolysable tannins for use in mitigating acute respiratory distress syndrome
El Kantar et al. Derivatization and combination therapy of current COVID-19 therapeutic agents: a review of mechanistic pathways, adverse effects, and binding sites
Hong et al. Remdesivir as a broad-spectrum antiviral drug against COVID-19.
EP4116296A1 (en) Anti-rna virus drug and application thereof
CN113491699A (zh) 霉酚酸或含霉酚酸的组合制剂在抗冠状病毒中的应用
US20240033349A1 (en) Vaccine and method of protection against coronavirus infection
US20230210866A1 (en) Composition comprising diltiazem for treating a viral infection caused by sars-cov-2 viruses
EP4188378A1 (en) Use of wnt/beta-catenin pathway inhibitors to block replication of sars-cov-2 and other pathogenic viruses
KR20210129579A (ko) 사스 코로나바이러스 감염증 치료용 약학적 조성물
CN113893345A (zh) 247种化合物及其组合物在抗新型冠状病毒感染中的应用
OA21043A (en) Pharmaceutical composition for preventing or treating epidemic RNA viral infectious disease.
CN113262224A (zh) 奈非那韦在制备防治新冠肺炎药物中的应用
CN114786659A (zh) 用于治疗汉坦病毒感染的mek抑制剂
CN113440527B (zh) 萘酚喹或含萘酚喹的组合制剂在抗冠状病毒中的应用
RU2794315C1 (ru) Способ профилактики или лечения коронавирусной и других острых респираторных вирусных инфекций
AU2017210921B2 (en) Composition and combined medication method for treating enterovirus infection
CN113440527A (zh) 萘酚喹或含萘酚喹的组合制剂在抗冠状病毒中的应用
JP2024512051A (ja) ウイルス感染症を処置するためのメベンダゾールの使用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40081976

Country of ref document: HK