CN115968285A - TGF-β抑制、用于其的药剂及组合物 - Google Patents
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Abstract
本公开涉及利用诸如青蒿素和反义寡核苷酸(包括OT‑101)的特定药剂抑制TGF‑β。本发明还提供了包含所述药剂及任选的一种或多种另外的治疗剂的组合物、治疗各种病毒性疾病包括COVID‑19的方法以及涉及所述药剂的使用方法。本发明还提供了纯度大于90%的基本上纯的青蒿素。本发明还提供了用于治疗COVID‑19的青蒿素。本发明提供了青蒿素的提取方法和包含青蒿素的物质组合物。本发明还提供了治疗TGF‑β风暴的方法。本发明还提供了通过抑制TGF‑β诱导的蛋白(包括IL‑6、TGFBIp)使用反义寡核苷酸的方法。
Description
技术领域
本公开在广义上属于药剂学领域,尤其是TGF-β抑制。具体而言,本发明涉及利用特定药剂如青蒿素、反义寡核苷酸抑制TGF-β。本发明还提供了包含所述药剂的组合物、涉及所述药剂的治疗方法和使用方法。
背景技术
转化生长因子β(TGF-β)是分泌型二聚多功能蛋白的一个较大超家族的一部分,该超家族还包括激活素和骨形态生成蛋白。TGF-β是一组多功能肽,在许多细胞类型中控制增殖、分化和其他功能。通过TGF-β配体与其同源的I型和II型单次跨膜受体(即分别为TβRI和TβRII)的相互作用来激活TGF-β信号通路,所述I型和II型单次跨膜受体被赋予固有的丝氨酸/苏氨酸激酶活性。已鉴定出三种TGF-β亚型,即TGF-β1、2和3,它们具有70%的序列同一性,结合相同的TGF-βⅠ型和II型受体复合物,并激活相同的下游细胞内信号通路。
TGF-β超家族抑制剂在多种临床应用中具有巨大潜力。有几种分子能抑制TGF-β家族成员。TGF-β抑制剂的开发和体内药物递送新技术的创新无疑将增加针对病毒性疾病和其中TGF-β家族起重大作用的其他疾病/病症的治疗选择。
需要有效的药剂来抑制TGF-β。这在各种病毒、细菌、真菌等引起的流行病和感染中也变得重要。
近年来如SARS、MERS、禽流感、猪流感的疾病在很大程度上影响了人类。
自2019年末以来,由新型冠状病毒SARS-CoV-2引起的上呼吸道感染和肺炎爆发(也称为COVID-19)已从其震中迅速蔓延,成为一种全球流行病,造成数百万病例和数千人死亡。据信,此次爆发源于人畜共患病,其中动物与人之间传播,随后通过气溶胶飞沫和污染表面进行人与人之间的传播。与先前的SARS和MERS爆发一样,正在采取多种方法来试图治疗和预防该疾病。SARS-CoV-2的基因组信息是已知的,并且已经被共享。已经开发出一种使用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的可靠检测方法并投入广泛使用。据报道,在全球范围内,有数百项临床研究正在进行靶向COVID-19的诊断和治疗。在clinicaltrials.gov网站上记录了至少5000项此类临床研究,而且列表每天都在增加。大多数都是活跃的和正在登记的患者。这些试验跨越了治疗范围,并包括一些诊断研究和一些评价传统药物和草药治疗方法的试验。大多数列出的研究都是在评估现有的药物,并有一些证据表明它们或作为单一疗法或以联合方式具有抗病毒活性。
这类药剂包括抗病毒药(蛋白酶抑制剂、核苷酸类似物)、非甾体抗炎药、皮质类固醇、免疫调节剂、单克隆抗体、多克隆抗体制剂、洗涤微生物群和脐带间充质干细胞。
尽管进行了大量研究,但除地塞米松(Dexamethasone)外,没有发现任何药剂是有效的。早期候选治疗药物已开始产生临床视点,其能有助于下一波抗-COVID-19疗法的开发。三种早期药物治疗包括:1)氯喹(chloroquine)和羟氯喹(hydroxychloroquine)/阿奇霉素(azithromycin)联合用药2)瑞德西韦(remdesivir)和3)sarilumab。
从羟氯喹学到的经验:
羟氯喹和氯喹被FDA批准用于治疗或预防疟疾。羟氯喹也被FDA批准用于治疗自身免疫性疾病,如慢性盘状红斑狼疮、成人系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎。虽然已有关于使用氯喹和羟氯喹(用于疟疾的药物)的报告浮出水面,但对COVID-19的疗效在最好的情况下仍不确定,或者在较糟的情况下不是有效的且是有毒的。已知羟氯喹对SARS-CoV-2病毒具有体外活性。然而,针对SARS-CoV-2病毒的EC50与针对疟疾的EC50不同,羟氯喹针对SARS-CoV-2的体外EC50比针对疟疾的高>20倍。文献中针对SARS-CoV-2病毒的EC50值范围为0.72-17.31μM,较高的EC50通常与较高的感染多样性相关,这表明针对更高的病毒载量可能需要进行更大的全身暴露。对于FDA推荐的疟疾治疗剂量(800mg负荷剂量,随后每天400mg,共3天),模拟预测89%的受试者在第一天出现高于目标的低谷,但在开始预防后的第14天,这一数字降至7%。这表明,在安全性特性可能不如批准的疟疾剂量稳健的情况下,需要更高的剂量。目前FDA批准了疟疾治疗剂量(800mg,然后在初始剂量后6小时、24小时和48小时为400mg,共3天)和预防(每周400mg)以及其他方案,如最近的COVID-19试验中测试的那些方案(即400mg/天,持续5天或200mg,每天3次,持续6天)。
从瑞德西韦学到的经验:
瑞德西韦(GS-5734)是腺苷类似物的一种研究性单氨基磷酸盐前药,由GileadSciences,Inc.开发,用于应对2014年至2016年西非埃博拉病毒爆发。瑞德西韦以其活性三磷酸核苷形式与核糖核酸(RNA)依赖性RNA聚合酶结合,并作为RNA链终止剂起作用。其在Vero E6细胞中显示出对SARS-CoV-2强效的体外活性,48小时时的EC50为0.77μM。该药物的NIAID/NIH试验是双盲和安慰剂对照的:治疗组中的患者第一天接受200mg药物,此后每天接受100mg,持续直到10天。参与者需要病毒检测呈阳性,并在该疾病中有肺部受累(lunginvolvement)的证据。主要终点是改善恢复时间(出院或恢复正常活动的能力),瑞德西韦在统计学上优于安慰剂:11天相比于15天。然而,对生存时间没有影响(治疗组死亡率为8%,安慰剂组为11.6%)。这项在中国进行的双盲、安慰剂对照试验共有237名患者入选,这些患者具有12天或更少的症状,证实了病毒感染以及肺部受累(室内空气中氧饱和度<94%,以及X光片证实的病毒性肺炎)。瑞德西韦的剂量与NIH试验相同,但该药物的使用与临床改善时间缩短不相关。亚组分析显示,总体上症状持续10天或更短时间的患者有更短持续时间的趋势(无统计学显著性)。两组的死亡率相同,尽管在更短时间的患者中,接受瑞德西韦的死亡率也有降低的趋势(无显著性)。在患者的上呼吸道和下呼吸道中都检查病毒载量,在任何组中,与安慰剂相比,瑞德西韦对病毒载量均无影响。由于缺乏床位,患者可能是COVID-19的更严重病例。数据表明,瑞德西韦在早期或作为预防药物比在更严重的情况下更有效。这可能适用于仅靶向病毒复制的抗病毒药。
从托珠单抗(Tocilizumab)学到的经验:
托珠单抗是一种抑制膜结合的和可溶性的白介素-6(IL-6)受体的人源化单克隆抗体。白介素-6由单核细胞和巨噬细胞分泌,是细胞因子释放综合征(CRS)患者免疫应答和症状的主要驱动因素之一。尽管托珠单抗于2010年首次被FDA批准用于类风湿性关节炎的治疗,但近年来,它在作为皮质类固醇减量剂(corticosteroid-sparing agent)的嵌合抗原受体T细胞(CAR T)疗法之后,已成为治疗CRS患者的热门药物。事实上,由于其有效性和安全性特性,它在2017年获得了FDA批准用于严重或危及生命的CAR T相关CRS。在严重COVID-19中已报道了高炎症状态和细胞因子风暴,包括IL-6升高,其与中国患者的死亡率增加有关。2020年2月5日至14日期间,中国21名接受托珠单抗治疗的患者的预印本(非同行评审)病例系列报告取得了明显的成功,包括发烧和C-反应蛋白快速消退,氧气需求减少,以及通过计算机断层扫描成像肺部阴影消退。作者声明,所有患者在托珠单抗前都接受了“一周的常规治疗”,其被描述为“根据国家治疗指南的标准治疗”,包括洛匹那韦(lopinavir)、甲基强的松龙(methylprednisolone)和其他支持性治疗。所有患者在施用托珠单抗前均进行了IL-6分析,平均值为132.38±278.54pg/mL(正常<7pg/mL)。现在看来,效用仅存在于危重症患者,即那些需要机械通气或高流量氧合的患者。Sanofi和Regneron于2020年4月27日宣布,在中期分析发现对不太严重的患者中几乎没有益处之后,一项正在进行的II/III期试验将仅对这些危重症受试者继续进行。这些数据与细胞因子风暴仅在COVID-19相关ARDS的晚期阶段重要一致。在不解决潜在感染的情况下抑制炎症反应可能不是治疗COVID-19的最佳方法,因此联合使用抗病毒剂是合适的。
对当前COVID-19形势的综合认识:
COVID-19疾病进展和如瑞德西韦及托珠单抗等治疗剂的临床经验表明,COVID-19有两个阶段-基于免疫防御的保护阶段和继发炎症驱动的破坏阶段(图1)。瑞德西韦在初始感染早期起作用,托珠单抗在该疾病末期的晚期起作用。在从早期感染过渡到高炎症阶段(肺部阶段)期间的中间阶段,目前没有任何可用的方法来对抗COVID-19。这个肺部阶段是我们认为TGF-β起主导作用的阶段,并且是TGF-β抑制剂具有重大影响的阶段。最近证明的OT-101的抗病毒活性(如同瑞德西韦的抗病毒活性)将支持其在感染早期阶段使用,可能与瑞德西韦联用。此外,当与托珠单抗联合使用时,OT-101的这种抗病毒活性将是有益的。同时抑制过度的细胞因子风暴和消除潜在的病毒感染将为COVID-19递送有效的疗法。TGF-β在中性粒细胞募集和纤维化中的作用表明OT-101在感染的末期阶段也将是有效的。除托珠单抗外,末期还应考虑液体保守疗法。在肺血管通透性增加的情况下,降低肺血管静水压力可减少肺水肿。当ARDS Network在一项1000名患者的随机临床试验中报告了液体保守策略使机械通气平均持续时间显著减少了2.5天(这一差异不受使用肺动脉导管的影响)时,这一观察的临床重要性得到了证实。主要的有益机制可以通过对史达林(Starling)力的有利作用来解释:较低的血管压力减少了跨血管液体过滤,尤其是在肺血管通透性增加的情况下。
图A.COVID-19的各个阶段。为了治疗COVID-19,应在病毒反应阶段增强免疫应答,同时在宿主炎症反应阶段抑制免疫应答,并采取液体保守策略。
TGF-β在ALI/ARDS中的作用
图B.细胞因子和TGF-β在介导肺水肿和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中的作用的概述示意图。
急性肺损伤(ALI)、ARDS和肺炎都是以肺水肿和肺泡积液为特征的病理学。肺炎死亡率通常是由肺泡积液、阻止正常气体交换和继发的低氧血症引起的。气道通常具有严格调节的液体层,对于正常的气体交换和去除气道中的异物至关重要(A)。在肺泡中维持这一液体层主要依赖于上皮钠通道(ENaCs)和CFTR氯离子通道介导的钠再吸收(B)。在ALI、脓毒症、炎症或感染期间,产生抑制ENaC的炎性细胞因子(C)。ENaC再吸收的减少使液体积聚在肺泡中,导致肺泡积液,导致正常气体交换丧失,继而导致低氧血症(D)。对于COVID-19,ARDS进展为全面的细胞因子风暴,并伴有IL-6表达、中性粒细胞浸润、中性粒细胞NET及相关血栓形成。
转化生长因子-β是一种致病性细胞因子,与ARDS之前的早期急性肺损伤(ALI)有关。与健康对照组相比,ARDS患者的TGF-β水平升高。此外,在ARDS患者的上皮衬液中活性TGF-β水平增加了一倍以上。除了激活多个Smad途径外,TGF-β还降低了产生多种类固醇的能力,导致无法自愈和进一步炎症损伤。其中一些途径可能对皮质类固醇治疗不敏感。
其他研究专门探讨了TGF-β在肺泡积液中的作用。使用博来霉素诱导的肺损伤模型,TGF-β诱导型基因早在2天时就急剧增加,表明TGF-β可能先于肺泡积液。令人感兴趣的是,TGF-β实际上可能在局部保持潜伏,共价连接至潜伏期相关肽(LAP);肺上皮细胞可激活并导致TGF-β与LAP解离。最近已表明整合素家族的一个成员ανβ6是LAP的配体。ανβ6在较低水平下正常表达,但随着损伤而显著增加,这揭示了快速和局部TGF-β活化的新机制。TGF-β也是氧化还原敏感的,并且经由电离辐射增加ROS的体外模型揭示了TGF-β活化的另一种机制。总之,这些研究表明,在肺损伤期间,全身和旁分泌TGF-β活化有多种备用的可能性。
直接在调节ENaC中牵涉TGF-β的第一批研究中的一个是由Frank及其同事进行的。他们表明TGF-β降低了肺上皮细胞中阿米洛利(amiloride)敏感型Na+转运。此外,TGF-β在ALI模型中经由ERK1/2途径降低αENaC mRNA和蛋白的表达,从而促进肺泡水肿。体内研究则表明,TGF-β降低了向量(vectorial)Na+和水的转运,并且这一过程独立于上皮通透性的增加而发生。有趣的是,还发现TGF-β在ENaC运输中起着不可或缺的作用。Peters及其同事首次证明了ENaC在肺中的这种急性调节;他们发现TGF-β经由与ENaCβ的相互作用诱导ENaC内化。总之,TGF-β已参与到降低ENaC表达和顶端定位的多种机制中,从而有助于ARDS和肺水肿的病理生理学。
总之,TGF-β通过以下方式损害肺屏障功能:1)降低肺上皮屏障功能,2)增加肺内皮单层的通透性,3)增加肺泡上皮单层的通透性,4)通过激活巨噬细胞破坏肺泡上皮屏障功能,和5)经由Smad2依赖性p38激活诱导内皮屏障功能障碍。TGF-β的局部激活对ALI中的肺水肿的发展至关重要,阻断TGF-β或其激活减轻肺水肿。这种中和可以例如通过施用可溶性II型TGF-β受体来实现,所述受体在肺损伤期间隔离游离的TGF-β,并保护野生型小鼠免受博来霉素或大肠杆菌内毒素诱导的肺水肿。
同样,已表明抗炎异黄酮葛根素(Puerarin)通过抑制TGF-β的表达减少肺中ARDS相关炎性过程。维生素D3通过抑制TGF-β减轻肺损伤。
TGF-β在COVID-19中的作用
预期TGF-β抑制剂在两种水平上对COVID-19具有活性:1)细胞水平-通过直接抑制TGF-β抑制病毒复制,2)患者水平-抑制病毒诱导的病理。
在细胞水平通过直接抑制TGF-β抑制病毒复制:
RSV感染诱导TGF-β表达,导致A549和PHBE细胞的细胞周期停滞。细胞周期阻滞也显示出增强RSV复制。通过用TGF-β抗体或TGF-β受体信号抑制剂阻断细胞周期阻滞可以逆转细胞周期阻滞,这表明TGF-β在病毒诱导的细胞周期阻滞中起作用。最后,阻断TGF-β也显著降低病毒蛋白表达和降低病毒滴度。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种包膜的单链正义RNA病毒,属于动脉炎病毒科(Arteriviridae)Rodartevirus属。这种高度变异的病毒可导致全部年龄段猪的呼吸疾病、流产和继发病毒和/或细菌感染,通过抑制宿主的免疫防御,导致长期感染和广泛的复杂疾病。PRRSV诱导TGF-β的过度表达,以打破免疫系统平衡,解除宿主监视,最终有利于病毒存活。在PBMC被病毒感染时,TGF-β1或TGF-β2短干扰RNA(shRNA)对TGF-β1的抑制抑制了PRRSV复制,并改善了细胞活力。
冠状病毒进入细胞后,细胞复制受到抑制,并且细胞机制转向病毒复制。VeroE6细胞的SARS-CoV感染既通过磷脂酰肌醇3’-激酶/Akt信号通路又通过细胞凋亡来抑制细胞增殖。SARS-CoV的核衣壳蛋白抑制细胞周期蛋白-细胞周期蛋白依赖性激酶复合物并阻断哺乳动物细胞(包括VeroE6)的S期进展。并且,SARS-CoV 7a蛋白经由HEK293、COS-7和Vero细胞的细胞周期蛋白D3/pRB途径阻断G0/G1期的细胞周期进展。小鼠冠状病毒复制通过降低Cdk活性和pRb磷酸化诱导感染的17Cl-1细胞G0/G1期细胞周期停滞。用禽冠状病毒感染性支气管炎病毒(IBV)感染异步复制和同步复制细胞,使感染细胞在细胞周期的G1/M期停滞。
因此,我们假设TGF-β抑制剂会影响SARS-CoV和SARS-CoV-2感染后的细胞周期调节,从而抑制病毒复制。我们在SARS-CoV-2(COVID-19病毒)的病毒复制试验中测试了各种TGF-β抑制剂。事实上,这些抑制剂表现出对SARS-CoV-2的有效抑制。已发现,在SARS-CoV-2感染期间TGF-β和/或TGF-β途径被上调,TGF-β的抑制剂有效地抑制病毒复制。这除了提供TGF-β途径对SARS-CoV-2体外感染至关重要的遗传学证据外,还提供了药理学验证。
a.TGF-β将中性粒细胞募集到炎症部位,增加肺血栓形成的风险
TGF-β是一种多功能细胞因子,在呼吸系统病毒感染的病理学中起重要作用,包括中性粒细胞募集,导致炎症和肺积液,常导致肺炎和死亡。低水平的局部TGF-β诱导中性粒细胞向受损组织(即肺)趋化。TGF-β具有最高的外周血中性粒细胞(PMN)迁移距离。随着炎症的发展,高水平的TGF-β可能通过局部表型效应和继发效应(包括血管通透性的变化)促进病毒的发病,这是由VEGF或其他TGF-β调节的细胞因子、趋化因子和生长因子的诱导引起的,如对埃博拉病毒所显示的。
急性感染的特征是白细胞增多和中性粒细胞增多(neutrophila),这在COVID-19中也有看到。COVID-19患者患有免疫应答失调,包括中性粒细胞增多和淋巴细胞减少(lymphophenia),导致中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)增加。当LASSO回归中包括26个变量时,高NLR是危重疾病发生率的最重要的预后预测因子。高NLR更常见于重症患者。高NLR预示着更糟糕的结果,包括更低的恢复率、更高的机械通气率和更高的氧疗法需求。预期高NLR增加中性粒细胞/巨噬细胞衍生的细胞因子释放风暴(CRS),并因病毒相关组织损伤和并发症而加重。单独的中性粒细胞增多也可预测COVID-19患者的不良结果。对于COVID-19已报告了肺毛细血管中的中性粒细胞浸润、伴有纤维蛋白沉积的急性毛细血管炎、中性粒细胞外渗到肺泡腔和中性粒细胞粘膜炎。这些发现与TGF-β升高作为中性粒细胞向COVID-19累及肺部的趋化性而导致肺血栓形成一致。已报道与正常对照相比,从COVID-19患者支气管肺泡灌洗(BAL)液中分离的RNA中TGF-β表达升高,这支持了这一构思。
b.TGF-β抑制ENaC并导致肺部积液和ARDS/肺炎
TGF-β在急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的病理生理学中被认为是一种重要的促炎细胞因子,促成肺的通透性增加和液体不能再吸收,导致持续重度的肺水肿。重要的是,与非ARDS对照组的BAL样品相比时,插管后2天内收集的ARDS患者支气管肺泡灌洗液(BAL)样品显示出更高的TGF-β水平。TGF-β可以通过促进黏着连接的分解以及抑制肺内皮细胞的增殖来增加肺泡上皮通透性和肺内皮通透性。已表明SARS-CoV上调促炎细胞因子,包括TGF-β,并且TGF-β水平在SARS合并ARDS患者中显著升高。
Peters等人最近的一项研究证明,TGF-β通过调节上皮钠通道(ENaC)活性和经由Tgfbr1介导的独特信号通路的运输,深刻影响肺泡离子和液体转运。TGF-β被确定为肺泡上皮细胞内化ENaC的唯一主调节因子,其在ARDS中的上调导致ENaC运输缺陷,肺上皮细胞上ENaC细胞表面丰度明显降低,从而快速且实质性地损害ARDS患者的肺泡液再吸收,并导致其肺水肿持续存在。一种能够隔离TGF-β的可溶性重组TGF-β受体蛋白已有效地减轻ARDS实验模型中肺水肿的严重程度。同样,已表明抗炎异黄酮葛根素通过抑制TGF-β的表达而减少ARDS相关的肺部炎症过程。值得注意的是,ARDS患者BAL样品中TGF-β水平与无呼吸机天数和无ICU天数之间存在显著的负相关。此外,较低的TGF-β水平与较好的生存结局相关,这表明TGF-β水平较高的患者可能具有较高和较快的病死率。BAL液TGF-β水平降低与ARDS患者生存时间提高的相关性进一步支持了在ARDS患者中使用青蒿素和/或OT-101降低TGF-β水平的构思。OT-101也称为Trabedersen,在本文通篇可以互换使用。
c.TGF-β诱导晚期纤维化,即使在恢复后也会损害肺容量
TGF-β还参与ARDS后肺组织重塑和肺纤维化的发病。具体而言,TGF-β通过刺激肺成纤维细胞的增殖/分化、胶原和其他细胞外基质蛋白在肺间质和肺泡腔中的积累,导致肺纤维化的发生和发展,从而促成肺纤维化的发展。Wang等人报道,肺成纤维细胞中miR-425的减少通过激活TGF-β信号通路促成ARDS后肺纤维化的发展。Smad2是经典TGF-β信号通路的一种关键组分,发现其受miR-425调控。因此,抑制TGF-β信号通路也有可能预防ARDS后肺纤维化的发展,并改善肺愈合过程。
d.TGF-β诱导IL-6导致全身炎症和“细胞因子风暴”
仅用TGF-β治疗导致IL-6的诱导,并且这既是剂量依赖性的也是时间依赖性的。TGF-β的作用在IL-6mRNA水平上是明显的,表明TGF-β诱导了IL-6的从头合成。TGF-β诱导IL-6的能力表明IL-6可以介导TGF-β的一些作用。在哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)患者的气道平滑肌细胞(ASMC)中,免疫调节和纤维生成细胞因子TGF-β的表达明显升高。TGF-β对ASMC的重要炎症性作用是诱导IL-6释放。TGF-β在驱动ASMC向促氧化和促炎表型发展中起着关键作用。TGF-β通过Smad和PI3K依赖性途径破坏ASMC中的氧化剂/抗氧化剂平衡并增加IL-6的释放。TGF-β1还促进BAL细胞中IL-6的释放。TGF-β1在刺激时启动肥大细胞产生IL-6,而不是直接驱动IL-6产生。在这种情况下,TGF-β驱动肺部的先天性炎症。
然而,必须强调的是,具有ARDS/CRS高炎症性表型的患者的中位IL-6水平比重度COVID-19患者高10到200倍。值得注意的是,发生CRS的患者的血浆IL-6峰值水平为约10,000pg/mL,几乎比重度COVID-19患者高1000倍。因此,IL-6诱导的细胞因子风暴不是重度COVID-19患者中观察到的危及生命的ARDS和凝血功能障碍的主要原因。相反,TGF-β上调IL-6在COVID-19中很重要。关注亚组分(IL-6)而不是主要病理学(TGF-β)是无效的,这可以通过在COVID-19中使用抗IL-6受体的mAb的两个主要3期研究的失败来证明。(sarilumab),一种抗IL-6受体的人单克隆抗体,未通过Sanofi和RegeneronPharmaceutical,Inc.进行的3期试验。托珠单抗未通过其III期COVACTA研究。在第4周使用7类序数量表评估的患者中,Actemra/RoActemra和安慰剂之间的临床状态差异不具有统计学显著性(p=0.36;比值比[95% CI]=1.19[0.81,1.76])。
e.TGF-β诱导TGFBIp导致血管炎症
转化生长因子诱导蛋白(TGFBIp)是一种在功能上与各种细胞的粘附、迁移、增殖和分化相关的细胞外基质蛋白,其已被鉴定并克隆为肺腺癌细胞系A549中的主要TGF-β应答基因:TGF-β诱导的基因人克隆3,简称βig-h3。TGFBIp由多种细胞系分泌,包括上皮细胞、内皮细胞、角质形成细胞、成纤维细胞和单核细胞,并存在于ECM中。它是一种68kDa的蛋白,由4个成束蛋白1结构域(FAS1结构域)和一个羧基末端精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)序列组成,这两者都可能作为细胞附着位点结合整合素。
已发现,TGFBIp及其衍生物TGFBIp K676Ac(乙酰化的676位赖氨酸TGFBIp)在SARS-CoV-2肺炎患者(n=113)血液中升高;尤其是在重症监护室(ICU)患者中比在非ICU患者中更高。在炎症条件下,分泌的TGFBIp被CBP/p300乙酰化,然后分泌的TGFBIp K676Ac的RGD结构域与整合素αvβ5结合并激活NF-κB以诱导炎症。TGFBIp促进重度血管炎症反应和血栓形成。其使用抗TGFBIp抗体的中和显著减少SARS-CoV-2患者的PBMC分泌促炎细胞因子。在重度COVID-19患者中观察到的血浆TGF-β水平升高将支持这一构思:TGF-β正在诱导炎症/血管炎因子,导致多种COVID-19病理。
f.TGF-β诱导IgA类别转换,导致IgA血管炎/川崎病综合征
川崎病(Kawasaki Disease,KD)是一种IgA血管炎疾病,由最初的IgM类别转换为IgA引起。已知TGF-β与IL-10的联合在B细胞诱导转换为IgA抗体产生。已表明,在EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)相关疾病中,EBV特异性IgA滴度与TGF-β水平呈正相关。与KD类似,IgA在COVID-19患者中上调,并且是其标志性特征之一。在重度COVID-19中观察到的IgA反应增强可能会对重度COVID-19产生损害作用。因此,假设重度COVID-19可能至少部分是IgA介导的疾病(与IgA沉积和血管炎有关),这有助于解释COVID-19中常见的器官损伤,例如急性肺栓塞、肾损伤等。
本领域已经表明,IgA的第一个血清转化日是初始症状发作后2天,IgM和IgG的第一个血清转化日是发作后5天。与非重症患者相比,重症患者的IgA和IgG的相对水平明显更高。在重症组和非重症组之间IgA(P<0.001)和IgG(P<0.001)的相对水平具有显著性差异。相比之下,在疾病发作之后,在重症和非重症患者之间IgM水平无统计学显著性变化。在进一步的亚组分析中,发现SARS-CoV-2特异性IgA水平与COVID 19危重症患者的APACHE II评分呈显著性正相关(r=0.72,P=0.01),而SARS-CoV-2特异性的IgG和IgM水平与疾病严重程度不相关。
COVID-19的心血管症状可能与IgA血管炎有关,因为在重度COVID-19患者中观察到相对于IgG增加的IgA。虽然目前没有证据表明COVID-19中存在抗体依赖性增强,但是这与川崎综合征是一致的,并且与以前观察到的SARS抗体依赖性增强是一致的。
针对SARS-CoV-2抗原的全球自身抗体筛选发现,针对参与免疫应答调节的蛋白和心脏结构蛋白、特别是糖蛋白内皮联蛋白(Endoglin)的自身抗体在MIS-C中强富集。内皮联蛋白(CD105),也称为TGF-β受体III,是一种结合TGF-β的同二聚体膜蛋白。综上所述,IgA血管炎以及心肌和肺中内皮联蛋白的富集可导致这些部位发生免疫应答,其可以进一步解释COVID-19中常见的器官损伤。因此,我们认为TGF-β抑制可减少IgA血管炎(KD综合征),并将改善COVID-19。
COVID-19–一种TGF-β风暴疾病:
冠状病毒进入细胞后,细胞复制受到抑制,细胞机制转向病毒复制。VeroE6细胞的SARS-CoV-1感染通过磷脂酰肌醇3’-激酶/Akt信号通路以及通过细胞凋亡这两者来抑制细胞增殖。SARS-CoV-1的核衣壳蛋白抑制细胞周期蛋白-细胞周期蛋白依赖性激酶复合物,并阻断哺乳动物细胞(包括VeroE6)的S期进展。而且,SARS-CoV-1 7a蛋白经由HEK293、COS-7和Vero细胞的细胞周期蛋白D3/pRB途径阻断G0/G1期的细胞周期进展。鼠冠状病毒复制通过降低Cdk活性和pRb磷酸化诱导感染的17Cl-1细胞G0/G1期细胞周期停滞。用禽冠状病毒传染性支气管炎病毒(IBV)感染异步复制和同步复制细胞,使感染细胞在细胞周期的G1/M期停滞。细胞周期停滞也由TGF-β的上调中央介导。SARS冠状病毒经由其核衣壳蛋白和木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)上调TGF-β。SARS冠状病毒PL在基于细胞的测定和直接肺注射的小鼠模型中均促激活TGF-β1转录。还证明了SARS患者肺样品中TGF-β的过度表达。OT-101对TGF-β表达的抑制在病毒复制测定中抑制SARS-CoV1和SARS-CoV2的复制[OT-101研究者手册(OT-101Investigator Brochure),犹他大学报告]。在同一项研究中,青蒿素(一种已报道的TGF-β抑制剂)也抑制了SARS-CoV2的复制。因此,最有可能的是,感染后诱导TGF-β导致细胞周期停滞,从而允许细胞机制转向病毒生产。这意味着,随着病毒载量的增加,TGF-β将成比例增加,而这又推动了COVID-19疾病的进展。已报道,病毒载量与危重症COVID-19患者IL-6水平和死亡率急剧升高密切相关。通过靶向TGF-β,OT-101关闭了COVID-19背后的引擎,使患者在不陷入呼吸危机的情况下恢复。事实上,施用可溶性II型TGF-β受体,在肺损伤期间隔离游离的TGF-β,并保护野生型小鼠免受博来霉素或大肠杆菌内毒素诱导的肺水肿。TGF-β的局部增加也可引发级联事件,导致中性粒细胞、NET向感染器官募集,由此产生的凝血释放血小板中储存的TGF-β,造成严重后果。
图C.涉及细胞外组蛋白/NET、C5a和TGF-β的ALI/ARDS病理生理机制的当前构思。
左边的框架显示了肺泡的结构,其是由I型和II型肺泡上皮细胞、驻留的肺泡内巨噬细胞和邻近的内皮衬里完整的肺毛细血管组成。右边的框架显示了ALI/ARDS中的受损肺泡:由活化的巨噬细胞释放的补体激活产物(C5a)和炎症性介质协调PMN、单核细胞和适应性免疫细胞流入肺泡室。C5a促进NET和细胞外组蛋白的释放,从而导致组织损伤和上皮/内皮屏障的破坏。肺泡内出血包括血小板的存在,血小板与NET相互作用并释放TGF-β。ALI/ARDS的后期可能包括TGFβ介导的纤维增殖反应和细胞外基质的积累。对于COVID-19,触发事件不是对器官的损伤,而是在病毒复制和感染期间产生的TGF-β的释放。
在SARS-CoV感染的情况下,在SARS早期期间血清TGF-β1水平升高(Pang等人,2003)。在SARSCoV感染的肺细胞(包括肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞和单核细胞/巨噬细胞)中也观察到高水平的TGF-β。病毒诱导的高水平血清和原位TGF-β配体导致TGF-β通路过度激活,导致SARS/ARDS。
用于COVID-19的OT-101(TGF-β的抑制剂):
新出现的认识是,TGF-β可能是治疗COVID-19的有效靶点。Alhelfawi M.等人提出,COVID-19可以通过抑制TGF-β来治疗。SARS-CoV PLpro在体外和体内经由ROS/p38MAPK/STAT3/Egr-1通路显著诱导TGF-β介导的促纤维化反应。PLpro还触发了TSP-1的Egr-1依赖性转录,在潜在的TGF-β1激活中起重要作用。阻断TGF-β将抑制或减少病毒传播和纤维化的并发症,并为细胞免疫提供发挥其作用的机会,并因此降低感染细胞中的病毒产量。事实上,shRNA敲低TGF-β基因表达不仅抑制了PRRSV的复制,而且改善了病毒感染后的免疫应答性,这表明了一种促进对猪PRRSV感染的控制的新方法。上皮细胞在协调肺部稳态和抵抗病原体方面发挥着至关重要的作用。TGF-β调节一系列炎症性和调节性免疫应答,但其功能高度依赖于位置和环境。上皮衍生的TGF-β在甲型流感感染期间作为抑制早期免疫应答的前病毒因子发挥作用。特异性缺乏支气管上皮TGF-b1(epTGFbKO)的小鼠对流感诱导的体重减轻、气道炎症和病理表现出明显的保护作用。
然而,对流感诱导的病理的保护与淋巴细胞免疫应答的增强不相关。相比之下,与对照小鼠相比,在epTGFbKO小鼠中向气道释放干扰素β(IFNb)的动力学显著增强,与对照小鼠相比,epTGFb KO小鼠的IFNb在第1天升高。这诱导了高度的抗病毒状态,导致epTGFbKO小鼠的病毒复制受损。他们的出版物简明扼要地描述了TGF-β抑制对病毒感染的影响,我们提出OT-101将导致如果不是相同的就是非常相似的反应,不包括由上皮细胞的病毒感染和增殖驱动的TGF-β风暴作为TGF-β来源。
因此,活性TGF-β(可能在某些促炎细胞因子如TNFα、IL-6和IL-1β的帮助下)的突然和不受控制的增加不可避免地导致快速和大量水肿和纤维化,其重塑并最终阻塞气道。这导致肺功能衰竭和患者死亡。
总结数据,我们想要提出COVID-19的进展以及OT-101相比于瑞德西韦和其他药物在治疗COVID-19中的位置,如下所示。
表1.COVID-19的三个阶段以及OT-101、素食和能量的应用
OT-101和细胞因子风险:
尽管进行了广泛的数据挖掘,但使用OT-101治疗后没有细胞因子风暴信号或细胞因子风暴出现。对IL-6进行了检查,并如上所示,在使用OT-101治疗后的时间范围内,IL-6没有表现出有意义的变化。我们预计,使用OT-101治疗COVID-19患者不会导致细胞因子风暴的出现。然而,由于这一潜在风险,该方案设计为引入期,患者将以交错方式进入,连续患者之间的间隔为最少48小时。将对患者进行AE监测,并进行多项评估,以确认OT-101在该患者群体中的安全性。将持续监测患者的AE,直到第14天。数据安全委员会(Data SafetyCommittee,DSC)将在第一名患者开始治疗后的第7天和第14天审查安全性数据。预期到第14天,所有7名患者的直到第7天的安全性数据都将是可获得的,并由DSC审查。第2部分即试验的扩展部分将仅当OT-101与7名患者中的任何一名患者在第1部分中的药物相关SAE不相关时才会启动。在P001期间进行了细胞因子分析,分析报告在两份报告中:1)在研究P001的选定样品中31种细胞因子/趋化因子的血浆水平分析,研究编号:AP 12009/021301;和2)对OT-101(Trabedersen)治疗的患者的细胞因子反应的分析。
在一项探索性分析研究中,对来自P001研究的12名胰腺癌患者的临床血浆样品的31种细胞因子/趋化因子进行了评估,以分析OT-101治疗对血浆中细胞因子/趋化因子水平的影响。在研究筛选阶段期间和治疗期间的选定时间点,从OT-101治疗开始前获得分析样品。Lophius-Biosciences采用一种允许分析多种细胞因子的非验证方法测量样品并获取数据。进行回归和分层聚类分析,以确定本队列研究患者的潜在细胞因子特征。应用方差分析模型来研究细胞因子/趋化因子水平与临床结果(PK和OS)之间的关系。应用Logistic模型表征细胞因子/趋化因子水平与不良事件的关联。
转化生长因子β(TGF-β)是一种多功能调节多肽,其控制许多方面的细胞功能,包括细胞增殖、分化、迁移、凋亡、粘附、血管生成、免疫监督和存活。TGF-β在癌症中具有双重作用。它在癌前细胞和肿瘤发展的早期具有肿瘤抑制作用,但在肿瘤进展的后期具有较强的原癌性。自分泌TGF-β信号传导促进上皮-间充质转化,其增加细胞侵袭和转移。旁分泌TGF-β信号传导通过抑制T淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞来刺激血管生成并促成免疫耐受环境。肿瘤炎症机制的总体平衡是极化的,以促进血管生成、肿瘤细胞存活和免疫逃逸,所有这些都促成肿瘤生长。
在被SARS-CoV-2感染后,高达三分之一的COVID-19患者发生急性肺部炎症,并暴发性进展为急性呼吸窘迫综合征(ARDS),尽管有最好的可用支持性治疗,但在高风险患者群体中致死率很高。在这些患者中,最初认为大量且连续的促炎细胞因子的“突然释放”导致重度形式的全身毛细血管渗漏综合征并伴有肺水肿,这可导致缺氧损伤和多器官功能障碍,最终导致不可逆转的致命性多器官衰竭。这种超急性炎症过程让人联想到细胞因子释放综合征(CRS),其可以过度激活先天和后天免疫系统的元素。然而,随着IL-6mAb的失败,细胞因子风暴可能不是COVID-19的主要病理学。相反,将我们的发现即ARTIVedaTM具有强抗病毒活性与现有的TGF-β知识结合起来,已提出TGF-β是COVID-19的主要驱动因素。
在SARS-CoV-2感染后,TGF-β被上调,诱导细胞周期停滞,并允许病毒劫持宿主机器进行其自身复制。病毒载量的增加导致TGF-β激增,导致与COVID-19相关的多种临床症状。代替靶向个体亚成分,即抗IL-6的mAb,靶向这些临床症状的潜在病理学似乎更有效,即采用青蒿素和/或OT-101抑制TGF-β激增/风暴(在1975年4月,在关于作为抗疟疾药的青蒿素的全国合作会议之后,来自中医研究院(现为中国中医科学院(CACMS))、山东、云南、广东、四川、江苏、湖北、河南、广西、上海、中国科学院(CAS)和中国人民解放军(PLA)的研究单位成立了中国青蒿素合作研究小组。在海南、云南、四川、山东、河南、江苏、湖北和东南亚,青蒿素制剂(包括栓剂)被用于治疗疟疾。
共计1511例间日疟用青蒿素进行治疗。平均退热时间为20-30小时,平均无性寄生虫清除时间为30-40小时,一个月内复发率为10%-30%。1975年,该合作研究小组使用青蒿素片剂(总剂量为3g)治疗了16例间日疟。对另外13例对照例给予氯喹,总剂量为1.5克(碱)。青蒿素组的寄生虫清除时间为39.6±13.5h,氯喹组的寄生虫清除时间为55.9±16.6h(P<.01),表明青蒿素的清除速度比氯喹快。然而,青蒿素组在一个月内的复发率为21.4%,而氯喹组没有见到复发病例。在其他位置也观察到类似的结果。
在不同地区使用青蒿素治疗了527例恶性疟。发热清除时间为30-40小时,无性寄生虫清除时间为30-50小时。片剂一个月内复发率为85%,其他制剂一个月内复发率为10%-25%。
同样在1975年,该合作研究小组使用青蒿素片(总剂量为2.5g)和氯喹(总剂量为1.5g碱)的3天方案,每种药物治疗18例恶性疟。青蒿素的平均无性寄生虫清除时间为37±17.8h,而氯喹的平均无性寄生虫清除时间为65.7±29.9h(P<.01)。因此,青蒿素的清除速度比氯喹快。青蒿素组的所有病例在一个月内都经历了复发,而氯喹的复发率为50%。尽管青蒿素的复发率高于氯喹,但当用油、油悬浮液和水悬浮液制剂替代片剂制剂时,复发率在1个月内降低至10%-25%。
在抗氯喹恶性疟流行的地区,共研究了143例对氯喹(RI–RIII抗性)没有反应的病例。使用青蒿素油、油悬浮液或水悬浮液的3天方案,所有患者均被治愈。因此,已表明青蒿素有效地治疗抗氯喹恶性疟。
从1974年到1978年,在抗氯喹恶性疟是地方性流行的地区研究了141例脑型疟。由于当时没有注射剂,对36名患者使用了鼻胃管饲法。治愈率为91.7%。一旦注射剂可用,就采用肌内给药。141名患者中,131名患者被治愈(92.9%)。10名患者死亡,死亡率为7.1%。从所有地点的统计数据来看,平均寄生虫清除时间为33.3–64.5小时,平均退热时间为34.1–56.7小时。恢复意识所需的平均时间为21.5–30.8小时。这不包括在至少10天后才恢复意识的少数病例。
在采用青蒿素治疗的2099例中未见到明显的副作用。对139例在治疗前后进行了肝功能测试和心电图(ECG)记录,并对75例检查了血液中非蛋白氮。未发现异常。心脏、肝脏或肾脏疾病患者和孕妇均无异常。对于水悬浮液,在注射部位经历了轻微疼痛,但未报告其他不良反应。
通过新西兰自发药物不良反应报告系统(New Zealand spontaneous adversedrug reaction reporting system),确定了一系列与黄花蒿(Artemisia annua L.)提取物相关的肝毒性病例。使用超临界二氧化碳萃取法生产的并与葡萄籽油一起配制而成的黄花蒿提取物已作为一种用于关节健康的天然产品在新西兰上市。截至2019年1月31日,新西兰药物警戒中心(New Zealand Pharmacovigilance Centre)已收到29例患者服用葡萄籽油中的黄花蒿提取物后出现肝脏不良反应的报告。对病例报告评估患者和不良反应特征、黄花蒿提取物的使用模式和因果关系(基于WHO-UMC标准化病例因果关系评估系统)。患者年龄为47至93岁(中位数为67岁)。在23份含有此信息的报告中,从开始使用黄花蒿提取物到肝毒性发作的时间为7天至约12个月。这些报告中19份报告显示在12周内发作。在27份报告中,黄花蒿提取物是唯一的可疑药物。少数患者可能存在易感疾病。报告了27名患者在停止使用黄花蒿提取物后已恢复或好转。9名患者需要入院治疗。肝损伤的类型是不同的。16名患者经历了黄疸,常伴有瘙痒和深色尿。在不同报告者的病例报告之间具有相当大的一致性。
23份报告描述了“肝酶升高”/“肝功能异常”。5名患者经历了“肝炎”,1名患者经历了“肝硬化”。16名患者也报告了“黄疸”,通常出现在早期,其中7名患者伴有“瘙痒”。两份报告提示肝合成功能受损:一名患者有低蛋白血症,另一名患者经历了紫癜和血尿。
所有报告均未描述死亡结果。然而,有9名患者需要入院治疗。在16份报告中,报告者将肝脏不良反应描述为“重度”。21份报告中有肝功能测试结果。分别对18、19和21名患者报告了血清胆红素、ALP和ALT峰值浓度。血清胆红素范围为5至608μg/L(平均115.3);ALP范围为73至594IU/L(平均307.5);ALT范围为37至3,311IU/L(平均517.6)。
黄花蒿有着悠久的传统使用历史,但很少有关于肝毒性的报告。然而,使用草药后的不良反应可能无法识别或报告的原因有很多。通常,使用草药的个体如果经历了不良作用,不会寻求专业建议,并且草药的使用通常不会向医疗保健专业人员透露。这些物质缺乏不良反应报告不应被解释为“安全性”的证据。
WHO个例安全性报告全球数据库(WHO Global Database of Individual CaseSafety Reports),含有两份最近非新西兰的与黄花蒿相关的肝胆病症报告。第一份报告对几种草药制剂的使用感到困惑,但第二份报告涉及一名每天服用黄花蒿1.25g持续六周的男性。他在开始治疗八周后出现胆汁淤积性黄疸,其报告为严重(导致或延长住院时间)。停用黄花蒿后反应减轻且患者康复了。
在美国,青蒿素在无需处方的情况下即可用作草药补充剂已经至少20年;这些补充剂上市用于一般健康维护以及用于治疗寄生虫感染和癌症。在CAERS数据库(2004-2019年)中,仅有5例与青蒿素相关的毒性病例。2008年8月27日,CDC接到通知,一名患者在服用含有青蒿素的草药补充剂一周后出现肝炎。这名52岁的男子在服用青蒿素200mg,每天三次,持续一周后出现肝炎。临床调查未发现肝炎的任何其他原因。停用青蒿素后两周他康复了。患者具有腹痛、深色尿以及与肝炎一致的实验室结果(例如,血清丙氨酸氨基转移酶为898IU/L[正常值:10-55IU/L])。补充剂的样品被送往CDC和佐治亚理工学院进行分析,以测定青蒿素的含量并鉴定任何污染物。分析表明,该补充剂含有包装上所述的100mg青蒿素的94%-97%,且该补充剂不含其他常见药物活性成分。根据患者的临床病程和实验室评价,CDC研究人员得出结论,肝炎可能与摄入含有青蒿素的草药补充剂相关。一名43岁的女性在她开始每日两至三次口服125mg青蒿素后五周出现关节痛和黄疸。一项彻底的临床调查没有发现肝炎的任何结构性、病毒性或自身免疫性原因,并且对乙酰氨基酚浓度是检测不到的。停用青蒿素导致临床和生化逐渐改善,一年后该妇女仍无症状,且肝功能正常。
FDA不良事件报告系统(FDA's Adverse Event Reporting System,AERS)及其食品安全和应用营养中心(Center for Food Safety and Applied Nutrition,CFSAN)的不良事件报告系统(Adverse Event Reporting System,CAERS)的数据库保存了另外8份使用青蒿素作为自我治疗的患者的肝毒性报告。对这些病例报告和两份已公布的报告的专家审查指出,与用于疟疾治疗(通常为3天)相比,青蒿素的使用持续时间更长,剂量更大,并表明这可能导致肝毒性。
综上所述,他们确实提出了一个假设,即未经纯化的黄花蒿提取物具有肝毒性。在一项随机、双盲、安慰剂对照的探索性研究中,报告了与黄花蒿提取物相关的肝毒性。在随机接受治疗的28名受试者中,14名接受高剂量(300mg,每天两次)的参与者中的一名出现肝炎,研究者认为可能与研究药物有关。34名参与者继续进行为期6个月的每天两次150mg Arthrem开放标签安全性扩展研究。一名患者因血清肝酶升高而退出研究,研究者认为这与研究药物无关。
除了青蒿素外,黄花蒿提取物还含有可变量的其他组分,包括一系列青蒿素类(arteannuins)、artemisitine、青蒿酸、类黄酮(包括蒿黄素)和一种挥发油。这些化合物中的许多化合物的药理活性尚未完全了解。草药原料中特定成分的数量受许多因素的影响,例如生长位置和条件以及收获时间。青蒿素的浓度在植物即将开花之前的叶片中最高。此外,根据所用的提取方法,从黄花蒿叶制备的提取物的化学组成不同。
和是通过对干燥植物材料进行超临界CO2萃取由黄花蒿制备的。这种方法依赖于以下事实:二氧化碳在高压下表现为液体,并且对于提取生物质高度有效。种子来自于瑞士,然后生长在坦桑尼亚的高海拔地区,那里的土壤肥沃而密实。植物完全生长需要九个月。该植物富含营养的叶尖是用传统方法手工采摘和干燥的。干燥后,将植物运往NZ,在那里提取活性化合物。天然提取物被送往瑞士实验室进行分析。然后将提取物与葡萄籽油混合制成易于吞咽的软凝胶胶囊,并以和上市。
青蒿素的安全性信息主要来源于青蒿素作为抗疟疗法(通常与其他药物联合使用)的使用,其中青蒿素通常被认为是安全且耐受性好的。然而,值得注意的是,观察到含有青蒿素的草药提取物的肝脏毒性。我们的结论是,就临床安全性而言,应仅使用作为纯化产品的青蒿素(artemisinin),而不使用作为草药提取物的青蒿素(Artemisinin)。
是中国军事医学科学院(AMMS)于20世纪90年代初开发的新一代ACT。它是两种独立开发的抗疟药物青蒿素和萘酚喹(naphthoquine)的组合产品。青蒿素和萘酚喹作为疟疾感染的单一疗法的主要缺点是,青蒿素因为快速消除而使循环半衰期非常短,因此可能无法维持有效的浓度水平以确保在几个无性生殖周期内完全消除血液寄生虫。对于萘酚喹,主要缺点是疗法施用后的杀寄生虫作用起效慢。起效慢将为年轻的循环寄生虫逃逸到中央血管内腔隙创造机会时间窗口。逃逸的寄生虫更有可能避免药物的杀寄生虫作用。因此,很明显,联合制剂应假设克服个体药物的固有缺点。
成人人群(年龄>16岁)治疗非复杂疟疾(uncomplicated malaria)的推荐剂量为单剂量8片(总剂量1000mg青蒿素/400mg萘酚喹)。对于儿童,推荐根据体重进行调整(25mg青蒿素/10mg萘酚喹)。对于年龄较小的儿童,包括婴儿,给药前应将片剂压碎。制造商目前的建议是,所有药物应在餐前或餐后(餐后约2小时)服用,但不能随餐服用。
完成了以下研究:
1)相比于氯喹和磺胺多辛-乙胺嘧啶(SP)的组合。这项试验是在巴布亚新几内亚(美拉尼西亚西太平洋地区)在患有非复杂恶性疟感染的成人人群中进行的。在这种情况下,片剂在治疗开始时以单剂量给药,而氯喹每天给药一次,连续三天,且SP以单剂量给药。监测治疗反应28天。尽管这两种治疗提供了相对可比的治愈率,但治疗在寄生虫血症清除率方面更为优越。
2)与双氢青蒿素-哌喹(DHA-PPQ)的比较。这项研究是在印度尼西亚在患有非复杂恶性疟、间日疟和恶性疟-间日疟共感染的成人人群中进行。在本研究中,研究了单剂量(8片)与3天(每天一次,持续3天)DHA-PPQ组合片的比较。监测治疗反应28天和42天。在第42天,两种治疗方法对恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)(99%vs.DHA-PPQ 97%)、间日疟原虫(Plasmodium vivax)(99%vs.DHA-PPQ97%)以及恶性疟原虫和间日疟原虫混合感染(79%vs.DHA-PPQ 97%)疟疾提供了可比的PCR校正治愈率。两种治疗的寄生虫清除时间没有统计学显著性差异(28±11.7vs.26±12.2DHA-PPQ);然而,在混合感染中对治疗的反应较低[来源:KPC存档数据]。
3)与蒿甲醚-苯芴醇(AL)的比较。这些研究中的两项是在尼日利亚和乌干达在儿童人群中进行的,一项是在乌干达在患有非复杂恶性疟的成人人群中进行的。对于儿童,片剂的给药数量基于体重(25/10mg/kg青蒿素-萘酚喹组合),对于成人人群,片剂以单剂量八片给药。在尼日利亚研究中,治疗反应监测28天,在乌干达研究中,治疗反应监测42天。在这两项研究中,单剂量治疗和6剂量AL方案在第28天和第42天对儿童的疗效和安全性特性没有显著性差异。在乌干达研究中在第28天,在成人人群中在两种治疗之间进行了相似的观察[来源:KPC存档数据]。
4)与蒿甲醚-苯芴醇与青蒿琥酯-阿莫地喹的比较(三组研究)。这项研究是在尼日利亚在患有非复杂恶性疟的混合人群(儿童+成人)中进行的。片剂按照上述给药安排给药。对于AL,对于儿童根据体重每天两次施用片剂,连续三天,对于成人,施用预定数量的片剂,而对于AA,对于儿童根据体重每天一次施用片剂,连续3天,对于成人,施用预定数量的组合片剂。监测治疗反应28天。研究得出结论,在这些情况中,和AA治疗略优于蒿甲醚-苯芴醇[来源:KPC存档数据]。
5)(以分剂量每天2次)与蒿甲醚-苯芴醇(AL)的比较。这项研究是在西非象牙海岸(Ivory Cost)在患有非复杂恶性疟的混合人群(儿童和成人)中进行的。如上所述施用药物。监测治疗反应28天。治疗1天(以分剂量每天2次)和AL治疗3天(治愈率:100%vs.98% AL)的疗效和安全性没有显著性差异。
6)(单剂量)与(2次/天,分剂量)的比较。这项研究是在贝宁(中非)在患有非复杂恶性疟的儿童人群中进行的。儿童基于体重以单剂量接受一定数量的片剂,相比于将同一剂量分为两次剂量,间隔12小时给予。监测治疗反应28天。两种治疗剂量方案的治疗效力和安全性相似(即两种方案同样有效)。
7)仅在患有非复杂恶性疟的成人人群中进行了两项研究:一项在尼日利亚,一项在缅甸,没有对照。监测治疗反应28天。这两项研究都证明了在各自国家环境中的高疗效和安全性特性。关于个体患者提供的安全性数据主要是临床数据。在实验室数据可得的情况下,两项研究之间的实验室评价安排不一致,使得安全性数据的比较解释变得困难。由于汇总分析中包括的试验方法尚未被前瞻性标准化,因此在定义、评估、报告和分类不良事件方面存在重大的试验间差异。此外,通常很难可靠地将药物副作用与疟疾感染的临床症状区分开,大多数报告在很大程度上取决于事件发生时进行的主观评估。该分析所获得的安全性数据来自于个体患者数据病例记录表,该记录表存档于昆明制药股份有限公司临床研究中心。在对952名接受青蒿素-萘酚喹组合治疗非复杂疟疾的成年患者的汇总分析中,共记录了16种不同的不良事件,具有不同的频率和强度。最常见的五种不良事件按顺序为头痛、恶心、呕吐、头晕和腹痛。然而,很难辨别哪些不良事件与疟疾有关,哪些是药物治疗所致,因为几乎所有这些事件都是在治疗开始后的头24小时期间报告的。没有成人或儿科患者因不良经历而过早停止治疗或治疗的任何部分。
尽管该分析方法存在局限性,但这些系列研究中治疗的总体安全性特性似乎是良好的。据估计,临床医生和/或主要研究者考虑的药物相关不良事件的总发生率较低(≤5%)。所报告的大多数不良事件本质上与胃肠道有关,并且是自限性的。总的来说,治疗的安全性特性似乎很好。
常见的不良事件包括头痛、恶心、呕吐、头晕和腹痛,这些都是自限性的。一些患者报告了短暂性耳聋。治疗后,在基线和最终剂量后4小时之间可能发生QTc延长。然而,已发现其是仅与萘酚喹相关的不良作用。然而,不应将该药物施用于处于QTc延长、心律失常风险的个体和电解质失衡的患者。
-怀孕:怀孕的妇女比未怀孕的妇女相对更容易感染疟疾。拒绝这一人群使用可获得的最有效的抗疟药物不会挽救生命。可能是ACT在人类孕期中的胚胎毒性被过度强调了。
青蒿素-哌喹
根据PRISMA指南,从开始到2020年7月,就以下术语:“青蒿素-哌喹”或“AP”,对EMBASE、MEDLINE、谷歌学术搜索和Cochrane图书馆数据库进行了系统搜索。仅包括了随机对照试验(RCT)。竞争性干预措施包括双氢青蒿素-哌喹(DHA-PPQ)、蒿甲醚-苯芴醇(AL,Coartem)、青蒿琥酯-甲氟喹(melfloquine)(ASAM)和青蒿琥酯-阿莫地喹(ASAQ,Artekin)。还评估了AP的单组临床试验。对报告的结果包括总体反应、治愈率、发热和寄生虫清除时间、血液学、生化、心电图(ECG)、不良事件、复发率和敏感性分析进行了系统研究。使用Review Manager 5.3对所有数据进行分析。
共回顾了七项研究,包括五项RCT和两项单组研究。对5项RCT(n=772)的汇总分析揭示了,AP和竞争性干预措施在治疗非复杂疟疾方面对聚合酶链反应(PCR)证实的治愈率具有可比的疗效。至于发烧和寄生虫清除时间,由于一些研究缺乏完整的数据,只能使用3项研究的数据。患者对所有药物均表现出良好的耐受性,每个组都报告了一些副作用(例如头痛、缺氧、呕吐、恶心和头晕),但这些副作用是自限性的,且未显示出显著性差异。
治疗前和治疗后报告的最常见不良事件如下所示,并且它们的强度一般为轻度的。两个治疗组在开始治疗之前和之后报告不良事件的患者的百分比相当。每次ACT第一次给药后24小时和到开始治疗后48小时,不良事件明显减少,大多数患者均无不良事件。AE主要与疾病有关。
PQP和4-氨基喹啉类药物的其他成员的一个明确的安全性问题是在治疗剂量下可能导致QTc延长,例如,欧洲(一种DHA-PQP组合)产品特性摘要中描述了QT延长。哌喹延长QT的分子机制是选择性抑制心脏延迟整流电流IKr(也称为hERG通道)。哌拉喹与DHA联用已在EU和其他国家获得批准。一片含有320mg PQP和40mg DHA。在欧洲,(DHA-PQP)适用于治疗成人、儿童和6个月及以上且体重5kg或以上的婴儿的非复杂恶性疟。
通过DHA-PQP研究,描述了哌喹的QTc延长性质,并对其进行了充分的量化。在一项彻底的QT研究中,评价了DHA-PQP在健康受试者中的QT作用,并与蒿甲醚/苯芴醇的作用进行了比较。伴随高脂肪/低热量膳食(第1组,64名受试者)、高脂肪/高热量膳食(第4组,40名受试)或处于禁食状态(第5组,40名受试者)基于体重调整的剂量给药DHAPQP(三片或四片),持续3天。DHA-PQP导致QTc延长。在第3天,第4组、第5组和第1组中按时间点观察到的最大平均安慰剂调整的ΔQTcF分别为45ms、36ms和21ms。
在最近的两项尚未发表的观察性/IV期患者研究(INESS和WANECAM)中,在基线和预测的哌喹tmax时记录了ECG,其作用更大:ΔQTcF为约30ms(存储资料,MMV)。在最近已发表的在柬埔寨进行的一项提前停止的临床试验中也观察到了比关键试验大得多的作用,在该试验中,用DHAPQP 180/1440mg给药2天后,在血浆浓度峰值时,平均安慰剂调整的ΔQTcF为46ms。
这些发现在本研究中在健康受试者中得到了证实和进一步量化,其中,证明了哌喹血浆浓度与安慰剂调整的ΔQTcF之间的统计学显著性关系,斜率为0.047ms每ng ml-1(90% CI 0.038,0.057),即每100ng ml-1哌喹血浆浓度增加约5ms。
抗COVID-19的青蒿素-哌喹
41例确诊的新冠肺炎患者被纳入本研究,并分为两组:青蒿素-哌喹(AP)组(n=23)和对照组(n=18)。主要结果是达到检测不到严重急性呼吸综合征-冠状病毒-2(SARS-CoV-2)水平所需的时间,以及第7、10、14和28天检测不到SARS-CoV-2的参与者百分比。次要结果是十天内的计算机断层扫描(CT)成像变化、校正QT间期变化、不良事件和异常实验室参数。
AP组达到检测不到病毒RNA的平均时间(平均值±标准差)为10.6±1.1天(95%置信区间[CI]:8.4-12.8),对照组为19.3±2.1天(95%CI:15.1-23.5)。AP组第7、10、14、21和28天检测不到病毒RNA的患者百分比分别为26.1%、43.5%、78.3%、100%和100%,对照组分别为5.6%、16.7%、44.4%、55.6%和72.2%。治疗后10天内的CT成像显示两组之间没有显著性差异(p>0.05)。两组均出现轻度不良事件。
AP组:使用AP(ARTEPHARM Co.,Ltd)作为抗病毒对症治疗。第一天口服AP,负荷剂量为两片(青蒿素125mg和哌喹750mg),接下来的六天口服维持剂量,为一片/天(青蒿素62.5mg和哌喹375mg)。7天的总剂量为8片。
对照组:根据《中国新型冠状病毒肺炎诊断和治疗计划(试行第七版)》,羟氯喹/阿比多尔(Arbidol)主要用作抗病毒对症治疗。前三天口服硫酸羟氯喹(上海中西制药有限公司),负荷剂量为800mg/天,接下来的五天口服维持剂量为400mg/天。口服盐酸阿比多尔(石药集团欧意药业有限公司)600mg/天,持续8天,每天分成三次剂量服用。
当药物剂量完成后,阳性患者将继续接受对症治疗,并满足出院条件,直到连续两次核酸检测转为阴性。所有患者出院后应隔离观察14天。如果检测结果仍为阴性,隔离限制可能会取消。
AP组和对照组患者的平均年龄分别为42.7岁和45.8岁。AP组中82.6%的患者和对照组中88.9%的患者被诊断为中度COVID-19,其余为轻度COVID-19患者。
AP组达到检测不到SARS-CoV-2RNA的平均时间显著少于对照组(AP:10.6±1.1天(95% CI:8.4-12.8),对照:19.3±2.1天(95% CI:15.1-23.5))(p=0.001<0.005)。AP组在药物施用期间在第7、10、14、21和28天达到检测不到SARS-CoV-2的患者百分比分别为26.1%、43.5%、78.3%、100%和100%,而对照组分别为5.6%、16.7%、44.4%、55.6%和72.2%。对这些数据的分析表明,AP组SARS-CoV-2RNA的清除率显著高于对照组(RD=0.28;95% CI 0.07-0.49)。AP组患者住院时间为13.3±4.8天,对照组为21.3±9.1天。没有患者转为重症病例。
在AP组的17名患者中,ECG结果显示治疗前平均QTc间期值为411.94ms,治疗后3-8天为433.59ms。治疗后平均延长21.65ms(95%CI:3.58-39.71ms)。12名患者(70.59%)出现不同程度的延长,6名(35.29%)出现轻度延长(<30ms),4名(23.53%)显示出中度延长(30-60ms),2名(11.76%)显示出重度延长(>60ms)。此外,配对样本t检验显示两组之间存在显著性差异(p<0.05)。AP治疗不会导致患者出现TdP和其他心律失常。QT间期延长的患者在停止治疗后恢复正常。没有收集和记录对照组患者的ECG变化。
结论:
1.哌喹和羟氯喹是喹啉家族的成员,它们都仅在体外对SARS-CoV-2具有轻微活性。HCQ未能通过针对COVID-19的临床试验。因此,青蒿素是这两组之间的主要区别。
2.AP组检测不到SARS-CoV-2RNA的时间显著少于对照组(AP:10.6±1.1天,对照:19.3±2.1天)。P值具有高度显著性(P=0.001)。
3.AP组住院时间为13.3±4.8天,对照组为21.3±9.1天。
4.然而,哌喹的心脏毒性将反对联合使用这种固定剂量组合,而赞成使用单独的青蒿素。
青蒿素和/或OT-101治疗以关闭TGF-β驱动的病理,概述如下:
a)TGF-β将中性粒细胞招募到炎症部位,增加了肺血栓形成的风险。
b)TGF-β抑制ENaC并导致肺部积液和ARDS/肺炎。
c)TGF-β甚至在恢复后也诱导晚期纤维化损害肺容量。
d)TGF-β诱导IL-6导致全身炎症和“细胞因子风暴”
e)TGF-β诱导TGFBIp导致血管炎症。
f)TGF-β诱导IgA类别转换,导致IgA血管炎/川崎病综合征。
g)TGF-β诱导弗林蛋白酶,其增加病毒的细胞摄取。这与病毒诱导的TGF-β阻滞细胞周期使病毒得以复制一起,形成一个阳性循环,导致TGF-β激增,其驱动a-g所述的病理。
反义寡核苷酸
反义寡核苷酸(ASO)是一种单链脱氧核糖核苷酸,其与mRNA靶互补。反义方法的目的是下调分子靶标,通常通过诱导RNase H内切酶活性来实现,该酶可切割RNA-DNA异源双链,并显著减少靶基因翻译。其他ASO驱动的机制包括抑制5′帽的形成、剪接过程的改变(剪接转换)和核糖体活性的空间位阻。
反义策略利用单链DNA寡核苷酸,通过介导靶mRNA的催化降解或通过与翻译所必需的mRNA上的位点结合来抑制蛋白生产。反义寡核苷酸可被设计成靶向病毒RNA基因组或病毒转录物。因此,ASO已广泛用于治疗病毒性疾病。因此,反义寡核苷酸(ASO)提供了一种识别潜在靶点的方法,因此代表了潜在的治疗剂。
冠状病毒组成一大类病毒,其可感染禽类和哺乳动物,包括人类,并已在世界各地引发数起爆发,包括严重急性呼吸综合征(SARS-CoV)、中东呼吸综合征(MERS-CoV)和最近发生的新型冠状病毒(COVID-19)。
SARS-CoV是冠状病毒科冠状病毒属的一种病毒,是一种有约30,000个核苷酸的包膜阳性链病毒。这些最大的RNA病毒由三组组成:第1组含有传染性胃肠炎冠状病毒(TGEV)、猪胃肠炎病毒等;第2组由SARS-CoV、小鼠肝炎病毒(MHV)等组成,第3组含有禽传染性支气管炎病毒(AIBV)等。
冠状病毒是一种单组分、线性单链RNA(+),其基因组大小为27至32kb(所有RNA病毒基因组中最大的)。冠状病毒基因组通常被加帽,并被聚腺苷化。基因组5'端的先导RNA(65-89bp)也存在于每个亚基因组RNA的末端。病毒体RNA具有传染性,同时作为基因组和病毒信使RNA。基因组RNA编码ORF1a,而ORF1b则通过核糖体移码进行翻译。得到的多蛋白pp1a和pp1ab被加工成病毒聚合酶(RdRp)和其他参与RNA合成的非结构蛋白。结构蛋白表达为亚基因组RNA。
SARS-CoV基因组的三分之二编码病毒复制酶基因,该基因被翻译成两个重叠的复制酶多蛋白pp1a(~490kDa)和pp1ab(~790kDa)。多蛋白随后被两种病毒蛋白酶3C样蛋白酶(3CLpro)和木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)裂解,产生病毒复制所必需的非结构蛋白。剩下的三分之一编码3CLpro和PLpro,仍然被认为是一个可行的靶点,以及一些新的替代物,如E蛋白(Orf4)、M蛋白(Orf6)、N蛋白(Orf9)、Orf3a、RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)和解旋酶。
病毒的生命周期如下所示:
1)病毒S蛋白(如果存在,也可能是HE)与宿主受体的连接介导病毒进入宿主细胞的内吞作用。
2)病毒膜与内体膜融合(可能由S2介导),ssRNA(+)基因组被释放到细胞质中。
3)复制酶多蛋白的合成和蛋白水解裂解。
4)复制发生在病毒工厂。从基因组ssRNA(+)合成dsRNA基因组。
5)dsRNA基因组被转录/复制,从而提供病毒mRNA/新的ssRNA(+)基因组。
6)亚基因组mRNA编码的结构蛋白的合成。
7)在内质网(ER)、中间隔室和/或高尔基复合体的膜上组装和出芽。
8)通过胞吐作用释放新的病毒粒子。
反义寡核苷酸(ASO)是单链DNA的小合成片段,长度通常为15-30个核苷酸。ASO通过Watson–Crick杂交与互补性DNA/RNA序列特异性结合,并且一旦与靶RNA结合,通过诱导切割机制或通过抑制mRNA成熟来抑制翻译过程。1978年,Zamecnik和Stephenson首次报道使用ASO作为潜在的抗病毒疗法。他们使用了一种包含13个核苷酸的磷酸二酯寡脱氧核苷酸(一种13聚体),该核苷酸被设计成阻断劳斯肉瘤病毒的复制。自那时起,因为ASO的特异性及其作为治疗剂的潜在应用的范围,ASO选择性抑制基因表达的能力在科学和医学界引起了值得注意的热情。在过去的十年中,广泛的寡核苷酸类似物已经可用,这导致了基于ASO的抗病毒剂的靶向验证和开发,所述基于ASO的抗病毒剂在体外和体内对各种病毒类型的疗效都有报道。对于根据经验使用的ASO,需要修改DNA或RNA以保持杂交能力,同时增加稳定性。
在磷酸二酯键、糖环和骨架中引入了重大改变,从而产生了用于合成ASO低聚物的三代核酸类似物。基于ASO的抗病毒剂被专门设计成通过(i)核糖核酸酶H(RNAse H)或RNAse P介导的mRNA切割或(ii)通过空间(非键合)阻断参与靶基因翻译的酶来阻断翻译过程。
抗负义和单链RNA病毒的反义寡核苷酸
流感
已针对几种呼吸道病毒广泛研究了反义寡核苷酸,并取得了良好的结果。最早使用寡核苷酸(‘oligo’)抑制MDCK细胞中病毒特异性蛋白(包括流感)合成的研究报告于20世纪90年代。研究人员观察到,经修饰的寡核苷酸可以有效抑制甲型/PR8/34(H1N1)病毒的产生。从那时起,已经合成了其他几种ASO,并对其抗流感的疗效进行了研究。Ge等人表明,专门设计用于靶向病毒基因组保守区的siRNA可有效抑制细胞系(Vero、MDCK)以及胚胎鸡卵中流感病毒的产生。
Wu等人表明,用三种剂量的RNA寡核苷酸进行体内治疗显著保护受感染的鸡免于H5N1病毒诱导的死亡率高达87.5%。作者使用靶向NS1基因的混合RNA寡核苷酸,通过噬斑测定和实时PCR分析,显示感染动物肺组织中空斑形成单位(PFU)和病毒RNA水平显著降低。他们的研究证明,靶向病毒NS1基因的RNA寡核苷酸可以有效抑制高致病性禽H5N1流感病毒的繁殖,因此,可以潜在地用作人类H5N1流感病毒感染的预防和治疗。
在另一项研究中,Gabriel等人使用三种缀合肽的磷酸二酰胺吗啉代低聚物(PPMO),选择性地靶向PB1或NP mRNA的翻译起始位点区域或NP病毒RNA的30-末端区域,以防止病毒在MDCK细胞中复制。该研究进一步利用引物延伸试验表明,任何有效的PPMO治疗都显著降低了mRNA、cRNA和vRNA的水平。
Duan等人的另一项研究使用了针对甲型流感病毒所有八个病毒RNA片段中发现的50-末端保守序列特异性设计的一种新的反义寡核苷酸(IV-AS)。他们使用小鼠模型在体外MDCK细胞中以及在体内监测了IV-AS的活性。从感染后6小时开始,每天一次向H5N1感染的小鼠鼻内施用IV-AS,持续6天。IV-AS的50%有效浓度(EC50)为2.2至4.4μM,可抑制甲型流感病毒在MDCK细胞中诱导的细胞病变效应。IV-AS在预防死亡、减轻体重、减少肺实变和降低肺病毒滴度方面也对H5N1病毒有效。
文献中已知,与对照组相比,通过鼻内途径递送的反义PPMO能够抑制小鼠中马流感病毒A/Eq/Miami/1/63(H3N8)的复制超过95%。在另一项研究中,一组作者设计了针对IAV基因组常见的30个NCR片段的反义寡核苷酸,以抑制其复制。AS分子显示,由A/PR/8/34(H1N1)、A/Udorn/307/72(H3N2)和A/New Caledonia/20/99(H1N1)IAV毒株引起的细胞病变效应显著降低,在感染后持续几乎48小时。同样的AS分子保护小鼠抵抗所有流感病毒毒株。
从PB2 vRNA的30和50末端的包装信号中获得的硫代磷酸寡核苷酸(S-ON)已在体外针对流感病毒进行了测试。来自PB2 vRNA 50末端的15聚体S-ON(标记为5-15b),与其编码区30末端(核苷酸2279-2293)互补,证明具有明显的抑制作用。与其他相关研究类似,还观察到5-15b的抗病毒活性是剂量和时间依赖性的;然而,它与研究中使用的细胞底物和感染的多样性无关。
在另一项后续研究中,已经研究了是否可以识别靶向PB1和PA基因片段的类似抑制性S-ON,以及病毒是否可能对S-ON产生抗药性。作者观察到,在MDCK细胞中,复制PB1和PA基因片段50末端的20聚体S-ON对几种甲型流感病毒亚型发挥了主导的抗病毒活性。他们的发现表明,PB2 vRNA 50末端的包装信号可能是设计新型抗流感化合物的潜在治疗靶点。此外,针对该区域的抗病毒药可能是有益的,因为这些病毒基因的突变变化较少。
Lenartowicz等人设计并测试了20-O-甲基和锁核酸反义寡核苷酸(ASO),以特异性地靶向甲型流感/California/04/2009(H1N1)病毒RNA片段8的内部区域。在14个设计并测试的ASO中,10个显示出对MDCK细胞中病毒复制的显著抑制。ASO的长度为11-15个核苷酸,显示出5至25倍不等的抑制作用。所设计的ASO对IAV非常特异,并且显示对乙型流感/Brisbane/60/2008(维多利亚株系)无抑制作用。ASO的组合略微改善了抗流感活性。这些研究表明,ASO可以被设计为在50至30末端之间形成的盘柄以外的区域内可接触IAV RNA。
呼吸道合胞病毒(RSV)
包括RSV在内的线性负义RNA基因组也被一些设计的ASO分子靶向。Jairath等人在他们的研究中研究了寡脱氧核糖核苷酸在细胞培养中抑制RSV复制的用途。用RSV毒株A2感染人上皮2型(HEp-2)细胞并用设计的寡核苷酸处理。针对靶向于病毒NS2基因起始的设计反义寡核苷酸,获得了0.5-1uM的50%有效浓度(EC50)值。ELISA和PT-PCR分析表明,所有寡核苷酸都抑制了病毒抗原的产生,并证明基因组RNA靶的序列特异性耗尽。观察到靶RNA在特定的反义寡核苷酸结合位点被切割。结果表明,反义寡核苷酸对RSV感染具有治疗价值。PPMO具有容易进入细胞并通过互补RNA的空间位阻干扰病毒蛋白表达的能力。Lai等人设计了两种反义PPMO,以特异性地靶向RSV L mRNA的50-末端区和翻译起始位点区。当在两种人气道细胞系中测试抗RSV活性时,这两种PPMO都表现出最小的细胞毒性。一种PPMO(AUG-2)使病毒滴度降低了>2.0log10。在RSV感染前对BALB/c小鼠鼻内施用AUG-2显示,在感染后第5天,肺组织中的病毒滴度下降了1.2log10,并在感染后第7天,进一步减轻肺部炎症。总体结果表明,PPMO具有有效的抗RSV活性,并有可能成为RSV感染的治疗方案。
埃博拉
埃博拉病毒是一种高致病性丝状病毒,可导致高死亡率的重度出血热。它组装成了异质的、丝状的、有包膜的病毒颗粒,该颗粒含有被包装在螺旋核衣壳(NC)内的负义单链RNA基因组。病毒基因组编码核蛋白(NP)、糖蛋白(GP)、RNA依赖性RNA聚合酶(L)和被称为VP24、VP30、VP35和VP40的四种结构蛋白。此外,埃博拉病毒能够通过RNA编辑表达一种截短的可溶形式的GP(sGP)。目前,EBOV抗病毒治疗中最有前景的研究利用病毒基因特异性寡核苷酸干扰病毒mRNA翻译的能力。这种反义策略抑制EBOV复制,从而减少EBOV的致病作用,并使免疫系统有更多时间清除感染。靶向ZEBOV L、VP24和VP35的联合反义策略在一些啮齿动物和NHP研究中是有效的暴露后治疗(Warfield2006,Warren 2010)。根据静脉内注射治疗的时间,66%或100%的NHP免于致命性攻毒(Gelsbert 2010)。一项类似的研究使用化学修饰的寡核苷酸(称为磷酸二酰胺吗啉代低聚物),在腹膜内、皮下和静脉内给药后,对NHP中的致命性ZEBOV攻毒具有60%的保护作用(de Wit 2011)。
抗正义和单链RNA病毒的反义寡核苷酸
严重急性呼吸综合征(SARS)
Neuman等人针对SARS-CoV(Tor2株)基因组中的特定序列设计了特异性PPMO。分析PPMO抑制感染性病毒产生的能力,并进一步研究以确定保守vRNA基序及其二级结构的功能。设计了几种病毒特异性PPMO以及随机序列对照PPMO,其对SARS-CoA显示出低抑制活性。病毒靶向PPMO进一步减少了病毒感染引起的细胞病理学,并减少了因病毒复制减少引起的细胞间传播。发现活性PPMO在病毒合成高峰之前的任何时间施用时最有效,并在培养基中发挥持续的抗病毒作用。该研究证明了与鼠冠状病毒复制酶的AUG翻译起始位点区互补设计的PPMO的体外抗病毒作用,并表明ASO对冠状病毒感染具有治疗潜力。在另一项研究中,Ahn等人评价了靶向高度保守RNA序列的反义肽核酸(PNA)对真核RNA病毒利用的程序化1核糖体移码(1PRF)的抗病毒作用。用融合到细胞穿透肽(CPP)的PNA(50%抑制浓度为4.4μM)处理的SARS-CoV-复制子转染的细胞显示出对SARS-CoV复制的显著抑制。
Fukuda等人在他们的专利和论文中描述了核酶(一种具有催化活性的反义RNA分子),其用于治疗SARS-CoV和其他CoV如MHV的感染。这种核酶特异性识别SARS-CoV或其他HCoV的mRNA上存在于环区的碱基序列,即GUC。核酶上的互补碱基序列是通过在不改变其结合亲和力的情况下缺失、添加或修饰碱基而获得的。一项中国专利声称使用小干扰RNA抑制SARS-CoV的M蛋白表达。设计的双链RNA(命名为siRNA-M1)具有与M蛋白mRNA 220--241核苷酸互补的序列,为5’-gggugacuggcgggauugcgau-3’。另一种siRNA-M2,5’-gggcgcugugacauuaaggac-3’,与M蛋白mRNA的460--480个核苷酸互补。这两种siRNA显示抑制M蛋白mRNA的表达水平。
在Shi等人的另一项研究中,用质粒构建体转染Vero E6细胞,该质粒构建体含有SARS-CoV结构蛋白E、M或N基因的外显子或其位于具有报告蛋白EGFP的框架中的外显子。将转染的细胞培养物通过加入培养基中,用反义硫代磷酸寡核苷酸(反义PSODN,20聚体)或对照寡核苷酸处理。在总共26个靶向E、M和N基因的反义PS-ODN中,获得了6个反义PS-ODN,其在通过RT-PCR测试的细胞培养基中,在50μM浓度下,可序列特异性降低靶基因表达超过90%。通过下调具有报告蛋白EGFP的框架中含有结构蛋白E、M或N的融合蛋白的表达,进一步证明了反义作用。
在Vero E6细胞中,反义作用取决于反义PS-ODN的浓度,范围为0-10μM或0-30μM。反义寡核苷酸的施用方法对于在Vero E6细胞中获得的抑制作用至关重要。作为游离寡核苷酸添加到培养基中的反义PS-ODN的下调作用在不同细胞类型之间是不同的。这可能是由于PS-ODN的细胞内浓度不同,RNase H水平的细胞类型特异性差异,这被认为是PS-ODN介导的基因表达反义抑制的主要因素。
小鼠肝炎病毒(MHV)
Burrer等人研究了PMO化合物对体内MHV复制和疾病的影响。在细胞培养中测试了10种针对病毒基因组中不同靶位点的P-PMO,其中一种(5TERM)与基因组RNA的5末端互补,对6种MHV毒株有效。使用与5TERM PMO序列缀合的各种富含精氨酸的肽进行进一步研究,以评价疗效和毒性,从而选择体内测试的候选物。在未感染的小鼠中,延长P-PMO治疗不会导致体重减轻或可检测的组织病理学变化。5TERM P-PMO治疗降低了靶器官中的病毒滴度,并保护小鼠免受病毒诱导的组织损伤。在大多数实验条件下,预防性5TERM P-PMO治疗减少与感染相关的体重减轻的量。治疗还延长了两种致命攻毒模型的存活时间。在一些高剂量病毒接种后延迟治疗的情况下,5TERM P-PMO治疗没有保护作用,增加了治疗组的发病率,这表明P-PMO可能导致对患病小鼠的毒性作用,而在未感染动物中毒性作用并不明显。然而,观察到的强抗病毒作用表明,随着进一步发展,P-PMO可以为广泛的冠状病毒感染提供有效的治疗方法。
针对SARS/冠状病毒的反义寡核苷酸的发展的重要发现
响应于抗病毒疗法的病毒突变
RNA病毒的易错复制在病毒进化和抗药性中起着重要作用。药物开发面临的挑战之一是病毒响应于抗病毒剂发生突变并导致抗药性的倾向。已经进行了许多研究,以显示SARS-CoV对包括反义寡核苷酸在内的抗病毒药物产生耐药性的倾向。在Neuman等人进行的研究中,研究人员推断,通过选择对复制、转录和宿主因子相互作用至关重要的保守RNA序列元件和二级结构作为靶点,可能改善P-PMO的抗病毒作用。他们证明,通过靶向病毒RNA合成和翻译所需的保守RNA元件,可以实现反义寡核苷酸介导的病毒复制抑制。测试的P-PMO包括五种设计用于直接抑制复制酶开放阅读框1a(TRS1-2,AUG1-3)的翻译,一种用于抑制核糖体移码(1ABFS),三种用于结合3’-非翻译区的保守序列(3UTR,S2M,3TERM),以及一种乱序对照序列(DSCR)。针对先导转录调控序列的P-PMO在降低病毒滴度方面最有效。
在11轮TRS2 P-PMO选择后纯化的SARS-CoV蚀斑在不存在P-PMO的情况下在Vero-E6细胞上形成小蚀斑。与未经处理的SARS-CoV和其他P-PMO-选择的SARS-CoV相比,TRS2 P-PMO-选择的SARS-CoV显示出延迟的生长动力学。从11轮连续P-PMO治疗后选择的蚀斑纯化的SARS-CoV中分离RNA。对14个经P-PMO连续处理的SARS-CoV的RT-PCR扩增子进行测序,以确定病毒在P-PMO选择期间是否发生了突变。仅在来自TRS2抗性SARS-CoV的14个扩增子中出现了位于TRS2-P-PMO的第61-63位、靠近前导TRS且在靶区域内的三个连续碱基变化,即CTC变化为AAA。
具有可变错配的缀合肽的PMO/RNA双链体的热熔解曲线数据导致他们推测,TRS2-P-PMO靶位点的这三个突变将有效熔解温度(Tm)降低~25–30℃。
靶序列应为病毒所有变种中的保守序列
Zhang等人报道,靶向S基因的siRNA可以抑制SARS-CoV复制,并质疑靶向前导序列的siRNA是否比靶向特定基因更有效。前导序列在不同的SARS-CoV毒株之间高度保守,而编码诸如S、N、M和E等特定蛋白的其他序列在不同毒株之间含有不同的突变。根据这些信息,选择并设计CCAACCAACCTCGATCTC序列作为适当GC/AT比率和CC结构的siRNA靶标。
为了比较有效性,他们使用相同量的质粒转染Vero E6细胞,并测量了被相同量的SARS-CoV感染的细胞上清液中的病毒滴度。数据显示,在具有U6/GFP-RNAi质粒的感染细胞中,病毒滴度为4.4x106 PFU,而在具有U6/S-RNAi1、U6/SRNAi2和U6/L-RNAi质粒的细胞中病毒滴度分别降至4.2x105、4.8x105和7.8x104 PFU。
S基因中基因变异的概率可能导致随机选择的靶向序列改变,这将降低设计的siRNA的有效性。虽然冠状病毒的前导序列仍保持一致,但他们假设产生针对SARS-CoV的前导序列的siRNA,这是病毒各种基因转录所必需的。这个靶向位点比靶向个体基因更强大,并将克服SARS-CoV中其他基因的各种突变。
排他性靶向基因组RNA更有效(TRS1和5TERM)
为了防止反义疗法引起的病毒突变,应将SARS-CoV不同毒株之间的保守区用作反义的靶序列。不同SARS-CoV分离株的5'UTR序列相对保守,完整序列将形成包含四个茎-环结构域的二级结构。与SARS-CoV5'UTR对应的cDNA序列在真核细胞中具有启动子活性。SARS-CoV5'UTR的启动子结构域包含茎-环I和II。SARS-CoV 5'UTR的第56个核苷酸及其下游TRS在调节转录中起关键作用。来源于各种组织的细胞可以为作为启动子的SARS-CoV 5'UTR序列提供有效的辅助因子,而来源于肺的细胞可能是最合适的。
Neuman等人研究了靶向SARS-CoV RNA不同区域的反义寡核苷酸的效果。在该研究中,P-PMO被设计为靶向与SARS-CoV RNA合成、翻译和/或宿主因子相互作用有关的保守病毒序列。冠状病毒复制酶多蛋白的表达在两个时间点受到控制:在开放阅读框1a处开始翻译,以及导致扩展开放阅读框1ab的翻译的核糖体移码。紧邻病毒复制酶多蛋白开放阅读框1a的AUG翻译起始密码子的附近选择三个序列(AUG1、AUG2和AUG3),使得AUG2与AUG3重叠起始密码子,AUG1位于翻译起始位点附近的5非翻译区。P-PMO 1ABFS被设计为破坏1核糖体移码位点的RNA二级结构,该位点介导复制酶多蛋白的其余部分的翻译。SARS-CoV RNA的非翻译5-末端263个核苷酸也含有在感染细胞中产生的5-和3-共末端亚基因组病毒RNA种类的每一个的一个末端处发现的80个核苷酸前导序列。位于基因组5-UTR的转录调控序列(TRS)被认为参与不连续RNA合成。前导TRS被两个P-PMO靶向,每个P-PMO被设计为掩盖共有TRS(5-CGAAC-3),并破坏预计在该区域形成的茎-环。TRS1与存在于基因组和亚基因组RNA种类上的前导RNA中的TRS互补。TRS2跨越前导和5-UTR的不存在于亚基因组RNA上的部分之间的连接。
冠状病毒缺陷干扰RNA的研究已表明,基因组末端含有几个保守基序,其中一些作为RNA复制的离散信号。针对3-非翻译区中的靶点设计的P-PMO化合物包括3UTR,靶向大多数冠状病毒基因组中发现的保守RNA茎-环/假结的一部分;S2M,靶向与星状病毒和马鼻病毒中的序列相关的茎-环2基序区;和3TERM,靶向基因组RNA的3末端,包括多腺苷尾的前5个碱基。包括两种无义P-PMO、DSCR和FT,以控制非特异性P-PMO作用。P-PMO的5末端与富含精氨酸的递送肽[R9F2]缀合;或与重排的R5F2R4肽缀合,该肽赋予等效的递送和疗效性质。R9F2和R5F2R4肽缀合物在本文所述的抗病毒研究中互换使用。我们没有观察到与这两种递送肽中的一种或另一种缀合的PMO之间序列特异性或非特异性作用的可检测差异。
最有效的P-PMO靶向转录调控序列,其中发现最有效的P-PMO是TRS2。与本研究中使用的所有其他P-PMO相比,两种不同的P-PMO:TRS1和TRS2显示出最高水平的抗病毒活性。20聚体TRS1和21聚体TRS2的变化仅为几个核苷酸,但据预测,它们可以结合的靶点会有很大变化。TRS1靶点包括共有TRS核心序列ACGAAC和病毒5方向上的14个碱基。TRS2覆盖TRS核心、3方向上的4个碱基以及5侧上的11个碱基。预测这种差异将允许TRS1与全长基因组RNA和所有八种亚基因组mRNA结合。在8个SARS亚基因组RNA中,5个具有邻近于TRS核心的两个碱基或位于TRS核心的两个碱基内的起始密码子。TRS核心的3末端也是TRS1靶点的3末端。因此,预期TRS1具有更深远的抗病毒作用,这归因于其经由对紧邻至少五种离散病毒RNA的AUG翻译起始位点上游的区域进行双链化(duplexing)来进行翻译抑制的潜力,以及其阻断所有亚基因组负链RNA不连续转录的潜在能力。TRS2 P-PMO比TRS1P-PMO更广泛地跨越TRS核心两侧上的侧翼序列,并因此可能更有效地抑制不连续转录。TRS2比TRS1更有效的观察表明,仅靶向基因组RNA是更有效的采用这类反义化合物的抗病毒策略。
小鼠肝炎病毒(MHV)与SARS-CoV具有紧密的亲缘关系。与SARS-CoV相似,小鼠肝炎病毒(MHV)中的基因组RNA和所有mRNA种类的5’-端都含有约70个核苷酸的前导序列。此外,5TERM比TSR1更有效,再次加强了仅靶向基因组RNA是更有效的方法。针对一组MHV毒株测试了R9F2-5TERM、R9F2-TRS1和R9F2-RND的相对有效性。用R9F2-5TERM对细胞进行感染前处理使五种MHV毒株的滴度降低了超过10倍,对MHV-A59和MHV-3观察到最强的作用。在降低病毒滴度方面,R9F2-TRS1处理不如R9F2-5TERM处理有效,并且R9F2-RND处理在几种情况下略微增加了感染病毒的释放(下表2)。对SARS进行的类似研究表明,5TERM和TSR1是有效的,但TSR1更有效,表明5TERM与TSR1的组合将是优选的。
核糖体移码(-1PRF)作为潜在靶标
SARS-CoV的基因组由长约30kb的单链、有义RNA组成。大的SARS-CoV RNA基因组产生8个3′-共末端、嵌套的亚基因组mRNA(sg-mRNA),用于有效翻译结构蛋白和辅助蛋白。SARS-CoV基因组的5′2/3编码两种大的复制酶多蛋白,由开放阅读框(ORF)1a和1b表达。与其他冠状病毒一样,ORF1a和ORF1b略有重叠,并且由于ORF1b缺乏其自己的翻译起始位点,ORF1b编码的蛋白只能通过编程-1核糖体移码(-1PRF)与ORF1a一起翻译为融合蛋白。ORF1a和ORF1a/1b融合蛋白被蛋白水解切割成16种成熟的非结构蛋白(nsp),其在病毒基因组复制期间发挥多种关键作用。-1PRF被认为对CoV基因组复制至关重要,因为冠状病毒RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)是病毒基因组复制所需复制酶的关键组分,是移码后合成的ORF1a/1b蛋白的第一部分。
天然核糖体移码在翻译期间几乎不发生。然而,由特定信号产生的PRF使tRNA滑动的可能性增加了50%。核糖体移码信号由两个元件组成:一个是七核苷酸滑动位点,另一个是RNA假结形式的下游三级RNA结构。SARS-CoV启动在含三-六螺旋的RNA假结处的-1移码。最近,控制-1PRF效率已被证明对于维持病毒复制酶蛋白的正确化学计量比至关重要。-1PRF信号在序列和结构上是保守的,这可能限制了SASR-CoV发展出抗药突变体的能力,使其成为抗病毒药物发现的有吸引力的靶点。
反义肽核酸(PNA)归因于其中性骨架而具有高杂交亲和力。与其他反义剂相比,PNA还表现出优异的稳定性,这归因于用多肽骨架替代脱氧核糖磷酸骨架而产生的核酸酶抗性。在Ahn等人进行的研究中,他们设计了靶向SARS-CoV移码信号的假结结构的PNA,并测试了这些分子抑制-1PRF和使用表达荧光素酶报告子的SARS-CoV复制子的SARS-CoV复制的能力。
10μM Tat-FS PNA使病毒复制抑制了82%,而靶向日本脑炎病毒(JEV)基因组的3′-UTR的缀合Tat的J3U2 PNA在相同浓度下不影响病毒复制。与EMSA和移码报告测定结果一致,错配两个核苷酸的PNA Tat-FSm2显示出显著降低的抗病毒活性。这些结果一起清楚地证明了Tat-FS PNA序列特异性抑制-1PRF。相比之下,当用250IU/ml IFN-β合成双链RNAPoly(I:C)处理复制子复制细胞时,IFN-β1a(一种在体外减少SARS-CoV复制的有效干扰素)将荧光素酶活性降低了46%,这触发了I型IFN(α/β)的产生,也导致了SARS-CoV复制的抑制。Tat-FS PNA以剂量依赖性方式抑制SARS-CoV复制,IC50值为4.4μM。
体内预防性治疗比治疗性治疗更有效
Burrer等人在细胞培养实验中评价了10个MHV P-PMO,并发现其中一个的序列与病毒基因组的5末端序列(5TERM)互补,对所攻毒的每一个MHV毒株始终产生最高水平的特异性抑制。在体内,5TERM P-PMO降低了感染各种MHV毒株的动物肝脏中的病毒复制。组织学检查显示,肝组织损伤严重程度的降低与病毒载量的降低相对应。用5TERM P-PMO进行预防性治疗,在所测试的所有接种剂量下,用三种MHV菌株中的每一种进行腹腔攻毒后,动物的临床状态得到改善。然而,矛盾的是,当延迟P-PMO治疗的施用直至高剂量MHV-Alb139感染后1天时,发病率和死亡率增加。在肺中采用MHV-1获得类似的结果,其中不论病毒复制水平如何,与感染对照组相比,某些抗病毒和无效的P-PMO方案加重了临床疾病。这些结果共同揭示了在治疗相关MHV攻毒模型中P-PMO治疗的抗病毒活性和潜在毒性。
硫代磷酸(PS)反义是有效的
在另一项研究中,Hayashi等人表明,与小鼠肝炎病毒(MHV)的前导RNA互补的硫代磷酸寡脱氧核苷酸(PS-oligo)是比天然寡脱氧核苷酸(PO-oligo)更有效的MHV增殖抑制剂。在低浓度(0.001–0.1μM)的反义PS-oligo下,显示出对病毒增殖的序列依赖性抑制。硫代磷酸寡脱氧胞苷。PS-(dC)20和PS-oligo与MHV序列没有显著同源性,在浓度高于0.5μM时对MHV增殖表现出抑制作用。这些结果表明,PS-oligo比PO-oligo更有效地抑制MHV增殖,并且PS-oligo可以通过两种不同的机制即以序列依赖性和非依赖性方式抑制MHV增殖。
Hayashi等人选择了包括保守序列在内的前导序列作为反义PS-oligo的靶区域,并研究了PS-oligo对MHV增殖的影响。
AL-oligo(5’AAAGTTTAGATTAGATTAGA3’)含有与JHMV的前导RNA的保守序列互补的序列。ML-oligo(5’AAAGTTTAGATTAGA TTAGA3’)含有与AL-oligo具有70%同源性的序列。
随机-oligo(5’AAAGTTAATGTAATGTTAGA3’)与迄今报道的MHV序列没有显著同源性。还合成了硫代磷酸寡脱氧胞苷PS-(dC)20(5’CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC3’)。
与来自未经PS-oligo处理的对照细胞的产量相比,来自用0.001μM的AL-oligo和ML-oligo处理的细胞的感染性病毒粒子的产量显著降低。在0.1和0.5μM时,病毒增殖被抑制超过95%。由于用与前导RNA互补的天然PO-oligo处理后,在1μM时未观察到对病毒增殖的抑制作用,PS-oligo的效力比未经修饰的PO-oligo高1000倍。据报道,PS-oligo对细胞和全身的核酸酶消化更具抗性。因此,PS-oligo可能比PO-oligo更有效地抑制感染细胞中的病毒增殖。尽管ML-oligo含有与AL-oligo仅70%同源的序列,但在AL-oligo和ML-oligo之间没有观察到对MHV增殖的抑制作用的显著性差异。尽管存在同源性差异,但在AL-oligo和ML-oligo之间没有显著性差异的原因尚不清楚。众所周知,5'端的序列在寡核苷酸和模板之间的杂交形成中是重要的。由于AL-oligo和ML-oligo在5'端和3'端具有相同的序列,因此AL-oligo和前导RNA之间杂交形成的效率可能与ML-oligo和前导RNA之间的效率相似。随机-oligo不含有与MHV基因和寡脱氧胞苷PS-(dC)20有显著同源性的序列,其显示出对病毒增殖的抑制作用。在低浓度下,随机-oligo和PS-(dC)20的抑制百分比显著低于AL-oligo和ML-oligo的抑制百分比。
已知用于TGF-β抑制的反义核苷酸之一是OT-101(trabedersen)。Trabedersen是一种合成的反义寡核苷酸,其被设计用于在阻断TGF-β2(一种可以发挥促肿瘤作用的分泌蛋白)的产生。Trabedersen适用于治疗恶性脑肿瘤和其他过度表达TGFβ2的实体肿瘤,如皮肤、胰腺和结肠的那些肿瘤。
冠状病毒进入细胞后,细胞复制受到抑制,细胞机制转向病毒复制。VeroE6细胞的SARS-CoV-1感染通过磷脂酰肌醇3’-激酶/Akt信号通路以及通过细胞凋亡来抑制细胞增殖。SARS-CoV-1的核衣壳蛋白抑制细胞周期蛋白-细胞周期蛋白依赖性激酶复合物并阻断哺乳动物细胞(包括VeroE6)的S期进展。而且,SARS-CoV-1 7a蛋白经由HEK293、COS-7和Vero细胞的细胞周期蛋白D3/pRB途径阻断G0/G1期的细胞周期进展。小鼠冠状病毒复制通过降低Cdk活性和pRb磷酸化诱导17Cl-1感染细胞的G0/G1期细胞周期停滞。用禽冠状病毒感染性支气管炎病毒(IBV)感染异步复制和同步复制细胞,使感染细胞在细胞周期的G1/M期停滞。
RSV感染诱导TGF-β表达,导致A549和PHBE细胞的细胞周期停滞。细胞周期停滞也显示出增强RSV复制。通过用TGF-β抗体或TGF-β受体信号抑制剂阻断可以逆转细胞周期停滞,这表明TGF-β在病毒诱导的细胞周期停滞中起作用。最后,阻断TGF-β也会导致显著降低的病毒蛋白表达和较低的病毒滴度。以类似的方式,我们假设OT-101下调TGF-β2的能力将影响SARSCoV-1和SARS-CoV-2感染后的细胞周期调节,从而中和病毒。因此,我们在SARS-CoV-1和SARSCoV-2(COVID-19病毒)的病毒复制试验中测试了抗TGF-β2的反义OT-101。OT-101表现出对SARS-CoV-1和SARSCoV-2的nM抑制。这形成了我们的OT-101抗COVID-19的IND的基础。此外,TGF-β2是一种多功能细胞因子,在呼吸道病毒感染的病理学中起着重要作用,包括中性粒细胞募集,这可能导致炎症和肺部积液,其通常导致归因于COVID-19的死亡。低水平的TGF-β,尤其是TGF-β2,诱导中性粒细胞向受损组织即肺的趋化性。随着炎症的发展,高水平的TGF-β可能通过局部表型效应和继发效应(包括血管通透性的变化)促进病毒发病,这是由如对埃博拉所示的VEGF或其他TGF-β调节的细胞因子、趋化因子和生长因子的诱导引起的。结合其已证明的抗病毒活性,OT-101可以是抗COVID-19的有效治疗剂。
显然需要新的药物(预防性和治疗性)来治疗COVID-19患者。本发明围绕着TGF-β激增作为COVID-19病理学和临床表现的中心原因这一新概念。本发明涉及使用已知的TGF-β抑制剂(如OT-101和青蒿素)来治疗COVID-19的方法。可以预见,这种TGF-β抑制剂将在COVID-19感染的整个三个阶段起作用:1)抑制病毒摄取和/或复制,2)抑制病毒症状,和3)抑制恢复时的肺损伤。本发明通过提出各种组合物、治疗方法和使用方法,克服了现有技术的局限性,满足了对包括COVID-19在内的病毒性疾病进行预防性和治疗性治疗的需要。
本发明目的
本发明的主要目的是通过施用选自青蒿素(Artemisinin)、OT-101反义寡核苷酸的药剂提供TGF-β抑制。
本发明的目的之一是提供组合物,其包含选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸和其他反义寡核苷酸的药剂。
本发明的另一个目的是通过施用青蒿素提供TGF-β抑制。
本发明的另一个目的是通过施用OT-101提供TGF-β抑制。
本发明的另一个目的是提供纯度大于90%的基本上纯的青蒿素。
本发明的另一个目的是提供不含杂质侧柏酮(Thujone)的基本上纯的青蒿素。
本发明的另一个目的是提供一种基本上纯的青蒿素,其含有量可忽略不计的杂质,如青蒿素、9-表青蒿素(9-epiartemisinin)。
本发明的另一个目的是提供用于治疗或预防病毒性疾病或肺部疾病的青蒿素。
本发明的另一个目的是提供用于治疗COVID-19的青蒿素。
本发明的另一个目的是提供用于治疗COVID-19的青蒿素。
本发明的另一个目的是提供一种组合物,其包含选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸的药剂以及一种或多种其他治疗剂的药剂。
本发明的另一个目的是提供一种通过向受试者施用选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸和其他反义寡核苷酸的药剂,任选地与一种或多种另外的治疗剂一起,来治疗纤维化或任何胶原相关的疾病、癌症、病毒性疾病、细菌性疾病、真菌性疾病、寄生虫引起的疾病的方法。
本发明的另一个目的是提供一种通过向受试者施用选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸和其他反义寡核苷酸的药剂,任选地与一种或多种另外的治疗剂一起,来治疗COVID-19的方法。
本发明的另一个目的是提供一种通过静脉内、鞘内、肌肉内、口服和任何其他可接受的施用途径施用药剂的治疗方法。
本发明的另一个目的是提供一种包含青蒿素的药学上可接受的口服剂型。
本发明的另一个目的是提供青蒿素的提取方法。
本发明的另一个目的是提供一种包含青蒿素的物质组合物。
本发明的另一个目的是提供青蒿素衍生物如蒿甲醚(ARM)、青蒿琥酯(ARS)和双氢青蒿素的物质组合物。
本发明的另一个目的是提供含有青蒿素、青蒿烯(Artemisitene)、9-表青蒿素和侧柏酮的黄花蒿提取物。
本发明的另一个目的是提供被配制为药物产品的包含青蒿素的物质组合物(composition of matter,同“物质”)。
本发明的另一个目的是提供包含反义寡核苷酸OT-101或OT-101与反义寡核苷酸序列的组合的物质组合物、其药物组合物,及其用于治疗病毒性疾病包括COVID-19的用途,其中骨架相对于现有技术状态被修饰为包括但不限于OME或LNA,所述反义寡核苷酸序列选自SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID8。
本发明的另一个目的是提供包含反义寡核苷酸OT-101的组合物,其进一步包含一种或多种另外的治疗剂。
本发明的另一个目的是提供一种组合物,所述组合物包含反义寡核苷酸OT-101与选自SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8的反义寡核苷酸序列的组合,其进一步包含一种或多种另外的治疗剂。
本发明的另一个目的是提供治疗TGF-β风暴的方法。
本发明的另一个目的是提供一种通过抑制TGF-β诱导的蛋白(包括IL-6、TGFBIp)来使用反义寡核苷酸的方法。
本发明的另一个目的是提供一种组合物,其中一种或多种另外的治疗剂选自青蒿素、哌喹、咯萘啶(Pyronaridine)、姜黄素、乳香或SOC。
发明概述
本发明通过施用选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸的药剂提供TGF-β抑制。
本发明提供一种组合物,其包含选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸和其他反义寡核苷酸的药剂。
本发明通过施用青蒿素提供TGF-β抑制。
本发明通过施用OT-101提供TGF-β抑制。
本发明提供了纯度大于90%的基本上纯的青蒿素。
本发明提供了不含杂质侧柏酮的基本上纯的青蒿素。
本发明提供了一种基本上纯的青蒿素,其含有量可忽略不计的杂质,如青蒿素、9-表青蒿素。
本发明提供了用于治疗或预防病毒性疾病或肺部疾病的青蒿素。
本发明提供用于治疗COVID-19的青蒿素。
本发明提供了用于治疗COVID-19的OT-101。
本发明提供一种组合物,其包含选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸的药剂以及一种或多种另外的治疗剂。
本发明提供了通过向受试者施用选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸和其他反义寡核苷酸的药剂,任选地与一种或多种另外的治疗剂一起,来治疗纤维化或任何胶原相关疾病、癌症、病毒性疾病、细菌性疾病、真菌性疾病、寄生虫引起的疾病的方法。
本发明提供了一种通过向受试者施用选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸和其他反义寡核苷酸的药剂,任选地与一种或多种另外的治疗剂一起,来治疗COVID-19的方法。
本发明提供了一种通过静脉内、鞘内、肌肉内、口服和任何其他可接受的施用途径施用药剂的治疗方法。
本发明提供了一种包含青蒿素的药学上可接受的口服剂型。
本发明提供了一种提取青蒿素的方法。
本发明提供了一种包含青蒿素的物质组合物。
本发明提供了青蒿素衍生物如蒿甲醚(ARM)、青蒿琥酯(ARS)和双氢青蒿素的物质组合物。
本发明提供了包含青蒿素、青蒿烯、9-表青蒿素和侧柏酮的黄花蒿提取物。
本发明提供了包含青蒿素的物质组合物,其被配制为药物产品。
本发明提供了一种物质组合物、其药物组合物,及其在治疗病毒性疾病包括COVID-19中的用途,所述物质组合物包含反义寡核苷酸OT-101或OT-101与反义寡核苷酸序列的组合,其中骨架相对于现有技术状态被修饰为包括但不限于OME或LNA,所述反义寡核苷酸序列选自SEQ ID1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQID 8。
本发明提供了一种组合物,其包含选自序列OT-101的反义寡核苷酸,并进一步包含一种或多种另外的治疗剂。
本发明提供了一种组合物,其中一种或多种另外的治疗剂选自青蒿素、哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香或SOC。
本发明提供了一种组合物,其包含OT-101、青蒿素、姜黄素、乳香和维生素C的组合。
本发明提供了一种药物组合物,其包含OT-101、青蒿素和哌喹的组合。
本发明提供了一种药物组合物,其包含OT-101、青蒿素和咯萘啶的组合。
本发明提供了一种治疗TGF-β风暴的方法。
本发明提供了一种通过抑制TGF-β诱导的蛋白(包括IL-6、TGFBIp)来使用反义寡核苷酸的方法。
附图简要说明
图1.青蒿素的提取工艺流程。
图2.用ARTIVedaTM+SOC相比于单独的SOC治疗的患者的症状的时间依赖性改善。
图3.位点特定SOC。将多个位点共用的药剂标注上颜色。
图4.降低1分WHO量表,即2分降低至1分和4分降低至3分的天数。黑线为SOC+ARTIVedaTM,蓝线为单独的SOC。
图5.ARTIVedaTM+SOC和单独的SOC之间恢复率的对数秩统计分析。ARTIVedaTM使患者受益,如通过增加WHO量表所示,患者病情越重,经ARTIVedaTM治疗与未经ARTIVedaTM治疗之间的差异越明显。
图6.青蒿素速释胶囊500MG的生产工艺流程图。
图7.OT-101治疗抑制IL-6。
发明详述
在详述的一开始,可以理解,随后的描述仅示出了本发明的特定形式。然而,这种特定形式只是示例性实施方案,并不旨在意味着对本发明范围的任何限制。因此,该描述将被理解为本发明的示例性实施例和教导,而不旨在被限制性地理解。
因此,本发明的一个重要的实施方案涉及通过施用选自青蒿素、具有SEQ ID 9的OT-101反义寡核苷酸的药剂来抑制TGF-β。
在该实施方案的一个方面,本发明涉及通过施用选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸来抑制TGF-β,其中TGFβ可以是TGF-β1或TGF-β2或TGF-β3。
在本发明实施方案的另一方面,本发明涉及通过施用青蒿素来抑制TGF-β。
在该实施方案的又一方面,本发明涉及通过施用反义寡核苷酸,优选具有SEQ ID9的OT-101来抑制TGF-β。
在该实施方案的另一个方面,本发明涉及通过施用反义寡核苷酸,优选OT-101或其中骨架相对于现有技术状态被修饰以包括但不限于OME或LNA的OT-101来抑制TGF-β。
在该实施方案的又一方面,本发明涉及通过施用反义寡核苷酸OT-101或OT-101与选自SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8的反义寡核苷酸序列的组合来抑制TGF-β。
在实施方案的另一个方面中,所述药剂被施用于人或动物。
本发明的另一个实施方案涉及用于TGF-β抑制的组合物,其包含选自青蒿素、OT-101反义寡核苷酸和其他反义寡核苷酸的药剂。
在该实施方案的一个方面,本发明涉及一种用于TGF-β抑制的组合物,其包含青蒿素。
在该实施方案的另一方面,本发明涉及一种用于TGF-β抑制的组合物,该组合物包含药剂OT-101或骨架相对于现有技术状态被修饰为包括但不限于OME或LNA的OT-101。
本发明的另一个重要实施方案涉及纯度大于90%的基本上纯的青蒿素。
在该实施方案的一个方面,本发明涉及不含杂质如侧柏酮的基本上纯的青蒿素。
在该实施方案的另一方面,本发明涉及杂质如青蒿素、9-表青蒿素的量可忽略不计的基本上纯的青蒿素。
在该实施方案的另一方面,本发明涉及基本上纯的青蒿素,其不含杂质如青蒿素、9-表青蒿素和侧柏酮。
在一个实施方案中,本发明涉及从植物黄花蒿中提取青蒿素的方法,其包括以下步骤:用水提取植物提取物,将提取物分配在水和石油醚中,用包含石油醚和乙酸乙酯的溶剂在硅胶吸附剂上对提取的溶液进行色谱,以获得在洗脱溶液中的青蒿素,以及蒸发洗脱的溶液以获得油性材料,然后结晶,产生基本上纯的青蒿素。
在另一个实施方案中,本发明涉及用于治疗或预防病毒性疾病或肺部疾病的青蒿素。
在该实施方案的另一个方面,本发明涉及用于治疗或预防病毒性疾病的青蒿素,所述病毒性疾病包括但不限于SARS、MERS、RSV、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒(CMV)、人类疱疹病毒6型(HHV-6)、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV2)、EB病毒(EBV)、乙型肝炎病毒(HBV)、肠病毒D68、甲型流感病毒。
在该实施方案的另一方面中,本发明涉及用于治疗或预防病毒性疾病如COVID-19的青蒿素。
在一个实施方案中,本发明涉及一种药物组合物,其包含游离的青蒿素或其药学上可接受的盐形式、多晶型物或立体异构体或其混合物,任选地连同药学上可接受的赋形剂。
在该实施方案的一个方面,本发明涉及一种组合物,其包含青蒿素、选自聚山梨醇酯80和聚山梨醇酯80干粉的稳定剂、选自微晶纤维素的稀释剂、选自交联聚维酮和交联羧甲基纤维素的崩解剂以及选自硬脂酸镁的抗结块剂。
在该实施方案的另一方面,本发明提供了药物组合物,其中所述组合物包含88-97重量%的青蒿素、1-5重量%的稳定剂、0.2-1重量%的稀释剂、1-4重量%的崩解剂和1-2重量%的抗结块剂。
在该实施方案的另一方面,本发明提供了一种药物组合物,其包含游离的青蒿素或其药学上可接受的盐形式、多晶型物或立体异构体或其混合物,以及一种或多种药学上可接受的赋形剂,所述赋形剂选自稀释剂、稳定剂、崩解剂和抗结块剂,其中所述组合物包含45-99%w/w的青蒿素、1-50%w/w的稀释剂和2-20%w/w的抗结块剂。
在该实施方案的另一方面,本发明提供了药物组合物,其包含纯度大于90%的基本上纯的青蒿素。
在该实施方案的另一方面,本发明提供了药物组合物,其包含不含青蒿素、9-表青蒿素和侧柏酮杂质的基本上纯的青蒿素。
在又一个实施方案中,本发明提供了一种治疗纤维化或任何胶原相关疾病、癌症、病毒性疾病、细菌性疾病、真菌性疾病、寄生虫引起的疾病的方法,其中该方法包括向受试者施用治疗有效量的青蒿素。
在该实施方案的一个方面,该方法用于治疗由但不限于SARS、MERS、RSV、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒(CMV)、人类疱疹病毒6型(HHV-6)、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV2)、EB病毒(EBV)、乙型肝炎病毒(HBV)、肠病毒D68、甲型流感病毒诱导的病毒性疾病。
在该实施方案的另一个方面中,本发明涉及一种治疗COVID-19的方法,包括向受试者施用治疗有效量的青蒿素。
在该实施方案的另一个方面,青蒿素抑制TGF-β,其中TGF-β是TGF-β1、TGF-β2或TGF-β3。
在另一个方面,施用包括静脉内、鞘内、肌肉内、口服和任何其他可接受的施用途径。在又一实施方案中,本发明涉及用于治疗COVID-19的青蒿素。
本发明的另一个重要实施方案涉及提供包含青蒿素的组合物。
本发明的另一个重要实施方案涉及包含青蒿素的药学上可接受的口服剂型。
在该实施方案的一个方面,本发明涉及一种药学上可接受的口服剂型,其包含青蒿素,青蒿素的量为每天一次250-750mg,持续五天,优选量为每天一次500mg,持续五天。
根据我们自己的内部研究(临床和基于细胞的),发现了ARTIVedaTM(青蒿素/中亚苦蒿(Artemisia absinthium)植物提取物/阿育吠陀文本中的Damanaka)(即蒿属(Artemisia)提取物)具有抗COVID-19的活性,并得到全球其他研究的独立证实。该数据有力支持了ARTIVedaTM可以作为抗COVID-19的治疗剂。
植物(如蒿属(Artemesia))中的生物活性物质是与细胞代谢和植物生理学密切相关的次级代谢产物,所述细胞代谢和植物生理学创建以作为植物在生态系统内共同进化为对病原体(如病毒)的防御、对传粉者(如昆虫)的引诱剂的一部分以改善植物的存活以及传播者(如放牧动物)的健康。最初作为赋予生存优势的药效团被人类探索用来治疗折磨他们的疾病。几千年来,传统草药医学被编成各种传统医学体系。民族植物学将从传统医学信息中获得的见解用于开发药物。
蒿属植物物种在传统医学中应用广泛。蒿属植物大多为草本植物,有时为灌木,通常具有强烈的香气。植物体常被浓密的毛。叶片羽状半裂至羽状全裂,尺寸可变。头状花序通常呈圆锥状总状花序排列形式。草本总苞片存在。花托凸起或平坦,裸露或被毛覆盖。舌状花具雌蕊。花冠颜色为黄色或绿色,很少为棕色。盘心花是两性的。连萼瘦果为倒卵球形至长圆形,大部分为棕色。有三种在印度种植的众所周知的物种。黄花蒿虽然不是印度本土的,但现在在克什米尔山谷、喜马偕尔邦山、北方邦和该国其他地区广泛种植。蒿属植物的化学组成由挥发性和非挥发性组分(主要是倍半萜,包括青蒿素)组成。
1.中亚苦蒿(Vilayati afsantin,Afsantin,Kakamush,Afsantheen,Zoon)。民族植物学用途:1.干燥的植物用于保护衣物免受昆虫侵害,并作为杀虫剂。2.全植物汤剂用作一般健康的补品。3.叶粉用于治疗胃部问题和肠道蠕虫。4.种子粉口服治疗风湿病。5.将种子粉糊剂涂抹在牙齿上以缓解疼痛。商品名:Dvipantara Damanaka。
2.黄花蒿(Afsantin,Afsantin jari)。民族植物学用途:1.全植物汤剂用于治疗疟疾。2.叶子用于发烧、咳嗽和普通感冒。3.叶子的干粉用于治疗腹泻。4.afsantin油因其芳香宜人而被用于当地香水(ettar)。商品名:Seeme Davana。
3.北艾(A.vulgaris L.)(Tatwan,Nagdowna,Tarkha)。民族植物学用途:1.叶子输液用于治疗发烧。2.绒毛被用作艾。商品名:Dvipantara Damanaka。
包含青蒿素的药用植物胶囊组合物
在一个多个实施方案中,本公开涉及包含青蒿素的药用植物胶囊,其加工或生产以及用于治疗或预防COVID-19疾病的方法,所述青蒿素为游离的或药学上可接受的盐形式、多晶型物或立体异构体或其混合物,任选地与一种或多种另外的治疗剂组合。
在另一个实施方案中,提供了用于肺健康支持的药学上可接受的剂型。药学上可接受的口服剂量可以包括治疗有效量的青蒿素和药学上可接受的载体。当使用USP II型溶出装置在900mL含2%(w/v)十二烷基硫酸钠的pH 6.8的磷酸钠缓冲液中以75rpm、37℃下进行测量时,口服剂型在45分钟后释放至少70wt%的青蒿素,或者在另一种情况下,在45分钟后释放量比不含载体的同等剂量口服剂型多至少20wt%。
在另一个实施方案中,植物胶囊口服剂型的本发明药物组合物可以包装在HDPE瓶或泡罩包装中。
青蒿素给药:选择每天500mg口服剂量持续5天作为最佳剂量。
青蒿素的药代动力学在以前以不同的剂量水平用于疟疾的临床试验中进行了研究。通过分析这些临床试验的数据,我们得出了最佳剂量为500mg剂量水平,每天一次,持续5天,然后中断5天。这完成了一个治疗周期,并允许患者在需要时继续最多3个治疗周期以实现完全康复。
本发明的另一个实施方案涉及包含青蒿素以及一种或多种另外的治疗剂的组合物。
在该实施方案的另一个方面,本发明提供了一种药物组合物青蒿素,其为游离或药学上可接受的盐形式、多晶型物或立体异构体或其混合物,还包括一种或多种另外的治疗剂。
在一个方面,一种或多种另外的治疗剂选自哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香或SOC。
在该实施方案的另一方面,SOC被定义为采用选自以下的药物的治疗:瑞德西韦、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫(Budamate)、Rapitus、Montek LC、低分子量肝素、泼尼松龙、强力霉素、对乙酰氨基酚、B族复合物(B.complex)、维生素C、泮托拉唑(Pantoprozol)、多西环素、伊维菌素、锌、Foracort-Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松(Injection Ceftriaxone)、对乙酰氨基苯酚片(Tab Paracetamol)、注射用片段化蛋白(Injection Fragmin)、瑞德西韦(Covifor)片、阿奇霉素、泮托拉唑(Pantoprozole)、注射用地塞米松、注射用昂丹司琼(Injection Odndansetron)、复合维生素片、抗坏血酸片、碳酸钙片、硫酸锌片。
在该实施方案的另一个方面,本发明涉及一种药物组合物,其包含青蒿素、姜黄素、乳香和维生素C。
在该实施方案的另一个方面,本发明涉及包含青蒿素和哌喹的药物组合物。
在该实施方案的另一方面,本发明涉及一种药物组合物,其包含70:30至30:70重量%的青蒿素和咯萘啶。
在该实施方案的又一方面,组合物是纳米颗粒制剂的形式。
在该实施方案的另一方面,组合物为喷雾剂形式。
在一个方面,本发明提供了一种组合物,其包含青蒿素和姜黄素。产品ArtemiC是一种包含青蒿素、姜黄素、乳香和维生素C的医用喷雾剂。ArtemiC展示了以下不同的优势:
1.无药物不良事件的完全安全性和疗效特性;
2.预防COVID-19患者病情恶化并实现更快的临床改善的能力;
3.协助减轻医疗系统压力并支持应对住院患者的能力;
4.改善与COVID-19相关的症状和疼痛的能力;
5.在社区和医院中使用的通用性;和
6.由于ArtemiCTM的作用机制侧重于抗炎作用和预防细胞因子风暴,因此在未来开发中将考虑广谱的潜在适应症。
在该实施方案的另一个方面,本发明提供了一种ArtemiC的制剂,其以纳米颗粒制剂形式包含青蒿素、姜黄素、乳香属(Boswellia)和维生素C,被提议用于治疗与新型冠状病毒SARS-CoV-2相关的疾病。鉴于其作为食品补充剂的地位,它很容易获得。这项倡议是在这种致命性疾病引起暴发性大流行的紧急情况下提出的,这种疾病被称为COVID-19,并已在全球传播,造成死亡并扰乱现代社会的正常功能。该提议的依据是基于对该制剂的组分和药理特征的现有知识,以及它们与当前对正在解决的疾病过程的理解的相关性。
这些考虑因素中最重要的是充分确定的活性成分的免疫调节活性,如多年来在体外和体内确定并发表的。例如在降低TNF-α和IL-6水平的活性方面是明显的这些活性被认为与COVID-19进展形式所涉及的病理生理过程有关。活性剂还具有显著的抗氧化、抗炎以及抗聚集和抗微生物活性。
基于在动物模型中的这些活性和观察结果,结合在其他情况下单独成分以及各种组合的临床经验,提议评价其在COVID-19情况下的效果。
在一个实施方案中,本发明涉及包含青蒿素的物质组合物。
在一个实施方案中,本发明涉及青蒿素的衍生物如蒿甲醚(ARM)、青蒿琥酯(ARS)和双氢青蒿素的物质组合物。
在一个实施方案中,本发明涉及一种黄花蒿提取物,其包含青蒿素、青蒿烯、9-表青蒿素和侧柏酮。
在该实施方案的一个方面,本发明涉及配制为药物产品的物质组合物。
在该实施方案的另一个方面,药物产品是胶囊、片剂、粉剂、袋、小袋、栓剂。
在该实施方案的又一方面,药物产品被封装在植物、硬明胶或软明胶胶囊中。
在该实施方案的另一方面,本发明涉及配制为用于释放、立即释放、持续释放或改性释放药物的胶囊、片剂、粉剂、袋、小袋、栓剂的药物产品。
在该实施方案的另一个方面中,溶出曲线是这样的,即在15分钟内达到大于40%的溶出。
本发明的另一个重要实施方案涉及一种物质组合物、其药物组合物以及其在治疗病毒性疾病包括COVID-19中的用途,所述物质组合物包含具有SEQ ID 9的反义寡核苷酸OT-101或具有SEQ ID 9的OT-101与选自SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID3、SEQ ID 4、SEQ ID5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8的反义寡核苷酸序列的组合,其中骨架相对于现有技术状态被修饰为包括但不限于OME或LNA。
本发明的另一个重要实施方案涉及一种药物组合物,其包含选自具有SEQ ID 9的序列OT-101、SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQID 8或其组合的反义寡核苷酸,任选地连同一种或多种药学上可接受的赋形剂。
本发明的又一个实施方案涉及一种组合物,其包含选自序列OT-101的反义寡核苷酸,还包含一种或多种另外的治疗剂。
在该实施方案的一个方面中,一种或多种另外的治疗剂选自青蒿素、哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香或SOC。
在该实施方案的另一个方面,SOC被定义为采用选自以下的药物的治疗:瑞德西韦、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫、Rapitus、Montek LC、低分子量肝素、泼尼松龙、强力霉素、对乙酰氨基酚、B族复合物、维生素C、泮托拉唑(Pantoprozol)、多西环素、伊维菌素、锌、Foracort-Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松、对乙酰氨基苯酚片、注射用片段化蛋白、瑞德西韦(Covifor)片、阿奇霉素、泮托拉唑(pantoprozole)、注射用地塞米松、注射用昂丹司琼、复合维生素片、抗坏血酸片、碳酸钙片、硫酸锌片。
在该实施方案的另一方面,本发明提供了一种组合物,其包含OT-101、青蒿素、姜黄素、乳香和维生素C的组合。
在该实施方案的另一个方面,本发明涉及药物组合物,其包含OT-101、青蒿素和哌喹的组合。
在该实施方案的另一个方面,本发明涉及药物组合物,其包含OT-101、青蒿素和咯萘啶的组合。
在该实施方案的另一个方面,本发明涉及纳米颗粒制剂形式的组合物。
在该实施方案的另一个方面,本发明提供了喷雾剂形式的组合物。
在一个方面,一种或多种药学上可接受的赋形剂选自溶媒、稳定剂、稀释剂、崩解剂、抗结块剂和/或添加剂。
在该实施方案的另一个方面,本发明涉及一种药物组合物,其包含OT-101与SEQID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8的组合,比例为1:1至1:100。
在该实施方案的另一个方面,本发明涉及一种药物组合物,其包含OT-101与SEQID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8的组合,其中骨架相对于现有技术状态被修饰为包括但不限于OME或LNA,所述药物组合物还包含一种或多种另外的治疗剂。
在该实施方案的又一方面,该组合物是纳米颗粒制剂的形式。
抗SARS-CoV2的ASO的设计
反义实验的成功或失败从根本上取决于首先在感兴趣的特定mRNA内选择正确的靶序列。然后围绕该序列设计反义寡核苷酸(ASO)及其适当的化学修饰。在选择mRNA靶序列时,应考虑以下因素:
ASO长度
ASO包含至少8个核苷酸,最佳是20个核苷酸。形成3个氢键和2个氢键的残基的比率应>=2.9。
ASO应为大约20个碱基长;这种寡核苷酸易于合成,形成稳定的DNA-RNA双链体,并且足够长,以至少在人类基因组中是独特的。独特性很重要;关键的是,ASO不与非靶mRNA结合,即使是部分结合也不行。如果在ASO和非靶mRNA之间形成少至6-7个碱基对,这可能足以启动RNase H活性,导致错误靶的切割。
鉴定100%匹配的mRNA的Blast搜索对整个序列是阴性的;发现部分序列的100%匹配-除了TRS-1,Tm不高于37℃值得关注。另一个序列FS表现出异常短的序列和低Tm,因此不适合作为治疗性反义药物。
正在针对COVID-19评价以下ASO。
靶mRNA/ASO中CG基序的存在
由于非甲基化CG基序在细菌DNA中很常见,但在真核DNA中不常见,如果生物体的免疫系统将其解释为细菌感染,则它们在反义寡聚体中的存在可能会在体内实验中触发免疫应答。当CG序列作为嘌呤-嘌呤-C-G-嘧啶-嘧啶序列的一部分嵌入时,CG介导的免疫应答是特别强的。避免这一问题的一种方法是仔细选择缺乏CG或至少缺乏CG周围的上述侧翼序列的寡核苷酸。如果不可能消除CG,那么一个好的替代方案是用5-甲基-C代替CG中的C,这不会刺激免疫系统或有害地影响杂交。
含有CG的寡核苷酸可以通过引起B淋巴细胞的增殖;通过激活巨噬细胞、树突状细胞和T细胞;并通过诱导细胞因子释放而作为免疫刺激剂。这些CG介导的免疫效应取决于CG二聚体的侧翼序列,并且在嘌呤.嘌呤.CG.嘧啶.嘧啶基序下最强。这些CG效应发生在硫代磷酸酯和磷酸二酯中,并且可能负责报道的寡核苷酸的一些体内活性。
ASO内四联体的形成
ASO不应含有4个或更多个的连续元件/核苷酸(CCCC或GGGG)。此外,ASO不应含有2个或更多系列的3个连续元件/核苷酸(CCC或GGG)。
含有单个GGGG连续区段或很靠近的重复的GG或GGG连续区段的ASO可以形成链内四联体(四条链的单独结构)。G四联体通常对蛋白具有高亲和力,这可能导致可能干扰反义实验的强效的非反义生物效应,特别是当这种效应模拟反义活性时。在可能的情况下,应避免此类G基序。当这种基序的消除不可避免时,一个好的替代方案是用7-脱氮-G或6-硫代-G置换一个或多个G,这阻断G-四联体的形成。
具有强效生物活性的四联体的形成在反义领域引起了一些问题。研究者应仔细检查所有极其富含特定核苷的寡核苷酸,特别是如果它们显示重复序列或多次出现两个或更多个相邻的相同碱基。具有两个或更多个连续G或C的多个重复的低聚物可以形成四联体和其他非沃森-克里克结构。并非所有具有这种特征的低聚物都必然形成这些高阶结构,特别是在生理条件下。尽管如此,这样的序列还是发出了警告信号,在没有仔细研究的情况下,将生物效应归因于反义机制有充分证明的危险。
最广泛研究的四联体由含有多个相邻鸟嘌呤残基的寡核苷酸形成。这些可能发生在具有约四个残基的单个连续区段中,但它们也可以在很靠近发生的重复GG或GGG基序中发现。即使它们不形成四联体,具有多个GG二聚体的富含G的序列也可能根据序列情况形成其他不寻常的结构。G的四联体形成连续区段似乎对各种蛋白具有亲和力,并且当包括在合成寡核苷酸中时,它们产生多种生物效应。例如,研究人员已经鉴定出与凝血酶和HIV包膜蛋白结合的四联体。已表明其他四联体与转录因子结合或通过蛋白结合产生抗增殖作用。通过用7-脱氮G或6-硫代G置换鸟嘌呤残基可以阻断形成四联体的能力。还应注意的是,仅含有C残基的硫代磷酸寡核苷酸具有与含有G-四联体的硫代磷酸寡核苷酸类似的活性。
增加/减少反义活性的基序
几项研究最终表明,ASO对其mRNA靶的活性是序列-基序含量依赖性的。一项对1000多个硫代磷酸化ASO的主要研究表明,基序CCAC、TCCC、ACTC、GCCA和CTCT的存在与反义活性呈正相关,而GGGG、ACTG、TAA、CCGG和AAA与反义活性呈负相关。
研究者已提出,靶标中嘌呤的区段可能稳定形成的异源双链。通过在许多已发表的研究中审查活性反义寡核苷酸的序列,研究者提出,选择含有序列GGGA的靶标给出好得多的成功机会。
构象和热力学考虑
主要的问题在于二级和三级折叠,其可使大部分RNA不能接近像寡核苷酸这样大的分子。即使那些似乎可接近的序列也可能已经参与了分子内氢键合、堆积相互作用,或参与了溶剂化,该溶剂化可能被寡核苷酸的杂交破坏。因此,杂交诱导的现有RNA结构的重排可能带来令人望而却步的热力学惩罚。另一方面,RNA内的单链序列可以通过堆叠成螺旋构象而预先排序,所述螺旋构象特别有利于杂交。两个发夹环(吻式相互作用)之间形成的杂交体的异常稳定性是众所周知的,并且在天然反义RNA与它们的靶标的结合中是重要的。尽管碱基配对的规则非常简单,但支配寡核苷酸与RNA的杂交的其他微妙之处尚未被充分了解。寡核苷酸的行为非常依赖于末端核苷酸。此外,一个或两个核苷酸的长度的小变化或结合位点的移动可以深刻地影响杂交体形成的动力学。即使是少数不改变双链体热力学稳定性的碱基变化也可能极大地改变杂交的动力学。这些效应可能部分解释了不同反义寡核苷酸在体内的疗效。
硫代磷酸酯
易于合成的硫代磷酸寡核苷酸具有天然的沃森-克里克核苷酸氢键合模式,可以激活RNase H介导的细胞mRNA降解,并且具有核酸酶抗性。在对组织培养细胞单次施用后48小时以上可以观察到硫代磷酸酯的反义作用。需要这种程度的稳定性进行体内工作。然而,在特定实验中,硫代磷酸寡核苷酸的实际稳定性可能因所检查的每个序列和细胞系而异。尽管使用这些化合物的早期工作非常令人鼓舞,但很明显,一些最令人兴奋的结果实际上归因于硫代磷酸DNA(硫酸化聚阴离子)的与序列无关的生物学效应和CpG岛的免疫刺激性质,而不是由真正的反义机制引起的。小心规划以避免这些陷阱,应为具有硫代磷酸骨架的反义药物提供强有力的平台。
与天然磷酸二酯寡核苷酸相比,硫代磷酸酯显示出与细胞蛋白和细胞外基质组分的结合增加。这种结合似乎是归因于这些化合物的多阴离子性质;它们的行为类似于硫酸葡聚糖和硫酸肝素。这种结合可以取代或模拟天然配体与各种蛋白如受体或粘附分子的结合。事实上,任何肝素结合类蛋白也可以结合硫代磷酸酯。磷酸二酯DNA是一种多阴离子,可以非特异性地结合蛋白,但由于核酸酶的作用,其具有如此缩短的寿命,以至于这种作用的影响很可能有限。
在另一个实施方案中,本发明涉及一种用于治疗病毒性疾病的反义寡核苷酸,其中所述反义寡核苷酸选自OT-101或OT-101与SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID3、SEQ ID 4、SEQID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7和SEQ ID 8的组合。
在一个方面,本发明的实施方案涉及用于治疗由但不限于SARS、MERS、RSV、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒(CMV)、人类疱疹病毒6型(HHV-6)、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV2)、EB病毒(EBV)、乙型肝炎病毒(HBV)、肠病毒D68、甲型流感病毒诱导的病毒性疾病的反义寡核苷酸。
在该实施方案的另一个方面,病毒性疾病是COVID-19。
在另一个实施方案中,本发明涉及治疗纤维化或任何胶原相关疾病、癌症、病毒性疾病、细菌性疾病和寄生虫性疾病的方法,其中该方法包括向受试者施用治疗有效量的反义寡核苷酸序列,所述反义寡核苷酸序列选自OT-101、SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8或其组合。
在该实施方案的一个方面,该方法用于治疗由但不限于SARS、MERS、RSV、冠状病毒(corona)、埃博拉、巨细胞病毒(CMV)、人类疱疹病毒6型(HHV-6)、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV2)、EB病毒(EBV)、乙型肝炎病毒(HBV)、肠病毒D68、甲型流感病毒诱导的病毒性疾病。
在该实施方案的另一个方面,该方法用于治疗细菌、病毒或其他形式细胞因子诱导的肺炎。
在该实施方案的另一方面,病毒性疾病是COVID-19。
在该实施方案的又一方面,施用包括静脉内、鞘内、肌肉内、口服和任何其他可接受的施用途径。
在该实施方案的另一方面,OT-101反义寡核苷酸抑制TGF-β。
在该实施方案的又一方面,TGF-β是TGF-β1、或TGF-β2或TGF-β3。
在该实施方案的另一个方面,反义寡核苷酸是针对TGF-β、病毒5'末端、病毒转录调控位点和病毒移码位点的反义的任何组合。
本发明的另一个重要实施方案涉及治疗TGF-β风暴的方法。
在该实施方案的又一方面,本发明涉及一种治疗TGF-β风暴的方法,该方法涉及用TGF-β抑制剂、抗病毒剂、IL-6抑制剂或其任何组合治疗TGF-β风暴。
在该实施方案的另一方面,本发明涉及TGF-β抑制剂,包括靶向TGF-β的活性结构域的mAb、小分子。
在该实施方案的又一方面,本发明涉及TGF-β抑制剂,包括mAb、小分子、反义寡核苷酸、RNA治疗剂,其靶向TGF-β或活化蛋白的活化。
在该实施方案的又一方面,本发明涉及TGF-β抑制剂,包括mAb、小分子、反义寡核苷酸、RNA治疗剂,其靶向病毒复制或病毒结合和摄取或病毒蛋白合成或病毒复制。
在该实施方案的另一方面,本发明涉及使用反义寡核苷酸的方法,其中该方法包括抑制病毒与靶细胞的结合和/或在靶细胞中的复制。
在该实施方案的又一方面,本发明涉及治疗与病毒感染相关的症状的方法。
在该实施方案的又一方面,本发明涉及包括治疗与呼吸道病毒感染相关的症状的方法。
在该实施方案的又一方面,本发明涉及包括治疗与冠状病毒感染相关的症状的方法。
在该实施方案的另一方面,本发明涉及一种使用反义寡核苷酸的方法,其中所述方法包括抑制TGF-β诱导的蛋白,包括IL-6、TGFBIp。
在该实施方案的又一个方面,该方法包括抑制归因于TGF-β诱导型蛋白如IL-6、TGFBIp引起的症状。
在该实施方案的另一方面,本发明涉及的反义寡核苷酸是具有SEQ ID 9的OT-101。
在另一个实施方案中,本发明涉及使用具有SEQ ID 9的OT-101治疗细胞因子风暴的方法。
在另一个实施方案中,本发明涉及使用具有SEQ ID 9的OT-101治疗多器官炎症综合征的方法。
在另一个实施方案中,本发明涉及使用具有SEQ ID 9的OT-101治疗川崎综合征的方法。
在另一个实施方案中,本发明涉及使用具有SEQ ID 9的OT-101治疗IgA血管炎的方法。
在本说明书的说明书和权利要求书通篇中,短语“包含”和“含有”以及它们的变体表示“包括但不限于”,并且不旨在排除其他部分、添加剂、组分、整数或步骤。因此,除非上下文另有要求,否则单数涵盖复数。凡使用不定冠词,除非上下文另有要求,否则本说明书应理解为考虑复数以及单数。
在以下实施例中进一步定义了实施方案。以下实施例是为了说明本发明,而不是旨在以任何方式限制本发明的范围。
实施例
实施例1.青蒿素针对SARS-CoV2的抗病毒活性
Cao等人证明了,ART治疗后4T1乳腺癌细胞中TGF-β蛋白水平和mRNA水平降低。收获亚汇合的4T1细胞,在无血清培养基中洗涤一次,并以5x105个细胞/0.1mL PBS的浓度重新悬浮在PBS中。然后将0.1mL细胞悬浮液皮下植入雌性BALB/c小鼠的腹部乳房脂肪垫中。一旦肿瘤是可感知的(植入后5-7天),将小鼠随机分为对照组(n=7;每天腹膜内注射200μl无菌PBS,持续20天)或ART组(n=10;每天腹膜内注射100mg/kg的溶解于0.2% DMSO中的ART,持续20天)。ART治疗后肿瘤内TGF-βmRNA水平显著降低(P<0.01)。
青蒿素可以通过抑制肾脏组织中TGF-β1蛋白的表达以及激活Nrf2信号通路和增强抗氧化蛋白的表达,来减轻糖尿病肾病(DN)大鼠早期肾脏氧化应激损伤,从而对DN肾脏施加保护作用。蛋白质印记分析显示,与正常对照组相比,DN模型大鼠肾脏组织中TGF-β的表达显著增加(p<.05)。青蒿素(25、50、75mg/kg)通过抑制TGF-β1的表达,使TGF-β1的表达恢复至接近正常。类似地,在狼疮性肾炎小鼠中,TGF-β表达增加。这种过表达也被青蒿素治疗所改善。与未经治疗的对照小鼠相比,RNA和蛋白水平均显著降低。
在Vero 76细胞的病毒复制试验中,OT-101(一种针对TGF-β的反义寡核苷酸)对TGF-β表达的抑制抑制了SARS-CoV和SARS-CoV-2的复制,这是与犹他州立大学(NIAID抗病毒测试联盟的一部分)的Brett Hurst博士合作证明的。
在该测定中,化合物在测试培养基(补充有2% FBS和50μg/mL庆大霉素的MEM)中使用八次半对数稀释连续稀释,以使起始(高)测试浓度为1000pg/mL。将每种稀释液添加到具有80-100%汇合的Vero 76细胞的96孔板的5个孔中。
使每种稀释液的三个孔感染病毒,两个孔保持未感染作为毒性对照。六个孔感染且未经处理作为病毒对照,六个孔未感染且未经处理作为细胞对照。制备SARS-CoV-2病毒悬浮液以实现可能的在5天内产生>80%的细胞病变效应(CPE)的最低感染复数(MOI)。对M128533进行平行测试作为阳性对照。
感染后第5天,一旦未经处理的病毒对照孔达到最大CPE,用中性红色染料对板染色约2小时(15分钟)。去除上清液染料并用PBS冲洗孔,将合并的染料在50:50的Sorensen柠檬酸盐缓冲液/乙醇中提取>30分钟,并在540nm下在分光光度计上读取光密度。
将光密度转换为细胞对照的百分比并相对于病毒对照进行归一化,然后通过回归分析计算测试化合物使CPE抑制50%所需的浓度(EC50)。类似地计算了在不存在病毒的情况下导致50%细胞死亡的化合物浓度(CC50)。选择性指数(SI)是CC50除以EC50。
青蒿素是已报道的TGF-β抑制剂,也抑制SARS-CoV-2的复制。OT-101活性优于针对SAR-CoV-2基因组特异性设计的沿着所选的5'-TERM、FS和LTR的反义寡核苷酸。非特异性反义寡核苷酸(RSV)未表现出任何抑制作用。数据如下表1所示。
表-1
OT-101:TGF-β反义寡核苷酸;RSV:阴性对照反义寡核苷酸;M128533:阳性对照;EC50:50%有效抗病毒浓度(μg/ml);CC50:未添加病毒时化合物的50%细胞毒性浓度(μg/ml);SI=CC50/EC50;SARS-CoV来源:疾病控制中心库存809940(200300592)。SARS-CoV-2来源:UTMB新兴病毒和虫媒病毒世界参考中心(World Reference Center for EmergingViruses and Arboviruses,WRCEVA)。
随后,两个其他实验室证实了青蒿素的抗SARS-CoV-2活性:
1)通过RTPCR方法。为了进行抗病毒测定,将4.8x 106个Vero E6细胞接种到48孔细胞培养培养皿上并生长过夜。在37℃下用稀释的实验化合物梯度预处理1小时后,用MOI为0.01的病毒感染细胞1小时。温育后,取出接种物,用PBS洗涤细胞,用新鲜的含药物培养基补充培养容器。感染后24小时,从上清液中提取总RNA,并进行qRT-PCR以量化病毒产量。
2)通过用于突起蛋白的免疫染色。用SARS-CoV-2感染前一天接种在96孔板中的VeroE6细胞,并用指定浓度的供试品进行处理。温育2天后,通过对SARS-CoV-2突起糖蛋白的免疫染色使感染细胞可视化,并对其自动计数。
此外,进行了对接研究,以表明其对病毒的初始结合和摄取具有活性。青蒿素比羟氯喹产生更好的Vina对接得分(得分最高的青蒿素衍生物为-7.1kcal mol-1,相比之下,羟氯喹为-5.5kcal mol-1)。青蒿琥酯、青蒿素和双氢青蒿素与突起蛋白的Lys353和Lys31结合热点表现出两种相互作用模式。
独立地,当通过针对S蛋白:人ACE2复合物的盲对接测试总共含有~203,458个天然配体的ZINC天然文库时,青蒿素是前4个候选物之一(穿心莲内酯、青蒿素、紫檀芪(Pterostilbene)和白藜芦醇)。
青蒿素表现出S蛋白:人ACE2复合物的界面之间的结合。其特征在于:1)与ACE2受体的Tyr-505残基形成1个H键,2)His-34和Ala-387形成与受体的烷基和pi-烷基接触,和3)Pro-389形成碳H键。
实施例2.青蒿素-ARTI-19试验
鉴于我们观察到青蒿素是针对SARS-CoV-2(COVID-19)的强效抗病毒剂,优于瑞德西韦和氯喹,以及青蒿素是世界范围内常用的草药,我们开始在COVID-19患者中评价青蒿素,以确定其是否是这些患者的有效治疗选择。ARTI-19试验由印度监管机构批准,并在印度临床试验注册中心(Clinical Trials Registry India,CTRI)下注册,有三个活动位点,随着试验的进展和扩大,将添加另外的位点。ARTI-19试验注册信息见:CTRI/2020/09/028044。评价青蒿素作为干预剂对COVID-19受试者的安全性和疗效的IV期研究。http://ctri.nic.in/Clinicaltrials/advsearch.php。位点特定信息为:1)Government MedicalCollege&Government General Hospital,Srikakulam,ANDHRA PRADESH;2)RajarshiChhatrapati Shahu Maharaj Government Medical College and Chhatrapati PramilaRaje Hospital,MAHARASHTRA;和3)Seven Star Hospital,MAHARASHTRA。
研究目的:观察青蒿素在COVID-19患者中的作用的临床研究。这些患者将通过RT-PCR确认SARS-CoV-2感染,并出现COVID-19的轻度和中度(住院,无需氧疗法)症状。这些患者在WHO临床进展量表上的得分为2-4。
研究目标:评价青蒿素在COVID-19患者中的临床作用(见上面的患者描述)。
研究的主要终点:主要终点:根据(1)WHO临床进展量表和(2)症状评估标准,通过向SOC添加青蒿素,COVID-19患者(见上面的患者描述)的体征和症状恢复的天数。
待研究人群描述:本先导研究将在班加罗尔在120名成年COVID-19患者中进行。这些患者将通过RT-PCR确认SARS-CoV-2感染,并出现COVID-19的轻度和中度(住院,无需氧疗法)症状,在WHO临床进展量表上得分为2-4。这些患者在医院接受诊断,并且符合诊断标准和入选标准、愿意给出参加临床试验的知情同意书的将被登记。然后将这些登记患者按计算机生成的随机序列随机分为第1组或第2组。将通过患者信息表向每个登记患者提供临床试验的详细信息,并在征得他们的同意后,根据临床研究Performa记录详细病史,生成的数据将用于研究。如果先导研究表明,青蒿素在与SOC一起施用时改善了COVID-19患者的症状,则将对1080名成年COVID-19患者进行扩大临床研究,其研究设计与先导研究相同。
·第1组-治疗组:青蒿素+SOC(医生的选择)。
·第2组-对照组:SOC(医生的选择)。
诊断标准:这些患者将通过RT-PCR确认SARS-CoV-2感染,并出现COVID-19的轻度和中度(住院,无需氧疗法)症状。这些患者在WHO临床进展量表上的得分为2-4分。
入选标准:
1.经COVID-19实验室检测确认的COVID-19感染病例。
2.年龄限制:21至60岁的男性,或非怀孕或非哺乳期女性。
3.氧饱和度高于95%且不需要任何氧疗法或辅助通气的患者。
4.愿意给出其参与临床试验的知情同意书的患者。
排除标准:
1.60岁以上或21岁以下的COVID-19阳性患者。
2.接受免疫抑制疗法的患者。
3.具有相关的肾或肝损害的患者。
4.孕妇或哺乳期母亲。
5.处于需要紧急医疗干预的疾病如肺炎、支气管哮喘、器官衰竭的晚期的患者。
6.需要呼吸机支持的患者。
7.不愿意给出其参与临床试验的知情同意书的患者。
8.有以下共病的患者:胰岛素依赖性糖尿病、高血压伴心脏症状、病态肥胖伴糖尿病和/或高血压。未控制的糖尿病。未控制的高血压。
剂量学:在这方面,将向通过RT-PCR确认为SARS-CoV-2感染并具有COVID-19轻度或中度(住院,无需氧疗法)症状的患者提供持续的对抗疗法药物。这些患者在WHO临床进展量表上得分为2-4。
结果:ARTI-19全球研究的印度组有望在2021年1月15日前完成第一批120名患者的入组,其中78名患者已经进行了随机分组。对前78名患者(随机时,8名患者WHO量表为2分,70名患者WHO量表为4分)进行中期分析。本研究采用WHO 10分量表(图2)。
1)值得注意的是,到使用ARTIVedaTM治疗的第2天,75%的WHO量表4分患者就表现出下降至WHO量表3分。WHO量表3分不需要住院治疗。
2)在使用ARTIVedaTM治疗的第5天,40%的WHO量表4分患者表现出下降至WHO量表1分。注:WHO量表1分是无症状。
3)SOC=标准护理,包括瑞德西韦/地塞米松/肝素。
位点特定分析:
SOC因位点而异,每个位点的SOC如图3所示。尽管这些患者接受了一系列抗病毒剂以及用于治疗COVID-19症状的药剂(如用于治疗发热的对乙酰氨基酚)的重度治疗,但当使用ARTIVedaTM+SOC治疗时,这些患者全都更快地得到了改善(图4)。
恢复分析:
ARTIVedaTM加SOC达到无症状WHO量表1分的中位时间为5天,相比之下单用SOC为14天。差异具有统计学显著性,意味着不太可能偶然发生。初始疾病状态越高,这种趋势越明显。对数秩统计:WHO量表2、3、4分:p=0.0369/RR=1.476(0.8957-2.433),WHO量表3、4分:p=0.026/RR=1.581(0.9094-2.747),WHO量表4分:p=0.0043/RR=2.038(0.9961-4.168)。RR=恢复率比(图5)。
包含青蒿素的药用植物胶囊组合物
实施例3:赋形剂相容性研究
研究了青蒿素与选定赋形剂的化学相容性。评价的赋形剂为:(l)稀释剂(微晶纤维素PH112,USP);(2)稳定剂(聚山梨醇酯80干粉,IH);(3)崩解剂(交联聚维酮USP和交联羧甲基纤维素钠USP);(4)抗粘剂(硬脂酸镁,USP)。青蒿素与每种赋形剂以1:1的重量比混合,混合后立即以及在40℃和75%相对湿度下加速老化一个月后评价混合物。在没有辅料的相同条件下,对青蒿素进行比较。发现与所选赋形剂没有化学不相容性。相容性稳定性样品的所有样品测量结果表明,与对照相比,青蒿素的效力为98.1%至99.2%。杂质谱没有明显变化。
表2:赋形剂和青蒿素相容性数据
*不可检测的;杂质青蒿烯(RC1);杂质9-表青蒿素(RC2);杂质侧柏酮(RC3)
实施例4
胶囊制剂的小规模测试
对包含约500mg青蒿素的胶囊进行胶囊制剂开发的初始试验。如实施例1所述,每种制剂包括单一稀释剂、稳定剂、两种崩解剂和抗结块剂。以400粒胶囊大小制备制剂。最初的干混过程包括通过40目筛筛选API(青蒿素)和每种赋形剂,然后手动袋混。首先将API和除抗结块剂以外的所有赋形剂混合,通过60目筛,然后加入抗结块剂并进一步混合。将所得混合物进一步通过40目筛筛选,然后使用台式填充机将其封装在0号大小的植物胶囊中,该填充机使用定量盘和捣固销,以获得一致的填充重量。下表3显示了测试的组合物的重量百分比。
表3:试验批次组合物详细信息
使用USP II型装置,在具有2%十二烷基硫酸钠的pH 6.8的900mL磷酸钠缓冲液中以75rpm测试每种组合物的青蒿素释放。使用HPLLC分析从每种组合物释放的青蒿素的百分比。
根据表3中给出的配方进行黄花蒿胶囊的首次试验(WND20244A)。观察到胶囊在37℃下以75rpm在具有2%(w/v)十二烷基硫酸钠的pH6.8的磷酸钠缓冲液中的溶出度非常低,即约20%。
在WND20254A的这项试验中,为了在37℃下以75rpm提高具有2%(w/v)十二烷基硫酸钠的pH 6.8的磷酸钠缓冲液中的溶出速率,添加了表面活性剂液体聚山梨醇酯80,这导致溶出速率提高至35%,但仍远未达到可接受的范围。此外,发现制剂的质地也不理想。溶出问题在本次试验中仍未解决,因此计划下一批试验以实现我们的目标。
在WND20255A试验中,试图通过用聚山梨醇酯80干粉代替液体聚山梨醇酯80,并向配方中加入崩解剂和超崩解剂交聚维酮和交联羧甲基纤维素,来解决溶出速率问题,改善了溶出速率,并在分析期间在37℃下以75rpm在具有2%(w/v)十二烷基硫酸钠的pH 6.8的磷酸钠缓冲液中在45分钟时观察到大于70%。胶囊的最终平均填充重量最终确定为500mg。溶出问题得到解决。也在可接受范围内。所有物理参数均符合目标限值。因此,发现所有参数都令人满意,并送去进行分析。物理和化学参数也符合口服剂量速释胶囊的要求。
实施例5
胶囊制剂的再现性测试
通过使用表4中给出的配方通过干法造粒工艺制备青蒿素胶囊剂型。
表4:再现性测试批次的试验组合物详情
制剂按1000粒胶囊大小制备。最初的干混过程包括使API(青蒿素)和每种赋形剂通过40目筛过筛,然后进行八角混合器(GR-17)混合。首先将API和除抗结块剂以外的所有赋形剂混合,通过60目筛,然后加入抗结块剂并进一步混合。将所得混合物进一步通过40目过筛,然后使用半自动胶囊填充机(SA-9)将其封装在0号植物胶囊中,以获得一致的填充重量。下表3显示了测试组合物的重量百分比。
为了检查最终配方和工艺的再现性,使用类似的设备,采用相同的批次大小、相同的配方和参数,计划了三个可再现批次WND20263A、WND20266A和WND20268A。如表4所示,发现在所有方面物理和化学参数都是令人满意且可再现的。也对这些批次进行了稳定性测试。
在II型桨式溶出研究中,使用含2%(w/v)十二烷基硫酸钠的pH6.8的900磷酸钠缓冲液在37℃下以75rpm的速度对每批进行测试。结果如下表5所示。各批次之间青蒿素含量测定和溶出度值的结果相似。这些批次的结果对于速释口服胶囊是可接受的,因此选择该批次配方用于制备大规模胶囊制剂(GMP)。
表5:来自采用最终实验室批次配方进行再现性测试的批次的胶囊的特性
实施例6
植物胶囊制剂的放大(GMP)
进行进一步研究,以制备11个kg批次的青蒿素植物胶囊用于GMP评价(食品药品管理局制定的现行良好生产规范)。根据小规模研究结果,选择表6中的配方进行进一步开发。
表6:20,000粒胶囊的申报批次(GMP)的批次配方
组分 | 等级 | 使用原理 | %(w/w) |
黄花蒿提取物 | IH | API | 94.59 |
微晶纤维PH112 | HSP | 稀释剂 | 0.45 |
聚山梨醇酯80干粉 | IH | 稳定剂 | 2.45 |
交聚维酮 | USP | 崩解剂 | 1.03 |
交联羧甲基纤维素钠 | USP | 崩解剂 | 1.03 |
硬脂酸镁 | USP | 抗粘剂 | 0.45 |
胶囊剂型生产中涉及的加工步骤在下面给出:
i)过筛:在双层塑料袋中将黄花蒿提取物和微晶纤维素PH112通过40#筛过筛,并装入八角混合器中混合10分钟。
ii)润滑剂过筛:使交聚维酮、交联羧甲基纤维素钠和聚山梨醇酯80干粉通过40#筛过筛,使硬脂酸镁通过60#筛过筛。
iii)润滑:将步骤2的过筛材料(硬脂酸镁除外)加入八角混合器中的步骤1的混合物中,并混合5.0分钟。
iv)将过筛的硬脂酸镁加入八角混合器中的混合物,并进一步混合3.0分钟。
v)使混合物准备好进行分析,并可进一步填充在“0”号大小的透明/C.透明#HPMC胶囊壳中。植物胶囊的理论平均重量应为96mg±5.0%。
vi)胶囊填充:将干混混合物填充到半自动胶囊填充机的料斗中。设置胶囊填充机。设置机器后,设置过程中参数并进行胶囊填充过程中控制。首先设置平均填充重量。
vii)平均填充重量应保持在650.0mg,胶囊的理论平均重量应为650.0mg±3.0%[555mg混合物部分+(95.0mg空HPMC帽)],应监测并记录所有胶囊填充参数。
viii)在取出胶囊进行抛光之前,对胶囊进行除尘并检查是否有任何凹陷、破损、斑点外观。
进行GMP分析研究,发现该批次符合所有GMP要求。未观察到混合物与捣固销的不利粘附。
青蒿素给药
实施例7.选择每日500mg持续5天的口服剂量
12名越南健康男性受试者,单次500mg口服剂量。药代动力学中相对较小的个体间变化似乎没有临床意义。单剂量青蒿素耐受性良好:未检测到不良作用。根据这些结果,可以建议每天2x 500mg青蒿素(口服剂量)的治疗方案。这将导致足够的抗疟疾血浆浓度(尽管生物利用度低),并快速消除。
8名越南健康男性受试者以交叉设计的方式采取随机的顺序施用1×250、2×250和4×250mg青蒿素胶囊,施用之间有7天的洗脱期。药代动力学结果表明,青蒿素需要进行高度的全身前(pre-systemic extration)提取。青蒿素口服血浆清除率为约400L h-1,随剂量的增加略有下降,但作用较弱。药物施用后不同时间点测定的青蒿素血浆浓度与500mg和1000mg剂量后的AUC之间存在高度相关性,但250mg剂量后相关性较小。青蒿素耐受性良好,对血压、心率或体温没有明显的剂量或时间依赖性作用。
在禁食条件下对15名越南健康男性志愿者进行了一项单中心、随机、4顺序、开放标签、交叉研究,研究访视之间有3周洗脱期。单次口服剂量160或500mg青蒿素单独或与哌喹联合施用。由临床医生或通过使用实验室测试结果每天监测潜在的不良事件。给药后12小时内频繁抽取血液样品。使用LC-MS/MS对血浆中的青蒿素进行定量。使用非房室性分析方法从血浆浓度-时间曲线计算药代动力学参数。
这项单剂量研究发现,在测试制剂和参考制剂之间的剂量归一化Cmax、AUC0-最后的点和AUC0-∞平均几何差异相对较小(<40%),并且可能在疟疾感染的治疗中不具有临床影响。
在11名越南非复杂恶性疟患者中在单次500mg口服剂量给药后研究了青蒿素的药代动力学。寄生虫迅速消失,平均寄生虫清除时间为36小时。药代动力学与寄生虫清除率之间没有发现任何关系。对单剂量青蒿素的耐受性良好。未检测到不良作用。总之,单剂量青蒿素用于非复杂恶性疟的药代动力学与在健康受试者中的发现结果并无差异。单剂量500mg青蒿素有效降低非重度恶性疟的寄生虫血症,且耐受性良好。
在77名男性和女性成年越南恶性疟患者中研究了青蒿素两种口服剂量方案的即时疗效,将这些患者随机分为接受每天500mg青蒿素持续5天的治疗(A组;n=40)或接受每天100mg剂量的青蒿素持续2天,然后连续2天剂量增加至每天250mg,以及在第5天最终剂量为500mg的治疗(B组;n=37)。每4小时监测寄生虫血症。B组的平均寄生虫清除时间比A组长(平均值±标准差分别为50±23和34±14小时;P<0.01)。两组在第5天的青蒿素药代动力学参数是相似的,尽管从第1天到第5天口服清除率明显显著增加。因此,青蒿素表现出剂量依赖性和时间依赖性药代动力学。在治疗期结束时,不断增加的剂量并未导致更高的青蒿素浓度。
实施例8.建立5天服用/5天中断周期作为治疗方案。
青蒿素主要通过肝脏转化清除。为了调查肝硬化患者中青蒿素的清除率是否与健康志愿者不同,在口服接受500mg青蒿素的患有儿童B型肝硬化的越南男性患者中进行了药代动力学研究。该结果与先前在健康受试者中发现的结果进行了比较。浓度时间曲线下的平均(±SD)面积为2365(±1761)h ng/ml;平均(±SD)清除率为382(±303)/L/h。通过对数线性回归估计清除半衰期为4(±1.3)h,使用单房室一级消除模型通过非线性回归估计为2.4±0.9h。平均(±SD)吸收时间为1.55(±0.8)h。这些结果与健康受试者的结果没有差异,表明肝脏疾病对口服青蒿素的利用度和清除率没有影响,表明青蒿素具有中等的肝脏提取率,并且没有显著的首过效应。
对六名健康的越南男性受试者研究了食物摄入对青蒿素药代动力学的影响。在一项交叉研究中,青蒿素胶囊(500mg)在过夜禁食后与食物一起或不与食物一起施用。在摄入每种药物后获取血浆样品直到24小时。青蒿素浓度的测量通过高效液相色谱法和电化学检测进行。根据主观和客观发现结果,包括重复身体检查、常规血液检查和心电图,来评价耐受性。采用非房室方法和单室模型分析药代动力学。该模型具有零级或一级输入。两种实验条件的结果之间没有发现统计学显著性差异。具体而言,最可能受食物摄入影响的参数,包括吸收曲线、吸收率、生物利用度(f)(如浓度时间曲线下面积[AUC]所反映的)和药物清除率,没有一致性差异。进食后的一些平均值±标准差参数如下所示:血清中药物的最大浓度(Cmax),443±224μg x L-1;达到Cmax的时间,1.78±1.2h;AUC,2092±1441ng x ml-1x h,表观清除率/f,321±167L x h-1;平均停留时间,4.42±1.31h;和达到终点值一半的时间,0.97±0.68h。尿液中排出的青蒿素总量小于剂量的1%。我们得出结论,食物摄入对青蒿素的药代动力学没有重大影响。此外,我们初步得出结论,青蒿素可以被肝脏清除,这种清除不依赖于肝血流(即青蒿素是一种所谓的低清除药物),药物的吸收不受食物摄入的影响。
受食物影响的另一个重要药代动力学因素是肝血流,以及因此的生物利用度和/或全身清除率。因为我们在尿液中发现了仅痕量的未改变的青蒿素,酶促代谢,并因此最可能是肝脏代谢似乎是消除青蒿素的主要途径。理论上,胆汁排泄是另一种可能的消除途径。肝血流变化对药代动力学的影响取决于肝血流和肝脏代谢药物的内在能力(所谓的“内在清除率”)之间的关系。当内在清除率比肝血流高时,药物清除率的限速因素是肝血流;因此,预期肝血流的变化对药代动力学参数具有影响。当内在清除率低于肝血流时,肝血流的变化不影响清除率。因为我们发现进食后青蒿素的药代动力学与进食前没有差异,所以肝血流对青蒿素清除或生物利用度没有影响。因此,青蒿素很可能是一种所谓的低清除率药物。
15名受试者接受了单剂量青蒿素的四种不同给药方案:作为常规制剂(160和500mg)和作为微粉化测试制剂(160mg单用以及与360mg磷酸哌喹联用),每个周期之间有3周的洗脱期(即四向交叉)。在每个周期中给药后频繁采集静脉血浆样品直到12小时。使用液相色谱联用串联质谱法定量血浆中的青蒿素。采用非线性混合效应建模方法评价药物的人群药代动力学性质,并研究不同制剂的临床影响。
青蒿素的血浆浓度-时间曲线通过具有单室配置的转运吸收模型在所有四个序列中同时进行了充分描述。平均口服清除率、分布体积和终末清除半衰期分别为417L/h、1210L和1.93h。在全协变量方法中,哌喹的制剂、剂量和可能的相互作用的影响被评价为分类协变量。显示制剂之间没有临床显著性差异,这与使用非房室生物等效性方法的先前结果一致。
在10名健康的越南男性成年人中,抗疟药青蒿素的药代动力学在每日口服500mg的7天方案中表现出不寻常的时间依赖性。青蒿素的血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)到第4天下降到施用第一天后获得的值的34%(中位数),到第7天进一步下降到仅24%。在两周洗脱期后重新研究的七名受试者中,青蒿素AUC几乎正常化,证明了时间依赖性药物处置的可逆性。结果表明,青蒿素对药物代谢具有不寻常幅度的自诱导作用。这可能部分解释了为什么一些接受标准剂量的患者,由于在标准治疗方案结束时的杀寄生虫药物水平不足,不能完全清除寄生虫。
青蒿素即使在单次给药后也会诱导其自身代谢,导致重复施用后浓度降低。肝室中青蒿素量的增加以线性方式增加了酶前体的产生速率,从而产生了更大量的酶。
24名健康男性随机接受每日单剂量为500mg的口服青蒿素持续5天,或在前5天的每一天接受单口服剂量100/100/250/250/500mg。每组两名受试者在研究开始后的第7、10、13、16、20或24天中的一天施用500mg的新剂量。通过HPLC测定在第1、3、5天和最后一天采集的唾液样品中的青蒿素浓度。使用半生理学模型分析数据,该模型包括(a)前体自诱导成代谢酶,以及(b)具有单独肝室的两室药代动力学模型以模拟自诱导和高的肝提取(hepaticextraction)。
发现青蒿素诱导其自身代谢的平均诱导时间为1.9小时,而酶清除半衰期估计为37.9小时。青蒿素的肝提取率估计为0.93,自诱导代谢后增加至约0.99。该模型表明,自诱导主要影响生物利用度,但不影响全身清除率。AUC随剂量的非线性增加通过影响首过提取的饱和肝清除来解释。
因此,为了防止酶诱导以及实现高血浆浓度,有必要在给药5天后按剂量缩放或中断给药5天。重要的是,青蒿素的给药不应受到食物摄入或肝脏状况的影响。
实施例9:生产:物理、化学和药物性质、制剂和施用途径
物理和化学表征
产品ARTIVedaTM是来源于黄花蒿的青蒿素制剂。
研究性药物产品的药学性质
ARTIVedaTM在符合当前GMP和法律要求的设施中生产。通过适当的分析方法(例如HPLC、pH等)对最终产品进行质量控制,以确认ARTIVedaTM的身份和纯度。分析测试是根据肠胃外药物的常用药物标准(例如欧洲药典和/或美国药典)进行的。
ARTIVedaTM作为用于口服施用的明胶胶囊提供。胶囊以10粒一条的形式包装,足以进行两个ARTIVedaTM循环。封闭系统的主要和次要容器符合国际质量标准。
施用:制备和应用
药物产品生产
ARTIVedaTM作为口服胶囊施用,作为10天治疗方案的一部分,每天一粒胶囊,持续5天,然后是5天洗脱;并且该循环可以重复。该药物产品符合《国际药典》2019年第九版青蒿素(Artemisinin)(青蒿素(Artemisininum))的要求。该产品就USP 231、USP 232和USP 233而言符合USP。该产品就ICH Q3D和FDA Q3D(R1)而言符合ICH和FDA。
生产过程如图6所示,商业批次的批次配方如表1所示。生产青蒿素胶囊的每个单元操作的叙述性总结如下所述:
1.过筛:在双层塑料袋(poly bag)中将黄花蒿提取物和微晶纤维素PHI 12通过40#筛过筛,并装入八角混合器中混合10分钟。
2.润滑剂过筛:使交聚维酮、交联羧甲基纤维素钠和聚山梨醇酯80干粉通过40#筛过筛,使硬脂酸镁通过60#筛过筛。
3.润滑:将步骤2的过筛材料(硬脂酸镁除外)加入八角混合器中的步骤1的混合物中,并混合5.0分钟。
4.将过筛的硬脂酸镁加入八角混合器中的混合物,并进一步混合3.0分钟。
5.使混合物准备好进行分析,并可进一步填充在“0”号大小的透明/C.透明#.HPMC胶囊壳中。植物胶囊的理论平均重量应为96mg±5.0%。
6.胶囊填充:将干混混合物填充到半自动胶囊填充机的料斗中。设置胶囊填充机。设置机器后,设置过程中参数并进行胶囊填充过程中控制。首先设置平均填充重量。
7.平均填充重量应保持在650.0mg,胶囊的理论平均重量应为650.0mg±3.0%[555mg混合物部分+(95.0mg空HPMC帽)],并应监测并记录所有胶囊填充参数。
8.在取出胶囊进行抛光之前,对胶囊进行除尘并检查是否有任何凹陷、破损、斑点外观。
9.抛光:使用抛光机抛光胶囊。记录产量并将胶囊储存在双层聚乙烯袋中。
10.填充胶囊的储存:在将样品从包装中取出前,分别储存在NMT25℃的受控温度和NMT 32%下。
表7.商业批次的批次配方
以下批次由三个匹配提出的商业批次配方(表8)的申报批次生产。批次描述如表9所示,测试结果如表10所示。这些批次生产的产品迄今为止证明了生产工艺的稳健性和产品的稳定性。
表8.药物产品批次
表9.药物产品配方
表10.药物产品测试结果
实施例10药物稳定性:处理和储存条件
温度稳定性
根据国际协调会议(International Conference on Harmonisation)指南进行稳定性研究,以获得ARTIVedaTM的稳定性数据。根据这些稳定性研究,ARTIVedaTM展示出在室温(+25℃±2℃/60%相对湿度(RH)下储存至少24个月)时至少2年的保质期。
稳定性计划包括药物产品在0、4、8和12周时的加速稳定性(40℃/75% RH),以及在0、3、6、9和12个月时的室温(25℃/60%RH)稳定性数据(表11)。表12总结了当前可得的稳定性数据。
表11.稳定性计划
表12.稳定性数据总结
推荐的储存和处理条件
迄今为止,ARTIVedaTM储存和运输的推荐温度条件为+25℃±2℃/60% RH。
实施例11.青蒿素组合产品:
ArtemiC是一种医用喷雾剂,其在胶束制剂中包含青蒿素(6mg/ml)、姜黄素(20mg/ml)、乳香(=乳香属)(15mg/ml)和维生素C(60mg/ml),用于喷雾施用。
患者在第1天和第2天以两次分剂量给予6mg青蒿素、20mg姜黄素、15mg乳香和60mg维生素C,作为附加疗法(还有标准护理)。
患者以2:1的方式随机分配研究药物(ArtemiC)和给予安慰剂的标准护理以及标准护理。
最后2周对患者进行了随访。在此期间,对患者监测不良事件。
为了检查副作用和研究药物疗效,需要额外的时间进行随访(直到出院)。
在第1天和第2天每天2次在安慰剂组中给予安慰剂作为附加治疗,安慰剂包含相同的溶剂,但不含活性成分。
研究目的:本研究被设计用于评价ArtemiC对确诊的COVID-19患者的安全性和疗效。
方法:在接受活性剂或安慰剂以及附加的标准护理的治疗的平行组中对50名患有COVID-19感染的成年患者进行研究。
通过收集和分析不良事件、血液和尿液实验室评估以及生命体征来评估安全性。
基于Swiss PharmaCan AG MyCell EnhancedTM递送系统技术,对那些确诊的COVID-19患者进行的抗炎治疗ArtemiC的II期双盲、安慰剂对照临床试验已满足所有II期主要和次要终点,并证明改善了患者的临床康复。
关键试验结果
研究组和安慰剂组治疗前后的比较见表13。
II期试验涉及以色列和印度三个独立医院位点的50名感染患者,其中33名在治疗组,17名在安慰剂组。
完整的结果证明了,COVID-19患者的健康状况得到了改善,其NEWS评分小于或等于2。
治疗组中所有患者都不需要额外的氧气、机械通气或进入重症监护室,而在安慰剂组中则报告了所有这些事件。
安慰剂组中患者的平均NEWS评分为2.25,在统计学上显著高于治疗组(-0.5.><0.04)(p<0.04)。
NEWS评分决定患者的病情程度,并提示重症监护干预。
这被定义为预估COVID-19患者临床健康状况和改善的主要工具。
与炎症和细胞因子风暴有关的不同适应症将被视为未来的发展目标,并包括与细胞因子风暴有关的广泛疾病,如自身免疫性疾病、炎症性GI疾病、流感和化疗患者。
主要结果量度:
1.临床改善时间,定义为与常规治疗相比,国家早期预警评分2(NEWS2)</=2维持24小时[时间框架:24小时]
将使用临床体征变化评分表对患者进行评估
2.具有确定的或可能的药物相关不良事件的参与者的百分比[时间框架:14天]
将对研究药物引起的不良事件进行评估
次要结果量度:
1.达到阴性COVID-19PCR的时间[时间框架:14天]
2.自症状发作后直到第14天发热和氧饱和度正常化的参与者的比例[时间框架:14天]
3.COVID-19相关生存时间[时间框架:14天]
4.机械通气的发生率和持续时间[时间框架:14天]
5.重症监护室(ICU)停留的发生率[时间框架:14天]
6.ICU停留的持续时间[时间框架:14天]
7.补充氧气的持续时间[时间框架:14天]
入选标准:
1.确诊的SARS-CoV-2感染。
2.住院的COVID-19患者病情稳定中度(即不需要ICU入住)。
3.受试者必须接受观察或入住受控设施或医院(居家隔离是不够的)。
排除标准:
1.管饲或肠胃外营养。
2.筛选时有症状且需要氧气的患者(临床改善顺序量表评分>3)。
3.呼吸代偿障碍,需要机械通气。
4.未控制的2型糖尿病。
5.自身免疫性疾病。
6.孕妇或哺乳期妇女。
7.根据主要研究者的观点认为会妨碍本试验的充分参与或干扰试验终点的评价的任何情况。
反义寡核苷酸
实施例12:本发明中合成的ASO:
1)*PS
2)在胞嘧啶(C)的5位用甲基取代表示为Me
OligoEvaluator(Sigma)的分析
5TERM(1-20)5'G*G*T*A*G*G*T*A*A*A*A*A*C*C*T*A*A*T*A*T 3'
TRS1(53-72)5'G*T*TC*G*T*T*T*A*G*A*G*A*A*C*A*G*A*T*C 3'
TRS2(56-76)5'T*A*A*A*G*T*T*C*G*T*T*T*A*G*A*G*A*A*C*A*G 3'
RSV1 5'C*T*C*C*C*T*C*A*T*G*G*T*G*G*C*A*G*T*T*G*A 3'
结果:OT-101的SARS抗病毒测定结果
1.制备所需细胞系的96孔板并温育过夜。种子板的细胞浓度将在过夜温育后在每个孔中产生80-100%的汇合单层。
2.在最高测试化合物浓度为1000μg/mL的测试培养基中制备8个半对数连续稀释液。
4.将100μL每种浓度添加到96孔板上的5个测试孔中。在测试培养基中用测试病毒感染每个稀释液的3个孔(对于大多数病毒,≤100CCID50/孔)。将不含病毒的测试培养基添加到2个孔中(未感染毒性对照)。
5.感染6个孔作为未经处理的病毒对照。
6.向6个孔中仅添加培养基作为细胞对照。
7.平行测试已知活性化合物作为对照。
8.在37℃+5% CO2下温育,直到CPE明显。
9.在显微镜下观察到细胞病变效应(CPE)后,用0.011%中性红染料染色约2小时。虹吸中性红染料(任选地用PBS冲洗一次,以去除残留的未结合的染料)。
10.根据药物浓度进行CPE定量,以确定EC50。
11.OT-101的50%有效浓度为7.6μg/ml,在1000μg/ml的最高剂量时没有毒性,安全指数(SI)值为>130,我们认为其具有高度活性。
12.安全指数=毒性剂量/疗效剂量。范围越宽,药物的安全性越高。
13.由于OT-101已经进行了多次临床试验,治疗了200多名患者,因此将OT-101用于COVID19的临床试验应该没有问题。
14.预期OT-101对COVID-19具有多种作用机制:1)抗病毒活性,2)抗肺炎活性和3)抗病毒与其受体的结合。
测试培养基:
对于大多数病毒为MEM+2% FBS和50ug/mL庆大霉素
对于流感:对于流感病毒为MEM+10U/mL胰蛋白酶和1ug/mL EDTA
其他特殊培养基(如果需要)取决于病毒和细胞类型
实施例13.用反义寡核苷酸测试SARS-CoV2。实施例1中描述的反义分子以及OT-101(针对TGF-β2的反义寡核苷酸)。
将OT-101(Trabedersen)和十种针对SARS-CoV-2的反义化合物溶解在无菌盐水中,以制备20mg/mL储备溶液,将其通过0.2μM低蛋白结合过滤器无菌过滤。在测试培养基(补充有2% FBS和50μg/mL庆大霉素的MEM)中使用八次半对数稀释连续稀释化合物,以使起始(高)测试浓度为1000μg/mL。将每种稀释液添加到96孔板的5孔中,其中含有80-100%汇合的Vero 76细胞。
使每种稀释液的三个孔感染病毒,两个孔保持未感染作为毒性对照。使六个孔感染且不经处理作为病毒对照,并使六个孔不感染且不经处理作为细胞对照。制备SARS-CoV-2病毒悬浮液以实现可能的在5天内产生>80%的细胞病变效应(CPE)的最低感染复数(MOI)。平行测试M128533作为阳性对照。
感染后第5天,一旦未经处理的病毒对照孔达到最大CPE,用中性红染料对板染色约2小时(15分钟)。去除上清液染料并用PBS冲洗孔,将合并的染料在50:50的Sorensen柠檬酸盐缓冲液/乙醇中提取>30分钟,并在540nm下在分光光度计上读取光密度。将光密度转换为细胞对照的百分比并相对于病毒对照进行归一化,然后通过回归分析计算抑制CPE达到50%所需的测试化合物浓度(EC50)。类似地计算了在不存在病毒的情况下导致50%细胞死亡的化合物的浓度(CC50)。选择性指数(SI)是CC50除以EC50。
每种化合物对SARS-CoV-2的抗病毒活性在下面示出。对TRS1(53-72)、FS(13,458-13,472)和5TERM(1-20)MOE观察到细胞毒性。观察到以下化合物具有高抗病毒活性:OT-101、5TERM(1-20)、TRS1(53-72)、FS(13,458-13,472)、5TERM(1-20)MOE、TRS2-2 53-72、FS-2a(13539-13558)。阳性对照化合物的表现符合预期。
表-14
RSV-阴性对照反义寡核苷酸/M128533-阳性对照。EC50:50%有效抗病毒浓度(μg/ml)/CC50:在未添加病毒的情况下化合物的50%细胞毒性浓度(μg/ml)/SI=CC50/EC50。SARS-COV-2来源:UTMB新兴病毒和虫媒病毒世界参考中心(WRCEVA)。测试化合物和M128533的单位为μg/mL。
实施例14.OT-101的TGF-β抑制活性。
在人HGG、人胰腺癌、恶性黑色素瘤、结直肠癌和其他肿瘤(前列腺癌、肾细胞癌和非小细胞肺癌)的细胞系中,分析了trabedersen对TGF-β2分泌的影响。对用trabedersen处理7天后细胞培养上清液中TGF-β2的浓度进行了分析。在所有测试浓度下,与未经处理的对照组相比,Trabedersen降低了人HGG细胞系A-172中TGF-β2的分泌;对10μM trabedersen(也称为OT-101)观察到最高的64%的抑制作用。Trabedersen在其他细胞系中也显示出非常强的活性,并且与未经处理的对照相比,浓度依赖性地减少了TGF-β2的分泌。对于人HGG、胰腺癌、恶性黑色素瘤和结直肠癌细胞,测定了体外(无载体)实现TGF-β2分泌半最大抑制所需的trabedersen浓度(半最大抑制浓度[IC50]),其在2至5μM的范围内。此外,在人恶性黑色素瘤细胞(即MER 116和RPMI 7951(OT-101))以及来源于其他肿瘤类型(如非小细胞肺癌、前列腺癌、肾透明细胞癌)的人类细胞系中也证明了TGF-β2的下调。
体外实验的结果清楚地证明了,trabedersen具有抑制TGF-β2分泌的高效力。
逆转TGF-β诱导的免疫抑制
TGF-β2抑制淋巴细胞增殖并抑制淋巴细胞介导的针对肿瘤细胞的细胞毒性。trabedersen对TGF-β2的靶向抑制应重新建立免疫细胞对人类肿瘤的细胞毒性活性。
从5名患者的手术标本中获得人HGG细胞。用人重组IL-2激活这些患者的PBMC,以产生淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞作为效应细胞,已知LAK细胞裂解大多数自体和同种异体新鲜人肿瘤细胞。在细胞共培养系统中使用钙黄绿素释放测定测试LAK细胞介导的对患者来源的自体HGG细胞(靶细胞)的细胞毒性。Trabedersen明显增强了对人HGG细胞的自体细胞毒性,平均为40%(未经处理的对照组为16%)。与未经处理的对照相比,抗肿瘤活性的增加范围为41%-520%。
使用人胰腺癌细胞系作为靶细胞以及来自健康供体的PBMC作为效应细胞,在同种异体细胞细胞毒性测试系统中评价trabedersen的作用。在细胞介导的细胞毒性测定中,在与靶细胞共温育之前,将效应细胞在trabedersen处理的肿瘤细胞的细胞上清液中进行温育。在不同比例的人免疫效应细胞和胰腺癌靶细胞下,与未经处理的对照组和Lipofectin对照组相比,用经trabedersen/Lipofectin处理的肿瘤细胞(PA-TU-8902)上清液培养的人免疫细胞显示出增加的抗肿瘤活性。这些结果用来自不同健康供体的PBMC以及另一种人类胰腺癌细胞系(Hup-T3)得到了证实。
Trabedersen经由抑制TGF-β2的分泌来逆转人类肿瘤细胞对免疫细胞的抑制。这些结果表明,在用trabedersen处理后,人类免疫细胞的抗肿瘤活性明显增强,并强调了这种方法的潜在治疗益处。
TGF-β表达异种移植模型的疗效
在功能性体内测试系统中的研究证明:(i)OT-101本身具有轻微的抗肿瘤活性。然而,它能够协同并增加紫杉醇和达卡巴嗪的活性。OT-101不能与吉西他滨协同作用。在相当于80mg/m2/天的人体剂量下实现了显著的抗肿瘤活性,这远低于对患者静脉输注所用的140mg/m2/天的最佳临床剂量。
在雌性BALB/c nu/nu小鼠C8161的原位C8161人黑色素瘤模型中评价OT-101诱导的抗肿瘤活性。将60只雌性无胸腺裸小鼠皮内接种0.5x106C8161人黑色素瘤细胞,并随机分为6组,每组10只小鼠。三组接受OT-101(16mg/kg)(第2组)或DTIC(1或10mg/kg;第3、4组)的单药疗法治疗。两组接受OT-101/DTIC联合疗法,剂量为16/1mg/kg或16/10mg/kg(第5组和第6组)。溶媒(0.9%盐水,第1、3和4组)和OT-101经由皮下注射(SC)每周施用3次。从第14天开始,溶媒(0.9%盐水,第1组和第2组)和DTIC(1或10mg/kg)经由腹膜内注射(ip)每周施用四次。每周三次对小鼠监测不良反应、体重和肿瘤大小。终止时从所有小鼠中切除肿瘤、肺、肝和肾,并称重。与对照组1相比,第2、3、4、5和6组的肿瘤生长在第42天分别被抑制了2%、-2%、78%、27%和92%。使用Kruskal-Wallis检验对所有6组进行比较,肿瘤体积生长存在显著性差异(P<0.0001)。对重复测量相比于对照组1进行ANOVA统计,第2、3、4、5和6组的P值分别为无显著性(ns)、ns、<0.0001、ns和<0.0001。当OT-101与低剂量DTIC(第5组vs.第3组)或高剂量DTIC(第6组vs.第4组)联合时,DTIC对肿瘤生长的抑制作用增强,分别提高了29%和14%。联合组6的抗肿瘤活性显著优于高剂量DTIC组4(P=0.038)。
紫杉醇和Trabedersen(OT-101)对裸小鼠中人胶质母细胞瘤U87 MG异种移植模型的体内评价。在裸小鼠中建立皮下U87 MG异种移植模型,以测试紫杉醇(Taxol)和Trabedersen(OT-101)的单药疗法以及紫杉醇和Trabedersen以两种给药安排的联合疗法对人胶质母细胞瘤的疗效。测试药剂的最佳剂量是根据先前在给定安排下进行的剂量探索研究及其临床剂量确定的,以更好地预测临床结果。总的来说,紫杉醇与Trabedersen的联合在U87胶质母细胞瘤异种移植模型中表现出耐受性,并显示出增强的抗肿瘤疗效。紫杉醇与Trabedersen的联合显示出采用Trabedersen随后是紫杉醇的安排具有显著的体内协同关系,从而增强了抗肿瘤活性并提高了小鼠的存活率。
在裸小鼠SK-OV-3异种移植模型中紫杉醇和Trabedersen(OT-101)对人卵巢腺癌的体内评价。在裸小鼠中建立皮下SK-OV-3卵巢癌异种移植模型,以测试紫杉醇(Taxol)和Trabedersen(OT-101)的单药疗法以及紫杉醇和Trabedersen以两种给药安排的联合疗法对人卵巢癌的疗效。测试药剂的最佳剂量是根据先前在给定安排下进行的剂量探索研究及其临床剂量确定的,以更好地预测临床结果。总体而言,在SK-OV-3卵巢癌异种移植模型中,10mg/kg紫杉醇与32mg/kg Trabedersen的联合表现出耐受性,并显示出增强的抗肿瘤疗效。紫杉醇与Trabedersen的联合显示出采用Trabedersen随后是紫杉醇(D7施用)的安排具有显著的体内协同关系,从而增强了抗肿瘤活性并提高了小鼠的存活率。
3'-截短(n-1)-(n-4)Trabedersen的生物活性
在人HGG细胞系A-172中测试了截短的trabedersen(即代谢物)与全长trabedersen相比在抑制TGF-β2分泌方面的生物活性。取决于浓度,3’-截短的(n-1)和(n-2)trabedersen在5或10μM时的生物活性与全长trabedersen在相同范围内,而更短的片段(3’-截短的(n-3)和(n-4))的生物活性更低。
对人外周血单核细胞的活力和增殖的影响
使用台盼蓝排斥试验,在体外用trabedersen处理人PBMC后评估细胞活力。将新鲜分离的、来自健康供体和HGG患者的IL-2激活的PBMC在不含trabedersen或含1、5、10或80μMtrabedersen的情况下温育2、3、6、7、14和21天。直到21天,未观察到对来自健康供体或HGG患者的PBMC的活力的相关影响。在未经处理的细胞和经trabedersen处理的细胞之间细胞活力没有差异。分别用5μM、10μM或50μM trabedersen处理的PBMC的增殖在偏差范围内。用80μM trabedersen处理7天后,PBMC增殖略有减少(未经处理的对照细胞的67%)。
虽然trabedersen抑制肿瘤细胞增殖,但在临床应用浓度下,PBMC的活力和增殖没有受到显著的负面影响。
实施例14.OT-101对表达TGF-β的实体瘤的临床疗效。
目前,临床开发计划包括1项在实体瘤患者中静脉注射施用trabedersen的I/II期研究和3项I/II期研究、1项随机和活性药对照的IIb期研究,以及1项在复发或难治性高级别胶质瘤患者中局部施用(瘤内)trabedersen的III期研究。
在实体瘤患者中的静脉内施用
进行了I/II期研究P001,以研究在实体瘤(即晚期胰腺癌、恶性黑色素瘤或结直肠癌)患者中静脉内注射施用trabedersen的情况。
研究描述
P001是一项完整的I/II期剂量递增研究。如下所述,主要目标是确定作为核心治疗的2个周期以及每隔一周静脉内施用trabedersen 4或7天的最多8个任选的扩展周期的MTD以及DLT。该研究遵循经典队列设计,每个队列有3名可评价患者。对于每个治疗周期,用第1种安排治疗的患者连续接受trabedersen治疗7天,随后是7天的无治疗间隔(7天用药,7天停药)。在达到该安排的MTD后,开始第二种安排,即对于每个治疗周期,施用trabedersen4天,随后是10天的无治疗间隔(4天用药,10天停药)。在该治疗安排中,尚未达到MTD。
目标和治疗
本研究的主要目标是确定每隔一周施用trabedersen的两个周期的最大耐受剂量(MTD)以及剂量限制性毒性(DLT)。次要目标包括静脉内trabedersen治疗的安全性和耐受性、药代动力学曲线和潜在的抗肿瘤活性。
经由与便携式泵连接的植入式皮下端口系统以及采用0.8mL/h的流速,以每隔一周静脉内连续输注4或7天的方式施用Trabedersen。该核心治疗由2个治疗周期组成。在临床获益的情况下,施用最多8个任选的扩展周期。
主要入选和排除标准
研究人群包括成年患者(18-75岁),经组织学或细胞学证实确诊以下之一:
·胰腺癌III期或IV期(美国癌症联合委员会(American Joint Committee onCancer),AJCC 2002;相当于AJCC 1997IVA或IVB期),
·恶性黑色素瘤III或IV期(AJCC 2002),或
·结直肠癌III或IV期(AJCC 2002)。
其他重要的入选标准是Karnofsky功能状态≥80%,足够的器官功能和从任何先前疗法引起的急性毒性中恢复。患者不接受或不再接受既定形式的疗法。
主要排除标准包括12周内的脑转移史和放射疗法史、4周内的肿瘤手术史或研究进入前2周内具有已确定的抗肿瘤作用的任何其他疗法史。
剂量递增
剂量递增遵循经典队列设计,每个队列至少3名且最多6名患者接受Trabedersen。基于在作为最相关物种的猴子中确定的最低观察不良反应水平(Lowest-Observed-Adverse-Effect Level,LOAEL)选择起始剂量。发现成人的LOAEL相当于48mg/m2/天,并因此,起始剂量设定为40mg/m2/天(相当于约1mg/kg体重/天)。数据和安全监测委员会(Dataand Safety Monitoring Board,DSMB)在每个递增步骤之前定期审查可得的安全性和疗效数据。一般来说,如果一个队列的患者耐受了该疗法,那么下一个队列接受下一个更高剂量。根据美国国立癌症研究所-通用毒性标准(National Cancer Institute-CommonToxicity Criteria,NCI-CTC,第2版)评估毒性。DLT被定义为NCI-CTC 3级或4级的至少可能相关的、医学上重要的不良事件,肾或肝毒性相对于基线恶化了≥2级,其他实验室参数相对于基线恶化了≥3级,或研究者认为剂量限制性的其他毒性。如果一个队列中超过2名患者患有DLT,则下一个较低剂量被定义为MTD。如果达到MTD,则必须停止剂量递增。
测试了两种不同的Trabedersen治疗安排(7天用药、7天停药和4天用药、10天停药)。剂量递增完成后,纳入另一队列患者以按照一个确定的治疗安排和剂量进行治疗,以收集更多患者的进一步安全性和疗效数据。
疗效评估
根据RECIST标准1.0版,通过CT扫描评价来确定肿瘤的大小和反应。与基线相比,肿瘤大小的每一个变化都分为CR(完全反应)、PR(部分反应)、SD(疾病稳定)和PD(疾病进展)。
对所有患者计算总生存时间,即从研究药物治疗开始到因任何原因死亡的生存时间,并使用Kaplan-Meier方法进行分析。
研究历程和疗效结果
研究历程
共有33名晚期胰腺癌、恶性黑色素瘤或结直肠癌患者被纳入剂量递增研究(表15)。对于每个治疗周期,以第一个治疗安排治疗的患者连续7天接受Trabedersen,随后是7天的无治疗间隔(7天用药,7天停药)。剂量从40依次增加到80、160和240mg/m2/天。剂量为240mg/m2/天时出现三例剂量限制性毒性(2例血小板减少症,1例疹病),并在7天用药、7天停药的安排中将MTD确定为160mg/m2/天。
在7天用药、7天停药的安排中达到MTD后,使用改良的治疗安排,即对于每个治疗周期施用Trabedersen 4天然后是10天的无治疗间隔(4天用药、10天停药),开始第二次剂量递增。剂量从140mg/m2/天依次增加到190、250和330mg/m2/天。由于该改良后的治疗安排被证明耐受性良好,且在最低剂量组中已发现早期疗效迹象,因此在第4队列未达到MTD之后且在下一剂量水平(440mg/m2/天)的累积剂量将超过7天用药、7天停药安排中确定的MTD累积剂量之前,停止剂量递增。
随后,按照DSMB的建议,又招募了14名晚期胰腺癌患者和14名恶性黑色素瘤患者的队列,并在4天用药、10天停药安排内用剂量为140mg/m2/天的Trabedersen进行治疗。
共有61名患者用Trabedersen进行治疗。其中,50名患者完成了核心研究,即接受了2个周期的Trabedersen,共42名患者参与了扩展周期。治疗安排和患者处置的总结在表15中给出。
表15:治疗安排和患者处置-总人群
CRC=结直肠癌,MM=恶性黑色素瘤,NCI-CTC=国立癌症研究所-通用毒性标准,PC=胰腺癌
1.1.1.1.1基线患者特征)。
表16显示了安全性人群(即用Trabedersen进行治疗的所有患者)的患者人口统计学和基线特征。
表16:人口统计学和基线特征-安全性人群
N=各组患者数量;n=具有相应特征的患者数量;KPS=Karnofsky功能状态;百分比是指“N”。n.a.=不可得
晚期胰腺癌患者的生存时间和抗肿瘤活性
剂量递增治疗安排中的总生存时间
共有21名胰腺癌患者在剂量递增期间接受治疗。在剂量递增期间,在7天用药、7天停药的安排内治疗的患者的中位总生存时间(mOS)与用4天用药、10天停药安排治疗的病人的mOS相当(5.7个月vs.9.3个月,p=0.0645)。
每治疗队列的总生存时间
表17显示了所有35名接受治疗的胰腺癌患者的每队列mOS。无论是在7天用药、7天停药安排还是在4天用药、10天停药安排中,都没有明确的剂量-反应关系。当5名恶性黑色素瘤患者和5名在剂量递增期间接受治疗的结直肠癌患者也被包括在内时,可以看到类似的模式。
表17:每剂量队列的中位总生存时间
CI=置信区间CRC=结直肠癌,MM=恶性黑色素瘤,ND=未确定,PC=胰腺癌。
在4天用药、10天停药安排中的另外14名用140mg/m2/天剂量进行治疗的胰腺癌患者的mOS低于在研究的剂量递增部分中4名接受相同剂量的患者。然而,如从首次诊断起的中位时间长(15.1个月)所示,这些患者的预后较差,目前诊断为AJCC IV期胰腺癌的患者比例高(86%),接受Trabedersen作为三线或四线治疗的患者比例高(64%)。
每位患者的总生存时间
结合在剂量递增期间和最后一个队列中治疗的所有35名胰腺癌患者的生存数据,独立于Trabedersen剂量和治疗安排,得出mOS为4.9个月[95% CI:3.0,6.9个月]。一般来说,接受Trabedersen作为二线治疗的患者比接受Trabedersen作为三至四线治疗的患者具有更长的生存时间:存活时间>5.0个月的17名患者中有11名(64.7%)接受Trabedersen作为二线治疗,而存活时间≤5.0个月的18名患者中只有4名(22.2%)接受Trabedersen作为二线治疗。年龄、KPS或疾病持续时间等基线特征对生存时间没有明显影响。
用Trabedersen二线治疗的患者的总生存时间
与几名用Trabedersen二线治疗的患者显示出有利的生存时间这一发现一致,在研究期间,所有用Trabedersen作为二线疗法进行治疗的患者的mOS为8.9个月(95% CI:2.9,13.4),与剂量和安排无关。将生存分析限制在4天用药、10天停药安排中、以140mg/m2/天剂量作为二线治疗进行治疗的患者时,得到mOS为14.5个月(95% CI:2.2,18.9)。对4天用药、10天停药安排中以140mg/m2/天剂量作为二线治疗且在Trabedersen治疗结束后接受后续化疗的患者进行进一步的亚组分析,得到mOS为16.9个月(95% CI:5.5,39.7),相比之下,在Trabedersen治疗结束之后未接受后续化疗患者的mOS为2.6个月(95% CI:2.2,2.9)。对用5B1(一种抗CA19 mAb)治疗的相似患者人群进行的类似分析并未显示出对Trabedersen观察到的已观察到的后续化疗效果。
用Trabedersen治疗后的细胞因子谱
在按照4天用药、10天停药治疗安排以140mg/m2/天的剂量治疗的12名胰腺癌患者中,评价了Trabedersen治疗对细胞因子/趋化因子水平的影响的分析。在3个Trabedersen周期中在8个单独的时间点(基线;周期1第2天和第5天;周期2第1天、第2天和第5天;最后一次访视;周期3第5天),从临床血浆样品中评价了31种细胞因子/趋化因子。使用log10转换值将每名患者的细胞因子/趋化因子水平标准化,所述log10转换值是使用患者体内每个细胞因子/趋化因子的平均值和标准差计算的。为了研究Trabedersen对细胞因子/趋化因子水平的影响及其与OS的相关性,开发了ANCOVA模型。
构建ANCOVA模型以使得在每个周期和时间点,2个变量(细胞因子/趋化因子、总生存时间作为协变量)和相互作用项(细胞因子/趋化因子x总生存时间,以描绘细胞因子/趋化因子和总生存时间中的每一个的因变量反应)描述了细胞因子/趋化因子和OS的变化。在12名患者中,进一步检查了模型表现出显著效果的时间点,以确定细胞因子/趋化因子反应与OS的关联性。为了测试模型的假设是否得到满足,对正态分位数图检查模型残差分布。根据相互作用项参数和每个细胞因子/趋化因子的模型误差测定来评估细胞因子/趋化因子和OS之间关系的显著性(如果考虑相互作用项中的所有关系,错误发现率小于10%,则P值<0.05被认为是显著的)。
开发的ANCOVA模型解释了很大比例的第1周期第2天细胞因子/趋化因子测量结果的观察数据(R2=0.3,F59,217=1.575,P<0.0103)。其他时间点在相互作用项(基线,R2=0.271,P=0.0542(相互作用项无显著性关系);第1周期第5天R2=0.26,P=0.0984;第2周期第1天R2=0.2,P=0.892;第2周期第2天R2=0.26,P=0.368;第2周期第5天R2=0.400,P=0.0256(相互作用项无显著关系);最后一次访视R2=0.170,P=0.996;第3周期第5天R2=0.229,P=0.463)方面未表现出显著性模型拟合和显著性关系。
晚期黑色素瘤和结直肠癌患者的生存时间和抗肿瘤活性
将每一名都患有晚期恶性黑色素瘤和结直肠癌的5名患者纳入研究的剂量递增部分。
在7天用药、7天停药安排的240mg/m2/天队列中治疗的一名AJCC IV期结直肠癌患者被评估为病情稳定,生存7.3个月。所有患者的mOS为3.0个月(95% CI:2.1,7.3),与剂量和安排无关。
在4天用药、10天停药安排的330mg/m2/天队列中治疗的一名转移性且达卡巴嗪(DTIC)耐药性黑色素瘤患者在研究治疗开始后病情稳定并生存25.7个月。另外3名IV期黑色素瘤患者生存11.4、13.8和18.6个月(所有患者的MOS:13.8个月)。所有这些患者以前都曾用DTIC和PEG-Intron治疗过,即接受Trabedersen作为三线或四线治疗。
对在4天用药、10天停药安排中用140mg/m2/天治疗的另外14名恶性黑色素瘤患者进行的评价显示,mOS为10.4个月(95% CI:5.4,13.5)。接受7天用药、7天停药安排和4天用药、10天停药安排的患者之间的生存时间没有显著性差异(7.8个月vs 11.4个月,p=0.501)。在数据库锁定和最终分析时,4名患者仍存活,总生存时间分别为25.7、13.8、12.2和10.3个月。在分析期间对这4名患者的总生存时间进行了审查,得出所有患者的mOS为11.4个月(95% CI:6.5,13.8),与剂量和安排无关。将生存分析仅限于接受4天用药、10天停药安排的患者,结果显示,接受后续疗法(化学疗法或免疫疗法)治疗的患者与未接受后续疗法的患者相比,mOS得到改善(13.5个月vs 6.0个月)。仅接受免疫疗法或化学疗法(4名患者vs 3名患者)或这两者的联合(4名患者)的治疗具有均匀的分布。对最后一个队列(4天用药、10天停药,140mg/m2/天治疗的)中的患者的进一步限制性分析揭示,当在trabedersen后接受后续疗法时,mOS显著改善(13.5个月vs 6.0个月,p=0.0015)。
两名黑色素瘤患者在4天用药、10天停药安排中用140mg/m2/天进行2线治疗,显示出mOS为9.5个月(95% CI:5.4,13.5)。
实施例15-Oncotelic化合物与突发急性呼吸综合征相关冠状病毒程序的抗病毒活性
OT-101(Trabedersen)和十种反义化合物以冻干形式从主办者处收到。将化合物溶解在无菌盐水中,制备20mg/mL储备溶液,使其通过0.2μM低蛋白结合过滤器进行无菌过滤。在测试培养基(补充有2% FBS和50mg/mL庆大霉素的MEM)中使用八次半对数稀释连续稀释化合物,以使起始(高)测试浓度为1000mg/mL。将每种稀释液添加到具有80-100%汇合的Vero 76细胞的96孔板的5孔中。使每种稀释液的三个孔感染病毒,两个孔保持未感染作为毒性对照。使六个孔感染且未经处理作为病毒对照,六个孔未感染且未经处理作为细胞对照。制备SARS-CoV和SARS-CoV-2病毒悬浮液,以实现可能的在5天内产生>80%的细胞病变效应(CPE)的最低感染复数(MOI)。平行测试M128533作为阳性对照。将板在37±2℃、5%CO2下进行温育。
在感染后第5天,一旦未经处理的病毒对照孔达到最大CPE,用中性红染料对板染色约2小时(±15分钟)。去除上清液染料并用PBS冲洗孔,将结合的染料在50:50的Sorensen柠檬酸盐缓冲液/乙醇中提取>30分钟,并在540nm下在分光光度计上读取光密度。将光密度转换为细胞对照的百分比并相对于病毒对照进行归一化,然后通过回归分析计算抑制CPE达到50%所需的测试化合物浓度(EC50)。类似地计算了在不存在病毒的情况下导致50%细胞死亡的化合物浓度(CC50)。选择性指数(SI)是CC50除以EC50。
结果
每种化合物对SARS-CoV的抗病毒活性在表1中示出。对TRS2(56-76)和5TERM(1-20)MOE观察到细胞毒性,OT-101表现出中等抗病毒活性。阳性对照化合物表现如预期。
每种化合物对SARS-CoV-2的抗病毒活性在表2中示出。对TRS1(53-72)、FS(13,458-13,472)和5TERM(1-20)MOE观察到细胞毒性。观察到以下化合物具有高抗病毒活性:OT-101、5TERM(1-20)、TRS1(53-72)、FS(13,458-13,472)、5TERT(1-20)MOE、TRS2-2 53-72、FS-2a(13539-13558)和青蒿素。阳性对照化合物表现如预期。
表18.Onctotelic化合物对SARS-CoV的体外抗病毒活性。
测试化合物和M128533的单位为mg/mL EC50:50%有效抗病毒浓度
CC50:在未添加病毒的情况下化合物的50%细胞毒性浓度SI=CC50/EC50
表19.Onctotelic化合物对SARS-CoV-2的体外抗病毒活性。
测试化合物和M128533的单位为mg/mL
EC50:50%有效抗病毒浓度
CC50:在未添加病毒的情况下化合物的50%细胞毒性浓度
SI=CC50/EC50
实施例16-OT-101治疗抑制IL-6
·使用Eurofins开发的ImmunoSignal细胞因子风暴测定法测量在晚期实体瘤患者中进行的OT-101P001研究中胰腺癌患者的临床血浆样品的细胞因子水平。
·进一步检查了9名IL-6升高的患者。这些患者中超过50%(9名患者中有6名)在第一个OT-101给药周期后表现出显著降低的IL-6水平。值得注意的是1041和1051号患者在第1个周期停止治疗后出现反弹,在随后的第2个周期再次下降。所有患者在疾病进展中均表现出IL-6升高。
根据前述描述,除了本文所述的修改之外,本发明的各种修改对于本领域技术人员而言是显而易见的。这样的修改也旨在落入所附权利要求的范围内。本申请中引用的每一篇参考文献,包括所有专利、专利申请和出版物,通过引用方式以其整体并入本文。
参考文献
1.Schuftan C.A story to be shared:the successful fight againstmalaria in Vietnam.WHO WPRO and the global Roll Back Malaria Programme,2000https://www.panna.org/sites/default/files/vietnam Malara Study 20 071106.
2.Li Q,Weina PJ.Severe embryotoxicity of artemisinin derivatives inexperimental animals,but possibly safe in pregnant women.Molecules.2009;15(1):40-57.
3.Kovacs SD,Rijken MJ,Stergachis A.Treating severe malaria inpregnancy:a review of the evidence.Drug Saf.2015;38(2):165-181.
4.Nosten F,McGready R,d'Alessandro U,et al.Antimalarial drugs inpregnancy:a review Curr Drug Saf.2006;1(1):1-15.
5.Clark RL.Embryotoxicity of the artemisinin antimalarials andpotential consequences for use in women in the first trimester.ReprodToxicol.2009;28(3):285-296.
6.Guidelines for the Treatment of Malaria.2nd ed.Geneva:World HealthOrganization;2010.
7.Visser BJ,van Vugt M,Grobusch MP.Malaria:an update on currentchemotherapy.Expert Opin Pharmacother.2014;15(15):2219-2254.
8.McGready R,Lee SJ,Wiladphaingern J,et al.Adverse effects offalciparum and vivax malaria and the safety of antimalarial treatment inearly pregnancy:a population-based study.Lancet Infect Dis.2012;12(5):388-396.
9.Savage RL,Hill GR,Barnes J,Kenyon SH,Tatley MV.SuspectedHepatotoxicity With a Supercritical Carbon Dioxide Extract of Artemisia annuain Grapeseed Oil Used in New Zealand.Front Pharmacol.2019;10:1448.
10.Barnes J.Pharmacovigilance of herbal medicines:a UKperspective.Drug Saf.2003;26(12):829-851.
11.Uppsala Monitoring Centre.VigiBase:Uppsala Monitoring Centre.2019.从https://www.who-umc.org/vigibase/vigibase/可获得.
12.Uppsala Monitoring Centre.VigiAccess:Uppsala MonitoringCentre.2019.从http://www.vigiaccess.org/可获得.
13.Centers for Disease Control and Prevention(CDC).Hepatitistemporally associated with an herbal supplement containing artemisinin-Washington,2008.MMWR Morb Mortal Wkly Rep.2009;58(31):854-856.
14.Kumar S.Cholestatic liver injury secondary toartemisinin.Hepatology.2015;62(3):973-974.
15.US Food and Drug Administration.“Pharmacy Compounding AdvisoryCommittee,”in Compounders under section 503A of the FD&C act:quality,standards and FDA findings.,2017;31–43.
16.Stebbings S,Beattie E,McNamara D,Hunt S.A pilot randomized,placebo-controlled clinical trial to investigate the efficacy and safety ofan extract of Artemisia annua administered over 12 weeks,for managing pain,stiffness,and functional limitation associated with osteoarthritis of the hipand knee.Clin Rheumatol.2016;35(7):1829-1836.
17.Hunt S,Stebbings S,McNamara D.An open-label six-month extensionstudy to investigate the safety and efficacy of an extract of Artemisia annuafor managing pain,stiffness and functional limitation associated withosteoarthritis of the hip and knee.N Z Med J.2016;129(1444):97-102.
18.Heinrich M.,Barnes J.,Gibbons S.,Prieto J.,Williamson E.Methods innatural product analytical chemistry.In Fundamentals of Pharmacognosy andPhytotherapy,3rd edition.Edinburgh:Elsevier.2018;106.
19.Zhang X,Zhao Y,Guo L,Qiu Z,Huang L,Qu X.Differences in chemicalconstituents of Artemisia annua L from different geographical regions inChina.PLoS One.2017;12(9):e0183047.
20.DerMarderosian A.,Beutler J.A.,(eds).The Review of NaturalProducts.8th ed.St.Louis,Missouri:Clinical Drug Information,LLC.2014.
21.Iqbal S,Younas U,Chan KW,Zia-Ul-Haq M,Ismail M.Chemicalcomposition of Artemisia annua L.leaves and antioxidant potential of extractsas a function of extraction solvents.Molecules.2012;17(5):6020-6032.
23.GO Healthy.GO Arthri Remedy 1-A-Day.2019.从https://www.healthporter.co.nz/go-healthy-go-arthri-remedy-1-a-day-60-capsules可获得.
24.Sehailia M,Chemat S.In-silico Studies of Antimalarial-agentArtemisinin and Derivatives Portray More Potent Binding to Lys353 and Lys31-Binding Hotspots of SARS-CoV-2Spike Protein than Hydroxychloroquine:PotentialRepurposing of Artenimol for COVID-19.ChemRxiv.2020.Preprint.
25.Alazmi M,Motwalli O.Molecular basis for drug repurposing to studythe interface of the S protein in SARS-CoV-2and human ACE2 through docking,characterization,and molecular dynamics for natural drug candidates.J MolModel.2020;26:338.
26.Cao Y,Feng YH,Gao LW,et al.Artemisinin enhances the anti-tumorimmune response in 4T1 breast cancer cells in vitro and in vivo.IntImmunopharmacol.2019;70:110-116.
27.Wang M,Cao R,Zhang L,et al.Remdesivir and chloroquine effectivelyinhibit the recently emerged novel coronavirus(2019-nCoV)in vitro.CellRes.2020;30(3):269-271.
28.Cao R,Hu H,Li Y,et al.Anti-SARS-CoV-2Potential of Artemisinins InVitro.ACS Infect Dis.2020;6(9):2524-2531.
29.Gilmore K,Zhou Y,Ramirez S,et al.In vitro efficacy of Artemisinin-based treatments against SARS-CoV-2.bioRxiv.2020.10.05.326637.
30.Li G,Yuan M,Li H,et al.Safety and efficacy of artemisinin-piperaquine for treatment of COVID-19:an open-label,non-randomised andcontrolled trial.Int J Antimicrob Agents.2020;106216.
31.MGC Pharmaceutical Ltd.ArtemiCTMPhase II Clinical Trial Results onCOVID-19 patients confirm 100%of treatment group successfully met primaryand secondary endpoints.Press Release.14-Dec-2020.
32.Liu,J.et al.Hydroxychloroquine,a less toxic derivative ofchloroquine,is effective in inhibiting SARS-CoV-2 infection invitro.Cell.Discov.6,16(2020).
33.Yao,X.et al.In Vitro antiviral activity and projection ofoptimized dosing design of hydroxychloroquine for the treatment of severeacute respiratory syndrome coronavirus 2(SARSCoV-2).Clin.Infect.Dis.,(2020)doi:10.1093/cid/ciaa237.
34.Al-Kofahi M.et al.Finding the dose for hydroxychloroquineprophylaxis for COVID-19;the desperate search for effectiveness.ClinicalPharmacology&Therapeutics.(2020)(In press).https://doi.org/10.1002/cpt.1874.
35.CHEN J.et al.A pilot study of hydroxychloroquine in treatment ofpatients with common coronavirus disease-19(COVID-19).J Zhejiang Univ(MedSci)49,0-(2020).
36.Gautret,P.et al.Hydroxychloroquine and azithromycin as a treatmentof COVID-19:results of an open-label non-randomized clinical trial.Int.J.Antimicrob.Agents.105949(2020)doi:10.1016/j.ijantimicag.2020.105949.
37.Wang M.et al.Remdesivir and chloroquine effectively inhibit therecently emerged novel coronavirus(2019-nCoV)in vitro.Cell Res 2020;30:269–71.
38.Wang Y.et al.Remdesivir in adults with severe COVID-19:arandomised,double-blind,placebo-controlled,multicentre trial.Lancet(2020)https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)31022-9
39.Zhou F et al.Lancet 2020;395:1054–62 9.Hamacher J,Lucas R,LijnenHR,Buschke S,Dunant Y,Wendel A,et al.Tumor necrosis factoralpha andangiostatin are mediators of endothelial cytotoxicity in bronchoalveolarlavages of atients with acute respiratory distress syndrome.Am J Respir CritCare Med(2002)166:651–6.doi:10.1164/rccm.2109004
40.Wagener BM,Roux J,Carles M,Pittet JF.Synergistic inhibition ofbeta2-adrenergic receptormediated alveolar epithelial fluid transport byinterleukin-8and transforming growth factor-beta.Anesthesiology(2015)122:1084–92.doi:10.1097/ALN.0000000000000595
41.Fahy RJ,Lichtenberger F,McKeegan CB,Nuovo GJ,Marsh CB,WewersMD.The acute respiratory distress syndrome:a role for transforming growthfactor-beta 1.Am J Respir Cell Mol Biol(2003)28:499–503.doi:10.1165/rcmb.2002-0092OC.
42.Wakefield LM,Letterio JJ,Chen T,Danielpour D,Allison RS,Pai LH,etal.Transforming growth factor-beta1 circulates in normal human plasma and isunchanged in advanced metastatic breast cancer.Clin Cancer Res(1995)1:129–36.
43.Schwartze JT,Becker S,Sakkas E,Wujak LA,Niess G,Usemann J,etal.Glucocorticoids recruit Tgfbr3 and Smad1 to shift transforming growthfactor-beta signaling from the Tgfbr1/Smad2/3 axis to the Acvrl1/Smad1 axisin lung fibroblasts.J Biol Chem(2014)289:3262–75.doi:10.1074/jbc.M113.541052.
44.Matsuki K,Hathaway CK,Lawrence MG,Smithies O,Kakoki M.The role oftransforming growth factor beta1 in the regulation of blood pressure.CurrHypertens Rev(2014)10:223–38.doi:10.2174/157340211004150319123313.
45.Kaminski N,Allard JD,Pittet JF,Zuo F,Griffiths MJ,Morris D,etal.Global analysis of gene expression in pulmonary fibrosis reveals distinctprograms regulating lung inflammation and fibrosis.Proc Natl Acad Sci U S A(2000)97:1778–83.doi:10.1073/pnas.97.4.1778.
46.Annes JP,Chen Y,Munger JS,Rifkin DB.Integrin alphaVbeta6-mediatedactivation of latent TGF-beta requires the latent TGF-beta binding protein-1.J Cell Biol(2004)165:723–34.doi:10.1083/jcb.200312172.
47.Annes JP,Rifkin DB,Munger JS.The integrin alphaVbeta6 binds andactivates latent TGFbeta3.FEBS Lett(2002)511:65–8.doi:10.1016/S0014-5793(01)03280-X.
48.Munger JS,Huang X,Kawakatsu H,Griffiths MJ,Dalton SL,Wu J,etal.The integrin alpha v beta 6 binds and activates latent TGF beta 1:amechanism for regulating pulmonary inflammation and fibrosis.Cell(1999)96:319–28.doi:10.1016/S0092-8674(00)80545-0.
49.Breuss JM,Gallo J,DeLisser HM,Klimanskaya IV,Folkesson HG,PittetJF,et al.Expression of the beta 6 integrin subunit in development,neoplasiaand tissue repair suggests a role in epithelial remodeling.J Cell Sci(1995)108(Pt6):2241–51.
50.Barcellos-Hoff MH,Dix TA.Redox-mediated activation of latenttransforming growth factorbeta 1.Mol Endocrinol(1996)10:1077–83.doi:10.1210/me.10.9.1077.
51.Frank J,Roux J,Kawakatsu H,Su G,Dagenais A,Berthiaume Y,etal.Transforming growth factor-beta1 decreases expression of the epithelialsodium channel alphaENaC and alveolar epithelial vectorial sodium and fluidtransport via an ERK1/2-dependent mechanism.J Biol Chem(2003)278:43939–50.doi:10.1074/jbc.M304882200.
52.Pittet JF,Griffiths MJ,Geiser T,Kaminski N,Dalton SL,Huang X,etal.TGF-beta is a critical mediator of acute lung injury.J Clin Invest(2001)107:1537–44.doi:10.1172/JCI11963.
53.Peters DM,Vadasz I,Wujak L,Wygrecka M,Olschewski A,Becker C,etal.TGF-beta directs trafficking of the epithelial sodium channel ENaC whichhas implications for ion and fluid transport in acute lung injury.Proc NatlAcad Sci U S A(2014)111:E374–83.doi:10.1073/pnas.1306798111.
54.Frank JA,Matthay MA.TGF-beta and lung fluid balance in ARDS.ProcNatl Acad Sci U S A(2014)111:885–6.doi:10.1073/pnas.1322478111.
55.Staub NC.Pulmonary edema:physiologic approaches tomanagement.Chest.1978;74(5):559–564.
56.Prewitt RM,McCarthy J,Wood LD.Treatment of acute low pressurepulmonary edema in dogs:relative effects of hydrostatic and oncotic pressure,nitroprusside,and positive end-expiratory pressure.J Clin Invest.1981;67(2):409–418.
57.Wiedemann HP,et al.Comparison of two fluid management strategiesin acute lung injury.N Engl J Med.2006;354(24):2564–2575.
58.Wheeler AP,et al.Pulmonary-artery versus central venous catheterto guide treatment of acute lung injury.N Engl J Med.2006;354(21):2213–2224.
59.Pittet JF,Griffiths MJ,Geiser T,Kaminski N,Dalton SL,Huang X,etal.TGF-beta is a critical mediator of acute lung injury.J Clin Invest(2001)107(12):1537–44.doi:10.1172/jci11963.
60.Hu X,Huang X.Alleviation of Inflammatory Response of PulmonaryFibrosis in Acute Respiratory Distress Syndrome by Puerarin via TransformingGrowth Factor(TGF-b1).Med Sci Monit,2019;25:6523-6531.
61.Mizutani T,Fukushi S,Iizuka D,Inanami O,Kuwabara M,Takashima H,Yanagawa H,Saijo M,Kurane I,Morikawa S.Inhibition of cell proliferation bySARS-CoV infection in Vero E6 cells.FEMS Immunol Med Microbiol.2006;46(2):236-243.
62.Surjit M,Liu B,Chow VT,Lal SK.The nucleocapsid protein of severeacute respiratory syndrome-coronavirus inhibits the activity of cyclin-cyclin-dependent kinase complex and blocks S phase progression in mammaliancells.J.Biol.Chem.2006;281(16):10669-10681.
63.Dove B,Brooks G,Bicknell K,Wurm T,Hiscox JA.Cell cycleperturbations induced by infection with the coronavirus infectious bronchitisvirus and their effect on virus replication.J.of Virology.2006;80(8):4147-4156.
64.Huang KJ,Su IJ,Theron M,Wu YC,Lai SK,Liu CC,Lei HY.An interferon-gamma related cytokine storm in SARS patients.J.Med.Virol.2005;75(2):185-194.
65.He L,Ding Y,Zhang Q,Che X,He Y,Shen H,Wang H,Li Z,Zhao L,Geng J,Deng Y,Yang L,Li J,Cai J,Qiu L,Wen K,Xu X,Jiang S.Expression of elevatedlevels of pro-inflammatory cytokines in SARS-CoV infected ACE2+cells in SARSpatients:relation to the acute lung injury and pathogenesis ofSARS.J.Pathol.2006;210(3):288-297.
66.Zhao X,Nicholls JM,Chen YG.Severe acute respiratory syndrome-associated coronavirus nucleocapsid protein interacts with Smad3 andmodulates transforming growth factor-beta signalling.J.Biol.Chem.2008;283(6):3272-3280.
67.Li SW,Yang TC,Wan L,Lin YJ,Tsai FJ,Lai CC,Lin CW.Correlationbetween TGF-β1 expression and proteomic profiling induced by severe acuterespiratory syndrome coronavirus papain-like protease.Proteomics.2012;12(21):3193-3205.
68.Wang CY,Lu CY,Li SW,Lai CC,Hua CH,Huang SH,Lin YJ,Hour MJ,LinCW.SAR coronavirus papain-like protease up-regulates the collagen expressionthrough non-Samd TGF-β1 signaling.Virus Research.2017;235:58-66.
69.Li SW,Wang CY,Jou YJ,Yang TC,Huang SH,Wan L,Lin YJ,Lin CW.SARScoronavirus papain-like protease induces Egr-1-dependent up-regulation ofTGF-β1 via ROS/p38 MAPK/STAT3 pathway.Scientific Reports.2016;6:25754.
70.Pang BS,Wang Z,Zhang LM,Tong ZH,Xu LL,Huang XX,Guo WJ,Zhu M,WangC,Li XW et al(2003)Dynamic changes in blood cytokine levels as clinicalindicators in severe acute respiratory syndrome.Chin Med J 116:1283–1287.
71.Baas T,Taubenberger JK,Chong PY,Chui P,Katze MG(2006)SARS-CoVvirus-host interactions and comparative etiologies of acute respiratorydistress syndrome as determined by transcriptional and cytokine profiling offormalin-fixed paraffin-embedded tissues.J Interferon Cytokine Res 26:309–317.
72.Chen X.et al.Detectable serum SARS-CoV-2 viral load(RNAaemia)isclosely associated with drastically elevated interleukin 6(IL-6)level incritically ill COVID-19 patients.medRxiv preprint doi:https://doi.org/10.1101/2020.02.29.20029520.
73.Cao Y.et al.Artemisinin enhances the anti-tumor immune responsein4T1 breast cancer cells in vitro and in vivo.Int.Immunopharmacology 70(2019)110-116.
74.Zheng S.,J.Yang,X.Hu,M.Li,Q.Wang,R.C.A.Dancer,D.Parekh,F.Gao-Smith,D.R.
75.Sazani P,Kole R.Therapeutic potential of antisenseoligonucleotides as modulators of alternative splicing.J Clin Invest.2003;112(4):481-486.
76.Juliano R,Alam MR,Dixit V,Kang H.Mechanisms and strategies foreffective delivery of antisense and siRNA oligonucleotides.Nucleic AcidsRes.2008;36(12):4158-4171.
77.Chan J,Lim S,Wong WS.Antisense oligonucleotides:from design totherapeutic applications.Clin Exp Pharmacol Physiol.2006;33(5-6):533-540.
78.Kurreck J.Antisense technologies.Improvement through novelchemical modifications.Eur J Biochem.2003;270(8):1628-1644.
79.Crooke ST.Progress in antisense technology.Annu Rev Med.2004;55:61-95.
80.Ratmeyer L,Vinayak R,Zhong YY,Zon G,Wilson WD.Sequence specificthermodynamic and structural properties for DNA.RNAduplexes.Biochemistry.1994;33(17):5298-5304.
81.Tu GC,Cao QN,Zhou F,Israel Y.Tetranucleotide GGGA motif in primaryRNA transcripts.Novel target site for antisense design.J Biol Chem.1998;273(39):25125-25131.
82.Benimetskaya L,Berton M,Kolbanovsky A,Benimetsky S,SteinCA.Formation of a G-tetrad and higher order structures correlates withbiological activity of the RelA(NF-kappaB p65)'antisense'oligodeoxynucleotide.Nucleic Acids Res.1997;25(13):2648-2656.
83.Wang W,Chen HJ,Sun J,Benimetskaya L,Schwartz A,Cannon P,Stein CA,Rabbani LE.A comparison of guanosine-quartet inhibitory effects versuscytidine homopolymer inhibitory effects on rat neointimal formation.AntisenseNucleic Acid Drug Dev.1998;8(3):227-236.
84.Williamson JR,Raghuraman MK,Cech TR.Monovalent cation-inducedstructure of telomeric DNA:the G-quartet model.Cell.1989;59(5):871-880.
85.Schultze P,Macaya RF,Feigon J.Three-dimensional solution structureof the thrombin-binding DNA aptamer d(GGTTGGTGTGGTTGG).J Mol Biol.1994;235(5):1532-1547.
86.Chou SH,Zhu L,Reid BR.The unusual structure of the humancentromere(GGA)2 motif.Unpaired guanosine residues stacked between shearedG.A pairs.J Mol Biol.1994;244(3):259-268.
87.Griffin LC,Toole JJ,Leung LL.The discovery and characterization ofa novel nucleotide-based thrombin inhibitor.Gene.1993;137(1):25-31.
88.Wyatt JR,Vickers TA,Roberson JL,Buckheit RW Jr,Klimkait T,DeBaetsE,Davis PW,Rayner B,Imbach JL,Ecker DJ.Combinatorially selected guanosine-quartet structure is a potent inhibitor of human immunodeficiency virusenvelope-mediated cell fusion.Proc Natl Acad Sci U S A.1994;91(4):1356-1360.
89.Tam RC,Lin CJ,Lim C,Pai B,Stoisavljevic V.Inhibition ofCD28expression by oligonucleotide decoys to the regulatory element in exon 1of the CD28 gene.J Immunol.1999;163(8):4292-4299.
90.Bates PJ,Kahlon JB,Thomas SD,Trent JO,Miller DM.Antiproliferativeactivity of G-rich oligonucleotides correlates with protein binding.J BiolChem.1999;274(37):26369-26377.
91.Murchie AI,Lilley DM.Tetraplex folding of telomere sequences andthe inclusion of adenine bases.EMBO J.1994;13(4):993-1001.
92.Olivas WM,Maher LJ 3rd.Overcoming potassium-mediated triplexinhibition.Nucleic Acids Res.1995;23(11):1936-1941.
93.Stein CA,Tonkinson JL,Yakubov L.Phosphorothioateoligodeoxynucleotides—anti-sense inhibitors of gene expression?PharmacolTher.1991;52(3):365-384.
94.Crooke ST,Lebleu B,eds.Antisense Research and Applications.BocaRaton FL:CRC Press.1993.
95.Srinivasan SK,Iversen P.Review of in vivo pharmacokinetics andtoxicology of phosphorothioate oligonucleotides.J Clin Lab Anal.1995;9(2):129-137.
96.Bonham MA,Brown S,Boyd AL,Brown PH,Bruckenstein DA,Hanvey JC,Thomson SA,Pipe A,Hassman F,Bisi JE,Froehler BC,Matteucci MD,Wagner RW,NobelSA,Babiss LE.An assessment of the antisense properties of RNase H-competentand steric-blocking oligomers.Nucleic Acids Res.1995;23(7):1197-1203.
97.Yaida Y,Nowak TS Jr.Distribution of phosphodiester andphosphorothioate oligonucleotides in rat brain after intraventricular andintrahippocampal administration determined by in situ hybridization.RegulPept.1995;59(2):193-199.
98.Crooke ST,Lemonidis KM,Neilson L,Griffey R,Lesnik EA,MoniaBP.Kinetic characteristics of Escherichia coli RNase H1:cleavage of variousantisense oligonucleotide-RNA duplexes.Biochem J.1995;312(Pt 2):599-608.
99.Gura T.Antisense has growing pains.Science.1995;270(5236):575-577.
100.Krieg AM,Stein CA.Phosphorothioate oligodeoxynucleotides:antisense or anti-protein?Antisense Res Dev.1995;5(4):241.
101.Krieg AM,Yi AK,Hartmann G.Mechanisms and therapeutic applicationsof immune stimulatory cpG DNA.Pharmacol Ther.1999;84(2):113-120.
102.Lipford GB,Bauer M,Blank C,Reiter R,Wagner H,Heeg K.CpG-containing synthetic oligonucleotides promote B and cytotoxic T cellresponses to protein antigen:a new class of vaccine adjuvants.Eur JImmunol.1997;27(9):2340-2344.
103.Sun S,Zhang X,Tough DF,Sprent J.Type I interferon-mediatedstimulation of T cells by CpG DNA.J Exp Med.1998;188(12):2335-2342.
104.Bendigs S,Salzer U,Lipford GB,Wagner H,Heeg K.CpG-oligodeoxynucleotides co-stimulate primary T cells in the absence of antigen-presenting cells.Eur J Immunol.1999;29(4):1209-1218.
105.Jakob T,Walker PS,Krieg AM,von Stebut E,Udey MC,VogelJC.Bacterial DNA and CpG-containing oligodeoxynucleotides activate cutaneousdendritic cells and induce IL-12 production:implications for the augmentationof Th1 responses.Int Arch Allergy Immunol.1999;118(2-4):457-461.
106.Krieg AM,Matson S,Fisher E.Oligodeoxynucleotide modificationsdetermine the magnitude of B cell stimulation by CpG motifs.Antisense NucleicAcid Drug Dev.1996;6(2):133-139.
序列表
<110> 昂科特利克公司(Oncotelic, Inc.)
<120> TGF-β抑制、用于其的药剂及组合物
<130> PCT-2147
<140> PCT-2147
<141> 2021-03-18
<150> IP58484
<151> 2020-03-18
<160> 9
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> NON-MOE
<400> 1
gtaggtaaaa acctaatat 19
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
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<220>
<223> NON-MOE
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<211> 21
<212> DNA
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taaagttcgt ttagagaaca g 21
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<212> DNA
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<212> DNA
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cggcatgtct attttgta 18
Claims (87)
1.通过施用治疗有效量的药剂实现受试者中的TGF-β抑制,所述药剂选自青蒿素和反义寡核苷酸。
2.如权利要求1所述的TGF-β抑制,其中TGF-β是TGF-β1或TGF-β2或TGF-β3。
3.如权利要求1所述的TGF-β抑制,其中所述药剂是青蒿素。
4.如权利要求1所述的TGF-β抑制,其中所述药剂是反义寡核苷酸,优选具有SEQ ID 9的Trabedersen/OT-101。
5.如权利要求4所述的TGF-β抑制,其中所述药剂是具有SEQ ID 9的OT-101或具有SEQID 9的、其骨架相对于现有技术状态被修饰为包括但不限于OME或LNA的OT-101。
6.如权利要求4所述的TGF-β抑制,其中所述药剂是OT-101或OT-101与反义寡核苷酸序列的组合,所述反义寡核苷酸序列选自SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8。
7.如权利要求1所述的TGF-β抑制,其中所述受试者是人或动物。
8.一种药物组合物,其包含如权利要求1所述的药剂或其药学上可接受的盐形式、多晶型物或立体异构体或其混合物,任选地,还包含药学上可接受的赋形剂。
9.一种基本上纯的青蒿素,其中青蒿素的纯度大于90%。
10.一种青蒿素,其用于治疗或预防病毒性疾病或肺部疾病。
11.如权利要求10所述的青蒿素,其中所述病毒性疾病包括但不限于SARS、MERS、RSV、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒(CMV)、人类疱疹病毒6型(HHV-6)、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV2)、EB病毒(EBV)、乙型肝炎病毒(HBV)、肠病毒D68、甲型流感病毒。
12.如权利要求11所述的青蒿素,其中所述病毒性疾病是SARS。
13.如权利要求11所述的青蒿素,其中所述病毒性疾病为COVID-19。
14.一种药物组合物,其包含游离的青蒿素或其药学上可接受的盐形式、多晶型物或立体异构体或其混合物,任选地,还包含药学上可接受的赋形剂。
15.如权利要求14所述的组合物,其中所述组合物包括选自聚山梨醇酯80和聚山梨醇酯80干粉的稳定剂、选自微晶纤维素的稀释剂、选自交聚维酮和交联羧甲基纤维素的崩解剂以及选自硬脂酸镁的抗结块剂。
16.如权利要求14所述的药物组合物,其中所述组合物包含88-97重量%的青蒿素、1-5重量%的稳定剂、0.2-1重量%的稀释剂、1-4重量%的崩解剂和1-2重量%的抗结块剂。
17.如权利要求14所述的药物组合物,其进一步包含一种或多种另外的治疗剂。
18.如权利要求14所述的组合物,其中一种或多种另外的治疗剂选自哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香或SOC。
19.如权利要求18所述的组合物,其中SOC被定义为用选自以下的药物进行的治疗:瑞德西韦、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫、Rapitus、Montek LC、低分子量肝素、泼尼松龙、强力霉素、对乙酰氨基酚、B族复合物、维生素C、泮托拉唑(Pantoprozol)、多西环素、伊维菌素、锌、Foracort-Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松、对乙酰氨基苯酚片、注射用片段化蛋白、瑞德西韦片、阿奇霉素、泮托拉唑(pantoprozole)、注射用地塞米松、注射用昂丹司琼、复合维生素片、抗坏血酸片、碳酸钙片、硫酸锌片。
20.如权利要求17所述的药物组合物,其中所述组合物包含青蒿素、姜黄素、乳香和维生素C。
21.如权利要求17所述的药物组合物,其中所述组合物包括青蒿素和哌喹。
22.如权利要求17所述的药物组合物,其中所述组合物包含70:30至30:70重量%的青蒿素和咯萘啶。
23.如权利要求20所述的组合物,其中所述组合物为纳米颗粒制剂的形式。
24.如权利要求20所述的组合物,其中所述组合物为喷雾剂的形式。
25.一种治疗纤维化或任何胶原相关疾病、癌症、病毒性疾病、细菌性疾病、真菌性疾病、寄生虫引起的疾病的方法,其中所述方法包括向受试者施用治疗有效量的青蒿素。
26.如权利要求25所述的方法,其中所述方法用于治疗由以下但不限于以下诱导的病毒性疾病:SARS、MERS、RSV、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒(CMV)、人类疱疹病毒6型(HHV-6)、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV2)、EB病毒(EBV)、乙型肝炎病毒(HBV)、肠病毒D68、甲型流感病毒。
27.如权利要求26所述的方法,其中所述病毒性疾病是COVID-19。
28.如权利要求25所述的方法,其中所述施用包括静脉内、鞘内、肌肉内、口服和任何其他可接受的施用途径。
29.一种药学上可接受的口服剂型,其包含青蒿素,青蒿素的量为每天250-750mg,持续5天,优选量为每天500mg,持续5天。
30.如权利要求25所述的方法,其中青蒿素抑制TGF-β。
31.如权利要求30所述的方法,其中TGF-β是TGF-β1或TGF-β2或TGF-β3。
32.一种从植物黄花蒿提取青蒿素的方法,其包括以下步骤:用水提取植物提取物,在水和石油醚之间分配提取物,用包含石油醚和乙酸乙酯的溶剂在硅胶吸附剂上对提取的溶液进行色谱,以获得在洗脱溶液中的青蒿素,以及蒸发洗脱的溶液以获得油性材料,随后结晶以产生基本上纯的青蒿素。
33.如权利要求32所述的方法,其中使用所述植物的干燥的叶。
34.一种基本上纯的青蒿素,其中青蒿素基本上不含杂质,如青蒿素、9-表青蒿素和侧柏酮。
35.如权利要求34所述的青蒿素,其中所述青蒿素的纯度大于90%。
36.一种包含青蒿素的物质组合物。
37.一种青蒿素衍生物如蒿甲醚(ARM)、青蒿琥酯(ARS)和双氢青蒿素的物质组合物。
38.一种黄花蒿提取物,其包含青蒿素、青蒿烯、9-表青蒿素和侧柏酮。
39.如权利要求36-38所述的物质组合物,其被配制为药物产品。
40.如权利要求39所述的物质组合物,其中所述药物产品是胶囊、片剂、粉剂、袋、小袋、栓剂。
41.如权利要求39所述的物质组合物,其中所述药物产品被包封在植物、硬明胶或软明胶胶囊中。
42.如权利要求39所述的物质组合物,其中所述药物产品是用于释放药物、速释、缓释或改性释放的胶囊、片剂、粉末、袋、小袋、栓剂。
43.如权利要求39所述的物质组合物,其中溶出曲线使得在15分钟内达到大于40%的溶出。
44.一种药物组合物,其包含游离的青蒿素或其药学上可接受的盐形式、多晶型物或立体异构体或其混合物以及一种或多种药学上可接受的赋形剂,所述赋形剂选自稀释剂、稳定剂、崩解剂和抗结块剂,其中组合物包含45-99%w/w的青蒿素、1-50%w/w的稀释剂和2-20%w/w的抗结块剂。
45.如权利要求44所述的药物组合物,其中所述青蒿素的纯度大于90%。
46.如权利要求44所述的药物组合物,其中所述青蒿素不含青蒿素、9-表青蒿素和侧柏酮杂质。
47.一种物质组合物,其包含反义寡核苷酸,其中反义寡核苷酸是具有SEQ ID 9的OT-101或OT-101与反义寡核苷酸序列的组合,所述反义寡核苷酸序列选自SEQ ID 1、SEQ ID2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8,其中骨架相对于现有技术状态被修饰为包括但不限于OME或LNA。
48.一种药物组合物,其包含反义寡核苷酸以及任选的一种或多种药学上可接受的赋形剂,所述反义寡核苷酸选自序列SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8、具有SEQ ID 9的OT-101或其组合。
49.如权利要求48所述的组合物,其中所述一种或多种药学上可接受的赋形剂选自溶媒、稳定剂、稀释剂、崩解剂、抗结块剂和/或添加剂。
50.如权利要求48所述的药物组合物,其中所述组合物包含OT-101与SEQ ID 1、SEQ ID2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8的组合,比例为1:1至1:100。
51.如权利要求48所述的药物组合物,其进一步包含一种或多种另外的治疗剂。
52.如权利要求48所述的组合物,其中所述组合物为纳米颗粒制剂的形式。
53.一种反义寡核苷酸,其用于治疗病毒性疾病,其中所述反义寡核苷酸选自具有SEQID 9的OT-101或OT-101与SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8的组合。
54.如权利要求53所述的反义寡核苷酸,其中所述病毒性疾病由以下但不限于以下诱导:SARS、MERS、RSV、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒(CMV)、人类疱疹病毒6型(HHV-6)、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV2)、EB病毒(EBV)、乙型肝炎病毒(HBV)、肠病毒D68、甲型流感病毒。
55.如权利要求53所述的反义寡核苷酸,其中所述病毒性疾病为COVID-19。
56.一种治疗纤维化或任何胶原相关疾病、癌症、病毒性疾病、细菌性疾病和寄生虫性疾病的方法,其中所述方法包括向受试者施用治疗有效量的反义寡核苷酸序列,所述反义寡核苷酸序列选自具有SEQ ID 9的OT-101、SEQ ID 1、SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 4、SEQID 5、SEQ ID 6、SEQ ID 7、SEQ ID 8或其组合。
57.如权利要求56所述的方法,其中所述方法用于治疗由以下但不限于以下诱导的病毒性疾病:SARS、MERS、RSV、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒(CMV)、人类疱疹病毒6型(HHV-6)、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV2)、EB病毒(EBV)、乙型肝炎病毒(HBV)、肠病毒D68、甲型流感病毒。
58.如权利要求56所述的方法,其中所述方法用于治疗细菌、病毒或其他形式的细胞因子诱导的肺炎。
59.如权利要求57所述的方法,其中所述病毒性疾病为COVID-19。
60.如权利要求57所述的方法,其中所述施用包括静脉内、鞘内、肌肉内、口服和任何其他可接受的施用途径。
61.如权利要求57所述的方法,其中具有SEQ ID 9的OT-101抑制TGF-β。
62.如权利要求57所述的方法,其中TGF-β是TGF-β1或TGF-β2或TGF-β3。
63.如权利要求56所述的方法,其中所述反义寡核苷酸是针对TGF-β、病毒5'末端、病毒转录调节位点和病毒移码位点的反义寡核苷酸的任何组合。
64.一种治疗TGF-β风暴的方法,其中所述方法包括用TGF-β抑制剂、抗病毒剂、IL-6抑制剂或其任何组合治疗TGF-β风暴。
65.如权利要求64所述的方法,其中TGF-β抑制剂包括但不限于mAb、小分子、反义寡核苷酸、RNA治疗剂或靶向该分子本身的其他药剂。
66.如权利要求64所述的方法,其中包括mAb、小分子的TGFβ抑制剂靶向TGF-β的活性结构域。
67.如权利要求64所述的方法,其中包括mAb、小分子、反义寡核苷酸、RNA治疗剂的TGF-β抑制剂靶向TGF-β或活化蛋白的活化。
68.如权利要求64所述的方法,其中包括mAb、小分子、反义寡核苷酸、RNA治疗剂的TGF-β抑制剂靶向病毒复制或病毒结合和摄取或病毒蛋白合成或病毒复制。
69.一种使用反义寡核苷酸的方法,其中所述方法包括抑制病毒与靶细胞的结合和/或病毒在靶细胞中的复制。
70.如权利要求69所述的方法,其中所述方法包括治疗与病毒感染相关的症状。
71.如权利要求69所述的方法,其中所述方法包括治疗与呼吸系统病毒感染相关的症状。
72.如权利要求69所述的方法,其中所述方法包括治疗与冠状病毒病毒感染相关的症状。
73.一种使用反义寡核苷酸的方法,其中所述方法包括抑制TGF-β诱导的蛋白,包括IL-6、TGFBIp。
74.如权利要求73所述的方法,其中所述方法包括抑制归因于TGF-β诱导型蛋白如IL-6、TGFBIp的症状。
75.如权利要求73所述的方法,其中反义寡核苷酸是OT-101。
76.一种使用具有SEQ ID 9的OT-101治疗细胞因子风暴的方法。
77.一种使用具有SEQ ID 9的OT-101治疗多器官炎症综合征的方法。
78.一种使用具有SEQ ID 9的OT-101治疗川崎综合征的方法。
79.一种使用具有SEQ ID 9的OT-101治疗IgA血管炎的方法。
80.如权利要求48所述的药物组合物,其进一步包含一种或多种另外的治疗剂。
81.如权利要求48所述的组合物,其中一种或多种另外的治疗剂选自青蒿素、哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香或SOC。
82.如权利要求81所述的组合物,其中SOC被定义为用选自以下的药物进行的治疗:瑞德西韦、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫、Rapitus、Montek LC、低分子量肝素、泼尼松龙、强力霉素、对乙酰氨基酚、B族复合物、维生素C、泮托拉唑(Pantoprozol)、多西环素、伊维菌素、锌、Foracort-Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松、对乙酰氨基苯酚片、注射用片段化蛋白、瑞德西韦片、阿奇霉素、泮托拉唑(pantoprozol)、注射用地塞米松、注射用昂丹司琼、复合维生素片、抗坏血酸片、碳酸钙片、硫酸锌片。
83.如权利要求81所述的药物组合物,其中所述组合物包含OT-101、青蒿素、姜黄素、乳香和维生素C的组合。
84.如权利要求81所述的药物组合物,其中所述组合物包括OT-101、青蒿素和哌喹的组合。
85.如权利要求81所述的药物组合物,其中所述组合物包括OT-101、青蒿素和咯萘啶的组合。
86.如权利要求83所述的组合物,其中所述组合物为纳米颗粒制剂的形式。
87.如权利要求83所述的组合物,其中所述组合物为喷雾剂的形式。
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