CN115557856B - 一种嗜铁素类化合物Fradiamine C及其发酵菌株与发酵方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种新型嗜铁素类化合物，并进一步公开了可发酵所述化合物的链霉菌，以及基于所述菌株进行发酵制备所述嗜铁素类化合物的方法。本发明所述嗜铁素类化合物Fradiamine C为新型结构嗜铁素类化合物，可用于新型抗生素药物的前体化合物。本发明分离并筛选的链霉菌FIMYZ‑003，可用于发酵制备具有所述嗜铁素类化合物Fradiamine C，具有很好的工业化潜力与应用前景。
Description
技术领域
本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种新型嗜铁素类化合物，并进一步公开了可发酵所述化合物的链霉菌，以及基于所述菌株进行发酵制备所述嗜铁素类化合物的方法。
背景技术
铁对大多数微生物的正常生长至关重要，一般需要0.4-1.0μM铁来维持自身的正常生长，虽然铁在地球上的含量很高，但多以不溶的形式存在，生物有效性极低。在这样一种胁迫作用下，微生物进化出多条途径来获得所必须的铁元素。
嗜铁素广泛存在于细菌、真菌和植物体内，是一类低分子量、可螯合铁离子的配位体，在铁缺乏的情况下合成的，对三价铁有较强的亲和力，通过降低环境pH值来增加铁的溶解性，还原三价铁为生物利用性更高的亚铁形式帮助微生物从环境中获取必需的铁元素。细菌产生嗜铁素，并分泌出来与细胞外的铁结合，形成的复合物可被特定的外膜受体识别并转运至胞浆内提供铁离子供细菌利用。嗜铁素介导的铁元素摄入是微生物获取铁元素的最普遍方式，许多微生物甚至合成和分泌超出自身细胞干重的嗜铁素，来满足铁元素的营养需求。
嗜铁素类化合物已在治疗重金属中毒、开发嗜铁素-抗生素耦合物、生物防治、环境修复及维护生态平衡等众多领域得到应用。除生物化学应用外，铁载体在生物技术和制药领域同样具有相当大的潜力。据报道，新型抗菌制剂嗜铁素-抗生素耦合物可通过细菌细胞外膜特殊受体进入细菌，规避细菌耐药性问题，而合适性能的嗜铁素的开发是其研究的重要基石。
发明内容
为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种新型嗜铁素类化合物FradiamineC；
本发明所要解决的第二个技术问题在于提供一种链霉菌FIMYZ-003，所述菌株可用于发酵生产所述嗜铁素类化合物Fradiamine C；
本发明所要解决的第三个技术问题在于提供一种基于所述链霉菌FIMYZ-003菌株发酵制备所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的方法。
本发明所要解决的第四个技术问题在于提供上述嗜铁素类化合物Fradiamine C用于制备新型抗生素药物合成前体的用途。
为解决上述技术问题，本发明所述的一种嗜铁素类化合物Fradiamine C，所述化合物具有如下式(Ⅰ)所示的结构：
本发明还公开了一种链霉菌株FIMYZ-003，其分类命名为链霉菌Streptomycessp.，于2022年9月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25736。
本发明还公开了所述链霉菌株FIMYZ-003用于发酵制备所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的用途。
本发明还公开了一种制备所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的方法，包括将所述的链霉菌株FIMYZ-003接种于适宜的发酵培养基中进行发酵培养的步骤。
具体的，所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，所述发酵培养基的组分包括：K2SO4 0.1-0.3wt％，K2HPO4 0.2-0.4wt％，NH4Cl 0.3-0.8wt％，NaCl 0.05-0.2wt％，CaCl2 0.005-0.02wt％，葡萄糖0.2-0.3wt％，酵母提取物0.01-0.1wt％，pH自然；
优选的，所述发酵培养基的组分包括：K2SO4 0.2wt％，K2HPO4 0.3wt％，NH4Cl0.5wt％，NaCl 0.1wt％，CaCl2 0.01wt％，葡萄糖0.25wt％，酵母提取物0.05wt％，pH自然。
具体的，所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，所述发酵培养步骤的条件包括：发酵温度25-32℃，转速控制160-200rpm，发酵时间6-10天。
具体的，所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，所述方法还包括将所述链霉菌株FIMYZ-003进行平板培养基保存的步骤；
所述平板培养基的组分包括：酵母膏0.05-0.2wt％，牛肉膏0.05-0.2wt％，酪蛋白0.1-0.3wt％，葡萄糖0.5-2wt％，琼脂1-2wt％，pH值7.0-7.5；
优选的，所述平板培养基的组分包括：酵母膏0.1wt％，牛肉膏0.1wt％，酪蛋白0.2wt％，葡萄糖1wt％，琼脂1.5wt％，pH值7.3。
具体的，所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，所述方法还包括对所述嗜铁素类化合物Fradiamine C进行提取及纯化的步骤，具体包括：
提取：将发酵液进行固液分离，收集滤液经减压蒸发后加入乙醇进行萃取，收集乙醇溶液部分并去除乙醇后，得到粗提取物；
纯化：将所述粗提取物用甲醇溶解后进行反相高效液相色谱纯化。
具体的，所述纯化步骤条件包括：采用Agilent Eclipse XDB C18反相色谱柱；流动相为甲醇和水；洗脱时间为34min，流速为3mL/min；洗脱过程中，甲醇在流动相中的体积百分比从30％线性上升至70％；检测波长为210纳米；收集峰值的保留时间为11min的峰的洗脱液，经减压蒸干，即得。
本发明还公开了所述嗜铁素类化合物Fradiamine C用于制备新型抗生素药物的合成前体的用途。
本发明所述嗜铁素类化合物Fradiamine C为新型结构嗜铁素类化合物，经验证，该嗜铁素类化合物Fradiamine C具有较强的结合铁离子的能力，为研究开发新型抗生素药物提供了前体化合物，对开发利用中国的海洋药物资源具有重要价值。
本发明分离并筛选到一株链霉菌FIMYZ-003，该菌株在选定培养基的培养下，可用于发酵制备具有所述嗜铁素类化合物Fradiamine C，具有很好的工业化潜力与应用前景。
附图说明
为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中，
图1为所述链霉菌FIMYZ-003在平板培养基上30℃生长5天时的菌落形态；
图2为使用反相高效液相色谱分离粗提取物得到的化合物Fradiamine C的出峰结果；
图3为所述化合物Fradiamine C溶于d6-DMSO中的1H-NMR谱图；
图4为所述化合物Fradiamine C溶于d6-DMSO中的13C-NMR谱图；
图5为所述化合物Fradiamine C加入CAS试剂的检测结果；其中，从左到右分别表示CAS检测剂、化合物溶液、混合液；
图6为所述化合物Fradiamine C加入2％ FeCl3检测剂的检测结果；其中，从左到右分别表示2％ FeCl3检测剂、化合物溶液、混合液。
具体实施方式
实施例1
本发明筛选获得一株链霉菌株(Streptomyces sp.)FIMYZ-003，通过16S rRNA基因分析确定其属于海洋链霉菌株，于2022年9月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25736，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
实施例2
本实施例应用所述链霉菌(Streptomyces sp.)FIMYZ-003发酵制备化合物Fradiamine C。
将保存的链霉菌FIMYZ-003划线接种于平板培养基上，于30℃培养5天，得到平板培养基。所述链霉菌FIMYZ-003在平板培养基上30℃生长5天时的菌落形态如附图1所示。
所述平板培养基的制备方法：将1g酵母膏、1g牛肉膏、2g酪蛋白、10g葡萄糖和15g琼脂粉溶于去离子水，调pH 7.3，用去离子水定溶至1L，于121℃灭菌15分钟。
取上述接种于平板中约2×2cm尺寸的琼脂块加入500ml发酵培养基中，于30℃、180rpm振荡培养7天，收集发酵液。
所述发酵培养基的制备方法：取2g K2SO4、3g K2HPO4、5g NH4Cl、1g NaCl、0.1gCaCl2、2.5g葡萄糖和0.005g酵母提取物充分溶于去离子水，用去离子水定溶至1L，自然pH值，于121℃灭菌15分钟。
实施例3
本实施例对上述实施例2中发酵液中化合物Fradiamine C进行提纯。
收集上述实施例2中得到的发酵液，于20℃、10000rpm离心10分钟，收集上清液。将所述上清液经减压蒸发干燥后，用乙醇溶液进行充分萃取，收集乙醇溶液部分，经减压蒸馏除去乙醇溶液后，得到粗提取物。
将所述粗提取物用甲醇进行重新充分溶解，过滤去除不溶物后进行反向高效液相色谱纯化。
本实施中，反相高效液相色谱的条件包括：采用Agilent Eclipse XDB C18反相色谱柱；流动相为甲醇和水；洗脱时间为34min，流速为3mL/min；洗脱过程中，甲醇在流动相中的体积百分比从30％线性上升至70％；检测波长为210纳米。
本实施例中，使用反相高效液相色谱分离粗提取物得到的化合物Fradiamine C的出峰结果如附图2所示。
收集峰值的保留时间为11min的峰的洗脱液，经减压蒸干后得到目标所述化合物1.2mg，记为化合物Fradiamine C。
对上述化合物Fradiamine C进行性状检测，其外观为黄色胶状固体，溶解性为可溶于DMSO溶剂。
实施例4
本实施例对上述实施例3中纯化所得化合物Fradiamine C进行鉴定。
所述化合物Fradiamine C溶于d6-DMSO中的1H-NMR谱图见附图3所示，所述化合物Fradiamine C溶于d6-DMSO中的13C-NMR谱图见附图4所示。
所述化合物Fradiamine C的归属情况如下表1所示。
表1:所述化合物Fradiamine C的归属情况
可见，本发明所述化合物Fradiamine C的结构如下：
实施例5
将上述得到的化合物Fradiamine C加入CAS检测剂进行检测，结果如图5所示。结果显示，试剂由蓝紫色变为红色，显示所述化合物具有结合嗜铁素活性。
将上述得到的化合物Fradiamine C加入2％ FeCl3检测剂进行检测，结果如图6所示。结果显示，试剂由黄色变为褐色，显示所述化合物可以与铁离子相结合。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种链霉菌株FIMYZ-003，其分类命名为链霉菌Streptomycessp.，于2022年9月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25736。
2.权利要求1所述链霉菌株FIMYZ-003用于发酵制备嗜铁素类化合物Fradiamine C的用途；
所述嗜铁素类化合物Fradiamine C具有如下式(Ⅰ)所示的结构：
3.一种制备嗜铁素类化合物Fradiamine C的方法，其特征在于，包括将权利要求1所述的链霉菌株FIMYZ-003接种于适宜的发酵培养基中进行发酵培养的步骤；
所述嗜铁素类化合物Fradiamine C具有如下式(Ⅰ)所示的结构：
4.根据权利要求3所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基的组分包括：K2SO4 0.1-0.3wt％，K2HPO4 0.2-0.4wt％，NH4Cl 0.3-0.8wt％，NaCl0.05-0.2wt％，CaCl2 0.005-0.02wt％，葡萄糖0.2-0.3wt％，酵母提取物0.01-0.1wt％。
5.根据权利要求4所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基的组分包括：K2SO4 0.2wt％，K2HPO40.3wt％，NH4Cl 0.5wt％，NaCl 0.1wt％，CaCl20.01wt％，葡萄糖0.25wt％，酵母提取物0.05wt％。
6.根据权利要求5所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，其特征在于，所述发酵培养步骤的条件包括：发酵温度25-32℃，转速控制160-200rpm，发酵时间6-10天。
7.根据权利要求6所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，其特征在于，所述方法还包括将所述链霉菌株FIMYZ-003进行平板培养基保存的步骤；
所述平板培养基的组分包括：酵母膏0.05-0.2wt％，牛肉膏0.05-0.2wt％，酪蛋白0.1-0.3wt％，葡萄糖0.5-2wt％，琼脂1-2wt％，pH值7.0-7.5。
8.根据权利要求7所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，其特征在于，所述平板培养基的组分包括：酵母膏0.1wt％，牛肉膏0.1wt％，酪蛋白0.2wt％，葡萄糖1wt％，琼脂1.5wt％，pH值7.3。
9.根据权利要求3-8任一项所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，其特征在于，所述方法还包括对所述嗜铁素类化合物Fradiamine C进行提取及纯化的步骤，具体包括：
提取：将发酵液进行固液分离，收集滤液经减压蒸发后加入乙醇进行萃取，收集乙醇溶液部分并去除乙醇后，得到粗提取物；
纯化：将所述粗提取物用甲醇溶解后进行反相高效液相色谱纯化。
10.根据权利要求9所述嗜铁素类化合物Fradiamine C的制备方法，其特征在于，所述纯化步骤条件包括：采用Agilent Eclipse XDB C18反相色谱柱；流动相为甲醇和水；洗脱时间为34min，流速为3mL/min；洗脱过程中，甲醇在流动相中的体积百分比从30％线性上升至70％；检测波长为210nm；收集峰值的保留时间为11min的峰的洗脱液，经减压蒸干，即得。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102212020A (zh) * | 2011-03-03 | 2011-10-12 | 浙江省农业科学院 | 一种新的氧肟酸类嗜铁素及其在病害防治中的应用 |
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| CN105636966A (zh) * | 2013-04-18 | 2016-06-01 | 圣母大学 | 抗细菌铁载体-氨基青霉素缀合物 |
| CN106544306A (zh) * | 2016-12-12 | 2017-03-29 | 浙江农林大学 | 一株铁载体高产菌及其在农田污染土壤重金属修复方面的应用 |
| CN110760455A (zh) * | 2019-03-04 | 2020-02-07 | 西北大学 | 一株产铁载体的氢氧化细菌及其分离方法和应用 |
-
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103619191A (zh) * | 2011-02-08 | 2014-03-05 | 鹿特诺瓦营养品和食品有限公司 | 甜度增进剂、甜味剂组合物、其制备方法以及含有其的消费品 |
| CN102212020A (zh) * | 2011-03-03 | 2011-10-12 | 浙江省农业科学院 | 一种新的氧肟酸类嗜铁素及其在病害防治中的应用 |
| CN105636966A (zh) * | 2013-04-18 | 2016-06-01 | 圣母大学 | 抗细菌铁载体-氨基青霉素缀合物 |
| CN106544306A (zh) * | 2016-12-12 | 2017-03-29 | 浙江农林大学 | 一株铁载体高产菌及其在农田污染土壤重金属修复方面的应用 |
| CN110760455A (zh) * | 2019-03-04 | 2020-02-07 | 西北大学 | 一株产铁载体的氢氧化细菌及其分离方法和应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Fradiamine A, a new siderophore from the deep-sea actinomycete Streptomyces fradiae MM456M-mF7;Yasuhiro Takehana等;The Journal of Antibiotics;第70卷;标题，第612页图1 * |
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