CN115531313A - 一种抗菌液及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种抗菌液及其制备方法和应用，该抗菌液的原料包括：生物活性蛋白、溶解基液、加热喷剂成分、凉味剂；该抗菌液为了保证活性蛋白的生物活性，雾化温度为200℃‑220℃，比正常雾化温度低30℃‑40℃；申请人为了保证该雾化温度，在研究中发现，除了溶解基液、加热喷剂成分是保证工作温度的重要物质之外，其中凉味剂也具有重要的作用；通过筛选研究，本发明通过筛选获得复方凉味剂，该复方凉味剂为一定比例的“天然薄荷油、乳酸薄荷酯和WS‑23”；在本发明的抗菌液中加入一定比例的“天然薄荷油、乳酸薄荷酯和WS‑23”，保证工作温度为200℃‑220℃，进一步保证活性蛋白的生物活性。

Description

一种抗菌液及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，更具体的说涉及一种抗菌液及其制备方法和应用。
技术背景
生物活性蛋白，在较低浓度下可杀灭大部分革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、支原体等致病菌生活体；并具有显著的抗炎、抗皮肤过敏、止痒、促进皮肤或黏膜修复功能和一定的保湿、止痛作用。
生物活性蛋白的作用机理为：(1)抗炎机理。生物活性蛋白对菌体内毒素的主要成分：LPS(脂多糖)具有强力的亲和性，能够封闭其致热性、致死毒性，从而阻断LPS对皮肤、组织炎症的诱导效应。同时，生物活性蛋白能够封闭炎症发生部位高浓度的炎症因子，如TNFα、IL-6、IL-8等，避免肌体对炎症的过激反应，从而加速炎症消退、促进伤口愈合。(2)杀菌机理：生物活性蛋白携带强大的正电荷吸附到菌体表面，使胞壁局部电位骤变形成高电位差，最终击穿胞壁形成穿孔。生物活性蛋白分子累积到一定数量时，进一步扩大已经形成的孔洞，破坏细胞膜的完整性，从而使胞内物质外流，菌体死亡。在适当生物活性蛋白浓度下，该过程的发生、结束将在数秒内完成。得益于这种物理性杀菌的机制，微生物很难对生物活性蛋白形成耐药性。(3)其他功能机理：生物活性蛋白对游离蛋白及蛋白复合体具有不同程度的结合、封闭能力，因而对多种由细胞因子、配体结合主导的局部生理反应均具有一定的缓解作用。同时，也因这种广泛的非特异性结合，使得生物活性蛋白只能作用于与其直接接触的部位，无法向肌体组织内扩散，保障了使用的安全性和局部有效浓度。
抗菌液是近几年发展起来的新型给药方式，通过加热使抗菌液产生气体被人体吸收，从而被口腔、咽喉部等呼吸道或肺部吸收，起到局部的作用；而生物活性蛋白，在体外具有可杀灭大部分革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、支原体等致病菌生活体；并具有显著的抗炎、抗皮肤过敏、止痒、促进皮肤修复功能和一定的保湿、止痛作用，因此将该活性成分抗菌液具有很好的市场前景。
发明内容
基于上述原因，申请人通过若干创造性的试验，获得一种含有生物活性蛋白的抗菌液，申请人研究表明，该抗菌液为了保证活性蛋白的生物活性，加热喷雾温度为200℃-220℃，比正常可喷雾温度低30℃-40℃，甚至比有的抗菌液温度低80℃-100℃；申请人为了保证该加热喷雾温度，在研究中发现，除了溶解基液、加热喷雾成分是保证喷雾温度的重要物质之外，其中凉味剂也具有重要的作用；通过筛选研究，本发明通过筛选获得复方凉味剂，该复方凉味剂为一定比例的“天然薄荷油、乳酸薄荷酯和WS-23”；在本发明的抗菌液中加入一定比例的“天然薄荷油、乳酸薄荷酯和WS-23”，保证喷雾温度为200℃-220℃，进一步保证活性蛋白的生物活性。
本发明通过下述技术方案实现的。
一种抗菌液，该抗菌液的原料包括：生物活性蛋白、溶解基液、加热喷雾成分、凉味剂。
其中所述的抗菌液的原料包括生物活性蛋白、溶解基液为丙二醇，加热喷雾成分为食用甘油，凉味剂为天然薄荷油、乳酸薄荷酯和WS-23。
其中所述抗菌液的原料包括生物活性蛋白0.2-1重量份、溶解基液为丙二醇360-550重量份，加热喷雾成分为食用甘油630-760重量份，凉味剂为天然薄荷油3-5重量份，乳酸薄荷酯1-3重量份，WS-23 0.3-1.5重量份。
其中所述抗菌液的原料包括生物活性蛋白0.6重量份、溶解基液为丙二醇405重量份，加热喷雾成分为食用甘油695重量份，凉味剂为天然薄荷油4重量份，乳酸薄荷酯2重量份，WS-23 0.9重量份。
其中所述的抗菌液在制备抗菌、抗病毒、抗炎、止痒或止痛产品中的应用。
其中所述的抗菌液加入山梨醇、去离子水。
其中的所述的抗菌液加入山梨醇1-6重量份，去离子水60-120重量份。
其中所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量1-3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的2-4倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
其中所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量1-3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的2-4倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入山梨醇和去离子水，再加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
本发明所述的丙二醇均为1,2-丙二醇。
本发明生物活性蛋白可以由市场购买使用，具有“抗菌、抗病毒、抗炎、止痒或止痛”作用均可以使用。
本发明的有益的技术效果为：
(1)本发明抗菌液的雾化温度低，为200℃-220℃，就能够保证抗菌液的雾化效率。
(2)本发明采用一定比例的关系的复合凉味剂，从众多凉味剂中筛选出最佳的三种凉味剂，在保证抗菌液中的口感，最为重要的，通过加入三种凉味剂，以及与一定比例的丙二醇和食用甘油组合之后，能充分保证本发明抗菌液在雾化温度为200℃的雾化效率。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面结合具体实施方式，对本发明进一步详细说明。应该理解，这些描述只是示例性的，而并非要限制本发明的范围。此外，在以下说明中，省略了对公知结构和技术的描述，以避免不必要地混淆本发明的概念。
实施例1
抗菌液的原料包括生物活性蛋白0.6g、溶解基液为丙二醇405g，加热喷雾成分为食用甘油695g，凉味剂为天然薄荷油4g，乳酸薄荷酯2g，WS-23 0.9g。
所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量2倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
实施例2
抗菌液的原料包括：生物活性蛋白0.2g、溶解基液为丙二醇360g，加热喷雾成分为食用甘油630g，凉味剂为天然薄荷油3g，乳酸薄荷酯1g，WS-23 0.3g。
所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量1倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的2倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
实施例3
抗菌液的原料包括：生物活性蛋白1g、溶解基液为丙二醇550g，加热喷雾成分为食用甘油760g，凉味剂为天然薄荷油5g，乳酸薄荷酯3g，WS-23 1.5g。
抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的4倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
实施例4
抗菌液的原料包括生物活性蛋白0.6g、溶解基液为丙二醇405g，加热喷雾成分为食用甘油695g，凉味剂为天然薄荷油4g，乳酸薄荷酯2g，WS-23 0.9g,山梨醇4g，去离子水80g。
所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量2倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的2倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，先加入山梨醇和去离子水，再加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
实施例5
抗菌液的原料包括：生物活性蛋白0.2g、溶解基液为丙二醇360g，加热喷雾成分为食用甘油630g，凉味剂为天然薄荷油3g，乳酸薄荷酯1g，WS-23 0.3g,山梨醇1g，去离子水60g。
所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量1倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的2倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，先加入山梨醇和去离子水，再加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
实施例6
抗菌液的原料包括：生物活性蛋白1g、溶解基液为丙二醇550g，加热喷雾成分为食用甘油760g，凉味剂为天然薄荷油5g，乳酸薄荷酯3g，WS-23 1.5g,山梨醇6g，去离子水120g。
抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的4倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，先加入山梨醇和去离子水，再加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
对比例1
抗菌液的原料包括生物活性蛋白0.6g、溶解基液为丙二醇405g，加热喷雾成分为食用甘油695g，凉味剂为天然薄荷油4g，WS-23 0.9g。
所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量2倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、WS-23，加入各自重量的3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3；
(2)取步骤(1)备用1-3，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
对比例2
抗菌液的原料包括生物活性蛋白0.6g、溶解基液为丙二醇405g，加热喷雾成分为食用甘油695g，凉味剂为天然薄荷油4g，薄荷醇2g，WS-23 0.9g。
所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量2倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、薄荷醇、WS-23，加入各自重量的3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
对比例3
抗菌液的原料包括生物活性蛋白0.6g、溶解基液为丙二醇405g，加热喷雾成分为食用甘油695g，凉味剂为WS-3 4g，薄荷醇2g，WS-23 0.9g。
所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量2倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取WS-3、薄荷醇、WS-23，加入各自重量的3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
本发明的生物活性蛋白由武汉沃轩科技有限公司提供使用。
本发明的生物活性蛋白购买自任何销售厂家，具有抗菌、抗病毒、抗炎、止痒或止痛作用即可。
本发明的生物活性蛋白也可以按照中国专利申请号2013102453730说明书公开的制备方法得到。
试验1
加热喷雾效率试验
试验方法：
各取200ml实施例和对比例制备的抗菌液，注入电子加热喷雾器中(电子加热喷雾器温度200℃)，在抽烟机上抽吸，抽吸参数设置为：抽吸容量：50ml、抽吸时间：抽2S、停8S、抽吸口数：100口。用剑桥滤片收集气溶胶，然后对滤片上收集的物质经过溶出处理进行分析检测。
电子加热喷雾器按照发明专利申请号为2019105659588的制备方法得到。
食用甘油含量、丙二醇含量用气相色谱(GC)检测，活性蛋白含量用高效液相色谱(HPLC)检测。
各物质的加热喷雾效率＝气溶胶中含量/喷雾前含量×100％，其中，加热喷雾前含量为电子抗菌液中各物质对应的含量；甘油、丙二醇、生物活性蛋白的加热喷雾效率的实验数据具体见表1。
表1实施例和对比例各物质的加热喷雾效率
Figure BDA0003835314450000081
试验结论：上述试验表明，采用本发明复方凉味剂的抗菌液，活性蛋白、食用甘油以及丙二醇的加热喷雾效率都大于35％以上，而不使用本发明复方凉味剂的抗菌液(对比例1-3)，活性蛋白、食用甘油以及丙二醇的加热喷雾效率都低于20％，是使用本发明复方凉味剂的加热喷雾效率的50％；这进一步说明，本发明的凉味剂的使用，不仅仅是在改善抗菌液的口感等基本的效果，对于加热喷雾效率的影响也有着至关重要的作用。
试验例2
性能检测试验
试验方法：选择90名男性健康志愿者，且年龄为30-40岁之间，并随机分为10组，每组10人，分别对香气、外观进行评价。然后让每组志愿者分别利用电子加热喷雾器的抗菌液吸取试样，并对试样使用后的清凉感、甜味感、还原感、雾化量、杂味感、余味进行评价，评价结果如表2所示。
表2不同抗菌液的性能结果比较
Figure BDA0003835314450000091
Figure BDA0003835314450000101
试验结论：从上述试验可知，本申请的抗菌液，通过原料之间的协同作用，特别是复方凉味剂的使用，使抗菌液具有清爽、均一透明的优点，而且还具有还原感良好、纯正、凉味舒适自然、凉度适中、雾化量良好、余味自然舒适、抽吸口感好的优点，满足市场需求。而对比例1-3缺点较多，不适合市场的需求。
试验例3
以实施例1抗菌液为试验样品
1)急性经口毒性试验(小鼠及大鼠)：
产品对雌雄小鼠及大鼠经口LD50值均大于5000mg/kg b.wt.，属实际无毒级；
2)多次眼刺激试验：
产品对家兔多次眼刺激分值为0，眼刺激反应分级为无刺激性；
3)皮肤变态反应试验：
产品对试验动物豚鼠的皮肤致敏率(％)＝0，属未见皮肤变态反应；
4)多次完整皮肤刺激试验：
产品对家兔多次完整皮肤刺激反应积分均值为0.38，刺激强度为无刺激性；
5)多次黏膜刺激试验：
产品对家兔粘膜刺激指数为1.22，刺激强度为极轻刺激性；
6)小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：
剂量达5000mg/kg b.wt.未检出产品对雌雄小鼠骨髓嗜多染红细胞的致微核作用；
7)亚急性经口毒性试验：产品以100mg/kg b.wt.、300mg/kg b.wt.和1000mg/kgb.wt.的剂量灌胃给予大鼠28天，试验结果表明：未见明显毒性。最大未观察到有害作用计量值为1000mg/kg b.wt.。
安评估结论：无经口毒性，无皮肤黏膜和眼角膜刺激恶性，无生殖毒性，无致畸性，无致瘤性，无溶血性，对内脏无病理毒性，无重金属残留，无抗生素残留，无激素添加。
实施例4
本发明活性蛋白抗菌试验
表3生物活性蛋白对多种菌的最小抑菌浓度
Figure BDA0003835314450000111
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种抗菌液，其特征在于该抗菌液的原料包括：生物活性蛋白、溶解基液、加热喷雾成分、凉味剂。
2.根据权利要求1所述的一种抗菌液，其中所述的抗菌液的原料包括生物活性蛋白、溶解基液为丙二醇，加热喷雾成分为食用甘油，凉味剂为天然薄荷油、乳酸薄荷酯和WS-23。
3.根据权利要求1所述的一种抗菌液，其中所述抗菌液的原料包括生物活性蛋白0.2-1重量份、溶解基液为丙二醇360-550重量份，加热喷雾成分为食用甘油630-760重量份，凉味剂为天然薄荷油3-5重量份，乳酸薄荷酯1-3重量份，WS-23 0.3-1.5重量份。
4.根据权利要求1所述的一种抗菌液，其中所述抗菌液的原料包括生物活性蛋白0.6重量份、溶解基液为丙二醇405重量份，加热喷雾成分为食用甘油695重量份，凉味剂为天然薄荷油4重量份，乳酸薄荷酯2重量份，WS-23 0.9重量份。
5.根据权利要求1-4任一项所述的一种抗菌液，其中所述的抗菌液在制备抗菌、抗病毒、抗炎或止痒产品中的应用。
6.根据权利要求1-4任一项所述的一种抗菌液，其中所述的抗菌液加入山梨醇、去离子水。
7.根据权利要求1-4任一项所述的一种抗菌液，其中的所述的抗菌液加入山梨醇1-6重量份，去离子水60-120重量份。
8.根据权利要求1-4任一项所述的一种抗菌液，其中所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量1-3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的2-4倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
9.根据权利要求6或7所述的一种抗菌液，其中所述的抗菌液的制备方法为：
(1)取生物活性蛋白，加入生物活性蛋白重量1-3倍的丙二醇，溶解完全，得到备用1；同理分别取天然薄荷油、乳酸薄荷酯、WS-23，加入各自重量的2-4倍的丙二醇，溶解完全，得到备用2、备用3、备用4；
(2)取步骤(1)备用1-4，加入剩余的丙二醇中，混合完全，加入山梨醇和去离子水，再加入食用甘油，混合均匀，得到抗菌液。
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