CN111329981B - 一种抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于日化领域。一种抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物，由微胶囊包裹体和以下按重量份数计算的组分制备而成：何首乌、侧柏叶、姜根、当归、鳢肠、胡椒籽、辣椒果以及酵母提取物。该组合物具有良好的抗炎抑菌、活血防脱、生发育发功效。本发明的制备方法通过多种中草药混合提取，避免引入过多杂质，保证了提取液活性成分的高纯度，温和不刺激；采用微胶囊包裹体对中药复合提取液和酵母提取物进行包裹保护，提高了有效成分的稳定性和高活性，使用时更具有针对性，药效强、效果明显，有效缩短治疗周期。

Description

一种抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于日化领域，涉及一种抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物及其制备方法。

背景技术

脂溢性脱发又称男性型脱发、雄激素性脱发，是目前最常见的一种脱发，主要表现为头皮油脂分泌旺盛，头发异常油腻，导致毛囊堵塞，萎缩退化，多数为长期慢性脱发。病因尚未完全明确，可能与免疫、遗传、激素和局部炎症反应、神经和环境等因素有关。

目前，人们通常使用化学分子治疗雄激素性脱发，合成添加剂具有见效快、效果明显等特点，但其也存在着副作用较大的问题。将天然活性生发成分运用于防脱生发领域可有效解决上述问题，天然植物借助中医辨证论治的理论基础，配合先进的提取分离技术，可筛选出更有效的治疗脱发功能性成分。

采用传统方法制备的植物提取液，植物提取后残留的杂质和致敏物多，将会导致一系列头皮问题；将植物复合提取液加入到洗发组合物体系中，也可能会出现粘度过低或泡沫量不足等问题，影响洗发组合物的稳定性和使用感。目前市面上的植物防脱液大多是按固定比例对不同的中草药进行复合配置，多种植物提取液混合使用可能会导致有效成分的损失。如将各种中草药分别制得提取液后再混合配置，则因各植物提取液的有效成分难以标定，直接影响搭配的比例，中药讲究君臣佐使，阴阳协调；单一制备植物，成本大大提高；若提取试剂不同，多种残留物必定会对头皮产生刺激甚至过敏。将中药混合提取，其复合作用可增加药物有效成分的溶解度，消除和减弱某种药物毒性，还可生成新物质，发挥新的疗效作用。但由于中草药中的活性物大部分为挥发性物质，中药混合提取制得的提取液中有可能因为有效物质的损失使得治疗周期变长甚至无效。

中国专利CN104095780A公开了将茶枯、柚子叶、枫叶、老姜等植物加入水浸泡后煮沸降温至50-60℃后保温的植物复合提取技术，植物经高温煮沸容易导致某些有效物质失活，所得复合液纯度不高，导致治疗和使用周期较长，且该法制得的提取物存在使用和储存不便，容易导致微生物滋长等问题。

中国专利CN109549881A公开了一种将制得的人参提取物、苦参黄酮、侧柏提取物、三七提取物和当归提取物分别提取后再按一定的比例复合制成的植物防脱生发液，该专利中各植物的萃取方法均不相同，所用的溶剂种类和浓度也有所不同，若乙醇和正丁醇的残留过多，大量的溶剂杂质作用在头皮上，刺激头皮，容易导致过敏和头皮炎症；这种方法配置的生发液有效成分难以标定，直接影响搭配的比例。

中国专利号CN102822413A公开了对多种纤维、纺织材料进行处理的方法，公开了微胶囊的制备方法，公开的技术里有提及到其在化妆品和药品领域的应用，但是并未详细说明这两个领域的应用实例。尽管活性物质微囊化技术因其诸多优点已经在医药、食品包装、生物技术、环境保护等领域得到了广泛的应用，但是该技术并不能实现对活性物质的全部包埋，即在微囊化过程中会导致部分活性物质的损失。因此，针对不同活性成分制定合适的微囊化工艺是该技术使用的前提。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物，该组合物具有良好的抗炎抑菌、活血防脱、生发育发功效。本发明的制备方法通过多种中草药混合提取，避免引入过多杂质，保证了提取液活性成分的高纯度，温和不刺激；采用微胶囊包裹体对中药复合提取液和酵母提取物进行包裹保护，提高了有效成分的稳定性和高活性，使用时更具有针对性，药效强、效果明显，有效缩短治疗周期。

本发明的技术方案如下：

一种抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物，由微胶囊包裹体和以下按重量份数计算的组分制备而成：

（A）何首乌 9-23份；

（B）侧柏叶 8-21份；

（C）姜根 5-18份；

（D）当归 3-13份；

（E）鳢肠 3-13份；

（F）胡椒籽 2-8份；

（G）辣椒果 2-8份；

（H）酵母提取物 0.01-10份。

进一步的，所述微胶囊包裹体包括第一包裹体和第二包裹体；所述第一包裹体和第二包裹体分别为壳聚糖、海藻糖、明胶、阿拉伯胶、三聚磷酸钠、聚乳酸、聚乙交酯丙交酯、聚乙二醇中的至少一种。

（A）何首乌

本发明组合物包括9-23重量份，优选13-20重量份，进一步优选15-20重量份，特别优选17-20重量份的何首乌。何首乌味苦、甘、涩，性微温。何首乌其块根入药，可安神、养血、活络，解毒（截疟）、消痈；何首乌可补益精血、乌须发、强筋骨、补肝肾。何首乌含有二苯乙烯苷类、蒽醌类、卵磷脂类、糖类等多种物质。其中的卵磷脂为构成神经组织、血球及其他细胞膜的重要成分，有强壮神经作用，能促进血细胞的生长和发育。何首乌可以促进黑色素的合成调节神经，滋养发根，改善头皮内血液循环和毛囊环境。

（B）侧柏叶

本发明组合物包括8-21重量份，优选10-20重量份，进一步优选15-20重量份，特别优选16-18重量份的侧柏叶。侧柏叶味苦涩、性微寒，入肺、肝、大肠经，具有凉血止血、生发黑发、抑菌消炎之功效。其主要成分为侧柏烯、黄酮类、VC等，具有抑菌抗炎、扩胀血管、去屑防脱、育发生发的作用。侧柏叶提取物富含黄酮、雪松醇、山奈酚、异槲皮素等活性成分，可促进头发生长，治疗脱发效果显著。

（C）姜根

本发明组合物包括5-18重量份，优选6-18重量份，进一步优选8-15重量份，特别优选12-15重量份的姜根。生姜味辛，性微温。姜根中的姜辣素、姜稀油等成分，可以使头部皮肤血液循环正常化，促进头皮新陈代谢，活化毛囊组织，能有效的防止脱发白发，刺激新发生长，并可抑制头痒，强化发根。

（D）当归

本发明组合物包括3-13重量份，优选6-13重量份，进一步优选8-13重量份，特别优选10-13重量份的当归。当归含挥发油、多糖、氨基酸、腺嘌呤、VB12和叶酸等活性成分。性温，味甘、辛，能扩张血管，缓解周围血管平滑肌痉挛，增加血流量，具有抗缺氧、活血补血和抑菌抗炎的作用。

（E）鳢肠

本发明组合物包括3-13重量份，优选6-13重量份，进一步优选8-13重量份，特别优选8-11重量份的鳢肠。味甘、酸、微寒。《本草纲目》中记载鳢肠味甘、酸、平、无毒，其汁涂眉发，生速而繁。鳢肠含有的黄酮类主要有槲皮素、木樨草素、芹菜素、蒙花苷等成分，具有抗氧化、抗肿瘤、抗血管增生、消炎、和抗病毒等功效。

（F）胡椒籽

本发明组合物包括2-8重量份，优选2-6重量份，进一步优选3-5重量份，特别优选3-4重量份的胡椒籽。胡椒籽含多种酰胺类化合物，富含胡椒碱、胡椒酰胺、次胡椒酰胺和胡椒亭碱等成分，味辛，性热。具有温中止痛，抑菌消炎等功能，能促进头皮的血液微循环。

（G）辣椒果

本发明组合物包括2-8重量份，优选2-6重量份，进一步优选3-6重量份，特别优选5-6重量份的辣椒果。辣椒富含维生素C、辣椒碱和辣椒红色素。其具有增进食欲，振奋精神，促进血液循环，强胃健脾，驱寒除湿，活血消肿等功效，能杀菌止痒，促进头皮血液的微循环。辣椒碱对部分杆菌有显著抑制作用，外用作为涂擦剂对皮肤有复苏作用，使皮肤局部血管起反射性扩张，促进局部血液循坏的旺盛。

（H）酵母提取物

所述酵母提取物为二裂酵母提取物、毕赤酵母提取物、假丝酵母/柬埔寨藤黄发提取物中的至少一种。酵母提取物是酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解后制得，其富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分。小分子氨基酸活性强，皮肤渗透性好，容易被皮肤吸收，可有效修复皮肤屏障功能。核酸及核苷酸具有促进新陈代谢、提高蛋白质合成速度、增强免疫机能等功能。

一种所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物的制备方法，包括以下步骤：

a.按配比将何首乌、侧柏叶、姜根、当归、鳢肠、胡椒籽、辣椒果洗净后干燥、粉粹、过筛，制得植物粉末；粉碎力度不可过大，会影响有效成分的提取率，30-40目过筛；

b.将所述植物粉末用浓度为60-85%的乙醇溶液浸泡，料液比为1:15-1:55，浸泡温度为75-90℃，浸泡时间≤6h，离心取滤液，即得第一滤液；

c.萃取：将步骤b所得滤渣用浓度为30-60%乙醇溶液浸泡30-60min，移至超声-微波协同萃取仪中进行中萃取，微波功率为100-1000W，微波功率由小至大调节3-5次，每次调节功率后萃取2-8min，静置冷却至室温，离心取滤液，即得第二滤液；

d.将步骤c中所得滤渣采用步骤c所述萃取方法提取，即得第三滤液；

e.纯化浓缩：将所述第一滤液、第二滤液和第三滤液混合后进行大孔树脂纯化，洗脱剂为浓度60-80%的乙醇溶液，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，取滤液在温度为58-75℃的条件下，进行真空旋转蒸发浓缩回收乙醇，即得中药复合提取液；

f.包裹：将1份的第一包裹体粉末溶于2份浓度为1%的冰乙酸溶液和98份的水中，35-40℃搅拌4-8h，过滤取滤液，制得质量百分比为1%的第一包裹体-乙酸溶液；加入1mol/L的NaOH调节pH至3.8-6.5后，置于温度为25℃，功率为100-400W的条件下超声处理10-30min，加入质量百分比为0.5-2.5%的乳化剂，58-68℃恒温搅拌30-60min至均匀，降温至25-35℃，加入所述中药复合提取液和酵母提取物，再以2滴/s的速率滴入0.5-2mg/ml的第二包裹体溶液，搅拌20-50min，即得中药复合提取液微胶囊悬液；

g.将所述中药复合提取液微胶囊悬液在温度为4℃，转速为10000-18000r/min的条件下离心30-60min，取下层用质量分数0.9%的生理盐水悬浮，以2-5%的冻干保护剂于-20℃冷冻干燥，即得微胶囊中草药组合物。

进一步的，步骤a中，干燥温度为55-65℃，干燥时间为5-8h。

进一步的，步骤e中，大孔树脂纯化所用树脂为AB-8、D1300、D101、HPD100中的至少一种。

进一步的，所述乳化剂为吐温20、吐温80、单甘酯、TR-1、TR-2中的至少一种。

进一步的，冻干保护剂为多元醇、分子量＜20000的聚乙二醇或二者的混合物。

进一步的，所述多元醇为甘露醇、甘油、山梨醇、季戊四醇、双甘油、二丙二醇中的至少一种。

一种复合植物防脱液的制备方法，步骤为：将所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物溶解于溶剂中，即得复合植物防脱液；其中，所述溶剂为水、多元醇或二者的混合物。

本发明具有如下有益效果：

1、本发明组合物以何首乌、侧柏叶为君药，姜根为臣药，胡椒籽和辣椒籽作为佐药，其他药材为使药。申请人经研究发现，只采用其中一种或两种中药时药物疗效不佳，通过多种中草药合理搭配，协同增效，使组合物具有抑菌消炎、促进头皮血液循坏的作用，从而达到防脱育发的目的。配合酵母提取物，其富含的多肽和氨基酸，可促进毛囊干细胞增值分化，促进毛囊和毛发生长。将酵母提取物与多种中草药提取物配合制成微胶囊，药效强见效快，可实现缩短治疗周期的目的。

2、本发明组合物的制备方法，多种中草药混合后使用同一溶剂提取，有利于各种中草药成分之间的增溶、助溶作用，有效提高有效成分的溶出率，同时避免了制备植物提取物时过多杂质的引入；采用超声-微波协同萃取法，兼具超声波萃取和微波萃取的优点，振动匀化使样品介质内各点受到的作用一致，可有效提高提取效率，节能高效。

3、将本发明组合物通过包裹技术制成微胶囊可确保其功效性，同时提高了中草药复合液的水溶性，有效缩短治疗和使用周期；通过包埋法固定活性物质可提高其稳定性，确保了挥发性物质的功效持久稳定。本发明组合物在使用时若加以外部作用力，例如揉搓、按摩等，可加快其活性成分的释放。

附图说明

图1为某志愿者使用本发明样品a和样品b前后的头皮图像；

图2为某志愿者使用本发明样品d和样品e前后的头皮图像；

图3为某志愿者使用本发明样品f和样品g前后的头皮图像；

图4为某志愿者使用本发明样品15和空白对照前后的头皮图像。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明进行详细的说明，实施例仅是本发明的优选实施方式，不是对本发明的限定。

表1-2为本发明抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物3个实施例和11个对比例的配方表（单位：g）。

表1：

组分	实施例1	实施例2	实施例3	对比例1	对比例2	对比例3	对比例4
								何首乌	185	175	180	185	191	\	190
侧柏叶	175	175	175	175	175	156	70
								姜根	145	130	135	145	145	270	155
当归	125	135	125	125	125	260	135
								鳢肠	80	90	90	80	80	120	120
胡椒籽	35	40	40	35	35	\	60
								辣椒果	55	55	55	55	55	\	70
酵母提取物	6g,毕赤酵母提取物	6g，毕赤酵母提取物	6g,二裂酵母提取物、假丝酵母/柬埔寨藤黄发提取物	6g,毕赤酵母提取物	\	\	6g,毕赤酵母提取物
								总量	806	806	806	806	806	806	806

表2：

组分

对比例5

对比例6

对比例7

对比例8

对比例9

对比例10

对比例11

何首乌

800

/

/

/

/

/

/

侧柏叶

/

800

/

/

/

/

/

姜根

/

/

800

/

/

/

/

当归

/

/

/

800

/

/

/

鳢肠

/

/

/

/

800

/

/

胡椒籽

/

/

/

/

/

800

/

辣椒果

/

/

/

/

/

/

800

毕赤酵母提取物

6

6

6

6

6

6

6

总量

806

806

806

806

806

806

806。

本发明抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物实施例1和对比例4的制备方法，包括以下步骤：

a.按配比将何首乌、侧柏叶、姜根、当归、鳢肠、胡椒籽、辣椒果洗净后干燥，干燥温度为58℃，干燥时间为6h，粉粹过筛，粉碎力度不可过大，会影响有效成分的提取率，40目过筛，制得植物粉末；

b.将所述植物粉末用浓度为60%的乙醇溶液浸泡，料液比为1:2.5，浸泡温度为78℃，浸泡时间4h，离心取滤液，即得第一滤液；

c.萃取：将步骤b所得滤渣用浓度为50%乙醇溶液浸泡40min，移至超声-微波协同萃取仪中进行中萃取，微波功率为100-300W，微波功率由小至大调节3次，每次调节功率后萃取3min，静置冷却至室温，离心取滤液，即得第二滤液；

d.将步骤c中所得滤渣采用步骤c所述萃取方法提取，即得第三滤液；

e.纯化浓缩：将所述第一滤液、第二滤液和第三滤液混合后进行大孔树脂纯化，所用树脂型号为AB-8，洗脱剂为浓度70%的乙醇溶液，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，取滤液在温度为58-75℃的条件下，进行真空旋转蒸发浓缩回收乙醇，即得中药复合提取液；

f.包裹：将1份的壳聚糖粉末溶于2份浓度为1%的冰乙酸溶液和98份的水中，35℃搅拌5h，过滤取滤液，制得质量百分比为1%壳聚糖-乙酸溶液；加入1mol/L的NaOH调节pH至4.5后，置于温度为25℃，功率为300W的条件下超声处理15min，加入质量百分比为1%的吐温80，58-68℃恒温搅拌35min至均匀，降温至25-35℃，加入所述中药复合提取液和酵母提取物，再以2滴/s的速率滴入0.5-2mg/ml的三聚磷酸钠溶液，搅拌30min，即得中药复合提取液微胶囊悬液；

g.将所述中药复合提取液微胶囊悬液在温度为4℃，转速为12000r/min的条件下离心40min，取下层用质量分数0.9%的生理盐水悬浮，以3%的甘露醇于-20℃冷冻干燥，即得微胶囊中草药组合物。

本发明抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物实施例2-3的制备方法，包括以下步骤：

a.按配比将何首乌、侧柏叶、姜根、当归、鳢肠、胡椒籽、辣椒果洗净后干燥，干燥温度为58℃，干燥时间为6h，粉粹过筛，粉碎力度不可过大，会影响有效成分的提取率，40目过筛，制得植物粉末；

b.将所述植物粉末用浓度为60%的乙醇溶液浸泡，料液比为1:2.5，浸泡温度为78℃，浸泡时间4h，离心取滤液，即得第一滤液；

c.萃取：将步骤b所得滤渣用浓度为50%乙醇溶液浸泡40min，移至超声-微波协同萃取仪中进行中萃取，微波功率为100-300W，微波功率由小至大调节3次，每次调节功率后萃取3min，静置冷却至室温，离心取滤液，即得第二滤液；

d.将步骤c中所得滤渣采用步骤c所述萃取方法提取，即得第三滤液；

e.纯化浓缩：将所述第一滤液、第二滤液和第三滤液混合后进行大孔树脂纯化，所用树脂型号为AB-8，洗脱剂为浓度70%的乙醇溶液，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，取滤液在温度为58-75℃的条件下，进行真空旋转蒸发浓缩回收乙醇，即得中药复合提取液；

f.包裹：将1份的海藻糖粉末溶于2份浓度为1%的冰乙酸溶液和98份的水中，35℃搅拌5h，过滤取滤液，制得质量百分比为1%海藻糖-乙酸溶液；加入1mol/L的NaOH调节pH至4.5后，置于温度为25℃，功率为300W的条件下超声处理15min，加入质量百分比为1%的吐温80，58-68℃恒温搅拌35min至均匀，降温至25-35℃，加入所述中药复合提取液和酵母提取物，再以2滴/s的速率滴入0.5-2mg/ml的三聚磷酸钠溶液，搅拌30min，即得中药复合提取液微胶囊悬液；

g.将所述中药复合提取液微胶囊悬液在温度为4℃，转速为12000r/min的条件下离心40min，取下层用质量分数0.9%的生理盐水悬浮，以3%的山梨醇于-20℃冷冻干燥，即得微胶囊中草药组合物。

本发明抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物对比例1的制备方法，包括以下步骤：

a.按配比将何首乌、侧柏叶、姜根、当归、鳢肠、胡椒籽、辣椒果洗净后干燥，干燥温度为58℃，干燥时间为6h，粉粹过筛，粉碎力度不可过大，会影响有效成分的提取率，40目过筛，制得植物粉末；

b.将所述植物粉末用浓度为60%的乙醇溶液浸泡，料液比为1:2.5，浸泡温度为78℃，浸泡时间4h，离心取滤液，即得第一滤液；

c.萃取：将步骤b所得滤渣用浓度为50%乙醇溶液浸泡40min，移至超声-微波协同萃取仪中进行中萃取，微波功率为100-300W，微波功率由小至大调节3次，每次调节功率后萃取3min，静置冷却至室温，离心取滤液，即得第二滤液；

d.将步骤c中所得滤渣采用步骤c所述萃取方法提取，即得第三滤液；

e.纯化浓缩：将所述第一滤液、第二滤液和第三滤液混合后进行大孔树脂纯化，所用树脂型号为AB-8，洗脱剂为浓度70%的乙醇溶液，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，取滤液在温度为58-75℃的条件下，进行真空旋转蒸发浓缩回收乙醇，即得中药复合提取液；

f.将所述中药复合提取液和0.5份的丙二醇混合均匀后，加入酵母提取物，制得复合液。

本发明抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物对比例2-3的制备方法，包括以下步骤：

a.按配比将何首乌、侧柏叶、姜根、当归、鳢肠、胡椒籽、辣椒果洗净后干燥，干燥温度为58℃，干燥时间为6h，粉粹过筛，粉碎力度不可过大，会影响有效成分的提取率，40目过筛，制得植物粉末；

b.将所述植物粉末用浓度为60%的乙醇溶液浸泡，料液比为1:2.5，浸泡温度为78℃，浸泡时间4h，离心取滤液，即得第一滤液；

c.萃取：将步骤b所得滤渣用浓度为50%乙醇溶液浸泡40min，移至超声-微波协同萃取仪中进行中萃取，微波功率为100-300W，微波功率由小至大调节3次，每次调节功率后萃取3min，静置冷却至室温，离心取滤液，即得第二滤液；

d.将步骤c中所得滤渣采用步骤c所述萃取方法提取，即得第三滤液；

e.纯化浓缩：将所述第一滤液、第二滤液和第三滤液混合后进行大孔树脂纯化，所用树脂型号为AB-8，洗脱剂为浓度70%的乙醇溶液，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，取滤液在温度为58-75℃的条件下，进行真空旋转蒸发浓缩回收乙醇，即得中药复合提取液；

f.包裹：将1份的海藻糖粉末溶于2份浓度为1%的冰乙酸溶液和98份的水中，35℃搅拌5h，过滤取滤液，制得质量百分比为1%海藻糖-乙酸溶液；加入1mol/L的NaOH调节pH至4.5后，置于温度为25℃，功率为300W的条件下超声处理15min，加入质量百分比为1%的吐温80，58-68℃恒温搅拌35min至均匀，降温至25-35℃，加入所述中药复合提取液，再以2滴/s的速率滴入0.5-2mg/ml的三聚磷酸钠溶液，搅拌30min，即得中药复合提取液微胶囊悬液；

g.将所述中药复合提取液微胶囊悬液在温度为4℃，转速为12000r/min的条件下离心40min，取下层用质量分数0.9%的生理盐水悬浮，以3%的山梨醇于-20℃冷冻干燥，即得微胶囊中草药组合物。

本发明抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物对比例5-11的制备方法，包括以下步骤：

a.将中草药洗净后干燥，干燥温度为58℃，干燥时间为6h，粉粹过筛，粉碎力度不可过大，会影响有效成分的提取率，40目过筛，制得植物粉末；

b.将所述植物粉末用浓度为60%的乙醇溶液浸泡，料液比为1:2.5，浸泡温度为78℃，浸泡时间4h，离心取滤液，即得第一滤液；

c.萃取：将步骤b所得滤渣用浓度为50%乙醇溶液浸泡40min，移至超声-微波协同萃取仪中进行中萃取，微波功率为100-300W，微波功率由小至大调节3次，每次调节功率后萃取3min，静置冷却至室温，离心取滤液，即得第二滤液；

d.将步骤c中所得滤渣采用步骤c所述萃取方法提取，即得第三滤液；

e.纯化浓缩：将所述第一滤液、第二滤液和第三滤液混合后进行大孔树脂纯化，所用树脂型号为AB-8，洗脱剂为浓度70%的乙醇溶液，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，取滤液在温度为58-75℃的条件下，进行真空旋转蒸发浓缩回收乙醇，即得中药提取液；

f.包裹：将1份的壳聚糖粉末溶于2份浓度为1%的冰乙酸溶液和98份的水中，35℃搅拌5h，过滤取滤液，制得质量百分比为1%壳聚糖-乙酸溶液；加入1mol/L的NaOH调节pH至4.5后，置于温度为25℃，功率为300W的条件下超声处理15min，加入质量百分比为1%的吐温80，58-68℃恒温搅拌35min至均匀，降温至25-35℃，加入所述中药复合提取液和酵母提取物，再以2滴/s的速率滴入0.5-2mg/ml的三聚磷酸钠溶液，搅拌30min，即得中药复合提取液微胶囊悬液；

g.将所述中药复合提取液微胶囊悬液在温度为4℃，转速为12000r/min的条件下离心40min，取下层用质量分数0.9%的生理盐水悬浮，以3%的甘露醇于-20℃冷冻干燥，即得微胶囊中草药组合物。

实施例1和实施例2的区别在于包裹体不同；实施例1与实施例3的区别在于所用酵母提取物不同；实施例1和对比例1的区别在于中草药组合物是否被包裹；实施例1和对比例2的区别在于是否添加酵母提取物；对比例3和对比例4是未按照本发明提出的比例进行组合的中草药组合物；对比例5-11中为单一组分的中草药提取物。

一种复合植物防脱液的制备方法，步骤为：将20g抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物实施例1-3和对比例1-11分别溶解于80g丙二醇中，制得复合植物防脱液样品1-14。

一种复合植物防脱液的制备方法，步骤为：将抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物实施例1-3和对比例1-4分别溶于水中,制得浓度为50%的复合植物防脱液样品a-n。

测试本发明复合植物防脱液样品1-15和样品a-n的各项性能；其中，样品15为普通市售植物防脱液，空白对照为浓度为45%的丙二醇水溶液。

一、使用模式微生物进行抑菌圈效果实验

实验用微生物为:糠批马拉色菌模式菌株为ATCC14521，痤疮丙酸杆菌ATCC65102，金黄色葡萄球菌模式菌为菌株ATCC6538；

针对不同微生物采用不同培养方法，如糠批马拉色菌采用真菌培养基，震荡培养；痤疮丙酸杆菌采用厌氧培养方法；金黄色葡萄球菌采用LB肉汤培养基震荡培养。先鉴定并小量接种，分光光度计比浊定量微生物数量后将其涂布在培养皿内，标准牛津杯加入适量药剂和对比药剂，每个菌种做4个重复，培养24h后取抑菌圈平均值。

参照标准抑菌测定方法，抑菌圈> 20mm为高度敏感，10-20mm为中度敏感，＜10mm为耐药。三种不同微生物所使用的阳性对比抑菌剂皆为甲硝哩，该抑菌剂作为常规抑菌剂广泛使用在消毒产品和化妆品中。测试结果如表3-4所示。

表3：

表4：

可见，含有实施例1的样品1和含有实施例2的样品2的对糠批马拉色菌和痤疮丙酸杆菌为高敏，对金黄色葡萄球菌为中敏，优于经典抑菌剂甲硝唑；含有对比例1的样品4对糠批马拉色菌为高敏，对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌为中敏，优于经典抑菌剂甲硝唑；含有对比例2的样品5对糠批马拉色菌、痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌均为中敏；含有对比例3的样品6对糠批马拉色菌和金黄色葡萄球菌为低敏，对痤疮丙酸杆菌为中敏；含有对比例4的样品7和普通市售的样品15对糠批马拉色菌和痤疮丙酸杆菌为中敏，对金黄色葡萄球菌为低敏。

从以上抑菌实验的结果可知，本发明提出的中草药复合提取液经过包裹之后的抑菌效果优于未包裹的中草药复合提取液；未按照本发明提出的工艺参数以及中药复合比例所制得的复合液的抑菌效果均不太理想。

二、白细胞介素-8（IL-8）生成抑制测试

进行实验的一天前，将皮肤角化上皮细胞，以5×10⁴细胞/孔，接种于96孔板中，然后在37℃，5%CO₂培养箱中培养24小时。24小时后，用磷酸盐缓冲液清洗细胞2次，并更换成无血清角化细胞基底培养基。在各孔中，用下述表4浓度的中草药复合提取液进行处理，并反应30分钟后，分别用金黄色葡萄球菌肽聚糖(10μg/ml)、金黄色葡萄球菌肽聚糖(50μg/ml)及金黄色葡萄球菌肽聚糖(50μg/ml)+脂多糖(1μg/ml)处理。其中，金黄色葡萄球菌肽聚糖(PGSA)作为从葡萄球菌中提取的肽聚糖，是革兰氏阳性(+)菌的细胞壁的主要组成成分，并且已知细菌的细胞膜成分会诱发炎症。另外，脂多糖(LPS)为革兰氏阴性(-)菌的细胞膜的主要组成成分，并且已知脂多糖是炎症诱发的主要原因。

在37℃，5%CO₂培养箱中培养24小时后，取出培养液对白细胞介素-8(Interleukin-8，IL-8)进行酶联免疫吸附试验，测试结果如表5-6所示。

表5：

项目	白细胞介素-8的分泌（pg/ml)
		无处理对照组	874.6
PGSA(10μg/ml)	4768.6
		PGSA(50μg/ml)	5926.4
PGSA(50μg/ml)+LPS(1μg/ml)	6904.5
		样品1(50ppm)	920.5
样品2(50ppm)	934.8
		样品3(50ppm)	925.1
样品4(50ppm)	1800.4
		样品5(50ppm)	1104.3
样品6(50ppm)	3615.4
		样品7(50ppm)	3716.1

表6：

项目	白细胞介素-8的分泌（pg/ml)
		无处理对照组	874.6
PGSA(10μg/ml)	4768.6
		PGSA(50μg/ml)	5926.4
PGSA(50μg/ml)+LPS(1μg/ml)	6904.5
		样品8(50ppm)	2409.8
样品9(50ppm)	1802.5
		样品10(50ppm)	3826.1
样品11(50ppm)	3766.4
		样品12(50ppm)	1702.5
样品13(50ppm)	2831.6
		样品14(50ppm)	3101.5
样品15 (50ppm)	3648.5

可见，样品1-3和样品5能够显著减少及抑制因PGSA和脂多糖LPS而增加的白细胞介素-8的分泌，但样品5对白细胞介素-8的生成抑制效果不如样品1-2。样品4、6-15对白细胞介素-8的生成抑制效果不显著，远不如样品1-2。

三、皮肤中血液循坏测试

为了评价根据本发明组合物促进皮肤血液循环的效果，利用激光多普勒血流成像仪(Laser Doppler Perfusion Imager，LDPI)，测定皮肤中血液循环程度。已知LDPI是测定皮肤中的血液循环的仪器，并且其为目前广泛使用的仪器，是一种不仅可以测定皮肤毛细血管中的血液的速度及量，而且可以测出小动脉和小静脉中的流动的非常灵敏的仪器；

在恒温恒湿室里，用洗发水洗头后吹干，适应30分钟，并利用LDPI测定了初期值。用LDPI对脱发的80名志愿者头部的前、中、后的初期血流量进行测定，试验对象使用样品a-n（测试周期为一周，期间早晚各使用一次）后再次测定血流量，计算得出样品使用前后的血流量变化率，测试结果如表7-8所示。

表7：

样品	血流量变化率%
		样品a	16.5
样品b	15.4
		样品c	15.7
样品d	8.2
		样品e	12.4
样品f	4.2
		样品g	4.5

表8：

样品	血流量变化率%
		样品h	13.3
样品i	10.4
		样品j	8.9
样品k	9.2
		样品l	8.4
样品m	4.1
		样品n	3.8
样品15	5.3
		空白对照	3.7

可见，实施例所制成的样品和对比例所制成的样品相比，实施例能使皮肤血流量显著增加；样品a-n、样品15和空白对照组对比，样品a-c和样品e能较显著地增加血流量。

四、红细胞溶血实验

红细胞溶血实验是兔眼刺激性实验(Draize test)替代方法之一，基本原理是通过测定血红蛋白溶出量及变性程度来评价化学品对眼组织细胞的损伤。国际上主要将RBC实验用于评价化妆品及原料等化学品的眼刺激性研究。

将样品a-g进行红细胞溶血实验，本实验依照欧洲替代方法验证中心(ECVAM)的 RBC实验测试方法及分级标准；

L/D	分级
		＞ 100	无刺激
10＜ L/D ≤ 100	微刺激
		1＜ L/D≤ 10	轻度刺激性
0.1 ≤ L/D≤ 1	中度刺激性
		L/D ≤0.1	重度刺激性

其中，L/D为HC50与DI的比值，HC50为半数红细胞溶血浓度，DI为血红蛋白变性指 数；测试结果如下表所示。

实验项目	L/D	评价
			样品a	1531	无刺激
样品b	1357	无刺激
			样品c	1480	无刺激
样品d	648	无刺激
			样品e	1105	无刺激
样品f	95	微刺激
			样品g	110	无刺激
样品15	210	无刺激
			空白对照	2754	无刺激。

由表8可知，由HC₅₀与DI的比值L/D得出样品a-e、样品g、样品8和空白对照均无刺激性；样品f均呈微刺激。

五、皮脂抑制率

样品a-g的抑制皮脂分泌效果评价如下：选定认为皮脂分泌多的被试者男女30人，并在指定的部位上每天使用样品2-3次，每次使用时轻轻揉搓头皮1-2min，涂抹4周。采用皮脂量测量仪(Sebumeter SM810 ,C+K Electronic Co.德国)分别测定经过2周后和经过4周后的平均皮脂减少率(%)，以判断皮脂减少的效果，测试结果如下表所示。

可见，由实施例制成的样品a-c能有效的抑制分泌过多的皮脂；而样品d-g、样品8和空白对照抑制皮脂分泌的效果不显著。

六、人群试用调查统计

样品a-g在人群中的试用效果评价如下：种样品选定脱发的被试者男女各20人，确保在测试期间均使用同一种洗发水，并保证每天使用喷剂2-3次，每次使用时轻轻揉搓头皮1-2min，涂抹6周。测试期间，时隔两周回访，统计每次洗发后的掉发数、通过台湾CBS头皮影像分析仪记录头皮毛囊情况。

1、平均脱发量

测试结果如下表所示（单位：根）。

可见，由实施例制成的样品a-c能有效的减少试用人群的脱发量；而样品d-g、样品15和空白对照抑制脱发的效果不显著。

2、头皮毛囊情况

每组随机选取一名志愿者，观察其样品使用前后的头皮图像记录，样品a-b、样品d-g、样品8和空白对照使用前后的头皮毛囊情况如图1-4所示。可见，由实施例制成的样品a-c在使用六周后有明显的发根变粗，毛发变多的现象；而样品d-g、样品15和空白对照抑制脱发的效果不显著。

3、发量变化情况

对每组样品使用六周后的志愿者图像进行分析，比较了每组志愿者在用样前后其 发量的变化，测试结果如下表所示（单位：%）。

发量变化	样品a	样品b	样品c	样品d	样品e	样品f	样品g	样品15	空白对照
										明显变多	70	75	70	5	/	5	/	10	/
稍有变多	20	15	15	15	10	10	5	15	5
										无变化	10	10	15	75	75	80	80	70	85
稍有变少	/	/	/	10	10	5	10	5	10
										明显变少	/	/	/	/	5	/	5	/	/。

可见，由实施例制成的样品a-c在使用六周后发量“明显变多”占70%以上，对脱发的改善作用明显；样品d-g、样品15和空白对照在使用六周后发量“没变化”占70%以上，并出现发量变少的现象，说明其对脱发的改善效果不明显。

本发明抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物具有良好的抗炎抑菌、活血防脱、生发育发功效。本发明的制备方法通过多种中草药混合提取，避免引入过多杂质，保证了提取液活性成分的高纯度，温和不刺激；通过凝胶法将中药复合提取液和酵母提取物进行包裹保护，提高了有效成分的稳定性和高活性，使用时更具有针对性，药效强、效果明显，有效缩短治疗周期。

Claims (9)

1.一种抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物，其特征在于，由微胶囊包裹体和以下按重量份数计算的组分制备而成：

（A）何首乌 9-23份；

（B）侧柏叶 8-21份；

（C）姜根 5-18份；

（D）当归 3-13份；

（E）鳢肠 3-13份；

（F）胡椒籽 2-8份；

（G）辣椒果 2-8份；

（H）酵母提取物 0.01-10份；

所述微胶囊包裹体包括材质不同的第一包裹体和第二包裹体；所述第一包裹体和第二包裹体分别为壳聚糖、海藻糖、明胶、阿拉伯胶、三聚磷酸钠、聚乳酸、聚乙交酯丙交酯、聚乙二醇中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物，其特征在于，所述酵母提取物为二裂酵母提取物、毕赤酵母提取物、假丝酵母/柬埔寨藤黄发酵 提取物中的至少一种。

3.一种权利要求1所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.按配比将何首乌、侧柏叶、姜根、当归、鳢肠、胡椒籽、辣椒果洗净后干燥、粉粹、过筛，制得植物粉末；

b.将所述植物粉末用浓度为60-85%的乙醇溶液浸泡，料液比为1:15-1:55，浸泡温度为75-90℃，浸泡时间≤6h，离心取滤液，即得第一滤液；

c.萃取：将步骤b所得滤渣用浓度为30-60%乙醇溶液浸泡30-60min，移至超声-微波协同萃取仪中进行中萃取，微波功率为100-1000W，微波功率由小至大调节3-5次，每次调节功率后萃取2-8min，静置冷却至室温，离心取滤液，即得第二滤液；

d.将步骤c中所得滤渣采用步骤c所述萃取方法提取，即得第三滤液；

e.纯化浓缩：将所述第一滤液、第二滤液和第三滤液混合后进行大孔树脂纯化，洗脱剂为浓度60-80%的乙醇溶液，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，取滤液在温度为58-75℃的条件下，进行真空旋转蒸发浓缩回收乙醇，即得中药复合提取液；

f.包裹：将1份的第一包裹体粉末溶于2份浓度为1%的冰乙酸溶液和98份的水中，35-40℃搅拌4-8h，过滤取滤液，制得质量百分比为1%的第一包裹体-乙酸溶液；加入1mol/L的NaOH调节pH至3.8-6.5后，置于温度为25℃，功率为100-400W的条件下超声处理10-30min，加入质量百分比为0.5-2.5%的乳化剂，58-68℃恒温搅拌30-60min至均匀，降温至25-35℃，加入所述中药复合提取液和酵母提取物，再以2滴/s的速率滴入0.5-2mg/ml的第二包裹体溶液，搅拌20-50min，即得中药复合提取液微胶囊悬液；

g.将所述中药复合提取液微胶囊悬液在温度为4℃，转速为10000-18000r/min的条件下离心30-60min，取下层用质量分数0.9%的生理盐水悬浮，以2-5%的冻干保护剂于-20℃冷冻干燥，即得微胶囊中草药组合物。

4.根据权利要求3所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物的制备方法，其特征在于，步骤a中，干燥温度为55-65℃，干燥时间为5-8h。

5.根据权利要求3所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物的制备方法，其特征在于，步骤e中，大孔树脂纯化所用树脂为AB-8、D1300、D101、HPD100中的至少一种。

6.根据权利要求3所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物的制备方法，其特征在于，所述乳化剂为吐温20、吐温80、单甘酯、TR-1、TR-2中的至少一种。

7.根据权利要求3所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物的制备方法，其特征在于，冻干保护剂为多元醇、分子量＜20000的聚乙二醇或二者的混合物。

8.根据权利要求7所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物的制备方法，其特征在于，所述多元醇为甘露醇、甘油、山梨醇、季戊四醇、双甘油、二丙二醇中的至少一种。

9.一种复合植物防脱液的制备方法，其特征在于，步骤为：将权利要求1所述的抑菌抗炎活血的微胶囊中草药组合物溶解于溶剂中，即得复合植物防脱液；其中，所述溶剂为水、多元醇或二者的混合物。

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