CN111544553B - 一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物及应用 - Google Patents

一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物及应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，该组合物由下述按重量份计的原料制备而成：藏荆芥挥发油1‑20份、郁金乙醇提取液1‑20份。本发明以天然植物挥发油及提取物为主要原料，不含有化学驱虫剂，安全无副作用，具有良好的驱蚊、止痒功效。

Description

一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物及应用
技术领域
本发明属于精细化工日用品技术领域，具体涉及的是一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物及其制备方法。
背景技术
近年来,随着全球气候变暖愈加明显，蚊虫个体数量及相应危害与日俱增。除了对人畜的骚扰、叮咬外，蚊虫的主要危害在于传播黄热病、登革热、疟疾等疾病。据统计，全球每年死于蚊虫传播类疾病的人群达到200万人。
国内外常用灭蚊产品主要以氯菊酯等拟除虫菊酯类为主。然而，上述化学合成灭蚊剂存在药物耐药性、对人畜的毒副作用、药物残留及环境污染等问题。另外，用于化妆品驱蚊领域的避蚊胺(DEEF)可通过阻断蚊虫对体表排除的二氧化碳及汗液中乳酸的识别，达到较理想的驱蚊效果。然而，长期暴露于该化学产品中，可能导致中枢神经系统紊乱,继而引发癫痫、麻痹等副作用。欧盟及WHO等国际组织于2006年起已陆续限制其使用。
蚊虫在叮刺人体时，其唾液中含有的过敏原、天然抗原蛋白、腺苷脱氨酶等变态反应相关蛋白将随之注入皮肤，进而导致肥大细胞脱颗粒中抗原-抗体反应介导的组织胺释放。而过量的组织胺不仅加速、加重皮肤瘙痒及过敏反应，也参与免疫细胞炎症反应，终导致被叮咬部位红肿、刺痛、瘙痒等变态反应。现用于蚊虫性皮炎的治疗药物包括糖皮质激素类、抗组胺药、局部麻醉药等。然而，上述化学药物均存在不同程度的耐药性或其它副作用。
有鉴于此，有必要提供一种以天然植物为来源的驱蚊效果优良、持续时间长、止痒效果显著、安全无毒、环保且对人体刺激性小的替代产品。本发明中，将天然植物精油及提取物组合使用，既可以满足驱蚊、止痒的作用，又能够保证不出现刺激皮肤等副作用。
藏荆芥(Nepeta angustifolia C.Y.Wu)，又名萨都那保，为唇形科荆芥属植物，主要生长于海拔3600～4600米的林边、山坡路边、草地等地，在西藏南部、中部地区分布广泛，主产于拉萨、山南、日喀则等地区，为西藏独有的药材。藏荆芥在西藏民间以地上部分入药，味辛、苦，性凉，主治神魂惊厥、卒中、出血性脑梗死、创伤及疼痛等症，具有消炎、止痛等功效。《中华本草·藏药卷》记载：本品“息风止痉，消肿止痛，主治癫痫抽搐，创伤肿痛”，《新修晶珠本草》认为本品的“镇静、止痛，治癫痫、头痛”，《晶珠本草》指出其“治癫痫，脑溢血，疮伤及疼痛等症”。目前，对于藏荆芥的化学成分与药理作用已有部分研究，表明藏荆芥中主要含挥发油、黄酮类和萜类化合物，并具有解痉、抗炎、镇痛、抗氧化、抗病原微生物等药理活性。
郁金为姜科姜黄属植物温郁金(Curcuma rcenyujin Y，H.Chen et C.Ling)、姜黄(Curcuma longa L.)、广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)或蓬莪术(Curcumaphaeocaulis Val.)的干燥块根，主要产于我国四川、福建、浙江、广西等地。本药性寒，味辛、苦，归心、肝、胆经，具有活血行气止痛、清心解郁、利胆退黄、凉血止血之功效。现代药学研究表明其含有挥发油、姜黄素、多糖、少量微量元素等成分，具有抗氧化、抗炎、保肝、降血脂、抗癌、免疫调节等诸多药理作用。
发明内容
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明的目的是提供一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物及其制备方法。
为了实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，以重量份计，其原料包括：藏荆芥挥发油1-20份、郁金乙醇提取液1-20份。
所述一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入2-50倍的水，浸泡30-60min，采用水蒸汽蒸馏方法提取1-5h，在油水分离器中静置分离2-3h后，收集得到藏荆芥挥发油。
(2)干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入8-15倍的30-90％乙醇，60-90℃下提取60-120min，提取两次，过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
优选地，一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，以重量份计，其原料包括：藏荆芥挥发油1-3份、郁金乙醇提取液1-3份。
上述含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物可用于制备多种剂型，包括但不限于溶液剂、喷雾剂、涂膜剂、乳剂、软膏剂、凝胶剂。
与现有技术相比，本发明有益效果主要体现在：
(1)本发明获得的天然植物驱蚊止痒组合物是以天然植物挥发油及提取物为主要原料，不含有化学驱虫剂，安全无副作用，具有良好的驱蚊、止痒功效；
(2)本发明中天然植物驱蚊止痒组合物的原料为藏荆芥挥发油和郁金提取物，发明人发现，上述两种原料具有显著的协同增效作用，与两种原料单独比较，驱蚊和止痒效果增强显著。这可能与藏荆芥挥发油、郁金乙醇提取液混合后，藏荆芥挥发油中的成分与郁金中的姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素等成分，在蚊虫叮咬后产生的皮肤变态反应、免疫应答过程中，可发挥协同增效作用。发明人在反复进行两种原料配伍比例与驱蚊止痒功效相关性的实验基础上，摸索并确定最佳和有效比例范围，从而保障该组合物的驱蚊止痒效果及其在相关产品领域中的应用。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步说明本发明的技术解决方案，这些实施例不能理解为是对技术方案的限制。
实施例1
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，以重量份计，其原料包括：藏荆芥挥发油1份、郁金乙醇提取液20份。
所述一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入30倍的水，浸泡30min，采用水蒸汽蒸馏方法提取1h，在油水分离器中静置分离2h后，收集得到藏荆芥挥发油。
(2)干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入8倍的60％乙醇，90℃下提取60min，提取两次，过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
实施例2
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，以重量份计，其原料包括：藏荆芥挥发油1份、郁金乙醇提取液10份。
所述一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入5倍的水，浸泡45min，采用水蒸汽蒸馏方法提取3h，在油水分离器中静置分离3h后，收集得到藏荆芥挥发油。
(2)干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入10倍的30％乙醇，70℃下提取90min，提取两次，过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
实施例3
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，以重量份计，其原料包括：藏荆芥挥发油1份、郁金乙醇提取液5份。
所述一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入2倍的水，浸泡60min，采用水蒸汽蒸馏方法提取2.5h，在油水分离器中静置分离2.5h后，收集得到藏荆芥挥发油。
(2)干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入12倍的40％乙醇，60℃下提取120min，提取两次，过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
实施例4
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，以重量份计，其原料包括：藏荆芥挥发油2份、郁金乙醇提取液1份。
所述一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入40倍的水，浸泡50min，采用水蒸汽蒸馏方法提取4h，在油水分离器中静置分离3h后，收集得到藏荆芥挥发油。
(2)干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入12倍的75％乙醇，80℃下提取100min，提取两次，过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
实施例5
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，以重量份计，其原料包括：藏荆芥挥发油5份、郁金乙醇提取液1份。
所述一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入35倍的水，浸泡40min，采用水蒸汽蒸馏方法提取4.5h，在油水分离器中静置分离2h后，收集得到藏荆芥挥发油。
(2)干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入15倍的50％乙醇，75℃下提取75min，提取两次，过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
实施例6
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，以重量份计，其原料包括：藏荆芥挥发油10份、郁金乙醇提取液1份。
所述一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入20倍的水，浸泡50min，采用水蒸汽蒸馏方法提取3.5h，在油水分离器中静置分离3h后，收集得到藏荆芥挥发油。
(2)干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入9倍的65％乙醇，75℃下提取110min，提取两次，过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
实施例7
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物
一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，以重量份计，其原料包括：藏荆芥挥发油20份、郁金乙醇提取液1份。
所述一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入50倍的水，浸泡35min，采用水蒸汽蒸馏方法提取5h，在油水分离器中静置分离3h后，收集得到藏荆芥挥发油。
(2)干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入12倍的55％乙醇，80℃下提取100min，提取两次，过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
实施例8
将实施例1-7的天然植物驱蚊止痒组合物与对照1、对照2进行驱蚊止痒对比实验，探究藏荆芥挥发油和郁金提取物协同增效作用与否。
其中：
对照1包括以下组分：藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入50倍的水，浸泡60min，后进行水蒸气蒸馏5h，采用水蒸汽蒸馏方法提取5h，在油水分离器中静置分离3h后，收集得到藏荆芥挥发油。
对照2包括以下组分：干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入50％乙醇，85℃下提取120min，提取两次；过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
对照3包括以下组分：市售蚊虫驱避止痒剂(卡波姆0.6％，乙醇30％，驱蚊酯25％，羟哌酯15％，乳酸薄荷酯0.3％，二异丙胺0.4％，去离子水28.7％)。
实施例9
天然植物驱蚊止痒组合物驱蚊效果评价
1实验样品
本发明实施例1-8样品及对照1、2、3样品。
2供试虫种和品系
白纹伊蚊，室内饲养正常品系，羽化后4～5天雌成蚊后供测定。
3实验方法
3.1攻击力试验
蚊笼内装入≥350只蚊子，将暴露5cm×5cm的手臂(其他部位严密遮盖)伸入蚊笼内，放置2min，落在手臂上的蚊子数≥20只视为攻击力合格，落在手臂上的蚊子数<20只视为攻击力不合格蚊虫，需更换攻击力合格蚊虫进行试验(重新进行攻击力试验，直至攻击力合格为止)。
3.2驱蚊实验
按GB/T 13917.9－2009《农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验及评价》要求，选择攻击力合格的白纹伊蚊和小白鼠。将不同样品直接涂抹在小白鼠腹部暴露皮肤(2.0cm×2.0cm)进行测试，涂抹剂量均为2mL/cm2，其他部位严密遮蔽。涂布2h后将小白鼠放入含有300只雌蚊的蚊笼内5min，观察有无蚊虫吸血。若有1只蚊虫停落吸血即判为实验结束。按统一纳入标准选择小白鼠，采用完全随机设计方法将小白鼠分为11组，每组6只。计算有效保护时间(保护率＞95％时的保护时间)。
3.3统计方法
试验数据采用SPSS22.0统计软件进行统计分析，统计量用均值±标准差
Figure BDA0002566232830000061
表示，组间比较用单因素方差分析。
4实验结果
表1天然植物驱蚊止痒组合物的驱蚊性能考察
Figure BDA0002566232830000062
注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。
实施例10
天然植物驱蚊止痒组合物抑痒效果评价
1实验样品
本发明实施例1-8样品。
2实验方法
2.1动物模型建立及分组给药
将72只小鼠适应性饲养1周后，随机分为12组：空白对照组、组织胺组、本发明实施例1样品、本发明实施例2样品、本发明实施例3样品、本发明实施例4样品、本发明实施例5样品、本发明实施例6样品、本发明实施例7样品、本发明实施例8样品(对照1、2、3)，每组6只。实验前2d剃光小鼠颈背部毛发，面积约为2cm×3cm。实验开始时，用医用棉签连续2次于注射部位涂抹给药，每次给药量为2mL，共涂抹3d。于第4天给药后1h，除空白对照组外，每组小鼠颈背部皮内注射组织胺50μL/只。给予组织胺后，将小鼠置于观察笼内，在安静、无人环境下用摄像仪录像30min，观察小鼠行为学挠痒情况，记录小鼠挠痒次数。
2.2统计方法
试验数据采用SPSS22.0统计软件进行统计分析，统计量用均值±标准差
Figure BDA0002566232830000071
表示，组间比较用单因素方差分析。
3实验结果
表2天然植物驱蚊止痒组合物的抑痒效果考察
Figure BDA0002566232830000072
注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。与组织胺组比较，#P<0.05，##P<0.01。
由表1及表2结果可知，与对照1，2相比，本发明实施例1-7驱蚊抑痒效果显著；实施例4驱蚊抑痒效果最佳，显著优于对照3。表明藏荆芥挥发油和郁金提取物具有显著的协同增效作用，当两者比例为2：1时驱蚊抑痒效果最为显著。
实施例11
天然植物驱蚊止痒组合物抑制组织胺生成效果评价
1实验样品
本发明实施例4、实施例8(对照1、对照2、对照3)样品进行减压冷冻干燥，供细胞实验使用。
2实验方法
2.1细胞模型建立及分组给药
小鼠肥大细胞MC/9细胞株购自于美国模式生物保藏中心(ATCC)。将MC/9细胞株接种于含10％FBS和1％青霉素/链霉素双抗的IMEM培养基。并在37℃、5％CO2的细胞培养箱中培养，取对数生长期细胞用于试验。在组胺生成试验中，将细胞接种于24孔板，接种密度为1×105个/mL并培养12小时。然后用本发明实施例4、实施例8(对照1、对照2、对照3)进行减压冷冻干燥所得样品(100μg/mL)预给药保护12h，再采用丙二醇甲醚醋酸酯(PMA,50nM)和钙离子导入剂A23187(1μM)诱导MC/9细胞24h。诱导结束后，收集细胞培养上清液，采用ELISA试剂盒检测组织胺的生成。
2.2统计方法
试验数据采用SPSS22.0统计软件进行统计分析，统计量用均值±标准差
Figure BDA0002566232830000081
表示，组间比较用单因素方差分析。
3实验结果
表3天然植物驱蚊止痒组合物的抑制组织胺生成效果考察
Figure BDA0002566232830000082
注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。与PMA/A23187组比较，#P<0.05，##P<0.01。
实施例12
天然植物驱蚊止痒组合物抑制炎症效果评价
1实验样品
本发明实施例4、实施例8(对照1、对照2、对照3)样品进行减压冷冻干燥，供细胞实验使用。
2实验方法
2.1细胞模型建立及分组给药
小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞株购自于美国模式生物保藏中心(ATCC)。将RAW264.7细胞株接种于含10％FBS和1％青霉素/链霉素双抗的DMEM高糖培养基,于37℃、5％CO2的细胞培养箱中培养,取对数生长期细胞用于试验。将细胞接种于24孔板，接种密度为1×105个/mL并培养12小时。然后用本发明实施例4、实施例8(对照1、对照2、对照3)进行减压冷冻干燥所得样品(100μg/mL)预给药保护24h，再以脂多糖(LPS，1μg/mL)诱导RAW264.7细胞24h产生炎症反应，诱导结束后，采用Griess法检测NO生成量。
2.2统计方法
试验数据采用SPSS22.0统计软件进行统计分析，统计量用均值±标准差
Figure BDA0002566232830000091
表示，组间比较用单因素方差分析。
3实验结果
表4天然植物驱蚊止痒组合物的抑制巨噬细胞NO生成效果考察
Figure BDA0002566232830000092
注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。与LPS组比较，#P<0.05，##P<0.01。
由表3及表4结果可知，本发明实施例4的组织胺、炎症抑制效果优于对照1、2。表明，相比于藏荆芥挥发油和郁金提取物单独给药，其混合使用具有显著的协同增效作用；当两者比例为2：1时组织胺、炎症抑制效果最为显著。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物，其特征在于，该组合物由下述按重量份计的原料制备而成：藏荆芥挥发油1-3份、郁金乙醇提取液1-3份；藏荆芥挥发油和郁金乙醇提取液的制备方法包括以下步骤：
(1)藏荆芥粉碎后，过20目筛，按照质量比加入2-50倍的水，浸泡30-60min，采用水蒸汽蒸馏方法提取1-5h，在油水分离器中静置分离2-3h后，收集得到藏荆芥挥发油；
(2)干燥的郁金粉碎后，过20目筛，按照质量比加入8-15倍的30-90％乙醇，60-90℃下提取0-120min，提取两次，过滤，合并两次提取的药液，真空减压浓缩，得浓度为1g生药/mL的郁金乙醇提取液。
2.根据权利要求1所述的一种含藏荆芥挥发油的天然植物驱蚊止痒组合物在制备驱蚊止痒产品中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述驱蚊止痒产品为驱蚊止痒溶液剂、驱蚊止痒喷雾剂、驱蚊止痒涂膜剂、驱蚊止痒乳剂、驱蚊止痒软膏剂、驱蚊止痒凝胶剂。
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