CN115530285A - 一种微生物饲料添加剂、制备方法及应用 - Google Patents

一种微生物饲料添加剂、制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于微生物发酵技术领域，公开了一种微生物饲料添加剂、制备方法及应用，所述微生物饲料添加剂的制备方法包括：应用培养基进行试管种培养；将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙混合于水中，调节pH值，灭菌后装入三角瓶中进行高压灭菌；放入无菌室中进行冷却，在酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支；设置相应的温度和转速，振荡培养，当达到标准后，放入冰箱中备用；选取合适的塑料杯，塑料杯发酵生产；将谷物粉、中药材或秸秆粉、饼粉、石灰进行混合，加水拌匀；调节pH值，将料装入塑料杯用报纸封口并用棉绳扎紧，进行灭菌接种培养。本发明可加快畜禽生长速度，提高饲料转化率，增强机体免疫力，提高抗病性和成活率。

Description

一种微生物饲料添加剂、制备方法及应用
技术领域
本发明属于微生物发酵技术领域，尤其涉及一种微生物饲料添加剂、制备方法及应用。
背景技术
饲料添加剂在饲料中的作用十分重要，饲用抗生素在预防和抵御畜禽疾病及促进动物生长方面起到重大作用。但抗生素的大量使用增加了动物体内微生物的抗药性和耐药性；抑制体内的有益菌群的生长，引起肠道内微生态失衡和各种肠道疾病；同时，抗生素会在动物体内大量残留，危害人类健康。为维护我国动物源性食品安全和公共卫生安全，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料。微生物饲料添加剂基于微生态平衡原理，胃肠道微生态环境通过多种属菌群相互依存、相互制约而维持稳定的内环境，完成各种营养生理学作用，有效抑制致病菌的增殖，防止感染。微生物添加剂以其安全、高效、无药物残留的优势，成为了一种能够替代抗生素的新型促生长剂。在提高动物对饲料的利用率，维持动物肠道微生态平衡，促进动物生长，防治动物疾病和提高动物生产性能等方面发挥着重要作用，提高畜禽的品质。微生物添加剂可以有效调节胃肠道微环境平衡，避免应激作用造成的损失。在饲料及养殖业领域也得到了广泛的应用。目前，微生物饲料添加剂存在成本较高，菌种来源不明确，作用机理不够清楚以及有益菌活性不稳定等诸多缺点。
通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：现有技术中的微生物饲料添加剂无法提高饲料转化率，加快畜禽生长速度；并且不具有安全、高效、环保等特点。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种微生物饲料添加剂、制备方法及应用。
本发明是这样实现的，一种微生物饲料添加剂的制备方法，所述微生物饲料添加剂的制备方法包括：菌种的提纯、复壮及优化培养；应用细黄链霉菌发酵农产品下脚料，培养基原料配方的筛选与配比，使得菌种生长健壮，代谢产物多，产品质量好；创新液体菌种制备与固体容器发酵配套的生产体系，降低能源、原料、设备投入；添加药用植物原料，提质增效；生产具有转化饲料利用率、提高生物产量、抗病和提高商品品质的绿色微生物饲料添加剂产品。
细黄链霉菌发酵产物含有生长素、抗菌素、苯乙酸、瑚珀酸及细胞分裂素等；经氨基酸分析仪检测含有丙氨酸、组氨酸、门冬氨酸、缬氨酸、苏氨酸、甘氨酸、胱氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸和脯氨酸等17种氨基酸；采用HPLC法分析，含有B1、B2、B5、B6、B12等多种维生素。产品安全性评价，ICR小鼠经口给予“微生物饲料添加剂”2.4-1g/kg剂量，未引起毒性反应，对神经肌肉和感官无刺激作用，对照组在整个试验过程中未见任何异常；未测出微生物饲料添加剂的LD50。最大耐受量实验结果表明：微生物饲料添加剂对小鼠摄食量，饮水量未见明显影响；整个实验阶段中，受试组和空白对照组小鼠体重均正常增长，两组间无显著差异。脏器重量和系数检查中，对小鼠各主要脏器系数无明显影响，组织病理学检查中未见异常病变。在试验剂量条件下，ICR小鼠经口给予“微生物饲料添加剂”剂量9.6g/kg,未对小鼠产生明显的毒性反应。
具体过程为：
步骤一，应用高氏1号培养基进行试管种培养；
步骤二，制作摇瓶液体菌种，将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙混合于水中，调节pH值，灭菌后装入三角瓶中进行高压灭菌；
步骤三，高压灭菌完成后，放入无菌室中进行冷却，在超净工作台中酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支；放置在摇床上，设置相应的温度和转速，进行振荡培养，当达到标准后，放入冰箱中备用；
步骤四，选取合适的塑料杯，进行塑料杯发酵生产；将谷物粉、中药材或秸秆粉、饼粉、石灰进行混合，并加水拌匀；调节pH值，将料装入塑料杯用报纸封口并用棉绳扎紧，进行灭菌接种培养。
本发明中试管种培养保证优良、纯正种质；步骤二、步骤三灭菌、接种纯菌种液体培养，确保没有杂菌污染；液体摇床培养时间短，质量可控，保障种源供应。步骤四，原料资源化再利用，设备简单。整体节约资源、设备和时间成本，生产优质高效产品。
进一步，所述步骤二中，将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙混合于水中，调节pH值，灭菌后装入三角瓶中进行高压灭菌具体过程为：
将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙各1％混合于100毫升水中，调节PH值8-8.5，灭菌后7-7.5，然后装入500毫升的三角瓶中，高压灭菌30分钟。
进一步，所述步骤三中，高压灭菌完成后，放入无菌室中进行冷却，在超净工作台中酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支具体过程为：
放入无菌室，冷至30℃时，在超净工作台中酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支。进一步，所述步骤三中，放置在摇床上，设置相应的温度和转速，进行振荡培养，当达到标准后，放入冰箱中备用具体过程为：
于25-35℃，放于120-225转/分钟摇床上，振荡培养30小时后，检查无杂菌异味，涂片镜检达到菌丝均匀粗壮，无自溶现象后，放入冰箱中备用。
进一步，所述步骤四中，选取合适的塑料杯，具体为：塑料杯高15-25厘米，上口15-20厘米，下口10-15厘米。
进一步，所述步骤四中，将谷物粉、中药材或秸秆粉、饼粉、石灰进行混合，并加水拌匀具体过程为：
将谷物粉10-15％、中药材或秸秆粉65-80％、饼粉5-10％、石灰1-2％，所有配料加水拌匀。
进一步，所述步骤四中，调节pH值，将料装入塑料杯用报纸封口并用棉绳扎紧具体过程为：
调PH值，达7.5-8.5之间，将料装入塑料杯的1/3至1/2之间，用报纸封口并用棉绳扎紧。
进一步，所述步骤四中，灭菌接种培养具体过程为：
在压力1.2-2.5公斤/厘米2、温度为121～135℃，灭菌1.5小时；取出，待料温降至40-45℃时，按原辅料质量比5～10％接种细黄链霉菌的种子，接种后保持在22-35℃之间；放置在通风良好的地方，培养5天，干燥、粉碎、计量，包装成品。
本发明的另一目的在于提供一种利用所述的微生物饲料添加剂的制备方法制备的微生物饲料添加剂。
本发明的另一目的在于提供一种利用所述的微生物饲料添加剂的制备方法制备的微生物饲料添加剂在养猪、养牛、养鸡和水产养殖中的应用。
结合上述的技术方案和解决的技术问题，请从以下几方面分析本发明所要保护的技术方案所具备的优点及积极效果为：
第一、针对上述现有技术存在的技术问题以及解决该问题的难度，紧密结合本发明的所要保护的技术方案以及研发过程中结果和数据等，详细、深刻地分析本发明技术方案如何解决的技术问题，解决问题之后带来的一些具备创造性的技术效果。具体描述如下：
本发明提供的发酵菌质是由微生物发酵中药材等培养而成的有效微生物及其代谢产物，是替代抗生素的微生物制剂；广泛应用于养猪、养牛、养鸡和水产养殖上，可加快畜禽生长速度，提高饲料转化率，增强机体免疫力，提高抗病性和成活率；具有安全、高效、环保等特点，是绿色无抗生素养殖的新型绿色饲料添加剂；增强消化功能，增加生长速度，提高产肉率；防止大肠杆菌、沙门氏菌引起的疾病，预防腹泻，降低死亡率，减少用药成本；提高肉的品质，无药物残留，口感更好；改善环境，驱虫、防恶臭。本发明用于各种饲料添加，具有调节肠道微生态平衡，防治多种肠道疾病，提高饲料吸收率，增强机体免疫力，提高畜禽产量的作用。育肥猪，按0.5％饲料量添加发酵菌质，每日喂三次，连续喂15日后。猪表现为：好静不好动，饮食后喜卧；喜吃稀食，好喝水；食欲旺，吃的多；肉皮嫩，毛顺；不易生病，上膘快；提高猪的饲料转化率，耗饲料少，提早出栏，降低了饲料成本，减少其他场地、人工等成本；其次猪增重明显，会提前出栏，每提前出栏一天就会减少一天的猪舍管理清洁费用，可以改善环境，驱虫、防恶臭；防治猪的多种肠道病害、增强免疫力，节省医药的风险费用；提高肉的品质，无药物残留，口感更好。以200克发酵菌质/吨饲料的添加量，喂子鸡42日后，比未添加发酵菌质的鸡平均增重50克，且可以治疗鸡痢疾。
第二，把技术方案看做一个整体或者从产品的角度，本发明所要保护的技术方案具备的技术效果和优点，具体描述如下：本发明采用无致病性的细黄链霉菌菌株，以保证微生物饲料添加剂的安全性。本发明建立试管种-液体菌种-固体发酵培养的生产体系，兼顾资源、培养效率及成本、劳动效率、环境条件和经济效益。它以农副产品为主要原料，通过该菌株研制成功新型微生物饲料添加剂，产品无毒无害、对人畜安全、生产过程无三废排放，无污染治理；同时也是发展高品质绿色畜产品的环境友好型饲料添加剂。
第三，作为本发明的权利要求的创造性辅助证据，还体现在以下几个重要方面：
本发明的技术方案转化后的预期收益和商业价值为：应用细黄链霉菌发酵农产品下脚料，开展循环利用，降低能源、原料、设备投入。成本控制在每吨1万元左右，市场售价在每吨5万元以上，用量少，效益丰厚。
附图说明
图1是本发明实施例提供的微生物饲料添加剂的制备方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
一、解释说明实施例。为了使本领域技术人员充分了解本发明如何具体实现，该部分是对权利要求技术方案进行展开说明的解释说明实施例。
如图1所示，本发明实施例提供的微生物饲料添加剂的制备方法包括：
S101：应用高氏1号培养基进行试管种培养；
S102：制作摇瓶液体菌种，将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙混合于水中，调节pH值，灭菌后装入三角瓶中进行高压灭菌；
S103：高压灭菌完成后，放入无菌室中进行冷却，在超净工作台中酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支；放置在摇床上，设置相应的温度和转速，进行振荡培养，当达到标准后，放入冰箱中备用；
S104：选取合适的塑料杯，进行塑料杯发酵生产；将谷物粉、中药材或秸秆粉、饼粉、石灰进行混合，并加水拌匀；调节pH值，将料装入塑料杯用报纸封口并用棉绳扎紧，进行灭菌接种培养。
本发明实施例提供的S102中，将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙混合于水中，调节pH值，灭菌后装入三角瓶中进行高压灭菌具体过程为：
将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙各1％混合于100毫升水中，调节PH值8-8.5，灭菌后7-7.5，然后装入500毫升的三角瓶中，高压灭菌30分钟。
本发明实施例提供的S103中，高压灭菌完成后，放入无菌室中进行冷却，在超净工作台中酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支具体过程为：
放入无菌室，冷至30℃时，在超净工作台中酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支。
本发明实施例提供的S103中，放置在摇床上，设置相应的温度和转速，进行振荡培养，当达到标准后，放入冰箱中备用具体过程为：
于26-32℃，放于120-225转/分钟摇床上，振荡培养30小时后，检查无杂菌异味，涂片镜检达到菌丝均匀粗壮，无自溶现象后，放入冰箱中备用。
本发明实施例提供的S104中，选取合适的塑料杯具体为：塑料杯高15-25厘米，上口15-20厘米，下口10-15厘米。
本发明实施例提供的S104中，将谷物粉、中药材或秸秆粉、饼粉、石灰进行混合，并加水拌匀具体过程为：
将谷物粉10-15％、中药材或秸秆粉65-80％、饼粉5-10％、石灰1-2％，所有配料加水拌匀。
本发明实施例提供的S104中，调节pH值，将料装入塑料杯用报纸封口并用棉绳扎紧具体过程为：
调PH值，达7.5-8.5之间，将料装入塑料杯的1/3至1/2为宜，用报纸封口并用棉绳扎紧。
本发明实施例提供的S104中，灭菌接种培养具体过程为：
在压力1.2-2.5公斤/厘米、温度为121～135℃，灭菌1.5小时。取出待料温降至不烫手(40-45℃)时，按原辅料质量比5～10％接种细黄链霉菌的种子，接种后保持在22-35℃之间。放置在通风良好的地方，培养5天，干燥、粉碎、计量，包装成品。
二、实施例相关效果的证据。本发明实施例在研发或者使用过程中取得了一些积极效果，和现有技术相比的确具备很大的优势，下面内容结合试验过程的数据、图表等进行描述。
本发明实施例提供的细黄链霉菌-。代小伟，徐琛，孙宝启，丁自勉，孙群。丰益菌剂处理对玉米种子萌发及幼苗生长的影响，中国种业2011.12。
经高压液相色谱和氨基酸测定仪分析，发酵菌质含有维生素B1、B2、B5、B6、B12等多种维生素和17种氨基酸。白或米黄色均匀粉末、水分≤11％、有益菌数≥2.5亿/克。按配合饲料重量的0.1％～0.5％比例均匀添加到饲料中。发酵菌质是由微生物发酵中药材等培养而成的有效微生物及其代谢产物，是替代抗生素的微生物制剂。广泛应用于养猪、养牛、养鸡和水产养殖上，可加快畜禽生长速度，提高饲料转化率，增强机体免疫力，提高抗病性和成活率；具有安全、高效、环保等特点，是绿色无抗生素养殖的新型绿色饲料添加剂；增强消化功能，增加生长速度，提高产肉率；防止大肠杆菌、沙门氏菌引起的疾病，预防腹泻，降低死亡率，减少用药成本；提高肉的品质，无药物残留，口感更好；改善环境，驱虫、防恶臭。本发明用于各种饲料添加，具有调节肠道微生态平衡，防治多种肠道疾病，提高饲料吸收率，增强机体免疫力，提高畜禽产量的作用。
育肥猪，按0.5％饲料量添加发酵菌质，每日喂三次，连续喂15日后。猪表现为：好静不好动，饮食后喜卧；喜吃稀食，好喝水；食欲旺，吃的多；肉皮嫩，毛顺；不易生病，上膘快。提高猪的饲料转化率，耗饲料少，提早出栏，降低了饲料成本，减少其他场地、人工等成本；其次猪增重明显会提前出栏，每提前出栏一天就会减少一天的猪舍管理清洁费用，可以改善环境，驱虫、防恶臭；防治猪的多种肠道病害、增强免疫力，节省医药的风险费用；提高肉的品质，无药物残留，口感更好。以200克发酵菌质/吨饲料的添加量，喂子鸡42日后，比未添加发酵菌质的鸡增重50克。同时可以治疗治鸡痢疾。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述微生物饲料添加剂的制备方法包括：
步骤一，应用高氏1号培养基进行试管种培养；
步骤二，制作摇瓶液体菌种，将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙混合于水中，调节pH值，灭菌后装入三角瓶中进行高压灭菌；
步骤三，高压灭菌完成后，放入无菌室中进行冷却，在超净工作台中酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支；放置在摇床上，设置相应的温度和转速，进行振荡培养，当达到标准后，放入冰箱中备用；
步骤四，选取合适的塑料杯，进行塑料杯发酵生产；将谷物粉、中药材或秸秆粉、饼粉、石灰进行混合，并加水拌匀；调节pH值，将料装入塑料杯用报纸封口并用棉绳扎紧，进行灭菌接种培养。
2.如权利要求1所述微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙混合于水中，调节pH值，灭菌后装入三角瓶中进行高压灭菌具体过程为：
将蔗糖、玉米粉、豆饼粉、棉籽饼粉、碳酸钙各1％混合于100毫升水中，调节PH值8-8.5，灭菌后7-7.5，然后装入500毫升的三角瓶中，高压灭菌30分钟。
3.如权利要求1所述微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述步骤三中，高压灭菌完成后，放入无菌室中进行冷却，在超净工作台中酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支具体过程为：
放入无菌室，冷至30℃时，在超净工作台中酒精灯火焰上接入斜面试管菌种一支。
4.如权利要求1所述微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述步骤三中，放置在摇床上，设置相应的温度和转速，进行振荡培养，当达到标准后，放入冰箱中备用具体过程为：
于26-32℃，放于120-225转/分钟摇床上，振荡培养30小时后，检查无杂菌异味，涂片镜检达到菌丝均匀粗壮，无自溶现象后，放入冰箱中备用。
5.如权利要求1所述微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述步骤四中，选取合适的塑料杯具体为：塑料杯高15-25厘米，上口15-20厘米，下口10-15厘米。
6.如权利要求1所述微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述步骤四中，将谷物粉、中药材或秸秆粉、饼粉、石灰进行混合，并加水拌匀具体过程为：
将谷物粉10-15％、中药材或秸秆粉65-80％、饼粉5-10％、石灰1-2％，所有配料加水拌匀。
7.如权利要求1所述微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述步骤四中，调节pH值，将料装入塑料杯用报纸封口并用棉绳扎紧具体过程为：
调PH值，达7.5-8.5之间，将料装入塑料杯的1/3至1/2之间，用报纸封口并用棉绳扎紧。
8.如权利要求1所述微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述步骤四中，灭菌接种培养具体过程为：
在压力1.2-2.5公斤/厘米、温度为121～135℃，灭菌1.5小时；取出待料温降至40-45℃时，按原辅料质量比5～10％接种细黄链霉菌的种子，接种后保持在22-35℃之间；放置在通风良好的地方，培养5天，干燥、粉碎、计量，包装成品。
9.一种利用如权利要求1～8任意一项所述的微生物饲料添加剂的制备方法制备的微生物饲料添加剂。
10.一种利用如权利要求1～8任意一项所述的微生物饲料添加剂的制备方法制备的微生物饲料添加剂在养猪、养牛、养鸡和水产养殖中的应用。
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