CN115524420A - 一种盐酸多巴胺中基因毒性杂质胡椒基氯检测方法及盐酸多巴胺质控方法 - Google Patents
一种盐酸多巴胺中基因毒性杂质胡椒基氯检测方法及盐酸多巴胺质控方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115524420A CN115524420A CN202211159297.7A CN202211159297A CN115524420A CN 115524420 A CN115524420 A CN 115524420A CN 202211159297 A CN202211159297 A CN 202211159297A CN 115524420 A CN115524420 A CN 115524420A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dopamine hydrochloride
- solution
- temperature
- detection
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 51
- CTENFNNZBMHDDG-UHFFFAOYSA-N Dopamine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 CTENFNNZBMHDDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 43
- 229960001149 dopamine hydrochloride Drugs 0.000 title claims abstract description 43
- DWSUJONSJJTODA-UHFFFAOYSA-N 5-(chloromethyl)-1,3-benzodioxole Chemical compound ClCC1=CC=C2OCOC2=C1 DWSUJONSJJTODA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 231100000024 genotoxic Toxicity 0.000 title description 8
- 230000001738 genotoxic effect Effects 0.000 title description 8
- 239000012535 impurity Substances 0.000 title description 8
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 31
- 239000001307 helium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 12
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 71
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 70
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 25
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 18
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 17
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 12
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 12
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 9
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 8
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 8
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 7
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 6
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 6
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 5
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 5
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 4
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 4
- 241000722363 Piper Species 0.000 description 4
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 4
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 4
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 4
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 102000015554 Dopamine receptor Human genes 0.000 description 2
- 108050004812 Dopamine receptor Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000012740 beta Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010079452 beta Adrenergic Receptors Proteins 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 2
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000004872 arterial blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001595 contractor effect Effects 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 210000000713 mesentery Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000012495 positive regulation of renal sodium excretion Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000008327 renal blood flow Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/16—Injection
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/30—Control of physical parameters of the fluid carrier of temperature
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/72—Mass spectrometers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/025—Gas chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
- G01N2030/324—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed speed, flow rate
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明提出了一种盐酸多巴胺中胡椒基氯检测方法和盐酸多巴胺质控方法，检测方法包括：采用气相色谱质谱联用仪对待测盐酸多巴胺样品进行检测；其中，所述检测采用分流进样、载气恒流和程序升温方式进行。利用本发明的检测方法可以有效地分离检测出胡椒基氯，具有准确性强、分离度好、检测限低、适用性、耐用性和专属性好、操作简便、快捷、效率高等优点，适于广泛应用。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域。具体地，本发明涉及盐酸多巴胺中胡椒基氯检测方法。
背景技术
多巴胺是去甲肾上腺素生物合成的前体，为中枢性递质之一，具有兴奋β-受体、α-受体和多巴胺受体的作用，兴奋心脏β-受体可增加心肌收缩力，增加心输出量。兴奋多巴胺受体和α-受体使肾、肠系膜、冠脉及脑血管扩张、血流量增加，对周围血管有轻度收缩作用，升高动脉血压，使肾血流量增加，肾小球滤过率增加，从而促使尿量增加，尿钠排泄也增加。临床用于各种类型的休克，尤其适用于休克伴有心收缩力减弱、肾功能不全者。
目前，盐酸多巴胺主流的制备工艺如下：
该方法以胡椒乙胺为起始原料，在盐酸和苯酚作用下经一步开环反应得到盐酸多巴胺，该路线步骤简短，但合成工艺过程可产生微量胡椒基氯。胡椒基氯为卤代烷烃，属于基因毒性杂质，根据ICH M7指导原则，胡椒基氯需严格控制其含量。基因毒性杂质直接或间接损伤细胞DNA，产生基因突变或体内诱变，具有致癌可能或者倾向。近年来基因毒性杂质因其重大的安全风险，逐渐引起了广泛关注，世界各国的法规机构如ICH、FDA、EMA等都对基因毒性杂质有了更明确的要求，越来越多的药企在新药研发过程中着重关注基因毒性杂质的控制和检测。因此，盐酸多巴胺中基因毒性杂质胡椒基氯检测方法亟待开发。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本发明提出了一种盐酸多巴胺中胡椒基氯检测方法和盐酸多巴胺质控方法，利用该检测方法可以有效地分离检测出胡椒基氯，具有准确性强、分离度好、检测限低、适用性、耐用性和专属性好、操作简便、快捷、效率高等优点，适于广泛应用。
在本发明的一个方面，本发明提出了一种盐酸多巴胺中胡椒基氯检测方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：采用气相色谱质谱联用仪对待测盐酸多巴胺样品进行检测；其中，所述检测采用分流进样、载气恒流和程序升温方式进行。
发明人采用气相色谱质谱联用仪对盐酸多巴胺中的胡椒基氯进行检测时发现，样品进样方式、载体流速和升温方式会显著影响检测效果，当采用分流进样方式、载气流速恒定、以程序升温方式，有助于胡椒基氯与盐酸多巴胺分离，不易出现拖尾或前伸等问题，具有准确性强、分离度好、检测限低、适用性、耐用性和专属性好、操作简便、快捷、效率高等优点，适于广泛应用。
根据本发明的实施例，上述盐酸多巴胺中胡椒基氯检测方法还可以具有下列附加技术特征：
根据本发明的实施例，所述分流进样采用的分流比为1:1～15:1，优选3:1～7:1。发明人发现分流比会影响目标峰的峰强度，经过大量实验筛选获得上述较佳分流比，由此，可以避免色谱柱过载或者响应值过低。
根据本发明的实施例，所述载气的流速为0.5～5ml/min，优选0.8～1.4ml/min。发明人发现载气的流速会影响分离效果，若流速过快，将降低分离效能，若流速过慢，色谱峰容易拖尾或者前伸。进而，发明人经过大量实验得到上述较佳载气流速，由此，分离效果佳。
根据本发明的实施例，所述程序升温方式如下：起始温度为70～90℃，维持1～3min，再以25～40℃/min的速率升至180～200℃，并维持1～1.8min，再以25～40℃/min的速率升至280～320℃，维持0.5～2min。发明人经过大量实验得到上述较佳程序升温方式，由此，分离效果佳。
根据本发明的实施例，所述检测采用离子扫描模式，m/z为51、77、135，驻留时间为0.08、0.08、0.08。由此，以便于准确地鉴定出胡椒基氯。
根据本发明的实施例，所述检测采用的进样口温度为260～300℃，传输线温度为280～320℃，离子源温度为280～320℃。由此，可以使得胡椒基氯气化完全，避免污染离子源。
根据本发明的实施例，所述检测采用的色谱柱为安捷伦DB-35MS，进样量为1μl，载气为氦气，分流比为5:1，进样口温度为280℃，传输线温度为300℃，离子源温度为300℃，流速为1.0ml/min，溶剂延迟为2.50min，扫描方式为离子扫描模式，m/z为51、77、135，驻留时间为0.08、0.08、0.08，程序升温方式为：起始温度为80℃，维持2min，再以30℃/min的速率升至190℃，并维持1.5min，再以30℃/min的速率升至300℃，维持1min。
发明人经过大量实验得到上述较佳检测条件，由此具有准确性强、分离度好、检测限低、适用性、耐用性和专属性好、操作简便、快捷、效率高等优点，适于规模化应用。
在本发明的另一方面，本发明提出了一种盐酸多巴胺质控方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：利用前面所述方法对待测盐酸多巴胺样品进行检测，确定检测结果；基于所述检测结果，确定所述待测盐酸多巴胺样品质量是否达标。由此，采用根据本发明实施例的方法可以准确判断出盐酸多巴胺质量是否符合要求，从而有效地把控质量。
本发明对于如何基于检测结果确定盐酸多巴胺质量是否达标的方式不作严格限定，可以根据实际情况灵活选择，例如，可以将检测得到的胡椒基氯或盐酸多巴胺含量与预设阈值进行比较，当盐酸多巴胺含量高于阈值和/或胡椒基氯含量低于阈值，则判定为质量达标。本发明要求胡椒基氯的限度为不得过1500ng/g(1.5ppm)。
本领域技术人员能够理解的是，前面针对盐酸多巴胺中胡椒基氯检测方法所描述的特征和优点，同样适用于该盐酸多巴胺质控方法，在此不再赘述。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1显示了根据本发明实施例2中空白溶液色谱图；
图2显示了根据本发明实施例2中对照品溶液色谱图；
图3显示了根据本发明实施例2中供试品溶液色谱图；
图4显示了根据本发明实施例2中100％加标供试品溶液色谱图；
图5显示了根据本发明实施例2中的线性图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
在该实施例中，按照下列方法检测盐酸多巴胺溶液中胡椒基氯含量：
1、溶液配制
对照品溶液的制备：取胡椒基氯对照品适量，精密称定，置于量瓶中，用正己烷溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含胡椒基氯约0.090μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取供试品(盐酸多巴胺原料药)约0.12g，精密称定，置于5ml离心管中，准确加入1ml一级水完全溶解，加入2ml正己烷，涡旋30s，取正己烷层过0.22μm尼龙滤膜，上机测试。
2、检测
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lμl，注入气相色谱质谱联用仪，按外标法以峰面积测定，具体的检测条件如下：
表1 GC-MS检测参数
实施例2
在该实施例中，按照下列方法检测盐酸多巴胺溶液中胡椒基氯含量：
1、溶液配制
对照品溶液的制备：取胡椒基氯对照品适量，精密称定，置于量瓶中，用正己烷溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含胡椒基氯约0.090μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取供试品(盐酸多巴胺原料药)约0.12g，精密称定，置于5ml离心管中，准确加入1ml一级水完全溶解，加入2ml正己烷，涡旋30s，取正己烷层过0.22μm尼龙滤膜，上机测试。
2、检测
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lμl，注入气相色谱质谱联用仪，按外标法以峰面积测定，具体的检测条件如下：
表2 GC-MS检测参数
实施例3
在该实施例中，按照下列方法检测盐酸多巴胺溶液中胡椒基氯含量：
1、溶液配制
对照品溶液的制备：取胡椒基氯对照品适量，精密称定，置于量瓶中，用正己烷溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含胡椒基氯约0.090μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取供试品(盐酸多巴胺原料药)约0.12g，精密称定，置于5ml离心管中，准确加入1ml一级水完全溶解，加入2ml正己烷，涡旋30s，取正己烷层过0.22μm尼龙滤膜，上机测试。
2、检测
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lμl，注入气相色谱质谱联用仪，按外标法以峰面积测定，具体的检测条件如下：
表3 GC-MS检测参数
实施例4
在该实施例中，对实施例1的检测方法进行方法学验证：
1、溶液配制：
(1)对照品溶液配制
胡椒基氯对照品贮备液1(浓度：4523μg/ml)：取胡椒基氯标准品适量，精密称定0.02262g置5ml量瓶中，加甲醇溶解，用甲醇定容至刻度，摇匀，即得。
中间液1(浓度：104.029μg/ml)：精密量取23μl胡椒基氯对照品贮备液l，置于1ml量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
中间液2(浓度：10.403μg/ml)：精密量取100μl中间液1，置于1ml量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
中间液3(浓度：1.040μg/ml)：精密量取100μl中间液2，置于1ml量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
对照品溶液(浓度：93.600ng/ml)：精密量取90μl中间液3，置于1ml量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
(2)检测限与定量限溶液配制
定量限溶液(浓度：26.000ng/ml)：精密量取25μl中间液3，置于1ml量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
检测限溶液(浓度：13.520ng/ml)：精密量取13μl中间液3，置于1ml量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
(3)线性溶液配制
线性溶液1(浓度：26.000ng/ml)：精密量取25μl中间液3，置于1ml量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
线性溶液2(浓度：46.800ng/ml)：精密量取45μl中间液3，置于1ml量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
线性溶液3(浓度：93.600ng/ml)：精密量取90μl中间液3，置于1ml量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
线性溶液4(浓度：140.440ng/ml)：精密量取27μl中间液2，置于2ml量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
线性溶液5(浓度：187.254ng/ml)：精密量取36μl中间液2，置于2ml量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
(4)供试品溶液及空白溶液配制
取供试品约0.12g，精密称定，置于5ml离心管中，准确加入1ml一级水完全溶解，加入2ml正己烷，涡旋30s，取正己烷层1ml过0.22μm尼龙滤膜，即得供试品溶液。取正己烷作空白溶液。
(5)加标供试品溶液配制
定量限加标供试品溶液：取供试品约0.12g，精密称定，置于5ml离心管中，准确加入50μl中间液3，再准确加入1ml一级水完全溶解，加入2ml正己烷，涡旋30s，取正己烷层1ml过0.22μm尼龙滤膜，即得。
50％加标供试品溶液：取供试品约0.12g，精密称定，置于5ml离心管中，准确加入9μl中间液2，再准确加入1ml一级水完全溶解，加入2ml正己烷，涡旋30s，取正己烷层1ml过0.22μm尼龙滤膜，即得。
100％加标供试品溶液：取供试品约0.12g，精密称定，置于5ml离心管中，准确加入18μl中间液2，再准确加入1ml一级水完全溶解，加入2ml正己烷，涡旋30s，取正己烷层1ml过0.22μm尼龙滤膜，即得。
150％加标供试品恪液：取供试品约0.12g，精密称定，置于5ml离心管中，准确加入27μl中间液2，再准确加入1ml一级水完全溶解，加入2ml正己烷，涡旋30s，取正己烷层1ml过0.22μm尼龙滤膜，即得。
(6)中间精密度溶液配制
中间液4(浓度：104.029μg/ml)：精密量取23μl对照品贮备液l，置于1ml量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
中间液5(浓度：10.403μg/ml)：精密量取100μl中间液4，置于1ml量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
中间液6(浓度：1.040μg/ml)：精密量取100μl中间液5，置于1ml量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
中间精密度100％加标供试品溶液：取供试品约0.12g，置于5ml离心管中，准确加入18μl中间液5，再准确加入1ml一级水完全溶解，加入2ml正己烷，涡旋30s，取正己烷层1ml过0.22μm尼龙滤膜，即得。
2、系统适用性
取对照品溶液连续进样6次，结果如下：
表4 系统适用性结果
结论：经验证，对照品溶液连续进样6次的峰面积的RSD小于10.0％，系统适用性符合规定。
3、专属性
将空白溶液、供试品溶液、对照品溶液1、100％加标供试品溶液、分别进行测试，检测结果如下表和图1-图4所示。
表5 专属性
结论：经验证，空白溶液、供试品溶液、100％加标供试品溶液和对照品溶液对目标物定性离子无干扰，专属性符合规定。
4、准确度
取加标供试品溶液各三份分别进行测试，结果如下：
表6 准确度结果
注：样品含量用于计算，因此将未检出结果记为0；准确度1为50％加标供试品溶液，准确度2为100％加标供试品溶液，准确度3为150％加标供试品溶液。
结论：经验证，9份加标供试品溶液的回收率在70％-125％范围内，RSD小于15.0％，准确度符合规定。
5、精密度-重复性
因供试品溶液含量较低，采用加标的方法测定重复性。取6份100％加标供试品溶液分别进行测试，结果如下：
表7 重复性结果
结论：经验证，加标供试品溶液含量RSD小于10.0％，重复性符合规定。
6、精密度-中间精密度
由另外一名试验人员(实验人员B)，配制各中间精密度溶液，于不同时间分别进行测试，与原试验人员(实验人员A)的重复性结果进行对比，结果如下：
表8 中间精密度系统适用性结果(实验人员B)
表9 中间精密度结果(实验员B)
表10 中间精密度回收率结果
注：样品含量用于计算，因此将未检出结果记为0。
表11 中间精密度结果(实验员A、B)
结论：经验证，不同试验人员12份加标供试品溶液的回收率在70％-125％范围内，含量RSD小于15.0％，中间精密度符合规定。
7、检测限与定量限
取检测限溶液与定量限溶液分别进行测试。
表12 检测限与定量限结果
结论：经验证，检测限最小信噪比大于3，检测限符合规定；定量限最小信噪比大于10，定量限低于限度的30％，且定量限重复性试验RSD小于10.0％，定量限符合规定。
8、线性与范围
将线性溶液依次进行测试，检测结果如下表和图5所示：
表13 线性结果
结论：经验证，在准确度验证范围内，线性相关系数均大于0.990，且截距小于限度浓度峰面积的25.0％，线性及范围符合规定。
9、耐用性(溶液稳定性)
取对照品溶液、100％加标供试品溶液，分别于不同时间点进行测试，结果如下：
表14 对照品溶液稳定性结果
表15 100％加标供试品溶液稳定性结果
结论：经验证，同一份对照品溶液和加标供试品溶液在不同时间点检测，峰面积的RSD小于15.0％，溶液稳定性符合规定。
总结：经验证，该分析方法的系统适用性、专属性、准确度、精密度、检测限、定量限、线性范围及耐用性(溶液稳定性)均符合规定，表明该分析方法适用于盐酸多巴胺中胡椒基氯的检测。
检测结果
＜LOQ表示检测结果低于定量限(相当于样品中浓度定量限)
检测结论：经检测，该批样品的胡椒基氯检测结果小于定量限。
实施例5
在该实施例中，按照下列方法检测盐酸多巴胺溶液中胡椒基氯含量：
1、溶液配制
同实施例1。
2、检测
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lμl，注入气相色谱质谱联用仪，按外标法以峰面积测定，具体的检测条件如下：
表16 GC-MS检测参数
实施例1和实施例5检测结果表明，采用不同的样品进样方式会影响检测结果，当采用不分流模式时，因进样浓度过大导致基线噪音干扰严重，故采用分流模式进样。
当分流比越大，结果的效应值就越小，当分流比为20:1时，灵敏度接近限度值。为了确保该分析方法的灵敏度符合要求，将分流比确定为5:1和10:1时，基线噪音较小，灵敏度符合限度要求，其中分流比为5:1时，效果最佳。
实施例6
在该实施例中，按照下列方法检测盐酸多巴胺溶液中胡椒基氯含量：
1、溶液配制
同实施例1。
2、检测
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lμl，注入气相色谱质谱联用仪，按外标法以峰面积测定，具体的检测条件如下：
表17 GC-MS检测参数
实施例1和实施例6的检测结果表明，采用不同的载气流速会影响主峰分离效果和保留时间，采用载气流速为1.0ml/min和2.0ml/min时，主峰分离效果好，保留时间适宜，其中，1.0ml/min效果较佳。当载气流速为3.0ml/min时，出峰太快，分离效果不好，峰不能有效分开。
实施例7
在该对比例中，按照实施例1的方法检测盐酸多巴胺溶液中胡椒基氯含量，区别在于，升温程序如下：
表18 程序升温方式
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (10)
1.一种盐酸多巴胺中胡椒基氯检测方法，其特征在于，包括：
采用气相色谱质谱联用仪对待测盐酸多巴胺样品进行检测；
其中，所述检测采用分流进样、载气恒流和程序升温方式进行。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分流进样采用的分流比为1:1～15:1。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分流进样采用的分流比为3:1～7:1。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载气的流速为0.5～5ml/min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载气的流速为0.8～1.4ml/min。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述程序升温方式如下：
起始温度为70～90℃，维持1～3min，再以25～40℃/min的速率升至180～200℃，并维持1～1.8min，再以25～40℃/min的速率升至280～320℃，维持0.5～2min。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测采用离子扫描模式，m/z为51、77、135，驻留时间为0.08、0.08、0.08。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测采用的进样口温度为260～300℃，传输线温度为280～320℃，离子源温度为280～320℃。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测采用的色谱柱为安捷伦DB-35MS，进样量为1μl，载气为氦气，分流比为5:1，进样口温度为280℃，传输线温度为300℃，离子源温度为300℃，流速为1.0ml/min，溶剂延迟为2.50min，扫描方式为离子扫描模式，m/z为51、77、135，驻留时间为0.08、0.08、0.08，程序升温方式为：起始温度为80℃，维持2min，再以30℃/min的速率升至190℃，并维持1.5min，再以30℃/min的速率升至300℃，维持1min。
10.一种盐酸多巴胺质控方法，其特征在于，包括：
利用权利要求1～9任一项所述方法对待测盐酸多巴胺样品进行检测，确定检测结果；
基于所述检测结果，确定所述待测盐酸多巴胺样品质量是否达标。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211159297.7A CN115524420A (zh) | 2022-09-22 | 2022-09-22 | 一种盐酸多巴胺中基因毒性杂质胡椒基氯检测方法及盐酸多巴胺质控方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211159297.7A CN115524420A (zh) | 2022-09-22 | 2022-09-22 | 一种盐酸多巴胺中基因毒性杂质胡椒基氯检测方法及盐酸多巴胺质控方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115524420A true CN115524420A (zh) | 2022-12-27 |
Family
ID=84698955
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211159297.7A Pending CN115524420A (zh) | 2022-09-22 | 2022-09-22 | 一种盐酸多巴胺中基因毒性杂质胡椒基氯检测方法及盐酸多巴胺质控方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115524420A (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090280230A1 (en) * | 2006-04-21 | 2009-11-12 | Rhondi Shigemura | Comestible compositions comprising high potency savory flavorants, and processes for producing them |
| CN105503814A (zh) * | 2015-12-07 | 2016-04-20 | 东北制药集团股份有限公司 | 一种洋茉莉醛的制备方法 |
| CN106432212A (zh) * | 2016-09-21 | 2017-02-22 | 苏州弘森药业股份有限公司 | 一种合成吡贝地尔的方法 |
| CN112724120A (zh) * | 2020-12-29 | 2021-04-30 | 爱斯特（成都）生物制药股份有限公司 | 一种连续流反应合成胡椒基氯的方法 |
-
2022
- 2022-09-22 CN CN202211159297.7A patent/CN115524420A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090280230A1 (en) * | 2006-04-21 | 2009-11-12 | Rhondi Shigemura | Comestible compositions comprising high potency savory flavorants, and processes for producing them |
| CN105503814A (zh) * | 2015-12-07 | 2016-04-20 | 东北制药集团股份有限公司 | 一种洋茉莉醛的制备方法 |
| CN106432212A (zh) * | 2016-09-21 | 2017-02-22 | 苏州弘森药业股份有限公司 | 一种合成吡贝地尔的方法 |
| CN112724120A (zh) * | 2020-12-29 | 2021-04-30 | 爱斯特（成都）生物制药股份有限公司 | 一种连续流反应合成胡椒基氯的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 何湛等: "吡贝地尔的合成工艺研究", 中国药物化学杂志, vol. 20, no. 04, 31 August 2010 (2010-08-31), pages 285 - 286 * |
| 宋鑫等: "超高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中的4种β-受体激动剂", 环境与职业医学, vol. 33, no. 02, 31 December 2016 (2016-12-31), pages 193 - 196 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112014510B (zh) | 一种hplc法测定马来酸桂哌齐特中间体中氯乙酸残留检测方法 | |
| CN113092639A (zh) | 一种超高效液相色谱质谱联用检测利伐沙班有关物质含量的方法 | |
| CN108152425B (zh) | 一种高效液相色谱检测芝麻油木脂素的方法 | |
| CN110887911B (zh) | 一种动物源食品中克霉唑残留的气相色谱-串联质谱检测方法 | |
| CN115524420A (zh) | 一种盐酸多巴胺中基因毒性杂质胡椒基氯检测方法及盐酸多巴胺质控方法 | |
| CN111103384A (zh) | 一种液质联用测定人尿液中内源性高香草酸和香草扁桃酸浓度的方法 | |
| CN111122736A (zh) | 一种用于检测布瓦西坦中间体中对映异构体的方法 | |
| CN113933424B (zh) | 阿哌沙班起始物料中杂质的检测方法 | |
| CN109633015B (zh) | 一种英托利匹特中添加剂的检测方法 | |
| CN116465990B (zh) | 苯磺酸阿曲库铵与苯磺酸顺阿曲库铵原料药中杂质1，5-己二醇、1，6-己二醇、3-甲基-1，5-戊二醇的检测方法 | |
| CN114594174A (zh) | 吲达帕胺制剂中杂质a的检测方法 | |
| CN112305134A (zh) | 曲唑酮的检测方法 | |
| CN113252803A (zh) | 一种丙戊酸钠原料中工艺及降解杂质测定方法 | |
| CN109298101A (zh) | 一种小麦粉及其制品中间苯二酚的高效液相色谱测定方法 | |
| CN115436522B (zh) | 一种图卡替尼中间体的杂质含量的检测方法 | |
| CN115728416B (zh) | 1-溴乙基乙酸酯及其杂质的气相色谱检测方法 | |
| CN109324139A (zh) | 一种烟叶中玉米素核苷液液萃取-液相色谱-串联质谱的测定方法 | |
| CN115266983B (zh) | 一种利用气相色谱质谱法对消毒产品抗、抑菌剂中抗真菌药物进行测定的方法 | |
| CN116626145B (zh) | 基于多反应监测的蛋氨酸亚氨基代砜的定量检测方法 | |
| CN115436525B (zh) | Llts-m3及其有关物质的检测方法和应用 | |
| CN115184498B (zh) | N-Boc-哌嗪中有关物质哌嗪的检测方法 | |
| CN116930368B (zh) | 一种司替戊醇异构体的检测方法 | |
| CN111595954B (zh) | 吲达帕胺原料药中dcc和dcu含量的检测方法 | |
| CN112305100B (zh) | 一种药物中基因毒性杂质溴化苄含量的检测方法 | |
| CN110849995B (zh) | 吲达帕胺原料药中dcu的检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |