CN115466338A - 一种黄大茶多糖及其药物组合物和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种黄大茶多糖及其药物组合物和应用,是以黄大茶多糖与5‑氟尿嘧啶为活性成分,其中黄大茶多糖ULYTP‑1的分子量为1.29×104Da;黄大茶多糖与5‑氟尿嘧啶的质量比为10‑20:1。本发明首次发现相较于单独使用5‑氟尿嘧啶,黄大茶多糖与5‑氟尿嘧啶联用不仅有效提高抗肿瘤作用,而且可显著缓解5‑氟尿嘧啶的毒副作用。
Description
技术领域
本发明属于制药领域,具体涉及黄大茶多糖与5-氟尿嘧啶联用在制备治疗乳腺癌药物中的应用。
背景技术
目前,化疗是治疗乳腺癌的主要方式之一。由于化疗药物的使用容易引起血液系统不良反应、恶心呕吐、腹泻、脱发及肝肾功能受损等毒副作用,严重影响患者的接受程度。因此,在提高化疗药物治疗效果的同时,亟待解决化疗药物对体内毒副作用。
发明内容
本发明针对现有技术的不足,提供了一种黄大茶多糖与5-氟尿嘧啶联用在制备治疗乳腺癌药物中的应用。
首先,本发明提供了一种黄大茶多糖,其总糖含量为87.75%,糖醛酸含量为50.07%,相对分子量为1.29×104Da。
所述黄大茶多糖的单糖组成及摩尔比为半乳糖:半乳糖醛酸:鼠李糖:葡萄糖:阿拉伯糖:甘露糖=5.08:25.25:3.97:2.58:9.3:1。
所述黄大茶多糖是通过包括如下步骤的方法提取获得:
步骤1:将黄大茶与无水乙醇混合,60℃水浴环境下浸泡12h,除去乙醇,干燥、粉碎过80目筛,得到黄大茶干粉;
步骤2:向步骤1得到的黄大茶干粉中加入蒸馏水,真空封装后放入超高压设备,400MPa下进行超高压提取,得到的提取液经固液分离、减压浓缩、醇沉和冻干,制得黄大茶多糖。
步骤3:将步骤2得到的黄大茶多糖通过DEAE Sephrose FF色谱柱(XK26/40)进一步纯化。流动相分别为蒸馏水(60mL)和氯化钠溶液(0.1M,pH 7,40mL),流速为1mL/min。苯酚-硫酸法检测每5mL洗脱液的总糖含量。收集主要组分,浓缩,透析,冻干得到纯化黄大茶多糖组分ULYTP-1。
其次,基于上述黄大茶多糖,本发明还提供了一种药物组合物,包括所述黄大茶多糖和5-氟尿嘧啶。
所述药物组合物中黄大茶多糖与5-氟尿嘧啶为质量比为10-20:1。
第三,本发明还提供了所述药物组合物的应用,是以所述药物组合物作为治疗制剂,用于乳腺癌的治疗。
所述乳腺癌为三阴性乳腺癌。
本发明将包括黄大茶多糖与5-氟尿嘧啶的药物组合物联合用于乳腺癌治疗。在乳腺癌的治疗中,所述联合是指同时给药,即同时给予黄大茶多糖与5-氟尿嘧啶。
本发明通过动物体内试验证明,黄大茶多糖ULYTP-1联合5-Fu用药具有良好的抗肿瘤作用,能够缓解5-Fu引起的体重减轻,提高小鼠免疫器官指数及肝功能。
附图说明
图1是HPLC分子量和单糖组成分析:A为ULYTP-1的分子量分布图谱;B为标准单糖的HPLC色谱图(*表示溶剂峰。1-甘露糖、2-鼠李糖、3-葡萄糖醛酸、4-半乳糖醛酸、5-葡萄糖、6-半乳糖和7-阿拉伯糖);C为ULYTP-1的单糖组成的HPLC色谱图。
图2是各组小鼠肿瘤大小。
图3是各组小鼠的肝功能水平(A为ALT谷丙转氨酶;B为AST谷草转氨酶)。
具体实施方式
以下通过具体的实施描述黄大茶多糖与5-氟尿嘧啶联合在制备治疗乳腺癌药物中的应用,所举实施例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的保护范围。
实施例1:黄大茶多糖的制备及纯化
步骤1:将黄大茶与无水乙醇按照1:10比例混合,60℃水浴环境下浸泡12h,除去乙醇,干燥、粉碎过80目筛,得到黄大茶干粉。
步骤2:将步骤1得到的黄大茶干粉,按照料液比1:10加入蒸馏水,真空封装后放入超高压设备,设定压力为400MPa,保压时间为5min,提取温度为25℃,得到的提取液经固液分离、减压浓缩、醇沉和冻干,制得黄大茶多糖UHP-LYTP。
步骤3:用0.22μm膜对UHP-LYTP溶液进行过滤,将一定量的滤液放入DEAESephrose FF色谱柱(XK26/40)纯化。流动相分别为蒸馏水(60mL)和氯化钠溶液(0.1M,pH7,40mL),流速为1mL/min。采用每5mL法监测洗脱液的总碳水化合物含量。收集主要组分,浓缩,透析,冻干得到纯化的ULYTP-1。
步骤4:ULYTP-1的化学组成测定。总糖含量以葡萄糖为标准品,采用苯酚-硫酸法测定;蛋白质含量以牛血清白蛋白(BSA)为标准品,考马斯亮蓝G-250法测定;咔唑-硫酸法测定糖醛酸含量,之后分别在490nm、595nm和520nm处测量其吸光值。
表1 ULYTP-1的化学组成
实施例2:ULYTP-1单糖组成和分子量测定
步骤1:ULYTP-1的单糖组成分析采用酸水解-柱前PMP衍生化方法处理样品,高效液相色谱法分析测定。称取ULYTP-1(5mg)溶于5mL的三氟乙酸(2mol/L)中,氮气封管,110℃油浴8h使其充分水解。旋转蒸发仪旋出水分,加适量的去离子水,如此反复旋蒸至溶液pH为中性,加入1mL蒸馏水,备用。
步骤2:标准单糖和已水解的样品溶液中加入50μLPMP甲醇溶液(0.5mol/L)和50μLNaOH溶液(0.3mol/L),在70℃的水浴锅中反应30min进行PMP柱前衍生化,然后用50μLHCl(0.3mol/L)中和至中性。所得产物使用高效液相色谱检测,选用DAD检测器。HPLC柱温为30℃,色谱柱为Zorbox Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm),波长为245nm下检测。检测流动相A为乙腈,流动相B为0.05mol/L磷酸盐缓冲溶液。时间梯度洗脱0-60min,初始设置为流动相A:流动相B=17%:83%,最终洗脱至比例为流动相A:流动相B=20%:80%,进样量为10μL。
步骤3:采用去离子水洗脱,安捷伦高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)检测ULYTP-1的分子量。配制2mg/mL的ULYTP-1和葡聚糖标准品(T5、T12、T41、T100、T200)的溶液1mL,采用TSK Gel G6000 PWXL色谱柱(300×7.0mm,13μm),载气为N2,气体流速为2.5L/min,进样量为10μL。以标准品相对分子质量的对数(LgMw)和保留时间(Rt)作标准曲线,测得的ULYTP-1的分子量范围。
ULYTP-1的HPLC色谱图如图1A所示,它是一种成分均一的酸性茶多糖。根据不同分子量的右旋糖酐的标准曲线,计算出ULYTP-1的分子量为1.29×104Da。
表2 ULYTP-1的单糖组成
实施例3:ULYTP-1和5-Fu联合的抗肿瘤活性测定
步骤1:实验动物分组
经过为期一周的适应性喂养后,将48只BALB/c雌性小鼠随机分为6组(n=8),分别为正常组、模型组、ULYTP-1组、5-Fu组和ULYTP-1+5-Fu组。2周后,按以下方式处理:模型组,每日灌胃生理盐水。ULYTP-1组:每天给予ULYTP-1(400mg/kg)灌胃。5-Fu组:每日腹腔注射5-Fu(25mg/kg)。ULYTP-1联合5-Fu组:灌胃400mg/kg,联合腹腔注射25mg/kg5-Fu。除空白组外所有小鼠右腋窝皮下接种0.2mL制备的细胞悬液(1×106/mL)。18天后,小鼠禁食1晚,采集麻醉小鼠的血液。取小鼠的肿瘤组织、肝脏并称重。
步骤2:小鼠生活指标测定
在实验过程中,观察小鼠的活动模式和皮毛状况,记录每只小鼠的肿瘤长度和宽度。
步骤3:ULYTP-1和5-Fu联用对4T1荷瘤小鼠肿瘤抑制率、生活质量和免疫器官指数的影响
肿瘤抑制率(%)=[(A-B)/A]×100%
肿瘤抑制率在式中,A为模型组的平均肿瘤重量,B为各给药组的平均肿瘤重量。
表3 ULYTP-1联合5-Fu对4T1荷瘤小鼠肿瘤生长和免疫器官指数的影响。
每个值都是平均±SD。表中的-项表示该值为0。*P<0.05,**P<0.01是与空白组相比。#P<0.05,##P<0.01是与模型组相比。aP<0.05,aaP<0.01是与5-Fu组相比。
图2和表3结果显示5-Fu组和ULYTP-1+5-Fu组具有较高的肿瘤抑制率,5-Fu组小鼠胸腺指数和脾脏指数明显偏低,表明其免疫器官受损,而ULYTP-1+5-Fu组小鼠胸腺指数和脾脏指数基本恢复正常水平。
Claims (7)
1.一种黄大茶多糖,其特征在于:
所述黄大茶多糖的总糖含量为87.75%,糖醛酸含量为50.07%,相对分子量为1.29×104Da。
2.根据权利要求1所述的黄大茶多糖,其特征在于:
所述黄大茶多糖的单糖组成及摩尔比为半乳糖:半乳糖醛酸:鼠李糖:葡萄糖:阿拉伯糖:甘露糖=5.08:25.25:3.97:2.58:9.3:1。
3.根据权利要求1或2所述的黄大茶多糖,其特征在于所述黄大茶多糖是通过包括如下步骤的方法提取获得:
步骤1:将黄大茶与无水乙醇混合,60℃水浴环境下浸泡12h,除去乙醇,干燥、粉碎过80目筛,得到黄大茶干粉;
步骤2:向步骤1得到的黄大茶干粉中加入蒸馏水,真空封装后放入超高压设备,400MPa下进行超高压提取,得到的提取液经固液分离、减压浓缩、醇沉和冻干,制得黄大茶多糖;
步骤3:将步骤2得到的黄大茶多糖通过DEAE Sephrose FF色谱柱进一步纯化,得到纯化黄大茶多糖组分ULYTP-1。
4.一种基于权利要求1或2所述的黄大茶多糖的药物组合物,其特征在于:
所述药物组合物包括所述黄大茶多糖和5-氟尿嘧啶。
5.根据权利要求4所述的药物组合物,其特征在于:
所述药物组合物中黄大茶多糖与5-氟尿嘧啶为质量比为10-20:1。
6.一种权利要求4所述的药物组合物的应用,其特征在于:
以所述药物组合物作为治疗制剂,所述治疗制剂用于乳腺癌的治疗。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:
所述乳腺癌为三阴性乳腺癌。
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Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108853032A (zh) * | 2018-09-26 | 2018-11-23 | 海南卓泰制药有限公司 | 一种注射用氟尿嘧啶组合物冻干粉剂 |
CN108904521A (zh) * | 2018-09-04 | 2018-11-30 | 贵州师范学院 | 一种含百尾参多糖的抗肿瘤药物及其使用方法 |
CN108912236A (zh) * | 2018-09-29 | 2018-11-30 | 霍山县天下泽雨生物科技发展有限公司 | 一种具有抗肿瘤作用的霍山石斛精制多糖及其制备方法 |
CN111793660A (zh) * | 2020-09-02 | 2020-10-20 | 安徽大学 | 一种具有降血糖作用的黄大茶多糖 |
CN112920288A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-06-08 | 安徽大学 | 一种具有降脂活性的黄大茶酸性多糖及其制备方法和应用 |
CN114272259A (zh) * | 2021-06-15 | 2022-04-05 | 海南卓泰制药有限公司 | 一种氟尿嘧啶注射液及其制备方法 |
CN114751997A (zh) * | 2022-04-25 | 2022-07-15 | 安徽农业大学 | 一种具有抗炎活性的黄大茶多糖及其制备方法和应用、抗炎药物组合物 |
CN114835827A (zh) * | 2022-03-23 | 2022-08-02 | 安徽大学 | 一种超高压制取黄大茶多糖的方法及其应用 |
-
2022
- 2022-09-29 CN CN202211199516.4A patent/CN115466338B/zh active Active
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108904521A (zh) * | 2018-09-04 | 2018-11-30 | 贵州师范学院 | 一种含百尾参多糖的抗肿瘤药物及其使用方法 |
CN108853032A (zh) * | 2018-09-26 | 2018-11-23 | 海南卓泰制药有限公司 | 一种注射用氟尿嘧啶组合物冻干粉剂 |
CN108912236A (zh) * | 2018-09-29 | 2018-11-30 | 霍山县天下泽雨生物科技发展有限公司 | 一种具有抗肿瘤作用的霍山石斛精制多糖及其制备方法 |
CN111793660A (zh) * | 2020-09-02 | 2020-10-20 | 安徽大学 | 一种具有降血糖作用的黄大茶多糖 |
CN112920288A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-06-08 | 安徽大学 | 一种具有降脂活性的黄大茶酸性多糖及其制备方法和应用 |
CN114272259A (zh) * | 2021-06-15 | 2022-04-05 | 海南卓泰制药有限公司 | 一种氟尿嘧啶注射液及其制备方法 |
CN114835827A (zh) * | 2022-03-23 | 2022-08-02 | 安徽大学 | 一种超高压制取黄大茶多糖的方法及其应用 |
CN114751997A (zh) * | 2022-04-25 | 2022-07-15 | 安徽农业大学 | 一种具有抗炎活性的黄大茶多糖及其制备方法和应用、抗炎药物组合物 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
张肖娟等: "茶叶功能成分对乳腺癌作用的研究进展" * |
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Publication number | Publication date |
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