CN115433714A - 一种免疫细胞在治疗疾病中的应用及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种免疫细胞在治疗疾病中的应用及其制备方法，首先提供一种培养基组合物，其可用于免疫细胞TPKT的培养，其组分包括：A液和B液；其中，A液组成成分包括：基础培养基、IL‑2、IFN‑γ、GMCSF；还可进一步包括TNF‑α；B液组成成分包括：基础培养基、IL‑2、IFN‑γ；还可进一步包括IL‑12。本发明的培养基用于针对可识别、清除机体内表达变异蛋白的肿瘤前体细胞及影像学不可见得微小肿瘤的TPKT细胞的培养，可使免疫细胞的增殖速度更快、识别及免疫功能更强。
Description
技术领域
本发明属于细胞培养技术领域领域，具体是指一种免疫细胞在治疗疾病中的应用及其制备方法。
背景技术
免疫细胞治疗技术是运用生物技术治疗肿瘤的一种方法，能有效清除手术、放疗、化疗后残存的癌细胞及微小病灶，降低肿瘤的转移和复发，并有效地补充患者因患病而导致的白细胞数量下降的缺失，恢复和激活身体免疫机制，提高病人自身机体免疫能力，从而达到真正治疗肿瘤的目的。目前，对于机体内由于易感因素等造成的表达变异蛋白的肿瘤前体细胞及不可见微小肿瘤都不能进行准确的诊断，但可以通过免疫细胞治疗技术进行预防及治疗。
预防肿瘤发生的免疫细胞培养如何实现快速扩增，增强其对表达变异蛋白的肿瘤前体细胞及不可见微小肿瘤的识别及清除功能，细胞培养是关键，然而应用现有技术培养免疫细胞时其增长速度慢，免疫功能不强。针对这个问题，目前市场上现有的培养基配制技术还有待于改进和发展。
因此，亟待研究一种免疫细胞在治疗疾病中的应用及其制备方法来解决上述提出的问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题就是克服以上的技术缺陷，提供一种免疫细胞在治疗疾病中的应用及其制备方法。
为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：一种用于免疫细胞的培养基组合物，其组分包括：A液和B液；
其中，A液组成成分包括：基础培养基、IL-2、IFN-γ、GM-CSF；还可进一步包括TNF-β；
B液组成成分包括：基础培养基、IL-2、IFN-γ；
进一步的，IL-2、IFN-γ、GM-CSF、TNF-β在A液中的用量为：
IL-2，200-5000IU/ml；
IFN-γ，400-10000IU/ml；
GM-CSF，450-1500IU/ml；
TNF-β，10-500IU/ml。
进一步的，IL-2、IFN-γ、IL-12在B液中的用量为：IL-2，600-10000IU/ml；IFN-γ，600-10000IU/ml；
进一步的，所述基础培养基为无血清细胞培养基X-VIVO150或RPMI-1640。
进一步的，IL-2在A液与B液中的剂量范围分别为2500-4000IU/ml、5000-6500IU/ml。
进一步的，IFN-γ在A液与B液中的剂量范围分别为2000-4000IU/ml、2000-4000IU/ml。
进一步的，GM-CSF在A液的剂量范围为300-1000IU/ml。
一种免疫细胞在治疗疾病中的制备方法，该方法包括：以权利要求1～7任一项所述的培养基组合物分别制备A液与B液，其中，A液制备：无菌操作，基础培养基中加入IL-2、IFN- γ、GM-CSF，加或者不加TNF-β，搅拌5-10min；
B液制备：无菌操作，向基础培养基中加入IL-2、IFN-γ，搅拌5-10min；将A液、B 液分别调节pH值至7.3-7.4。
进一步的，所述的培养基组合物在培养预防肿瘤发生的免疫细胞中的应用。
本发明与现有技术相比的优点在于：本发明的免疫细胞培养基用于针对可识别、清除机体内表达变异蛋白的肿瘤前体细胞及影像学不可见得微小肿瘤的免疫细胞，可使TPKT细胞的增殖速度更快、识别及免疫功能更强，从而预防肿瘤的发生及复发。
具体实施方式
一种用于免疫细胞的培养基组合物，其组分包括：A液和B液；
其中，A液组成成分包括：基础培养基、IL-2、IFN-γ、GM-CSF；还可进一步包括TNF-β；
B液组成成分包括：基础培养基、IL-2、IFN-γ；
IIL-2、IFN-γ、GM-CSF、TNF-β在A液中的用量为：IL-2，200-5000IU/ml；IFN-γ，400-10000IU/ml；GM-CSF，450-1500IU/ml；TNF-β，10-500IU/ml。
进一步的，IL-2、IFN-γ、IL-12在B液中的用量为：IL-2，600-10000IU/ml；IFN-γ，600-10000IU/ml；
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一种免疫细胞在治疗疾病中的制备方法，该方法包括：以权利要求1～7任一项所述的培养基组合物分别制备A液与B液，其中，A液制备：无菌操作，基础培养基中加入IL-2、IFN- γ、GM-CSF，加或者不加TNF-β，搅拌5-10min；
B液制备：无菌操作，向基础培养基中加入IL-2、IFN-γ，搅拌5-10min；将A液、B 液分别调节pH值至7.3-7.4。
进一步的，所述的培养基组合物在培养预防肿瘤发生的免疫细胞中的应用。
以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，具体实施方式中所示的也只是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例，实际的结构并不局限于此。总而言之如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的结构方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种用于免疫细胞的培养基组合物，其组分包括：A液和B液；
其中，A液组成成分包括：基础培养基、IL-2、IFN-γ、GM-CSF；还可进一步包括TNF-β；
B液组成成分包括：基础培养基、IL-2、IFN-γ。
2.根据权利要求1所述的培养基组合物，其中，IL-2、IFN-γ、GM-CSF、TNF-β在A液中的用量为：
IL-2，200-5000IU/ml；
IFN-γ，400-10000IU/ml；
GM-CSF，450-1500IU/ml；
TNF-β，10-500IU/ml。
3.根据权利要求1所述的培养基组合物，其中，IL-2、IFN-γ、IL-12在B液中的用量为：IL-2，600-10000IU/ml；
IFN-γ，600-10000IU/ml。
4.根据权利要求1所述的培养基组合物，其中，所述基础培养基为无血清细胞培养基X-VIVO150或RPMI-1640。
5.根据权利要求1所述的培养基组合物，其中，IL-2在A液与B液中的剂量范围分别为2500-4000IU/ml、5000-6500IU/ml。
6.根据权利要求1所述的培养基组合物，其中，IFN-γ在A液与B液中的剂量范围分别为2000-4000IU/ml、2000-4000IU/ml。
7.根据权利要求1所述的培养基组合物，其中，GM-CSF在A液的剂量范围为300-1000IU/ml。
8.一种免疫细胞在治疗疾病中的制备方法，该方法包括：以权利要求1～7任一项所述的培养基组合物分别制备A液与B液，其中，A液制备：无菌操作，基础培养基中加入IL-2、IFN-γ、GM-CSF，加或者不加TNF-β，搅拌5-10min；
B液制备：无菌操作，向基础培养基中加入IL-2、IFN-γ，搅拌5-10min；将A液、B液分别调节pH值至7.3-7.4。
9.权利要求1～7任一项所述的培养基组合物在培养预防肿瘤发生的免疫细胞中的应用。
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