CN115420716B - 一种检测吊白块含量的方法及其应用 - Google Patents
一种检测吊白块含量的方法及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115420716B CN115420716B CN202210872172.2A CN202210872172A CN115420716B CN 115420716 B CN115420716 B CN 115420716B CN 202210872172 A CN202210872172 A CN 202210872172A CN 115420716 B CN115420716 B CN 115420716B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- white
- hanging
- solution
- detection
- detecting
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 53
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 52
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 46
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 46
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims abstract description 41
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 25
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 claims abstract description 23
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims abstract 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 41
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 9
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 235000013527 bean curd Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 3
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 241000209094 Oryza Species 0.000 description 19
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 11
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 11
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 8
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 8
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 239000004289 sodium hydrogen sulphite Substances 0.000 description 6
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 6
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 102000006833 Multifunctional Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108010047290 Multifunctional Enzymes Proteins 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N Sulphur dioxide Chemical compound O=S=O RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N acetylacetone Chemical compound CC(=O)CC(C)=O YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 2
- 108010061711 Gliadin Proteins 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000011022 opal Substances 0.000 description 1
- JOVOSQBPPZZESK-UHFFFAOYSA-N phenylhydrazine hydrochloride Chemical compound Cl.NNC1=CC=CC=C1 JOVOSQBPPZZESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940038531 phenylhydrazine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- XWGJFPHUCFXLBL-UHFFFAOYSA-M rongalite Chemical compound [Na+].OCS([O-])=O XWGJFPHUCFXLBL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000011896 sensitive detection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
- G01N21/643—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" non-biological material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
- G01N21/6456—Spatial resolved fluorescence measurements; Imaging
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
- G01N2021/6439—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
本发明涉及食品检测技术领域，尤其涉及一种检测吊白块含量的方法及其应用。所述方法包括：包括：混合多巴胺、间苯二酚和待测样品得到混合溶液，充分反应后检测所述混合溶液的荧光强度，将检测结果和吊白块标准曲线对比得到所述待测样品中吊白块含量。本发明基于多巴胺和间苯二酚的反应原理提供了一种检测食品中吊白块含量的方法，其样品处理简单、基质耐受性强、准确性高，对于粉丝、面粉、米粉以及多种其他食品中吊白块的检测具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及食品检测技术领域，尤其涉及一种检测吊白块含量的方法及其应用。
背景技术
吊白块学名为甲醛次硫酸钠，通常被用作工业漂白剂以及有机合成过程中的绿色试剂。吊白块与甲醛和亚硫酸氢钠的化学性质较为相似，具有强还原性，因而被非法用于食品漂白和保鲜。但吊白块是一种强致癌物质，对人体的肺、肝脏和肾脏损害极大，普通人经口摄入量为10g时即可导致中毒死亡。因此，在食品加工中吊白块被严禁使用。然而在利益的驱使下，吊白块被非法用作食品添加剂用于漂白和改善小麦粉、米粉、豆腐、粉丝和其他食品的漂白及保鲜的情况仍然存在，这对消费者的健康造成了严重威胁。因此，如何准确地检测食品中吊白块是保障食品安全的重要举措之一。
吊白块化学性质不稳定，在在酸性溶液和加热条件下会等摩尔分解成甲醛和亚硫酸氢钠。因此，常规的高效液相色谱、高效液相串联质谱等仪器分析方法难以直接测定吊白块。目前，间接法是较为常用的检测吊白块含量的方法，即在酸性条件下将吊白块分解为甲醛、二氧化硫或亚硫酸氢钠，然后通过测定分解产物的含量进而实现吊白块的间接检测。已报道的间接法包括变色酸法、乙酰丙酮法和盐酸苯肼比色法等分析技术。但间接法存在操作复杂、步骤繁琐、准确性低等问题，而且通过间接法无法辨别测得的甲醛是吊白块的分解产物还是本身存在的添加剂，导致检测结果假阳性率高。因此，迫切需要开发一种可靠、快速、灵敏的检测方法并应用于食品样品中吊白块的定量检测。
发明内容
为了解决现有技术存在的问题，本发明提供一种检测吊白块的方法及其应用。
第一方面，本发明提供一种检测吊白块含量的方法，包括：
混合多巴胺、间苯二酚和待测样品得到混合溶液，充分反应后检测所述混合溶液的荧光强度，将检测结果和吊白块标准曲线对比得到所述待测样品中吊白块含量。
如图1所示，本发明的检测原理为：多巴胺和间苯二酚在碱性条件下可以生成蓝色荧光分子(azamonardine)；当在多巴胺和间苯二酚的混合溶液中加入吊白块，蓝色荧光分子的生成量降低，即荧光强度降低(图1)。因此，吊白块的浓度与azamonardine荧光强度呈反比，进而实现样品中吊白块的定量检测。
其中，多巴胺和间苯二酚为商用化学试剂，可直接购买获得，作为原位荧光反应的底物。
进一步地，所述吊白块标准曲线的制备方法如下：
将不同浓度吊白块和多巴胺、间苯二酚混合后得到不同浓度的吊白检测溶液，并检测其荧光强度；
后根据所述不同浓度的吊白检测溶液的浓度和所述荧光强度得到所述吊白块标准曲线。
进一步地，所述多巴胺和所述间苯二酚的浓度比为(1～60)：(1～60)，优选为(1～3)：(1～3)。
进一步地，所述多巴胺的浓度为4～6μM；和/或，所述间苯二酚的浓度为8～12μM。
进一步地，所述待测样品在检测前通过如下方法预处理：
将所述待测样品溶解于碳酸盐溶液中，超声提取、离心后过滤。
进一步地，所述碳酸盐溶液的浓度为1～3mM；和/或，所述超声提取为在27℃～35℃条件下提取5～15分钟；和/或，所述离心为在8000～12000rpm转速下离去10～20分钟；和/或，所述过滤为通过0.4～0.5μm的过滤器进行过滤。
进一步地，所述荧光强度为在420nm-465nm范围内的荧光强度。
进一步地，所述充分反应为在碱性条件下反应20分钟以上。
第二方面，本发明提供一种吊白块检测试剂盒，包括：
多巴胺溶液、间苯二酚溶液、吊白块标准品溶液和样品提取液。
其中，多巴胺溶液的浓度为4～6μM，间苯二酚溶液的弄懂度为8～12μM。
本发明进一步提供所述方法在检测食品中的吊白块中的应用。
进一步地，所述食品包括粉丝、面粉、米粉、腐竹或豆腐中的一种或多种。
本发明具备如下有益效果：
本发明提供了一种基于多巴胺和间苯二酚在碱性条件下的反应生产蓝色荧光分子的原理，提供了一种检测吊白块的方法，通过荧光强度即可反应吊白块的含量。本发明提供的方法具有样品前处理简单、基质耐受性强、灵敏度高、准确性高、成本低等特点。本发明提供的方法以粉丝、面粉和米粉等食品为检测样本，方法的检测限为0.28-0.38μg/g，在测定食品中吊白块残留时具有良好的应用前景。
附图说明
图1为本发明实施例1提供的检测吊白块的原理示意图。
图2为本发明实施例1提供的缓冲体系中荧光强度随吊白块浓度变化对应的变化图。
图3为本发明实施例1提供的缓冲体系中吊白块的标准曲线图。
图4为本发明实施例3提供的荧光检测方法的特异性测定图。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
本实施例提供一种检测吊白块的方法，其流程如图1所示，其中吊白块标准曲线的建立方法的流程如下：
1、取0.76g多巴胺溶解于超纯水中，并用10mL容量瓶定容，制备获得浓度为500μM的多巴胺溶液。取浓度为50μM的多巴胺溶液稀释100倍，并于100mL容量瓶中定容，即可获得浓度为5.0μM的多巴胺溶液。
2、取1.1g间苯二酚溶解于超纯水中，并用10mL容量瓶定容，制备获得浓度为1mM的间苯二酚溶液。取浓度为1mM的间苯二酚溶液稀释100倍，并于100mL容量瓶中定容，即可获得浓度为10μM的间苯二酚溶液。
3、取吊白块11.8mg溶解于碳酸盐缓冲溶液(2mM，pH 10)中定容至10mL，配置浓度为10mg/mL的吊白块标准品溶液。将吊白块标准品溶液分别稀释为0，0.01，0.03，0.09，0.27，0.81，1.30和2.43μg/mL。
4、取5.0μM多巴胺溶液(30μL/孔)、10μM的间苯二酚溶液(30μL/孔)、不同浓度吊白块标准品溶液(200μL/孔)于不透明96孔酶标板中(每个条件做5个平行)。
5、混合溶液振荡混合均匀，室温条件下反应20min。
6、设定荧光分光光度计或多功能酶标仪的激发和发射波长分别为420nm和465nm，最终测定混合溶液荧光强度。
7、将所测得的数据以-log10(吊白块浓度)值为横坐标，以荧光强度为纵坐标，利用Origin 8.0的四参数方程进行拟合，建立标准曲线获得半数抑制浓度(IC50)值及线性范围。
结果如图2和图3所示，图2中的a显示溶液体系荧光强度呈蓝色荧光，且随着吊白块浓度的增加，蓝色荧光逐渐变浅；经多功能酶标仪扫描获得荧光光谱图，结果如b所示溶液体系的荧光强度逐渐降低；图3为本发明基于吊白块浓度与荧光强度建立标准曲线，通过四参数方程拟合可得方法的IC50为0.22μg/mL，线性范围(IC20-IC80)为0.05-0.9μg/mL，线性相关系数为0.993。
实施例2
本实施例提供吊白块检测试剂盒的制备方法，步骤如下：
1、取5.0μM的多巴胺溶液1mL于1.5mL离心管中标记为A液，避光保存。
2、取10μM的间苯二酚溶液1mL于1.5mL离心管中标记为B液，避光保存。
3、取10mg/mL的吊白块标准品溶液于1.5mL离心管中，避光保存。
4、取100mL碳酸盐缓冲溶液(20mM，pH 10)于塑料试剂瓶中，作为样本提取母液。使用时，将母液稀释10倍后使用。
5、将不透明96孔酶标板用铝箔纸密封保存。
6、上述试剂盒使用说明书包括：概述、原理、组分、储存方法、注意事项、工作液的准备、样品前处理、检测、计算、试剂盒参数、标准曲线参考图、分析限制等。
本发明提供的检测试剂盒的保质期为3个月。
实施例3
本实施例提供粉丝、面粉与米粉等食品样品中吊白块的检测方法，步骤如下：
1、样品前处理方法
粉丝的前处理方法为：取1.0g粉丝磨成粉末并溶解于10mL碳酸盐溶液(2mM，pH10)中，将混合物超声提取10min。以10,000rpm转速离心15min，收集上清液(1.0mL)并用无菌注射器过滤器(0.45μm)过滤。
面粉和米粉的前处理方法为：取1.0g小麦或大米粉溶解于10mL碳酸盐溶液(2mM，pH 10)中，将混合物超声提取10min。以10,000rpm转速离心15min，收集上清液(1.0mL)并用无菌注射器过滤器(0.45μm)过滤。
样本前处理后，取粉丝、面粉与米粉样品提取液进行测定。测定步骤参考实施例1，将实施例1中的标准品溶液替换为制备获得的样品提取液即可，最后对其荧光强度进行测定。
2、原位荧光检测方法及试剂盒检测限的测定
检测限定义为粉丝、面粉、米粉阴性样品荧光强度加3倍标准差对应的浓度(三次平行试验)。
具体操作步骤为：取粉丝、面粉、米粉各20份(经仪器分析方法验证为吊白块阴性样本)，分别进行样品前处理。然后测定阴性样品对应的荧光强度，计算平均值(X)及标准差(SD)。计算X±3SD，并将其带入标准曲线，计算获得原位荧光检测方法及试剂盒的检测限。
经计算可得，粉丝、面粉、米粉的检测线分别为0.38，0.28和0.32μg/g，因此原位荧光检测方法及试剂盒的检测限为0.28-0.38μg/g。
3、原位荧光检测方法特异性的测定
本发明进一步通过探究粉丝、面粉、米粉样品中可能含有的基质化合物及强还原性化合物等对原位荧光检测方法的影响，评估检测方法的特异性。
所涉及的粉丝、面粉、米粉样品中可能含有的基质化合物包括：葡萄糖、蔗糖、谷氨酸、麦醇溶蛋白和Ca2+。强还原性化合物包括：甲醛与亚硫酸氢钠。
具体操作步骤为：分别配置浓度为0、0.25和10μg/mL的上述化合物溶液。分别测定缓冲体系中不同浓度的化合物溶液对检测荧光信号的影响。
检测结果如图4所示，葡萄糖、蔗糖、谷氨酸等样品基质物质对原位荧光检测方法的检测信号几乎无影响。当甲醛和亚硫酸氢钠的浓度为10μg/mL时，会导致荧光强度降低。但荧光信号降低幅度小，尚未达到阴性对照信号的1/2。因此，甲醛和亚硫酸氢钠对原位荧光检测方法的影响可忽略不计。综上，本发明所述基于原位荧光反应的食品中吊白块检测方法及其检测试剂盒的特异性良好。
4、原位荧光检测方法准确性的测定
本实施例通过添加回收率评估原位荧光检测方法的准确性，具体操作步骤如下：
分别取20个粉丝、面粉、米粉阴性样本，并在样本中添加吊白块标准品，至浓度为1、2和4μg/g。采用前述的前处理方法进行前处理，采用实施例1进行检测。检测结果显示，方法的回收率为80.7％-102.1％，变异系数为4.2％-12.6％(表1)。结果表明本发明建立的吊白块的检测方法、开发的检测试剂盒可以高效较准确地测定食品中的吊白块，具有操作简便、安全、高效等优势，具有较好的应用前景。
表1添加回收率(N＝3)
试验例1
本发明进一步对比本发明和现有的化学检测法(DB35/T 638-2005)的检测灵敏度，针对这2种方法，采用实施例3中相同的方法统计吊白块浓度，结果如下(表2)：
表2不同样品中吊白块含量的检测结果
| 样品 | 吊白块添加量 | 实施例1检测结果 | DB35/T 638-2005检测结果 |
| 粉丝1# | 0 | 未检出 | 未检出 |
| 粉丝2# | 0 | 未检出 | 未检出 |
| 粉丝3# | 0 | 未检出 | 未检出 |
| 小麦粉1# | 0 | 未检出 | 未检出 |
| 小麦粉2# | 0 | 未检出 | 未检出 |
| 小麦粉3# | 0 | 未检出 | 未检出 |
| 米粉1# | 0 | 未检出 | 未检出 |
| 米粉2# | 0 | 未检出 | 未检出 |
| 米粉3# | 0 | 未检出 | 未检出 |
| 粉丝1# | 4 | 4.2 | 未检出 |
| 粉丝2# | 4 | 3.9 | 未检出 |
| 粉丝3# | 4 | 3.8 | 未检出 |
| 小麦粉1# | 10 | 9.2 | 未检出 |
| 小麦粉2# | 10 | 9.8 | 未检出 |
| 小麦粉3# | 10 | 9.6 | 未检出 |
| 米粉1# | 20 | 17.9 | 检出 |
| 米粉2# | 20 | 16.4 | 检出 |
| 米粉3# | 20 | 19.2 | 检出 |
注：表中DB35/T 638-2005通过测定甲醛含量然后换算为吊白块浓度。
结果显示，本发明的检测结果与DB35/T 638-2005检测结果一致性较好，且本发明的灵敏度较高，可以对样本中低浓度吊白块进行定量测定。
本发明进一步总结了目前已报道的测定食品中吊白块的检测方法的性质及优缺点(表3)。结果显示：本发明建立的荧光检测方法是一种新型检测方法，且具有样本前处理简单、成本低、适用性好、灵敏度高、检测结果准确等优势。
表3不同吊白块检测方法的效果对比
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (9)
1.一种检测吊白块含量的方法，其特征在于，包括：
混合多巴胺、间苯二酚和待测样品得到混合溶液，充分反应后检测所述混合溶液的荧光强度，将检测结果和吊白块标准曲线对比得到所述待测样品中吊白块含量；
所述多巴胺和所述间苯二酚的浓度比为（1~60）：（1~60）。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述吊白块标准曲线的制备方法如下：
将不同浓度吊白块和多巴胺、间苯二酚混合后得到不同浓度的吊白检测溶液，并检测其荧光强度；
后根据所述不同浓度的吊白检测溶液的浓度和所述荧光强度得到所述吊白块标准曲线。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品在检测前通过如下方法预处理：
将所述待测样品溶解于碳酸盐溶液中，超声提取、离心后过滤。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述碳酸盐溶液的浓度为1~3 mM；和/或，所述超声提取为在27~35 ℃条件下提取5~15分钟；和/或，所述离心为在8000~12000 rpm转速下离去10~20分钟；和/或，所述过滤为通过0.4~0.5μm的过滤器进行过滤。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述荧光强度为在420nm-465nm范围内的荧光强度。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述充分反应为在碱性条件下反应20分钟以上。
7.一种吊白块检测试剂盒，其特征在于，包括：
多巴胺溶液、间苯二酚溶液、吊白块标准品溶液和样品提取液；
所述多巴胺和所述间苯二酚的浓度比为（1~60）：（1~60）。
8.一种检测食品中的吊白块的方法，其特征在于，采用权利要求1-6任一项所述的方法在检测食品中的吊白块。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述食品包括粉丝、面粉、米粉、腐竹或豆腐中的一种或多种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210872172.2A CN115420716B (zh) | 2022-07-22 | 2022-07-22 | 一种检测吊白块含量的方法及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210872172.2A CN115420716B (zh) | 2022-07-22 | 2022-07-22 | 一种检测吊白块含量的方法及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115420716A CN115420716A (zh) | 2022-12-02 |
| CN115420716B true CN115420716B (zh) | 2024-05-14 |
Family
ID=84197183
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210872172.2A Active CN115420716B (zh) | 2022-07-22 | 2022-07-22 | 一种检测吊白块含量的方法及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115420716B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN207248732U (zh) * | 2017-07-20 | 2018-04-17 | 深圳市易瑞生物技术股份有限公司 | 一体化食品药品安全快速检测系统 |
| JP2021031629A (ja) * | 2019-08-28 | 2021-03-01 | 東洋インキＳｃホールディングス株式会社 | 蛍光標識用コアシェル型樹脂微粒子、および、蛍光標識剤 |
-
2022
- 2022-07-22 CN CN202210872172.2A patent/CN115420716B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN207248732U (zh) * | 2017-07-20 | 2018-04-17 | 深圳市易瑞生物技术股份有限公司 | 一体化食品药品安全快速检测系统 |
| JP2021031629A (ja) * | 2019-08-28 | 2021-03-01 | 東洋インキＳｃホールディングス株式会社 | 蛍光標識用コアシェル型樹脂微粒子、および、蛍光標識剤 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Detection of Dopamine Receptors Using Nanoscale Dendrimer forPotential Application in Targeted Delivery and Whole-BodyImaging: Synthesis andIn VivoOrgan Distribution;Marzieh Ramezani Farani;ACS Applied Bio Materi;20220404;全文 * |
| 基于氧化还原反应的甲醛次硫酸氢钠(雕白块)的荧光检测;叶秋香;江西理工大学学报;20200615;全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115420716A (zh) | 2022-12-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tang et al. | Highly sensitive and selective near-infrared fluorescent probe for zinc and its application to macrophage cells | |
| CN107014787B (zh) | 谷胱甘肽模板金纳米簇在检测半胱氨酸和赖氨酸中的应用 | |
| CN1731156A (zh) | 食品中甲醛的快速检测方法 | |
| CN113916858A (zh) | 一种利用氮掺杂碳量子点荧光探针检测Cr6+的方法 | |
| CN104048959A (zh) | 一种超痕量铅镉离子检测方法及检测试纸条 | |
| Ma et al. | Flow-injection chemiluminescence determination of penicillin antibiotics in drugs and human urine using luminol-Ag (III) complex system | |
| CN115420716B (zh) | 一种检测吊白块含量的方法及其应用 | |
| CN108896750A (zh) | 一种BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP比例型荧光传感器的制备方法和用途 | |
| CN109632740B (zh) | 水溶液中柠檬酸的检测方法 | |
| CN110964044B (zh) | 一种基于双香豆素衍生物的过氧化亚硝酸盐荧光探针、制备方法与应用 | |
| CN103115882B (zh) | 一种检测h2o2的方法 | |
| CN110672518A (zh) | 一种稳定的二甲苯胺蓝法血清镁检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN211652552U (zh) | 一种快速检测亚硝酸盐含量的试纸 | |
| CN113049547B (zh) | 一种硝基甲烷工业废水中亚硝酸钠的荧光测定方法 | |
| CN109283165B (zh) | 一种有机试剂中微量水分析荧光试纸条的制备方法与应用 | |
| CN109187514B (zh) | 一种基于纳米金表面的化学发光共振能量转移传感器快速检测百草枯的方法 | |
| RU2779479C1 (ru) | Способ люминесцентного определения иттрия (III) | |
| CN110698390A (zh) | 一种识别亚硫酸氢根的荧光探针及其制备方法和检测方法 | |
| RU2473885C2 (ru) | Количественный анализ тиомочевины и флуоресцеина натрия при их совместном присутствии в пластовых водах | |
| CN108148596B (zh) | 一种利用上转换荧光材料荧光熄灭鉴别红葡萄酒的方法 | |
| Chen et al. | Carbazole as fluorescence carrier for preparation of doxycycline sensor | |
| CN111398228A (zh) | 一种祛痘类化妆品中磺胺嘧啶的检测方法 | |
| CN106556595B (zh) | 一种抗干扰能力强的肌酐苦味酸法检测试剂盒 | |
| CN109900692A (zh) | 绿色高效检测汞离子的凝胶的制备方法及该凝胶的应用 | |
| CN115219471B (zh) | 一种检测微囊藻毒素-lr的荧光探针的制备和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |