CN115380826A - 一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，包括外植体的制备与消毒、不定芽诱导培养、不定芽的增殖培养、生根培养、继组培苗移栽，本发明在实际使用中，利用组织培养技术，可以快速大量地繁殖出彩美丽竹芋种苗，解决市场的需求，本技术可以达到快速繁殖彩美丽竹芋种苗，并降低制种的污染率，提高成苗率。
Description
技术领域
本发明涉及电气自动化设备的检测领域，具体来说，涉及一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法。
背景技术
彩美丽竹芋（学名：CalatheaRoseopicta‘Rosy’）是肖竹芋属多年生草本观叶植物。原产巴西。该种叶色丰富多彩，观赏性极强，且多为阴生植物，具有较强的耐阴性，是优良的室内喜阴观叶植物，适合用来布置卧室、客厅、办公室等场所。在国内未能满足市场对彩美丽竹芋的极大需求，其主要原因在于，彩美丽竹芋难结种子，分蘖能力差，生长周期长，很难快速繁殖大量成品。
发明内容
（一）解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供了一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
（二）技术方案
为实现解决上述背景技术中提出的问题，本发明采用的具体技术方案如下：
一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，包括：
S11、母本取外植体前，进行消毒处理，之后进行管养，然后在母本上切取健壮侧芽，剥去老叶鞘，用手术刀将切口切平整，清水冲洗干净晾干，在熏蒸浸泡冲洗，消毒时保证外植体与消毒液充分接触，无菌水冲洗3次，剥去最外面一层叶鞘，把切口位置修平整并将消毒后受伤的组织切除，备用；
S12、取S11步骤中处理好的外植体接种到不定芽诱导培养基中进行培养，培养40~50天可获得不定芽小苗；
S13、将S12步骤中获得的不定芽小苗，分成单株，切除叶片，保留茎段1cm，接种到不定芽增殖培养基中进行培养，获得健壮的不定芽小苗；
S14、将S13步骤中获得的小苗，切成单株小苗，接种在生根培养基中进行培养；
S15、将15步骤中的小苗从培养瓶中取出，用干净的水将培养基洗掉，转移至水帘大棚，定植在72穴盘中，等长出第一片新叶后，开始淋肥水，成活率达95%-99%。
进一步的，所述S11步骤中，母本取外植体前，用1500倍百菌清灌淋处理，管养环境温度保持在20~28℃，湿度保持在80%~95%，光照强度保持在5000~10000lux，等待母本泥炭湿度降至18%-22%，在母本上切取3~6cm长的健壮侧芽，剥去老叶鞘，保留最里面2~3层干净的叶鞘，用手术刀将切口切平整，清水加入洗洁精浸泡5~10分钟，清水冲洗干净晾干，臭氧熏蒸40~60分钟，浓度5%双氧水震荡浸泡1~2小时，无菌水冲洗2次。将处理完毕的外植体转移到超净工作台上，用75%酒精摇曳浸泡40~70s，无菌水冲洗1次，放入0.6%次氯酸钠水溶液中，摇曳浸泡15~25分钟，消毒时保证外植体与消毒液充分接触，无菌水冲洗3次，剥去最外面一层叶鞘，把切口位置修平整并将消毒后受伤的组织切除，备用。
进一步的，所述S12步骤中，处理好的外植体接种到不定芽诱导培养基中进行培养，培养40~50天可获得不定芽小苗，培养环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2000lux。
进一步的，所述S13步骤中，不定芽小苗，分成单株，切除叶片，保留茎段1cm，接种到不定芽增殖培养基中进行培养，培养50~60天后，茎段重新长出2~3棵小苗的丛状团块，增殖系数2.0~3.0。将丛状团块分成单株小苗，切除叶片，保留茎段1cm，接种到不定芽培养基继续下一代培养，继代增殖总数15~20次，获得健壮的不定芽小苗。培养环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2000lux。
进一步的，所述S14步骤中，不定芽小苗，切成单株小苗，接种在生根培养基中进行培养，30~40天后可获得有2~3条主根的完整植株，生根率达95%-99%，培养环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2500lux。
进一步的，所述S15步骤中，小苗从培养瓶中取出，用干净的水将培养基洗掉，转移至水帘大棚，定植在72穴盘中，定植后淋一次2000倍百菌清，种植环境湿度80~95%，温度22~28℃，种植的基质为泥炭：椰糠=4:1。泥炭的粗细度为5~25，等长出第一片新叶后，开始淋肥水，成活率达95%-99%。
进一步的，所述S12步骤中进行不定芽诱导培养，不定芽诱导培养基的组分为：NH4NO3990mg/L、KNO31140mg/L、MgSO4·7H2O222mg/L、KH2PO4102mg/L、CaCl2·2H2O264mg/L、KI0.83mg/L、H3BO36.2mg/L、MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、Na2MoO2·2H2O0.25mg/L、CuSO4·5H2O0.025mg/L、CoCl2·6H2O0.025mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、Na2·EDTA37.3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、甘氨酸2mg/L、抗坏血酸5~10mg/L、肌醇100mg/L、白糖30g/L、卡拉胶8.0g/L、6-苄氨基嘌呤3.0~5.0mg/L、萘乙酸0.1～0.2mg/L。
进一步的，所述S13步骤中进行不定芽增殖培养，不定芽增殖培养基的组分为：NH4NO3990mg/L、KNO31140mg/L、MgSO4·7H2O222mg/L、KH2PO4102mg/L、CaCl2·2H2O264mg/L、KI0.83mg/L、H3BO36.2mg/L、MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、Na2MoO2·2H2O0.25mg/L、CuSO4·5H2O0.025mg/L、CoCl2·6H2O0.025mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、Na2·EDTA37.3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、甘氨酸2mg/L、抗坏血酸5~10mg/L、肌醇100mg/L、白糖30g/L、卡拉胶8.0g/L、6-苄氨基嘌呤1.0~3.0mg/L、萘乙酸0.1~0.2mg/L。
进一步的，所述S14步骤中进行生根培养，生根培养基的组分为：NH4NO3990mg/L、KNO31140mg/L、MgSO4•7H2O222mg/L、KH2PO4102mg/L、CaCl2•2H2O264mg/L、KI0.83mg/L、H3BO36.2mg/L、MnSO4•4H2O22.3mg/L、ZnSO4•7H2O8.6mg/L、Na2MoO2•2H2O0.25mg/L、CuSO4•5H2O0.025mg/L、CoCl2•6H2O0.025mg/L、FeSO4•7H2O27.8mg/L、Na2•EDTA37.3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、抗坏血酸5~10mg/L、甘氨酸2mg/L、肌醇100mg/L、白糖25g/L、卡拉胶8.0g/L、6-苄氨基嘌呤0.1~0.2mg/L、萘乙酸0.01～0.02mg/L、吲哚丁酸0.1~0.4mg/L，活性炭0.2g/L。
进一步的，所述S15步骤中进行组培苗移栽，组培苗移栽基质配比为泥炭：椰糠=4:1。泥炭的粗细度为5~25。
（三）有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，具备以下有益效果：
（1）、本发明在实际使用中，利用组织培养技术，可以快速大量地繁殖出彩美丽竹芋种苗，解决市场的需求，本技术可以达到快速繁殖彩美丽竹芋种苗，并降低制种的污染率，提高成苗率。
（2）、本发明在不定芽诱导培养、不定芽的增殖培养、生根培养的培养基中加入抗坏血酸5~10mg/L,有效减轻增殖芽和生根苗的切口褐化，抑制醌类物质在培养基中积累，减轻醌类物质对增殖芽小苗的毒害，提高增值芽吸收营养的效率和提高生根苗的成活率
（3）、本发明在生根培养基中加入低浓度的6-苄氨基嘌呤0.1~0.2mg/L，使植株生长健壮，叶片叶绿素含量增加，叶色鲜艳。环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2500lux，能够长期稳定繁殖出健壮的组培苗，生根率达95%以上，根系健康。在组培苗移栽步骤中，种植的基质为泥炭：椰糠=4:1。泥炭的粗细度为5~25。能使组培苗定植后成活率达95%以上。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是根据本发明实施例的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法的主流程图。
具体实施方式
为进一步说明各实施例，本发明提供有附图，这些附图为本发明揭露内容的一部分，其主要用以说明实施例，并可配合说明书的相关描述来解释实施例的运作原理，配合参考这些内容，本领域普通技术人员应能理解其他可能的实施方式以及本发明的优点，图中的组件并未按比例绘制，而类似的组件符号通常用来表示类似的组件。
根据本发明的实施例，提供了一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法。
现结合附图和具体实施方式对本发明进一步说明；
实施例1
一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，请参阅附图1，包括外植体的制备与消毒、不定芽诱导培养、不定芽的增殖培养和生根培养，具体为：
S11、母本取外植体前，进行消毒处理，之后进行管养，然后在母本上切取健壮侧芽，剥去老叶鞘，用手术刀将切口切平整，清水冲洗干净晾干，在熏蒸浸泡冲洗，消毒时保证外植体与消毒液充分接触，无菌水冲洗3次，剥去最外面一层叶鞘，把切口位置修平整并将消毒后受伤的组织切除，备用；
S12、取S11步骤中处理好的外植体接种到不定芽诱导培养基中进行培养，培养40~50天可获得不定芽小苗；
S13、将S12步骤中获得的不定芽小苗，分成单株，切除叶片，保留茎段1cm，接种到不定芽增殖培养基中进行培养，获得健壮的不定芽小苗；
S14、将S13步骤中获得的小苗，切成单株小苗，接种在生根培养基中进行培养；
S15、将15步骤中的小苗从培养瓶中取出，用干净的水将培养基洗掉，转移至水帘大棚，定植在72穴盘中，等长出第一片新叶后，开始淋肥水，成活率达95%-99%。
通过上述实施例，1、在S11步骤中，母本取外植体前，用1500倍百菌清灌淋处理，管养环境温度保持在20~28℃，湿度保持在80%~95%，光照强度保持在5000~10000lux。等待母本泥炭湿度降至18%-22%，在母本上切取3~6cm长的健壮侧芽，剥去老叶鞘，保留最里面2~3层干净的叶鞘，用手术刀将切口切平整，清水加入洗洁精浸泡5~10分钟，清水冲洗干净晾干，臭氧熏蒸40~60分钟，浓度5%双氧水震荡浸泡1~2小时，无菌水冲洗2次。将处理完毕的外植体转移到超净工作台上，用75%酒精摇曳浸泡40~70s，无菌水冲洗1次，放入0.6%次氯酸钠水溶液中，摇曳浸泡15~25分钟，消毒时保证外植体与消毒液充分接触，无菌水冲洗3次，剥去最外面一层叶鞘，把切口位置修平整并将消毒后受伤的组织切除，备用。
2、在S12步骤中，处理好的外植体接种到不定芽诱导培养基中进行培养，培养40~50天可获得不定芽小苗，培养环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2000lux。
3、在S13步骤中，不定芽小苗，分成单株，切除叶片，保留茎段1cm，接种到不定芽增殖培养基中进行培养，培养50~60天后，茎段重新长出2~3棵小苗的丛状团块，增殖系数2.0~3.0。将丛状团块分成单株小苗，切除叶片，保留茎段1cm，接种到不定芽培养基继续下一代培养，继代增殖总数15~20次，获得健壮的不定芽小苗。培养环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2000lux。
4、在S14步骤中，不定芽小苗，切成单株小苗，接种在生根培养基中进行培养，30~40天后可获得有2~3条主根的完整植株，生根率达95%-99%，培养环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2500lux。
5、在S15步骤中，小苗从培养瓶中取出，用干净的水将培养基洗掉，转移至水帘大棚，定植在72穴盘中，定植后淋一次2000倍百菌清，种植环境湿度80~95%，温度22~28℃，种植的基质为泥炭：椰糠=4:1。泥炭的粗细度为5~25，等长出第一片新叶后，开始淋肥水，成活率达95%-99%。
其中，不定芽诱导培养基的组分比例为：
不定芽增殖培养基的组分比例为：
生根培养基的组分比例为：
综上所述，本发明在不定芽的增殖培养步骤中增殖系数2.0~3.0，继代增殖总数15~20次，与一般分株繁殖方法相比，大大提高了繁体系数。不定芽诱导培养、不定芽的增殖培养步骤中，培养环境为温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2000lux。
抗坏血酸是一种强还原剂，在不定芽诱导培养、不定芽的增殖培养、生根培养的培养基中加入抗坏血酸5~10mg/L,有效减轻增殖芽和生根苗的切口褐化，抑制醌类物质在培养基中积累，减轻醌类物质对增殖芽小苗的毒害，提高增值芽吸收营养的效率和提高生根苗的成活率。
生根培养基中加入低浓度的6-苄氨基嘌呤0.1~0.2mg/L，使植株生长健壮，叶片叶绿素含量增加，叶色鲜艳。环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2500lux，能够长期稳定繁殖出健壮的组培苗，生根率达95%以上，根系健康。在组培苗移栽步骤中，种植的基质为泥炭：椰糠=4:1。泥炭的粗细度为5~25。能使组培苗定植后成活率达95%-99%。
在本发明中，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置”、“连接”、“固定”、“旋接”等术语应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或成一体；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系，除非另有明确的限定，对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，包括：
S11、母本取外植体前，进行消毒处理，之后进行管养，然后在母本上切取健壮侧芽，剥去老叶鞘，用手术刀将切口切平整，清水冲洗干净晾干，在熏蒸浸泡冲洗，消毒时保证外植体与消毒液充分接触，无菌水冲洗3次，剥去最外面一层叶鞘，把切口位置修平整并将消毒后受伤的组织切除，备用；
S12、取S11步骤中处理好的外植体接种到不定芽诱导培养基中进行培养，培养40~50天可获得不定芽小苗；
S13、将S12步骤中获得的不定芽小苗，分成单株，切除叶片，保留茎段1cm，接种到不定芽增殖培养基中进行培养，获得健壮的不定芽小苗；
S14、将S13步骤中获得的小苗，切成单株小苗，接种在生根培养基中进行培养；
S15、将15步骤中的小苗从培养瓶中取出，用干净的水将培养基洗掉，转移至水帘大棚，定植在72穴盘中，等长出第一片新叶后，开始淋肥水，成活率达95%-99%。
2.根据权利要求1所述的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，所述S11步骤中，母本取外植体前，用1500倍百菌清灌淋处理，管养环境温度保持在20~28℃，湿度保持在80%~95%，光照强度保持在5000~10000lux，等待母本泥炭湿度降至18%-22%，在母本上切取3~6cm长的健壮侧芽，剥去老叶鞘，保留最里面2~3层干净的叶鞘，用手术刀将切口切平整，清水加入洗洁精浸泡5~10分钟，清水冲洗干净晾干，臭氧熏蒸40~60分钟，浓度5%双氧水震荡浸泡1~2小时，无菌水冲洗2次；将处理完毕的外植体转移到超净工作台上，用75%酒精摇曳浸泡40~70s，无菌水冲洗1次，放入0.6%次氯酸钠水溶液中，摇曳浸泡15~25分钟，消毒时保证外植体与消毒液充分接触，无菌水冲洗3次，剥去最外面一层叶鞘，把切口位置修平整并将消毒后受伤的组织切除，备用。
3.根据权利要求1所述的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，所述S12步骤中，处理好的外植体接种到不定芽诱导培养基中进行培养，培养40~50天可获得不定芽小苗，培养环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2000lux。
4.根据权利要求1所述的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，所述S13步骤中，不定芽小苗，分成单株，切除叶片，保留茎段1cm，接种到不定芽增殖培养基中进行培养，培养50~60天后，茎段重新长出2~3棵小苗的丛状团块，增殖系数2.0~3.0；将丛状团块分成单株小苗，切除叶片，保留茎段1cm，接种到不定芽培养基继续下一代培养，继代增殖总数15~20次，获得健壮的不定芽小苗,
培养环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2000lux。
5.根据权利要求1所述的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，所述S14步骤中，不定芽小苗，切成单株小苗，接种在生根培养基中进行培养，30~40天后可获得有2~3条主根的完整植株，生根率达95%-99%，培养环境温度22~24℃，光照时长10小时，光照强度1500~2500lux。
6.根据权利要求1所述的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，所述S15步骤中，小苗从培养瓶中取出，用干净的水将培养基洗掉，转移至水帘大棚，定植在72穴盘中，定植后淋一次2000倍百菌清，种植环境湿度80~95%，温度22~28℃，种植的基质为泥炭：椰糠=4:1；泥炭的粗细度为5~25，等长出第一片新叶后，开始淋肥水，成活率达95%-99%。
7.根据权利要求1所述的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，所述S12步骤中进行不定芽诱导培养，不定芽诱导培养基的组分为：NH4NO3990mg/L、KNO31140mg/L、MgSO4·7H2O222mg/L、KH2PO4102mg/L、CaCl2·2H2O264mg/L、KI0.83mg/L、H3BO36.2mg/L、MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、Na2MoO2·2H2O0.25mg/L、CuSO4·5H2O0.025mg/L、CoCl2·6H2O0.025mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、Na2·EDTA37.3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、甘氨酸2mg/L、抗坏血酸5~10mg/L、肌醇100mg/L、白糖30g/L、卡拉胶8.0g/L、6-苄氨基嘌呤3.0~5.0mg/L、萘乙酸0.1～0.2mg/L。
8.根据权利要求1所述的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，所述S13步骤中进行不定芽增殖培养，不定芽增殖培养基的组分为：NH4NO3990mg/L、KNO31140mg/L、MgSO4·7H2O222mg/L、KH2PO4102mg/L、CaCl2·2H2O264mg/L、KI0.83mg/L、H3BO36.2mg/L、MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、Na2MoO2·2H2O0.25mg/L、CuSO4·5H2O0.025mg/L、CoCl2·6H2O0.025mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、Na2·EDTA37.3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、甘氨酸2mg/L、抗坏血酸5~10mg/L、肌醇100mg/L、白糖30g/L、卡拉胶8.0g/L、6-苄氨基嘌呤1.0~3.0mg/L、萘乙酸0.1~0.2mg/L。
9.根据权利要求1所述的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，所述S14步骤中进行生根培养，生根培养基的组分为：NH4NO3990mg/L、KNO31140mg/L、MgSO4•7H2O222mg/L、KH2PO4102mg/L、CaCl2•2H2O264mg/L、KI0.83mg/L、H3BO36.2mg/L、MnSO4•4H2O22.3mg/L、ZnSO4•7H2O8.6mg/L、Na2MoO2•2H2O0.25mg/L、CuSO4•5H2O0.025mg/L、CoCl2•6H2O0.025mg/L、FeSO4•7H2O27.8mg/L、Na2•EDTA37.3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、抗坏血酸5~10mg/L、甘氨酸2mg/L、肌醇100mg/L、白糖25g/L、卡拉胶8.0g/L、6-苄氨基嘌呤0.1~0.2mg/L、萘乙酸0.01～0.02mg/L、吲哚丁酸0.1~0.4mg/L，活性炭0.2g/L。
10.根据权利要求1所述的一种彩美丽竹芋的组织培养快速繁育方法，其特征在于，所述S15步骤中进行组培苗移栽，组培苗移栽基质配比为泥炭：椰糠=4:1；泥炭的粗细度为5~25。
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