CN115316658B - 一种五味子酵素的发酵方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种五味子酵素的快速发酵方法，属于食品加工领域。本发明公开的发酵方法采用酵母菌或多菌种作为发酵剂，以新鲜五味子作为发酵原料发酵五味子酵素，使整个发酵周期缩短至14~20小时。大大节约了生产成本，解决了目前五味子酵素高投入低回报的情况。本发明使用能够改善肠道益生作用的乳酸菌代替经典的酵母菌作为发酵剂制备五味子酵素，使用具有降血糖功效的五味子为发酵底物，将二者综合利用，该产品能够达到良好的调节机体血糖与肠道益生菌的效果，为糖尿病患者与高血糖的人群带来健康的保障。
Description
技术领域
本发明属于食品加工领域，具体涉及一种五味子酵素的快速发酵方法。
背景技术
随着社会经济的高速发展，人们的生活节奏也按下了加速键，心理压力越来越大，情绪焦虑状况增多，各种疾病的患病率大大升高，如糖尿病、高血压等。中药北五味子具有镇静安神、抗氧化、降低血糖、降低血压等功效。北五味子的抗氧化性能还可以减缓人体的衰老速度，降低因体内细胞氧化所致疾病的患病率。目前北五味子深加工产品在市场上主要有北五味子茶，加工生产出的产品较为单一。
酵素是一种新型的食品，酵素的生产工艺最早可追溯到中国古代的酿酒技术，经过不断地改良创新获得成熟的酵素生产工艺。目前生产酵素原料的来源主要有植物、动物和菌类，目前酵素产品种类繁多，质量良莠不齐。北五味子酵素以中药材为原料，结合现代酵素生产工艺，兼具北五味子抗氧化、降血糖、降血压、延缓衰老等优良性能，是一种具有生物活性的新型产品。
目前已公开的文献中五味子酵素的发酵需要12~16天，使得生产周期增加，造成高投入低回报的情况，产品发展受到严重制约。因此，亟需找到在不影响五味子酵素制品品质的情况下，可以快速发酵的方法。
发明内容
针对上述问题，本发明的目的在于提供一种五味子酵素的快速发酵方法，通过将处理后的五味子果汁调节酸度后，加入发酵剂进行发酵处理，而后加入甜味剂，经过或不经过冻干处理均可，制成酵素产品，整个发酵周期仅需14~20小时。
为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案。
本发明提供了一种五味子酵素的快速发酵方法，其特征在于，所述方法的发酵周期为14~20小时，所述方法的具体步骤如下：
（1）按如下质量比称取原料并稀释：五味子鲜果汁：水=1:3~1:4，得到原料液A；
（2）将原料液A使用1mol/L的Na2CO3调节pH到4.5~5.0，得到原料液B；
（3）向原料液B中加入0.3~0.5%的发酵剂，发酵16h，温度42℃，搅拌速度82rpm，得料液C；
（4）将料液C中加入1g/L的菊粉，混合均匀，得产品D；
（5）将产品D进行冻干处理，得产品E。
进一步地，所述发酵剂包括乳酸菌发酵剂或多菌种混合发酵剂。
更进一步地，所述乳酸菌发酵剂包括以下任一种或几种菌种：乳双歧杆菌、嗜乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌。
更进一步地，所述多菌种混合发酵剂葡萄酒果酒专用酵母SY和葡萄酒果酒专用酵母RW按比例混合后再与乳酸菌发酵剂共同发酵。
优选地，所述葡萄酒果酒专用酵母SY与葡萄酒果酒专用酵母RW混合比例为1:4。
本发明还提供一种五味子酵素的快速发酵方法，其特征在于，所述方法采用乳酸菌作为发酵剂将发酵周期缩短至14~20小时，所述方法的具体步骤如下：
（1）按如下质量比称取原料并稀释：五味子鲜果汁:水=1:3~1:4，得到原料液A；
（2）将原料液A使用1mol/L的Na2CO3调节pH到4.5~5.0，得到原料液B；
（3）向原料液B中加入0.3~0.5%的乳酸菌，发酵16h，温度42℃，搅拌速度82rpm，得料液C；
（4）将料液C中加入1g/L的菊粉，混合均匀，得产品D；
（5）将产品D进行冻干处理，得产品E。
进一步地，所述乳酸菌发酵剂包括以下任一种或几种菌种：乳双歧杆菌、嗜乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌。
本发明还提供一种五味子酵素的快速发酵方法，其特征在于，所述方法采用多菌种混合作为发酵剂将发酵周期缩短至14~20小时，所述方法的具体步骤如下：
（1）按如下质量比称取原料并稀释：五味子鲜果汁:水=1:3~1:4，得到原料液A；
（2）将原料液A使用1mol/L的Na2CO3调节pH到4.5~5.0，得到原料液B；
（3）向原料液B中加入0.3~0.5%的多菌种发酵剂，发酵16h，温度42℃，搅拌速度82rpm，得料液C；
（4）将料液C中加入1g/L的菊粉，混合均匀，得产品D；
（5）将产品D进行冻干处理，得产品E。
进一步地，所述多菌种混合发酵剂葡萄酒果酒专用酵母SY和葡萄酒果酒专用酵母RW按比例混合后再与乳酸菌发酵剂共同发酵；所述葡萄酒果酒专用酵母SY与葡萄酒果酒专用酵母RW混合比例为1:4。
本发明还提供一种五味子酵素产品，其特征在于，所述五味子酵素产品按照上述所述方法发酵制备而得。
与现有技术相比本发明的有益效果。
（1）本发明提供的发酵五味子酵素的方法，可以使整个发酵周期从12~16天缩短至14~20小时。大大节约了生产成本，解决了目前五味子酵素高投入低回报的情况。
（2）本发明使用能够改善肠道菌群的乳酸菌或复合菌代替经典的酵母菌作为发酵剂制备五味子酵素，以使该产品能够达到良好的调节机体血糖的效果。用菊粉代替传统酵素中添加的白砂糖，极大的降低了产品的含糖量与热量，并且具有良好的肠道益生作用，对于需要降低体重和维持血糖水平的人群是一个理性的选择。
（3）本发明采用新鲜五味子制汁作为发酵原材料，其原因如下：首先五味子鲜果中含有含量与活性更为丰富的花青素与多糖；其次五味子鲜果的加工性能好于中药五味子，在工艺上可以省略泡发等工艺；功效成分的得率方面，鲜果也远高于中药五味子；另外，本发明所开发的工艺十分适合五味子种植地区就地转化应用。
（4）本发明采用的五味子具有敛肺，滋肾，生津，收汗，涩精之功能，经常在治疗糖尿病的组方中被使用，五味子中的多糖与木脂素被认为起到了主要的降血糖作用。本产品在弘扬传统中医药文化与中医药产品现代化方面，具有重要的意义。
附图说明
图1固体酵素产品。
图2液体酵素产品。
图3发酵液pH单因素测定结果曲线图。
图4发酵时间单因素测定结果曲线图。
图5发酵温度单因素测定结果曲线图。
图6搅拌速度单因素测定结果曲线图。
图7稀释比例单因素测定结果曲线图。
图8接种量单因素测定结果曲线图。
图9响应面优化发酵工艺验证图。
图10甜味剂选择评价图。
图11菊粉添加量评分图。
图12酵素产品对肠道定植菌的益生作用图。
图13酵母菌混合发酵最优比例工艺验证图。
图14多菌种混合发酵产品对肠道定植菌的益生作用图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做详细的说明。以下实施例将有助于对本发明的了解，但这些实施例仅为了对本发明加以说明，本发明并不限于这些内容。在实施例中的操作方法均为本技术领域常规操作方法。
下面实施例只为进一步说明本发明，不以任何形式限制本发明范围，本产品所有原料无特殊说明，均市售可得。
实施例1：
（1）按如下质量比称取原料并稀释：五味子果汁:水=1:4，得到原料液A；
（2）将原料液A使用1mol/L的Na2CO3调节pH到5.0，得到原料液B；
（3）向原料液B中加入0.4%的发酵剂，发酵16h，温度42℃，搅拌速度82rpm，得料液C；
（4）将料液C中加入1g/L的菊粉，混合均匀，得产品D；
（5）将产品D进行冻干处理，得粉红色产品E。
实施例2：
（1）按如下质量比称取原料并稀释：五味子果汁:水=1:3，得到原料液A；
（2）将原料液A使用1mol/L的Na2CO3调节pH到5.0，得到原料液B；
（3）向原料液B中加入0.4%的发酵剂，发酵16h，温度42℃，搅拌速度82rpm，得料液C；
（4）将料液C中加入1g/L的菊粉，混合均匀，得产品D；
（5）将产品D进行喷雾干燥处理，得粉红色的产品E。
实施例3：
（1）按如下质量比称取原料并稀释：五味子果汁:水=1:3，得到原料液A；
（2）将原料液A使用1mol/L的Na2CO3调节pH到5.5，得到原料液B；
（3）向原料液B中加入0.4%的发酵剂，发酵16h，温度42℃，搅拌速度82rpm，得料液C；
（4）将料液C中加入1g/L的菊粉，混合均匀，得产品D；
（5）将产品D进行冻干处理，得偏浅粉红色的产品E。
实例例4：
（1）按如下质量比称取原料并稀释：五味子果汁:水=1:3，得到原料液A；
（2）将原料液A使用1mol/L的Na2CO3调节pH到5.0，得到原料液B；
（3）向原料液B中加入0.5%的发酵剂，发酵16h，温度42℃，搅拌速度82rpm，得料液C；
（4）将料液C中加入1g/L的菊粉，混合均匀，得产品D；
（5）将产品D进行喷雾干燥处理，得粉红色的产品E。
实例例5：
（1）按如下质量比称取原料并稀释：五味子果汁:水=1:3，得到原料液A；
（2）将原料液A使用1mol/L的Na2CO3调节pH到5.0，得到原料液B；
（3）向原料液B中加入0.4%的发酵剂，发酵16h，温度42℃，搅拌速度60rpm，得料液C；
（4）将料液C中加入1g/L的菊粉，混合均匀，得产品D；
（5）将产品D进行喷雾干燥处理，得粉红色的产品E。
实施例6。
实验材料。
1.1原料。
发酵底物原料：新鲜五味子。
发酵剂：干酪乳杆菌。
食品添加剂：菊粉、碳酸钠。
1.2培养基：MRS培养基。
实验方法。
2.1五味子果汁的预处理。
对新鲜五味子去除果梗，使用榨汁机打碎，用纱布过滤，弃去果渣，加入适量的蒸馏水进行倍比稀释，离心（20min，4000rpm），取上清液调果汁节pH，灭菌（100℃，15s，巴氏灭菌），冷却至室温备用。
2.2多糖标准曲线的测定。
使用苯酚-硫酸法测定多糖标准曲线。
2.3发酵剂活性的测定。
取处理好的果汁，接种干酪乳杆菌0.03g/100mL，在37℃，60rpm条件下发酵，每2h取1mL发酵液稀释至10-7、10-8、10-9（n=3）的浓度，均匀涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上，放入37℃恒温箱中培养48±2h，菌落计数法统计活菌数。
2.4单因素实验研究五味子酵素的发酵条件。
2.4.1五味子酵素发酵基本条件。
取处理好的北五味子汁，接种1.1中所述发酵剂，发酵，以多糖含量以及菌落总数为指标，评价发酵pH、发酵时间、发酵温度、搅拌速度、稀释果汁比例、接种量等6个工艺条件对五味子酵素品质的影响，根据前期的预实验与查阅文献，设定单因素的取值范围。使用水体醇沉法提取发酵液中的总多糖，使用苯酚-硫酸法测量酵素中总多糖的含量。五味子酵素发酵的基本条件为发酵温度37℃，pH4.5，接种量0.3%，转速60rpm，稀释比例1:4，发酵时间18h。
2.4.2发酵pH对五味子酵素的影响。
将处理好的北五味子果汁接种发酵剂，按照2.4.1的实验条件，调节果汁的pH为4、4.5、5、5.5、6，保持其他发酵条件不变，测定发酵液多糖含量。
2.4.3发酵时间对五味子酵素的影响。
将处理好的北五味子果汁接种发酵剂，按照2.4.1的实验条件，调节发酵时间为14h、16h、18h、20h、22h、24h，取发酵液测量其多糖含量。
2.4.4发酵温度对五味子酵素的影响。
将处理好的北五味子果汁接种发酵剂，按照2.4.1的实验条件，调节发酵温度为27℃、33℃、37℃、42℃、45℃，发酵后取发酵液测量其多糖含量。
2.4.5搅拌速度对五味子酵素的影响。
将处理好的北五味子果汁接种发酵剂，按照2.4.1的实验条件，调节摇床转速为50rpm、70rpm、90rpm、110rpm、130rpm发酵，取发酵液测量其多糖含量。
2.4.6果汁稀释比例对五味子酵素的影响。
将处理好的北五味子果汁接种发酵剂，按照2.4.1的实验条件，稀释比例调为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5，取发酵液测量其多糖含量。
2.4.7接种量对五味子酵素的影响。
将处理好的北五味子果汁接种发酵剂，按照2.4.1的实验条件，调节乳酸菌接种量为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%，取发酵液测量其多糖含量。
2.5响应面试验优化酵素发酵条件。
2.5.1响应面试验设计。
根据单因素试验的结果，选取对北五味子酵素质量影响较大的温度、转速、接种量进行响应面实验，有意义的选择取值范围，根据Design-expert软件，设计实验方案，如表1。
表1响应面试验设计表
。
2.5.2验证实验。
根据响应面设计软件Design-expert的分析结果，采用其中给出的优化发酵条件进行重复实验。对比未经优化的条件下，酵素中总多糖的含量，考查回归模型的应用能力。
2.6感官评价。
2.6.1甜味剂的选择。
选择如下甜味剂对五味子酵素的口感进行调节：分别称取甜菊糖0.15g、阿拉伯糖0.30g、菊粉0.1g、葡聚糖0.2g、低聚木糖0.2g、低聚果糖0.25g、乳果糖0.30g、低聚半乳糖0.30g，加入到100mL北五味子酵素中，搅拌均匀，品尝味道，做出评价。
2.6.2五味子酵素感官评价表的设计。
根据文献对产品的气味、口感制定评定标准，设计感官评价表，表2是针对五味子酵素的感官评价表（表2）。
表2.五味子液体酵素的感官评价表
。
2.6.3感官评价的组织。
组织9名同学在实验室对使用添加剂后的北五味子酵素的组织状态、色泽、口感根据感官评价表进行评定。
2.7酵素产品体外降血糖功效研究。
取100.0μL样品溶液、α-葡萄糖苷酶（溶解于磷酸盐缓冲液pH6.5），在避光条件下反应10min（37℃水浴），然后加入100μL对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷溶液，在相同条件下反应20min，最后加入2.0mL Na2CO3溶液终止反应，于405nm处测定样品吸光值AS。同时设空白组和样品控制组，用乙醇代替样品作为空白组AB，用磷酸盐缓冲液代替α-葡萄糖苷酶溶液作为控制组AC。α-葡萄糖苷酶抑制率计算公式如下：
。
2.8酵素产品对肠道定植菌的益生作用。
将一定量灭菌后的酵素加入MRS培养基中，接种肠道定植菌——乳杆菌，37℃恒温箱中培养48±2h，菌落计数法统计活菌数，观察乳杆菌的生长情况。
实验结果。
3.1单因素试验研究五味酵素的发酵条件。
3.1.1发酵pH对五味子酵素的影响。
按照2.4.2的实验方法得出在不同pH时五味子酵素中多糖的含量如下图3，pH对于干酪乳杆菌的发酵活性会产生显著的影响。在发酵过程中乳酸菌会产生乳酸，降低发酵液的pH，进而抑制其自身的生长与代谢，在pH为5.5时酵素内的多糖含量最高。但在pH>5后产品的颜色较差，花青素损失严重，因此在响应面优化实验时，选择pH<5.0的范围。
3.1.2发酵时间对五味子酵素的影响。
按照2.4.3的实验方法得出不同发酵时间对五味子酵素中多糖的含量影响，结果如下图4，随着五味子酵素发酵时间的增加，酵素内的多糖含量先增加后降低，在18h时多糖含量最高。
3.1.3发酵温度对五味子酵素的影响。
按照2.4.4的实验方法得出在不同发酵温度时五味子酵素中多糖的含量如下图5，随着发酵温度升高，发酵剂活性增强，酵素中的多糖含量增加。在发酵温度为42℃时，多糖含量最高。
3.1.4搅拌速度对北五味子酵素的影响。
按照2.4.5的实验方法得出在不同搅拌速度时北五味子酵素中多糖的含量如下图6，在转速为90rpm时多糖含量最高。大部分干酪乳杆菌不运动，随着摇床转速的增加，干酪乳杆菌在发酵液中的分布更加均匀，发酵能力增强，搅拌速度升高后剪切力也会增加，会导致干酪乳杆菌的部分死亡，多糖的含量降低。
3.1.5稀释比例对北五味子酵素的影响。
按照2.4.6的实验方法，在不同果汁稀释比例时，北五味子酵素中多糖的含量如下图7，研究发现随着稀释比例增加，发酵液中的含氧量和含水量增加，干酪乳杆菌的生长发酵过程加快，产生多糖量升高，稀释比例更高后发酵底物含量降低，限制了干酪乳杆菌的生长发酵速度，多糖产量降低，并且干酪乳杆菌随着稀释比例的变化菌落数变化较大，综合考虑稀释比例为1:3最为合适。
3.1.6接种量对北五味子酵素的影响。
按照2.4.7的实验方法得出在不同接种量时北五味子酵素中多糖的含量，如下图8。研究表明，随着接种量的增多，活菌菌落数升高，达到一定数量后干酪乳杆菌之间的竞争力增强，消耗底物增加，发酵功能降低，酵素内多糖的含量先增加后降低，在接种量为0.4%时多糖含量最高。
3.2响应面实验结果与分析。
3.2.1响应面实验设计结果。
见下表3。
表3 响应面实验设计结果表
。
3.2.2响应面实验设计结果分析。
使用Box-Benhnken程序对数据结果回归分析，各个因素经过回归拟合后，得到的回归方程如下：五味子酵素产生的多糖含量=+1.24-0.024A+0.16B+0.11C-0.063AB-0.038AC+0.034BC-0.079A2-0.077B2-0.048C2。
式中：A为转速，B为pH，C为发酵时间。
由表4可知，模型F值为18.22意味着该模型显著。回归模型的决定系数为B、C、AB、A2、B2，Prob>F项小于0.0500表明模型条件具有显著性，且决定系数对多糖的积累量影响显著，该模型拟合度好。P值小于0.001说明模型条件特别重要，在这种情况下B、C，即pH和发酵时间是特别重要的模型条件。
该模型R2=0.9591，R2Adj=0.9064。说明该模型拟合效果很好，可以用于优化五味子酵素生产工艺方法的理论预测。模型的确定系数R2Adj为0.9064，说明方程的因变量与全体自变量间线性关系显著，响应值的变化有71.89%来源于所选自变量，即转速、pH、时间。AdeqPrecision是测量信噪比标志，比例若大于4即表示实验结果可取。本实验的信噪比为14.290说明这个模型可以被用作预估实验结果当中。
表4方差分析结果
。
*注：P<0.05显著，P<0.01特别显著。
3.2.3验证试验。
根据Box-Behnken实验所得到的数据结果和回归方程，从中可以获得一组最佳的北五味子酵素发酵条件：摇床速度82rpm，pH5.00，发酵时间16h，预计得到的多糖含量为1.4579mg/mL，根据该条件进行验证实验，测得发酵液的多糖含量为1.612mg/mL，说明响应面的可行性很好。使用2.4.1发酵条件所测得的总多糖含量为0.939mg/mL，说明优化后的发酵条件能够明显的增加酵素中的多糖含量，结果如下图9。
3.3甜味剂的选择。
按照GB 2760-2014对五味子酵素进行调味，选择了甜菊糖、阿拉伯糖、菊粉、葡聚糖、低聚木糖、低聚果糖、乳果糖、低聚半乳糖8种甜味剂，感官得分的比较如下图10。其中菊粉在添加量为1g/L时感官得分最高，菊粉可以较好的遮盖住北五味子酵素的明显发酵气味和酸味。甜菊糖具有清凉甘甜的味道，加入后北五味子酵素的发酵味道遮盖效果不佳，且轻微加重了酵素的苦味；阿拉伯糖、低聚木糖、低聚果糖的甜度较低调节酵素的酸味效果不佳，其中低聚木糖会明显加重酵素的苦味；乳果糖具有一定的蜂蜜味道，低聚半乳糖具有淡淡的奶香味，不能遮盖北五味子酵素的发酵气味。根据图11，随着菊粉添加量的增多，当添加量大于1g/L时菊粉的苦味与北五味子酵素的苦味叠加，使苦味加重，感官评分下降。
3.4酵素产品体外降血糖功效研究。
五味子酵素对于α-葡萄糖苷酶抑制率为：71.11%，高于文献（徐月,高慧,贾天柱.五味子“生熟异用”之降血糖作用[J].中药材,2014,37(11):1977-1979.DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2014.11.016.）中生五味子的α-葡萄糖苷酶抑制率。
3.5酵素产品对肠道定植菌的益生作用。
由图12可见，添加了酵素的培养基，经过培养后，获得了更多的活菌数，说明酵素产品对肠道益生菌的活性具有一定的促进作用。
3.6干酪乳杆菌发酵五味子酵素的功效成分的测定。
表5五味子果汁与发酵液功效成分分析
。
实施例7。
实验材料。
1.1原料。
发酵底物原料：新鲜五味子。
发酵剂：
①葡萄酒果酒专用酵母SY（Saccharomyces cerevisiae）：葡萄酒果酒专用酵母RW（Saccharomyces cerevisiae）。将上述酵母菌复合发酵剂配比后按接种量0.3%添加；
②干酪乳杆菌，接种量0.4%。
食品添加剂：菊粉、碳酸钠。
1.2培养基：MRS培养基。
实验方法。
2.1五味子果汁的预处理。
对新鲜五味子去除果梗，使用榨汁机打碎，用纱布过滤，弃去果渣，加入适量的蒸馏水进行倍比稀释，离心（20min，4000rpm），取上清液调果汁节pH，灭菌（100℃，15s，巴氏灭菌），冷却至室温备用。
2.2多糖标准曲线的测定。
使用苯酚-硫酸法测定多糖标准曲线。
2.3酵母菌活性的测定。
取处理好的果汁，接种酵母菌SY与RW各0.03g/100mL，在37℃，60rpm条件下发酵，每2h取1mL发酵液稀释至10-7、10-8、10-9（n=3）的浓度，均匀涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上，放入37℃恒温箱中培养48±2h，菌落计数法统计活菌数。
2.4酵母菌混合发酵比例研究。
按照RW：SY的比例为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、的比例在搅拌速度90rpm，温度32℃的条件下发酵21h，测定其发酵液的多糖含量，以其中含有的多糖量为指标进行评价，选出最佳配比。
2.5多菌种混合发酵产品对肠道定植菌的益生作用。
将一定量灭菌后的酵素加入MRS培养基中，接种常见的肠道定植菌——乳杆菌，37℃恒温箱中培养48±2h，菌落计数法统计活菌数，观察乳杆菌的生长情况。
2.6多菌种混合发酵产品体外降血糖功效研究。
取100.0μL样品溶液、α-葡萄糖苷酶（溶解于磷酸盐缓冲液pH6.5），在避光条件下反应10min（37℃水浴），然后加入100μL对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷溶液，在相同条件下反应20min，最后加入2.0mL Na2CO3溶液终止反应，于405nm处测定样品吸光值AS。同时设空白组和样品控制组，用乙醇代替样品作为空白组AB，用磷酸盐缓冲液代替α-葡萄糖苷酶溶液作为控制组AC。α-葡萄糖苷酶抑制率计算公式如下：
。
实验结果。
3.1酵母菌混合发酵最优比例。
RW:SY不同比例对多糖含量的影响如图13所示，其比例为1:4时多糖含量最高。混合发酵可使发酵液香味更浓，并且单一的菌种发酵有局限性，对于复杂的发酵过程不能很好的完成。酵母菌SY适合核果类发酵，酵母菌RW适合浆果类发酵。根据北五味子的特性，更适合使用SY作为发酵剂，所以本发明进行了酵母菌SY大量RW小量的比例研究。
3.2多菌种混合发酵产品对肠道定植菌的益生作用如图。
由图14可见，添加了酵素的培养基，经过培养后，获得了更多的活菌数，说明酵素产品对肠道益生菌的活性具有一定的促进作用。
3.3酵素产品体外降血糖功效研究。
多菌种混合发酵液98.77%、酵母菌发酵液85.68%、乳酸菌发酵液71.11%，说明混合多菌种发酵的酵素具有更好的潜在降血糖功效。
以上内容仅为本发明的较佳实施例，对于本领域的普通技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
Claims (2)
1.一种五味子酵素的发酵方法，其特征在于，所述方法的发酵周期为14~20h，所述方法的具体步骤如下：
（1）按如下质量比称取原料并稀释：五味子鲜果汁:水=1:3~1:4，得到原料液A；
（2）将原料液A使用1mol/L的Na2CO3调节pH到4.5~5.0，得到原料液B；
（3）向原料液B中加入0.3~0.5%的发酵剂，发酵16h，温度42℃，搅拌速度82rpm，得料液C；
（4）将料液C中加入1g/L的菊粉，混合均匀，得产品D；
（5）将产品D进行冻干处理，得产品E；
所述发酵剂为干酪乳杆菌。
2.一种五味子酵素产品，其特征在于，所述五味子酵素产品按照权利要求1所述方法发酵制备而得。
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