CN115286681B - 一种茶皂素提取物的制备方法 - Google Patents

一种茶皂素提取物的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种茶皂素提取物的制备方法，属于植物提取物相关技术领域。该制备方法包括以下步骤：S1、利用复合酶对油茶籽粕进行酶解，得到酶解液；所述复合酶包括纤维素酶、半纤维素酶与中性蛋白酶；S2、调节所述酶解液的乙醇体积分数至80％～90％后，固液分离，得到提取液；S3、向所述提取液中加入护色剂后，调节所述提取液的乙醇体积分数至30％～40％，分离得到醇相；S4、调节所述醇相的pH至8～9后，加入吸附剂，固液分离，得到上清液；S5、调节所述上清液的pH至5～6后，采用极性大孔树脂进行层析，依次用水、第一乙醇、第二乙醇进行洗脱，收集第二乙醇洗脱液，即得茶皂素提取物。该制备方法能够提取纯度高且颜色浅的茶皂素，且对环境友好。

Description

一种茶皂素提取物的制备方法
技术领域
本发明涉及植物提取物相关技术领域，尤其是涉及一种茶皂素提取物的制备方法。
背景技术
油茶饼粕又称茶饼、茶粕、枯饼等，其是油茶籽被榨取茶油后剰下的饼粕，其产量约为茶油的三倍。油茶粕含粗蛋白11～15％、粗脂肪5～7％、糖类40％～50％(其中粗纤维有15％～20％)、茶皂素10％～16％、粗灰分5％～6％、单宁2％左右、咖啡碱1％左右、水分7％～14％。油茶饼粕是很好的反当动物蛋白饲料，但是由于油茶饼粕味苦，且其含有的茶皂素、单宁等具有一定毒性，故多用作肥料、燃料、清塘剂等，造成了资源的极大浪费。
油茶饼粕中的茶皂素有许多优点，如降血脂、抑菌、増强动物免疫力、增加饲料转化率、抗病毒、改进肉质等，但是其味道辛辣并带苦湿，对鼻粘膜具有强烈的刺激性，影响饲料适口性，使得家畜拒食，而且其中所含的有毒成分含量较高，对动物的影响较大，不能直接作饲料。这严重制约着油茶饼粕在饲料业中的应用，因此，需对油茶饼粕进行脱毒处理才能用于饲喂牲畜，这不仅能够缓解世界性蛋白饲料紧缺的问题，而且还能提高废物利用率，实现资源的合理配置。
相关技术中公开了一种油茶籽饼粕中提纯茶皂素的方法(申请号：201110150274.5)，其采用石油醚将粉碎过筛后的油茶籽饼粕进行脱脂；用85％～95％乙醇溶液浸提，再通过采用絮凝-沉淀释放法对粗茶皂素进行提纯，得到的茶皂素溶液进行脱色，经浓缩、喷雾干燥制得精制茶皂素。此工艺使用了大量双氧水、二氧化氯，易造成污染，并且茶皂素的性质易受此影响；其次，该方法在沉淀的过程中引入了其他杂质，影响产品的质量，且收率低，最终茶皂素产品为淡黄色。
相关技术(申请号：202110006091.X)中还公开了通过用水混合加入酶对油茶籽粕分解，使得油茶籽粕细胞分子结构分散，提高溶剂的浸润效果；然后再喷雾干燥，使得水分挥发，保留物料的成分完整。通过使用去离子水、无水乙醇、乙酸乙酯混合成的提取溶剂，再用苯、醋酸依次处理得到纯化后的茶皂素，此工艺使用了大量的有机试剂，操作安全系数低，且使用了大量的酸碱，对环境不友好。
因此，需开发一种茶皂素提取物的制备方法，该制备方法能够提取纯度高且颜色浅的茶皂素，且对环境友好。
发明内容
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种茶皂素提取物的制备方法，该制备方法能够提取纯度高且颜色浅的茶皂素，且对环境友好。
根据本发明的第一方面实施例的一种茶皂素提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、利用复合酶对油茶籽粕进行酶解，得到酶解液；
所述复合酶包括纤维素酶、半纤维素酶与中性蛋白酶；
S2、调节所述酶解液的乙醇体积分数至80％～90％后，固液分离，得到提取液；
S3、向所述提取液中加入护色剂后，调节所述提取液的乙醇体积分数至30％～40％，分离得到醇相；
S4、调节所述醇相的pH至8～9后，加入吸附剂，固液分离，得到上清液；
S5、调节所述上清液的pH至5～6后，采用极性大孔树脂进行层析，依次用水、第一乙醇、第二乙醇进行洗脱，收集第二乙醇洗脱液，即得茶皂素提取物。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述油茶籽粕还需要进行前处理。所述前处理包括粉碎过筛。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述油茶籽粕的粒度为20目～40目。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，按质量计，所述复合酶的用量为所述油茶籽粕的0.32wt％～0.44wt％。纤维素酶和半纤维素酶能够使得粗纤维酶解，从而促进茶皂素溶出。茶皂素的皂苷主要同蛋白类的物质结合在一起，中性蛋白酶能够将蛋白组分水解，释放茶皂素，从而提高茶皂素的得率。
根据本发明的一些实施方式，所述纤维素酶、所述半纤维素酶与所述中性蛋白酶的质量比为20～30:4～5:2。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述酶解反应的溶剂为酸性乙醇水溶液。
根据本发明的一些实施方式，所述酸性乙醇水溶液中，乙醇的体积分数为40％～50％。在乙醇水溶液中，纤维素酶等具有更大的酶促水解效率，酶对细胞壁的水解和乙醇溶液对茶皂素类物质的浸出产生协同效应。由此，能够破坏细胞壁纤维素晶体表面的水分子层结构，使纤维素分子间或分子内的氢键作用减弱，还可以降低酶在纤维素上的无效吸附。同时，40％～50％乙醇溶液的极性与茶皂素类物质的极性相近，能够促进茶皂素的溶出，从而提高茶皂素的提取量。如果乙醇浓度过高，会使酶失活，影响提取效果。如果乙醇浓度过低，会使得茶皂素提取不完全，极性大的多糖类、蛋白类等物质被提取，且易发生美拉德反应，影响茶皂素的颜色与纯度，还会导致浓缩时易起泡，使得生产浓缩不可控。
根据本发明的一些实施方式，所述酸性乙醇水溶液的pH为5.5～6.5。由此，茶皂素损耗小，油脂收率高。如果酸性乙醇水溶液的pH过酸，会导致茶皂素不稳定，最终收率低。如果复合酶的溶剂乙醇水溶液为碱性，会使得黄酮类色素等被提取出来，增加后期分离难度。
根据本发明的一些实施方式，所述酸性乙醇水溶液的pH为6～6.5。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述油茶籽粕与所述酸性乙醇水溶液的料液比为1kg：1.5L～2.5L。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述油茶籽粕与所述酸性乙醇水溶液的料液比为1kg：1.8L～2.2L。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述油茶籽粕与所述酸性乙醇水溶液的料液比为1kg：1.8L。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述酶解反应的温度为40℃-50℃。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述酶解反应的时间为30min～40min。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述酶解反应还包括超声处理。
根据本发明的一些实施方式，步骤S1中，所述超声处理的功率为160-320W。
随超声功率升高，超声波对底物均质作用越明显，伴随振动产生的能量加快了酶分子运动，增加了酶与底物的接触概率。同时，超声空化作用使细胞破裂，茶皂素、油脂溶出，不断增加。如果超声功率过大，瞬时热效应过于明显，会使部分酶分子失活或变性，导致茶皂素得率降低。
根据本发明的一些实施方式，步骤S2中，调节所述酶解液的乙醇体积分数后，料液比为1kg:10L～16L。
根据本发明的一些实施方式，步骤S2中，调节所述酶解液的乙醇体积分数后，还包括超声处理。
根据本发明的一些实施方式，步骤S2中，所述超声处理的温度为40℃～60℃。
根据本发明的一些实施方式，步骤S2中，所述超声处理的功率为240W～400W。随着超声波功率增加，提取率逐渐提高。如果功率超过400W，会增加机械破碎强度，会破坏茶皂素的性质，还会使得能耗加大。
根据本发明的一些实施方式，步骤S2中，所述超声处理的时间为20min～30min。
超声辅助高浓度乙醇水溶液(80％～90％乙醇水溶液)进行低温提取，既能够减少多糖、蛋白质类等成分的溶出，又能够防止已溶出的淀粉糊化速度加快，致使溶液黏性增加，影响后续浓缩处理，避免溶液发生褐变，导致颜色加深；同时还能够避免浓缩起泡，降低后续浓缩的难度，使得生产浓缩可控，提高了生产效率。单位时间内超声波产生的空化作用，利于破坏细胞壁，使得茶皂素等成分容易从细胞壁中释放到溶液中。
根据本发明的一些实施方式，步骤S3中，所述护色剂的用量为所述提取液中可溶性固形物的0.3wt％～0.4wt％。
根据本发明的一些实施方式，所述护色剂包括焦亚硫酸钠和亚硫酸氢钠。在茶皂素的生产中，浓缩时间往往比较长，且存在浓缩起泡问题，会使浓缩时间延长，且茶皂素分子含有糖体，可与氨基酸发生美拉德反应使提取物颜色加深。通过使用实施例的护色剂，能够抑制美拉德反应，使得制备得到的茶皂素提取物的褐变程度浅。
根据本发明的一些实施方式，按质量计，所述焦亚硫酸钠:所述亚硫酸氢钠＝1:1～2。
步骤S3中，需调节所述提取液的乙醇体积分数至30％～40％。由此，实现油相和醇相的分层。如果乙醇浓度过高，会增加油脂的溶解性，导致分离效果不理想。如果乙醇浓度过低，会使得破乳效果不明显。乙醇的界面张力比水小，在油脂提取中时，可以降低醇-水混合体系的界面张力，促进油脂的释放，还可以促进茶皂素的释放。乙醇是一种强极性的溶剂，可以通过分子运动扩散到体系的油水界面，其强亲水性导致原有的水膜结构和蛋白质以及茶皂素界面性质发生改变；同时，乙醇对形成界面膜的双亲蛋白质的亲水端与茶皂素的亲水端具有吸附力，从而能够有效破坏界面膜的稳定性，进而降低乳状液的稳定性，有利于油滴聚集形成游离的油相而被分离。
根据本发明的一些实施方式，步骤S3的温度不超过60℃。由此，能够抑制美拉德反应，如果温度超过60℃，受热时间较长，会加深茶皂素提取物的最终颜色。
根据本发明的一些实施方式，步骤S3的温度为45℃～60℃。
根据本发明的一些实施方式，步骤S3中，分离所述醇相还包括前处理。所述前处理为离心。所述离心的转速不低于6000r/min；优选为6000r/min～10000r/min。所述离心的时间为10min～15min。
步骤S4中，需调节所述醇相的pH至8～9。如果醇相的pH低于8，吸附剂中的羧甲基壳聚糖的羧基电离受到抑制，会使得一些色素类杂质的阴离子结合氢离子带部分正电荷，从而与吸附剂产生电荷排斥，影响脱色效果；如果醇相的pH高于9，吸附剂中的羧甲基壳聚糖羧基几乎全部形成羧酸根阴离子，会与色素类杂质阴离子产生电荷排斥，降低其吸附絮凝的能力，导致脱色效果差。
根据本发明的一些实施方式，步骤S4中，所述吸附剂的用量为所述油茶籽粕的2.4wt％～3wt％。
根据本发明的一些实施方式，所述吸附剂包括羧甲基壳聚糖和氧化镁。由此，能够脱除色素，吸附黄酮、酚酸、氨基酸、生物碱等杂质，且对茶皂素的保留率高。
氧化镁可通过电中和及吸附作用来去除色素及杂质，其不仅对糖、单宁、色素类杂质具有较好的吸附效果，还对皂苷类的成分也具有较强吸附作用。如果仅使用氧化镁作为吸附剂，虽然可以达到较好的脱色效果，但同时也导致茶皂素的收率下降。实施例的吸附剂同时含有羧甲基壳聚糖和氧化镁，其对杂质的吸附力大于茶皂素，不仅可达到脱色效果，同时可以降低茶皂素的损耗。如果不添加吸附剂，茶皂素收率会升高，但色素类杂质无法有效去除，会使制得的茶皂素提取物颜色深且纯度低，使其应用受限。
实验发现羧甲基壳聚糖-氧化镁复合吸附剂性能优于单独的氧化镁吸附剂，这是因为羧甲基壳聚糖相对分子质量较大，溶入水中后分散为有机线性高分子，在碱性条件下，其表面携带的阳离子活性基团可吸引杂质分子的负电荷基团，杂质分子上含有一些-OH及-NH2基团，可以通过范德华力、氢键等和羧甲基壳聚糖发生吸附形成沉降。复合吸附剂中的羧甲基壳聚糖形成的有机线性高分子具有在脱稳的悬浮粒子、杂质等之间架桥的作用，有利于形成较大的絮体，通过絮体有卷扫作用成倍地增强了去除水中杂质的功能；同时，羧甲基壳聚糖带有的活性基团同样能中和杂质表面的电荷，使杂质等进一步脱稳。在羧甲基壳聚糖和氧化镁的协同作用下，达到脱色并与溶液分离的目的，提高了吸附剂的絮凝效果。
根据本发明的一些实施方式，按质量计，所述羧甲基壳聚糖:所述氧化镁＝1:3～4。
根据本发明的一些实施方式，所述吸附剂的处理时间为45min～55min。
步骤S4中，需调节所述上清液的pH至5～6。在碱性条件下，茶皂素主要呈离子态，不易被树脂吸附。如果pH低于5，会使得吸附效果差，且杂质不易被洗脱。
根据本发明的一些实施方式，所述极性大孔树脂为XDA-8和S-8中的至少一种。
根据本发明的一些实施方式，步骤S5中，所述第一乙醇中，乙醇体积分数为20％～30％。
根据本发明的一些实施方式，步骤S5中，所述第一乙醇的用量为1BV～3BV。
通过水与20％～30％乙醇进行洗脱能够去除极性大的杂质，尤其是20％～30％乙醇进行洗脱可以去除掉极性相对较大的色素类杂质。如果水和第一乙醇的用量少，会达不到预期效果，难以得到颜色浅的茶皂素提取物；如果用量大，会影响茶皂素的收率。
根据本发明的一些实施方式，步骤S5中，所述第二乙醇中，乙醇体积分数为70％～80％。
根据本发明的一些实施方式，步骤S5中，所述第二乙醇的用量为2BV～4BV。
根据本发明实施例的一种茶皂素提取物的制备方法，具备如下有益效果：
油茶籽饼中含有5％～7％的油脂，相关技术多直接使用有机试剂对其进行脱脂处理，再采用水/醇提，需要使用到大量的易燃易爆试剂(如石油醚等)，或采用水酶法直接提取，这会导致大量的多糖类、蛋白质类、色素、油脂等成分与茶皂素混合在一起，从而影响茶皂素产品颜色，增加了后续茶皂素的分离难度。实施例的制备方法采用超声波辅助乙醇水溶液-复合酶体系进行酶解提取，能够有效提高茶皂素的收率，降低茶皂素后续分离难度。
实施例的制备方法工艺简单，能够综合利用油茶籽粕，还能够降低生产成本，除乙醇外未使用其他有机试剂，对环境友好。通过实施例的制备方法，可获得高纯度的灰白色茶皂素提取物，纯度＞95％。
本发明的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下述实施例中，油茶籽粕供应商：湖南朗林农业发展有限公司。油茶籽粕原料中，茶皂素含量11.47wt％，检测方法：GB/T 35131-2017；含油量6.36wt％，检测方法：GB/T14488.1-2008。半纤维素酶和纤维素酶的供应商为盛夏实业集团；中性蛋白酶的的供应商为安徽舒俊生物科技有限公司。
极性大孔树脂XDA-8、极性大孔树脂S-8的供应商：西安蓝晓科技新材料股份有限公司。
吸附剂的制备方法为：取羧甲基壳聚糖加入100mL 60℃～70℃水中，快速磁力搅拌30min～40min，至羧甲基壳聚糖完全溶解，再边搅拌边加入适量氧化镁粉末，继续搅拌20min～30min，放入105℃烘箱中烘干，粉碎备用。
茶皂素提取物含量检测方法：GB/T41549-2022。
茶皂素提取物中茶皂素含量的检测方法：GB/T 41549-2022油茶皂素质量要求。
步骤S3的醇相中，茶皂素收率的计算公式如下：
Figure BDA0003781617160000061
其中，m1指提取液中可溶性固形物的质量；w1指提取液中可溶性固形物的茶皂素含量；m1指醇相中可溶性固形物的质量；w2指醇相中的可溶性固形物的茶皂素的含量。
茶皂素提取物中，茶皂素含量计算公式如下：
Figure BDA0003781617160000062
m3指接收瓶与茶皂素提取物的总质量；m4指接收瓶的质量，m5指油茶籽粕的质量；1223.54为油茶皂素的理论平均相对分子质量；602为油茶皂素水解物的理论平均相对分子质量。
茶皂素提取物中，茶皂素总收率的计算公式如下：
Figure BDA0003781617160000071
其中，m6指茶皂素提取物的质量；w3指茶皂素提取物中的茶皂素含量；M指油茶籽粕的质量；w4指油茶籽粕中茶皂素的含量。
下面详细描述本发明的具体实施例。
实施例1
本实施例提供一种茶皂素提取物的制备方法，由以下步骤组成：
S1、将100kg油茶籽粕破碎至40目，加入220L的45％乙醇水-复合酶溶液(pH＝5.5，复合酶添加量为0.32wt％，其中，纤维素酶0.25wt％，半纤维素酶0.05wt％，中性蛋白酶0.02wt％)，超声功率160W，50℃超声酶解35min，得酶解液。
S2、向酶解液中加入95％乙醇和水，使乙醇终体积分数为80％，总料液比为1kg：10L，240W超声波辅助60℃超声30min，固液分离，得提取液。
其中，得到的固相为油茶籽粕渣，回收酒精并干燥后可作为动物饲料，其中的茶皂素、丹宁等被去除，减少了毒性，增加了适口性。
S3、向提取液中加入护色剂后，于60℃减压浓缩至乙醇终浓度为40％，随后6000r/min离心15min，分别收集上层油相与下层醇相。
其中，护色剂为焦亚硫酸钠和亚硫酸氢钠，按质量计，焦亚硫酸钠：亚硫酸氢钠＝1：1，其添加量为提取液中可溶性固形物质量的0.4％。
S4、用NaOH将醇相的pH调至8，并加入吸附剂，100r/min搅拌20min，静置30min，固液分离后，得上清液。
吸附剂中，按质量计，羧甲基壳聚糖：氧化镁＝1：3；其添加量为步骤S1的油茶籽粕重量的2.4wt％。
S5、将上清液pH调至5后，过极性大孔树脂XDA-8，依次用2BV水、1BV 30％乙醇水溶液、2BV 80％乙醇水溶液进行洗脱，收集80％乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩干燥，得到灰白色茶皂素提取物9.22kg。
经检测，步骤S3中，共收集到6.17kg上层油相，其中的茶皂素含量为3.50wt％；下层醇相相对提取液的茶皂素的收率为98.03％。
步骤S5的灰白色茶皂素提取物中，茶皂素含量为95.28％，总收率为76.55％。
实施例2
本实施例提供一种茶皂素提取物的制备方法，由以下步骤组成：
S1、将100kg油茶籽粕破碎至20目，加入180L的50％乙醇水-复合酶溶液(pH＝6.5，复合酶添加量为0.44wt％，其中，纤维素酶0.35wt％、半纤维素酶0.06wt％，中性蛋白酶0.03wt％)，超声功率240W，45℃超声酶解40min，得酶解液。
S2、向酶解液中加入95％乙醇和水，使乙醇终体积分数为90％，总料液比为1kg：16L，320W超声波辅助50℃超声25min，固液分离，得提取液。
其中，得到的固相为油茶籽粕渣，回收酒精并干燥后，可作为动物饲料。
S3、向提取液中加入护色剂后，于45℃减压浓缩至乙醇体积分数为30％，随后8000r/min离心12min，分别收集上层油相与下层醇相。
其中，护色剂为焦亚硫酸钠和亚硫酸氢钠，按质量计，焦亚硫酸钠：亚硫酸氢钠＝1：2，其添加量为提取液中可溶性固形物质量的0.3％。
S4、用NaOH将醇相的pH调至9，加入吸附剂，80r/min搅拌15min，静置40min，固液分离后，得上清液。
吸附剂中，按质量计，羧甲基壳聚糖：氧化镁＝1：4；其添加量为步骤S1的油茶籽粕重量的2.4wt％。
S5、将上清液pH调至6后，过极性大孔树脂S-8，依次用1.5BV水、2BV 25％乙醇水溶液、4BV 70％乙醇水溶液进行洗脱，收集70％乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩干燥，得到灰白色茶皂素提取物9.41kg。
经检测，步骤S3中，共收集到6.19kg上层油相，其中的茶皂素含量为1.72wt％；下层醇相相对提取液的茶皂素的收率为99.05％。
步骤S5的灰白色茶皂素提取物中，茶皂素含量为97.95％，总收率为80.34％。
实施例3
本实施例提供一种茶皂素提取物的制备方法，由以下步骤组成：
S1、将100kg油茶籽粕破碎至20目，加入200L的40％乙醇水-复合酶溶液(pH＝6，复合酶添加量为0.37wt％，其中，纤维素酶0.3wt％、半纤维素酶0.05wt％，中性蛋白酶0.02wt％)，超声功率320W，40℃超声酶解30min，得酶解液。
S2、向酶解液中加入95％乙醇和水，使乙醇终体积分数为85％，总料液比为1kg：13L，400W超声波辅助40℃超声25min，固液分离，得提取液。
其中，得到的固相为油茶籽粕渣，回收酒精并干燥后，可作为动物饲料。
S3、向提取液加护色剂后，于50℃减压浓缩至乙醇体积分数为35％，随后10000/min离心10min，分别收集上层油相与下层醇相。
其中，护色剂为焦亚硫酸钠和亚硫酸氢钠，按质量计，焦亚硫酸钠：亚硫酸氢钠＝1：1.5，其添加量为提取液中可溶性固形物质量的0.35％。。
S4、用NaOH将醇相pH调至8.5，加入吸附剂，90r/min搅拌15min，静置30min，固液分离后，得上清液。
吸附剂中，按质量计，羧甲基壳聚糖：氧化镁＝1：3.5；其添加量为步骤S1的油茶籽粕重量的3wt％。
S5、将上清液pH调至5.5后，过极性大孔树脂XDA-8，依次用2BV水、3BV 20％乙醇水溶液、3BV 75％乙醇水溶液进行洗脱，收集75％乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩干燥，得到灰白色茶皂素提取物9.17kg。
经检测，步骤S3中，共收集到6.21kg上层油相，其中的茶皂素含量为2.73wt％；下层醇相相对提取液的茶皂素的收率为98.46％。
步骤S5的灰白色茶皂素提取物中，茶皂素含量为96.38％，总收率为77.08％。
对比例1
相比于实施例2，区别仅在于：将步骤S3中的“减压浓缩至乙醇体积分数为35％”替换为“减压浓缩至乙醇体积分数为0％”。
经检测，步骤S3中，共收集到5.59kg上层油相，且油相中含有较多泡沫，其中的茶皂素含量为17.30wt％；下层醇相相对提取液的茶皂素的收率为91.38％。
步骤S5中，得到灰白色茶皂素提取物8.87kg，其中的茶皂素含量为92.31％，总收率为70.64％。
对比例2
相比于实施例2，区别仅在于：将步骤S3中的“减压浓缩至乙醇体积分数为35％”替换为“减压浓缩至乙醇体积分数为60％”。
经检测，步骤S3中，还含有少量乳化层，共收集到6.07kg上层油相，油相中的茶皂素含量为10.13wt％；下层醇相相对提取液的茶皂素的收率为94.51％。
步骤S5中，得到灰白色茶皂素提取物8.93kg，其中的茶皂素含量为93.86％，总收率为73.08％。
对比例3
相比于实施例2，区别仅在于：缺省步骤S4的吸附剂。
经检测，步骤S5中，得到茶皂素提取物10.34kg，为棕黄色，其中的茶皂素含量为91.48％，总收率为82.75％。
对比例4
相比于实施例1，区别仅在于：将步骤4中的吸附剂替换为氧化镁。
经检测，步骤S5中，得到灰白色茶皂素提取物8.94kg，其中的茶皂素含量为93.34％，总收率为72.79％。
上面结合具体实施方式对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

Claims (14)

1.一种茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、利用复合酶对油茶籽粕进行酶解，得到酶解液；
所述复合酶包括纤维素酶、半纤维素酶与中性蛋白酶；
步骤S1中，所述酶解反应的溶剂为酸性乙醇水溶液；所述酸性乙醇水溶液中，乙醇的体积分数为40％～50％；所述酸性乙醇水溶液的pH为5.5～6.5；
S2、调节所述酶解液的乙醇体积分数至80％～90％后，固液分离，得到提取液；
步骤S2中，调节所述酶解液的乙醇体积分数后，还包括超声处理；
S3、向所述提取液中加入护色剂后，调节所述提取液的乙醇体积分数至30％～40％，分离得到醇相；
所述护色剂包括焦亚硫酸钠和亚硫酸氢钠；步骤S3的温度不超过60℃；
S4、调节所述醇相的pH至8～9后，加入吸附剂，固液分离，得到上清液；
所述吸附剂包括羧甲基壳聚糖和氧化镁；
S5、调节所述上清液的pH至5～6后，采用极性大孔树脂进行层析，依次用水、第一乙醇、第二乙醇进行洗脱，收集第二乙醇洗脱液，即得茶皂素提取物；
步骤S5中，所述第一乙醇中，乙醇体积分数为20％～30％；所述第二乙醇中，乙醇体积分数为70％～80％。
2.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：步骤S1中，按质量计，所述复合酶的用量为所述油茶籽粕的0.32wt％～0.44wt％。
3.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：所述纤维素酶、所述半纤维素酶与所述中性蛋白酶的质量比为20～30:4～5:2。
4.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述酶解的温度为40℃-50℃。
5.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：所述酶解的时间为30min～40min。
6.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：所述超声处理的温度为40℃～60℃。
7.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：所述超声处理的功率为240W～400W。
8.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：步骤S3中，所述护色剂的用量为所述提取液中可溶性固形物的0.3wt％～0.4wt％。
9.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：按质量计，所述焦亚硫酸钠:所述亚硫酸氢钠＝1:1～2。
10.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：步骤S4中，所述吸附剂的用量为所述油茶籽粕的2.4wt％～3wt％。
11.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：按质量计，所述羧甲基壳聚糖:所述氧化镁＝1:3～4。
12.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：所述极性大孔树脂为XDA-8和S-8中的至少一种。
13.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：步骤S5中，所述第一乙醇的用量为1BV～3BV。
14.根据权利要求1所述的茶皂素提取物的制备方法，其特征在于：步骤S5中，所述第二乙醇的用量为2BV～4BV。
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