CN115261364A - 改善β-丙氨酸生产的昆虫源性天冬氨酸脱羧酶及其变体 - Google Patents

改善β-丙氨酸生产的昆虫源性天冬氨酸脱羧酶及其变体 Download PDF

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Abstract

与化学合成方法相比，经由酶催化去除L‑天冬氨酸的α羧基进行β‑丙氨酸的工业规模生物合成一直受到活性、表达和/或稳定性较差的酶的极大阻碍，使得此类方法在商业上不可行。本文描述了具有天冬氨酸1‑脱羧酶活性的特别有利于β‑丙氨酸生产的重组昆虫源性酶及其变体。本文还描述了展现出改善的β‑丙氨酸生产性能的昆虫天冬氨酸1‑脱羧酶的N末端截短型变体。

Description

改善β-丙氨酸生产的昆虫源性天冬氨酸脱羧酶及其变体
本说明书涉及用于生产β-丙氨酸的生物方法。更具体地，本文描述了特别有利于从L-天冬氨酸生产β-丙氨酸的昆虫天冬氨酸1-脱羧酶(ADC)酶及其变体。
背景技术
β-丙氨酸(也称为β-氨基丙酸或3-氨基丙酸)是一种天然存在的氨基酸，其中氨基位于羧酸基团的β位处。β-丙氨酸是一种多用途有机合成原料，主要用于合成泛酸和泛酸钙、肌肽、帕米膦酸盐、巴柳氮等。它广泛用于医药、饲料、食品以及其他领域，并且具有广阔的市场需求。在工业规模上，β-丙氨酸目前是通过涉及苛刻的反应条件的化学方法来生产的，具有安全问题、高设备成本和环境污染。与化学合成方法相比，通过更安全且更环保的生物方法生产β-丙氨酸一直受到活性、表达和/或稳定性较差的酶的极大阻碍，从而使得此类方法在商业上不可行。因此，非常需要可用于β-丙氨酸的生物生产的改善的酶。
发明内容
在一方面，本文描述了一种重组截短型昆虫天冬氨酸1-脱羧酶(ADC)，所述截短型昆虫ADC缺乏在相应的全长野生型昆虫ADC的氨基末端区域内的足够数量的连续残基，使得与相应的全长野生型昆虫ADC相比，所述截短型ADC展现出增加的天冬氨酸向β-丙氨酸的转化。
在进一步的方面，本文描述了一种具有天冬氨酸1-脱羧酶活性的重组蛋白，所述重组蛋白包含总体上与以下至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列：
(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置72至561；
(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置79至568；
(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置56至544；
(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置52至540；
(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置71至560；
(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置71至562；
(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置74至563；
(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置72至561；
(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置74至624；
(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置83至572；
(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置72至561；
(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置53至541；或
(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置57至572。
在进一步的方面，本文描述了一种多核苷酸，所述多核苷酸包含编码本文所述的重组截短型昆虫ADC或本文所述的重组蛋白的核酸序列。
在进一步的方面，本文描述了一种表达盒，所述表达盒包含分离的或重组的本文所述的多核苷酸，所述多核苷酸与相对于昆虫ADC异源的启动子可操作地连接。
在进一步的方面，本文描述了一种宿主细胞，所述宿主细胞表达本文所述的重组截短型昆虫ADC、本文所述的重组蛋白，和/或用本文所述的多核苷酸或本文所述的表达盒转化或被工程化以包含本文所述的多核苷酸或本文所述的表达盒。
在进一步的方面，本文描述了一种用于生产β-丙氨酸的方法，所述方法包括：(a)提供ADC酶源，所述ADC酶源是本文所述的截短型昆虫ADC、本文所述的重组蛋白和/或本文所述的宿主细胞；(b)在使所述ADC酶源能够催化天冬氨酸转化为β-丙氨酸的条件下使所述ADC酶源与天冬氨酸源接触；以及(c)分离和/或浓缩所生产的β-丙氨酸。
在进一步的方面，本文描述了一种组合物，所述组合物包含通过本文所述的方法生产的β-丙氨酸。
通用定义
提供标题和其他标识符(例如，(a)、(b)、(i)、(ii)等)只是为了便于阅读说明书和权利要求书。说明书或权利要求书中标题或其他标识符的使用不一定要求步骤或要素按字母或数字顺序或提供它们的顺序进行。
在权利要求书和/或说明书中，当与术语“包含(comprising)”连用时，词语“一个/一种(a)”或“一个/一种(an)”的使用可以意指“一个/一种(one)”，但是它也与“一个/一种或多个/多种(one or more)”、“至少一个/一种(at least one)”和“一个/一种或超过一个/一种(one or more than one)”的含义一致。
使用术语“约”指示某数值包括为了确定所述值而采用的装置或方法的误差的标准偏差。通常，术语“约”意在指定至多10％的可能变动。因此，某数值的1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％和10％的变动被包括在术语“约”中。除非另外指示，否则当在某范围之前使用术语“约”适用于所述范围的两端。
如本文所用，术语“包含(comprising)”(和包含(comprising)的任何形式，诸如“包含(comprise)”和“包含(comprises)”)、“具有(having)”(和具有(having)的任何形式，诸如“具有(have)”和“具有(has)”)、“包括(including)”(和包括(including)的任何形式，诸如“包括(includes)”和“包括(include)”)或“含有(containing)”(和含有(containing)的任何形式，诸如“含有(contains)”和“含有(contain)”)是包含性的或开放式的，并不排除另外的未列举的要素或方法(process/method)步骤。
如本文所用，术语“β-丙氨酸”包括β-丙氨酸以及β-丙氨酸盐(例如，钙、钠或钾β-丙氨酸盐)。
附图说明
在附图中：
图1示出了来自按85％序列同一性分组的不同昆虫物种的ADC酶的系统发生树。示出了实施例2中测试的一些ADC的活性数据。
图2示出了从九种不同的蚊物种中鉴定的ADC的氨基酸序列的比对。虚线描绘了N末端部分中的在蚊ADC之间的保守性较差的区域。CtADC独有的位置96处的甘氨酸残基以黑色突出显示。
图3示出了实施例5和实施例6中所述的蚊和甲虫ADC的N末端氨基酸序列的比对。以黑色突出显示的两个残基之间的N末端截短体产生与其相应的全长蛋白质相比具有增加的活性的截短型ADC，而以白色框出的两个残基之间的N末端截短体产生具有低或不可检测的ADC活性的酶。用虚线指示的区域描绘了预期N末端截短体可能不再有利于酶活性的位置。
序列表
本申请包含创建于2021年3月1日、大小约100kb的计算机可读形式的序列表。将所述计算机可读形式通过引用并入本文。
表1：序列表描述
Figure BDA0003530627980000021
Figure BDA0003530627980000031
具体实施方式
与化学合成方法相比，经由酶催化去除L-天冬氨酸的α羧基进行β-丙氨酸的工业规模生物合成的尝试一直受到活性、表达和/或稳定性较差的酶的极大阻碍，使得此类方法在商业上不可行。催化L-天冬氨酸转化为β-丙氨酸的具有增加的活性、表达和/或稳定性的改善的酶将极大地促进β-丙氨酸的商业规模生物合成。本说明书涉及以下发现：具有天冬氨酸1-脱羧酶活性的某些昆虫源性酶特别有利于β-丙氨酸生产，并且进一步地，此类昆虫源性酶的性能可以通过截短它们的N末端部分极大地改善。
在第一方面，本文描述了特别有利于β-丙氨酸生产的重组截短型昆虫天冬氨酸1-脱羧酶(ADC)酶。如本文所用，表述“天冬氨酸1-脱羧酶”或“ADC”是指具有催化L-天冬氨酸酶促转化为β-丙氨酸和二氧化碳的能力的多肽。在一些实施方案中，此类多肽可以包括归类在酶类E.C.4.1.1.11下的那些多肽。在一些实施方案中，此类多肽还可以包括归类在其他酶类中的酶(例如，对除L-天冬氨酸以外的底物也具有活性的酶)和/或可能已经被注释(例如，在公共数据库中)为除ADC以外的酶的多肽(例如，谷氨酸脱羧酶、半胱氨酸亚磺酸脱羧酶)。在一些实施方案中，本文所述的昆虫ADC及其截短型变体可以包括具有天冬氨酸1-脱羧酶活性和半胱氨酸亚磺酸脱羧酶活性二者的酶。
如本文所用，术语“截短型”或“截短”不仅包括从末端残基开始(例如，从重组蛋白的N末端甲硫氨酸开始)的蛋白质区段的去除，而且还可以包括在蛋白质(例如，野生型蛋白质)的末端区域或部分内连续残基的缺失，使得截短蛋白质的末端部分比未截短蛋白质的末端部分短。
在一些实施方案中，本文所述的截短型昆虫ADC缺乏在其相应的全长野生型昆虫ADC的氨基末端部分内的足够数量的连续残基，使得与其亲本全长野生型蛋白质相比，所述截短型ADC展现出增加的天冬氨酸向β-丙氨酸的转化。在一些实施方案中，相对于相应的全长野生型蛋白质，天冬氨酸向β-丙氨酸的转化增加可以包括增加的ADC催化活性、增加的ADC稳定性和/或增加的表达。
在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以是昆虫纲生物体的截短型变体(例如，蚊、蝇、甲虫、蚤、蟑螂或白蚁ADC)。在特定实施方案中，本文所述的截短型昆虫ADC可以是蚊、蝇或甲虫ADC的截短型变体，其结构关系示于图1的系统发生树中。在一些实施方案中，本文所述的截短型昆虫ADC可以是来自以下属的昆虫ADC的截短型变体：库蚊属(Culex)、按蚊属(Anopheles)、果蝇属(Drosophila)、Aethina、伊蚊属(Aedes)、拟谷盗属(Tribolium)、按蚊属、粉虫属(Tenebrio)、Asbolus或堆砂白蚁属(Cryptotermes)。在一些实施方案中，本文所述的截短型昆虫ADC可以包括来自以下物种的昆虫ADC的截短型变体：跗斑库蚊、阿拉伯按蚊、黑腹果蝇、致倦库蚊、蜂箱小甲虫、白纹伊蚊、埃及伊蚊、赤拟谷盗、中华按蚊、黄粉虫、Asbolus verrucosus或第二堆砂白蚁。
在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以是蚊ADC的截短型变体，所述蚊ADC包含总体上与SEQ ID NO:2、4或9-15中任一个至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以是甲虫ADC的截短型变体，所述甲虫ADC包含总体上与SEQ ID NO:1、3或5-6中任一个至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以是蝇ADC的截短型变体，所述蝇ADC包含总体上与SEQ ID NO:8至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以包含总体上与相对于其未截短(例如，全长)亲本酶展现出增加的活性的ADC的N末端截短片段至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以包含总体上与以下至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置72至561；(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置79至568；(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置56至544；(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置52至540；(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置71至560；(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置71至562；(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置74至563；(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置72至561；(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置74至624；(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置83至572；(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置72至561；(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置53至541；或(m)SEQ IDNO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置57至572。这些区段对应于野生型全长昆虫ADC的片段，所述片段要么被证明在β-丙氨酸生产中展现出提高的性能，要么可以基于序列保守性和多序列比对被预期如此，如在实施例5-7以及图2和图3中。
在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以缺乏相应的全长野生型昆虫ADC的氨基末端的至少X个连续残基，其中X是在5与50之间的任何整数。在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以缺乏相应的全长野生型昆虫ADC的氨基末端的至少5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69或70个连续残基，这取决于相应的全长野生型昆虫ADC的氨基末端的长度。
在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以在对应于全长野生型昆虫ADC的位置n的残基的紧邻C末端(下游)的位置处截短，其中n是在2与Y之间的任何整数，其中Y是在全长野生型昆虫ADC内的可以发生截短的最C末端残基位置，其中与全长野生型ADC相比，所述截短型ADC展现出增加的天冬氨酸向β-丙氨酸的转化。如本文在氨基酸残基编号的上下文中所用的，表述“对应于位置”考虑到氨基酸残基编号在不同的蛋白质(例如，不同的昆虫ADC)之间不同，但是本领域技术人员将能够使用广泛可用的软件(例如，Clustal Omega)通过在两种蛋白质(任选地包括另外的直系同源物)之间进行序列比对以鉴定保守残基来确定具有一定程度的氨基酸序列同一性的两种蛋白质中的相应的残基位置，如本文所证明的。
在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以在对应于以下中的任一个的残基的C末端(下游)的位置处截短：(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至71；(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至78；(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至55；(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至51；(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至70；(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至70；(g)SEQID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至73；(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至73；(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至73；(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至82；(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至78；(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至52；或(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至56。上述每个氨基酸序列的上限是指表7和图3所示的全长野生型昆虫ADC内的残基位置并且对应于CtADC的K71。至少直到CtADC的K71的N末端截短体产生与全长野生型ADC相比展现出增加的天冬氨酸向β-丙氨酸的转化的截短型ADC(CtADC72-561)。
在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以在对应于以下中的任一个的残基的N末端(上游)的位置处截短：(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置72至80；(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置79至87；(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置56至64；(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置52至60；(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置71至79；(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置71至79；(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置74至82；(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置72至82；(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置74至82；(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置83至91；(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置72至87；(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置53至61；或(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置57至65。这些残基位置对应于在表7中描绘并且在图3中用虚线描绘的那些位置。
在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC可以在对应于以下中的任一个的残基的N末端(上游)的位置处截短：(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置75；(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置82；(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置59；(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置55；(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置74；(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置74；(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置77；(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置77；(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置77；(j)SEQ IDNO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置86；(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置82；(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置56；或(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置60。这些残基位置对应于CtADC中的S75，其存在于在图3中比对的所有昆虫序列之间保守的三肽序列“SLP”内。
在进一步的方面，本文描述了具有天冬氨酸1-脱羧酶活性的重组蛋白，所述重组蛋白包含总体上与以下至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列：(a)SEQ IDNO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置72至561；(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置79至568；(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置56至544；(d)SEQ IDNO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置52至540；(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置71至560；(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置71至562；(g)SEQID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置74至563；(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置72至561；(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置74至624；(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置83至572；(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置72至561；(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置53至541；或(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置57至572。这些区域不仅在本文中被发现在至少蚊和甲虫ADC之间是高度保守的，而且它们还对应于CtADC72-561的截短型变体，发现与全长野生型CtADC相比，所述截短型变体展现出增加的天冬氨酸向β-丙氨酸的转化。
在一些实施方案中，本文所述的截短型ADC和/或重组蛋白可以在对应于SEQ IDNO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置96的位置处包含甘氨酸残基。根据实施例2中进行的酶活性测试，CtADC以显著的优势优于其他昆虫源性ADC，包括与其具有约97％氨基酸序列同一性的对应的蚊酶CqADC相比，活性增加39％。在实施例8中进行的酶的催化部分中CtADC与CqADC之间氨基酸差异的比较揭示了在CtADC的位置96处的单个甘氨酸残基在所分析的所有其他昆虫序列之间是独有的(参见图3)，这表明此残基可能在与CtADC相关的β-丙氨酸生产增加中起作用。
在进一步的方面，本文描述了多核苷酸，所述多核苷酸包含编码如本文所述的重组截短型昆虫ADC或重组蛋白的核酸序列。在一些实施方案中，所述多核苷酸是DNA。在一些实施方案中，所述多核苷酸是RNA。
在进一步的方面，本文描述了表达盒，所述表达盒包含分离的或重组的本文所述的多核苷酸，所述多核苷酸与启动子(例如，相对于昆虫ADC异源的启动子)可操作地连接。
在进一步的方面，本文描述了宿主细胞，所述宿主细胞表达如本文所述的重组截短型昆虫ADC或重组蛋白，和/或用本文所述的多核苷酸或表达盒转化或被工程化以包含本文所述的多核苷酸或表达盒。在一些实施方案中，所述宿主细胞可以是微生物细胞。在一些实施方案中，所述宿主细胞可以是细菌、昆虫、哺乳动物、酵母或真菌细胞。
在进一步的方面，本文所述的重组截短型昆虫ADC、重组蛋白或宿主细胞可以用于从天冬氨酸工业生产β-丙氨酸。在进一步的方面，本文描述了用于生产β-丙氨酸的方法，所述方法包括：(a)提供ADC酶源，所述ADC酶源是如本文所述的截短型昆虫ADC、如本文所述的重组蛋白和/或如本文所述的宿主细胞；(b)在使所述酶源能够催化天冬氨酸转化为β-丙氨酸的条件下使所述ADC酶源与天冬氨酸源接触；以及(c)分离和/或浓缩所生产的β-丙氨酸。在一些实施方案中，表达本文所述的重组截短型昆虫ADC或重组蛋白的宿主细胞可以用作完整细胞，这可以有利地防止来自裂解细胞的细胞碎片污染所生产的β-丙氨酸。
在进一步的方面，本文描述了组合物，所述组合物包含通过本文所述的方法生产的β-丙氨酸。
实施例
实施例1：通用材料和方法
L-天冬氨酸-α-脱羧酶(ADC)酶的克隆和表达
在细菌中克隆和表达的ADC的密码子优化的cDNA序列示于SEQ ID NO:16-27中。将ADC的cDNA序列克隆到单独的表达载体中并且转化到大肠杆菌(Escherichia coli)中，以在添加诱导剂后增强ADC的表达。对于N末端截短体，使所需数量的起始甲硫氨酸下游的氨基酸缺失。
ADC活性测量
通过以下方式来测量ADC活性：首先使表达目的ADC的BL21(DE3)大肠杆菌(E.coli)细胞在30℃下在含有卡那霉素和0.2％异丙基β-d-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)的500μL LB肉汤中生长24小时。然后将细胞沉淀以去除上清液，重悬浮并且超声破碎。然后将板离心以去除任何碎片，并且收集含有细胞裂解物的上清液。然后通过以下方式来测试含有ADC的细胞裂解物的活性：在6.5的pH、37℃的温度下在含有终浓度为60g/L的L-天冬氨酸和终浓度为0.2g/L的磷酸吡哆醛(PLP)的50mL溶液中孵育50μL上清液，并且在200rpm下搅拌。然后将1M硫酸滴定到反应溶液中以维持pH。一小时后，确定反应使用的硫酸量以直接测量ADC活性。至少进行3次实验，并且计算平均活性值。
实施例2：昆虫源性ADC的活性
进行大规模筛选以比较来自多种不同的原核和真核生物体的ADC酶当在细菌宿主细胞中重组表达时的表达和活性。筛选揭示了与来自其他生物体的ADC相比，用来自昆虫物种的ADC转化的细菌细胞的裂解物始终展现出更高的β-丙氨酸产量。表2示出了来自用来自蚊、蝇和甲虫物种的ADC的密码子优化的cDNA转化的细菌的裂解物的相对ADC活性，如实施例1所述测量的。有趣的是，来自用来自蚊物种跗斑库蚊的ADC(CtADC；SEQ ID NO:2)转化的细菌的裂解物显著优于所测试的所有其他酶。
表2：ADC的活性
酶 SEQ ID NO: 活性 昆虫 物种
CtADC 2 2.5 蚊 跗斑库蚊
AaADC 4 2.0 蚊 阿拉伯按蚊
DmADC 8 2.0 蝇 黑腹果蝇
CqADC 9 1.8 蚊 致倦库蚊
AtADC 3 1.6 甲虫 蜂箱小甲虫
Aa2ADC 10 1.5 蚊 白纹伊蚊
Aa3ADC 11 1.25 蚊 埃及伊蚊
TcADC 1 0.7 甲虫 赤拟谷盗
AsADC 12 1.0 蚊 中华按蚊
TmADC 6 0.6 甲虫 黄粉虫
AvADC 5 0.1 甲虫 Asbolus verrucosus
实施例3：昆虫源性ADC序列分析
将CtADC的氨基酸序列用作Protein BLASTTM的基础，以鉴定来自不同物种的其他ADC。检索到超过5000个命中序列，然后选择其中的188个具有最高BLAST得分的序列，与表2的昆虫源性ADC的序列组合，按85％序列同一性分组，并且最后并入广泛的昆虫系统发生树(图1)中。图1所示的系统发生树表明，蚊和蝇ADC在结构上是相关的，并且甲虫、蚤、蟑螂和白蚁ADC在结构上是相关的。
实施例4：蚊源性ADC序列分析
采用Clustal Omega(1.2.4)对从九种不同的蚊物种中鉴定的ADC的氨基酸序列进行比对，并且示于图2中。比对揭示了在不同的蚊物种中相对较高的序列保守性，如下表3中的百分比同一性矩阵所示。
表3：蚊源性ADC的百分比同一性矩阵
Figure BDA0003530627980000081
实施例5：蚊ADC的N末端截短体导致更高的β-丙氨酸产量
有趣的是，图2中的比对揭示了图2中以虚线指示的蚊ADC的氨基末端的低序列保守性区域，所述区域紧跟在所分析的所有蚊ADC之间100％保守的15个氨基酸的区段(SGSDSAGVSEDEDVQ；SEQ ID NO:28)之后。为了研究CtADC的N末端在其活性中的作用，在细菌中产生并且表达进行性N末端截短体，并且表征了它们的ADC活性，如实施例1所述。引人注目的是，范围从11至71个氨基酸的N末端截短体使β-丙氨酸产量增加了24％至100％，如表4所示。然而，通过从CtADC的N末端截短81个或更多个氨基酸，未检测到ADC酶活性。
表4：CtADC的N末端截短体的活性
Figure BDA0003530627980000082
“/”：活性太低以致无法检测。
还产生并且表征了另一种蚊酶AaADC的N末端截短体，如表5所示。通过截短AaADC的N末端63个氨基酸，观察到β-丙氨酸产量增加70％。然而，通过截短AaADC的137个或更多个氨基酸，未检测到ADC酶活性。
表5：AaADC的N末端截短体的活性
Figure BDA0003530627980000091
“/”：活性太低以致无法检测。
实施例6：甲虫ADC的N末端截短体导致更高的β-丙氨酸产量
在细菌中产生并且表达两种甲虫ADC的进行性N末端截短体，并且表征了它们的ADC活性，如实施例1所述。AtADC和TcADC的结果示于表5和表6中。对于AtADC，通过截短N末端45个氨基酸，观察到β-丙氨酸产量显著增加256％。然而，通过截短AtADC的114个或更多个氨基酸，未检测到ADC酶活性(表5)。对于TcADC，范围从10至50个氨基酸的N末端截短体使β-丙氨酸产量增加了10％至330％。然而，通过从TcADC的N末端截短60个氨基酸(TcADCN6，表6)，未检测到ADC酶活性。
表5：截短型AtADC的活性
Figure BDA0003530627980000092
“/”：活性太低以致无法检测。
表6：截短型TcADC的活性
Figure BDA0003530627980000093
“/”：活性太低以致无法检测。
实施例7：导致更高的β-丙氨酸产量的N末端截短体的位置的分析
实施例5和实施例6中所述的蚊和甲虫ADC的N末端序列的比对示于图3中。图3中的比对有助于可视化和理解实施例5和实施例6中的N末端截短体结果，其中与其相应的全长蛋白质相比，在以黑色突出显示的两个残基之间的N末端截短体产生具有增加的活性的截短型ADC。相反，以白色框出的两个残基之间的N末端截短体产生没有可检测的ADC活性的截短型ADC。因此，对于提供最高分辨率的CtADC和TcADC的截短实验，用虚线指示的区域描绘了预期N末端截短体不再有利于β-丙氨酸生产的位置。在蚊和甲虫ADC中残基的对应位置示于表7中。在图3中用虚线标记的区域也与在蚊和甲虫ADC之间的更大序列保守性起点重叠，其中三肽序列“SLP”在所比对的所有序列之间是100％保守的。不希望受理论的束缚，保守“SLP”三肽内丝氨酸N末端(或上游)的截短可能有利于增加β-丙氨酸的生产，而保守的丝氨酸下游的截短可能是有害的(表7)。
表7：图3中指示的残基位置
Figure BDA0003530627980000101
实施例8：CtADC与来自其他蚊物种的ADC的比较
根据实施例2中进行的酶活性测试，CtADC以显著的优势优于其他昆虫源性ADC。根据表2所示的活性，与来自蚊(AaADC)和蝇(DmADC)的次最佳的昆虫源性ADC相比，CtADC展现出β-丙氨酸产量增加25％。有趣的是，CtADC与CqADC(其也源自蚊)具有约97％的总体氨基酸序列同一性，但是表2中的结果揭示了CtADC展现出比CqADC高39％的β-丙氨酸产量。表4所示的结果揭示了CtADC的至少N末端71个残基可以被截短而不消除ADC活性(CtADCN7)。因此，观察在CtADC的残基72-561内CtADC与CqADC之间的氨基酸差异仅揭示了七个氨基酸取代。七个氨基酸取代中有六个对应于在不同的蚊ADC直系同源物中发现的残基。有趣的是，CtADC独有的唯一残基是位置96处的甘氨酸(参见图2中以黑色突出显示的残基)。事实上，在所分析的任何其他蚊或甲虫序列中均未发现对应于全长CtADC(SEQ ID NO:2)的位置96的甘氨酸(参见图3)，这表明此残基可能在与CtADC相关的β-丙氨酸生产增加中起作用。
本申请涉及如下技术方案：
1.一种重组截短型昆虫天冬氨酸1-脱羧酶(ADC)，所述截短型昆虫ADC缺乏在相应的全长野生型昆虫ADC的氨基末端区域内的足够数量的连续残基，使得与所述相应的全长野生型昆虫ADC相比，所述截短型ADC展现出增加的天冬氨酸向β-丙氨酸的转化。
2.根据项1所述的重组截短型昆虫ADC，所述重组截短型昆虫ADC是蚊、蝇、甲虫、蚤、蟑螂或白蚁ADC的截短型变体。
3.根据项1或2所述的重组截短型昆虫ADC，所述重组截短型昆虫ADC是来自以下属的昆虫ADC的截短型变体：库蚊属(Culex)、按蚊属(Anopheles)、果蝇属(Drosophila)、Aethina、伊蚊属(Aedes)、拟谷盗属(Tribolium)、按蚊属、粉虫属(Tenebrio)、Asbolus或堆砂白蚁属(Cryptotermes)。
4.根据项1至3中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，所述重组截短型昆虫ADC是来自以下物种的昆虫ADC的截短型变体：跗斑库蚊(Culex tarsalis)、阿拉伯按蚊(Anophelesarabiensis)、黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)、致倦库蚊(Culexquinquefasciatus)、蜂箱小甲虫(Aethina tumida)、白纹伊蚊(Aedes albopictus)、埃及伊蚊(Aedes aegypti)、赤拟谷盗(Tribolium castaneum)、中华按蚊(Anophelessinensis)、黄粉虫(Tenebrio molitor)、Asbolus verrucosus或第二堆砂白蚁(Cryptotermes secundus)。
5.根据项1至4中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述相应的全长野生型昆虫ADC是：
(a)包含总体上与SEQ ID NO:2、4或9-15中任一个至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的蚊ADC；
(b)包含总体上与SEQ ID NO:1、3或5-6中任一个至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的甲虫ADC；或
(c)包含总体上与SEQ ID NO:8至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的蝇ADC。
7.根据项1至6中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短型ADC包含总体上与以下至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列：
(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置72至561；
(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置79至568；
(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置56至544；
(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置52至540；
(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置71至560；
(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置71至562；
(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置74至563；
(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置72至561；
(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置74至624；
(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置83至572；
(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置72至561；
(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置53至541；或
(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置57至572。
8.根据项1至7中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短型ADC在对应于SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置96的位置处包含甘氨酸残基。
9.根据项1至8中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短型ADC缺乏所述相应的全长野生型昆虫ADC的氨基末端的至少X个连续残基，其中X是在5与50之间的任何整数。
10.根据项1至9中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短发生在对应于全长野生型昆虫ADC的位置n的残基的紧邻C末端(下游)的位置处，其中n是在2与Y之间的任何整数，其中Y是在所述全长野生型昆虫ADC内的能够发生N末端截短的最C末端残基位置，其中与所述全长野生型ADC相比，所述截短型ADC展现出增加的天冬氨酸向β-丙氨酸的转化。
11.根据项1至10中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短发生在对应于以下中的任一个的残基的C末端(下游)的位置处：
(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至71；
(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至78；
(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至55；
(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至51；
(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至70；
(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至70；
(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至73；
(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至73；
(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至73；
(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至82；
(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至78；
(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至52；或
(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、10或11至56。
11.根据项1至10中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短发生在对应于以下中的任一个的残基的N末端(上游)的位置处：
(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置72至80；
(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置79至87；
(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置56至64；
(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置52至60；
(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置71至79；
(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置71至79；
(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置74至82；
(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置72至82；
(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置74至82；
(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置83至91；
(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置72至87；
(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置53至61；或
(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置57至65。
12.根据项1至11中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短发生在对应于以下中的任一个的残基的N末端(上游)的位置处：
(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置75；
(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置82；
(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置59；
(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置55；
(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置74；
(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置74；
(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置77；
(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置77；
(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置77；
(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置86；
(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置82；
(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置56；或
(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置60。
13.一种具有天冬氨酸1-脱羧酶活性的重组蛋白，所述重组蛋白包含总体上与以下至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列：
(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置72至561；
(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置79至568；
(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置56至544；
(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置52至540；
(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置71至560；
(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置71至562；
(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置74至563；
(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置72至561；
(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置74至624；
(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置83至572；
(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置72至561；
(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置53至541；或
(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置57至572。
14.根据项13所述的重组蛋白，所述重组蛋白在对应于SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置96的位置处包含甘氨酸残基。
15.一种多核苷酸，所述多核苷酸包含编码根据项1至12中任一项所述的重组截短型昆虫ADC或根据项13或14所述的重组蛋白的核酸序列。
16.一种表达盒，所述表达盒包含分离的或重组的根据项15所述的多核苷酸，所述多核苷酸与相对于昆虫ADC异源的启动子可操作地连接。
17.一种宿主细胞，所述宿主细胞表达根据项1至12中任一项所述的重组截短型昆虫ADC、根据项13或14所述的重组蛋白，和/或用根据项15所述的多核苷酸或根据项16所述的表达盒转化或被工程化以包含根据项15所述的多核苷酸或根据项16所述的表达盒。
18.根据项17所述的宿主细胞，所述宿主细胞是细菌、昆虫、哺乳动物、酵母或真菌细胞。
19.根据项1至12中任一项所述的重组截短型昆虫ADC、根据项13或14所述的重组蛋白或根据项17或18所述的宿主细胞，用于从天冬氨酸工业生产β-丙氨酸。
20.一种用于生产β-丙氨酸的方法，所述方法包括：
(a)提供ADC酶源，所述ADC酶源是根据项1至12中任一项所述的截短型昆虫ADC、根据项13或14所述的重组蛋白和/或根据项17或18所述的宿主细胞；
(b)在所述ADC酶源能够催化天冬氨酸转化为β-丙氨酸的条件下使所述ADC酶源与天冬氨酸源接触；以及
(c)分离和/或浓缩所生产的β-丙氨酸。
21.根据项20所述的方法，其中所述ADC酶源是完整的根据项17或18所述的宿主细胞。
22.一种组合物，所述组合物包含通过根据项20或21所述的方法生产的β-丙氨酸。
序列表
<110> 广安摩珈生物科技有限公司
<120> 改善β-丙氨酸生产的昆虫源性天冬氨酸脱羧酶及其变体
<130> 19597-11
<160> 28
<170> PatentIn 3.5版
<210> 1
<211> 540
<212> PRT
<213> 赤拟谷盗(Tribolium castaneum)
<400> 1
Met Pro Ala Thr Gly Glu Asp Gln Asp Leu Val Gln Asp Leu Ile Glu
1 5 10 15
Glu Pro Ala Thr Phe Ser Asp Ala Val Leu Ser Ser Asp Glu Glu Leu
20 25 30
Phe His Gln Lys Cys Pro Lys Pro Ala Pro Ile Tyr Ser Pro Val Ser
35 40 45
Lys Pro Val Ser Phe Glu Ser Leu Pro Asn Arg Arg Leu His Glu Glu
50 55 60
Phe Leu Arg Ser Ser Val Asp Val Leu Leu Gln Glu Ala Val Phe Glu
65 70 75 80
Gly Thr Asn Arg Lys Asn Arg Val Leu Gln Trp Arg Glu Pro Glu Glu
85 90 95
Leu Arg Arg Leu Met Asp Phe Gly Val Arg Ser Ala Pro Ser Thr His
100 105 110
Glu Glu Leu Leu Glu Val Leu Lys Lys Val Val Thr Tyr Ser Val Lys
115 120 125
Thr Gly His Pro Tyr Phe Val Asn Gln Leu Phe Ser Ala Val Asp Pro
130 135 140
Tyr Gly Leu Val Ala Gln Trp Ala Thr Asp Ala Leu Asn Pro Ser Val
145 150 155 160
Tyr Thr Tyr Glu Val Ser Pro Val Phe Val Leu Met Glu Glu Val Val
165 170 175
Leu Arg Glu Met Arg Ala Ile Val Gly Phe Glu Gly Gly Lys Gly Asp
180 185 190
Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Ile Ala Asn Gly Tyr Ala Ile Ser
195 200 205
Cys Ala Arg Tyr Arg Phe Met Pro Asp Ile Lys Lys Lys Gly Leu His
210 215 220
Ser Leu Pro Arg Leu Val Leu Phe Thr Ser Glu Asp Ala His Tyr Ser
225 230 235 240
Ile Lys Lys Leu Ala Ser Phe Gln Gly Ile Gly Thr Asp Asn Val Tyr
245 250 255
Leu Ile Arg Thr Asp Ala Arg Gly Arg Met Asp Val Ser His Leu Val
260 265 270
Glu Glu Ile Glu Arg Ser Leu Arg Glu Gly Ala Ala Pro Phe Met Val
275 280 285
Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe Asp Pro Ile Glu
290 295 300
Lys Ile Ala Asp Val Cys Gln Lys Tyr Lys Leu Trp Leu His Val Asp
305 310 315 320
Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Val Ser Ala Lys His Arg His Leu
325 330 335
Leu Lys Gly Ile Glu Arg Ala Asp Ser Val Thr Trp Asn Pro His Lys
340 345 350
Leu Leu Thr Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr Leu Leu Leu Arg His Glu
355 360 365
Gly Val Leu Ala Glu Ala His Ser Thr Asn Ala Ala Tyr Leu Phe Gln
370 375 380
Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Lys Tyr Asp Thr Gly Asp Lys His Ile
385 390 395 400
Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp Phe Met Trp Lys
405 410 415
Ala Lys Gly Thr Ser Gly Leu Glu Lys His Val Asp Lys Val Phe Glu
420 425 430
Asn Ala Arg Phe Phe Thr Asp Cys Ile Lys Asn Arg Glu Gly Phe Glu
435 440 445
Met Val Ile Ala Glu Pro Glu Tyr Thr Asn Ile Cys Phe Trp Tyr Val
450 455 460
Pro Lys Ser Leu Arg Gly Arg Lys Asp Glu Ala Asp Tyr Lys Asp Lys
465 470 475 480
Leu His Lys Val Ala Pro Arg Ile Lys Glu Arg Met Met Lys Glu Gly
485 490 495
Ser Met Met Val Thr Tyr Gln Ala Gln Lys Gly His Pro Asn Phe Phe
500 505 510
Arg Ile Val Phe Gln Asn Ser Gly Leu Asp Lys Ala Asp Met Val His
515 520 525
Leu Val Glu Glu Ile Glu Arg Leu Gly Ser Asp Leu
530 535 540
<210> 2
<211> 561
<212> PRT
<213> 跗斑库蚊(Culex tarsalis)
<400> 2
Met Pro Thr Asn Gly Met Leu Asp Val Ala Leu Gln Val Ile Glu Asp
1 5 10 15
Ala Asn Leu Ser Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu Asp Glu
20 25 30
Asp Val Gln Leu Phe Ser Thr Thr Gly Asn Ile Val Ser Ser Lys Pro
35 40 45
Leu Lys Lys Pro Ala Leu Lys Pro Ala Thr Lys Asp Glu Asp Gln Asn
50 55 60
Lys Thr Lys Ala Asn Ala Lys Arg Tyr Ala Ser Leu Pro Asn Arg Glu
65 70 75 80
Gln His Gln Arg Phe Leu Thr Asp Phe Leu Ser Glu Val Leu Asn Gly
85 90 95
Ala Ile Phe Asn Ala Thr Asp Arg Ser Asn Lys Val Leu Asn Trp Val
100 105 110
Asp Pro Glu Glu Leu Lys Arg Ser Ile Asp Leu Ser Leu Lys Asp Glu
115 120 125
Pro Asp Ser Asp Glu Lys Leu Leu Glu Leu Ala Arg Ala Thr Ile Asp
130 135 140
His Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Met Asn Gln Leu Phe Ser
145 150 155 160
Ser Val Asp Pro Tyr Gly Phe Ala Gly Gln Val Leu Thr Asp Ala Leu
165 170 175
Asn Pro Ser Val Tyr Thr Phe Glu Val Ser Pro Val Phe Val Leu Met
180 185 190
Glu Glu Val Val Leu Lys Glu Met Arg Thr Ile Val Gly Phe Pro Gly
195 200 205
Gly Val Gly Asp Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Met Ala Asn Gly
210 215 220
Tyr Ala Ile Ser Cys Ala Arg Phe Lys His Met Pro Asp Val Lys Thr
225 230 235 240
Lys Gly Leu His Ser Leu Pro Arg Leu Val Ile Phe Thr Ser Glu Asp
245 250 255
Ala His Tyr Ser Ile Lys Lys Leu Ala Ser Phe Met Gly Ile Gly Ser
260 265 270
Asp Asn Val Tyr Pro Ile Arg Thr Asp Ala Val Gly Lys Ile Gln Pro
275 280 285
Asp His Leu Glu Ala Glu Ile Leu Arg Ala Lys Ser Glu Gly Ala Val
290 295 300
Pro Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe
305 310 315 320
Asp Pro Leu Glu Gln Ile Ala Asp Leu Cys Gln Lys Tyr Asn Leu Trp
325 330 335
Met His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Met Ser Lys Lys
340 345 350
Tyr Arg Thr Leu Leu Lys Gly Val Glu Arg Ala Asp Ser Val Thr Trp
355 360 365
Asn Pro His Lys Leu Leu Ala Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr Phe Leu
370 375 380
Thr Arg His Glu Gly Ile Leu Ser Gly Cys His Ser Thr Asn Ala Thr
385 390 395 400
Tyr Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Gln Tyr Asp Thr Gly
405 410 415
Asp Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp
420 425 430
Phe Met Trp Arg Ala Lys Gly Thr Ser Gly Leu Glu Gln His Ile Asp
435 440 445
Lys Val Phe Glu Thr Ala Glu Tyr Phe Thr Asn Ser Ile Lys Ala Arg
450 455 460
Pro Gly Phe Glu Met Val Ile Glu Asn Pro Glu Cys Thr Asn Val Cys
465 470 475 480
Phe Trp Tyr Val Pro Pro Gly Leu Arg Gln Val Pro Arg Asp Ser Ala
485 490 495
Glu Phe Gly Glu Arg Leu His Lys Val Ala Pro Lys Val Lys Glu Arg
500 505 510
Met Met Arg Glu Gly Ser Met Met Ile Thr Tyr Gln Pro Ile His Asp
515 520 525
Lys Pro Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu Gln Asn Ser Ala Leu Asp Lys
530 535 540
Ser Asp Met Asn Tyr Ile Ile Asp Glu Ile Glu Arg Leu Ala Ser Asp
545 550 555 560
Leu
<210> 3
<211> 544
<212> PRT
<213> 蜂箱小甲虫(Aethina tumida)
<400> 3
Met Pro Ala Asn Gly Gln Leu Glu Asp Gly Phe His Leu Ile Asp Glu
1 5 10 15
Pro Ala Thr Tyr Ser Asp Ala Val Ala Ser Ser Ser Asp Asp Glu Thr
20 25 30
Val Gln Tyr Ser Asn Asp Glu Arg Ser Ile Arg Asp Met Lys Ala Thr
35 40 45
Ile Ala Thr Gly Lys Leu Ala Thr Phe Glu Ser Leu Pro Ser Arg Ala
50 55 60
His His Glu Glu Phe Ile Arg Ser Cys Met Asp Val Ile Leu Lys Glu
65 70 75 80
Ala Val Phe Asp Gly Thr Asn Arg Asn Asn Pro Val Leu Asn Phe Val
85 90 95
Asn Pro Glu Glu Leu Gln Ser Lys Val Asn Phe Lys Leu Lys Thr Ala
100 105 110
Pro Ser Thr His Glu Asp Leu Leu Lys Thr Leu Lys Asp Thr Ile Arg
115 120 125
Tyr Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Val Asn Gln Leu Phe Ser
130 135 140
Ser Leu Asp Pro Tyr Gly Leu Val Gly Gln Trp Leu Thr Asp Ala Leu
145 150 155 160
Asn Pro Thr Val Tyr Thr Tyr Glu Val Ser Pro Val Phe Thr Leu Met
165 170 175
Glu Glu Glu Val Leu Arg Glu Met Arg Thr Ile Val Gly Phe Lys Asn
180 185 190
Gly Glu Gly Asp Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Met Ala Asn Gly
195 200 205
Tyr Ala Ile Ser Cys Ala Arg His Lys Phe Ile Pro Asp Ile Lys Lys
210 215 220
Lys Gly Leu His Ala Leu Pro Arg Leu Val Leu Phe Thr Ser Gln Asp
225 230 235 240
Ala His Tyr Ser Ile Lys Lys Leu Ser Ser Phe Leu Gly Leu Gly Thr
245 250 255
Asp Asn Val Tyr Ala Ile Cys Thr Asp Ala Lys Gly Lys Met Asp Val
260 265 270
Gly His Leu Val Glu Glu Ile Glu Arg Ala Leu Glu Glu Gly Ala Ala
275 280 285
Pro Phe Met Val Ser Ala Thr Ser Gly Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe
290 295 300
Asp Pro Leu Asp Glu Ile Ala Asp Val Cys Gln Lys Tyr Gly Leu Trp
305 310 315 320
Met His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Met Ser Lys Lys
325 330 335
His Arg His Leu Leu Lys Gly Val Glu Arg Ala Asp Ser Val Thr Trp
340 345 350
Asn Pro His Lys Leu Leu Thr Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr Leu Leu
355 360 365
Leu Arg His Glu Gly Leu Leu Ala Glu Cys Asn Ser Ala Asn Ala Thr
370 375 380
Tyr Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Lys Tyr Asp Leu Gly
385 390 395 400
Asp Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg Pro Asp Val Leu Lys Phe Trp
405 410 415
Phe Met Trp Lys Ala Lys Gly Thr Ser Gly Phe Glu Gln His Ile Asp
420 425 430
Lys Val Phe Glu Asn Thr Lys Tyr Phe Thr Asp Ser Ile Lys Asn Arg
435 440 445
Pro Gly Phe Glu Leu Val Val Pro Glu Pro Glu Cys Thr Asn Ile Cys
450 455 460
Phe Trp Tyr Val Pro Pro Ser Leu Arg Gln Ala Lys Ser Asp Pro Asp
465 470 475 480
Tyr Lys Glu Lys Leu His Lys Val Ala Pro Lys Ile Lys Glu Arg Met
485 490 495
Met Lys Glu Gly Ser Met Met Val Thr Tyr Gln Pro Leu Arg Glu Val
500 505 510
Pro Asn Phe Phe Arg Ile Val Phe Gln Asn Ser Gly Leu Asn Lys Thr
515 520 525
Asp Met Thr His Leu Ile Glu Glu Phe Glu Arg Leu Gly His Asp Leu
530 535 540
<210> 4
<211> 568
<212> PRT
<213> 阿拉伯按蚊(Anopheles arabiensis)
<400> 4
Met Pro Ala Asn Gly Val Cys Ser Val Gly Leu Glu Val Ile Glu Asp
1 5 10 15
Asn Ala Thr Tyr Ala Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu Asp
20 25 30
Glu Asp Val Gln Gln Leu Phe Val Ser Gly Ala Asp Arg Val Thr Ser
35 40 45
Val Leu Pro Lys Lys Ser Asp Ile Arg Lys Ala Ser Gln Val Asp Glu
50 55 60
Gln Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Val Ser Glu Lys Arg Tyr
65 70 75 80
Ala Ser Leu Pro Asn Arg Glu Gln His Gln Gln Phe Leu Thr Gln Phe
85 90 95
Leu Thr Glu Val Leu Asn Ser Ala Val Phe Asn Ala Thr Asp Arg Ala
100 105 110
Asn Lys Val Leu Asn Trp Val Asp Pro Glu Glu Leu Gln Arg Thr Leu
115 120 125
Asp Leu Ala Leu Lys Asp Glu Pro Asp Thr His Glu Lys Leu Leu Glu
130 135 140
Leu Thr Arg Ala Thr Ile Arg His Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr
145 150 155 160
Phe Met Asn Gln Leu Phe Ser Ser Val Asp Pro Tyr Gly Phe Ala Gly
165 170 175
Gln Val Leu Thr Asp Ala Leu Asn Pro Ser Val Tyr Thr Tyr Glu Val
180 185 190
Ser Pro Val Phe Val Leu Met Glu Glu Val Val Leu Arg Glu Met Arg
195 200 205
Thr Ile Val Gly Tyr Pro Asp Gly Glu Gly Asp Gly Ile Phe Ala Pro
210 215 220
Gly Gly Ser Met Ala Asn Gly Tyr Ala Ile Ser Cys Ala Arg His Lys
225 230 235 240
Phe Met Pro Asp Ile Lys Thr Lys Gly Leu His Ala Leu Pro Arg Leu
245 250 255
Val Ile Phe Thr Ser Glu Asp Ala His Tyr Ser Val Lys Lys Leu Ala
260 265 270
Ser Phe Met Gly Ile Gly Ser Asp Asn Val Tyr Ala Ile Lys Thr Asp
275 280 285
Asn Val Gly Lys Ile Arg Val Glu His Leu Glu Ser Glu Ile Leu Arg
290 295 300
Ala Lys Ser Glu Gly Ala Leu Pro Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly
305 310 315 320
Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe Asp Pro Leu Glu Gln Ile Ala Asp Leu
325 330 335
Cys Ala Lys Tyr Asn Leu Trp Met His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly
340 345 350
Gly Ala Leu Met Ser Lys Lys Tyr Arg Thr Leu Leu Lys Gly Ile Glu
355 360 365
Arg Ser Asp Ser Val Thr Trp Asn Pro His Lys Leu Leu Ala Ala Pro
370 375 380
Gln Gln Cys Ser Thr Leu Leu Thr Arg His Arg Asn Ile Leu Ala Glu
385 390 395 400
Ala His Ser Thr Asn Ala Thr Tyr Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr
405 410 415
Asp Thr Arg Tyr Asp Thr Gly Asp Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg
420 425 430
Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp Phe Met Trp Arg Ala Lys Gly Thr Ala
435 440 445
Gly Phe Glu Ala His Ile Asp Lys Val Phe Glu Asn Ala Glu His Phe
450 455 460
Thr Ser Ser Ile Lys Ala Arg Pro Gly Phe Glu Met Val Ile Glu Gln
465 470 475 480
Pro Glu Cys Thr Asn Val Cys Phe Trp Tyr Val Pro Pro Gly Leu Arg
485 490 495
Gly Val Pro Arg Asp Ser Ala Glu Tyr Arg Asp Arg Leu His Lys Val
500 505 510
Ala Pro Lys Val Lys Glu Arg Met Met Lys Asp Gly Ser Met Met Ile
515 520 525
Thr Tyr Gln Pro Ile His Asp Lys Pro Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu
530 535 540
Gln Asn Ser Ser Leu Asp Lys Ser Asp Met Asn Tyr Ile Ile Asp Glu
545 550 555 560
Ile Glu Arg Leu Gly Lys Asp Leu
565
<210> 5
<211> 572
<212> PRT
<213> Asbolus verrucosus
<400> 5
Met Pro Ala Thr Gly Glu Gln Asp Asp Leu Val Gln Asp Ile Ile Glu
1 5 10 15
Glu Pro Ala Thr Tyr Ser Asp Ala Val Leu Ser Ser Asp Asp Glu Val
20 25 30
Cys Val Arg Tyr Ser Ser Gln Ser Asp Thr Asn Asn Ser Ser Phe Tyr
35 40 45
Gln Thr Ala Thr Lys Lys Leu Ala Ser Phe Glu Ser Leu Pro Asn Arg
50 55 60
Glu His His Glu Asp Phe Ile Lys Lys Cys Ala Glu Ile Leu Ile Arg
65 70 75 80
Glu Ala Val Phe Glu Gly Thr Asn Arg Lys Asn Arg Val Leu Gln Trp
85 90 95
Asn Ser Pro Glu Glu Leu Gln Lys Leu Met Asp Phe Thr Leu Arg Thr
100 105 110
Ser Pro Ser Ser His Asp Glu Leu Leu Asp Leu Leu Arg Asn Thr Val
115 120 125
Asn Tyr Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Val Asn Gln Leu Phe
130 135 140
Ser Ser Leu Asp Pro Tyr Gly Leu Val Gly Gln Trp Ala Thr Asp Ala
145 150 155 160
Leu Asn Pro Ser Val Tyr Thr Tyr Glu Val Ser Pro Val Phe Thr Leu
165 170 175
Met Glu Glu Val Val Leu Arg Glu Met Arg Thr Ile Val Gly Phe Glu
180 185 190
Gly Gly Arg Gly Asp Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Ile Ala Asn
195 200 205
Gly Tyr Ala Ile Ser Cys Ala Arg His Lys Phe Gln Pro Glu Ile Lys
210 215 220
Ala Thr Ala Ser Val Thr Asn Leu Leu Lys Asn Ile Ala Asn Ile Ile
225 230 235 240
Leu Leu Leu Leu Gln Thr Lys Gly Leu His Ser Leu Pro Arg Leu Val
245 250 255
Leu Phe Thr Ser Glu Asp Ala His Tyr Ser Ile Lys Lys Leu Ser Ser
260 265 270
Phe Leu Gly Ile Gly Thr Asp Asn Val Tyr Leu Ile Arg Thr Asp Asp
275 280 285
Arg Gly Arg Met Asp Pro Ser His Leu Ile Gln Glu Ile Glu Arg Ala
290 295 300
Leu Ala Glu Gly Gly Ala Pro Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr
305 310 315 320
Thr Val Ile Gly Ala Phe Asp Pro Ile Asp Gln Ile Ala Asp Ile Cys
325 330 335
Glu Lys Tyr Asn Leu Trp Leu His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly
340 345 350
Ala Leu Met Ser Ser Lys His Arg Ser Leu Leu Lys Gly Ile Glu Arg
355 360 365
Ala Asp Ser Val Thr Trp Asn Pro His Lys Leu Leu Thr Ala Pro Gln
370 375 380
Gln Cys Ser Thr Leu Leu Leu Arg His Glu Gly Leu Leu Ser Glu Thr
385 390 395 400
His Ser Thr His Ala Ala Tyr Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp
405 410 415
Thr Lys Phe Asp Thr Gly Thr Lys Lys Phe Asn Gly Asp Lys His Ile
420 425 430
Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp Phe Met Trp Lys
435 440 445
Ala Lys Gly Thr Leu Gly Phe Glu Lys His Ile Asn Lys Val Phe Asp
450 455 460
Asn Ala Lys Phe Phe Ala Asp Ser Ile Arg Asn Arg Val Gly Phe Glu
465 470 475 480
Met Leu Ile Asp Gln Pro Glu Cys Thr Asn Val Cys Phe Trp Tyr Ile
485 490 495
Pro Glu Ser Leu Arg Asn Ala Lys Gln Asp Ser Asp Tyr Lys Glu Arg
500 505 510
Leu His Lys Val Ala Pro Lys Ile Lys Glu Arg Met Met Lys Glu Gly
515 520 525
Ser Met Met Val Thr Tyr Gln Ala Gln Lys Ser His Pro Asn Phe Phe
530 535 540
Arg Ile Val Phe Gln Ser Ser Gly Leu Asp Arg Ala Asp Met Leu His
545 550 555 560
Leu Ile Glu Glu Phe Glu Arg Leu Gly Arg Asp Leu
565 570
<210> 6
<211> 541
<212> PRT
<213> 黄粉虫(Tenebrio molitor)
<400> 6
Met Pro Ala Arg Gly Glu Gln Asp Asp Val Val Gln Asp Ile Ile Glu
1 5 10 15
Glu Pro Ala Thr Tyr Gly Asp Ala Ile Leu Ser Ser Asp Asp Glu Val
20 25 30
Tyr Thr Lys Phe Ser Glu Arg Pro Leu Thr Gln Phe Tyr Gln Pro Ser
35 40 45
Gln Lys Arg Ala Ser Phe Glu Ser Leu Pro Asn Arg Glu Arg His Glu
50 55 60
Glu Phe Ile Arg Lys Ser Val Glu Ile Leu Leu Lys Asp Ala Val Phe
65 70 75 80
Glu Gly Thr Ser Arg Asn Asn Arg Val Leu Gln Trp Thr Cys Pro Glu
85 90 95
Glu Leu Ser Arg Leu Met Glu Phe Gly Leu Lys Asn Gly Pro Ser Thr
100 105 110
His Glu Glu Leu Leu Glu Ile Leu Lys Lys Val Val Asn Tyr Ser Val
115 120 125
Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Val Asn Gln Leu Phe Ser Ser Leu Asp
130 135 140
Pro Tyr Gly Leu Val Ala Gln Trp Ala Thr Asp Ala Leu Asn Pro Ser
145 150 155 160
Val Tyr Thr Tyr Glu Val Ser Pro Val Phe Ile Leu Met Glu Glu Val
165 170 175
Val Leu Lys Glu Met Arg Ser Ile Val Gly Phe Glu Ala Gly Arg Gly
180 185 190
Asp Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Ile Ala Asn Gly Tyr Ala Ile
195 200 205
Ser Cys Ala Arg Tyr Lys Phe Gln Pro Asp Ile Lys Arg Lys Gly Leu
210 215 220
His Ser Leu Pro Arg Leu Val Leu Phe Thr Ser Glu Asp Ala His Tyr
225 230 235 240
Ser Ile Lys Lys Leu Ser Ser Phe Leu Gly Ile Gly Thr Asp Asn Val
245 250 255
Tyr Leu Ile Arg Thr Asp Asp Arg Gly Arg Met Asp Val Thr His Leu
260 265 270
Ile Gly Gln Ile Glu Arg Ser Leu Ser Glu Gly Ala Ala Pro Phe Met
275 280 285
Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe Asp Pro Leu
290 295 300
Asn Glu Ile Ala Ser Val Cys Glu Lys Tyr Lys Leu Trp Leu His Val
305 310 315 320
Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Val Ser Gly Lys His Lys Ser
325 330 335
Leu Leu Lys Gly Ile Glu Arg Ala Asp Ser Val Thr Trp Asn Pro His
340 345 350
Lys Leu Leu Thr Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr Leu Leu Leu Arg His
355 360 365
Glu Gly Ile Leu Ala Ala Ala His Ser Thr Asn Ala Ala Tyr Leu Phe
370 375 380
Gln Lys Asp Lys Ser Tyr Asp Thr Lys Phe Asp Thr Gly Asp Lys His
385 390 395 400
Ile Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp Phe Met Trp
405 410 415
Lys Ala Lys Gly Thr Ser Gly Leu Glu Lys His Ile Asn Lys Val Phe
420 425 430
Glu Asn Ala Ala Tyr Phe Ala Asp Ser Ile Arg Asn Arg Glu Gly Phe
435 440 445
Glu Met Val Ile Asp Gln Pro Glu Cys Thr Asn Val Cys Phe Trp Tyr
450 455 460
Ile Pro Glu Ser Leu Arg Ser Cys Lys Gln Asp Ser Asp Tyr Lys Glu
465 470 475 480
Arg Leu His Lys Val Ala Pro Lys Ile Lys Glu Arg Met Met Lys Glu
485 490 495
Gly Ser Met Met Val Thr Tyr Gln Ala Gln Lys Gln His Pro Asn Phe
500 505 510
Phe Arg Ile Val Phe Gln Asn Ser Gly Leu Asp Lys Ala Asp Met Ile
515 520 525
His Phe Val Glu Glu Ile Glu Arg Leu Gly Lys Asp Leu
530 535 540
<210> 7
<211> 547
<212> PRT
<213> 第二堆砂白蚁(Cryptotermes secundus)
<400> 7
Met Pro Ala Ser Ser Gly Ile Ile Thr Leu Thr Gln Ser Leu Glu Asn
1 5 10 15
Leu Asn Gly Lys His Gly Ile Ser Gly Ser Tyr Glu Asp Met Thr Ala
20 25 30
Gly Val Asn Val Ala Val Pro Ser Leu Ser Pro Ser Pro Gly Tyr Val
35 40 45
Thr Glu Lys Lys Ser Thr Arg Ser Val Ala Trp Phe Ala Ser Leu Pro
50 55 60
Asp Arg Gln Arg His Ser Gln Phe Leu Lys Glu Ala Val Asp Leu Met
65 70 75 80
Leu Asp Lys Ala Val Phe Asp Ala Ala Ser Arg Thr Asn Arg Val Val
85 90 95
Glu Trp Arg Ser Pro Glu Glu Leu Lys Lys Leu Ile Asp Leu Asp Leu
100 105 110
Pro Ala Asp Arg Val Ser His Asp Arg Leu Leu Gln Leu Leu Lys Asp
115 120 125
Ile Ile Gln Tyr Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Val Asn Gln
130 135 140
Leu Phe Ser Ser Val Asp Pro Tyr Gly Leu Val Gly Gln Trp Leu Gly
145 150 155 160
Asp Ala Leu Asn Pro Ser Val Tyr Thr Tyr Glu Val Ser Pro Val Phe
165 170 175
Thr Leu Met Glu Glu Thr Val Leu Cys Glu Met Arg Arg Ile Val Gly
180 185 190
Phe Pro Glu Gly Arg Gly Asp Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Ile
195 200 205
Ala Asn Gly Tyr Ala Ile Ser Cys Ala Arg Tyr Asn Phe Val Pro Asp
210 215 220
Val Lys Lys Arg Gly Leu His Gly Leu Pro Arg Leu Val Leu Phe Thr
225 230 235 240
Ser Glu Asp Ala His Tyr Ser Ile Lys Lys Met Ala Ser Leu Leu Gly
245 250 255
Leu Gly Ser Asp Asn Val Tyr Leu Ile His Cys Asn Ser Lys Gly Lys
260 265 270
Met Asp Val Gln His Leu Glu Gln Glu Ile Gln Arg Ala Leu Glu Glu
275 280 285
Gly Ala Ala Pro Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Leu
290 295 300
Gly Ala Phe Asp Pro Ile Pro Lys Ile Ala Asp Ile Cys Ser Lys Tyr
305 310 315 320
Lys Met Trp Leu His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Val
325 330 335
Ser Lys Lys His Lys His Leu Leu Glu Gly Ile Glu Lys Ala Asp Ser
340 345 350
Val Thr Trp Asn Pro His Lys Leu Leu Thr Ala Pro Gln Gln Cys Ser
355 360 365
Thr Phe Leu Leu Arg His Glu Gly Val Leu Ser Ala Cys His Ser Ala
370 375 380
Ser Ala Gln Tyr Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Gln Tyr
385 390 395 400
Asp Thr Gly Asp Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu
405 410 415
Lys Phe Trp Phe Met Trp Lys Ala Lys Gly Thr Val Gly Leu Glu Glu
420 425 430
His Ile Asp Thr Val Phe Asp Asn Ala Ala Tyr Phe Thr Lys Gln Ile
435 440 445
Lys Lys Arg Glu Gly Phe Arg Met Val Leu Gln Glu Pro Glu Cys Thr
450 455 460
Asn Val Cys Phe Trp Tyr Ile Pro Pro Ser Leu Arg Gly His Glu Asp
465 470 475 480
Gln Ser Asp Phe Ser Glu Arg Leu His Lys Val Ala Pro Arg Ile Lys
485 490 495
Glu Arg Met Ile Lys Glu Gly Ser Met Met Val Thr Tyr Gln Pro Leu
500 505 510
Arg Asp Gln Pro Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu Gln Asn Ser Gly Leu
515 520 525
Asp Trp Ala Asp Met Asp Tyr Phe Val Gln Glu Phe Glu Arg Leu Gly
530 535 540
Ser Asp Leu
545
<210> 8
<211> 575
<212> PRT
<213> 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)
<400> 8
Met Leu Ala Ser Glu Asn Phe Pro Thr His His Phe Lys Glu Ser Ile
1 5 10 15
Phe Lys Pro Tyr Ser Thr Thr Ser Gly Asp Asp Leu Ala Ser Val Ser
20 25 30
Pro Leu Thr Ala Thr Ala Ala Leu Val Ala Ser Thr Ser Ser Pro Ala
35 40 45
Asp Ser Thr Ser Thr Val Ala Phe Glu Gln Ala Ser Lys Met Leu Ala
50 55 60
Asn Ala Ala Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Ile Thr Ser Thr
65 70 75 80
Lys Asp Asp Leu Ser Ser Phe Val Ala Ser His Pro Ala Ala Glu Phe
85 90 95
Glu Gly Phe Ile Arg Ala Cys Val Asp Glu Ile Ile Lys Leu Ala Val
100 105 110
Phe Gln Gly Thr Asn Arg Ser Ser Lys Val Val Glu Trp His Glu Pro
115 120 125
Ala Glu Leu Arg Gln Leu Phe Asp Phe Gln Leu Arg Glu Gln Gly Glu
130 135 140
Ser Gln Asp Lys Leu Arg Glu Leu Leu Arg Glu Thr Ile Arg Phe Ser
145 150 155 160
Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Ile Asn Gln Leu Tyr Ser Gly Val
165 170 175
Asp Pro Tyr Ala Leu Val Gly Gln Trp Leu Thr Asp Ala Leu Asn Pro
180 185 190
Ser Val Tyr Thr Tyr Glu Val Ala Pro Leu Phe Thr Leu Met Glu Glu
195 200 205
Gln Val Leu Ala Glu Met Arg Arg Ile Val Gly Phe Pro Asn Gly Gly
210 215 220
Gln Gly Asp Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Ile Ala Asn Gly Tyr
225 230 235 240
Ala Ile Ser Cys Ala Arg Tyr Arg His Ser Pro Glu Ser Lys Lys Asn
245 250 255
Gly Leu Phe Asn Ala Lys Pro Leu Ile Ile Phe Thr Ser Glu Asp Ala
260 265 270
His Tyr Ser Val Glu Lys Leu Ala Met Phe Met Gly Phe Gly Ser Asp
275 280 285
His Val Arg Lys Ile Ala Thr Asn Glu Val Gly Lys Met Arg Leu Ser
290 295 300
Asp Leu Glu Lys Gln Val Lys Leu Cys Leu Glu Asn Gly Trp Gln Pro
305 310 315 320
Leu Met Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Leu Gly Ala Phe Asp
325 330 335
Asp Leu Ala Gly Ile Ser Glu Val Cys Lys Lys Tyr Asn Met Trp Met
340 345 350
His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Met Ser Lys Lys Tyr
355 360 365
Arg His Leu Leu Asn Gly Ile Glu Arg Ala Asp Ser Val Thr Trp Asn
370 375 380
Pro His Lys Leu Leu Ala Ala Ser Gln Gln Cys Ser Thr Phe Leu Thr
385 390 395 400
Arg His Gln Gln Val Leu Ala Gln Cys His Ser Thr Asn Ala Thr Tyr
405 410 415
Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Ser Phe Asp Thr Gly Asp
420 425 430
Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Phe Lys Phe Trp Phe
435 440 445
Met Trp Lys Ala Lys Gly Thr Gln Gly Leu Glu Ala His Val Glu Lys
450 455 460
Val Phe Arg Met Ala Glu Phe Phe Thr Ala Lys Val Arg Glu Arg Pro
465 470 475 480
Gly Phe Glu Leu Val Leu Glu Ser Pro Glu Cys Thr Asn Ile Ser Phe
485 490 495
Trp Tyr Val Pro Pro Gly Leu Arg Glu Met Glu Arg Asn Arg Glu Phe
500 505 510
Tyr Asp Arg Leu His Lys Val Ala Pro Lys Val Lys Glu Gly Met Ile
515 520 525
Lys Lys Gly Ser Met Met Ile Thr Tyr Gln Pro Leu Arg Gln Leu Pro
530 535 540
Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu Gln Asn Ser Cys Leu Glu Glu Ser Asp
545 550 555 560
Met Val Tyr Phe Leu Asp Glu Ile Glu Ser Leu Ala Gln Asn Leu
565 570 575
<210> 9
<211> 563
<212> PRT
<213> 致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)
<400> 9
Met Pro Thr Asn Gly Met Phe Asp Val Ala Leu Gln Val Ile Glu Asp
1 5 10 15
Ala Asn Leu Ser Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu Asp Glu
20 25 30
Asp Val Gln Leu Phe Cys Thr Thr Gly Asn Val Val Ser Ser Lys Pro
35 40 45
Leu Lys Lys Pro Ser Leu Lys Pro Val Thr Thr Val Lys Asp Glu Asp
50 55 60
Gln Asn Lys Met Lys Thr Asn Ala Lys Arg Tyr Ala Ser Leu Pro Asn
65 70 75 80
Arg Glu Gln His Gln Arg Phe Leu Thr Asp Phe Leu Ser Glu Val Leu
85 90 95
Asn Asn Ala Ile Phe Asn Ala Thr Asp Arg Ser Asn Lys Val Leu Asn
100 105 110
Trp Val Asp Pro Glu Glu Leu Lys Arg Ser Ile Asp Leu Ser Leu Lys
115 120 125
Ala Glu Pro Asp Ser Asp Glu Lys Leu Leu Glu Leu Ala Arg Ala Thr
130 135 140
Ile Asp His Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Met Asn Gln Leu
145 150 155 160
Phe Ser Ser Val Asp Val Tyr Gly Phe Ala Gly Gln Cys Leu Thr Asp
165 170 175
Ala Leu Asn Pro Ser Val Tyr Thr Phe Glu Val Ser Pro Val Phe Val
180 185 190
Leu Met Glu Glu Val Val Leu Lys Glu Met Arg Thr Ile Val Gly Phe
195 200 205
Pro Gly Gly Val Gly Asp Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Met Ala
210 215 220
Asn Gly Tyr Ala Ile Ser Cys Ala Arg Phe Lys His Met Pro Asp Val
225 230 235 240
Lys Thr Lys Gly Leu His Ser Leu Pro Arg Leu Val Ile Phe Thr Ser
245 250 255
Glu Asp Ala His Tyr Ser Ile Lys Lys Leu Ala Ser Phe Met Gly Ile
260 265 270
Gly Ser Asp Asn Val Tyr Pro Ile Arg Thr Asp Ala Val Gly Lys Ile
275 280 285
Gln Pro Asp His Leu Glu Ala Glu Ile Leu Arg Ala Lys Ser Glu Gly
290 295 300
Ala Leu Pro Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Ile Gly
305 310 315 320
Ala Phe Asp Pro Leu Glu Gln Ile Ala Asp Leu Cys Gln Lys Tyr Asn
325 330 335
Leu Trp Met His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Met Ser
340 345 350
Lys Lys Tyr Arg Thr Leu Leu Lys Gly Val Glu Arg Ala Asp Ser Val
355 360 365
Thr Trp Asn Pro His Lys Leu Leu Ala Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr
370 375 380
Phe Leu Thr Arg His Glu Gly Ile Leu Ser Gly Cys His Ser Thr Asn
385 390 395 400
Ala Thr Tyr Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Gln Tyr Asp
405 410 415
Thr Gly Asp Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys
420 425 430
Phe Trp Phe Met Trp Arg Ala Lys Gly Thr Ser Gly Phe Glu Gln His
435 440 445
Ile Asp Lys Val Phe Glu Asn Ala Glu Tyr Phe Thr Asn Ser Ile Lys
450 455 460
Ala Arg Pro Gly Phe Glu Met Val Ile Glu Asn Pro Glu Cys Thr Asn
465 470 475 480
Val Cys Phe Trp Tyr Val Pro Pro Gly Leu Arg Gln Val Pro Arg Asp
485 490 495
Ser Ala Glu Phe Gly Glu Arg Leu His Lys Val Ala Pro Lys Val Lys
500 505 510
Glu Arg Met Met Arg Glu Gly Ser Met Met Ile Thr Tyr Gln Pro Ile
515 520 525
His Asp Lys Pro Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu Gln Asn Ser Gly Leu
530 535 540
Asp Lys Ser Asp Met Asn Tyr Ile Ile Asp Glu Ile Glu Arg Leu Ala
545 550 555 560
Ser Asp Leu
<210> 10
<211> 560
<212> PRT
<213> 白纹伊蚊(Aedes albopictus)
<400> 10
Met Pro Ala Asn Gly Met Phe Asp Val Ala Leu Gln Val Ile Asp Asp
1 5 10 15
Ser Asn Val Ser Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu Asp Glu
20 25 30
Asp Val Gln Leu Phe Cys Ser Met Gly Asn Thr Ile Ala Pro Lys Pro
35 40 45
Leu Lys Lys Ser Ile Thr Lys Thr Lys Asp Glu Glu Phe Ser Lys Thr
50 55 60
Ala Lys Ala Asn Glu Lys Arg Tyr Ala Ser Leu Pro Asn Arg Glu Gln
65 70 75 80
His Gln Gln Phe Leu Thr Asp Phe Leu Ser Glu Val Leu Asn Asn Ala
85 90 95
Val Phe Asn Ala Thr Glu Arg Ala Asn Lys Val Leu Asn Trp Val Asp
100 105 110
Pro Glu Gln Leu Lys Arg Thr Leu Asp Leu Glu Leu Lys Asp Glu Pro
115 120 125
Asp Ser His Glu Lys Leu Leu Glu Leu Thr Arg Ala Thr Ile Lys His
130 135 140
Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Met Asn Gln Leu Phe Ser Ser
145 150 155 160
Val Asp Pro Tyr Gly Phe Ala Gly Gln Ile Leu Thr Asp Ala Leu Asn
165 170 175
Pro Ser Val Tyr Thr Phe Glu Val Ser Pro Val Phe Val Leu Met Glu
180 185 190
Glu Val Val Leu Lys Glu Met Arg Thr Ile Val Gly Tyr Pro Asp Gly
195 200 205
Ala Gly Asp Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Met Ala Asn Gly Tyr
210 215 220
Ser Ile Ser Cys Ala Arg Phe Lys His Met Pro Asp Val Lys Thr Lys
225 230 235 240
Gly Leu His Ser Leu Pro Arg Leu Val Ile Phe Thr Ser Glu Asp Ala
245 250 255
His Tyr Ser Val Lys Lys Leu Ala Ser Phe Met Gly Ile Gly Ser Asp
260 265 270
Asn Val Tyr Pro Ile Arg Thr Asp Ala Ile Gly Lys Ile Arg Val Asp
275 280 285
His Leu Glu Ser Glu Ile Leu Arg Ala Lys Ala Glu Gly Ala Val Pro
290 295 300
Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe Asp
305 310 315 320
Pro Leu Glu Gln Ile Ala Asp Leu Cys Lys Lys Tyr Asn Leu Trp Met
325 330 335
His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Met Ser Lys Lys Tyr
340 345 350
Arg Ser Leu Leu Lys Gly Ile Glu Arg Ser Asp Ser Val Thr Trp Asn
355 360 365
Pro His Lys Leu Leu Ala Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr Phe Leu Thr
370 375 380
Arg His Glu Gly Ile Leu Ser Glu Cys His Ser Thr Asn Ala Thr Tyr
385 390 395 400
Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Gln Tyr Asp Thr Gly Asp
405 410 415
Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp Phe
420 425 430
Met Trp Arg Ala Lys Gly Thr Ser Gly Leu Glu Gln His Ile Asp Lys
435 440 445
Val Phe Glu Asn Ala Glu His Phe Thr Asn Ser Ile Lys Ala Arg Asp
450 455 460
Gly Phe Glu Met Val Val Glu Thr Pro Glu Cys Thr Asn Val Cys Phe
465 470 475 480
Trp Tyr Val Pro Pro Gly Leu Arg Ser Val Pro Arg Asp Ser Ala Glu
485 490 495
Phe Thr Glu Arg Leu His Lys Val Ala Pro Lys Val Lys Glu Arg Met
500 505 510
Met Arg Glu Gly Ser Met Met Ile Thr Tyr Gln Pro Ile His Asp Lys
515 520 525
Pro Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu Gln Asn Ser Ala Leu Asp Lys Ser
530 535 540
Asp Met Asn Tyr Ile Ile Asp Glu Ile Glu Arg Leu Ala Ala Asp Leu
545 550 555 560
<210> 11
<211> 562
<212> PRT
<213> 埃及伊蚊(Aedes aegypti)
<400> 11
Met Pro Ala Asn Gly Met Phe Asp Val Ala Leu Gln Val Ile Asp Asp
1 5 10 15
Ser Asn Val Ser Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu Asp Glu
20 25 30
Asp Val Gln Leu Phe Cys Ser Lys Gly Asn Thr Ile Val Pro Lys Pro
35 40 45
Leu Lys Lys Ser Ile Ser Lys Ile Lys Asp Glu Glu Phe Ser Lys Thr
50 55 60
Ala Lys Ala Asn Glu Lys Arg Tyr Ala Ser Leu Pro Ser Arg Glu His
65 70 75 80
His Gln Gln Phe Leu Thr Asp Phe Leu Ser Glu Val Leu Asn Asn Ala
85 90 95
Val Phe Asn Ala Thr Glu Arg Ala Asn Lys Val Leu Asn Trp Val Asp
100 105 110
Pro Glu Gln Leu Lys Arg Thr Leu Asp Leu Glu Leu Lys Asp Glu Pro
115 120 125
Asp Ser His Glu Lys Leu Leu Glu Leu Thr Arg Ala Thr Ile Lys His
130 135 140
Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Met Asn Gln Leu Phe Ser Ser
145 150 155 160
Val Asp Pro Tyr Gly Phe Ala Gly Gln Ile Leu Thr Asp Ala Leu Asn
165 170 175
Pro Ser Val Tyr Thr Phe Glu Val Ser Pro Val Phe Val Leu Met Glu
180 185 190
Glu Val Val Leu Lys Glu Met Arg Thr Ile Val Gly Tyr Pro Asp Gly
195 200 205
Thr Gly Asp Gly Ile Phe Cys Pro Gly Gly Ser Met Ala Asn Gly Tyr
210 215 220
Ser Ile Ser Cys Ala Arg Phe Lys His Met Pro Asp Val Lys Thr Lys
225 230 235 240
Gly Leu His Ser Leu Pro Arg Leu Val Ile Phe Thr Ser Glu Asp Ala
245 250 255
His Tyr Ser Val Lys Lys Leu Ala Ser Phe Met Gly Ile Gly Ser Asp
260 265 270
Asn Val Tyr Pro Ile Arg Thr Asp Ala Ile Gly Lys Ile Arg Val Asp
275 280 285
His Leu Glu Ser Glu Ile Leu Arg Ala Lys Ser Glu Gly Ala Val Pro
290 295 300
Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe Asp
305 310 315 320
Pro Leu Glu Gln Ile Ala Asp Leu Cys Lys Lys Tyr Asn Leu Trp Met
325 330 335
His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Met Ser Lys Lys Tyr
340 345 350
Arg Ser Leu Leu Lys Gly Ile Glu Arg Ser Asp Ser Val Thr Trp Asn
355 360 365
Pro His Lys Leu Leu Ala Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr Phe Leu Thr
370 375 380
Arg His Glu Gly Ile Leu Ser Glu Cys His Ser Thr Asn Ala Thr Tyr
385 390 395 400
Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Gln Tyr Asp Thr Gly Asp
405 410 415
Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp Phe
420 425 430
Met Trp Arg Ala Lys Gly Thr Ser Gly Leu Glu Gln His Ile Asp Lys
435 440 445
Val Phe Glu Asn Ala Glu His Phe Thr Ser Ser Ile Lys Ala Arg Glu
450 455 460
Gly Phe Glu Met Val Val Glu Asn Pro Glu Cys Thr Asn Val Cys Phe
465 470 475 480
Trp Tyr Val Pro Pro Gly Leu Arg Asn Val Pro Arg Asp Ser Ala Glu
485 490 495
Phe Thr Glu Arg Leu His Lys Val Ala Pro Lys Val Lys Glu Arg Met
500 505 510
Met Arg Glu Gly Ser Met Met Ile Thr Tyr Gln Pro Ile His Asp Lys
515 520 525
Pro Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu Gln Asn Ser Ala Leu Asp Lys Ser
530 535 540
Asp Met Asn Tyr Ile Ile Asp Glu Ile Glu Arg Leu Ala Ala Asp Leu
545 550 555 560
Lys Pro
<210> 12
<211> 572
<212> PRT
<213> 中华按蚊(Anopheles sinensis)
<400> 12
Met Pro Ala Asn Gly Val Asn Ser Val Glu Leu Glu Val Ile Glu Asp
1 5 10 15
Val Ala Thr Thr Tyr Ala Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu
20 25 30
Asp Glu Asp Val Gln Gln Leu Phe Val Ser Gly Ala His His Ile Ser
35 40 45
Ser Val Pro Pro Leu Lys Lys Ala Val Glu Thr Arg Gly Lys Gly Thr
50 55 60
Gln Leu Gln Gly Pro Ala Ser Glu Gly Ala Ala Ala Ala Glu Val Ser
65 70 75 80
Glu Lys Arg Tyr Ala Ser Leu Pro Asn Arg Glu Gln His Gln Gln Phe
85 90 95
Leu Thr Asp Phe Leu Thr Glu Val Leu Asn Ser Ala Val Phe Asn Ala
100 105 110
Thr Asp Arg Ala Asn Lys Val Leu Asn Trp Val Asp Pro Glu Glu Leu
115 120 125
Lys Arg Thr Leu Asp Leu Ala Ile Lys Gln Glu Pro Asp Thr His Glu
130 135 140
Lys Leu Leu Glu Leu Thr Arg Ala Thr Ile Arg His Ser Val Lys Thr
145 150 155 160
Gly His Pro Tyr Phe Met Asn Gln Leu Phe Ser Ser Val Asp Pro Tyr
165 170 175
Gly Phe Ala Gly Gln Val Leu Thr Asp Ala Leu Asn Pro Ser Val Tyr
180 185 190
Thr Phe Glu Val Ser Pro Val Phe Val Leu Met Glu Glu Val Val Leu
195 200 205
Arg Glu Met Arg Thr Ile Val Gly Tyr Pro Asn Gly Glu Gly Asp Gly
210 215 220
Ile Phe Ala Pro Gly Gly Ser Met Ala Asn Gly Tyr Ala Ile Ser Cys
225 230 235 240
Ala Arg Tyr Lys Phe Met Pro Asp Val Lys Ala Lys Gly Leu His Ala
245 250 255
Leu Pro Arg Leu Val Ile Phe Thr Ser Glu Asp Ala His Tyr Ser Val
260 265 270
Lys Lys Leu Ala Ser Phe Met Gly Ile Gly Ser Asp Asn Val Tyr Ala
275 280 285
Ile Lys Thr Asp Ala Ile Gly Lys Ile Cys Val Asp His Leu Glu Ser
290 295 300
Glu Ile Leu Arg Ala Lys Gln Glu Gly Ala Leu Pro Phe Met Val Ser
305 310 315 320
Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe Asp Pro Leu Glu Gln
325 330 335
Ile Ala Asp Leu Cys Ala Lys Tyr Asn Leu Trp Met His Val Asp Ala
340 345 350
Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Met Ser Lys Lys Tyr Arg Thr Leu Leu
355 360 365
Lys Gly Ile Glu Arg Ser Asp Ser Val Thr Trp Asn Pro His Lys Leu
370 375 380
Leu Ala Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr Leu Leu Thr Arg His Arg Asn
385 390 395 400
Ile Leu Ser Glu Cys His Ser Thr Asn Ala Thr Tyr Leu Phe Gln Lys
405 410 415
Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Arg Tyr Asp Thr Gly Asp Lys His Ile Gln
420 425 430
Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp Phe Met Trp Arg Ala
435 440 445
Lys Gly Thr Ala Gly Phe Glu Gln His Ile Asp Lys Val Phe Glu Asn
450 455 460
Ala Glu His Phe Thr Ser Ser Ile Lys Ala Arg Pro Gly Phe Glu Met
465 470 475 480
Val Ile Glu Asn Pro Glu Cys Thr Asn Val Cys Phe Trp Tyr Val Pro
485 490 495
Pro Gly Leu Arg Ser Val Pro Arg Asp Ser Ala Glu Phe Arg Glu Arg
500 505 510
Leu His Lys Val Ala Pro Lys Val Lys Glu Arg Met Met Lys Glu Gly
515 520 525
Ser Met Met Ile Thr Tyr Gln Pro Ile His Asp Lys Pro Asn Phe Phe
530 535 540
Arg Leu Val Leu Gln Asn Ser Ser Leu Asp Lys Ser Asp Met Asn Tyr
545 550 555 560
Ile Ile Asp Glu Ile Glu Arg Leu Gly Lys Asp Leu
565 570
<210> 13
<211> 563
<212> PRT
<213> 白魔按蚊(Anopheles albimanus)
<400> 13
Met Pro Ala Thr Gly Val Ser Ser Ile Gly Leu Glu Val Gln Glu Glu
1 5 10 15
Pro Ala Thr Tyr Ala Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu Asp
20 25 30
Glu Asp Val Gln Gln Leu Phe Val Asn Gly Ala His Gly Leu Thr Ser
35 40 45
Val Ala Pro Ala Val Arg Lys Pro Glu Met Arg Gly Lys Leu Ser Leu
50 55 60
Asp Glu Ser Ala Ala Ile Asp Arg Lys Arg Tyr Ala Ser Leu Pro Asn
65 70 75 80
Arg Glu Gln His Gln Gln Phe Leu Thr Glu Phe Leu Thr Glu Val Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Phe Asn Ala Thr Asp Arg Ala Asn Lys Val Leu Asn
100 105 110
Trp Val Asp Pro Glu Glu Leu Ser Arg Thr Leu Asp Leu Ala Ile Lys
115 120 125
Asp Glu Pro Asp Thr His Glu Arg Leu Leu Glu Leu Thr Arg Ala Thr
130 135 140
Ile Arg His Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Met Asn Gln Leu
145 150 155 160
Phe Ser Ser Val Asp Pro Tyr Gly Phe Ala Gly Gln Val Leu Thr Asp
165 170 175
Ala Leu Asn Pro Ser Val Tyr Thr Tyr Glu Val Ser Pro Val Phe Val
180 185 190
Leu Met Glu Glu Thr Val Leu Arg Glu Met Arg Lys Ile Val Gly Tyr
195 200 205
Pro Asn Gly Val Gly Asp Ala Ile Phe Ala Pro Gly Gly Ser Met Ala
210 215 220
Asn Gly Tyr Ala Ile Ser Cys Ala Arg His Lys Phe Met Pro Asp Ile
225 230 235 240
Lys Ala Lys Gly Leu His Ala Leu Pro Arg Leu Val Ile Phe Thr Ser
245 250 255
Glu Asp Ala His Tyr Ser Ile Lys Lys Leu Ala Ser Phe Met Gly Ile
260 265 270
Gly Ser Asp Asn Val Tyr Pro Ile Lys Thr Asp Glu Ile Gly Lys Ile
275 280 285
Cys Val Asp His Leu Glu Ser Glu Ile Leu Arg Ala Lys Ala Glu Gly
290 295 300
Ala Ser Pro Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Ile Gly
305 310 315 320
Ala Phe Asp Pro Leu Glu Gln Ile Ala Asp Leu Cys Glu Lys Tyr Gln
325 330 335
Leu Trp Phe His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Met Ser
340 345 350
Lys Lys Tyr Arg Thr Leu Leu Lys Gly Ile Glu Arg Ser Asp Ser Val
355 360 365
Thr Trp Asn Pro His Lys Leu Leu Ala Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr
370 375 380
Leu Leu Thr Arg His Pro Asn Leu Leu Ser Glu Cys His Ser Thr Asn
385 390 395 400
Ala Thr Tyr Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Gln Tyr Asp
405 410 415
Thr Gly Asp Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys
420 425 430
Phe Trp Phe Met Trp Arg Ala Lys Gly Ser Thr Gly Phe Glu Gln His
435 440 445
Ile Asp Lys Val Phe Glu Asn Ala Glu Tyr Phe Thr Arg Ser Ile Lys
450 455 460
Ala Arg Pro Gly Phe Glu Met Val Ile Glu His Pro Glu Cys Thr Asn
465 470 475 480
Val Cys Phe Trp Tyr Val Pro Pro Ser Leu Arg Asp Met Ala Arg Asp
485 490 495
Ser Ala Glu Tyr Arg Glu Arg Leu His Lys Val Ala Pro Lys Val Lys
500 505 510
Glu Arg Met Met Lys Glu Gly Ser Met Met Ile Thr Tyr Gln Pro Ile
515 520 525
His Asp Lys Pro Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu Gln Asn Ser Ser Leu
530 535 540
Asp Lys Ser Asp Met Asn Tyr Ile Ile Asp Glu Ile Glu Arg Leu Gly
545 550 555 560
Lys Asp Leu
<210> 14
<211> 624
<212> PRT
<213> 达氏按蚊(Anopheles darling)
<400> 14
Met Pro Ala Thr Gly Val Ser Ser Ile Gly Leu Glu Val His Glu Glu
1 5 10 15
Pro Ala Thr Tyr Ala Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu Asp
20 25 30
Glu Asp Val Gln Gln Leu Phe Val Asn Gly Ala His Gly Val Thr Arg
35 40 45
Val Ala Pro Ala Ala Arg Lys Ala Glu Met Arg Gly Lys Leu Ser Leu
50 55 60
Asp Glu Ser Ala Ala Ile Asp Arg Lys Arg Tyr Ala Ser Leu Pro Asn
65 70 75 80
Arg Glu Gln His Gln Gln Phe Leu Thr Glu Phe Leu Thr Glu Val Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Phe Asn Ala Thr Asp Arg Ala Asn Lys Val Leu Asn
100 105 110
Trp Val Asp Pro Glu Glu Leu Ser Arg Thr Leu Asp Leu Ala Ile Lys
115 120 125
Asp Glu Pro Asp Thr His Glu Arg Leu Leu Glu Leu Thr Arg Ala Thr
130 135 140
Ile Arg His Ser Val Lys Thr Gly His Pro Tyr Phe Met Asn Gln Leu
145 150 155 160
Phe Ser Ser Val Asp Pro Tyr Gly Phe Ala Gly Gln Val Leu Thr Asp
165 170 175
Ala Leu Asn Pro Ser Val Tyr Thr Tyr Glu Val Ser Pro Val Phe Val
180 185 190
Leu Met Glu Glu Thr Val Leu Arg Glu Met Arg Lys Ile Val Gly Tyr
195 200 205
Pro Asn Gly Val Gly Asp Ala Ile Phe Ala Pro Gly Gly Ser Met Ala
210 215 220
Asn Gly Tyr Ala Ile Ser Cys Ala Arg His Lys Phe Met Pro Asp Ile
225 230 235 240
Lys Gly Lys Ser Phe Arg Thr Met His Leu Ile Thr Leu Ile Glu Ser
245 250 255
Ala Gly Tyr Gly Met Thr Ile Val Ser Gln His Val Thr Thr Val Val
260 265 270
Ala Ala Ile Lys Ile Val His Arg Gln Arg Arg Ser Thr Gly Cys Tyr
275 280 285
Thr Arg Ser Trp Leu Ile Glu Thr Ile Gly Asn Gln Ala Ser Ala Lys
290 295 300
Gly Leu His Ala Leu Pro Arg Leu Val Ile Phe Thr Ser Glu Asp Ala
305 310 315 320
His Tyr Ser Ile Lys Lys Leu Ala Ser Phe Met Gly Ile Gly Ser Asp
325 330 335
Asn Val Tyr Pro Ile Lys Thr Asp Asp Ile Gly Lys Ile Arg Val Asp
340 345 350
His Leu Glu Ser Glu Ile Leu Arg Ala Arg Ala Glu Gly Ala Leu Pro
355 360 365
Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe Asp
370 375 380
Pro Leu Glu Gln Ile Ala Asp Leu Cys Glu Lys Tyr Gln Leu Trp Phe
385 390 395 400
His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly Gly Ala Leu Met Ser Lys Lys Tyr
405 410 415
Arg Thr Leu Leu Lys Gly Ile Glu Arg Ser Asp Ser Val Thr Trp Asn
420 425 430
Pro His Lys Leu Leu Ala Ala Pro Gln Gln Cys Ser Thr Leu Leu Thr
435 440 445
Arg His Pro Asn Leu Leu Ser Glu Cys His Ser Thr Asn Ala Thr Tyr
450 455 460
Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr Asp Thr Gln Tyr Asp Thr Gly Asp
465 470 475 480
Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp Phe
485 490 495
Met Trp Arg Ala Lys Gly Ser Thr Gly Phe Glu Gln His Ile Asp Lys
500 505 510
Val Phe Glu Asn Ala Glu Tyr Phe Thr Arg Ser Ile Lys Ala Arg Pro
515 520 525
Gly Phe Glu Met Val Ile Glu His Pro Glu Cys Thr Asn Val Cys Phe
530 535 540
Trp Tyr Val Pro Pro Ser Leu Arg Gly Met Ala Arg Asp Ser Ala Glu
545 550 555 560
Tyr Arg Glu Arg Leu His Lys Val Ala Pro Lys Val Lys Glu Arg Met
565 570 575
Met Lys Glu Gly Ser Met Met Ile Thr Tyr Gln Pro Ile His Asp Lys
580 585 590
Pro Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu Gln Asn Ser Ser Leu Asp Lys Ser
595 600 605
Asp Met Asn Tyr Ile Ile Asp Glu Ile Glu Arg Leu Gly Lys Asp Leu
610 615 620
<210> 15
<211> 568
<212> PRT
<213> 斯氏按蚊(Anopheles stephensi)
<400> 15
Met Pro Ala Asn Gly Val Cys Ser Val Gly Leu Glu Val Ile Glu Asp
1 5 10 15
Asn Ala Ala Thr Tyr Ala Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu
20 25 30
Asp Glu Asp Val Gln Gln Leu Phe Val Asn Gly Ala Asp Arg Val Thr
35 40 45
Ser Val Ser Ser Leu Pro Lys Lys Ser Thr Glu Ala Arg Gly Lys Leu
50 55 60
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65 70 75 80
Ala Ser Leu Pro Asn Arg Glu Gln His Gln Gln Phe Leu Thr Glu Phe
85 90 95
Leu Thr Glu Val Leu Asn Ser Ala Val Phe Asn Ala Thr Asp Arg Ser
100 105 110
Asn Lys Val Leu Asn Trp Val Asp Pro Glu Glu Leu Lys Arg Thr Leu
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130 135 140
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145 150 155 160
Phe Met Asn Gln Leu Phe Ser Ser Val Asp Pro Tyr Gly Phe Ala Gly
165 170 175
Gln Val Leu Thr Asp Ala Leu Asn Pro Ser Val Tyr Thr Phe Glu Val
180 185 190
Ser Pro Val Phe Val Leu Met Glu Glu Val Val Leu Arg Glu Met Arg
195 200 205
Ser Ile Val Gly Tyr Pro Asn Gly Glu Gly Asp Gly Ile Phe Ala Pro
210 215 220
Gly Gly Ser Met Ala Asn Gly Tyr Ala Ile Ser Cys Ala Arg His Lys
225 230 235 240
Phe Met Pro Asp Ile Lys Thr Lys Gly Leu His Ala Leu Pro Arg Leu
245 250 255
Val Ile Phe Thr Ser Glu Asp Ala His Tyr Ser Val Lys Lys Leu Ala
260 265 270
Ser Phe Met Gly Ile Gly Ser Asp Asn Val Tyr Ala Ile Lys Thr Asp
275 280 285
Ser Ile Gly Lys Ile Arg Ile Glu His Leu Glu Ser Glu Ile Leu Arg
290 295 300
Ala Lys Ala Glu Gly Ala Leu Pro Phe Met Val Ser Ala Thr Ala Gly
305 310 315 320
Thr Thr Val Ile Gly Ala Phe Asp Pro Leu Glu Gln Ile Ala Asp Leu
325 330 335
Cys Ala Lys His Asn Leu Trp Met His Val Asp Ala Ala Trp Gly Gly
340 345 350
Gly Ala Leu Met Ser Lys Lys Tyr Arg Thr Leu Leu Lys Gly Ile Glu
355 360 365
Arg Ser Asp Ser Val Thr Trp Asn Pro His Lys Leu Leu Ala Ala Pro
370 375 380
Gln Gln Cys Ser Thr Leu Leu Thr Arg His Arg Asn Ile Leu Ser Glu
385 390 395 400
Cys His Ser Thr Asn Ala Thr Tyr Leu Phe Gln Lys Asp Lys Phe Tyr
405 410 415
Asp Thr Arg Tyr Asp Thr Gly Asp Lys His Ile Gln Cys Gly Arg Arg
420 425 430
Ala Asp Val Leu Lys Phe Trp Phe Met Trp Arg Ala Lys Gly Thr Ala
435 440 445
Gly Phe Glu Gln His Ile Asp Lys Val Phe Glu Asn Ala Glu His Phe
450 455 460
Thr Asn Ser Ile Lys Ala Arg Pro Gly Phe Glu Met Val Ile Glu Asn
465 470 475 480
Pro Glu Cys Thr Asn Val Cys Phe Trp Tyr Val Pro Pro Gly Leu Arg
485 490 495
Ser Val Pro Arg Asp Ser Ser Glu Phe Arg Glu Arg Leu His Lys Val
500 505 510
Ala Pro Lys Val Lys Glu His Met Met Lys Glu Gly Ser Met Met Ile
515 520 525
Thr Tyr Gln Pro Ile His Asp Lys Pro Asn Phe Phe Arg Leu Val Leu
530 535 540
Gln Asn Ser Ser Leu Asp Lys Ser Asp Met Asn Tyr Ile Ile Asp Glu
545 550 555 560
Ile Glu Arg Leu Gly Lys Asp Leu
565
<210> 16
<211> 1623
<212> DNA
<213> 赤拟谷盗(Tribolium castaneum)
<400> 16
atgccggcga ccggcgagga ccaggatctg gttcaagacc tgatcgagga accggcgacc 60
ttcagcgatg cggtgctgag cagcgacgag gaactgtttc accagaaatg cccgaagccg 120
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ctgcacgagg aatttctgcg tagcagcgtg gatgttctgc tgcaggaagc ggtgttcgaa 240
ggcaccaacc gtaagaaccg tgttctgcaa tggcgtgagc cggaggaact gcgtcgtctg 300
atggactttg gtgttcgtag cgcgccgagc acccatgagg aactgctgga agtgctgaag 360
aaagtggtta cctacagcgt gaaaaccggc cacccgtatt tcgttaacca gctgtttagc 420
gcggtggatc cgtacggtct ggttgcgcag tgggcgaccg atgcgctgaa cccgagcgtg 480
tacacctatg aggttagccc ggtgttcgtt ctgatggagg aagtggttct gcgtgagatg 540
cgtgcgatcg ttggtttcga aggtggcaag ggcgatggta tcttctgccc gggtggcagc 600
attgcgaacg gttacgcgat tagctgcgcg cgttatcgtt ttatgccgga catcaagaaa 660
aagggtctgc acagcctgcc gcgtctggtt ctgttcacca gcgaagatgc gcactacagc 720
attaaaaagc tggcgagctt tcagggcatc ggtaccgaca acgtgtatct gattcgtacc 780
gatgcgcgtg gccgtatgga cgtgagccac ctggttgagg aaattgagcg tagcctgcgt 840
gagggtgcgg cgccgtttat ggtgagcgcg accgcgggta ccaccgttat tggtgcgttt 900
gatccgatcg agaaaattgc ggacgtgtgc caaaaataca agctgtggct gcatgttgat 960
gcggcgtggg gtggcggtgc gctggtgagc gcgaaacacc gtcacctgct gaagggcatc 1020
gaacgtgcgg acagcgttac ctggaacccg cacaagctgc tgaccgcgcc gcagcaatgc 1080
agcaccctgc tgctgcgtca cgagggtgtg ctggcggaag cgcacagcac caacgcggcg 1140
tacctgttcc agaaggataa gttttacgac accaaatatg acaccggcga taagcacatc 1200
caatgcggtc gtcgtgcgga tgttctgaaa ttctggttta tgtggaaagc gaagggcacc 1260
agcggtctgg agaaacacgt ggataaggtt ttcgaaaacg cgcgtttctt taccgactgc 1320
attaagaacc gtgagggctt cgaaatggtt atcgcggagc cggaatacac caacatttgc 1380
ttttggtacg ttccgaaaag cctgcgtggt cgtaaggacg aggcggatta caaagacaag 1440
ctgcacaaag tggcgccgcg tatcaaagag cgtatgatga aggaaggcag catgatggtt 1500
acctatcagg cgcaaaaagg tcacccgaac ttctttcgta tcgtgttcca gaacagcggc 1560
ctggataagg cggacatggt gcatctggtg gaggaaattg aacgtctggg tagcgacctg 1620
taa 1623
<210> 17
<211> 1686
<212> DNA
<213> 跗斑库蚊(Culex tarsalis)
<400> 17
atgccgacca acggcatgct ggacgtggcg ctgcaagtta ttgaggatgc gaacctgagc 60
agcggcagcg acagcgcggg tgtgagcgag gacgaagatg ttcaactgtt cagcaccacc 120
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gaagatcaga acaagaccaa agcgaacgcg aagcgttacg cgagcctgcc gaaccgtgag 240
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attgacctga gcctgaaaga tgagccggac agcgatgaga agctgctgga actggcgcgt 420
gcgaccatcg accacagcgt gaagaccggt cacccgtact tcatgaacca gctgtttagc 480
agcgtggacc cgtatggctt cgcgggtcaa gttctgaccg atgcgctgaa cccgagcgtg 540
tacaccttcg aagttagccc ggtgtttgtt ctgatggagg aagtggttct gaaagaaatg 600
cgtaccattg tgggtttccc gggtggcgtt ggcgacggta tcttttgccc gggtggcagc 660
atggcgaacg gctatgcgat tagctgcgcg cgttttaagc acatgccgga cgtgaagacc 720
aaaggtctgc acagcctgcc gcgtctggtt attttcacca gcgaagatgc gcactacagc 780
atcaagaaac tggcgagctt tatgggcatc ggtagcgata acgtgtatcc gattcgtacc 840
gacgcggttg gcaaaatcca gccggatcac ctggaggcgg aaattctgcg tgcgaagagc 900
gagggtgcgg tgccgttcat ggttagcgcg accgcgggca ccaccgtgat tggtgcgttt 960
gacccgctgg aacagatcgc ggatctgtgc caaaaataca acctgtggat gcatgttgat 1020
gcggcgtggg gtggcggtgc gctgatgagc aagaaatatc gtaccctgct gaaaggtgtg 1080
gagcgtgcgg atagcgttac ctggaacccg cacaagctgc tggcggcgcc gcagcaatgc 1140
agcaccttcc tgacccgtca cgaaggcatt ctgagcggtt gccacagcac caacgcgacc 1200
tacctgttcc agaaggacaa attttacgat acccaatatg acaccggcga taagcacatt 1260
cagtgcggtc gtcgtgcgga cgttctgaaa ttctggttta tgtggcgtgc gaagggtacc 1320
agcggtctgg agcaacacat cgataaagtg ttcgagaccg cggaatactt taccaacagc 1380
attaaggcgc gtccgggctt cgaaatggtt atcgagaacc cggaatgcac caacgtgtgc 1440
ttttggtatg ttccgccggg tctgcgtcaa gtgccgcgtg acagcgcgga gttcggtgaa 1500
cgtctgcaca aagtggcgcc gaaggttaaa gagcgtatga tgcgtgaagg tagcatgatg 1560
atcacctacc agccgattca cgataaaccg aacttctttc gtctggttct gcaaaacagc 1620
gcgctggaca agagcgatat gaactatatc attgacgaga tcgaacgtct ggcgagcgat 1680
ctgtaa 1686
<210> 18
<211> 1635
<212> DNA
<213> 蜂箱小甲虫(Aethina tumida)
<400> 18
atgccggcga acggtcagct ggaagacggc ttccacctga ttgatgaacc ggcgacctat 60
agcgatgcgg tggcgagcag cagcgatgat gaaaccgttc aatatagcaa cgacgagcgt 120
agcatccgtg atatgaaagc gaccattgcg accggcaagc tggcgacctt cgaaagcctg 180
ccgagccgtg cgcaccacga ggaatttatc cgtagctgca tggacgtgat tctgaaagag 240
gcggttttcg atggcaccaa ccgtaacaac ccggtgctga actttgttaa cccggaggaa 300
ctgcaaagca aagtgaactt caaactgaag accgcgccga gcacccacga agacctgctg 360
aaaaccctga aggataccat tcgttacagc gtgaagaccg gtcacccgta tttcgttaac 420
cagctgttta gcagcctgga cccgtacggt ctggtgggcc aatggctgac cgatgcgctg 480
aacccgaccg tttacaccta tgaggtgtct ccggttttta ccctgatgga ggaagaggtg 540
ctgcgtgaaa tgcgtaccat cgttggcttc aagaacggtg aaggtgatgg tatcttctgc 600
ccgggtggca gcatggcgaa cggttatgcg atcagctgcg cgcgtcacaa attcatcccg 660
gatattaaga aaaagggcct gcatgcgctg ccgcgtctgg tgctgtttac cagccaggac 720
gcgcactaca gcatcaaaaa gctgagcagc ttcctgggtc tgggcaccga taacgtttat 780
gcgatttgca ccgacgcgaa aggcaagatg gatgtgggcc acctggttga agagattgaa 840
cgtgcgctgg aagagggtgc ggcgccgttt atggttagcg cgaccagcgg taccaccgtt 900
atcggcgcgt tcgacccgct ggatgagatt gcggacgtgt gccaaaaata cggtctgtgg 960
atgcatgttg atgcggcgtg gggtggcggt gcgctgatga gcaaaaagca ccgtcacctg 1020
ctgaagggcg tggaacgtgc ggacagcgtt acctggaacc cgcacaaact gctgaccgcg 1080
ccgcagcaat gcagcaccct gctgctgcgt cacgaaggtc tgctggcgga gtgcaacagc 1140
gcgaacgcga cctacctgtt ccagaaagac aagttttacg ataccaaata tgacctgggt 1200
gataagcaca tccaatgcgg ccgtcgtccg gatgtgctga agttctggtt tatgtggaaa 1260
gcgaagggta ccagcggctt cgaacagcac atcgacaaag ttttcgagaa caccaagtat 1320
tttaccgata gcattaaaaa ccgtccgggt tttgaactgg tggttccgga accggagtgc 1380
accaacattt gcttctggta cgttccgccg agcctgcgtc aagcgaaaag cgacccggat 1440
tataaagaga agctgcacaa ggtggcgccg aaaatcaagg aacgtatgat gaaagagggc 1500
agcatgatgg ttacctacca gccgctgcgt gaagtgccga acttctttcg tatcgttttt 1560
caaaacagcg gtctgaacaa gaccgacatg acccacctga ttgaagagtt cgagcgtctg 1620
ggccacgatc tgtaa 1635
<210> 19
<211> 1707
<212> DNA
<213> 阿拉伯按蚊(Anopheles arabiensis)
<400> 19
atgccggcga acggtgtgtg cagcgttggc ctggaagtga ttgaagacaa cgcgacctac 60
gcgagcggta gcgatagcgc gggcgttagc gaggacgaag atgtgcagca actgttcgtt 120
agcggtgcgg accgtgtgac cagcgttctg ccgaagaaaa gcgacatccg taaagcgagc 180
caggtggatg agcaagcggc ggcggcggcg gcggcggcgg cggtgtctga gaagcgttat 240
gcgagcctgc cgaaccgtga acagcaccag caattcctga cccaatttct gaccgaagtg 300
ctgaacagcg cggtttttaa cgcgaccgac cgtgcgaaca aagtgctgaa ctgggttgac 360
ccggaggaac tgcaacgtac cctggatctg gcgctgaagg acgagccgga tacccacgag 420
aaactgctgg aactgacccg tgcgaccatt cgtcacagcg tgaagaccgg tcacccgtac 480
ttcatgaacc agctgtttag cagcgtggac ccgtatggtt tcgcgggcca agttctgacc 540
gatgcgctga acccgagcgt gtacacctat gaagttagcc cggtgtttgt tctgatggag 600
gaagtggttc tgcgtgagat gcgtaccatt gttggctacc cggacggcga aggtgatggt 660
atttttgcgc cgggtggcag catggcgaac ggttatgcga ttagctgcgc gcgtcacaaa 720
tttatgccgg acatcaagac caagggtctg catgcgctgc cgcgtctggt gattttcacc 780
agcgaggatg cgcactacag cgttaagaaa ctggcgagct ttatgggtat cggcagcgac 840
aacgtgtatg cgattaagac cgataacgtg ggtaaaatcc gtgttgagca cctggagagc 900
gaaatcctgc gtgcgaaaag cgaaggtgcg ctgccgttca tggttagcgc gaccgcgggt 960
accaccgtta ttggcgcgtt tgacccgctg gaacagatcg cggatctgtg cgcgaagtac 1020
aacctgtgga tgcatgtgga tgcggcgtgg ggtggcggtg cgctgatgag caagaaatat 1080
cgtaccctgc tgaagggtat tgagcgtagc gatagcgtta cctggaaccc gcacaaactg 1140
ctggcggcgc cgcagcaatg cagcaccctg ctgacccgtc accgtaacat cctggcggaa 1200
gcgcacagca ccaacgcgac ctacctgttc cagaaggaca aattttacga tacccgttat 1260
gacaccggtg ataagcacat tcaatgcggc cgtcgtgcgg acgttctgaa gttctggttt 1320
atgtggcgtg cgaaaggtac cgcgggcttc gaggcgcaca tcgataaggt gttcgagaac 1380
gcggaacact ttaccagcag cattaaagcg cgtccgggtt tcgaaatggt tatcgagcaa 1440
ccggaatgca ccaacgtgtg cttttggtat gttccgccgg gtctgcgtgg cgtgccgcgt 1500
gacagcgcgg agtatcgtga tcgtctgcac aaggtggcgc cgaaggttaa agaacgtatg 1560
atgaaagacg gtagcatgat gatcacctac cagccgattc acgataagcc gaacttcttt 1620
cgtctggttc tgcaaaacag cagcctggac aaaagcgata tgaactatat cattgacgag 1680
atcgaacgtc tgggcaagga tctgtaa 1707
<210> 20
<211> 1738
<212> DNA
<213> Asbolus verrucosus
<400> 20
tggccatatg ccggcgaccg gcgagcagga cgatctggtg caagatatca ttgaggaacc 60
ggcgacctac agcgacgcgg ttctgagcag cgacgatgaa gtgtgcgttc gttacagcag 120
ccagagcgat accaacaaca gcagctttta tcaaaccgcg accaagaaac tggcgagctt 180
cgagagcctg ccgaaccgtg agcaccacga agactttatc aagaaatgcg cggaaatcct 240
gattcgtgag gcggtgttcg aaggcaccaa ccgtaaaaac cgtgttctgc aatggaacag 300
cccggaggaa ctgcaaaagc tgatggattt caccctgcgt accagcccga gcagccatga 360
cgaactgctg gatctgctgc gtaacaccgt gaactacagc gttaaaaccg gtcacccgta 420
tttcgtgaac cagctgttca gcagcctgga cccgtacggt ctggtgggtc agtgggcgac 480
cgatgcgctg aacccgagcg tttacaccta tgaggtgtct ccggttttta ccctgatgga 540
ggaagtggtt ctgcgtgaga tgcgtaccat tgtgggcttt gaaggtggcc gtggcgatgg 600
tatcttctgc ccgggtggca gcattgcgaa cggttatgcg atcagctgcg cgcgtcacaa 660
gttccagccg gaaattaaag cgaccgcgag cgttaccaac ctgctgaaaa acatcgcgaa 720
catcattctg ctgctgctgc aaaccaaagg tctgcacagc ctgccgcgtc tggtgctgtt 780
taccagcgag gacgcgcact acagcatcaa gaaactgagc agcttcctgg gcattggtac 840
cgataacgtt tatctgatcc gtaccgacga tcgtggtcgt atggacccga gccacctgat 900
ccaggagatt gagcgtgcgc tggcggaggg tggcgcgccg tttatggtta gcgcgaccgc 960
gggcaccacc gttattggtg cgttcgaccc gatcgatcaa attgcggata tctgcgaaaa 1020
atacaacctg tggctgcatg tggatgcggc gtggggtggc ggtgcgctga tgagcagcaa 1080
gcaccgtagc ctgctgaaag gcatcgagcg tgcggacagc gttacctgga acccgcacaa 1140
gctgctgacc gcgccgcagc aatgcagcac cctgctgctg cgtcacgagg gtctgctgag 1200
cgaaacccac agcacccacg cggcgtacct gttccagaag gacaaatttt atgataccaa 1260
gttcgacacc ggcaccaaga aattcaacgg tgataaacac attcaatgcg gccgtcgtgc 1320
ggacgtgctg aagttctggt ttatgtggaa ggcgaaaggc accctgggtt ttgaaaagca 1380
catcaacaaa gttttcgata acgcgaaatt ctttgcggac agcattcgta accgtgtggg 1440
ttttgagatg ctgatcgatc agccggaatg caccaacgtt tgcttctggt acattccgga 1500
gagcctgcgt aacgcgaagc aagacagcga ttataaggaa cgtctgcaca aagttgcgcc 1560
gaagatcaaa gagcgtatga tgaaagaagg tagcatgatg gtgacctatc aggcgcaaaa 1620
gagccacccg aacttctttc gtattgtttt tcagagcagc ggcctggacc gtgcggatat 1680
gctgcacctg atcgaggagt tcgagcgtct gggtcgtgac ctgtaatgat aagaattc 1738
<210> 21
<211> 1626
<212> DNA
<213> 黄粉虫(Tenebrio molitor)
<400> 21
atgccggcgc gtggcgagca ggatgatgtg gttcaagaca tcattgagga accggcgacc 60
tacggtgatg cgatcctgag cagcgacgat gaggtgtata ccaagttcag cgaacgtccg 120
ctgacccaat tttaccagcc gagccaaaaa cgtgcgagct tcgagagcct gccgaaccgt 180
gaacgtcacg aggaatttat ccgtaagagc gtggagattc tgctgaaaga cgcggttttc 240
gaaggcacca gccgtaacaa ccgtgttctg caatggacct gcccggagga actgagccgt 300
ctgatggagt ttggtctgaa gaacggcccg agcacccacg aggaactgct ggaaatcctg 360
aagaaagtgg ttaactacag cgtgaaaacc ggccacccgt atttcgttaa ccagctgttt 420
agcagcctgg acccgtatgg tctggttgcg caatgggcga ccgatgcgct gaacccgagc 480
gtgtacacct atgaggtgtc tccggttttc attctgatgg aggaagtggt tctgaaggag 540
atgcgtagca tcgtgggttt cgaagcgggc cgtggtgatg gcatcttctg cccgggtggc 600
agcattgcga acggttacgc gattagctgc gcgcgttata aattccagcc ggacatcaag 660
cgtaaaggtc tgcacagcct gccgcgtctg gttctgttca ccagcgaaga tgcgcactat 720
agcattaaga aactgagcag ctttctgggt atcggcaccg acaacgttta cctgattcgt 780
accgacgatc gtggtcgtat ggatgtgacc cacctgatcg gccaaattga acgtagcctg 840
agcgagggtg cggcgccgtt catggttagc gcgaccgcgg gtaccaccgt tattggtgcg 900
tttgacccgc tgaacgagat tgcgagcgtg tgcgaaaagt acaaactgtg gctgcatgtt 960
gatgcggcgt ggggtggcgg tgcgctggtt agcggcaagc acaaaagcct gctgaagggc 1020
atcgagcgtg cggacagcgt gacctggaac ccgcacaaac tgctgaccgc gccgcagcaa 1080
tgcagcaccc tgctgctgcg tcacgaaggt attctggctg cggcgcacag caccaacgcg 1140
gcgtacctgt tccagaagga caaaagctat gataccaagt ttgacaccgg tgataaacac 1200
atccaatgcg gccgtcgtgc ggatgtgctg aagttctggt ttatgtggaa ggcgaaaggt 1260
accagcggcc tggagaagca cattaacaaa gttttcgaaa acgcggcgta ttttgcggac 1320
agcatccgta accgtgaggg cttcgaaatg gtgattgatc agccggagtg caccaacgtt 1380
tgcttttggt atatcccgga aagcctgcgt agctgcaaac aagacagcga ttacaaggag 1440
cgtctgcaca aagttgcgcc gaagattaaa gagcgtatga tgaaggaagg tagcatgatg 1500
gttacctacc aggcgcaaaa acagcacccg aacttctttc gtatcgtgtt ccagaacagc 1560
ggcctggaca aggcggatat gatccacttt gttgaggaaa ttgaacgtct gggtaaagac 1620
ctgtaa 1626
<210> 22
<211> 1644
<212> DNA
<213> 第二堆砂白蚁(Cryptotermes secundus)
<400> 22
atgccggcga gcagcggtat cattaccctg acccagagcc tggagaacct gaacggcaag 60
cacggcatca gcggtagcta cgaagacatg accgcgggcg tgaacgtggc ggtgccgagc 120
ctgagcccga gcccgggtta tgttaccgag aagaaaagca cccgtagcgt ggcgtggttt 180
gcgagcctgc cggaccgtca gcgtcacagc caatttctga aagaggcggt tgacctgatg 240
ctggataaag cggtgttcga tgcggcgagc cgtaccaacc gtgtggttga atggcgtagc 300
ccggaggaac tgaagaaact gattgacctg gatctgccgg cggaccgtgt gagccacgat 360
cgtctgctgc aactgctgaa ggacatcatt caatacagcg ttaaaaccgg ccacccgtat 420
ttcgtgaacc agctgtttag cagcgttgac ccgtacggcc tggtgggtca atggctgggt 480
gatgcgctga acccgagcgt ttacacctat gaggtttctc cggtgtttac cctgatggag 540
gaaaccgttc tgtgcgagat gcgtcgtatt gtgggcttcc cggaaggccg tggtgatggc 600
atcttttgcc cgggtggcag cattgcgaac ggttacgcga tcagctgcgc gcgttataac 660
ttcgttccgg acgtgaagaa acgtggcctg cacggtctgc cgcgtctggt gctgtttacc 720
agcgaagatg cgcactacag cattaagaaa atggcgagcc tgctgggtct gggcagcgac 780
aacgtttatc tgatccactg caacagcaag ggcaaaatgg atgtgcagca cctggagcag 840
gaaattcagc gtgcgctgga ggaaggtgct gcgccgttca tggttagcgc gaccgcgggc 900
accaccgtgc tgggtgcgtt tgacccgatc ccgaagattg cggacatttg cagcaagtac 960
aaaatgtggc tgcacgttga tgcggcgtgg ggtggcggtg cgctggttag caagaaacac 1020
aagcacctgc tggagggcat cgaaaaagcg gatagcgtga cctggaaccc gcacaaactg 1080
ctgaccgcgc cgcagcaatg cagcaccttc ctgctgcgtc acgagggtgt tctgagcgcg 1140
tgccacagcg cgagcgcgca gtacctgttc caaaaggaca aattttacga tacccagtat 1200
gacaccggcg ataagcacat tcaatgcggt cgtcgtgcgg acgtgctgaa attctggttt 1260
atgtggaagg cgaaaggcac cgttggtctg gaggaacaca ttgacaccgt gttcgataac 1320
gcggcgtact ttaccaagca gatcaagaaa cgtgaaggct tccgtatggt tctgcaagag 1380
ccggaatgca ccaacgtgtg cttttggtat atcccgccga gcctgcgtgg tcacgaggac 1440
cagagcgatt tcagcgaacg tctgcacaaa gttgcgccgc gtattaagga gcgtatgatc 1500
aaagaaggta gcatgatggt tacctaccag ccgctgcgtg accaaccgaa cttctttcgt 1560
ctggtgctgc aaaacagcgg cctggattgg gcggacatgg attatttcgt tcaagagttt 1620
gaacgtctgg gtagcgatct gtaa 1644
<210> 23
<211> 1728
<212> DNA
<213> 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)
<400> 23
atgctggcga gcgaaaactt tccgacccac cacttcaagg agagcatctt taaaccgtat 60
agcaccacca gcggtgatga tctggcgagc gtgagcccgc tgaccgcgac cgcggcgctg 120
gttgcgagca ccagcagccc ggcggatagc accagcaccg tggcgtttga acaggcgagc 180
aagatgctgg cgaacgcggc gaacaataat aacaacaaca acaacaacat caccagcacc 240
aaagacgatc tgagcagctt tgttgcgagc cacccggcgg cggagtttga aggtttcatt 300
cgtgcgtgcg tggacgagat cattaagctg gcggttttcc aaggtaccaa ccgtagcagc 360
aaagtggttg agtggcacga accggcggag ctgcgtcagc tgttcgactt tcagctgcgt 420
gaacaaggcg agagccagga taagctgcgt gaactgctgc gtgagaccat ccgttttagc 480
gtgaaaaccg gtcacccgta cttcattaac caactgtata gcggcgtgga cccgtacgcg 540
ctggttggtc agtggctgac cgatgcgctg aacccgagcg tgtacaccta tgaagttgcg 600
ccgctgttca ccctgatgga ggaacaagtg ctggcggaga tgcgtcgtat cgttggtttt 660
ccgaacggtg gtcagggcga cggtattttc tgcccgggtg gcagcatcgc gaacggctat 720
gcgattagct gcgcgcgtta ccgtcacagc ccggaaagca agaaaaacgg tctgtttaac 780
gcgaagccgc tgatcatttt caccagcgaa gacgcgcact acagcgtgga gaaactggcg 840
atgtttatgg gcttcggtag cgatcacgtg cgtaagatcg cgaccaacga ggttggcaaa 900
atgcgtctga gcgacctgga aaagcaagtt aaactgtgcc tggagaacgg ttggcaaccg 960
ctgatggtta gcgcgaccgc gggcaccacc gttctgggtg cgtttgacga tctggcgggc 1020
atcagcgaag tgtgcaagaa atataacatg tggatgcatg ttgatgcggc gtggggtggc 1080
ggtgcgctga tgagcaagaa ataccgtcac ctgctgaacg gtattgagcg tgcggacagc 1140
gtgacctgga acccgcacaa gctgctggcg gcgagccagc aatgcagcac cttcctgacc 1200
cgtcaccagc aagttctggc gcaatgccac agcaccaacg cgacctacct gttccagaag 1260
gacaaatttt acgataccag cttcgacacc ggcgataagc acatccaatg cggtcgtcgt 1320
gcggatgtgt tcaaattttg gttcatgtgg aaggcgaaag gcacccaggg tctggaagcg 1380
cacgtggaga aggtttttcg tatggcggag ttcttcaccg cgaaagtgcg tgaacgtccg 1440
ggctttgagc tggttctgga aagcccggag tgcaccaaca ttagcttctg gtatgttccg 1500
ccgggtctgc gtgagatgga acgtaaccgt gagttctacg accgtctgca caaagtggcg 1560
ccgaaggtta aagagggcat gatcaagaaa ggtagcatga tgattaccta tcaaccgctg 1620
cgtcagctgc cgaacttctt tcgtctggtg ctgcaaaaca gctgcctgga ggaaagcgac 1680
atggtttact tcctggatga gattgaaagc ctggcgcaga acctgtaa 1728
<210> 24
<211> 1692
<212> DNA
<213> 致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)
<400> 24
atgccgacca acggcatgtt cgacgtggcg ctgcaagtta ttgaggatgc gaacctgagc 60
agcggcagcg acagcgcggg tgtgagcgag gacgaagatg ttcaactgtt ttgcaccacc 120
ggtaacgtgg ttagcagcaa accgctgaag aaaccgagcc tgaagccggt gaccaccgtt 180
aaagacgaag atcagaacaa gatgaaaacc aacgcgaagc gttacgcgag cctgccgaac 240
cgtgagcagc accaacgttt cctgaccgac tttctgagcg aagtgctgaa caacgcgatc 300
ttcaacgcga ccgatcgtag caacaaagtg ctgaactggg ttgacccgga ggaactgaag 360
cgtagcattg atctgagcct gaaagcggag ccggacagcg atgagaagct gctggaactg 420
gcgcgtgcga ccatcgacca cagcgttaag accggccacc cgtacttcat gaaccagctg 480
tttagcagcg tggacgttta tggcttcgcg ggtcaatgcc tgaccgatgc gctgaacccg 540
agcgtgtaca ccttcgaagt tagcccggtg tttgttctga tggaggaagt ggttctgaaa 600
gaaatgcgta ccattgtggg tttcccgggt ggcgttggcg acggtatctt ttgcccgggt 660
ggcagcatgg cgaacggcta tgcgattagc tgcgcgcgtt ttaagcacat gccggacgtg 720
aagaccaaag gtctgcacag cctgccgcgt ctggttattt tcaccagcga agatgcgcac 780
tacagcatca agaaactggc gagctttatg ggcatcggta gcgataacgt gtatccgatt 840
cgtaccgacg cggttggcaa aatccagccg gatcacctgg aggcggaaat tctgcgtgcg 900
aagagcgagg gtgcgctgcc gtttatggtt agcgcgaccg cgggcaccac cgttattggt 960
gcgtttgacc cgctggaaca gatcgcggat ctgtgccaaa aatacaacct gtggatgcat 1020
gtggatgcgg cgtggggtgg cggtgcgctg atgagcaaga aatatcgtac cctgctgaaa 1080
ggtgtggagc gtgcggatag cgttacctgg aacccgcaca agctgctggc ggcgccgcag 1140
caatgcagca ccttcctgac ccgtcacgaa ggcattctga gcggttgcca cagcaccaac 1200
gcgacctacc tgttccagaa ggacaaattt tacgataccc aatatgacac cggcgataag 1260
cacattcagt gcggtcgtcg tgcggacgtt ctgaaattct ggtttatgtg gcgtgcgaag 1320
ggcaccagcg gtttcgagca acacatcgat aaagtgttcg agaacgcgga atactttacc 1380
aacagcatta aggcgcgtcc gggtttcgaa atggttatcg agaacccgga atgcaccaac 1440
gtgtgctttt ggtatgttcc gccgggtctg cgtcaagtgc cgcgtgacag cgcggagttt 1500
ggtgaacgtc tgcacaaagt ggcgccgaag gttaaagagc gtatgatgcg tgaaggcagc 1560
atgatgatca cctaccagcc gattcacgat aaaccgaact tctttcgtct ggttctgcaa 1620
aacagcggtc tggacaagag cgatatgaac tatatcattg acgagatcga acgtctggcg 1680
agcgatctgt aa 1692
<210> 25
<211> 1683
<212> DNA
<213> 白纹伊蚊(Aedes albopictus)
<400> 25
atgccggcga acggcatgtt cgatgtggcg ctgcaagtta tcgacgatag caacgtgagc 60
agcggtagcg acagcgcggg cgtgagcgag gatgaagatg ttcaactgtt ttgctcgatg 120
ggtaacacca tcgcgccgaa accgctgaag aaaagcatta ccaagaccaa agatgaggaa 180
tttagcaaga ccgcgaaagc gaacgagaag cgttacgcga gcctgccgaa ccgtgaacag 240
caccagcaat tcctgaccga ctttctgagc gaggtgctga acaacgcggt tttcaacgcg 300
accgaacgtg cgaacaaagt gctgaactgg gttgatccgg agcaactgaa gcgtaccctg 360
gacctggagc tgaaagacga accggatagc cacgagaagc tgctggaact gacccgtgcg 420
accatcaagc acagcgtgaa aaccggtcac ccgtacttca tgaaccagct gtttagcagc 480
gttgatccgt atggttttgc gggccaaatt ctgaccgacg cgctgaaccc gagcgtgtac 540
accttcgaag ttagcccggt gtttgttctg atggaggaag tggttctgaa agaaatgcgt 600
accattgtgg gttacccgga tggtgcgggt gatggcattt tctgcccggg tggcagcatg 660
gcgaacggtt atagcatcag ctgcgcgcgt tttaagcaca tgccggatgt taagaccaaa 720
ggcctgcaca gcctgccgcg tctggtgatt ttcaccagcg aggacgcgca ctacagcgtt 780
aagaaactgg cgagctttat gggtatcggc agcgacaacg tgtatccgat tcgtaccgat 840
gcgatcggta aaattcgtgt tgaccacctg gagagcgaaa ttctgcgtgc gaaagcggag 900
ggtgcggtgc cgttcatggt tagcgcgacc gcgggtacca ccgtgattgg tgcgtttgac 960
ccgctggaac agattgcgga tctgtgcaag aaatacaacc tgtggatgca tgttgatgcg 1020
gcgtggggtg gcggtgcgct gatgagcaag aaatatcgta gcctgctgaa aggtatcgaa 1080
cgtagcgaca gcgttacctg gaacccgcac aagctgctgg cggcgccgca gcaatgcagc 1140
accttcctga cccgtcacga gggcattctg agcgaatgcc acagcaccaa cgcgacctac 1200
ctgttccaga aggacaaatt ttacgatacc caatatgaca ccggtgataa acacatccag 1260
tgcggccgtc gtgcggacgt gctgaaattc tggtttatgt ggcgtgcgaa gggtaccagc 1320
ggtctggagc aacacatcga taaagttttc gagaacgcgg aacactttac caacagcatt 1380
aaggcgcgtg acggtttcga aatggtggtt gagaccccgg aatgcaccaa cgtgtgcttt 1440
tggtatgttc cgccgggtct gcgtagcgtg ccgcgtgata gcgcggagtt caccgaacgt 1500
ctgcacaagg tggcgccgaa ggttaaagag cgtatgatgc gtgaaggtag catgatgatc 1560
acctaccagc cgattcacga caaaccgaac ttctttcgtc tggttctgca aaacagcgcg 1620
ctggacaaga gcgatatgaa ctatatcatt gatgagatcg aacgtctggc ggcggacctg 1680
taa 1683
<210> 26
<211> 1689
<212> DNA
<213> 埃及伊蚊(Aedes aegypti)
<400> 26
atgccggcga acggcatgtt cgatgtggcg ctgcaagtta tcgacgatag caacgtgagc 60
agcggtagcg acagcgcggg cgtgagcgag gatgaagatg ttcaactgtt ttgctcgaag 120
ggcaacacca ttgttccgaa accgctgaag aaaagcatca gcaagattaa agatgaggaa 180
tttagcaaga ccgcgaaagc gaacgagaaa cgttacgcga gcctgccgag ccgtgaacac 240
caccagcaat tcctgaccga ctttctgagc gaggtgctga acaacgcggt tttcaacgcg 300
accgaacgtg cgaacaaggt gctgaactgg gttgatccgg agcagctgaa gcgtaccctg 360
gacctggagc tgaaagacga accggatagc cacgagaagc tgctggaact gacccgtgcg 420
accatcaagc acagcgtgaa aaccggtcac ccgtacttca tgaaccagct gtttagcagc 480
gttgatccgt atggttttgc gggccaaatt ctgaccgacg cgctgaaccc gagcgtgtac 540
accttcgaag ttagcccggt gtttgttctg atggaggaag tggttctgaa agaaatgcgt 600
accatcgtgg gttacccgga cggcaccggt gatggcattt tctgcccggg tggcagcatg 660
gcgaacggtt atagcatcag ctgcgcgcgt tttaagcaca tgccggatgt taagaccaaa 720
ggcctgcaca gcctgccgcg tctggtgatt ttcaccagcg aagacgcgca ctacagcgtt 780
aagaaactgg cgagctttat gggtatcggc agcgacaacg tgtatccgat tcgtaccgat 840
gcgatcggta aaattcgtgt tgaccacctg gagagcgaaa ttctgcgtgc gaagagcgag 900
ggtgcggtgc cgttcatggt tagcgcgacc gcgggtacca ccgtgattgg tgcgtttgac 960
ccgctggaac agattgcgga tctgtgcaag aaatacaacc tgtggatgca tgttgatgcg 1020
gcgtggggtg gcggtgcgct gatgagcaag aaatatcgta gcctgctgaa aggtatcgag 1080
cgtagcgaca gcgtgacctg gaacccgcac aagctgctgg cggcgccgca gcaatgcagc 1140
accttcctga cccgtcacga gggcattctg agcgaatgcc acagcaccaa cgcgacctac 1200
ctgttccaga aggacaaatt ttacgatacc caatatgaca ccggtgataa acacatccag 1260
tgcggccgtc gtgcggatgt gctgaaattc tggtttatgt ggcgtgcgaa gggtaccagc 1320
ggcctggaac aacacatcga caaagttttc gagaacgcgg aacactttac cagcagcatt 1380
aaggcgcgtg agggtttcga aatggtggtt gagaacccgg aatgcaccaa cgtgtgcttt 1440
tggtatgttc cgccgggtct gcgtaacgtg ccgcgtgata gcgcggagtt caccgaacgt 1500
ctgcacaaag tggcgccgaa ggttaaagag cgtatgatgc gtgaaggtag catgatgatc 1560
acctaccagc cgattcacga caaaccgaac ttctttcgtc tggttctgca aaacagcgcg 1620
ctggacaaga gcgatatgaa ctatatcatt gatgagatcg aacgtctggc ggcggacctg 1680
aagccgtaa 1689
<210> 27
<211> 1719
<212> DNA
<213> 中华按蚊(Anopheles sinensis)
<400> 27
atgccggcga acggtgtgaa cagcgttgag ctggaagtga tcgaggatgt tgcgaccacc 60
tacgcgagcg gtagcgacag cgcgggcgtg agcgaggatg aagatgtgca gcaactgttc 120
gttagcggtg cgcaccacat tagcagcgtg ccgccgctga agaaagcggt tgagacccgt 180
ggcaagggta cccagctgca aggtccggcg agcgagggtg cggcggcggc ggaagtgagc 240
gaaaaacgtt atgcgagcct gccgaaccgt gagcagcacc agcaattcct gaccgatttt 300
ctgaccgaag tgctgaacag cgcggttttc aacgcgaccg atcgtgcgaa caaggtgctg 360
aactgggttg acccggagga actgaagcgt accctggacc tggcgatcaa acaagagccg 420
gatacccacg agaagctgct ggaactgacc cgtgcgacca ttcgtcacag cgtgaaaacc 480
ggtcacccgt acttcatgaa ccagctgttc agcagcgtgg acccgtacgg ttttgcgggc 540
caagttctga ccgacgcgct gaacccgagc gtgtacacct tcgaagttag cccggtgttt 600
gttctgatgg aggaagtggt tctgcgtgag atgcgtacca tcgtgggtta tccgaacggc 660
gaaggtgacg gcattttcgc gccgggtggc agcatggcga acggttacgc gatcagctgc 720
gcgcgttata agtttatgcc ggatgttaaa gcgaaaggtc tgcatgcgct gccgcgtctg 780
gtgattttca ccagcgaaga cgcgcactac agcgttaaga aactggcgag ctttatgggt 840
atcggcagcg acaacgtgta tgcgattaag accgatgcga tcggtaaaat ttgcgttgac 900
cacctggaga gcgaaatcct gcgtgcgaag caggaaggtg cgctgccgtt catggttagc 960
gcgaccgcgg gtaccaccgt tattggtgcg tttgacccgc tggaacaaat tgcggatctg 1020
tgcgcgaaat acaacctgtg gatgcatgtg gatgcggcgt ggggtggcgg tgcgctgatg 1080
agcaagaaat atcgtaccct gctgaaaggt atcgagcgta gcgacagcgt tacctggaac 1140
ccgcacaagc tgctggcggc gccgcagcaa tgcagcaccc tgctgacccg tcaccgtaac 1200
attctgagcg aatgccacag caccaacgcg acctacctgt tccagaagga caaattttac 1260
gatacccgtt atgacaccgg tgataaacac atccaatgcg gccgtcgtgc ggatgttctg 1320
aaattctggt ttatgtggcg tgcgaagggt accgcgggct ttgagcagca cattgacaaa 1380
gtgttcgaga acgcggaaca ctttaccagc agcatcaagg cgcgtccggg tttcgaaatg 1440
gttattgaga acccggaatg caccaacgtg tgcttttggt atgttccgcc gggtctgcgt 1500
agcgtgccgc gtgatagcgc ggagtttcgt gaacgtctgc acaaagtggc gccgaaggtt 1560
aaagagcgta tgatgaagga aggtagcatg atgatcacct accagccgat tcacgacaaa 1620
ccgaacttct ttcgtctggt tctgcaaaac agcagcctgg acaagagcga tatgaactat 1680
atcattgatg agatcgaacg tctgggcaaa gacctgtaa 1719
<210> 28
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 保守的N末端15-aa蚊ADC序列
<400> 28
Ser Gly Ser Asp Ser Ala Gly Val Ser Glu Asp Glu Asp Val Gln
1 5 10 15

Claims (9)

1.一种重组截短型昆虫天冬氨酸1-脱羧酶(ADC)，所述截短型昆虫ADC缺乏在相应的全长野生型昆虫ADC的氨基末端区域内的足够数量的连续残基，使得与所述相应的全长野生型昆虫ADC相比，所述截短型ADC展现出增加的天冬氨酸向β-丙氨酸的转化。
2.根据权利要求1所述的重组截短型昆虫ADC，所述重组截短型昆虫ADC是蚊、蝇、甲虫、蚤、蟑螂或白蚁ADC的截短型变体。
3.根据权利要求1或2所述的重组截短型昆虫ADC，所述重组截短型昆虫ADC是来自以下属的昆虫ADC的截短型变体：库蚊属(Culex)、按蚊属(Anopheles)、果蝇属(Drosophila)、Aethina、伊蚊属(Aedes)、拟谷盗属(Tribolium)、按蚊属、粉虫属(Tenebrio)、Asbolus或堆砂白蚁属(Cryptotermes)。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，所述重组截短型昆虫ADC是来自以下物种的昆虫ADC的截短型变体：跗斑库蚊(Culex tarsalis)、阿拉伯按蚊(Anopheles arabiensis)、黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)、致倦库蚊(Culexquinquefasciatus)、蜂箱小甲虫(Aethina tumida)、白纹伊蚊(Aedes albopictus)、埃及伊蚊(Aedes aegypti)、赤拟谷盗(Tribolium castaneum)、中华按蚊(Anophelessinensis)、黄粉虫(Tenebrio molitor)、Asbolus verrucosus或第二堆砂白蚁(Cryptotermes secundus)。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述相应的全长野生型昆虫ADC是：
(a)包含总体上与SEQ ID NO:2、4或9-15中任一个至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的蚊ADC；
(b)包含总体上与SEQ ID NO:1、3或5-6中任一个至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的甲虫ADC；或
(c)包含总体上与SEQ ID NO:8至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的蝇ADC。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短型ADC包含总体上与以下至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列：
(a)SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置72至561；
(b)SEQ ID NO:4所示的AaADC的氨基酸序列的位置79至568；
(c)SEQ ID NO:3所示的AtADC的氨基酸序列的位置56至544；
(d)SEQ ID NO:1所示的TcADC的氨基酸序列的位置52至540；
(e)SEQ ID NO:10所示的Aa2ADC的氨基酸序列的位置71至560；
(f)SEQ ID NO:11所示的Aa3ADC的氨基酸序列的位置71至562；
(g)SEQ ID NO:9所示的CqADC的氨基酸序列的位置74至563；
(h)SEQ ID NO:13所示的Aa4ADC的氨基酸序列的位置72至561；
(i)SEQ ID NO:14所示的AdADC的氨基酸序列的位置74至624；
(j)SEQ ID NO:12所示的AsADC的氨基酸序列的位置83至572；
(k)SEQ ID NO:15所示的As2ADC的氨基酸序列的位置72至561；
(l)SEQ ID NO:6所示的TmADC的氨基酸序列的位置53至541；或
(m)SEQ ID NO:5所示的AvADC的氨基酸序列的位置57至572。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短型ADC在对应于SEQ ID NO:2所示的CtADC的氨基酸序列的位置96的位置处包含甘氨酸残基。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短型ADC缺乏所述相应的全长野生型昆虫ADC的氨基末端的至少X个连续残基，其中X是在5与50之间的任何整数。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的重组截短型昆虫ADC，其中所述截短发生在对应于全长野生型昆虫ADC的位置n的残基的紧邻C末端(下游)的位置处，其中n是在2与Y之间的任何整数，其中Y是在所述全长野生型昆虫ADC内的能够发生N末端截短的最C末端残基位置，其中与所述全长野生型ADC相比，所述截短型ADC展现出增加的天冬氨酸向β-丙氨酸的转化。
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