CN115197431A - 脂质偶联完全可降解水溶性聚合物的合成及应用 - Google Patents
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Abstract
Description
技术领域
本发明涉及生物医药技术、纳米医药、超分子化学及小分子药物、核酸(DNA、RNA等)递送技术领域,尤其涉及一种脂质偶联完全可降解水溶性聚合物的合成及其在药物递送中的应用。
背景技术
化疗药物已在临床上被广泛用于肿瘤患者的一线治疗,但其进入人体后广泛的分布导致其副作用较大,精准递送化疗药物一直是研究的热点之一。脂质体(liposome)是目前使用最广泛的化疗药递送载体,基于脂质体-化疗药的复合药物已经在临床上有一定的使用案例;近年来,基于RNA的药物或治疗手段发展迅猛,其在多种疾病中均具有较大的治疗或预防潜力。RNA药物通常需进入细胞后发挥相应功能,如何高效、安全递送RNA进入细胞是急需解决的问题。脂质纳米粒(LNP)是目前为止使用最广泛、最先进的RNA递送载体。基于LNP的RNA疫苗在新冠爆发后短时间即被FDA批准大规模使用。目前,基于LNP的RNA递送技术正在被广泛研究用于治疗或预防各类疾病。
然而据报道,现有liposome和LNP递送体系在多次注射后会因为宿主产生的抗体反应对其进行排斥而产生一定肝毒性、且降低其作用效果,其中主要原因是载体组分中含有脂质-PEG这一聚合物,这一聚合物在体内较难降解,易诱发免疫反应。因此,研发出新的脂质-PEG聚合物的替代品,是避免药物载体多次注射产生副作用的主要途径。
发明内容
为解决现有技术中存在的不足,本发明的首要目的在于提供一种脂质偶联完全可降解、避免多次给药造成的抗体反应和肝毒性、用于小分子药物或核酸(DNA、RNA等) 递送的水溶性聚合物脂质-PPE分子。
本发明的上述目的通过以下技术方案实现:
所述聚合物合成引发剂为含-OH和疏水链的引发剂,其结构式如下:
其中羟基可引发聚合反应,疏水链可便于合成后的聚合物直接用于脂质纳米粒的制备;
X可为-CH基团或-N基团;
A1, A2, A3各自独立地选自羰基、酯基、酰胺基、脂肪烃基、醚键、氨基甲酸酯基、碳酸酯基、脲基、酮羰基或亚胺基连接基团;B1, B2, B3各自独立地选自羰基、酯基、酰胺基、脂肪烃基连接基团;
R1,R2脂质结构为脂肪烃链或胆固醇等疏水基团,包括C1-30的脂肪烃基的脂肪烃链,饱和或者不饱和,支链或者直链;
R1,R2可选择的结构包括但不限于以下代表性结构(其中碳-碳双键和碳-碳三键的位置包括但不限于脂肪烃末端):
在一优选的实施方式中,R1、R2可选自以下代表性结构:
在一更优选的实施方式中,R1、R2可选自以下代表性结构:
n1、n2、n3、n表示碳的个数,取值范围1-10内整数;
第二方面,本发明要求保护合成聚合物脂质-PPE的方法
对于聚合物脂质-PPE的合成,首先选择上述含-OH和疏水链的引发剂;
其次对于PPE的合成,选择如下结构式的单体:
具体地,所述单体为以下三种水溶性化合物:
其中n<15,
所述合成方法包括以下步骤:
将含-OH和疏水链的引发剂溶于溶剂1中,按照一定比例加入PPE聚合物单体,充分搅拌一定时间后加入催化剂在一定温度下反应一定时间,即得。
所述溶剂1选自二氯甲烷、甲苯、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、四氢呋喃、甲醇、乙醇或丙酮;
在一实施方式中,所述溶剂1选自二氯甲烷、甲苯、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、四氢呋喃、甲醇、乙醇或丙酮;优选地,选自二氯甲烷、甲苯;更优选地,为二氯甲烷;
聚合物单体与引发剂的摩尔比可为100:1-10:1;
在一实施方式中,聚合物单体与引发剂的摩尔比为80:1-10:1;优选地,为40:1;
在一实施方式中,搅拌时间为1-60min;优选地,为5-30min;更优选地,为10-20min。
在一实施方式中,所述催化剂为二乙胺、三乙胺、TBD、DBU,优选地,为TBD、DBU,更优选地,为DBU。
在一实施方式中,反应时间为1min-300min;优选地,为5-100min;更优选地,为10-50min。
在一实施方式中, 反应温度为0-120℃;优选地,为10-60℃;更优选地,为20-40℃。
上述方法进一步包括在反应完成后将反应液加到乙醚中沉淀,离心,干燥得到目标化合物。
第三方面,本发明要求保护上述脂质-PPE在脂质体(liposome)制备中的应用。
第四方面,本发明要求保护一种脂质体(liposome),所述脂质体(liposome) 由上述脂质-PPE与其它脂质分子共同组装而成,主要包括三个组成部分:胆固醇、磷脂、脂质-PPE。
所述磷脂包括但不限于:磷脂酰乙醇胺(PE),磷脂酰胆碱(PC),鞘磷脂(SM),磷脂酸(PA),磷脂酰甘油(PG),磷脂酰肌醇(PI),磷脂酰丝氨酸(PS),硬脂酰胺(SA)等。
第五方面,本发明要求保护上述脂质体(liposome)在制备药物递送体系中的应用。
第六方面,本发明要求保护一种药物递送体系及其制备方法。
所述药物递送体系以上述脂质体(liposome)为递送载体,通过包括如下步骤的方法制备得到:
步骤(B1)将磷脂、脂质-PPE、胆固醇以一定比例混合,用溶剂溶解,使用旋转蒸发仪旋干溶剂,在容器壁上得一薄膜层;
步骤(B2)将药物溶液注入旋干容器,超声,挤压,得粒径均一的载药脂质体,即药物递送体系。
优选地,步骤(B1)中用于溶解脂质分子的溶剂为甲醇、乙醇、四氢呋喃、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合物;
更优选地,步骤(B1)中用于溶解脂质分子的溶剂为乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷中的一种或几种的混合物;
最优选地,步骤(B1)中用于溶解脂质分子的溶剂为乙醇、三氯甲烷中的一种或两种的混合物。
优选地,步骤(B1)中磷脂、胆固醇和脂质-PPE的摩尔比为1-10:1:0.05-0.5;
更优选地,步骤(B1)中磷脂、胆固醇和脂质-PPE的摩尔比为2-6:1:0.05-0.15;
最优选地,步骤(B1)中磷脂、胆固醇和脂质-PPE的摩尔比为3:1:0.15。
步骤(B2)药物包括但不限于亲水性或疏水性小分子化疗药。
步骤(B2)中药物占步骤(B1)脂质总质量1-40%,优选为2-20%,更优选为8.9% ;
第七方面,本发明要求保护上述脂质-PPE在脂质纳米粒(LNPs)制备中的应用。
第八方面,本发明要求保护一种脂质纳米粒(LNPs)及其制备方法。
所述脂质纳米粒(LNPs)通过将脂质-PPE与其他脂质分子共同组装制得,主要包括四个组成部分:可离子化脂质体、中性脂质体、脂质-PPE及甾族脂质。
所述可离子化脂质体包括但不限于:含有一个或多个可离子化位点,包括吡啶、咪唑、伯胺、仲胺及叔胺等。例如:SM-102、ALC-0315、DODAP、DODMA、DOBAQ、YSK05、Dlin-DMA、Dlin-KC2-DMA、Dlin-MC3-DMA等。
所述中性脂质体包括但不限于:1 ,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (DSPC)、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (DPPC)、1 ,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、1 ,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺 (DPPE)、1 ,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺 (DMPE)、2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-(1 '-rac-甘油) (DOPG)、油酰磷脂酰胆碱(POPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基磷脂酰乙醇胺(POPE)。
所述甾族脂质包括但不限于:燕麦甾醇、β-谷甾醇、菜子甾醇、麦角骨化醇、菜油甾醇、胆甾烷醇、胆固醇、粪甾醇、脱氢胆固醇、链甾醇、二氢麦角骨化醇、二氢胆固醇、二氢麦角甾醇、黑海甾醇、表胆甾醇、麦角甾醇、岩藻甾醇、六氢光甾醇、羟基胆固醇;羊毛甾醇、光甾醇、海藻甾醇、谷甾烷醇、谷甾醇、豆甾烷醇、豆甾醇、胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、脱氧胆酸和石胆酸。
第九方面,本发明要求保护一种包载核酸分子的LNPs及其制备方法。
所述包载核酸分子的LNPs通过包括如下步骤的方法制备得到:
步骤(B1)将可离子化脂质体,脂质-PPE,甾族脂质,中性脂质体以一定比例混合,用溶剂溶解,得到脂质体溶液;
步骤(B2)将核酸分子用适当pH的缓冲溶液溶解;
步骤(B3)按照一定的体积比,将步骤(B2)中的核酸分子溶液滴入步骤(B1)中的脂质体溶液中,制备包载核酸分子的LNPs,之后使用对LNPs进行超滤或透析,得到包载核酸分子的LNPs。
优选地,步骤(B1)中所述溶剂为甲醇、乙醇、四氢呋喃、丙酮、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺;
更优选地,步骤(B1)中所述溶剂为乙醇、四氢呋喃、丙酮;
最优选地,步骤(B1)中所述溶剂为乙醇。
下述比例是摩尔百分比,总脂质体的摩尔量为100;
优选地,步骤(B1)中可离子化脂质体分子的比例为10%‒70%。
更优选地,步骤(B1)中可离子化脂质体分子的比例为30%‒60%。
最优选地,步骤(B1)中可离子化脂质体分子的比例为50%。
优选地,步骤(B1)中脂质-PPE的比例为1%‒20%。
更优选地,步骤(B1)中脂质-PPE的比例为1%‒10%。
最优选地,步骤(B1)中脂质-PPE的比例为2%。
优选地,步骤(B1)中甾族脂质的比例为5%‒60%。
更优选地,步骤(B1)中甾族脂质的比例为10%‒50%。
最优选地,步骤(B1)中甾族脂质的比例为38%。
优选地,步骤(B1)中中性脂质体的比例为1%‒30%。
更优选地,步骤(B1)中中性脂质体的比例为5%‒15%。
最优选地,步骤(B1)中中性脂质体的比例为10%。
优选地,步骤(B2)中缓冲溶液为醋酸/醋酸钠溶液,柠檬酸/柠檬酸钠溶液;
最优选地,步骤(B2)中缓冲溶液为柠檬酸/柠檬酸钠溶液。
优选地,步骤(B2)中缓冲溶液的pH为3‒9;
更优选地,步骤(B2)中缓冲溶液的pH为4‒6;
最优选地,步骤(B2)中缓冲溶液的pH为5。
优选地,步骤(B2)中缓冲溶液的浓度为1 mM‒1 M;
更优选地,步骤(B2)中缓冲溶液的浓度为20 mM‒500 mM;
最优选地,步骤(B2)中缓冲溶液的浓度为100 mM。
优选地,步骤(B3)中脂质分子与核酸分子的质量比为5:1‒50:1;
更优选地,步骤(B3)中脂质分子与核酸分子的质量比为10:1‒30:1;
最优选地,步骤(B3)中脂质分子与核酸分子的质量比为25:1。
优选地,步骤(B3)中有机溶液与水溶液的体积比为1:1‒1:10;
更优选地,步骤(B3)中有机溶液与水溶液的体积比为1:1‒1:5;
最优选地,步骤(B3)中有机溶液与水溶液的体积比为1:3。
本产品与其它现有脂质分子形成LNP复合物可用于多种哺乳动物、人类细胞系以及哺乳动物和人体给药。特别是小鼠,大鼠,兔,猫,狗,猪,猴以及人体给药,优选是小鼠,大鼠,兔,猫,狗,猪,猴以及人体肌肉或皮下注射给药。
本产品与其它现有脂质分子形成LNP复合物可以将多种外源核酸分子导入细胞,包括DNA核酸分子和RNA核酸分子。DNA核酸分子比如质粒,单链DNA分子和双链DNA分子。RNA核酸分子包括蛋白质编码线性RNA,环状RNA,自复制RNA和各种非编码RNA比如microRNAs,siRNAs, piRNAs, snoRNAs, snRNAs, exRNAs, scaRNAs 和长链非编码RNA。RNA 分子可以带上各种碱基修饰和帽子结构,包括但不限于:甲基化修饰比如:N6-甲基腺苷(m6A), n1 -甲基腺苷(m1A), 5-甲基胞苷(m5C), 3-甲基胞苷(m3C), n7 -甲基鸟苷(m7G)和1-甲基鸟苷(m1G), 2 ' - O -甲基鸟苷,N6,2 ' - O -二甲基鸟苷(m6Am),甲氧基乙氧基修饰比如:2-甲氧基乙氧基腺苷,2-甲氧基乙氧基胞苷,2-甲氧基乙氧基鸟苷,2-甲氧基乙氧基尿苷,氟基化修饰, 假尿嘧啶修饰(Ψ)和甲基假尿嘧啶修饰(M1-Ψ)以及cap0, cap1, cap2 的帽子结构。
本产品可以应用于RNA疫苗的递送载体,包括但不限于肿瘤疫苗、冠状病毒疫苗、猴痘病毒疫苗、黄病毒疫苗等,还可用于基于RNA的基因瞬时过表达系统,嵌合抗原受体免疫细胞等基因修饰免疫细胞制备,诱导多种原代细胞的多功能干细胞(iPSC)重编程和再分化。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
本发明所设计脂质-PPE分子-具有疏水的脂质尾端与亲水头端,可与其它现有脂质分子共同制备包载RNA的LNP,高效完成RNA的递送;
脂质-PPE分子引入了重复单元的磷酸酯键,在进入生物体内易降解成小分子单体,减少炎症反应;
由可降解的脂质-PPE和其它脂质分子组合形成的脂质体在多次注射后可减轻传统含聚乙二醇(PEG)的脂质体带来的抗体反应和肝毒性;
由可降解的脂质-PPE和其它脂质分子组合形成的LNP在多次注射后可减轻传统含聚乙二醇(PEG)的LNP带来的抗体反应和肝毒性;
本发明技术合成简单,原料价格低廉,适合大规模生产。
附图说明
图1为本发明实施例1中所采用的引发剂的结构式。
图2为本发明实施例1中所采用的单体的结构式。
图3为本发明实施例1中所制备的聚合物脂质-PPE的结构式。
图4为本发明实施例5、6、7和8中所用的可离子化脂质体的结构式。
图5为本发明实施例2中Elisa测定的脂质-PEG(PEG)和脂质-PPE(PPE)抗体相对表达结果。
图6为本发明实施例3中PEG-Liposome的TEM照片(A), PPE-Liposome的TEM照片(B)。
图7为本发明实施例4中基于脂质-PEG (PEGlipo@OxPt)和脂质-PPE(PPElipo@OxPt)包载的奥沙利铂(OxPt)脂质体用于小鼠治疗肿瘤生长曲线图。
图8为本发明实施例5中制备的LNP-PEG TEM照片(A),LNP-PPE的TEM照片(B)。
图9为本发明实施例6中LNP-PEG和LNP-PPE递送mRNA(EGFP)至细胞内蛋白表达实验结果图。
图10为本发明实施例7中LNP-PEG递送mRNA(luciferase)至小鼠肌肉组织蛋白表达实验结果图(A),LNP-PPE递送mRNA(luciferase)至小鼠肌肉组织蛋白表达实验结果图(B)。
图11为本发明实施例8中基于LNP-PEG和LNP-PPE包载mRNA(OVA)用于小鼠治疗肿瘤生长曲线图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施例仅为了阐明本发明,而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南,并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1、脂质-PPE分子的合成
将含有羟基和疏水链的引发剂(见图1)溶于二氯甲烷中,单体(见图2)与引发剂按摩尔比40:1混合,充分搅拌10 min后加入催化剂DBU(DBU加入催化量,与引发剂摩尔比1:1),反应室温搅拌20 min,溶液滴加到冰乙醚中沉淀。将沉淀溶于二氯甲烷,然后乙醚沉淀,重复三次操作,除去催化剂及其他杂质,得脂质-PPE(见图3)。单体转化率超过95%。
实施例2、脂质-PPE动物安全性评估
向小鼠体内分别尾静脉注射脂质-PEG和脂质-PPE(5 mg/mouse)(静脉注射PBS作为对照),在第五天和第十天再次注射相同剂量的相同脂质,第十五天取小鼠外周血,分离血清,用包被BSA-脂质-PEG和BSA-脂质-PPE的Elisa实验用96孔板按Elisa实验操作步骤检测相对IgG和IgM抗体量。结果如图5所示,脂质-PPE诱导相对低的抗体反应应答。
实施例3、以脂质-PPE分子为制备单元的脂质体用于包载奥沙利铂
将磷脂、胆固醇、实施例1制备的脂质-PPE按照摩尔比为3:1:0.15混合并溶解于乙醇三氯甲烷混合溶剂(乙醇、三氯甲烷体积比为1:1)中。旋转蒸发抽干液体,加入含奥沙利铂的溶液(占脂质体总质量分数的8.9%),超声30分钟,用手动挤压器挤压,得包载奥沙利铂的脂质体。采用脂质-PEG按相同实验方法获得包载奥沙利铂的脂质体。使用透射电镜(TEM)观察脂质体(liposome)结构,图6为PEG-Liposome的TEM照片(A), PPE-Liposome的TEM照片(B),liposome呈球形,粒径约为50-100 nm左右。
实施例4、包载奥沙利铂的脂质体用于荷瘤小鼠的治疗
选用雌性Balb/c小鼠,每只小鼠乳腺部位注射1×105 4T1肿瘤细胞。从第8天开始,将小鼠随机分成四组,每组分别通过静脉注射PBS、奥沙利铂、含脂质-PEG的奥沙利铂脂质体、含脂质-PPE的奥沙利铂脂质体,每隔三天给药一次,共给药三次。统计肿瘤体积,如图7所示,可见奥沙利铂脂质体有着明显的抗肿瘤效果,且基于脂质-PEG和脂质-PPE的脂质体效果相当。
实施例5、以脂质-PPE分子为制备单元的LNPs用于包载EGFP的mRNA
将可离子化脂质体(结构式如图4所示),DSPC、胆固醇、实施例1制备的脂质-PPE按照50:10:38:2的摩尔比混合,溶解在乙醇溶液中。mRNA用pH为5.0的柠檬酸钠(100 mM)缓冲溶液溶解。有机相溶液和水相溶液体积比为1:3,所含脂质与mRNA质量按25:1的比例混合,得到白色乳液。随后透析除去乙醇。得到包载mRNA的LNP(PPE)-mRNA。同时,选用传统PEG-脂质替代PPE-脂质,采用一致的方法得到LNP(PEG)-mRNA。使用透射电镜(TEM)对所获得的LNPs进行粒径分布表征以及形貌表征。图8为制备的LNP-PEG TEM照片(A),LNP-PPE的TEM照片(B)。TEM实验显示LNP(PPE)-mRNA呈球形,粒径约为50-100 nm。
实施例6、包载GFP-RNA的PPE-LNP用于细胞蛋白表达实验
根据实施例5中所述方法制备得到包载绿色荧光(EGFP)mRNA的LNP-PPE和LNP-PEG(所用可离子化脂质体的结构式如图4所示),之后选用人胚胎肾HEK293和小鼠胚胎成纤维NIH3T3细胞与LNP(0.5 μg RNA / 106 cells)共孵育12小时,24小时后通过流式细胞术检测细胞绿色荧光蛋白表达情况,结果如图9所示。
由图9的实验结果可知:LNP-PPE与LNP-PEG包载RNA后可介导相似的蛋白表达水平。
实施例7、包载luciferase-RNA的PPE-LNP用于小鼠肌肉组织蛋白表达实验
根据实施例6中所述方法制备得到包载萤火虫荧光素酶(luciferase)的mRNA的LNP-PPE和LNP-PEG(所用可离子化脂质体的结构式如图4所示),之后选用C57/B6J小鼠进行肌肉注射实验,每只小鼠肌肉注射相当于5μg RNA的LNP复合物,六小时后,小鼠腹腔注射荧光素底物,并通过活体成像系统观察小鼠荧光素酶表达情况,图10为LNP-PEG递送mRNA(luciferase)至小鼠肌肉组织蛋白表达实验结果图(A),LNP-PPE递送mRNA(luciferase)至小鼠肌肉组织蛋白表达实验结果图(B)。LNP-PEG和LNP-PPE介导蛋白表达水平相当。
实施例8、包载OVA抗原肽-RNA的PPE-LNP用于荷瘤小鼠的治疗
选用C57/B6J小鼠,通过皮下注射5×105表达鸡卵清蛋白OVA(257-264)抗原肽的结直肠癌MC38细胞系,待肿瘤生长至体积大于100 mm3后,将小鼠随机分组,根据实施例6所述方法制备编码鸡卵清蛋白OVA(257-264)抗原肽和萤火虫荧光素酶的mRNA的LNP-mRNA复合物(所用可离子化脂质体的结构式如图4所示),分别肌肉注射相当于5 μg RNA的LNP-mRNA复合物,并在特定时间点给予第二针注射,观察小鼠肿瘤生长情况,如图11所示,LNP-PEG和LNP-PPE介导抗肿瘤免疫应答效果相当。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说,在不脱离本发明的宗旨和范围,以及无需进行不必要的实验情况下,可在等同参数、浓度和条件下,在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例,应该理解为,可以对本发明作进一步的改进。总之,按本发明的原理,本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进,包括脱离了本申请中已公开范围,而用本领域已知的常规技术进行的改变。
Claims (9)
所述聚合物合成引发剂为含-OH和疏水链的引发剂,其结构式如下:
X为-CH基团或-N基团;
A1, A2, A3各自独立地选自羰基、酯基、酰胺基、脂肪烃基、醚键、氨基甲酸酯基、碳酸酯基、脲基、酮羰基或亚胺基连接基团;B1, B2, B3各自独立地选自羰基、酯基、酰胺基、脂肪烃基连接基团;
R1,R2为疏水基团,各自独立地为脂肪烃链或胆固醇;
n1、n2、n3、n表示碳的个数,取值范围1-10内整数;
2.根据权利要求1所述的聚合物脂质-PPE,其特征在于:R1,R2各自独立地包括C1-30的脂肪烃基的脂肪烃链,饱和或者不饱和,支链或者直链。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:聚合物单体与引发剂的摩尔比为100:1-10:1;
所述催化剂为二乙胺、三乙胺、TBD、DBU;
反应时间为1min-300min;
反应温度为0-120℃。
5.一种脂质体,其特征在于:所述脂质体由权利要求1或2所述聚合物脂质-PPE与其它脂质分子共同组装而成,包括三个组成部分:胆固醇、磷脂、脂质-PPE。
6.根据权利要求5所述的脂质体,其特征在于:所述脂质体中,磷脂、胆固醇和脂质-PPE的摩尔比依次为1-10:1:0.05-0.5。
7.一种药物递送体系,其特征在于:所述药物递送体系以权利要求5或6所述的脂质体为递送载体。
8.一种脂质纳米粒LNPs,其特征在于:所述脂质纳米粒LNPs通过将权利要求1或2所述聚合物脂质-PPE与其他脂质分子共同组装制得,包括四个组成部分:可离子化脂质体、中性脂质体、脂质-PPE及甾族脂质。
9.一种包载核酸分子的LNPs,其特征在于:所述包载核酸分子的LNPs以权利要求8所述的脂质纳米粒LNPs为递送载体。
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