CN116023303A - 一种可用于递送mRNA的脂质分子、脂质体及其制备方法与应用 - Google Patents
一种可用于递送mRNA的脂质分子、脂质体及其制备方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116023303A CN116023303A CN202210979395.9A CN202210979395A CN116023303A CN 116023303 A CN116023303 A CN 116023303A CN 202210979395 A CN202210979395 A CN 202210979395A CN 116023303 A CN116023303 A CN 116023303A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lipid
- group
- mrna
- nucleic acid
- lipid molecule
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 118
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 title claims abstract description 58
- 239000002502 liposome Substances 0.000 title claims abstract description 30
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical class OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 18
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- -1 triethanolamine lipid Chemical class 0.000 claims description 48
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 47
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 42
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 41
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 41
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 28
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 27
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 27
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 25
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 22
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 17
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 16
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 16
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 15
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 14
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 12
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 11
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 claims description 11
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 10
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 10
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 10
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 9
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 9
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol Substances OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 8
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 claims description 8
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 claims description 7
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 7
- NXLNNXIXOYSCMB-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) carbonochloridate Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(OC(Cl)=O)C=C1 NXLNNXIXOYSCMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 claims description 6
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 6
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 6
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 6
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 claims description 6
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 claims description 6
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 claims description 5
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 5
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 5
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims description 5
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- QYIXCDOBOSTCEI-QCYZZNICSA-N (5alpha)-cholestan-3beta-ol Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]2(C)CC1 QYIXCDOBOSTCEI-QCYZZNICSA-N 0.000 claims description 4
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical group NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- QYIXCDOBOSTCEI-UHFFFAOYSA-N alpha-cholestanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 QYIXCDOBOSTCEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000000431 campesterol Nutrition 0.000 claims description 4
- 125000005587 carbonate group Chemical group 0.000 claims description 4
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000002190 fatty acyls Chemical group 0.000 claims description 4
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000007821 HATU Substances 0.000 claims description 3
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000005626 carbonium group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229940069078 citric acid / sodium citrate Drugs 0.000 claims description 3
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 claims description 3
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 3
- KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N (-)-beta-Sitosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N 0.000 claims description 2
- BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N (10S)-3c-Acetoxy-4.4.10r.13c.14t-pentamethyl-17c-((R)-1.5-dimethyl-hexen-(4)-yl)-(5tH)-Delta8-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren Natural products CC12CCC(OC(C)=O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-ethyl-5alpha-cholest-22-en-3beta-ol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- IXRAQYMAEVFORF-UTLNTRLCSA-N (3S,8S,9S,10R,13S,14S,17R)-10,13-dimethyl-17-[(2R)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthrene-3,16-diol Chemical class C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC(O)[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 IXRAQYMAEVFORF-UTLNTRLCSA-N 0.000 claims description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N (3beta,5alpha)-4,4-Dimethylcholesta-8,24-dien-3-ol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21 CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 claims description 2
- SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine zwitterion Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 0.000 claims description 2
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 claims description 2
- FHQVHHIBKUMWTI-ZCXUNETKSA-N 1-palmitoyl-2-oleoyl phosphatidylethanolamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC FHQVHHIBKUMWTI-ZCXUNETKSA-N 0.000 claims description 2
- XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 14alpha-methylzymosterol Natural products CC12CCC(O)CC1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 24xi-n-propylcholesterol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CCC)C(C)C)C1(C)CC2 KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-lanostan Natural products C1CC2C(C)(C)C(O)CCC2(C)C2C1C1(C)CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SQRDXGHYNZDIBW-UHFFFAOYSA-N CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCNC(C)=O Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCNC(C)=O SQRDXGHYNZDIBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 claims description 2
- LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N Citrostadienol Natural products CC=C(CC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC[C@H]4[C@H](C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)C(C)C LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N 0.000 claims description 2
- ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N Dehydro-beta-sitosterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N Dehydrocholesterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 claims description 2
- BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N Gluanol Natural products CC(C)CC=CC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(O)C(C)(C)C4CC3 BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010007979 Glycocholic Acid Proteins 0.000 claims description 2
- LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N Lanosterol Natural products CC(CCC=C(C)C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N Lithocholsaeure Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N Na salt-Glycocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N Nerifoliol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LGJMUZUPVCAVPU-JFBKYFIKSA-N Sitostanol Natural products O[C@@H]1C[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@@H]([C@H]4[C@@](C)([C@@H]([C@@H](CC[C@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC2)CC1 LGJMUZUPVCAVPU-JFBKYFIKSA-N 0.000 claims description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N Taurocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N beta-Sistosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CC=C4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UCTLRSWJYQTBFZ-DDPQNLDTSA-N cholesta-5,7-dien-3beta-ol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 UCTLRSWJYQTBFZ-DDPQNLDTSA-N 0.000 claims description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 claims description 2
- QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N dihydrolanosterol Natural products CC(C)CCCC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 claims description 2
- 150000002137 ergosterols Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 claims description 2
- 150000002233 fucosterols Chemical class 0.000 claims description 2
- 229940083124 ganglion-blocking antiadrenergic secondary and tertiary amines Drugs 0.000 claims description 2
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N glycocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 claims description 2
- 229940099347 glycocholic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N lanosterol Chemical compound C([C@]12C)C[C@@H](O)C(C)(C)[C@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@H]([C@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@@]21C CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N 0.000 claims description 2
- 229940058690 lanosterol Drugs 0.000 claims description 2
- SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N lithocholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 2
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims description 2
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 claims description 2
- 235000015500 sitosterol Nutrition 0.000 claims description 2
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 claims description 2
- NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N sitosterol Natural products CC=C(/CCC(C)C1CC2C3=CCC4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1)C(C)C NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940083492 sitosterols Drugs 0.000 claims description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 2
- LGJMUZUPVCAVPU-HRJGVYIJSA-N stigmastanol Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 LGJMUZUPVCAVPU-HRJGVYIJSA-N 0.000 claims description 2
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 claims description 2
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 claims description 2
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N taurocholic acid Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2O)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@H](O)C1 WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N 0.000 claims description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 claims 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 abstract description 5
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 abstract description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 abstract description 3
- 230000005588 protonation Effects 0.000 abstract description 3
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 abstract description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 abstract description 2
- 229940117013 triethanolamine oleate Drugs 0.000 description 18
- 229960004418 trolamine Drugs 0.000 description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 13
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 238000001425 electrospray ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 8
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 5
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 5
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 5
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 5
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 4
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 4
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 4
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- ICLYJLBTOGPLMC-KVVVOXFISA-N (z)-octadec-9-enoate;tris(2-hydroxyethyl)azanium Chemical class OCCN(CCO)CCO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ICLYJLBTOGPLMC-KVVVOXFISA-N 0.000 description 3
- MLQBTMWHIOYKKC-KTKRTIGZSA-N (z)-octadec-9-enoyl chloride Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(Cl)=O MLQBTMWHIOYKKC-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 3
- VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)-N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C(=O)NCCC(N1CC2=C(CC1)NN=N2)=O VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 3
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 2
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 2
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 2
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 2
- JMOLZNNXZPAGBH-UHFFFAOYSA-N hexyldecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(C(O)=O)CCCCCC JMOLZNNXZPAGBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 108700021021 mRNA Vaccine Proteins 0.000 description 2
- 229940126582 mRNA vaccine Drugs 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000001280 n-hexyl group Chemical group C(CCCCC)* 0.000 description 2
- 125000000740 n-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 125000004973 1-butenyl group Chemical group C(=CCC)* 0.000 description 1
- 125000004972 1-butynyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C#C* 0.000 description 1
- 125000006039 1-hexenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006021 1-methyl-2-propenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006018 1-methyl-ethenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006023 1-pentenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006017 1-propenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000530 1-propynyl group Chemical group [H]C([H])([H])C#C* 0.000 description 1
- ASJSXUWOFZATJM-UHFFFAOYSA-N 2-(3,5-diphenyl-1h-tetrazol-2-yl)-4,5-dimethyl-1,3-thiazole Chemical compound S1C(C)=C(C)N=C1N1N(C=2C=CC=CC=2)NC(C=2C=CC=CC=2)=N1 ASJSXUWOFZATJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VVKHVWUCJZPGJH-UHFFFAOYSA-N 2-(azepan-1-yl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCCCCC1 VVKHVWUCJZPGJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FKJVYOFPTRGCSP-UHFFFAOYSA-N 2-[3-aminopropyl(2-hydroxyethyl)amino]ethanol Chemical compound NCCCN(CCO)CCO FKJVYOFPTRGCSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004974 2-butenyl group Chemical group C(C=CC)* 0.000 description 1
- 125000006020 2-methyl-1-propenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006022 2-methyl-2-propenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001494 2-propynyl group Chemical group [H]C#CC([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004975 3-butenyl group Chemical group C(CC=C)* 0.000 description 1
- 125000000474 3-butynyl group Chemical group [H]C#CC([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XGWFJBFNAQHLEF-UHFFFAOYSA-N 9-anthroic acid Chemical compound C1=CC=C2C(C(=O)O)=C(C=CC=C3)C3=CC2=C1 XGWFJBFNAQHLEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010027654 Allergic conditions Diseases 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 208000009137 Behcet syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010004485 Berylliosis Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000023355 Chronic beryllium disease Diseases 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010012310 Dengue fever Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 208000003807 Graves Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000020875 Idiopathic pulmonary arterial hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 201000011152 Pemphigus Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010037549 Purpura Diseases 0.000 description 1
- 241001672981 Purpura Species 0.000 description 1
- 241000238711 Pyroglyphidae Species 0.000 description 1
- 208000035977 Rare disease Diseases 0.000 description 1
- 208000034063 Rare infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037323 Rare tumor Diseases 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000005074 Retroviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical group [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010001 Silicosis Diseases 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 208000001455 Zika Virus Infection Diseases 0.000 description 1
- 208000035332 Zika virus disease Diseases 0.000 description 1
- 208000020329 Zika virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 208000024340 acute graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- IYABWNGZIDDRAK-UHFFFAOYSA-N allene Chemical group C=C=C IYABWNGZIDDRAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 229960004784 allergens Drugs 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 150000003976 azacycloalkanes Chemical class 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 208000002352 blister Diseases 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 1
- 239000012069 chiral reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000017760 chronic graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 208000025729 dengue disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 238000007306 functionalization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229950004531 hexyldecanoic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940046533 house dust mites Drugs 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 125000005462 imide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 125000001971 neopentyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001976 pemphigus vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 125000003538 pentan-3-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003386 piperidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 1
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 201000003651 pulmonary sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Abstract
本发明公开了一种可用于递送mRNA的脂质分子、脂质体及其制备方法与应用。该脂质分子的结构式如式I所示，式中各基团定义详见说明书。本发明提供的可离子化脂质分子可通过改变阳离子基团以及疏水链段的种类和数量对其质子化能力和疏水性进行极大范围的调控，能够充分满足mRNA递送的需要。本发明通过可离子化脂质分子在酸性条件下发生质子化，增强与mRNA之间的静电相互作用，从而实现对mRNA的高效地稳定地包载，用于递送mRNA以实现治疗。另外，本发明是在三乙醇胺的骨架上修饰一个或多个脂肪基链，且可对剩下的羟基进行修饰，引入一个或二个可离子化位点，实现其对RNA负载和递送的功能。
Description
技术领域
本公开属于医药生物领域，具体涉及可用于递送mRNA的脂质分子、脂质体及其制备方法与应用。
背景技术
在新冠病毒快速变异的大流行背景下，灵活的设计、标准化的生产流程和相对较短的细胞质存在时间使mRNA疫苗非常有优势。mRNA疗法的原理是将含有编码抗原蛋白的mRNA导入人体，直接进行翻译，形成相应的抗原蛋白，从而诱导机体产生特异性免疫应答,达到预防免疫的作用。mRNA疫苗的一个普遍优势是它们的开发相对较快。在鉴定保护性蛋白抗原并对相应基因进行测序后，可在数周内制备mRNA，且其安全性高，与蛋白质和病毒系统相比，mRNA的制造是无细胞的，速度更快，而且蛋白质产物具有天然的糖基化和构象特性。与寡核苷酸和大多数小分子药物靶点相比，介导刺激和抑制作用模式的能力，以及表达或替代缺陷蛋白的能力，扩大了其潜在适应症的使用范围。与传统基因疗法相比，mRNA的表达由于无插入基因组的风险而较为安全，更重要的是，mRNA药物不局限于分裂细胞，没有整合宿主基因组的风险，且会在体内自动降解。目前mRNA疗法凭借其高效、安全、丰富的治疗特点已广泛应用于罕见病、肿瘤、感染性疾病等多种疾病的治疗。
mRNA目前面临的挑战是其固有的免疫原性、对酶降解的易感性和几乎可忽略不计的细胞对裸mRNA的摄取水平。利用合适的mRNA递送载体可实现对mRNA的高效包载，并在体内实现良好的表达效果。目前常用的几种mRNA递送载体主要包括聚合物材料和脂质纳米粒(lipid nanoparticles，LNPs)。早期人们采用聚合物材料来进行核酸的递送，如聚乙烯亚胺(PEI)、聚氨基酯(PBAE)等，但因为其毒性和难以降解而应用受限。LNPs中的可离子化脂质分子以静电相互作用的方式将有效成分mRNA进行包裹，保护其在递送过程中不被降解。PEG分子的修饰可有效避免LNPs被肾脏、巨噬细胞清除。胆固醇的加入增强LNPs膜的稳定性与融合性，促进mRNA胞内摄入和胞质进入。mRNA的释放和蛋白表达过程，严重依赖于LNPs颗粒大小和细胞类型。在制备样品时，可通过调节微流控设备的流速及流速比等参数有效控制颗粒直径，加速蛋白表达。然而，目前的脂质体配方多为国外公司所拥有，国内相关研究较为薄弱，导致我国企业在许多药物的研发上被“卡脖子”。
因此，开发合适的且具有自主知识产权的mRNA递送载体具有重要意义。
发明内容
本发明的主要目的是在于提供一种用于递送mRNA的基于三乙醇胺为骨架的双位点可离子化脂质分子，以实现对核酸药物的高效装载和保护，通过对三乙醇胺的三个位点进行功能化，修饰上疏水链段或者胺类分子，实现对mRNA的高效地稳定地包载，细胞内吞后在胞内更快地释放mRNA并表达出目标蛋白。
第一方面，本发明提供一种式(I)所示的脂质分子：
以及在合成该脂质分子的过程中所获得的衍生脂质分子(中间体)：
其中，A1选自胺类结构，所述胺类结构包括伯胺、仲胺和叔胺。
B1、B2和B3分别与氧原子各自独立地形成醚键、酯基、碳酸酯基、氨基甲酸酯基等连接基团；
R1、R2、R3各自独立地选自C1-20脂肪烃基或者氢(至多一个)。
B1、B2和B3可以是相同的，或者不同的。
在一实施方式中，R1和R2各自独立地选自C1-20脂肪烃基或者氢(至多一个)。
B1、B2和B3分别与氧原子各自独立地形成酯基、碳酸酯基、氨基甲酸酯基中任一种二价连接基、任两种二价连接基的组合；
A1-B3-O结构为如以下任一通式所示：
通式中
其中n＝1-20，如1、2、3、5、8、10、15、20等。
本发明在三乙醇胺分子骨架上进行脂肪烃基修饰和胺类修饰，实现脂质分子多功能化。三乙醇胺具有三个羟基，可通过反应引入不同数量和种类的脂肪烃基以及胺类分子，赋予可离子化脂质分子丰富的疏水性和质子化能力。通过引入脂肪烃基，其疏水性有利于实现可离子化脂质分子的自组装；通过引入胺类分子，其中的氮原子可在酸性条件下发生质子化，其正电性能增强与负电性mRNA之间的静电相互作用，从而实现对mRNA的高效地稳定地包载，用于递送mRNA以实现治疗。
对于上述R1，R2，其可为分支或未分支、环状或非环状的、饱和或者不饱和的C1-20的烷基。
优选地，R1，R2为分支或未分支、环状或非环状的、饱和或者不饱和的C10-20的烷基。
最优选地，R1，R2为分支或未分支、环状或非环状的、饱和或者不饱和的C12-18的烷基。
进一步优选地，R1，R2为分支或未分支、环状或非环状的、不饱和的C12-18的烷基。
更优选地，R1，R2为分支或未分支、非环状的、不饱和的C12-18的烷基。
对于A1-B3-O结构，n＝1-20；优选地，n＝1-5；更优选地，n＝1-3。
对于A1-B3-O结构，其中氮杂环烷烃基的结构A1：
优选地，氮杂环烷烃基为四氢吡咯基、哌啶基、环己亚胺基和氮杂环辛烷基。
更优选地，氮杂环烷烃基为环己亚胺基、氮杂环辛烷基。
最优选地，氮杂环烷烃基为氮杂环辛烷基。
根据本发明的实施例，所述式(I)所示的脂质分子为式(Y1)及(Y2)所示脂质分子：
第二方面，本发明提供了一种上述式(I)所示的脂质分子的制备方法。
本发明所提供的式(I)所示的脂质分子，当B(B1、B2和/或B3)与氧原子形成酯键时的制备方法，包括下述步骤：
(A1)：首先通过脂肪酸与二氯亚砜在碱1的作用下在溶剂1中以一定温度反应一定时间，得到脂肪酰氯；本步骤中所述脂肪酸与式I中的R1，R2相对应；R3选自C1-20脂肪烃基或者氢(至多一个)；
(A2)：将步骤(A1)中所获得的脂肪酰氯与三乙醇胺在碱2的作用下在溶剂2中以一定温度反应一定时间，得到具有不同疏水链段的脂质分子。
通过控制投料比例，可获得取代数量不同的三乙醇胺脂质分子；
通过控制投料比例和反应顺序，可获得取代基不同的脂质分子。如先获得R1取代的三乙醇胺衍生物，再逐步获得R1，R2取代以及R1，R2，R3取代的三乙醇胺脂质分子。
本发明所提供的式(I)所示的脂质分子，当B(B1、B2和/或B3)与氧原子形成醚键时的制备方法，包括下述步骤(以下反应方程仅用于方法示意，不限于以下结构，可通过调节投料比例和顺序得到不同取代基种类和不同取代基数量的脂质分子)：
(A3)：将三乙醇胺在氢化钠的作用下在溶剂1中以一定温度反应一定时间，再加入对应的卤代脂肪烃(X-R1，X代表卤素，如溴代烃)反应一定时间，得到以醚键作为连接基团的脂质分子。本方法是采用氢化钠合成醚的方法，同类型的反应不再列举；
本发明所提供的式(I)所示的脂质分子，当B(B1、B2和/或B3)与氧原子形成碳酸酯或氨基甲酸酯时的制备方法，包括下述步骤(以下反应方程仅用于方法示意，不限于以下结构，可通过调节投料比例和顺序得到不同取代基种类和不同取代基数量的脂质分子)：
(A4)：将三乙醇胺与N,N'-羰基二咪唑或者对硝基苯基氯甲酸酯混合，在溶剂3中反应一段时间，得到羟基被活化的三乙醇胺衍生物；
(A5)：将步骤(A4)得到的羟基被活化的三乙醇胺衍生物与含有氨基的脂肪烃(R1-NH2)反应一定时间，可以得到对应的连接基团为氨基甲酸酯的脂质分子；
或，将步骤(A4)得到的羟基被活化的三乙醇胺衍生物与含有羟基的脂肪烃(R1-OH)在碱性环境下加热反应一定时间，可以得到对应的连接基团为碳酸酯的脂质分子。
(A6)对于步骤(A2)中所得到的双取代(R1,R2相同或不同)的三乙醇胺衍生物，在催化剂或活化试剂(活化试剂参考步骤(A4)和(A5))以及碱3的作用下，与胺类化合物在溶剂3中反应一段时间，将羟基转化为含有胺类基团的结构。
可以理解地，步骤(A1)为使用二氯亚砜与不同脂肪酸反应得到对应的酰氯，该反应是普适的，其反应活性及反应过程几乎不受脂肪烃基的影响，反应均可高效进行；
步骤(A2)为步骤(A1)得到的脂肪酰氯与三乙醇胺的反应，其发生在酰氯与羟基之间，同样几乎不受脂肪烃基的种类影响，可高效获得对应的三乙醇胺酯。
步骤(A6)为三乙醇胺酯上的羟基在催化剂的作用下，或通过活化试剂进行活化后，与含有反应位点的胺类化合物反应，反应几乎不受其他基团影响，可高效获得对应的可离子化脂质分子。
上述制备方法具有普适性，适合于不同的脂肪烃链(包括饱和脂肪烃链或者不饱和脂肪烃链)，可以得到不同疏水性的脂肪酸三乙醇胺酯和可离子化脂质分子。
在一实施方式中，步骤(A1)所述包括如R1定义的基团的脂肪酸和如R2定义的基团的脂肪酸独立地选自上述对应的可选结构。
本发明所述溶剂1、溶剂2、溶剂3均独立地选自二氯甲烷、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或四氢呋喃；
碱1、碱2、碱3均独立地选自吡啶、N，N-二甲基甲酰胺、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、二乙胺、异丙胺、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠或氢氧化钾。
上述方法，步骤(A1)的反应温度为25-120℃，反应时间为1-24h；步骤(A2)的反应温度为0-100℃，反应时间为1-24h；步骤(A3)的反应温度为0-100℃，反应时间为1-24h。
在一实施方式中，溶剂1选自二氯甲烷、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或四氢呋喃；优选地，选自二氯甲烷、甲苯或N，N-二甲基甲酰胺；更优选地，选自二氯甲烷或甲苯。
在一实施方式中，碱1选自吡啶、N，N-二甲基甲酰胺、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、二乙胺、异丙胺、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠或氢氧化钾；优选地，选自吡啶、N，N-二甲基甲酰胺、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、二乙胺或异丙胺；更优选地，选自吡啶，N，N-二甲基甲酰胺、三乙胺或异丙胺。
在一实施方式中，步骤(A1)的反应温度为25-120℃；优选地，为25-80℃；更优选地，为25-60℃。
在一实施方式中，步骤(A1)的反应时间为1-24h；优选地，为2-12h；更优选地，为4-6h。
在一实施方式中，溶剂2选自二氯甲烷、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或四氢呋喃；优选地，选自二氯甲烷、四氢呋喃或N，N-二甲基甲酰胺；更优选地，选自二氯甲烷或N，N-二甲基甲酰胺。
在一实施方式中，碱2选自吡啶、N，N-二甲基甲酰胺、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、二乙胺、异丙胺、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠或氢氧化钾；优选地，选自吡啶、N，N-二甲基甲酰胺、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、二乙胺或异丙胺；更优选地，选自吡啶、N，N-二甲基甲酰胺、三乙胺或异丙胺。
在一实施方式中，步骤(A2)中的反应温度为0-100℃；优选地，为25-80℃；更优选地，为25-60℃。
在一实施方式中，步骤(A2)的反应时间为1-48h；优选地，为6-24h；更优选地，为6-12h。
在一实施方式中，溶剂3选自二氯甲烷、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或四氢呋喃；优选地，选自二氯甲烷、四氢呋喃或N，N-二甲基甲酰胺；更优选地，选自二氯甲烷或N，N-二甲基甲酰胺。
在一实施方式中，步骤(A6)中催化剂1选自二环己基碳二亚胺(DCC)、二异丙基碳二亚胺(DIC)和1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDCI)、碳鎓六氟磷酸盐(HATU)、N'N-羰基二咪唑(CDI)、对硝基苯基氯甲酸酯、三乙胺、二甲氨基吡啶中的一种或两种；
优选地，选自二环己基碳二亚胺(DCC)、和1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDCI)、碳鎓六氟磷酸盐(HATU)、N'N-羰基二咪唑(CDI)、对硝基苯基氯甲酸酯、三乙胺、二甲氨基吡啶中的一种或两种；
更优选地，选自1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDCI)、N'N-羰基二咪唑(CDI)、对硝基苯基氯甲酸酯、三乙胺、二甲氨基吡啶中的一种或两种。
在一实施方式中，步骤(A6)中的反应温度为0-100℃；优选地，为25-80℃；更优选地，为25-60℃。
在一实施方式中，步骤(A6)的反应时间为1-24h；优选地，为6-24h；更优选地，为6-12h。
本发明的第二目的是要求保护一种含有上述可离子化脂质分子的脂质体。
本发明所提供的脂质体，其原料以质量百分含量计，包含10％-70％式(I)所示的可离子化脂质分子、1％-20％聚乙二醇脂质分子、5％-50％甾族脂质以及1％-30％辅助脂质分子。
本发明的第三目的是要求保护一种包载核酸药物的脂质纳米粒(LNPs)。
所述包载核酸药物的脂质纳米粒(LNPs)，包括本发明上述的含有可离子化脂质分子的脂质体和核酸药物。
所述核酸药物包括但不限于mRNA、siRNA、microRNA，反义核酸等。
在本发明的具体实施方式中，所述核酸药物可为mRNA，包括不同序列、不同长度的RNA，具体为EGFP mRNA。
本发明的第四目的是要求保护上述包载核酸药物的脂质纳米粒(LNPs)的制备方法。
本发明所述包载核酸药物的脂质纳米粒的制备方法，具体包括下述步骤：
(B1)将所述可离子化脂质分子、辅助脂质分子，聚乙二醇脂质及甾族脂质按比例混合，用溶剂溶解，得到有机相脂质体溶液；
(B2)将核酸药物用适当pH的缓冲溶液溶解，得到水相核酸药物溶液；
(B3)将所述有机相脂质体溶液与所述水相核酸药物溶液按照一定的质量比和体积比，用微流控设备均匀混合，制备出包载核酸药物的脂质纳米粒。
所述方法还包括：对步骤(B3)得到的包载核酸药物的脂质纳米粒进行超滤或透析，得到可用于生物实验的包载核酸药物的脂质纳米粒。
优选地，步骤(B1)中用于溶解脂质分子的溶剂为甲醇、乙醇、四氢呋喃、丙酮、二甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺。更优选地，步骤(B1)中用于溶解脂质分子的溶剂为乙醇、四氢呋喃、丙酮。最优选地，步骤(B1)中用于溶解脂质分子的溶剂为乙醇。
优选地，步骤(B1)中可离子化脂质分子的比例为10％-70％。更优选地，步骤(B1)中可离子化脂质分子的比例为30％-60％。最优选地，步骤(B1)中可离子化脂质分子的比例为50％。
优选地，步骤(B1)中聚乙二醇脂质的比例为1％-20％。更优选地，步骤(B1)中聚乙二醇脂质体的比例为1％-10％。最优选地，步骤(B1)中聚乙二醇脂质体的比例为2％。
优选地，步骤(B1)中甾族脂质的比例为5％-60％。更优选地，步骤(B1)中胆固醇的比例为10％-50％。最优选地，步骤(B1)中胆固醇的比例为40％。
优选地，步骤(B1)中辅助脂质分子的比例为1％-30％。更优选地，步骤(B1)中DSPC的比例为5％-15％。最优选地，步骤(B1)中辅助脂质分子的比例为8％。
优选地，步骤(B2)中缓冲溶液为醋酸/醋酸钠溶液或柠檬酸/柠檬酸钠溶液；最优选地，步骤(B2)中缓冲溶液为柠檬酸/柠檬酸钠溶液。
优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的pH为3-9；更优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的pH为4-6；最优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的pH为5。
优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的浓度为1mM-1M；更优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的浓度为20mM-500mM；最优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的浓度为100mM。
优选地，步骤(B3)中脂质分子与核酸药物的质量比为5:1-50:1；更优选地，步骤(B3)中脂质分子与核酸药物的质量比为10:1-30:1。
所述核酸药物为mRNA，优选的，所述脂质分子与mRNA为的质量比为25:1。
优选地，步骤(B3)中有机相脂质体溶液与水相核酸药物溶液的体积比为1:1-1:10。更优选地，步骤(B3)中有机相脂质体溶液与水相核酸药物溶液的体积比为1:1-1:5。最优选地，步骤(B3)中有机相脂质体溶液与水相核酸药物溶液的体积比为1:3。
本发明中，所述辅助脂质分子选自：1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DPPE)、1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DMPE)、2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)(DOPG)、油酰磷脂酰胆碱(POPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基磷脂酰乙醇胺(POPE)。
本发明中，所述聚乙二醇脂质选自下述至少一种：2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-二十四烷基乙酰胺(ALC-0159)、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油甲氧基聚乙二醇(PEG-DMG)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[氨基(聚乙二醇)](PEG-DSPE)、PEG-二甾醇基甘油(PEG-DSG)、PEG-二棕榈油基、PEG-二油基、PEG-二硬脂基、PEG-二酰基甘油酰胺(PEG-DAG)、PEG-二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(PEG-DPPE)或PEG-1,2-二肉豆蔻酰基氧基丙基-3-胺(PEG-c-DMA)。
本发明中，所述甾族脂质选自下述至少一种：燕麦甾醇、β-谷甾醇、菜子甾醇、麦角骨化醇、菜油甾醇、胆甾烷醇、胆固醇、粪甾醇、脱氢胆固醇、链甾醇、二氢麦角骨化醇、二氢胆固醇、二氢麦角甾醇、黑海甾醇、表胆甾醇、麦角甾醇、岩藻甾醇、六氢光甾醇、羟基胆固醇；羊毛甾醇、光甾醇、海藻甾醇、谷甾烷醇、谷甾醇、豆甾烷醇、豆甾醇、胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、脱氧胆酸和石胆酸。
本发明的第五目的是保护上述可质子化的脂质分子、含有上述可离子化脂质分子的脂质体在制备药物递送系统中的应用。
所述药物为核酸药物，包括但不限于mRNA、siRNA、microRNA，反义核酸等。
本发明还保护上述可质子化的脂质分子、含有上述可离子化脂质分子的脂质体用于RNA递送的方法及其应用。
其中，RNA种类包括但不限于mRNA、siRNA、microRNA，反义核酸等，具体应用包括但不限于诊断性应用和治疗性应用。
本发明的可离子化脂质分子可通过改变阳离子基团以及疏水链段的种类和数量对其质子化能力和疏水性进行极大范围的调控，能够充分满足mRNA递送的需要。
本发明通过可离子化脂质分子在酸性条件下发生质子化，增强与mRNA之间的静电相互作用，从而实现对mRNA的高效地稳定地包载，用于递送mRNA以实现治疗。另外，本发明是在三乙醇胺的骨架上修饰一个或多个脂肪基链，且可对剩下的羟基进行修饰，引入一个或二个可离子化位点，实现其对RNA负载和递送的功能。
现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1、与mRNA结合紧密，能够实现对mRNA的高包载率和稳定保护。
2、形成的LNPs生物相容性好，更加稳定。
3、具有二个可质子化位点，与mRNA结合作用更强，制备LNPs中可以减少载体的用量，降低潜在的副作用。
4、该脂质体适合于不同核酸分子量长度，不同核酸序列的mRNA递送，具有普适性。
5、通过对三乙醇胺的三个位点进行修饰可以实现分子多功能化，增强与mRNA的结合效果，实现高效包载递送。
6、本发明技术合成简单，原料价格低廉，适合大规模生产。
附图说明
图1示出了实施例1制备的单取代油酸三乙醇胺酯的结构式。
图2示出了实施例1制备的单取代油酸三乙醇胺酯的分子的1H NMR谱图。
图3示出了实施例1制备的单取代油酸三乙醇胺酯的分子的13C NMR谱图。
图4示出单取代油酸三乙醇胺酯的分子的ESI-TOF MS谱图。
图5示出了实施例1制备的双取代油酸三乙醇胺酯的结构式。
图6示出了实施例1制备的双取代油酸三乙醇胺酯的分子的1H NMR谱图。
图7示出了实施例1制备的双取代油酸三乙醇胺酯的分子的13C NMR谱图。
图8示出了实施例1制备的双取代油酸三乙醇胺酯的分子的ESI-TOF MS谱图。
图9示出了实施例1制备的三取代油酸三乙醇胺酯的结构式。
图10示出了实施例1制备的三取代油酸三乙醇胺酯的分子的1H NMR谱图。
图11示出了实施例1制备的三取代油酸三乙醇胺酯的分子的13C NMR谱图。
图12示出了实施例1制备的三取代油酸三乙醇胺酯的分子的ESI-TOF MS谱图。
图13示出了实施例2制备的可离子化脂质分子Y1的结构式。
图14示出了实施例2制备的可离子化脂质分子Y1的1H NMR谱图。
图15示出了实施例2制备的可离子化脂质分子Y1的13C NMR谱图。
图16示出了实施例2制备的可离子化脂质分子Y1的ESI-TOF MS谱图。
图17示出了实施例2制备的可离子化脂质分子Y2的结构式。
图18示出了实施例2制备的可离子化脂质分子Y2的1H NMR谱图。
图19示出了实施例4制备的LNPs@mRNA的粒径分布，其中，a为Y1为基础制备的LNPs@mRNA的粒径分布，b为Y2为基础制备的LNPs@mRNA的粒径分布。
图20示出了实施例4制备的LNPs@mRNA的TEM照片。其中，a是以Y1为基础制备的LNPs@mRNA的TEM照片，b是以Y2为基础制备的LNPs@mRNA的TEM照片。
图21示出了实施例5中LNPs@mRNA的细胞内表达实验结果。其中，a为Y1为基础制备的LNPs@mRNA在细胞内表达实验结果，b为Y2为基础制备的LNPs@mRNA在细胞内表达实验结果。
图22示出了实施例6中可离子化脂质分子Y1和Y2的细胞毒性实验结果，其中，a代表Y1孵育24小时的细胞存活率，b代表Y2孵育24小时的细胞存活率；
图23示出了实施例7中的转染实验结果；其中，a为lipo8000负载mRNA的转染效率，b为Y1为基础制备的LNPs@mRNA的转染效率，c为Y2为基础制备的LNPs@mRNA的转染效率。
图24示出了实施例8中的肝肾功能指标检测结果；其中，a代表正常小鼠的指标，b为小鼠注射Y1为基础制备的LNPs后的指标，c为小鼠注射Y2为基础制备的LNPs后的指标.
图25示出了实施例8中LNPs处理后的小鼠的主要器官H&E染色结果，其中，a为正常小鼠的主要器官H&E染色结果，b为小鼠注射Y1为基础制备的LNPs后主要器官H&E染色结果，c为小鼠注射Y2为基础制备的LNPs后主要器官H&E染色结果。
具体实施方式
I.定义
在本公开中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员所通常理解的含义。并且，本文中所用的相关术语和实验室操作步骤均为相应领域内广泛使用的术语和常规步骤。同时，为了更好地理解本公开，下面提供相关术语的定义和解释。
除非另有其它明确表示，否则在整个说明书和权利要求书中，术语“包括”或其变换如“包含”或“包括有”等等将被理解为包括所陈述的元件或组成部分，而并未排除其它元件或其它组成部分。
本公开化合物可以是不对称的，例如，具有一个或多个立体异构体。除非另有说明，所有立体异构体都包括，如对映异构体和非对映异构体。本公开的含有不对称碳原子的化合物可以以光学活性纯的形式或外消旋形式被分离出来。光学活性纯的形式可以从外消旋混合物拆分，或通过使用手性原料或手性试剂合成。外消旋体、非对映异构体、对映异构体都包括在本公开的范围之内。
在本公开中，
以及
是指取代基键合的位置。
术语“任选”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。
本文中的数字范围，是指给定范围中的各个整数。例如，“C1-C6”是指该基团可具有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子或6个碳原子；“C3-C6”是指该基团可具有3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子或6个碳原子。
术语“疏水性脂肪烃基”是指不含羟基、醛基、羧基、和含氮的氨基等亲水性基团的脂肪烃基。
术语“被取代的”是指特定原子或基团上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，只要特定原子或基团的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为酮基(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
当任何变量(例如Rn)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被1-5个R所取代，则所述基团可以任选地至多被5个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
术语“脂肪烃基”包括饱和或不饱和，直链或支链的链状或环状烃基，不含杂原子的和含有杂原子的脂肪烃基；所述杂原子指的是氮原子、氧原子、氟原子、磷原子、硫原子、和硒原子。所述脂肪烃基的类型可选自烷基、烯基、炔基等。如术语“C1-6脂肪烃基”包括：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-甲基乙烯基、1-丁烯基、1-乙基乙烯基、1-甲基-2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、1-己烯基、乙炔基，1-丙炔基，2-丙炔基，1-丁炔基，1-甲基-2-丙炔基，3-丁炔基，1-戊炔基、1-己炔基、环丙基、环丁基、环戊基和环己基等。
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，包括直链的或支链的饱和烃基，所述烃基具有所示出的碳原子数。如术语“C1-6烷基”包括C1烷基、C2烷基、C3烷基、C4烷基、C5烷基、C6烷基，实例包括，但不限于，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、2-戊基、3-戊基、正己基、2-己基、3-己基等。其可以是二价的，例如亚甲基、亚乙基。
术语“取代的”或“取代”是指特定原子或基团上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，只要特定原子或基团的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为酮基(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。取代基可以选自以下的一个、两个或更多个取代基取代：氘、卤素基团、氰基、硝基、-C(＝O)R、-C(＝O)OR’、-OC(＝O)R”、酰亚胺基、酰胺基、羟基、经取代或未经取代的胺基、经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的环烷基、经取代或未经取代的卤代烷基、经取代或未经取代的烷氧基、经取代或未经取代的烯基、经取代或未经取代的炔基、经取代或未经取代的芳基、经取代或未经取代的芳氧基、经取代或未经取代的杂芳基等，但不限于此。
术语“药物组合物”意指包含本公开所述化合物或其药学上可接受的盐，以及依施用方式和剂型的性质而定的至少一种选自以下药学上可接受的成分的组合物，包括但不限于：载体、稀释剂、佐剂、赋形剂、防腐剂、填充剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、悬浮剂、甜味剂、矫味剂、香味剂、抗菌剂、抗真菌剂、润滑剂、分散剂、温敏材料、温度调节剂、黏附剂、稳定剂、助悬剂等。
本公开的药物或药物组合物可以经肠胃外递送，即，通过静脉内(i.v.)、脑室内(i.c.v.)、皮下(s.c.)、腹膜内(i.p.)、肌内(i.m.)、皮下(s.d.)或皮内(i.d.)施用，通过直接注射，经例如快速浓注或连续输液。用于注射的配制剂可以单位剂型呈现，例如在具有添加的保藏剂的安瓿瓶或多-剂量容器中。所述组合物可以采用赋形剂(excipient)的形状，在油或水性载体中的混悬液、溶液或乳液的形式，并可以包含配制试剂如防沉降剂、稳定剂和/或分散剂。备选地，所述活性成分可以以粉末形式在使用前用适宜的载体(例如无菌无热原水)重构。
术语“炎性疾病”包括所述自身免疫、过敏性病症和炎性病症，例如选自关节炎，强直性脊柱炎，炎性肠病，溃疡性结肠炎，胃炎，胰腺炎，克罗恩氏病，乳糜泻，多发性硬化，全身性红斑狼疮，类风湿性关节炎，风湿热，痛风，器官或移植排斥，急性或慢性移植物抗宿主病，慢性同种异体移植物排斥，贝切特氏病，葡萄膜炎，牛皮癣，皮炎，特异性皮炎，皮肌炎，重症肌无力，格雷夫氏病，桥本甲状腺炎，斯耶格伦综合征，和起泡病症(例如寻常天疱疮)，抗体介导的脉管炎综合征，包括ANCA-相关的血管炎，紫癜，和免疫复合血管炎(癌症或感染一期或二期)。所述过敏性病症可尤其选自接触性皮炎，乳糜泻，哮喘，对屋尘螨的超敏性，花粉和相关的过敏原，铍中毒。所述呼吸病症可尤其选自哮喘，支气管炎，慢性阻塞性肺病(COPD)，囊性纤维化，肺水肿，肺栓塞，肺炎，肺肉瘤病，硅肺病，肺纤维化，呼吸衰竭，急性呼吸窘迫综合征，原发性肺动脉高压和肺气肿等。
术语“病毒感染”包括但不限于逆转录病毒感染、肝炎病毒感染、COVID-19新冠病毒感染，寨卡病毒感染，登革病毒感染等。
II.具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体描述，本实施例只用于对本发明作进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术人员根据上述发明的内容做出的一些非本质的改进和调整，均属本发明保护范围。
实施例1：油酸三乙醇胺酯可离子化脂质分子的制备
将油酸溶在甲苯中与二氯亚砜在60℃反应6h，随后真空除去溶剂和二氯亚砜，得到油酰氯。将油酰氯和三乙醇胺溶解在二氯甲烷中，加入三乙胺，过夜反应。得到的反应液经洗涤、干燥和浓缩后用色谱柱分离纯化。通过控制油酰氯与三乙醇胺的比例，该步骤所得产物包括：
单取代油酸三乙醇胺酯(图1)。相关表征包括1H NMR(图2，测试条件：CDCl3,400M,298.15K)、13C NMR(图3，测试条件：CDCl3,400M,298.15K)以及ESI-TOF MS(图4)，其[M+H]+理论值为m/z＝414.3578，测得m/z＝414.3564。
双取代油酸三乙醇胺酯(图5)。相关表征包括1H NMR(图6，测试条件：CDCl3,400M,298.15K)、13C NMR(图7，测试条件：CDCl3,400M,298.15K)以及ESI-TOF MS(图8)，其[M+H]+理论值为m/z＝678.6031，测得m/z＝678.6013。
三取代油酸三乙醇胺酯(图9)。相关表征包括1H NMR(图10，测试条件：CDCl3,400M,298.15K)、13C NMR(图11，测试条件：CDCl3,400M,298.15K)以及ESI-TOF MS(图12)，其[M+H]+理论值为m/z＝942.8484，测得m/z＝942.8468。
实施例2：含胺基结构的可离子化脂质分子(Y1)的制备
将双取代油酸三乙醇胺酯和2-(氮杂环庚烷-1-基)乙酸溶解于二氯甲烷中，加入(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDCI)和二甲氨基吡啶过夜反应。得到的反应液经洗涤、干燥和浓缩后用色谱柱分离纯化，所得产物为可离子化脂质分子Y1(图13)。相关表征包括1H NMR(图14，测试条件：CDCl3,400M,298.15K)、13C NMR(图15，测试条件：CDCl3,400M,298.15K)，以及ESI-TOF MS(图16)，其[M+H]+理论值为m/z＝817.7028，测得m/z＝817.7004。
实施例3：含胺基和羟基结构的可离子化脂质分子(Y2)的制备
将2-己基癸酸溶在甲苯中与二氯亚砜在60℃反应6h，随后真空除去溶剂和二氯亚砜，得到酰氯。将实施例1中所得产物单取代油酸三乙醇胺酯和酰氯溶解在二氯甲烷中，加入三乙胺，过夜反应。得到的反应液经过滤、洗涤、干燥和浓缩后用色谱柱分离纯化，得到油酸和2-己基癸酸取代的三乙醇胺酯。将双取代的中间产物和N,N'-羰基二咪唑(4倍量)在DCM里常温反应3h，反应结束后水洗3三遍，干燥后加入N-(3-氨基丙基)二乙醇胺(2倍量)，在二氯甲烷里过夜反应，得到的反应液经洗涤、干燥和浓缩后用色谱柱分离纯化，所得产物为可离子化脂质分子Y2(图17)。进行1H NMR表征(图18，测试条件：CDCl3,400M,298.15K)。
实施例4:包载mRNA的LNPs的制备
将Y1或Y2、DSPE-PEG2000、胆固醇以及DSPC按照质量比50％:2％:40％:8％的质量比混合，溶解在乙醇溶液中。mRNA为EGFP mRNA(SEQ ID No.1)，用pH为5.0的柠檬酸钠(100mM)缓冲溶液溶解。有机相溶液和水相溶液体积比为1:3，所含脂质与mRNA质量按25:1的比例混合，得到白色乳液。随后超滤除去乙醇。得到包载mRNA的LNPs@mRNA。
使用动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)对所获得的的LNPs进行粒径分布表征以及形貌表征。DLS结果显示(图19)，基于可离子化脂质体Y1制备的LNPs@mRNA的水合粒径为63.8nm，基于可离子化脂质体Y2制备的LNPs@mRNA的水合粒径为67.8nm。TEM结果显示(图20)，LNPs@mRNA均呈球形，粒径为40-80nm。
实施例5：LNPs@mRNA的细胞内表达实验
将人胚胎肾细胞(HEK293T)与实施例4制备得到的LNPs@mRNA共孵育24h，之后用DAPI对细胞核染色30分钟，PBS冲洗三次。使用荧光显微镜观察细胞的荧光强度，细胞内绿色荧光信号来自于mRNA表达的EGFP。
结果显示(图21)，超过90％的细胞具有来自EGFP绿色荧光蛋白的荧光，可见超过90％的细胞均成功表达了绿色荧光蛋白，说明以Y1为可离子化脂质体的LNPs@mRNA对细胞进行了高效转染并表达，同时以Y2为可离子化脂质体的LNPs@mRNA也实现了对细胞的高效转染。本发明制备的可离子化脂质体可高效递送编码EGFP的mRNA并实现高效转染。
实施例6：可离子化脂质分子的细胞毒性实验
将HEK293细胞接种在96孔板的DMEM培养基(10％胎牛血清和1％青霉素)中。将细胞在37℃下在含有5％CO2的气氛中孵育。细胞孵育24小时后更换新鲜培养基。加入不同浓度的可离子化脂质分子Y1或Y2(0-200μM，实施例2或实施例3制备)，分别将细胞孵育24和48小时后，用含有0.5mg/mL的3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑(MTT)培养基替换原培养基。继续孵育4小时后，除去含有MTT的培养基，用PBS小心洗涤3次。然后，加入DMSO(100μL)，在BioTek Synergy H4读数器中测量在570nm的波长下吸光度，计算得到24和48h的细胞存活率，验证本发明得到的递送体系的细胞毒性。
由图22可见，孵育24和48h后的细胞存活率均在95％以上，表明可离子化脂质分子Y1和Y2具有较低的细胞毒性，展现出了良好的生物安全性能。
实施例7：LNPs@mRNA的转染实验
根据实施例4中所述方法，制备LNPs@mRNA。使用同等浓度的LNPs@mRNA和lipo8000@mRNA分别对HEK293细胞进行转染。在转染4小时和12小时后，对两种转染方式处理的细胞进行统计，得到不同时间节点的转染比率(图23a)。另外在转染24小时后，用荧光显微镜获得两种转染方式处理的细胞的绿色荧光蛋白的发光强度(图23b)。转染比例和荧光强度的数据均说明，在4小时，12小时和24小时的转染中，本发明的可离子化脂质体均表现出与商品化转染试剂lipo8000相当的转染能力(图23)，说明这类可离子化脂质体具备相当可靠的商业化转化潜力。
实施例8:LNPs@mRNA的生物安全性分析
将BALB/c小鼠分为2组，每组5只，BALB/c小鼠(4-6周龄，雌性，体重约18-20g)，分别经尾静脉注射PBS和LNPs@mRNA(10μg mRNA)，注射5天后取小鼠静脉血，离心取上清液，测定肝肾功能各项指标。对注射5天后的PBS和LNPs@mRNA组的小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏进行H&E染色，观察其是否出现病变。
肝肾功能指标检测结果显示(图24)，Y1或Y2组小鼠的各项肝肾功能均未出现明显变化，其指标均与PBS相当。组织切片实验结果显示(图25)，经LNPs@mRNA处理的小鼠的各主要器官均未出现明显的病变，说明LNPs@mRNA纳米粒子具有良好的生物安全性。
前述对本公开的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本公开限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本公开的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本公开的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择。
Claims (10)
1.式(I)所示的脂质分子：
其中，A1选自胺类结构，所述胺类结构包括伯胺、仲胺和叔胺；
B1、B2和B3分别与氧原子各自独立地形成醚键、酯基、碳酸酯基、氨基甲酸酯基等连接基团；
R1和R2各自独立地选自C1-20脂肪烃基或者氢。
2.根据权利要求1所述的脂质分子，其特征在于：
所述B1、B2和B3分别与氧原子各自独立地形成酯基、碳酸酯基、氨基甲酸酯基中任一种二价连接基、任两种连接基的组合；
优选的，A1-B3-O结构为如以下任一通式所示：
通式中A1选自下述任一所示基团：
其中n＝1-20；
R1，R2为分支或未分支、环状或非环状的、饱和或者不饱和的C10-20的脂肪烃基；
优选地，R1，R2为分支或未分支、非环状的、不饱和的C12-18的脂肪烃基。
3.根据权利要求1或2所述的脂质分子，其特征在于，所述式(I)所示的脂质分子为式(Y1)及(Y2)所示脂质分子：
4.式(II)中任一所示的脂质分子：
式(II)中，R1、R2、R3各自独立地选自C1-20脂肪烃基或者氢(至多一个)。
5.权利要求1中式(I)所示的脂质分子的制备方法，包括下述步骤：
当B1、B2和/或B3与氧原子形成酯键时的式(I)所示的脂质分子制备方法，包括下述步骤：
(A1)：首先通过脂肪酸与二氯亚砜在碱1的作用下在溶剂1中以一定温度反应一定时间，得到脂肪酰氯；本步骤中所述脂肪酸与式I中的R1，R2相对应；R3选自C1-20脂肪烃基或者氢(至多一个)；
(A2)：将步骤(A1)中所获得的脂肪酰氯与三乙醇胺在碱2的作用下在溶剂2中以一定温度反应一定时间，得到具有不同疏水链段的脂质分子；
通过控制投料比例，可获得取代数量不同的三乙醇胺脂质分子；
通过控制投料比例和反应顺序，可获得取代基不同的脂质分子；如先获得R1取代的三乙醇胺衍生物，再逐步获得R1，R2取代和R1，R2，R3取代的三乙醇胺脂质分子；
当B1、B2和/或B3与氧原子形成醚键时的式(I)所示的脂质分子制备方法，包括下述步骤：
(A3)：将三乙醇胺在氢化钠的作用下在溶剂1中以一定温度反应一定时间，再加入对应的卤代脂肪烃反应一定时间，得到以醚键作为连接基团的脂质分子；通过调节投料比例和顺序得到不同取代基种类和不同取代基数量的脂质分子；所述卤代脂肪烃为X-R1，X代表卤素；
当B(B1、B2和/或B3)与氧原子形成碳酸酯或氨基甲酸酯时的式(I)所示的脂质分子制备方法，包括下述步骤：
(A4)：将三乙醇胺与N,N'-羰基二咪唑或者对硝基苯基氯甲酸酯混合，在溶剂3中反应一段时间，得到羟基被活化的三乙醇胺衍生物；
(A5)：将步骤(A4)得到的羟基被活化的三乙醇胺衍生物与含有氨基的脂肪烃(R1-NH2)反应一定时间，可以得到对应的连接基团为氨基甲酸酯的脂质分子；可通过调节投料比例和顺序得到不同取代基种类和不同取代基数量的脂质分子；
或，将步骤(A4)得到的羟基被活化的三乙醇胺衍生物与含有羟基的脂肪烃(R1-OH)在碱性环境下加热反应一定时间，可以得到对应的连接基团为碳酸酯的脂质分子；可通过调节投料比例和顺序得到不同取代基种类和不同取代基数量的脂质分子；
(A6)：对于步骤(A2)中所得到的双取代(R1,R2相同或不同)的三乙醇胺衍生物，在催化剂或活化试剂以及碱3的作用下，与胺类化合物在溶剂3中反应一段时间，将羟基转化为含有胺类基团的结构；活化试剂的使用参考步骤(A4)和(A5)；
其中，R1和R2、B1、B2和B3、A1的定义同式I；
优选的，所述溶剂1、溶剂2、溶剂3独立地选自二氯甲烷、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或四氢呋喃；
所述碱1、碱2、碱3独立地选自吡啶、N，N-二甲基甲酰胺、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、二乙胺、异丙胺、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠或氢氧化钾；
步骤(A1)的反应温度为25-120℃，反应时间为1-24h；步骤(A2)的反应温度为0-100℃，反应时间为1-48h；步骤(A6)的反应温度为0-100℃，反应时间为1-24h。
步骤(A6)中催化剂1选自二环己基碳二亚胺(DCC)、二异丙基碳二亚胺(DIC)和1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDCI)、碳鎓六氟磷酸盐(HATU)、N'N-羰基二咪唑(CDI)、对硝基苯基氯甲酸酯、三乙胺、二甲氨基吡啶中的一种或两种。
6.一种脂质体，其原料以质量百分含量计，包含10％-70％权利要求1-3中任一项所述的脂质分子、1％-20％聚乙二醇脂质分子、5％-50％甾族脂质以及1％-30％辅助脂质分子；
优选的，所述辅助脂质分子选自：1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DPPE)、1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DMPE)、2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)(DOPG)、油酰磷脂酰胆碱(POPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基磷脂酰乙醇胺(POPE)；
所述聚乙二醇脂质选自下述至少一种：2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-二十四烷基乙酰胺(ALC-0159)、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油甲氧基聚乙二醇(PEG-DMG)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[氨基(聚乙二醇)](PEG-DSPE)、PEG-二甾醇基甘油(PEG-DSG)、PEG-二棕榈油基、PEG-二油基、PEG-二硬脂基、PEG-二酰基甘油酰胺(PEG-DAG)、PEG-二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(PEG-DPPE)或PEG-1,2-二肉豆蔻酰基氧基丙基-3-胺(PEG-c-DMA)；
所述甾族脂质选自下述至少一种：燕麦甾醇、β-谷甾醇、菜子甾醇、麦角骨化醇、菜油甾醇、胆甾烷醇、胆固醇、粪甾醇、脱氢胆固醇、链甾醇、二氢麦角骨化醇、二氢胆固醇、二氢麦角甾醇、黑海甾醇、表胆甾醇、麦角甾醇、岩藻甾醇、六氢光甾醇、羟基胆固醇；羊毛甾醇、光甾醇、海藻甾醇、谷甾烷醇、谷甾醇、豆甾烷醇、豆甾醇、胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、脱氧胆酸和石胆酸。
7.一种包载核酸药物的脂质纳米粒，包括权利要求6所述的脂质体和核酸药物；
所述核酸药物包括但不限于mRNA、siRNA、microRNA，反义核酸。
8.权利要求7所述包载核酸药物的脂质纳米粒的制备方法，包括下述步骤：
(B1)将所述可离子化脂质分子、辅助脂质分子，聚乙二醇脂质及甾族脂质按照权利要求6中所述的比例混合，用溶剂溶解，得到有机相脂质体溶液；
(B2)将核酸药物用适当pH的缓冲溶液溶解，得到水相核酸药物溶液；
(B3)将所述有机相脂质体溶液与所述水相核酸药物溶液用微流控设备均匀混合，制备出包载核酸药物的脂质纳米粒。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：
所述步骤(B1)中，用于溶解脂质分子的溶剂为甲醇、乙醇、四氢呋喃、丙酮、二甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺；
所述步骤(B2)中，所述缓冲溶液为醋酸/醋酸钠溶液或柠檬酸/柠檬酸钠溶液；
所述步骤(B2)中，所述缓冲溶液的pH为3-9；更优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的pH为4-6；最优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的pH为5；
所述步骤(B2)中，所述缓冲溶液的浓度为1mM-1M；更优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的浓度为20mM-500mM；最优选地，步骤(B2)中缓冲溶液的浓度为100mM；
所述步骤(B3)中，所述脂质分子与核酸药物的质量比为5:1-50:1；更优选地，步骤(B3)中脂质分子与核酸药物的质量比为10:1-30:1；
所述核酸药物为mRNA，优选地，所述脂质分子与mRNA为的质量比为25:1。
10.权利要求1-3任一项所述的脂质分子、权利要求5所述的脂质体或权利要求7所述的包载核酸药物的脂质纳米粒在制备药物递送系统中的应用；
优选的，所述药物为核酸药物，包括但不限于mRNA、siRNA、microRNA，反义核酸。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210979395.9A CN116023303A (zh) | 2022-08-16 | 2022-08-16 | 一种可用于递送mRNA的脂质分子、脂质体及其制备方法与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210979395.9A CN116023303A (zh) | 2022-08-16 | 2022-08-16 | 一种可用于递送mRNA的脂质分子、脂质体及其制备方法与应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116023303A true CN116023303A (zh) | 2023-04-28 |
Family
ID=86078384
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210979395.9A Pending CN116023303A (zh) | 2022-08-16 | 2022-08-16 | 一种可用于递送mRNA的脂质分子、脂质体及其制备方法与应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116023303A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5229105A (en) * | 1986-05-28 | 1993-07-20 | Donald Basiliere | Multi-active skin preparation |
| JP2008063374A (ja) * | 2006-09-05 | 2008-03-21 | Adeka Corp | 燃料油添加剤組成物及びそれを含有する燃料油組成物 |
| CN101280515A (zh) * | 2007-08-22 | 2008-10-08 | 浙江传化股份有限公司 | 酯基双季铵盐织物柔软剂及其制备方法 |
| CN113748196A (zh) * | 2019-05-08 | 2021-12-03 | 宝洁公司 | 用于全洗衣物洗涤软化的颗粒 |
| CN114149337A (zh) * | 2021-07-07 | 2022-03-08 | 天津键凯科技有限公司 | 一种用于核酸递送的新型可电离脂质及其lnp组合物 |
| CN114890907A (zh) * | 2022-03-31 | 2022-08-12 | 荣灿生物医药技术(上海)有限公司 | 一种阳离子脂质化合物及其制备方法和应用 |
-
2022
- 2022-08-16 CN CN202210979395.9A patent/CN116023303A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5229105A (en) * | 1986-05-28 | 1993-07-20 | Donald Basiliere | Multi-active skin preparation |
| JP2008063374A (ja) * | 2006-09-05 | 2008-03-21 | Adeka Corp | 燃料油添加剤組成物及びそれを含有する燃料油組成物 |
| CN101280515A (zh) * | 2007-08-22 | 2008-10-08 | 浙江传化股份有限公司 | 酯基双季铵盐织物柔软剂及其制备方法 |
| CN113748196A (zh) * | 2019-05-08 | 2021-12-03 | 宝洁公司 | 用于全洗衣物洗涤软化的颗粒 |
| CN114149337A (zh) * | 2021-07-07 | 2022-03-08 | 天津键凯科技有限公司 | 一种用于核酸递送的新型可电离脂质及其lnp组合物 |
| CN114890907A (zh) * | 2022-03-31 | 2022-08-12 | 荣灿生物医药技术(上海)有限公司 | 一种阳离子脂质化合物及其制备方法和应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2022166213A1 (zh) | 一种可离子化脂质分子、其制备方法及其在制备脂质纳米颗粒中的应用 | |
| EP4282855A1 (en) | Ionizable lipid molecule, preparation method therefor, and application thereof in preparation of lipid nanoparticle | |
| CN114773217B (zh) | 用于递送核酸的阳离子脂质化合物和组合物及用途 | |
| JP7164547B2 (ja) | カチオン性脂質 | |
| CN114213295B (zh) | 一种阳离子化合物、制备方法及其复合物和用途 | |
| WO2011096558A1 (ja) | 易崩壊型ポリマーミセル組成物 | |
| CN114957164B (zh) | 一种脂质化合物及其制备方法与应用 | |
| CN115197431A (zh) | 脂质偶联完全可降解水溶性聚合物的合成及应用 | |
| CN114276535B (zh) | 聚乙二醇脂质及其应用 | |
| EP4267147A1 (en) | Zwitterionic lipid nanoparticle compositions, and methods of use | |
| CN116023303A (zh) | 一种可用于递送mRNA的脂质分子、脂质体及其制备方法与应用 | |
| CN115925563B (zh) | 一种可用于靶向肺部递送核酸的脂质分子及其制备方法与应用 | |
| WO2023176822A1 (ja) | 化合物および脂質組成物 | |
| CN114539083B (zh) | 脂质纳米粒及其在核酸递送中的应用 | |
| CN115850135B (zh) | 含硫Janus型可离子化脂质体及其用途 | |
| CN111004195B (zh) | 卡巴他赛弱碱性衍生物及其制剂 | |
| CN117185942A (zh) | 一种可用于靶向肺部递送广谱中和抗体的脂质纳米颗粒及其制备方法与应用 | |
| CN114230521B (zh) | 一种可电离的阳离子化合物及其复合物的应用 | |
| CN117229160B (zh) | 三酯类阳离子脂质化合物、包含其的组合物及用途 | |
| CN116270543B (zh) | 脂质纳米颗粒在制备通过雾吸或鼻滴给药递送核酸的药物中的用途 | |
| WO2023241314A1 (zh) | 一类新的脂质化合物及其用途 | |
| CN116199646B (zh) | 一种基于Tris的可电离脂质及其制备方法与应用 | |
| CN116082179B (zh) | 基于内源性二羧酸的可电离脂质及其制备方法与应用 | |
| WO2021233352A1 (zh) | 一种细胞内吞释放响应的化合物及其应用 | |
| CN117486832A (zh) | 一种能够实现早期溶酶体逃逸的用于rna递送的阳离子脂质分子 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |