CN115184512B - 一种基于甘油稳定碳（δ13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法 - Google Patents

一种基于甘油稳定碳（δ13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及稳定同位素分析技术领域，尤其涉及一种基于甘油稳定碳（δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法。包括以下步骤：对照组样品的发酵；不同δ13C值分布的外源糖制备；模拟掺糖葡萄酒样品；对照组样品与掺糖葡萄酒样品甘油δ13C值的测定；利用对照组与掺糖葡萄酒样品甘油δ13C值的SD构建掺糖鉴别模型。本发明采用液相色谱‑同位素比质谱仪（LC‑IRMS）实现了葡萄酒发酵后副产物甘油δ 13C值的测定，利用对照组与掺糖葡萄酒样品甘油δ 13C值的SD构建掺假鉴别模型，为鉴别葡萄酒中掺入外源糖使酒精度提升不超过2.0%的添加量提供有效技术支撑，为今后葡萄酒发酵过程中外源糖的添加提供鉴别方法，以期促进葡萄酒产业的健康发展。

Description

一种基于甘油稳定碳（ δ13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法
技术领域
本发明涉及稳定同位素分析技术领域，尤其涉及一种基于甘油稳定碳（ δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法。
背景技术
葡萄酒作为一种营养丰富的低酒精度饮料酒，适量饮用可以养颜益寿，防治心血管等疾病，深受消费者的青睐。随着我国葡萄酒市场日渐繁荣，某些产酒国在经济利益驱动下，遇到气候寒冷、光照不够，采收的葡萄含糖分不够，酿不出理想酒精度，需在酿造过程中添加外源糖，来提高酒精度。但在葡萄酒发酵过程中允许添加白砂糖作为外源糖来提高酒精度的最大添加量应不超过产生2.0%酒精。葡萄酒中常见的掺糖类型有C3和C4两种，C3植物的 δ 13C值的范围一般为-34‰～-22‰，C4植物 δ 13C值的范围一般为-19‰～-9‰。添加C4植物糖时，采用稳定同位素技术可以很好鉴别出，由于葡萄属于C3植物， δ 13C值与C3植物糖的 δ 13C值相近，采用稳定同位素技术不能很好地鉴别，需借助SNIF-NMR技术来分析葡萄酒乙醇分子中不同位点氢含量，才能鉴别C3植物糖的添加，但该技术价格昂贵，工作条件要求高，难以普及推广。基于此，本发明通过制备不同 δ 13C值分布的外源糖添加到纯正葡萄汁中进行发酵，测定发酵后对照组样品和掺糖葡萄酒样品中甘油 δ 13C值，通过分析二者 δ 13C值间的SD来鉴别外源糖的添加，为我国葡萄酒真实性数据库的建立提供一定的支撑和参考。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于甘油稳定碳同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，通过测定发酵后对照组样品和掺糖葡萄酒样品中甘油 δ 13C值，分析二者 δ 13C值间的SD来鉴别外源糖的添加，该发明可用于外源糖添加量不超过产生2.0%酒精度的鉴别，以期促进我国葡萄酒产业的健康发展。
本发明所采用的技术方案为：一种基于甘油稳定碳（ δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：对照组样品的发酵：将提前榨好的纯正葡萄汁装入三角瓶，置于恒温恒湿培养箱，根据发酵不同的酒精度数设定发酵条件，进行发酵；
步骤二：制备不同 δ 13C值分布的外源糖：利用EA-IRMS筛选出8种不同 δ 13C值分布的外源糖添加到葡萄汁中进行发酵来模拟掺假葡萄酒样品；
步骤三：模拟掺糖葡萄酒样品：测得步骤一对照组样品葡萄汁发酵后潜在酒精度为13.8%，将纯正葡萄汁通过加水和加糖（与葡萄汁 δ 13C值相同的糖）使能发酵成不同浓度梯度的葡萄酒，再添加8种不同 δ 13C值分布的外源糖使它们发酵成国标中要求的最低酒精度7.0%、生活中普遍可见的酒精度13.0%、以及普通酵母耐受酒精度16.0%；
步骤四：对照组样品与掺糖葡萄酒样品甘油 δ 13C值的测定：采用LC-IRMS测定对照组样品和掺糖葡萄酒样品中甘油 δ 13C值；
步骤五：利用对照组样品和掺糖葡萄酒样品中甘油 δ 13C值的SD构建掺糖鉴别模型，鉴别外源糖的添加量不超过产生2.0%的酒精度。
作为进一步的改进，所述步骤一，采集目标产区葡萄样品，经筛选、除根、榨汁备用，包括清洗器具、挑选葡萄、清洗、风干、破碎、除梗、装料、发酵、过滤、贮存，在250mL三角瓶中准备好200mL的纯正葡萄汁，接入酵母0.06g/200mL，用纱布封口，置于恒温恒湿培养箱中进行发酵，设定发酵条件为：温度28℃、湿度60%RH，发酵期间多次对样品进行摇匀并观察气泡变化，待气泡完全消失用滴定法测定葡萄酒样品中的残糖量小于4g/L，发酵完全，采用滴定法测得葡萄酒中的总糖含量为241.6g/L，按理论上17.5g的糖可以转化1.0%的酒精度，纯正葡萄汁理论上能发酵成潜在酒精度为13.8%的葡萄酒。
作为进一步的改进，所述步骤二，测定不同 δ 13C值分布的甜菜糖和蔗糖，筛选出一种 δ 13C值为-12.68‰的蔗糖和一种 δ 13C值为-26.68‰的甜菜糖，将上述两种 δ 13C值不同的外源糖进行不同质量配比后进行测定，再从最终测定的结果中筛选出 δ 13C值为、-14.64‰、-16.63‰、-18.67‰、-20.65‰、-22.68‰、-24.64‰的外源糖，将8种不同 δ 13C值分布的外源糖添加到葡萄汁中进行发酵来模拟掺假葡萄酒样品。
作为进一步的改进，所述步骤三，将纯正葡萄汁通过加水稀释成3.0%、3.5%、4.0%、4.5%、5.0%、6.0%、9.0%、9.5%、10.0%、10.5%、11.0%、12.0%、12.5%、13.0%、13.5%的葡萄汁和加糖（与葡萄汁 δ 13C值相同的糖）发酵成14.0%、15.0%的葡萄汁，再添加8种不同 δ 13C值分布的外源糖使3.0%、3.5%、4.0%、4.5%、5.0%、6.0%的葡萄汁发酵成国标中要求的最低酒精度7.0%，9.0%、9.5%、10.0%、10.5%、11.0%、12.0%的葡萄汁发酵成生活中普遍可见的酒精度13.0%，12.0%、12.5%、13.0%、13.5%、14.0%、15.0%的葡萄汁发酵成普通酵母耐受酒精度16.0%。
作为进一步的改进，所述步骤四，测样前，先用蔗糖IAEA-CH6碳稳定同位素参考标准对实验室工作标准进行校准测定，再使用实验室工作标准对CO2气体进行标定，每次测定样品使用CO2标准参考气体计算 δ 13C值。
作为进一步的改进，所述蔗糖IAEA-CH6的 δ 13C值为-10.4‰、实验室工作标准中葡萄糖水合物的 δ 13C值为-26.03‰±0.2‰。
作为进一步的改进，所述步骤五，碳同位素稳定性较好，测得结果偏差较小，进行数据化处理后不成正态分布，无法采用独立检验方法和方差分析鉴别未掺糖和掺糖样品的碳同位素值是否有显著差异，因此需采用仪器测量精度来鉴别两个样品的差异，用标准差SD分析。
作为进一步的改进，所述SD是指未掺糖和掺糖葡萄酒样品中甘油 δ 13C值间的显著差异分析指标，采用仪器测量精度来鉴别这两个样品的差异，当SD>0.100时，认为两个样品存在显著性差异。
本发明的有益效果：本发明与现有技术相比，其优点在于方法简单易操作，样品无需进行前处理，降低了检测成本；使用LC-IRMS测定葡萄酒发酵后甘油 δ 13C值，使用样品量小，样品检测速度快，建立的模型准确率高，有效地鉴别了葡萄酒中外源糖的最大添加量不超过产生2.0%酒精度，达到鉴别葡萄酒掺糖的目的。
附图说明
图1是本发明一种基于甘油稳定碳（ δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法的流程图。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。
一种基于甘油稳定碳（ δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：对照组样品的发酵：将提前榨好的纯正葡萄汁装入三角瓶，置于恒温恒湿培养箱，根据发酵不同的酒精度数设定发酵条件，进行发酵；
步骤二：制备不同 δ 13C值分布的外源糖：利用EA-IRMS筛选出8种不同 δ 13C值分布的外源糖添加到葡萄汁中进行发酵来模拟掺假葡萄酒样品；
步骤三：模拟掺糖葡萄酒样品：测得步骤一对照组样品葡萄汁发酵后潜在酒精度为13.8%，将纯正葡萄汁通过加水和加糖（与葡萄汁 δ 13C值相同的糖）使能发酵成不同浓度梯度的葡萄酒，再添加8种不同 δ 13C值分布的外源糖使它们发酵成国标中要求的最低酒精度7.0%、生活中普遍可见的酒精度13.0%、以及普通酵母耐受酒精度16.0%；
步骤四：对照组样品与掺糖葡萄酒样品甘油 δ 13C值的测定：采用LC-IRMS测定对照组样品和掺糖葡萄酒样品中甘油 δ 13C值；
步骤五：利用对照组样品和掺糖葡萄酒样品中甘油 δ 13C值的SD构建掺糖鉴别模型，鉴别外源糖的添加量不超过产生2.0%的酒精度。
本发明中，所述步骤一，采集目标产区葡萄样品，经筛选、除根、榨汁备用，包括清洗器具、挑选葡萄、清洗、风干、破碎和除梗、装料、发酵、过滤、贮存，在250mL三角瓶中准备好200mL的纯正葡萄汁，接入酵母0.06g/200mL，用纱布封口，置于恒温恒湿培养箱中进行发酵，设定发酵条件为：温度28℃、湿度60%RH，发酵期间多次对样品进行摇匀并观察气泡变化，待气泡完全消失用滴定法测定葡萄酒样品中的残糖量小于4g/L，发酵完全，采用滴定法测得葡萄酒中的总糖含量为241.6g/L，按理论上17.5g的糖可以转化1.0%的酒精度，纯正葡萄汁理论上能发酵成潜在酒精度为13.8%的葡萄酒。
本发明中，所述步骤二，测定不同 δ 13C值分布的甜菜糖和蔗糖，筛选出一种 δ 13C值为-12.68‰的蔗糖和一种 δ 13C值为-26.68‰的甜菜糖，将上述两种 δ 13C值不同的外源糖进行不同质量配比后进行测定，再从最终测定的结果中筛选出 δ 13C值为-14.64‰、-16.63‰、-18.67‰、-20.65‰、-22.68‰、-24.64‰的外源糖，将8种不同 δ 13C值分布的外源糖添加到葡萄汁中进行发酵来模拟掺假葡萄酒样品。
本发明中，所述步骤三，将纯正葡萄汁通过加水稀释成3.0%、3.5%、4.0%、4.5%、5.0%、6.0%、9.0%、9.5%、10.0%、10.5%、11.0%、12.0%、12.5%、13.0%、13.5%的葡萄汁和加糖（与葡萄汁 δ 13C值相同的糖）发酵成14.0%、15.0%的葡萄汁，再添加8种 δ 13C值分布的外源糖使3.0%、3.5%、4.0%、4.5%、5.0%、6.0%的葡萄汁发酵成国标中要求的最低酒精度7.0%，9.0%、9.5%、10.0%、10.5%、11.0%、12.0%的葡萄汁发酵成生活中普遍可见的酒精度13.0%，12.0%、12.5%、13.0%、13.5%、14.0%、15.0%的葡萄汁发酵成普通酵母耐受酒精度16.0%。
本发明中，所述步骤四，测样前，先用蔗糖IAEA-CH6碳稳定同位素参考标准对实验室工作标准进行校准测定，再使用实验室工作标准对CO2气体进行标定，每次测定样品使用CO2标准参考气体计算 δ 13C值。
本发明中，所述蔗糖IAEA-CH6的 δ 13C值为-10.4‰、实验室工作标准中葡萄糖水合物的 δ 13C值为-26.03‰±0.2‰。
本发明中，所述步骤五，碳同位素稳定性较好，测得结果偏差较小，进行数据化处理后不成正态分布，无法采用独立检验方法和方差分析鉴别未掺糖和掺糖样品的碳同位素值是否有显著差异，因此需采用仪器测量精度来鉴别两个样品的差异，用标准差SD分析。
本发明中，所述SD是指未掺糖和掺糖葡萄酒样品中甘油 δ 13C值间的显著差异分析指标，采用仪器测量精度来鉴别这两个样品的差异，当SD>0.100时，认为两个样品存在显著性差异。
实施例：
包括以下步骤：
步骤一：采集目标产区的葡萄样品：选取的样品是来自香格里拉产区的新鲜葡萄。
步骤二：对样品进行前处理（筛选、除根、榨汁）：清洗器具、挑选葡萄、清洗、风干、破碎和除梗、装料、发酵、过滤、贮存；将玻璃瓶、250mL三角瓶消毒洗净后晾干，将筛选出的葡萄冲洗干净，晾干至表面没有水珠（洗葡萄时不要用手搓），用压榨机将葡萄榨成汁，加入果胶酶，装入玻璃瓶中放在冰箱中待用（温度为1℃左右）。
步骤三：不同 δ 13C值分布的外源糖制备：采用EA-IRMS测定不同 δ 13C值分布的蔗糖和甜菜糖，筛选出 δ 13C值为-12.68‰的蔗糖和 δ 13C值为-26.68‰的甜菜糖，将二者进行不同质量配比后测定 δ 13C值，再从最终测定的结果中筛选出了 δ 13C值为-14.64‰、-16.63‰、-18.67‰、-20.65‰、-22.68‰、-24.64‰的外源糖，将8种 δ 13C值分布的外源糖添加到纯正葡萄汁中进行发酵来模拟掺假葡萄酒样品。
步骤四：模拟发酵掺假葡萄酒样品：在200mL的葡萄酒样品中，添加3.8g、7.6g、9.5g、11.4g、13.3g、15.2g（即酒精度提高1.0%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%、4.0%的添加量），6种不同梯度初始加糖量和8种不同 δ 13C值分布的外源糖（不同加糖量、不同 δ 13C值分布的外源糖，每个样品做三个重复）；在250mL三角瓶中准确量取200mL的纯正葡萄汁，加入酵母0.06g/200mL，纱布封口，置于恒温恒湿培养箱中，设定发酵条件为：温度28℃，湿度60%RH，进行发酵，发酵期间多次对样品进行摇匀并观察气泡变化，待气泡完全消失后，用滴定法测定葡萄酒样品中残糖量，若残糖量小于4g/L则发酵完全，采用滴定法测定葡萄酒中总糖含量，按理论上17.5g糖转化1.0%酒精度，纯正葡萄汁理论上可以发酵成一定潜在酒精度的葡萄酒，根据葡萄汁发酵后的潜在酒精度，将纯正葡萄汁通过加实验室纯净水和葡萄汁 δ 13C值（-25.17‰）相同的外源糖，理论上使葡萄汁能发酵成不同梯度的葡萄酒，再将制备好的不同 δ 13C值分布的外源糖按酒精度分别提高1.0%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%、4.0%的添加量添加到3.0%、3.5%、4.0%、4.5%、5.0%、6.0%、9.0%、9.5%、10.0%、10.5%、11.0%、12.0%、12.5%、13.0%、13.5%、14.0%、15.0%不同梯度的葡萄汁中，纱布封口，放在恒温恒湿培养箱中发酵，发酵条件同上，使它们分别发酵成国标中要求最低酒度7.0%和生活中普遍可见酒度13.0%以及普通酵母最高耐受酒度16.0%。
步骤五：采用气相测定不同酒样的酒精度：将发酵好的不同酒精度葡萄酒样品过膜，在进样小瓶中加入750μL的甲醇（色谱纯），20μL的4-甲级-2-戊醇（99%），250μL的葡萄酒样品，振荡混匀（利用已知葡萄酒的酒精度作为基准）后测定。由数据结果可以得出7.0%葡萄酒样品酒精度测定结果均在6.860-7.220之间，13.0%葡萄酒样品酒精度结果均在12.853-13.201之间，16.0%葡萄酒样品酒精度结果均在15.845-16.216之间，这些葡萄酒样酒精度数基本都达到所期望的7.0%、13.0%、16.0%。
步骤六：采用LC-IRMS测定对照样品和葡萄酒掺糖样品中甘油 δ 13C值：将7.0%的葡萄酒样品用超纯水稀释50倍，13.0%、16.0%的葡萄酒样品用超纯水稀释100倍，过0.22μm尼龙滤膜，移至样品瓶中，供LC-IRMS测定葡萄酒中甘油 δ 13C值。在测样前，先用蔗糖IAEA-CH6（ δ 13C值：-10.4‰）碳稳定同位素参考标准对实验室工作标准（葡萄糖水合物： δ 13C值：-26.03‰±0.2‰）进行校准测定，再使用实验室工作标准对CO2气体进行标定，每次测定样品使用CO2标准参考气体计算 δ 13C值。将经过前处理的葡萄酒样品上机测样。以上步骤均由仪器软件程序自动控制，测定结果由仪器软件自动完成计算，测定结果如表1所示：
表1 不同外源糖添加量的葡萄酒中甘油稳定碳同位素测定结果
步骤七：确定不同 δ 13C值分布的外源糖添加量与葡萄酒样品中甘油 δ 13C值间的相关性：对不同 δ 13C值分布的外源糖添加量与葡萄酒中甘油 δ 13C值数据进行线性判别分析可知，掺入与葡萄汁 δ 13C值（-25.17‰）相比，偏正的外源糖发酵后葡萄酒中甘油 δ 13C值会明显偏正，不同外源糖添加量与葡萄酒中甘油 δ 13C值呈良好正相关关系，拟合方程分别为YS1=0.46X-32.31，R2=0.994；YSB5=0.47X-32.87，R2=0.996；YSB9=0.38X-32.87，R2=0.982；YSB13=0.31X-32.73，R2=0.970；YSB19=0.24X-32.78，R2=0.992；YSB26=0.15X-32.45，R2=0.989；YSB31=0.09X-32.93，R2=0.999；掺入与葡萄汁 δ 13C值相比偏负的外源糖，发酵后葡萄酒中甘油 δ 13C值会明显偏负，不同外源糖添加量与葡萄酒中甘油 δ 13C值呈良好负相关关系，拟合方程为YB5=-0.02X-32.63，R2=0.987。
步骤八：利用对照样品和葡萄酒掺糖样品中甘油 δ 13C值间的SD建立葡萄酒掺糖鉴别模型：甘油是葡萄酒发酵过程中仅次于水和乙醇的重要副产物，在酒精发酵开始时，参加3-磷酸甘油醛转化为3-磷酸甘油酸这一反应所须的辅酶Ⅰ（NAD），是通过磷酸二羧丙酮的氧化作用来提供的，甘油伴随着这一氧化作用产生。因此，甘油 δ 13C值之间的差异可以被用于鉴别葡萄酒发酵过程中有无外源糖的添加。通过分析对照组样品和掺糖葡萄酒样品中甘油 δ 13C值间的SD来鉴别外源糖的掺入，当SD>0.100时，认为两个样品存在显著性差异，可以检出葡萄汁在发酵过程中添加了外源糖，反之则认为两个样品不存在显著性差异，检不出发酵过程中外源糖的添加，分析结果如表2所示（以添加 δ 13C值为-24.64‰、-26.68‰的外源糖为例）：
表2 掺糖葡萄酒样品与对照组葡萄酒样品中甘油 δ 13C值显著性差异分析结果
在200mL的葡萄酒样品中，掺入 δ 13C值为-12.68‰、-14.64‰、-16.63‰、-18.67‰、-20.65‰、-22.68‰的外源糖，葡萄汁与外源糖 δ 13C值分别相差12.49‰、10.53‰、8.54‰、6.50‰、4.52‰、2.49‰，酒精度调节1.0%时，SD>0.100，说明当掺入 δ 13C值为-12.68‰、-14.64‰、-16.63‰、-18.67‰、-20.65‰、-22.68‰的外源糖，该预测模型至少能够检出酒精度提升1.0%时的添加量。
由表2可得：在纯正葡萄酒样品中，掺入 δ 13C值为-24.64‰的外源糖，葡萄汁与外源糖 δ 13C值相差0.53‰，酒精度调节1.0%时，SD>0.100，能检出，说明该预测模型至少能够检出酒精度提升1.0%的添加量；掺入 δ 13C值为-26.68‰的外源糖，葡萄汁与外源糖 δ 13C值相差1.53‰，酒精度调节1.0%时，对照组样品与葡萄酒掺糖样品中甘油 δ 13C值相差0.08‰，SD<0.100，检不出，当酒精度调节2.0%时，对照组样品与葡萄酒掺糖样品中甘油 δ 13C值相差0.19‰，SD>0.100，能检出，说明该预测模型至少能够检出酒精度提升2.0%时外源糖的添加量。
因此，这种基于甘油稳定碳（ δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方能有效检出外源糖的添加，该方法的建立为食品中应用碳稳定同位素进行掺假鉴别奠定理论基础，为提高葡萄酒真实性鉴别的准确性提供了基础技术手段，为我国葡萄酒的碳同位素检测技术与国际接轨、建立我国葡萄酒数据库提供了支持。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范围。

Claims (8)

1.一种基于甘油稳定碳（δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：对照组样品的发酵：将提前榨好的纯正葡萄汁装入三角瓶，置于恒温恒湿培养箱，根据发酵不同的酒精度数设定发酵条件，进行发酵；
步骤二：制备不同δ 13C值分布的外源糖：利用EA-IRMS筛选出8种不同δ 13C值分布的外源糖添加到葡萄汁中进行发酵来模拟掺假葡萄酒样品；
步骤三：模拟掺糖葡萄酒样品：测得步骤一对照组样品葡萄汁发酵后潜在酒精度为13.8%，将纯正葡萄汁通过加水和加入与葡萄汁δ 13C值相同的糖使能发酵成不同浓度梯度的葡萄酒，再添加不同δ 13C值分布的外源糖使它们发酵成国标中要求的最低酒精度7.0%、生活中普遍可见的酒精度13.0%、以及普通酵母耐受酒精度16.0%；
步骤四：对照组样品与掺糖葡萄酒样品甘油δ 13C值的测定：采用LC-IRMS测定对照组样品和掺糖葡萄酒样品中甘油δ 13C值；
步骤五：利用对照组样品和掺糖葡萄酒样品中甘油δ 13C值的SD构建掺糖鉴别模型，鉴别外源糖添加量不超过产生2.0%的酒精度。
2.根据权利要求1所述的一种基于甘油稳定碳（δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：所述步骤一，采集目标产区葡萄样品，经筛选、除根、榨汁备用，包括清洗器具、挑选葡萄、清洗、风干、破碎和除梗、装料、发酵、过滤、贮存，在250mL三角瓶中准备好200mL的纯正葡萄汁，接入酵母0.06g/200mL，用纱布封口，置于恒温恒湿培养箱中进行发酵，设定发酵条件为：温度28℃、湿度60%RH，发酵期间多次对样品进行摇匀并观察气泡变化，待气泡完全消失用滴定法测定葡萄酒样品中的残糖量小于4g/L，发酵完全，采用滴定法测得葡萄酒中的总糖含量为241.6g/L，按理论上17.5g的糖可以转化1.0%的酒精度，纯正葡萄汁理论上能发酵成潜在酒精度为13.8%的葡萄酒。
3.根据权利要求1所述的一种基于甘油稳定碳（δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：所述步骤二，测定不同δ 13C值分布的甜菜糖和蔗糖，筛选出一种δ 13C值为-12.68‰的蔗糖和一种δ 13C值为-26.68‰的甜菜糖，将上述两种δ 13C值不同的外源糖进行不同质量配比后进行测定，再从最终测定的结果中筛选出δ 13C值为-14.64‰、-16.63‰、-18.67‰、-20.65‰、-22.68‰、-24.64‰的外源糖，将8种不同δ 13C值分布的外源糖添加到葡萄汁中进行发酵来模拟掺假葡萄酒样品。
4.根据权利要求1所述的一种基于甘油稳定碳（δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：所述步骤三，将纯正葡萄汁通过加水稀释成3.0%、3.5%、4.0%、4.5%、5.0%、6.0%、9.0%、9.5%、10.0%、10.5%、11.0%、12.0%、12.5%、13.0%、13.5%的葡萄汁和加糖发酵成14.0%、15.0%的葡萄汁，再添加8种不同δ 13C值分布的外源糖使3.0%、3.5%、4.0%、4.5%、5.0%、6.0%的葡萄汁发酵成国标中要求的最低酒精度7.0%，9.0%、9.5%、10.0%、10.5%、11.0%、12.0%的葡萄汁发酵成生活中普遍可见的酒精度13.0%，12.0%、12.5%、13.0%、13.5%、14.0%、15.0%的葡萄汁发酵成普通酵母耐受酒精度16.0%；其中加糖是与葡萄汁δ 13C值相同的糖。
5.根据权利要求1所述的一种基于甘油稳定碳（δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：所述步骤四，测样前，先用蔗糖IAEA-CH6碳稳定同位素参考标准对实验室工作标准进行校准测定，再使用实验室工作标准对CO2气体进行标定，每次测定样品使用CO2标准参考气体计算δ 13C值。
6.根据权利要求5所述的一种基于甘油稳定碳（δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：所述蔗糖IAEA-CH6的δ 13C值为-10.4‰、实验室工作标准中葡萄糖水合物的δ 13C值为-26.03‰±0.2‰。
7.根据权利要求1所述的一种基于甘油稳定碳（δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：所述步骤五，碳同位素稳定性较好，测得结果偏差较小，进行数据化处理后不成正态分布，无法采用独立检验方法和方差分析鉴别未掺糖和掺糖样品的碳同位素值是否有显著差异，因此需采用仪器测量精度来鉴别两个样品的差异，用标准差SD分析。
8.根据权利要求7所述的一种基于甘油稳定碳（δ 13C）同位素的葡萄酒掺糖鉴别方法，其特征在于：所述SD是指未掺糖和掺糖葡萄酒样品中甘油δ 13C值间的显著差异分析指标，采用仪器测量精度来鉴别这两个样品的差异，当SD>0.100时，认为两个样品存在显著性差异。
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